，加入泊洛沙姆1880. 88g，于4°C冰箱中过夜至充分溶胀，得P4Q7/P188温敏水凝 胶溶液；
[0022] 4)室温下，将负载多西他赛的功能化氧化石墨烯按体积比1:1缓慢滴加入P4tl7/ P188温敏水凝胶溶液，搅拌均匀，得负载多西他赛的功能化氧化石墨烯温敏水凝胶。
[0023] 实施例2
[0024] 1)称取氧化石墨稀IOOmg和壳聚糖500mg溶于50ml的2-(N-吗啡啉）乙磺酸缓 冲液中，超声Ih得到均匀分散的悬浮液，称取1- (3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸 盐600mg和N-羟基琥?自酰亚胺800mg，依次加入上述悬浮液中，继续超声6h，然后在室温下 磁力搅拌16h，成混合液，混合液通过0. 2 μ m的水膜过滤，用超纯水抽洗至中性以除去未反 应的壳聚糖，将所得滤饼用20ml超纯水重悬后，-20°C冰箱中预冻，冷冻干燥48h，得功能化 氧化石墨烯（GO-CS);
[0025] 2)称取功能化氧化石墨烯5mg溶于超纯水5ml中，在功率400w下探超40次，每 间隔5s探超一次，每次5s，得功能化氧化石墨烯分散液；取5mg多西他赛溶于250 μ 1的 二甲基亚砜中，得多西他赛溶液；将功能化氧化石墨烯分散液边超声边缓慢滴加到多西他 赛溶液中；在功率400w下探超20次，每间隔5s探超一次，每次5s，然后，lOOOOr/min离心 l〇min，弃去上清，去除二甲基亚砜，得沉淀物，沉淀物加入浓度为10mg/ml的泊洛沙姆188 溶液5ml溶解，在功率400w下探超20次，每间隔5s探超一次，每次5s，4000r/min离心 10min，取上清液，弃去沉淀以去除游离的多西他赛，-20°C预冻，冷冻干燥48h，得负载多西 他赛的功能化氧化石墨烯；
[0026] 3)采用冷溶法制备原位凝胶溶液：将泊洛沙姆4070. 20g加入到4°C预冷的超纯水 5ml中溶解，再加入泊洛沙姆1881. lg，于4°C冰箱中过夜至充分溶胀，即得P4OT/P188温敏水 凝胶溶液；
[0027] 4)室温下，将负载多西他赛的功能化氧化石墨烯按体积比2:1缓慢滴加入P4tl7/ P188温敏水凝胶溶液，并搅拌均匀，即得负载多西他赛的功能化氧化石墨烯温敏水凝胶。
[0028] 实施例3
[0029] 1)称取氧化石墨稀120mg和壳聚糖600mg溶于60ml的2-(N_吗啡啉）乙磺酸缓 冲液中，超声Ih得到均匀分散的悬浮液，称取1- (3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸 盐720mg和N-羟基琥珀酰亚胺960mg，依次加入上述悬浮液中，继续超声6h，得反应液；将 反应液室温下磁力搅拌16h，然后通过0. 2 μπι的水膜过滤，用超纯水抽洗至中性以除去未 反应的壳聚糖，将所得滤饼用24ml超纯水重悬后，-20°C预冻，冷冻干燥48h，即得功能化氧 化石墨條；
[0030] 2)称取功能化氧化石墨烯6mg溶于超纯水6ml中，在功率400w下探超40次，每 间隔5s探超一次，每次5s，得功能化氧化石墨烯分散液；取6mg多西他赛溶于300 μ 1的 二甲基亚砜中，得多西他赛溶液；将功能化氧化石墨烯分散液边超声边缓慢滴加到多西他 赛溶液中；在功率400w下探超20次，每间隔5s探超一次，每次5s，然后，lOOOOr/min离 心lOmin，弃去上清，去除二甲基亚砜，得沉淀物；取沉淀物加入浓度为10mg/ml的泊洛沙姆 188溶液6ml溶解，在功率400w下探超20次，每间隔5s探超一次，每次5s，4000r/min离 心10min，取上清液，弃去沉淀以去除游离的多西他赛，-20°C预冻，冷冻干燥48h，得负载多 西他赛的功能化氧化石墨烯；
[0031] 3)采用冷溶法制备原位凝胶溶液：称取泊洛沙姆4070. 24g加入到4°C预冷的超纯 水6ml中溶解，再加入泊洛沙姆1881. 32g，于4°C冰箱中过夜至充分溶胀，即得P4Q7/P188温敏 水凝胶溶液；
