(在55°C稍高于在40/75)，且在40/75下13周后两种 样品实际上仅增加了~0. 05%。
[0410] '湿的'喷雾干燥的制剂（12PM529-8-1)具有稍低于其它制剂样品的稳定性，但在 40/75下13周后杂质仍然在规格内（总杂质从在t = 0时的0. 67%增加至在t = 13周时 的 1. 33% )。
[0411] 喷雾干燥的API (CNS7056B，12PM529-9-1)显示显著的不稳定性，其中总杂质增加 至 1.94% (4 周，在 55°C)、2. 56% (4 周，在 40/75)和 3. 35% (13 周，在 40/75)。这证实乳 糖制剂在稳定性试验期间显著地使得API稳定，即使在该制剂中存在与API样品类似的含 水量。
[0412] 正如所预期的，所观察到的主要杂质是水解产物CNS7054X。
[0413] 5.使用拉曼作图研宄喷雾干燥制剂和冻干制剂中的API分布和形式
[0414] 打开一瓶冻干配制的产品（在乳糖中的CNS7056B，批号CNS2501A)并且随即采样 4次。然后将每次采样的部分置于显微镜载玻片上，并且对制剂样品表面的小区域进行拉 曼作图（~300x300 ym)。与冻干的（无定形）和结晶API (CNS7056B，1型和2型）和冻 干的（无定形）和结晶（一水合物）乳糖的参比样品对比加工数据。分析作图以确定API 在制剂内的分布，然后如果检测到任何相分离（API区域），则分析它们以评价API的物理 形式。进行第二次实验，其中打开一瓶新的冻干配制的产品（在乳糖中的CNS7056B，批号 CNS2501A)，并且从饼状物的上部、中部和底部采样。再次通过如上所述的拉曼作图分析这 3种样品。此外，在较小区域内（~20x20 ym)对上部和底部样品的2个区域更详细地作 图。还通过拉曼作图再分析另外3个批号的冻干配制的产品（乳糖中的CNS7056B):批号 P02308、A01P301和P301-02N。在这些实验中作图区域的大小为~120x100 ym。
[0415] 5. 1 批号 CNS2501A 的结果
[0416] 加工拉曼作图数据以得到'化学图像'，其显示对该图每一点上检测的拉曼光谱与 如下的类似性：
[0417] a)在355cm_l的赋形剂主峰（即乳糖）；
[0418] b)在 1580cm-l 的 API (CNS7056B)主峰；
[0419] c)与整个赋形剂光谱（乳糖）的相关性。
[0420] 数据显示，如在分析2支不同小瓶的7个不同刮取样品后提供的，在批号CNS2501A 中发现没有相分离和API重结晶。API和乳糖的分布均匀且未发现分离区域或API的颗粒。 这提示在冻干制剂批次CNS2501A中形成了 API在乳糖中真正的分子分散体。
[0421] 5. 2 批号 P02308、A01P301 和 P301-02N 的结果
[0422] 如5. 1章中所述，加工拉曼作图数据。
[0423] 如基于每批的一组作图数据所提供的，数据显示在批号P02308、A01P301和 P301-02N中无相分离和API的重结晶。API和乳糖的分布均匀且未发现分离区域或API的 颗粒。这提示在批号P02308、A01P301和P301-02N的冻干制剂中形成了 API在乳糖中的分 子分散体（注意：在此前对批号P02308进行的作图中发现了一些相分离。这提示在该批号 中分离（结晶）的API的分布不均匀。
[0424]6?概述
[0425] 可以成功地研发并且测试与目前冻干（冷冻干燥的）产品等同的喷雾干燥的制 剂。
[0426] 通过XRH)和拉曼分析显示喷雾干燥和冻干的制剂二者都完全是无定形的和单相 的（即，没有可检测到的分离的结晶API)。喷雾干燥的制剂具有稍微更高的杂质水平（~ 0. 7%总杂质对比冻干产品的~0. 5% )。推测这是在喷雾干燥生产过程中形成的并且可以 通过工艺优化将其降低。
