人参皂苷单体化合物在制备治疗黄病毒科病毒感染的药物中的用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及人参皂苷单体化合物的新医药用途，尤其涉及人参皂苷单体化合物在 制备治疗黄病毒科病毒感染药物中的用途，属于人参皂苷单体化合物的新医药用途领域。
【背景技术】
[0002] 人参皂苷（Ginsenoside)是人参的主要成分之一，以往研宄人参皂苷多集中于抗 癌活性及免疫调节作用。人参皂苷具有一定的抗病毒作用，而具体人参皂苷单体的直接抗 病毒作用的报道较少。
[0003] 牛病毒性腹泻 / 黏膜病（Bovine viral diarrhea/mucosal disease，BVD/MD)是 由牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus，BVDV)引起的牛等动物的重要传染 病。目前，BVDV免疫抑制及持续性感染所引发的经济损失非常严重。BVDV与丙型肝炎病毒 (hepatitis C virus，HCV)均隶属于黄病毒科，且由于基因组结构、复制翻译策略和蛋白质 功能与丙型肝炎病毒（HCV)密切相似，BVDV-直被认为是研宄HCV生命活动及抗病毒药物 筛选的理想替代模型。筛选出具有直接抗病毒作用的人参皂苷单体，对于治疗黄病毒科病 毒感染具有重要意义。
【发明内容】
[0004] 本发明所要解决的技术问题是提供人参皂苷单体化合物在制备治疗黄病毒科病 毒感染的药物中的新用途，这些化合物通过直接杀灭病毒颗粒、阻断病毒侵入细胞或抑制 病毒在细胞内复制等方式发挥抗病毒作用，能够用于治疗由牛病毒性腹泻病毒或丙型肝炎 病毒等黄病毒科病毒感染所导致的疾病。
[0005] 为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：
[0006] 本发明首先将包括人参皂苷 Rbl，Rb2, Rb3, Rc，Rd，Re，Rgl，Rg2, Rg3(s)，Rf， Rhl (s)，Rh2,拟人参皂苷Rh2,拟人参皂苷Fll，三七皂苷Rl，刺五加皂苷B和刺五加甙E 等在内的多种人参皂苷单体化合物通过细胞毒性实验确定这些人参皂苷单体化合物在 MDBK细胞的安全浓度。细胞毒性实验结果发现：人参皂苷Rbl、Rb2、Rb3、Rc、Re、Rgl、Rf、 Rhl (s)、拟人参皂苷Fll、三七皂苷RU刺五加皂苷B和刺五加甙E这些单体化合物在最大 浓度（500 μ g/mL)对MDBK细胞无毒性，细胞单层完整，细胞单折光性良好，视野中未见死细 胞；Rg3 (s)以及Rh2浓度高于62. 5 μ g/mL对MDBK细胞有毒性；拟人参皂苷Rh2浓度高于 31. 25 μ g/mL对MDBK细胞有毒性，浓度高于250 μ g/mL时，细胞单层严重残缺，基本不成层， 折光性很差，视野中主要为圆细胞或死细胞。
[0007] 在确定了人参皂苷单体化合物对于细胞毒性的基础上，本发明进一步通过人参皂 苷单体化合物对牛病毒性腹泻病毒（BVDV)致细胞病变的抑制实验以期望筛选得到对BVDV 病毒有良好的抑制作用且对细胞无毒的人参皂苷单体化合物；实验结果发现，Rb2和Rb3 大于100 μ g/mL即可对BVDV病毒产生良好的抑制作用，细胞状态正常，证明人参皂苷单体 化合物不仅对于牛病毒性腹泻病毒有非常好的抑制作用，而且对于细胞无毒；Rd，Rh2和 Rg3(s)尽管对于病毒有产生一定的抑制作用，但是这些单体化合物对于细胞的毒性很大； 其余的人参皂苷单体化合物即便在最大浓度（500 μ g/mL)时对BVDV病毒无任何抑制作用。
[0008] 人参皂苷单体化合物Rb2或Rb3抑制BVDV病毒复制方式确定实验结果表明，人参 皂苷单体化合物Rb2或Rb3浓度为200 μ g/mL时，可以直接杀灭病毒颗粒、抑制病毒在细胞 内复制等环节阻抗病毒作用。通过预防组结果表明，人参皂苷单体化合物Rb2或Rb3具有 一定阻断病毒侵入细胞作用。因此，人参皂苷单体化合物Rb2, Rb3通过直接杀灭病毒颗粒、 阻断病毒侵入细胞或抑制病毒在细胞内复制等多个环节的方式发挥抗病毒作用，可以用于 制备治疗由牛病毒性腹泻病毒或丙型肝炎病毒等黄病毒科病毒感染所导致的疾病的药物。
[0009] 本发明所述黄病毒科病毒包括牛病毒性腹泻病毒（Bovine Viral Diarrhea Virus，BVDV)、丙型肝炎病毒（hepatitis C virus，HCV)、猪瘟病毒（Classical Swine fever virus，CSFV)或绵羊边界病毒（Border disease virus，BDV)中的任意一种或多种。
