专利名称：一种生产苦参总黄酮及黄酮盐类的方法
技术领域：
本发明涉及一种生产苦参总黄酮及黄酮盐类的方法。
背景技术：
黄酮类化合物是自然界广泛存在的一类天然产物，其基本母核为2—苯基色原酮类，指两个具有酚羟基的苯环(A、B环)通过中央3个碳原子相互连接而成的一系列化合物，按照中央3碳链的差异，可分为黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮类、二氢黄酮醇类、花色素类、查耳酮类、二氢查耳酮类、异黄酮类、二氢异黄酮类等等，实验证明类黄酮化合物对动物及人体有以下作用①抗氧化、清除自由基作用；②对维生素C有增效作用；③通过保护细胞免疫、免受致癌物的损害、抑制肿瘤细胞增殖及抗自由基作用而具抗癌作用；④能与金属螯合，保护酶和细胞膜的活性；⑤能降低血脂和血胆固醇；⑥异黄酮有类雌激素的作用；⑦保肝作用。蜂胶、银杏、沙棘等黄酮在市场上已获得成功。
苦参富含生物碱类和黄酮类成份，目前的研究主要集中在苦参生物碱方面，而从苦参根分离的黄酮类化合物已有32种，多数为二氢黄酮和二氢黄酮醇类，少数为黄酮类、黄酮醇类、异黄酮类、查耳酮类及多环系黄酮类，包括苦参醇A、B、D、E、F、J等等。苦参黄酮A环上有异戊烯取代基存在，并且大多数黄酮在A环的C8位上取代基以lavandulyl的分枝异戊烯基侧链形式存在，黄酮的异戊烯基化增加了黄酮化合物的亲脂性，使其在生物体内更容易透过细胞膜到达作用目标，因而异戊烯基黄酮具有较强的抗微生物活性、抗炎活性、抗癌活性以及酪氨酸酶抑制活性(天然产物研究与开发，2004，16(2)172)。苦参黄酮类提取物对Alloxan糖尿病模型大鼠有明显降糖作用，而生物碱无降糖作用(海峡药学杂志，1998，10(1)9)，有关苦参生物碱提取分离的报导很多，高红宁等(广东药学院学报，2003，19(4)334)通过微滤、大孔树脂、醇沉精制氧化苦参碱与苦参总黄酮，但未实现生物碱与黄酮的分离；专利(200410030937.X)提供了一种苦参总黄酮的提取方法，但是，该方法中没有涉及苦参生物碱类与黄酮类有效成分的分离的内容和步骤，所得到的产品应该是苦参生物碱和苦参黄酮类的混合物产品。有关苦参异戊烯基黄酮类的提取分离鲜见报导。
黄酮盐类产品具有和黄酮的生物活性，化学性质相对稳定，可以和碱性药物配伍，易于保存等优点，有关其产品或生产工艺，尚未见报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种生产苦参总黄酮及黄酮盐类的方法。
本发明是由于苦参生物碱在植物体内和各种有机酸结合形成盐，用酸水将生物碱完全提取出来，而黄酮类活性物质是不溶于酸水，保留在植物体内。苦参黄酮类物质易溶于醇、酯、酮以及碱水等溶剂，可以用醇、酯、酮以及碱水等溶剂进行提取得到含量较高的苦参总黄酮及黄酮盐类产品。
本发明的具体操作步骤如下(1)、以粒度为10～120目的苦参为原料与酸水以1∶5～10重量比例混合，在10～40℃，完全提取苦参生物碱，过滤，滤液用来提纯制备苦参生物碱，滤渣抽干；(2)、将(1)所得滤渣与溶剂按1g∶4～12ml的比例混合，提取，过滤，滤液经过处理得到80％的苦参总黄酮或黄酮盐类产品。
如(1)所述酸水可为任何酸性水溶液，优选盐酸、硫酸、醋酸或硝酸水溶液，酸水的pH值以2～6为佳。
如(1)所述酸水提取生物碱可以通过浸泡、渗漉、超声提取等任何可将生物碱完全提取出来的方法。
