一种胺碘酮脂质体的制备方法及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药技术领域，具体是一种胺碘酮脂质体的制备方法及其应用。
【背景技术】
[0002] 盐酸胺碘酮（Amiodarone)是一种常用的抗心律失常药物，广泛用于室性早搏、室 性心动过速(包括室速、室颤、室扑)、室上性心动过速、房颤、房扑等各类心律失常，相对于 其他抗心律失常药物，更适合用于心肺复苏、心梗后心律失常及心衰等病理情况下应用。但 胺碘酮存在一些缺陷，例如吸收慢，半衰期长，个体差异性大，且由于胺碘酮高脂溶性，导 致药物给药后血浆中药物浓度下降较快(从血浆中再分布于组织中)，并且更多的分布于肝 脏、肺、脂肪、皮肤及其他非心脏组织，因此起始治疗需要负荷剂量，起效时间很长(胺碘酮 治疗阵发性房颤平均起效时间需6~8小时)，并且使用时还需要密切关注其毒副作用，包括： 低血压、负性肌力作用、甲状腺毒性、肺纤维化、肝毒性、皮肤蓝灰色改变、负荷剂量时消化 道不良反应、神经系统共济失调以及与影响如地高辛、华法令等药物效应等。
[0003] 脂质体（liposome)系指将药物包封于类脂质双分子层形成的薄膜中间所制成的 超微型球状药物载体制剂，由于其结构类似生物膜，可包封水溶性和脂溶性药物，具有减少 药物剂量，降低毒性，延缓释放，改变药物体内分布，并具有靶向治疗效应，提高药物疗效， 因此我们研制出"胺碘酮脂质体"，依据目前研宄结果显示能明显提高心脏组织，包括心肌 梗死、射频消融、手术损伤等病理状态下局部胺碘酮药物浓度，并减少非心脏组织的药物浓 度；药代动力学研宄也显示静脉注射胺碘酮脂质体，明显减缓血浆中胺碘酮药物清除速度， 延缓了胺碘酮组织再分布过程。从而在临床使用中可以减低药物剂量，降低药物毒副作用， 并且具有心脏组织靶向性，将可以更广泛应用于预防和治疗心肌梗死后心律失常、射频消 融手术后预防复发、各类快速性心律失常等领域，相对于普通胺碘酮药物具有显著优势。
[0004] 相关研宄证实胺碘酮脂质体相较于普通胺碘酮药物能明显减少心肌梗死后及再 灌注引起的致命性心律失常，并且明显减少胺碘酮对心脏的负性肌力作用和低血压反应。 同时研宄也显示，该制备的胺碘酮脂质体可靶向聚集在心脏射频消融损伤部位，局部浓度 较普通胺碘酮药物组显著提高，在临床中具有进一步减少射频消融后心律失常复发率的潜 在效能。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种胺碘酮脂质体的制备方法及其应用，以解决上述背景 技术中提出的问题。
[0006] 为实现上述目的，本发明提供如下技术方案： 一种胺碘酮脂质体的制备方法，具体制备步骤如下：（1)将蛋黄卵磷脂、胆固醇和盐酸 胺碘酮按照（40~41) : (5~6) :1的质量比倒入圆底烧瓶中混合，并倒入20ml氯仿进行 充分溶解；（2)将圆底烧瓶放置在真空旋转蒸发器中，在60° C水浴下蒸发干燥，得到的干 膜加去离子水水化；（3)通过超声波进行超声降解30min得到混悬液；（4)将混悬液通过 〇· 45 μ m微孔膜过滤去除游离ADHC晶体，即可得到纯胺碘酮脂质体。
[0007] 作为本发明进一步的方案：制备的胺碘酮脂质体应用于预防和治疗心肌梗死后心 律失常。
[0008] 与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明方法得到的胺碘酮脂质体应用于 预防和治疗心肌梗死后心律失常，降低射频消融术后心律失常(如房颤，室性心律失常）的 复发率，缩短治疗心律失常的复律时间（如室上速、阵发性房颤，室速等)，并减少胺碘酮毒 副作用（如甲状腺毒性，低血压反应)。
【附图说明】
[0009] 图1为电镜下观察胺碘酮脂质体的电镜图。
[0010] 图2为胺碘酮脂质体的稳定性测验结果数据图。
[0011] 图3为大鼠心脏消融后胺碘酮的组织分布图。
[0012] 图4为IR-775脂质体的心脏荧光成像图。
【具体实施方式】
[0013] 下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完 整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于 本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他 实施例，都属于本发明保护的范围。
[0014] -种胺碘酮脂质体的制备方法，具体制备步骤如下：（1)将蛋黄卵磷脂、胆固醇和 盐酸胺碘酮按照40. 48 :5. 45 :1的质量比倒入圆底烧瓶中混合，并倒入20ml氯仿进行充 分溶解；（2)将圆底烧瓶放置在真空旋转蒸发器中，在60° C水浴下蒸发干燥，得到的干 膜加去离子水水化；（3)通过超声波进行超声降解30min得到混悬液；（4)将混悬液通过 〇· 45 μ m微孔膜过滤去除游离ADHC晶体，即可得到纯胺碘酮脂质体。