[0010] 由于研宄发现能够抑制BVDV在细胞中复制的药物一般都可以用于治疗HCV 感染(Buckwold V, Beer B,Donis R, Bovine viral diarrhea virus as a surrogate model of hepatitis C virus for the evaluation of antiviral agents. Antiviral Research, 2003, 60(I): I - 15 ；Michelle P Walker, Nanhua Yao,Zhi Hong Promising candidates for the treatment of chronic hepatitis C. Expert Opinion on Investigational Drugs,August 2003, Vol. 12, N〇.8:1269_1280.)因此，本发明所筛选的 人参皂苷单体化合物在治疗丙型肝炎病毒感染方面亦具有一定效果。
[0011] 本发明还公开了一种治疗黄病毒科病毒感染的药物组合物，包括：治疗上有效量 的人参皂苷单体化合物和药学上可接受的辅料或载体。
[0012] 其中，所述人参皂苷单体化合物包括人参皂苷他2、他3、1?(1、1^3(8)或肋2中的任 意一种或多种；优选的，所述人参皂苷单体化合物为人参皂苷Rb2或人参皂苷Rb3中的任意 一种或两种。
[0013] 本发明所述人参皂苷他2、他3、1?(1、1^3(8)或肋2的分子式、化学结构式见表1。
[0014] 表1人参皂苷Rb2、Rb3、RcU Rg3 (s)或Rh2的分子式及化学结构式
【主权项】
1. 人参皂苷单体化合物在制备治疗黄病毒科病毒感染的药物中的用途。
2. 人参皂苷单体化合物在制备杀灭黄病毒科病毒颗粒的药物中的用途。
3. 人参皂苷单体化合物在制备阻断黄病毒科病毒侵入细胞的药物中的用途。
4. 人参皂苷单体化合物在制备抑制黄病毒科病毒在细胞内复制的药物中的用途。
5. 按照权利要求1至4任何一项所述的用途，其特征在于：所述黄病毒科病毒包括牛 病毒性腹泻病毒（BovineViralDiarrheaVirus)、丙型肝炎病毒（hepatitisCvirus)、 猪瘟病毒（ClassicalSwinefevervirus)或绵羊边界病毒（Borderdiseasevirus)中 的任意一种或多种。
6. 按照权利要求1至4任何一项所述的用途，其特征在于：所述人参皂苷单体化合物 包括人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷RcU人参皂苷Rg3(s)或人参皂苷Rh2中的任意 一种或多种；优选的，所述人参皂苷单体化合物为人参皂苷Rb2或人参皂苷Rb3中的任意一 种或两种。
7. -种治疗黄病毒科病毒感染的药物组合物，其特征在于，包括：治疗上有效量的人 参皂苷单体化合物和药学上可接受的辅料或载体。
8. 按照权利要求7所述的药物组合物，其特征在于：所述人参皂苷单体化合物包括人 参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3、人参皂苷RcU人参皂苷Rg3(s)或人参皂苷Rh2中的任意一种或 多种；优选的，所述人参皂苷单体化合物为人参皂苷Rb2或人参皂苷Rb3中的任意一种或两 种。
9. 按照权利要求7所述的用途，其特征在于：所述黄病毒科病毒包括牛病毒性腹泻 病毒（BovineViralDiarrheaVirus)、丙型肝炎病毒（hepatitisCvirus)、猪瘟病毒 (ClassicalSwinefevervirus)或绵羊边界病毒（Borderdiseasevirus)中的任意一种 或多种。
【专利摘要】本发明公开了人参皂苷单体化合物在制备治疗黄病毒科病毒感染的药物中的用途，属于人参皂苷单体化合物的新医药用途领域。本发明从多种人参皂苷单体化合物中筛选出具有良好的抗牛病毒性腹泻病毒的人参皂苷单体化合物，这些化合物通过直接杀灭病毒颗粒、阻断病毒侵入细胞或抑制病毒在细胞内复制等方式发挥抗牛病毒性腹泻病毒作用，能够用于治疗由牛病毒性腹泻病毒或丙型肝炎病毒等黄病毒科病毒感染所导致的疾病。本发明进一步公开了一种治疗黄病毒科病毒感染的药物组合物，包括治疗上有效量的人参皂苷单体化合物和药学上可接受的辅料或载体。
【IPC分类】A61K31-704, A61P31-14, A61K31-7034
【公开号】CN104688753
【申请号】CN201410777175
【发明人】张淑琴, 谭斌, 金银萍, 程世鹏, 王凤雪, 郭靖, 王英平
【申请人】中国农业科学院特产研究所
【公开日】2015年6月10日
【申请日】2014年12月15日