转入高速 组织捣碎机内，以每分钟20000转搅拌3min，反复3次，直至大豆卵磷脂均匀分散，得初乳； [0064] 3)取初乳加入预热至80°C的注射用水使达全量1000ml，转移至高压乳匀机内，匀 化3次，取样镜检，至乳滴在25-30 °C以下，进一步乳化为纳米乳剂；
[0065] 4)将纳米乳剂与重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子混合进行重分散载药处理，形成 乳剂喷雾剂。
[0066]实施例5:制备重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子(微)纳米乳喷雾剂
[0067] 1)取泊洛沙姆40g，山梨醇20g，大豆卵磷脂15g，纯甘油30g与预热至80度的适量注 射用水；
[0068] 2)用高速分散均质机进行分散混合，将分散液用超声探头进一步分散，超声3分钟 制得初乳；
[0069] 3)加入预热至80 °C的注射用水使达全量1000ml，再次超声3分钟，加入高压纳米均 质机内，匀化3次，得胶束载体介质；
[0070] 4)将重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子药物冻干粉或药物溶液分散在胶束介质中， 制得胶束喷雾剂。
[0071 ]实施例6:制备重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子脂质体纳米乳喷雾剂 [0072] 1)现将胆固醇IOg超声分散于乙醇中，于60°C水浴加热；
[0073] 2)加入磷脂IOg搅拌成不透明粘稠溶液，搅拌2-3分钟，加少量水稀释，然后边搅拌 边缓慢加水至1000ml，超声4分钟，即得合成或天然脂肪油及挥发油喷雾剂载体；
[0074] 3)将重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子药物冻干粉充分分散于所述合成或天然脂 肪油及挥发油喷雾剂载体中，充分分散得合成或天然脂肪油及挥发油载体喷雾剂。
[0075] 本发明的喷雾剂适用于各种白细胞减少症状所需粒细胞集落刺激因子，用于鼻 腔、口腔及舌下给药，计量范围〇.4-20yg/kg/天，可根据疾病或病情的不同适当调整。
[0076] 以上对本发明的具体实施例进行了详细描述，但其只是作为范例，本发明并不限 制于以上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言，任何对本发明进行的等同修改和 替代也都在本发明的范畴之中。因此，在不脱离本发明的精神和范围下所作的均等变换和 修改，都应涵盖在本发明的范围内。
【主权项】
1. 一种重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子喷雾剂，其特征在于，以脂质体、乳剂、胶束、合 成或天然脂肪及挥发油为药物载体，每1000重量份的喷雾剂溶液中包括(0.01-5.0)重量份 的重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子;其中， 所述脂质体包括磷脂、胆固醇、水溶性载体； 所述乳剂包括油相、表面活性剂、助表面活性剂和/或水； 所述胶束包括吸收促进剂、助溶剂、抗氧化剂与螯合剂、抑菌剂及缓冲溶液； 所述合成或天然脂肪油及挥发油为具有C6-C18中等链长的脂肪酸甘油脂，且所述合 成或天然脂肪油及挥发油类占喷雾剂组合物总量的1 一99.999%。2. 根据权利要求1所述的喷雾剂，其特征在于，所述重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子包 括天然基因重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子，经化学修饰的糖基化或PEG化的重组人粒细 胞巨噬细胞刺激因子及其突变体。3. 根据权利要去1所述的喷雾剂，其特征在于，所述磷脂选自大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、 二硬脂酰磷脂酰胆碱、棕榈酰磷脂酰胆碱，磷脂酰丝氨酸、磷脂酸和氢化卵磷脂中的一种或 几种;所述胆固醇选自胆留醇、胆固醇棕榈酸酯和胆固醇硬脂酸酯中的一种或几种;所述水 溶性载体为氯化钠和/或胆固醇;所述脂质体载体的喷雾剂为脂质体凝胶喷雾剂，纳米脂质 体乳喷雾剂或脂质体混悬喷雾剂。