抗巨细胞病毒的药物组合物及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种抗巨细胞病毒的药物组合物及其制备方法，该药物包括以下重量份的组分：虫草0.1～0.5份、灵芝1～2份、黑木耳0.5～1份和罗汉果8～10份。其制备方法为1)将虫草、灵芝、黑木耳先用乙醇提取，其滤渣再用水提取，取滤液备用；2)将罗汉果先用乙醇提取，其滤渣加水提取，取滤液备用；3)将步骤2)的滤液过截留分子量为1000道尔顿的膜过滤装置，收集流出液；4)将步骤1)的滤液过截留分子量为15000道尔顿的膜过滤装置，收集浓缩液；5)将流出液和浓缩液混匀，浓缩，干燥，即得。本发明的药物既可以阻止HCMV进入受体细胞，又可以阻遏HCMV的复制，保全面保障母婴安全。
【专利说明】
抗巨细胞病毒的药物组合物及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明设及一种中药组合物，具体设及一种抗巨细胞病毒的药物组合物及其制备 方法。
【背景技术】
[0002] 人巨细胞病毒化CMV)在人群中感染非常普遍，大多数在临床上呈隐形或潜伏感染 的特点。该病毒是引起先天性及围产期感染的重要病原，妊娠期HCMV活动性感染可W通过 胎盘垂直传播，导致流产、崎形、死胎及新生儿神经系统和脏器损害。然而孕妇感染巨细胞 病毒后的自然转阴率大约在40%左右，为了防止胎儿宫内和经产道感染巨细胞病毒，降低 感染几率，预防早产、流产、胎儿崎形等出生缺陷，需要用药物对该病毒在孕妇体内的繁殖 进行干预和阻断。HCMV围产期感染的预防和治疗时国内外医学研究的热点，虽然西药更昔 洛韦治疗巨细胞病毒感染疗效确切，但是更昔洛韦是在HCMV进入祀细胞后通过竞争性抑制 肥MV DNA多聚酶，并渗入病毒W及宿主细胞的DNA中，从而抑审化NA合成而起作用的，因此更 昔洛韦抗HCMV有效率较低，不仅如此，更昔洛韦有导致哺乳动物胎仔致崎的危险，因此不宜 应用于孕妇。
[0003] 中药在抗病毒方面尤其独特的优势，特别是不良反应相对较低，不易形成耐药性， 目前在病毒性疾病的治疗中占有重要地位。有文献报道运用金叶败毒颗粒治疗育龄期妇女 巨细胞病毒感染取得了良好的临床疗效，前瞻性随机对照临床研究证实该药可使孕妇 HCMV-IgM和HCMV晚期mRNA转阴率从自然状态下的42.64%提高到71.43%，宫内传播率从自 然状态下47.5%下降至20.0%，并使流产、先天崎形、死胎等子代生长发育异常大大减少。
【发明内容】
[0004] 本发明要解决的技术问题是提供一种不仅可W防止HCMV侵入祀细胞，即阻断HCMV 与祀细胞膜粘附、结合或融合，还可W抑制HCMV在侵入祀细胞后的复制与表达，全面阻断巨 细胞病毒在母婴之间传递。
[0005] 本发明提供的技术方案是一种抗巨细胞病毒的药物组合物，包括W下重量份的组 分;虫草0.1~0.5份、灵芝1~2份、黑木耳0.5~1份和罗汉果8~10份。
[0006] 上述组方中各原料的功效如下：
[0007] 虫草又名冬虫夏草，是我国民间惯用的一种名贵滋补药材，其营养成分高于人参， 可入药，也可食用，是上乘的佳肴，具有很高的营养价值。冬虫夏草可W增强机体的免疫力， 滋补肺肾，对肺癌、肝癌等有明显的抑制作用。在临床上对肺虚久咳，气喘，肺结核咯血，盗 汗，肾虚腰膝酸痛，阳瘦遗精，神经衰弱及化疗、放疗后的红细胞下降都有疗效。虫草的活性 成分主要包括虫草素、虫草酸、虫草多糖、酱醇等。
[000引灵芝，学名:Ganode;rma Lucidum Karst,是多孔菌科真菌灵芝的子实体。具有补气 安神、止咳平喘的功效，用于眩晕不眠、屯、惇气短、神经衰弱、虚劳咳喘，延年益寿的功效。