[0427] 在40°C/75% RH 13周和在55°C 4周内，完全干燥的喷雾干燥的制剂显示与冻干 产品等同的稳定性。未干燥的喷雾干燥的制剂（3%水）显示稍差的稳定性，但在40°C/75% RH 13周内仍然在规格内。
[0428] 在光稳定性试验（变成灰色/蓝色二者）中，喷雾干燥的制剂显示与冻干产品类 似的颜色改变。API和制剂的光应激的样品的物理分析显示一定的重结晶和水吸附，但没有 促成颜色改变的物理形式改变的证据。
[0429] 配制产品的目前冻干批号（CNS2501A)和此前冻干批号（P02308、A01P301和 P301-02N)的拉曼作图分析显示API和赋形剂的均匀分布，没有API分离和随后结晶的证 据。
[0430] III.包含二糖二元赋形剂的制剂的制备和稳定性分析
[0431] 1?目的和研宄概要
[0432] 本研宄的目的是评价所选择制剂的稳定性。制备了几种CNS 7056的冻干的制剂， 其包含一水合乳糖，并将pH调整至3. 1，API作为苯磺酸盐存在。研宄了 2种CNS 7056的 填充浓度：5mg/ml和10mg/ml。将制剂填充入ISO 10R和ISO 6R透明玻璃小瓶。使填充 体积减至4mL/小瓶（当前填充体积是5. 2mL)。将现有制剂填充入ISO 10R小瓶，用West 4023/50art. 1346塞和West S87J 4416/50塞封闭。评价在IS010R小瓶中制备的新制剂与 现有制剂的稳定性。除此之外，还测试了在最终临床批次生产框架内冻干的现有制剂（批 号A01P310,填充体积5. 2mL，ISO 20R透明玻璃小瓶）以生成对比性稳定性数据.。
[0433] 2?方法
[0434] 对样品稳定性进行如下测试：
[0435] ?冻干物的外观。
[0436] ?重构时间。
[0437] ?重构溶液的外观。
[0438] ?卡尔?费歇尔滴定的含水量。
[0439] ? HPLC含量测定/相关物质。
[0440] ?同渗质量摩尔浓度（仅在0时间）。
[0441] 3?批次描述
[0442] 将经受稳定性测试的批次的产品组成概述如下。
[0443]
[0444] 4?稳定性程序
[0445] 将稳定性程序概述在下表中：
[0446]
[0447] 5?稳定性计划
[0448] 将稳定性计划概述在下表中：
[0449] L .
[0453] 6?稳定性结果
[0454] 将在本研宄框架下采集的结果提供在图45 - 51中并且可以将它们概述如下：
[0455]在40°C 75% RH(1个月）贮存的样品
[0456] ?制剂L2M110R5和L2M110R10中冻干饼状物的外观的一些改变。一些小瓶的 L20R5(目视检查后弃去的临床批次小瓶）显示不同的冻干饼状物外观。
[0457] ?预期的含水量增加（在L20R5 ;L2M110R10中未观察到）。
[0458] ?总杂质少量增加（在L10R10 ;L10R5S87 ;L20R5中未观察到）。HPLC含量测定实 际上保持恒定。
[0459] ?已知杂质CNS7054X的增加。
[0460]在40°C 75% RH下贮存3个月后的样品（仅L10R5 :L10R5S87和L20R5制剂）.
[0461] 饼状物和重构溶液的外观均未发生任何改变（发现L20R5样品的一些饼状物皱 缩）。
[0462] 含量测定保持不变。
[0463] L10R5
[0464] ?含水量进一步增加（任何情况下％ H20〈1. 0% )。
[0465] ?因CNS7054X导致杂质进一步轻微增加。
[0466] L10R5S87
[0467] ?含水量进一步增加（任何情况下％H20〈1. 0%)。
[0468] ?因CNS7054X导致杂质进一步轻微增加。
[0469]L20R5 (目视检杳）
[0470] ?含水量进一步增加（任何情况下％ H20〈l. 0% )。
[0471] ?主要因CNS7054X导致杂质含量进一步轻微增加。
[0472]在55°C (1个月）贮存的样品.