[0015] 在这个最优化的条件下，测量的各项胺碘酮脂质体质量参数： 包封率EE值是99. 49 ± 13. 31% ; 粒度仪下粒径是99. 90 ±0. 36 nm ; PI :0. 224±0. 010 ; Zeta 电位：35· 07±10. 86 mV ; 如图1为电镜下观察胺碘酮脂质体。
[0016] 如图2为胺碘酮脂质体的稳定性测验结果：置于4°C环境下胺碘酮脂质体ADHC-L 的平均粒径和zeta电位变化。
[0017] 从图2中可以得知制备的胺碘酮脂质体很稳定。
[0018] 得到的胺碘酮脂质体显示在射频消融损伤的心脏组织也具有明显的心脏靶向效 应，大鼠体内组织分布实验显示发生消融损伤的心肌组织胺碘酮浓度明显升高，心脏荧光 成像也提示发生消融损伤的心肌组织荧光强度明显增强，同时药代动力学显示胺碘酮脂质 体与不同剂量的游离胺碘酮相比，明显提高了胺碘酮在体内的药时曲线下面积，延长了其 在体内的滞留时间，可以有效降低胺碘酮的临床使用剂量，减轻其毒副作用。
[0019] 在药物动力学实验中，随机将大鼠分成三组，第一组为游离胺碘酮对照组（3 mg/ kg);第二组为游离胺碘酮对照组（9 mg/kg);第三组为脂质体组（3 mg/kg)。给药后于不同 时间点各收集500 μL血液样品置于肝素钠化的离心管，测定血浆中的胺碘酮含量，再通过 药动学软件计算不同组的药动学参数。
[0020] 各组的药动实验结果见下表：
由上表所示，脂质体组与对照组（3 mg/kg和9 mg/kg)相比，其体内的药动学特性均有 显著的改善，明显提高了胺碘酮在体内的药时曲线下面积，延长了其在体内的滞留时间，可 以有效降低胺碘酮的临床使用剂量，减轻其毒副作用。
[0021] 在大鼠体内组织分布实验中，具体步骤如下：（1)随机将大鼠分成四组，第一组心 脏消融后，对照组（3 mg/kg)静脉给药；第二组心脏消融后，脂质体组（3 mg/kg)静脉给药； 第三组开胸不消融，对照组（3 mg/kg)静脉给药；第四组开胸不消融，脂质体组（3 mg/kg)静 脉给药；（2)300g左右大鼠常规麻醉，气管插管，人工辅助呼吸；于第四肋间隙开胸，暴露大 鼠心脏，用一个金属镊子托起，再用专门的射频消融导管，消融部位为左心室游离壁（前外 侧面)，消融能量设置：12W，15秒钟，每只大鼠消融4个点，形成一条直线；（3)大鼠于药物 静脉注射后20 min处死，取出各组织（心，肺，肝，脾，肾)，计算各组实验组织中胺碘酮药物 含量。
[0022] 结果显示，胺碘酮脂质体在射频消融后其心脏组织中的药物含量显著高于对照组 游离胺碘酮，是其3. 96倍。
[0023] 如图3是大鼠心脏消融后胺碘酮的组织分布。
[0024] 在大鼠心脏荧光成像实验中，具体步骤如下：按照胺碘酮脂质体的制备工艺和处 方，等量制备载IR-775的荧光脂质体；随机将大鼠分成三组，其中第一组作为对照组注射 胺碘酮脂质体仅开腔，不消融；第二组作为实验组进行心脏消融手术后注射胺碘酮脂质体， 第三组作为空白组注射等量的生理盐水；注射给药后20 min取出大鼠心脏，放置于装备有 荧光滤镜(激发波长770 nm，发射波长830 nm)的柯达多光谱荧光活体成像系统，分别对心 脏进行X-ray及焚光拍摄。
[0025] 如图4为IR-775脂质体的心脏荧光成像，结果显示发生消融损伤的心肌组织荧光 强度明显增强。
【主权项】
1. 一种胺碘酮脂质体的制备方法，其特征在于，具体制备步骤如下：（1)将蛋黄卵磷 月旨、胆固醇和盐酸胺碘酮按照（40~41): (5~6):1的质量比倒入圆底烧瓶中混合，并倒入 20ml氯仿进行充分溶解；（2)将圆底烧瓶放置在真空旋转蒸发器中，在60° C水浴下蒸发 干燥，得到的干膜加去离子水水化；（3)通过超声波进行超声降解30min得到混悬液；（4) 将混悬液通过0. 45 y m微孔膜过滤去除游离ADHC晶体，即可得到纯胺碘酮脂质体。2. 根据权利要求1所述的胺碘酮脂质体的制备方法，其特征在于，制备的胺碘酮脂质 体应用于预防和治疗心肌梗死后心律失常。
【专利摘要】本发明公开了一种胺碘酮脂质体的制备方法及其应用，将蛋黄卵磷脂、胆固醇和盐酸胺碘酮按照40.48：5.45：1的质量比倒入圆底烧瓶中混合，并倒入20ml氯仿进行充分溶解，然后放置在真空旋转蒸发器中，在60°C水浴下蒸发干燥，得到的干膜加去离子水水化，通过超声波进行超声降解30min得到混悬液，将混悬液通过0.45μm微孔膜过滤去除游离ADHC晶体，即可得到纯胺碘酮脂质体。本发明方法得到的胺碘酮脂质体显示在射频消融损伤的心脏组织也具有明显的心脏靶向效应，发生消融损伤的心肌组织胺碘酮浓度明显升高，荧光标记也提示发生消融损伤的心肌组织荧光强度明显增强，延长胺碘酮在体内的滞留时间，有效降低胺碘酮的临床使用剂量，减轻其毒副作用。
【IPC分类】A61K9/127, A61K31/343, A61P9/06
【公开号】CN104983681
【申请号】CN201510314551
【发明人】诸葛萦, 高峰, 汪芳, 谢木青
【申请人】上海市第一人民医院
【公开日】2015年10月21日
【申请日】2015年6月10日