[0009]黑木耳，又名黑菜，桑耳、本菌、树鸡、木蛾、木茸，因形似耳，加之其颜色黑褐色而 得名，黑木耳为木耳科植物，其性平味甘，人胃、大肠经。具有滋补、润燥、养血益胃、活血止 血、润肺、润肠的作用。
[0010] 罗汉果，葫芦科多年生藤本植物的果实，主要产于广西壮族自治区桂林市永福县 龙江乡、龙胜和百寿等镇。罗汉果是桂林名贵的±特产，也是国家首批批准的药食两用材料 之一，其主要功效是能止咳化疲。果实营养价值很高，含丰富的维生素 C(每100克鲜果中含 400毫克~500毫克）W及糖武、果糖、葡萄糖、蛋白质、脂类等。
[0011] 作为优选，各组分的重量份为:虫草0.1~0.2份、灵芝1~1.5份、黑木耳0.5~0.6 份和罗汉果8~10份。
[0012] 本发明还公开了上述可阻断巨细胞病毒在母婴之间传递的药物组合物的制备方 法，包括W下步骤：
[0013] 1)将配方量的虫草、灵芝、黑木耳粉碎，W乙醇为溶媒进行提取，将提取液过滤，取 滤渣备用；
[0014] 2)将步骤1)的滤渣加水提取，将提取液过滤，取滤液备用；
[0015] 3)将罗汉果粉碎，W乙醇为溶媒进行提取，将提取液过滤，取滤渣备用；
[0016] 4)将步骤3)的滤渣加水提取，将提取液过滤，取滤液备用；
[0017] 5)将步骤4)的滤液过截留分子量为1000道尔顿的膜过滤装置，收集流出液；
[0018] 6)将步骤2)的滤液过截留分子量为15000道尔顿的膜过滤装置，收集浓缩液；
[0019] 7)将步骤5)的流出液和步骤6)的浓缩液混匀，浓缩，干燥，即得。
[0020] 步骤1)和步骤3)中，由于虫草、灵芝、黑木耳和罗汉果中含有蛋白质和碳水化合 物，采用乙醇为溶媒，不利于蛋白质和碳水化合物的溶解，可减少杂质成分的溶出。
[0021] 步骤1)和步骤3)中，乙醇的用量为药材粉末重量的8~10倍，回流提取1~3次，每 次1~化。即步骤1)中，乙醇的用量为虫草、灵芝和黑木耳混合粉末重量的8~10倍，回流提 取1~3次，每次1~化。步骤3)中，乙醇的用量为罗汉果粉末重量的8~10倍，回流提取1~3 次，每次1~化。
[0022] 作为优选，乙醇的体积浓度为90~95%。
[0023] 步骤2)和步骤4)中，W水为溶媒，可W提取滤渣中的大分子多糖和小分子糖巧，水 的加入量为滤渣重量的8~10倍，回流提取1~3次，每次1~化。
[0024] 步骤5)中，将罗汉果的多糖和小分子糖巧提取液过截留分子量为1000道尔顿的膜 过滤装置，收集流出液是分子量小于1000的小分子糖巧。罗汉果小分子糖巧可W将阻遏 HCMV糖蛋白与祀细胞膜结合，阻止HCMV进入受体细胞，形成了抗HCMV病毒的第一道防线。
[0025] 步骤6)中，将虫草、灵芝和黑木耳的多糖和小分子糖巧的提取液过截留分子量为 15000道尔顿的膜过滤装置，收集的浓缩液中含有分子量大于15000道尔顿的大分子多糖， 可保护宿主细胞的HFF细胞，明显抑制宿主细胞内早期立即蛋白IE1、IE2及早期蛋白化84的 表达，由于IEUIE2作为转录因子，其表达在HCMV的早期复制中具有重要作用，IEUIE2的表 达缺失，导致HCMV某些基因不表达，故抑制HCMV多种复制启动因子的转录。此外，早期蛋白 化84的表达是形成HCMV病毒复制中屯、体的必经途径，由于浓缩液中混合大分子多糖的作 用，早期蛋白化84表达缺失，导致化44、IE2不参与肥MV复制体，从而导致肥MV在宿主细胞内 不能复制。
[0026] 与现有技术相比，本发明的药物组合物既可W阻止HCMV进入受体细胞，形成了抗 HCMV病毒的第一道防线，又可W全面阻遏HCMV在宿主细胞内的复制，可有效阻遏巨细胞病 毒在母婴之间传递，保证母婴安全。
【具体实施方式】
[0027] W下具体实施例对本发明作进一步阐述，但不作为对本发明的限定。
[0028] 实施例1
