地黄叶提取物在制备降血糖类药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药，特别是一种地黄叶提取物在制备降血糖类药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 地黄叶为玄参科植物地黄Wwiifliasa Libosch.的叶，首次载于《食疗 本草》:"(地黄)叶可以羹"，后收入1988年版《北京市中药材标准》:"地黄叶苦、寒，归心、肝、 肾经，清热，活血，益气养阴，补肾，用于少气乏力，面色无华，口干咽燥，气阴两虚证，外用于 恶疮，手足癣"。地黄叶与块根是同株植物不同的营养器官，且现代研究表明地黄叶具有多 种化学成分，又研究报道提取地黄叶总苷制备成为胶囊临床用于治疗肾炎，但至今未见关 于地黄叶降血糖作用的研究报道。传统用药时，地黄仅地下块根经不同炮制而入药，地上部 分基本全部舍弃，在资源日益紧张的今天，无疑是一种极大的浪费，有必要对地黄叶进行综 合开发利用。
【发明内容】
[0003] 针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种地黄叶提取 物在制备降血糖类药物中的应用，可有效解决糖尿病患者的治疗用药问题。
[0004] 本发明解决的技术方案是，地黄叶提取物在制备降血糖类药物中的应用，该地黄 叶提取物是，将地黄叶每次加地黄叶重量10-12倍的水提取2次，每次1-1. 5h，合并两次提 取液，减压浓缩至55°C相当于含生药0. 5-2g/ml的浓缩液，浓缩液加入质量浓度为95%的 乙醇使其醇浓度达到60-80%，4°C静置24h，取上清液，上清液减压浓缩至55°C相当于含生 药1-4. 5mg/ml的浓缩液，再采用H103树脂柱分离纯化，上样量为2-7个柱体积，上样时间 2_4h，然后用质量浓度10-20%的乙醇作洗脱剂对树脂柱进行洗脱，洗脱剂用量为2-15个柱 体积，洗脱流速为〇. 4-0. 5ml/min，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩，干燥，得干燥物，即地黄叶 提取物，可用于制备降血糖类药物。
[0005] 该地黄叶提取物作为唯一的活性部位用于制备降血糖类的药物，实现地黄叶提取 物唯一活性部位在制备治疗糖尿病药物中的应用。
[0006] 本发明原料丰富，制备方法简单，易操作，稳定可靠，采用本发明方法将地黄叶水 提醇沉后，用H103树脂分离纯化，可以通过工业化生产制得任意量的地黄叶提取物，可有 效利用地黄叶提取物制备降血糖类的药物，实现地黄叶的综合开发和废物利用，开拓了制 备降糖药物的新途径，经济和社会效益巨大。
【附图说明】
[0007] 图1本发明对给药后糖尿病小鼠体重、摄食量、饮水量的影响图。
[0008] 图2本发明对糖尿病小鼠体重的影响图。
[0009] 图3本发明对糖尿病小鼠日均摄食量的影响图。
[0010] 图4本发明对糖尿病小鼠日均饮水量的影响图。
[0011] 图5本发明对糖尿病小鼠空腹血糖（mmol/L)的影响图。
【具体实施方式】
[0012] 以下结合实施例对本发明的【具体实施方式】作详细说明。
[0013] 本发明在具体实施中，可由以下实施例实现。
[0014] 实施例1 一种地黄叶提取物在制备降血糖类药物中的应用，该地黄叶提取物是，取地黄叶500g， 洗去泥沙，切宽丝，置40°C以下通风干燥，置于提取设备(如提取罐）内，每次加地黄叶10倍 重量的水回流提取2次，每次lh，过滤，合并滤液（即提取液)，滤液置入旋转蒸发器（上海亚 荣生化仪器厂，型号：RE52-99)内，减压至-0. lMPa，55°C浓缩至为相当于含生药量lg/ml的 浓缩液，加入质量浓度95%的乙醇使其醇浓度达到70%，4°C静置24h，取上清液，减压浓缩， 上清液减压浓缩至55°C相当于含生药lmg/ml的浓缩液，再采用H103树脂分离纯化，上样体 积为2个柱体积，上样时间为4h，然后用质量浓度10%的乙醇作洗脱剂对树脂柱进行洗脱， 洗脱剂用量为8个柱体积，洗脱流速为0. 5ml/min，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩，干燥，得 干燥物，即地黄叶提取物。