[0032] 4)室温下，将负载多西他赛的功能化氧化石墨烯按体积比3:1缓慢滴加入P4tl7/ P188温敏水凝胶溶液，搅拌均匀，即得负载多西他赛的功能化氧化石墨烯温敏水凝胶。
[0033] 上述制备的基于功能化氧化石墨烯温敏水凝胶可有效用于肿瘤光热靶向治疗，实 现作为热疗介质和药物转运载体在制备治疗肿瘤光热靶向药物中的应用，其应用分为体外 和体内两部分：
[0034] 1)体外：将制得的负载多西他赛的功能化氧化石墨烯溶液，加入到癌细胞A中进 行培养，给药后4h后用780~IlOOnm波长的宽波长光源或者808nm激光光照，光照时间 1~5min，继续培养24h，测定癌细胞的存活率。
[0035] 2)体内：将本发明的负载多西他赛的功能化氧化石墨烯温敏水凝胶注射到荷瘤 小鼠瘤内，给药4h后用780~IIOOnm波长的宽波长光源或者808nm激光光照，光照时间为 1~5min，测量荷瘤小鼠的肿瘤体积大小。
[0036] 上述步骤2)中所述的抗肿瘤药物还可为：难溶性抗肿瘤药物、水溶性药物和核酸 药物，包括多西紫杉醇、紫杉醇、阿霉素、顺铂、卡铂、柔红霉素、寡义反核苷酸、小干扰RNA 和酶类药物中的一种或几种。
[0037] 上述步骤中的癌细胞为：器官表面或者内部出现的各种实体瘤，肺癌，鼻咽癌，食 道癌，胃癌，肝癌，大肠癌，乳腺癌，卵巢癌，膀胱癌，白血病，胰腺癌，宫颈癌，喉癌，甲状腺 癌，舌癌，脑瘤（颅内肿瘤），小肠肿瘤，胆囊癌，胆管癌，肾癌，前列腺癌，阴茎癌，睾丸肿瘤， 子宫内膜癌，绒毛膜癌，阴道恶性肿瘤，外阴恶性肿瘤，霍奇金病，非霍奇金淋巴瘤，皮肤癌， 恶性黑色素瘤中的一种。
[0038] 上述步骤2中的荷瘤小鼠为：器官表面或者内部出现的各种实体瘤，肺癌，鼻咽 癌，食道癌，胃癌，肝癌，大肠癌，乳腺癌，卵巢癌，膀胱癌，白血病，胰腺癌，宫颈癌，喉癌，甲 状腺癌，舌癌，脑瘤（颅内肿瘤），小肠肿瘤，胆囊癌，胆管癌，肾癌，前列腺癌，阴茎癌，睾丸 肿瘤，子宫内膜癌，绒毛膜癌，阴道恶性肿瘤，外阴恶性肿瘤，霍奇金病，非霍奇金淋巴瘤，皮 肤癌，恶性黑色素瘤中的一种。
[0039] 本发明的功能化氧化石墨烯温敏水凝胶作为肿瘤光热靶向治疗体内浅表肿瘤时， 加热程度无法达到热疗要求时，可以通过调节功率和照射时间来改善升温范围进行肿瘤的 治疗。
[0040] 本发明的功能化氧化石墨烯温敏水凝胶作为药物转运载体采用瘤内注射的方法 给药，可以更多的分布在肿瘤组织中，与正常组织相比，它可以长期的高浓度的保留在肿瘤 组织中，这样当采用适当的手段使用近红外激光照射时能够控制在肿瘤组织中温敏水凝胶 的温度使其发生形变，使其装载的药物在肿瘤部位浓度提高。并经实验取得了非常满意的 有益技术效果，有关实验资料如下：
[0041] 一、使用光照射本发明功能化氧化石墨烯对肿瘤细胞生长的抑制活性的测定
[0042] 将MCF-7乳腺癌细胞（由上海细胞库提供）用作待考察的癌细胞。将MCF-7细胞 培养在含胎牛血清（FBS) 10 %，青链霉素混合液1 %的RPMI 1640培养基中，培养箱条件为 37°C、5% CO2，每2~3天传代一次。收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，96孔板每孔加 入200 μ 1，铺板使待测细胞调密度至6X IO3个/孔，（边缘孔用无菌PBS填充）。置于5% C02,37°C孵育24h，至细胞单层铺满孔底（96孔平底板），加入浓度梯度（0.001、0.01、0. 1、 1 μ g/ml)的实施例1中的负载多西他赛的功能化氧化石墨烯，设置复孔为4~6个。光照组 放置在808nm近红外光2. 5W中2min，保持光照过程中温度在37°C，光照结束后将细胞板置 于CO2培养箱中孵育24h，对于无光照组而言，则直接将细胞板置于CO 2培养箱中孵育24h， 终止培养，加入预冷的50%三氯乙酸（TCA) 50 μ 1，4°C放置lh。倒掉固定液，每孔用去离子 水洗5遍，甩干，空气干燥。每孔加入50 μ 1的磺酰罗丹明B (SRB)溶液，静置放置30min，未 与蛋白结合的SRB用1 %醋酸洗5遍，空气干燥。结合的SRB用150 μ I lOmmol/L