[0029] 配方:虫草0.1份、灵芝1份、黑木耳0.5份和罗汉果8份。
[0030] 制备方法：
[0031] 1)将配方量的虫草、灵芝、黑木耳粉碎，W90V%乙醇为溶媒进行提取，乙醇的用量 为混合粉末重量的8倍，回流提取化，将提取液过滤，取滤渣备用；
[0032] 2)将步骤1)的滤渣加水提取，水的加入量为滤渣重量的8倍，回流提取化，将提取 液过滤，取滤液备用；
[0033] 3)将罗汉果粉碎，W90V%乙醇为溶媒进行提取，乙醇的用量为罗汉果粉末重量的 8倍，回流提取化，将提取液过滤，取滤渣备用；
[0034] 4)将步骤3)的滤渣加水提取，水的加入量为滤渣重量的8倍，回流提取化，将提取 液过滤，取滤液备用；
[0035] 5)将步骤4)的滤液过截留分子量为1000道尔顿的膜过滤装置，收集流出液；
[0036] 6)将步骤2)的滤液过截留分子量为15000道尔顿的膜过滤装置，收集浓缩液；
[0037] 7)将步骤5)的流出液和步骤6)的浓缩液混匀，浓缩，干燥，即得。
[003引实施例2
[0039] 配方:虫草0.5份、灵芝2份、黑木耳1份和罗汉果10份。
[0040] 制备方法：
[0041] 1)将配方量的虫草、灵芝、黑木耳粉碎，W95V%乙醇为溶媒进行提取，乙醇的用量 为混合粉末重量的10倍，回流提取3次，每次化，将提取液合并，过滤，取滤渣备用；
[0042] 2)将步骤1)的滤渣加水提取，水的加入量为滤渣重量的10倍，回流提取3次，每次 3h，将提取液合并，过滤，取滤液备用；
[0043] 3)将罗汉果粉碎，W95V%乙醇为溶媒进行提取，乙醇的用量为罗汉果粉末重量的 10倍，回流提取3次，每次化，将提取液合并，过滤，取滤渣备用；
[0044] 4)将步骤3)的滤渣加水提取，水的加入量为滤渣重量的10倍，回流提取3次，每次 3h，将提取液过滤，取滤液备用；
[0045] 5)将步骤4)的滤液过截留分子量为1000道尔顿的膜过滤装置，收集流出液；
[0046] 6)将步骤2)的滤液过截留分子量为15000道尔顿的膜过滤装置，收集浓缩液；
[0047] 7)将步骤5)的流出液和步骤6)的浓缩液混匀，浓缩，干燥，即得。
[004引实施例3
[0049]配方:虫草0.2份、灵芝1.5份、黑木耳0.6份和罗汉果9份。
[(K)加]制备方法：
[0051] 1)将配方量的虫草、灵芝、黑木耳粉碎，W90V%乙醇为溶媒进行提取，乙醇的用量 为混合粉末重量的9倍，回流提取2次，每次化，将提取液合并，过滤，取滤渣备用；
[0052] 2)将步骤1)的滤渣加水提取，水的加入量为滤渣重量的9倍，回流提取2次，每次 2h，将提取液合并，过滤，取滤液备用；
[0053] 3)将罗汉果粉碎，W95V%乙醇为溶媒进行提取，乙醇的用量为罗汉果粉末重量的 9倍，回流提取2次，每次化，将提取液合并，过滤，取滤渣备用；
[0054] 4)将步骤3)的滤渣加水提取，水的加入量为滤渣重量的9倍，回流提取2次，每次 2h，将提取液合并，过滤，取滤液备用；
[0055] 5)将步骤4)的滤液过截留分子量为1000道尔顿的膜过滤装置，收集流出液；
[0056] 6)将步骤2)的滤液过截留分子量为15000道尔顿的膜过滤装置，收集浓缩液；
[0057] 7)将步骤5)的流出液和步骤6)的浓缩液混匀，浓缩，干燥，即得。
[0化引实施例4
[0059] 配方:虫草0.1份、灵芝2份、黑木耳0.5份和罗汉果10份。
[0060] 制备方法：
[0061] 1)将配方量的虫草、灵芝、黑木耳粉碎，W90V%乙醇为溶媒进行提取，乙醇的用量 为混合粉末重量的10倍，回流提取化，将提取液过滤，取滤渣备用；
[0062] 2)将步骤1)的滤渣加水提取，水的加入量为滤渣重量的8倍，回流提取3次，每次 化，将提取液合并，过滤，取滤液备用；