[0473] ?发现制剂L2M110R5、L2M110R10、L4M110R5和L4M110R10的冻干饼状物皱缩且颜 色成淡黄色。一些小瓶的L20R5(目视加查后弃去的临床批次小瓶）显示炭状的冻干饼状 物。
[0474] ?含水量增加（在L20R5中未观察到）。
[0475] ?总杂质增加（在L10R5 ;L10R10中总杂质低于1. 00% )。同时HPLC含量测定的 减少可忽略不计。
[0476] ?已知杂质CNS7054X的增加。
[0477] ?在 L20R5、L4M110R5、L4M110R10、L2M110R5、L2M110R10 中另外的杂质超过 L0Q。
[0478] ?在其重构时轻微存在泡沫体（不持久）。
[0479] ?在 25°C /60% RH 贮存 1 个月后的 L10R5 ;L10R5S87 和 L20R5 制剂。
[0480] ?饼状物和重构溶液的外观未发生任何改变。
[0481] ?含量测定保持不变。
[0482] L10R5
[0483] 含水量轻微增加（任何情况下％ H20〈1. 0 % )。
[0484] 因CNS7054X导致杂质进一步轻微增加。
[0485] L10R5S87
[0486] 含水量未增加。
[0487] 杂质含量实际上保持不变。
[0488]L20R5 (目视检杳）
[0489] 含水量增加（任何情况下％ H20〈1. 0 % )。
[0490] 杂质含量增加主要归因于CNS7054X。
[0491] IV.包含二糖/葡聚糖的制剂的制备和稳定性分析，作为减少冻干时间的手段
[0492] 1?目的
[0493] 在本研宄中，研宄了包含乳糖和葡聚糖的几种CNS7056冻干物制剂。改变二糖与 葡聚糖之比以便操纵比玻璃化转变温度OV)和塌陷温度Tc，且由此减少冻干时间。与二 糖乳糖相比，葡聚糖具有更高的Tg'，因此可以作为塌陷温度调节剂起作用。
[0494] 在不同冻干方案中总计制备并且测试了 10种制剂。
[0495]2?制剂
[0496] 2. 1?制剂组成
[0497] 制备了如下表中所概括的2种CNS7056制剂，它们仅包含葡聚糖（001/PAN/13)或 包含乳糖和葡聚糖的混合物（002/PAN/13):
[0498]
[0499]2. 2?制剂制备
[0500] 2. 2. 1?溶液的制备
[0501] 根据下列方案制备了包含12mg/mL CNS7056的溶液：
[0502] ?在磁力搅拌下加入API (CNS 7056苯磺酸盐）至85%的最终体积；
[0503] ?在避光、环境下搅拌3小时；
[0504] ?对全部制剂检查pH(标称pH3. 2)并且将其调整至pH3. 0 ;
[0505] ?再搅拌20分钟：外观无显著改变；
[0506] ?制成90 %最终体积；
[0507] ?再搅拌20分钟；
[0508] ?制剂1-2显示淡黄色，轻微浑浊；
[0509] ?检查pH，全部标称pH3 ;
[0510] ?制成最终体积并且再搅拌20分钟；
[0511] ?制剂1-2外观无改变，在浓缩制剂中未溶解的物质更少；
[0512] ?过滤（0? 22 ym PVDF)制剂 1-2;
[0513] ?将浓缩制剂过滤（0. 22 y m PVDF)的浓缩制剂再搅拌25分钟；
[0514] ?全部过滤物澄清，淡黄色，不含看见颗粒物；
[0515] ?过滤物以4. 2mL体积填充并且按照2. 1. 2中所述方案冻干。
[0516] 2. 2. 2.冻干方案
[0517] 根据下列方案冻干样品：
[0518]
[0519] 2. 3冻干样品的分析
[0520] 对于包含碳水化合物：葡聚糖的冻干物，冻干物显示良好外观和快速重构时间。两 种制剂均显不尚于99. 72%的纯度。
[0521]
[0522] 2. 3. 1外观
[0523] 测定了冻干样品的外观。现将结果列在下表中：
[0524]
[0525] 2. 3. 2含水量
[0526] 测定了冻干样品的含水量。现将结果列在下表中：
[0527]
[0528] 2. 3. 3重构溶液的重构时间和pH
[0529] 用10mL 0. 9%盐水重构每支小瓶。现将有关重构时间和pH的结果列在下表中。
[0530]
[0531] 2. 3. 4小瓶含量
[0532] 在用10mL 0. 9%盐水重构每支小瓶后测定了T=lm 40°C /75% RH时样品的小瓶 含量。结果如下表中所示：
[0533]
[0534] 2. 3. 4杂质
[0535] 测定了在T = lm 40°C /75% RH时不同制剂的杂质。结果如下表中所示：
[0536] 001/PAN/13 ：
[0537]
[0539] *1全部杂质的总和彡0. 03%，以面积计
[0540] *2来自冻干后样品的杂质
[0541] 杂质是2次测定的平均值
[0542] n. d.=未检测
[0543] 002/PAN/13 ：
[0544]
LUD4CIJ *王部求M tfJ况、邪彡u. U3 %，以凹^KIT
