专利名称：表没食子儿茶素没食子酸酯的分离制备工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及茶多酚或儿茶素混合物中表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的分离制备方法，属于天然有机化学领域。
表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是茶叶初提药物中间体茶多酚所含酯型儿茶素的一种，由于其优异的抗氧化、抗癌等药效性能，已被国际上认为“是继紫杉醇之后从植物中提取的最为理想的抗癌新药”。
茶多酚或儿茶素混合物中EGCG的分离提取，目前一般采用HPLC法，以ODS为固定相，甲醇、甲酸、N，N-二甲基乙酰胺等有机溶剂为流动相，(戚向阳，谢笔钧、胡慰望，精细化工1994，11(1)40-46)。此法虽可将EGCG与混合物中的其它成份分离，但上述有机溶剂均为有毒试剂，不仅有害工作环境，而且会给产品带来难以消除的毒性残留物，同时，所制备的产品为顺式EGCG，结构不稳定，易氧化和自身缩聚合，生成附加价值低的茶红素、茶褐素，致使产品的纯度和产率都大为降低。
为了保护环境，消除产品中的毒性残留物，提高产品的稳定性，特提出本发明。
本发明避开有毒的有机溶剂，采用全程绿色无污染分离制备工艺，在固液分离时采用膜蒸馏浓缩或渗透汽化技术，以防止产品氧化或缩聚合，同时，在不另增加分离提取工序的情况下，将顺式EGCG异构化处理变成反式EGCG，使其在保持EGCG的抗氧化、抗癌等药效性能的前提下消除其不稳定性。具体工艺过程包括对茶多酚的溶解、过滤、HPLC分离、馏分截取、浓缩、膜蒸馏浓缩、真空干燥，最后得EGCG产品。
在需要EGCG反式结构产品时，可以首先对茶多酚进行异构化处理，再进行溶解分离。
与现有方法相比，本发明具有以下优点采用人体无害有机溶剂乙醇、乙酸等为HPLC流动相，实现EGCG的绿色分离制备，从源头上消除了有害物质对产品的污染，使所得产品完全符合绿色药品、绿色保健品的要求。
采用减压膜蒸馏或渗透汽化技术，在常温下进行浓缩干燥，不仅所得产品EGCG纯度高、不易氧化，而且节省能源；在不增加分离、纯化工序的情况下，将顺式EGCG异构化，生成反式EGCG，使在保持EGCG原药效性能的前提下，产品稳定性大大增强，不缩聚，不氧化，且反式产品的附加价值较原EGCG产品提高近20倍，从而获得更高的经济效益。
实施例茶多酚中EGCG的分离制备茶多酚系多酚类化合物的混合物，其中含有没儿茶素(EC)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)40-50％、表没食子儿茶素(EGC)、表儿茶素双没食子酸酯、没食子儿茶素双没食子酸酯等儿茶素成分。具体操作步骤如下1.儿茶素混合物的异构化取一定量儿茶素混合物样品，磨细，以210～230nm的紫外光惰性气氛照射2.5h进行异构化。取适量异构化产品与同量儿茶素混合物样品用乙醇溶解，测定并比较旋光度，计算异构化产率约为97％。
2.HPLC制备柱分离取适量异构化产品用乙醇超声溶解，过滤得样品溶液，以C18为色谱固定相，15％乙醇--0.2％乙酸水溶液为流动相，进行HPLC分离。截取富含EGCG馏分。
3.膜蒸馏浓缩、真空干燥结晶将累计的富含EGCG馏分采用膜蒸馏技术浓缩结晶得浓缩液，将浓缩液真空干燥(温度为35℃)即可得反式EGCG纯品(如未异构化处理，则所得产品为顺式EGCG)。
权利要求
1.一种表没食子儿茶素没食子酸酯的分离制备工艺，其特征在于本发明包括对茶多酚的溶解、过滤、HPLC分离、馏分截取、浓缩、膜蒸馏浓缩、真空干燥，具体工艺参数如下a.HPLC制备柱分离，对过滤滤液以C18为色谱固定相，15％乙醇--0.2％乙酸水溶液为流动相，进行HPLC分离，截取富含EGCG馏分；b.膜蒸馏浓缩、真空干燥结晶，将累计的富含EGCG馏分采用膜蒸馏技术浓缩结晶得浓缩液，将浓缩液于35℃真空干燥。
2.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于在需要EGCG反式结构产品时，可以首先对茶多酚进行异构化处理，再进行溶解分离，异构化的条件为以210～230nm的紫外光惰性气氛照射儿茶素混合物2.5h，用乙醇溶解。
全文摘要
一种表没食子儿茶素没食子酸酯的分离制备工艺,包括对茶多酚的HPLC分离、馏分截取、膜蒸馏浓缩等。本发明采用减压膜蒸馏或渗透汽化技术,在常温下进行浓缩干燥,不仅所得产品EGCG纯度高、不易氧化,而且节省能源;在不增加分离、纯化工序的情况下,可以将顺式EGCG异构化,生成反式EGCG,在保持EGCG原药效性能的前提下,产品稳定性大大增强,不缩聚,不氧化,且反式产品的附加价值较原EGCG产品提高近20倍,从而获得更高的经济效益。
文档编号C07D311/62GK1370776SQ0110687
公开日2002年9月25日 申请日期2001年2月21日 优先权日2001年2月21日
发明者周春山, 钟世安, 蒋新宇 申请人:中南大学