[0063] 3)将罗汉果粉碎，W95V%乙醇为溶媒进行提取，乙醇的用量为罗汉果粉末重量的 8倍，回流提取3次，每次化，将提取液合并，过滤，取滤渣备用；
[0064] 4)将步骤3)的滤渣加水提取，水的加入量为滤渣重量的10倍，回流提取化，将提取 液过滤，取滤液备用；
[0065] 5)将步骤4)的滤液过截留分子量为1000道尔顿的膜过滤装置，收集流出液；
[0066] 6)将步骤2)的滤液过截留分子量为15000道尔顿的膜过滤装置，收集浓缩液；
[0067] 7)将步骤5)的流出液和步骤6)的浓缩液混匀，浓缩，干燥，即得。
[006引实验例
[0069] 选妇产科口诊病例2800例进行筛查，检测血清中人巨细胞病毒HCMV-IgG、HCMV- IgM，发现HCMV-IgM阳性者150例作为研究对象，随机分为5组，每组30人，分为实验组1~4， 对照组。
[0070] 1、病例纳入标准
[0071] 年龄为22-35岁怀孕妇女，均为非素食者，全身一般情况W及营养状况良好。
[0072] 2、排除标准
[0073] 排除屯、、肝、肾、肺等脏器重大疾病患者，烟酒嗜好者和重金属元素接触史者。
[0074] 3、对照组1用金叶败毒颗粒(武汉中联药业集团股份有限公司生产，组成为大青 叶、蒲公英、金银花、鱼腥草，每袋lOg)治疗，每日3次，每次1袋;实验组服用实施例1~4制得 的药物，一日3次，每次用量5mg。两组连续服用14天，停药1周后无菌抽取静脉血4ml，取血清 于-20°C保存，复查肥MV-IgM转阴率。
[0075] 待婴儿出生2周后，无菌抽取婴儿静脉血4ml，取血清于-20°C保存，复查肥MV-IgM， 统计婴儿阳性病例数。
[0076] 4、实验结果
[0077]
[007引
[0079] 注：与对照组相比，冲<0.05;*冲<0.01。
【主权项】
1. 抗巨细胞病毒的药物组合物，其特征在于：包括以下重量份的组分：虫草0.1~0.5 份、灵芝1~2份、黑木耳0.5~1份和罗汉果8~10份。2. 根据权利要求1所述的抗巨细胞病毒的药物组合物，其特征在于：各组分的重量份 为:虫草0.1~0.2份、灵芝1~1.5份、黑木耳0.5~0.6份和罗汉果8~10份。3. 权利要求1或2所述的抗巨细胞病毒的药物组合物的制备方法，其特征在于:包括以 下步骤： 1) 将配方量的虫草、灵芝、黑木耳粉碎，以乙醇为溶媒进行提取，将提取液过滤，取滤渣 备用； 2) 将步骤1)的滤渣加水提取，将提取液过滤，取滤液备用； 3) 将罗汉果粉碎，以乙醇为溶媒进行提取，将提取液过滤，取滤渣备用； 4) 将步骤3)的滤渣加水提取，将提取液过滤，取滤液备用； 5) 将步骤4)的滤液过截留分子量为1000道尔顿的膜过滤装置，收集流出液； 6) 将步骤2)的滤液过截留分子量为15000道尔顿的膜过滤装置，收集浓缩液； 7) 将步骤5)的流出液和步骤6)的浓缩液混匀，浓缩，干燥，即得。4. 根据权利要求3所述的抗巨细胞病毒的药物组合物的制备方法，其特征在于:步骤1) 和步骤3)中，乙醇的用量为药材粉末重量的8~10倍，回流提取1~3次，每次1~3h。5. 根据权利要求4所述的抗巨细胞病毒的药物组合物的制备方法，其特征在于：乙醇的 体积浓度为90~95 %。6. 根据权利要求3所述的抗巨细胞病毒的药物组合物的制备方法，其特征在于:步骤2) 和步骤4)中，水的加入量为滤渣重量的8~10倍，回流提取1~3次，每次1~3h。
【文档编号】A61K36/42GK105998142SQ201610623874
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2016年7月29日
【发明人】苏华
【申请人】桂林淮安天然保健品开发有限公司