[0547] 杂质是2次测定的平均值
[0548] n. d.=未检测
[0549] 3.制剂-基于葡聚糖40的制剂的潜在工艺改进
[0550] 3. 1?制剂组成
[0551] 制备了如下表中所概述的两种包含葡聚糖（007/PAN/13)或乳糖和葡聚糖40混合 物（009/PAN/13)的 CNS7056 制剂：
[0552]
[0553] 3. 2.制剂制备
[0554] 3. 2. 1?溶液的制备
[0555] 通过在避光的实验室环境条件下高架搅拌促进CNS7056B溶解。现将每种制剂制 备的特点的概述显示如下。
[0556] 007/PAN/13
[0557] ? API添加（〈5分钟）至~85 %最终体积；
[0558] ?以500rpm开始搅拌并且到120分钟时增加至700rpm ;
[0559] ? 70分钟后调整至pH 3. 0 ;
[0560] ? 120分钟后增加至~90% ;
[0561] ? 150分钟后调整至pH 2. 8 ;
[0562]? 180分钟后，检查pH(2. 9)，调整至pH 3. 0,达到最终体积。
[0563] 009/PAN/13
[0564] ? API添加（〈5分钟）至~95 %最终体积；
[0565] ? API (500rpm)搅拌后立即增加至700rpm，然后
[0566] ?到30分钟时增加至800rpm ;
[0567] ? 10分钟后调整至pH 3. 0 ;
[0568]? 75分钟后，检查pH (pH 3. 1)，调整至pH 3. 0,且达到最终体积。
[0569] 制备后，将全部制剂通过0. 22 y m PVDF膜滤器过滤。
[0570] 3. 2. 2.冻干方案
[0571] 以将4. 2mL体积将过滤物填充到20mL透明型玻璃小瓶中，并且冻干（直接来自贮 存架上），冻干循环如下表中所示：
[0572]
[0573] L0574J 3. 3样品分析
[0575] 在批号007和009/PAN/13中冻干填塞物的外观无显著性差异。冻干填塞物看起 来是白色/灰白色、均匀的且形成良好。
[0576] 每种产品一式两份小瓶用于初始T = 0测试，现将分析结果的概述显示如下。
[0577] 3. 3.1重构后的分析
[0578] 将10mL生理盐水加到冻干样品中，涡旋小瓶并且观察。测定了重构时间、重构溶 液外观、pH和纯度（HPLC)。结果如下表中所示：
[0579]
[0580] 3. 3. 2 外观
[0581] 测定了冻干样品的外观。现将结果列在下表中：
[0582]
[0583] 3. 3. 3 含水量
[0584] 测定了冻干样品的含水量。现将结果列在下表中：
[0585]
[0586] 3. 3. 4重构溶液的重构时间和pH
[0587] 用10mL 0. 9%盐水重构了每支小瓶。现将有关重构时间和pH的结果列在下表中。
[0588]
[0589] 3. 3. 5小瓶含量
[0590] 用10mL 0. 9%盐水重构后测定了 T = lm 40°C /75% RH时样品的小瓶含量。结果 如下表中所示：
[0591]
[0592] i回收率计算为T = 0结果的百分比
[0593] 3. 3. 6 杂质
[0594] 测定了在T = lm 40°C /75% RH时不同制剂的杂质。结果如下表中所示：
[0595] 007/PAN/13 ：
[0596]
[0597]
[0598] *所有杂质的总和彡0. 03%，以面积计
[0599] 杂质是2次测定的平均值
[0600] n.d.=未检测
[0601] 009/PAN/13 ：
[0602]
[0603]
[0604] *所有杂质的总和彡0. 03 %，以面积计 [0605]杂质是2次测定的平均值
[0606] n.d.=未检测
[0607] 4.另外的制剂
[0608] 4. 1 参数：
[0609] ? CNS 7056 碱的填充浓度=12mg/mL
[0610] ?小瓶尺寸=20R(30mm直径）
[0611] ?填充溶液体积4. 2mL
[0612] ?制备每种产品约50支小瓶
[0613] ?还制备安慰剂
[0614] 4. 2制剂组成（小瓶等同物）
[0615]
[0616] 来自热评价预测的制剂的Tc = -15 °C
[0617] 4. 3 参数
[0618] ?冷冻 至-30°C @0. 2°C/min?保持
[0619] ?初级干燥-7°C @700-750mTorr
[0620] ?次级干燥30 °C
[0621] 4. 4冻干样品分析的测试标准
[0622] ?外观
[0623] ?重构时间-添加10mL盐水
[0624] ?含水量
[0625] ?相关物质
[0626] ?稳定性-lm 55C+1, 3m 40C/75% RH
[0627] 4. 4. 1 外观
[0628] 测定了冻干样品的外观。现将结果列在下表中：
[0629]
[0630] 4. 4. 2 含水量
[0631] 测定了冻干样品的含水量。现将结果列在下表中：
[0632]