[0015] 实施例2: 一种地黄叶提取物在制备降血糖类药物中的应用，该地黄叶提取物是，取地黄叶500g， 洗去泥沙，切宽丝，置40°C以下通风干燥，置于提取设备内，每次加地黄叶12倍重量的水回 流提取2次，每次lh，过滤，合并滤液，滤液置入旋转蒸发器内，减压至-0.1 MPa，55°C浓缩至 为相当于含生药量2g/ml的浓缩液，加入质量浓度95%的乙醇使其醇浓度达到80%，4°C静置 24h沉淀，取上清液，减压浓缩，上清液减压浓缩至55°C相当于含生药2. 5mg/ml的浓缩液， 再采用H103树脂分离纯化，上样体积为6个柱体积，上样时间为2h，然后用质量浓度20%的 乙醇作洗脱剂对树脂柱进行洗脱，洗脱剂用量为10个柱体积，洗脱流速为〇. 8ml/min，收集 洗脱液，洗脱液减压浓缩，干燥，得干燥物，即地黄叶提取物。
[0016] 实施例3: 一种地黄叶提取物在制备降血糖类药物中的应用，该地黄叶提取物是，取地黄叶500g， 洗去泥沙，切宽丝，置40°C以下通风干燥，置于提取设备内，每次加地黄叶11倍重量的水回 流提取2次，每次I. 5h，过滤，合并滤液，滤液置入旋转蒸发器内，减压至-0.1 MPa，55°C浓缩 至为相当于含生药量〇. 5g/ml的浓缩液，加入质量浓度95%的乙醇使其醇浓度达到60%，4°C 静置24h，取上清液，减压浓缩，上清液减压浓缩至55°C相当于含生药4. 5mg/ml的浓缩液， 再采用H103树脂分离纯化，上样体积为7个柱体积，上样时间为3h，然后用质量浓度15%的 乙醇作洗脱剂对树脂柱进行洗脱，洗脱剂用量为15个柱体积，洗脱流速为0. 4ml/min，收集 洗脱液，洗脱液减压浓缩，干燥，得干燥物，即地黄叶提取物。
[0017] 实验研究 上述给出的实施例仅是用于说明本发明的【具体实施方式】，并不是用于本发明的保护范 围，采用本发明方法可以通过工业化生产，制得任意量的地黄叶提取物该地黄叶提取物经 反复试验，具有降糖之功效，有效用于制备降血糖类药物，实现地黄叶提取物在制备降血糖 类药物中的应用，并经反复试验，均取得了相同或相近似的效果，有关试验资料如下 ： 1实验材料 I. 1动物KM雄性小鼠，SPF级，体重18-20g，由郑州大学医学院动物实验中心提供， 动物许可证号SCXK (豫）2010-0002,合格证号41003100000829。
[0018] 1.2仪器BMG型多功能酶标仪(江苏万科科教仪器有限公司）;BS 210S电子天平 (北京赛多利斯天平有限公司）；DZKW-4电子恒温不锈钢水浴锅(上海东星建材试验设备有 限公司）； 1. 3试剂盐酸二甲双胍片（天津中新药业集团股份有限公司，批号：P3813021);葡萄 糖试剂盒（中生北控生物科技股份有限公司，批号：143231);四氧嘧啶（Sigma，美国）；生理 盐水(河南双鹤华利药业有限公司，批号：13103107B) 1. 4药材地黄叶药材购自焦作温县宛西制药地黄种植基地，经河南中医学院董诚明 教授鉴定为玄参科植物地黄Rehmannia glutinosa Libosch.的叶。桑叶(批号120501)购 自郑州瑞龙制药股份有限公司，经河南中医学院董诚明教授鉴定为桑科植物桑Morus alba L.的干燥叶。
[0019] 1.5灌胃药液的制备 1. 5. 1地黄叶提取物地黄叶水提醇沉后，用H103树脂分离纯化所得的地黄叶提取 物，加蒸馏水调节含药量为〇. 6g · mL'冷藏保存备用。
[0020] 1.5. 2桑叶醇提 取桑叶，80°C水浴回流提取3次，每次1.5h，每次加20倍70% 乙醇，纱布过滤，合并滤液，减压浓缩至无醇味，加蒸馏水调节含药量为0. 6g · ml/1，冷藏保 存备用。
[0021] 1. 5. 3地黄叶/桑叶1 :1 每次灌胃前取1. 5. 1项下的地黄叶提取液及1. 5. 2项 下的桑叶醇提液等量，混合均匀，备用。