4. 根据权利要求1所述的喷雾剂，其特征在于，所述油相选自植物油、动物油、精油、矿 物油、合成油中的一种或几种;所述表面活性剂为两性离子表面活性剂或非离子表面活性 剂;所述助表面活性剂选自中链单甘酯、中链二甘酯、中链混合单/二甘酯、二乙二醇单乙醚 (Transcutol P)、丙二醇、聚乙二醇(分子量200-600的PEG)和乙醇中的一种或几种;所述乳 剂还包括稳定剂和防腐剂，所述稳定剂选自胆固醇、长链醇(C 14-22)、油酸、亚油酸或其衍生 物中的一种或几种;所述防腐剂选自丁香油、丙二醇、山梨酸、山梨酸甲酯、对羟基苯甲酸酯 类、对羟基苯甲酸丁酯钙、对羟基苯甲酸甲酯钠、对羟基苯甲酸丙酯钠、苯酚、间甲酚、苯甲 醇、苯甲酸中的一种或几种;所述乳剂形成的乳滴粒径在〇. 1-100μπι，包括W/0/W及0/W/0型 复乳。5. 根据权利要求4所述的喷雾剂，其特征在于，所述油相选自中链三甘酯、中链二甘酯 和中链单甘酯中的一种或几种，其中中链为C6-C18;所述表面活性剂选自聚氧乙烯失水山 梨醇脂肪酸酯，聚氧乙烯脂肪醇醚类、聚氧乙烯脂肪酸酯类、聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚 物、聚氧乙烯甘醇酸化的天然或氢化蓖麻油、琥珀酸维生素 Ε聚乙二醇酯、聚乙二醇-8-甘油 辛酸/癸酸酯、卵磷脂、氢化磷脂和豆磷脂中的一种或几种。6. 根据权利要求1所述的喷雾剂，其特征在于，所述吸收促进剂为大豆卵磷脂或蛋黄卵 磷脂，所述助溶剂为乙醇和/或丙二醇;所述抗氧化剂选自抗坏血酸、亚硫酸盐、硫甘油、巯 基乙酸和半胱氨酸盐酸盐中的一种或几种;所述螯合剂选自EDTA(乙二胺四乙酸通常为钠 盐）、柠檬酸和柠檬酸盐中的一种或几种;所述抑菌剂选自苯酸、间甲酚、苯甲醇、对羟基苯 甲酸酯类、氯丁醇中的一种或几种;所述缓冲液为ΡΗ=6的柠檬酸盐，ΡΗ=6-8的磷酸盐或ΡΗ = 6-6.5的醋酸盐。7. 制备如权利要求3所述的喷雾剂的方法，其特征在于，所述脂质体载体的喷雾剂采用 逆向蒸发法、复乳法、冻融法、钙诱导融合法、注入法、薄膜分散法、表面活性剂处理法或加 压挤出法制备，在制备条件不影响药物活性的前提下可将药物冻干粉或药物溶液采用上述 方法直接制备脂质体喷雾剂，或采用上述方法先制备空白脂质体，制备的空白脂质体的载 体溶液与药物冻干粉或药物溶液再进行重分散载药处理。8. 制备如权利要求4或5所述的喷雾剂的方法，其特征在于，所述乳剂是在高速搅拌下 制备粗乳剂，再通过超声粉碎机和或高压乳匀机进一步乳化为纳米乳剂，将制备好的粗乳 剂或纳米乳剂与药物冻干粉或药物溶液混合进行重分散载药处理。9. 制备如权利要求6所述的喷雾剂的方法，其特征在于，配制PH5-7.2范围的缓冲溶液， 加入吸收促进剂、助溶剂、抗氧化剂与螯合剂和抑菌剂高速搅拌，采用超声粉碎机至均匀分 散，将药物冻干粉或药物溶液分散在胶束介质中。10. 制备如权利要求1所述的喷雾剂的方法，其特征在于，将药物冻干粉或药物溶液充 分分散与被低级醇溶解的所述合成或天然脂肪油及挥发油中。
【专利摘要】本发明公开了一种重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子喷雾剂，以脂质体、乳剂、胶束、合成或天然脂肪及挥发油为药物载体，每1000重量份的喷雾剂溶液中包括(0.01?5.0)重量份的重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子；同时提供了该喷雾剂的制备方法及其在鼻腔、口腔及舌下黏膜用于提升白细胞的应用。本发明的喷雾剂通过特殊工艺制备的喷雾剂不仅能保护重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子的活性同时达到缓慢释药的效果，且本发明的产品生物效价高，起效快而作用持缓，使用方便，在临床上有着广阔的前景。
【IPC分类】A61K9/12, A61P7/00, A61K9/107, A61K38/19, A61K9/127
【公开号】CN105709213
【申请号】CN201610067519
【发明人】孙西洋, 马俐君, 张扬
【申请人】上海市同仁医院
【公开日】2016年6月29日
【申请日】2016年1月29日