如(2)所述溶剂为任何可以溶解黄酮溶剂或者溶液，优选低级醇、低级酯、低级酮、醚类以及上述任何溶剂的混合溶液或者碱的水溶液溶液。优选甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙酸甲酯、丙酮、乙醚以及上述任何溶剂的混合溶液。碱的水溶液优选氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸氢纳等的任何浓度水溶液。碱的水溶液优选pH值为9～14的溶液，优选pH值为9～11的溶液。
如(2)所述滤液经过的处理有二种方法方法一如果提取苦参黄酮用的溶剂为碱的水溶液，则可以将提取液加酸至pH值为中性，然后固液分离，固体干燥，即得苦参总黄酮固体粉末；所述滤液经过的处理也可以是直接将滤液干燥得到苦参总黄酮的盐作为最终产品。
所述的酸可以是任何溶于水的有机酸或无机酸，优选盐酸、硫酸、硝酸或醋酸等。
所述的固液分离可以是任何一种将固液两相分离的技术，优选过滤或离心沉淀。
所述的干燥优选喷雾干燥、减压蒸馏、真空冷冻干燥、闪蒸或自然蒸发晾干。
方法二如果提取液为除碱的水溶液以外的任何上述溶液或溶剂，可以将溶剂回收，然后干燥得到苦参总黄酮固体粉末。
所述的干燥喷雾干燥、真空冷冻干燥、闪蒸或自然蒸发。
本发明提取制备的苦参总黄酮可以制作成各种形式的产品，如粉末、各种苦参黄酮溶液以及苦参总黄酮的盐类产品。
本发明的优点如下
1、苦参黄酮类成分大多数A环的C8位上都有以lavandulyl的分枝异戊烯基侧链形式存在的取代基，这是苦参黄酮类所独有的，是区别于提取黄酮类的重要特征。
2、所述lavandulyl分枝异戊烯基侧链增加黄酮的亲脂性，使其在生物体内更容易透过细胞膜到达作用目标，因而苦参总黄酮较其他黄酮具有更强的抗微生物活性、抗炎活性、抗癌活性以及酪氨酸酶抑制活性。
3、首次实现分别提取苦参生物碱和苦参黄酮，首次得到不含苦参生物碱的苦参总黄酮类及其盐类产品。
4、采用提取苦参碱后的苦参残渣为原料生产苦参总黄酮及其盐类产品，原料成本低，工艺简单，适合工业生产。
5、得到的苦参总黄酮及其盐类产品含量较高，总黄酮产品是黄色固体粉末，总黄酮盐类产品为红棕色固体结晶。
具体实施例方式
实施例1〔1〕10～40目的苦参粉末100g加入pH＝3的盐酸水溶液600ml，10℃超声提取30min，静置，过滤，滤渣用上述盐酸溶液洗涤至无生物碱；过滤，滤液经过处理，可获得各种苦参生物碱产品。
〔2〕将(1)中过滤得到的滤饼加入500ml乙醇超声常温提取，30min，过滤，滤饼重复提取、过滤至提取液无黄色或者色泽很浅；合并提取液，减压旋转蒸发，得到黄色粉末产品，经检测含总黄酮80％(UV)。
实施例2〔1〕40～80目的苦参粉末100g加入pH＝5的醋酸水溶液500ml，20℃浸泡6小时，静置，过滤，滤渣用上述盐酸溶液洗涤至无生物碱；过滤，滤液经过处理，可获得各种苦参生物碱产品。
〔2〕将(1)中过滤得到的滤饼加入400ml甲醇浸泡6小时，过滤，滤饼重复提取、过滤至提取液无黄色或者色泽很浅；合并提取液，自然蒸发晾干，得到黄色粉末产品，经检测含总黄酮82％(UV)。
实施例3〔1〕80～120目的苦参粉末100g，用pH＝4的硫酸水溶液30℃渗漉提取至提取液无生物碱；过滤，滤液经过处理，可获得各种苦参生物碱产品。
〔2〕将(1)中过滤得到的滤饼加入500ml乙酸乙酯回流2小时，过滤，滤饼重复提取、过滤至提取液无黄色或者色泽很浅；合并提取液，真空冷冻干燥，得到黄色粉末产品，经检测含总黄酮89％(UV)。
实施例4〔1〕40～80目的苦参粉末100g加入pH＝6的硝酸水溶液1000ml，40℃超声提取至提取液无生物碱；过滤，滤液经过处理，可获得各种苦参生物碱产品。
〔2〕将(1)中过滤得到的滤饼加入500ml乙酸乙酯和乙醇的混合液(1∶1，V/V)浸泡6小时，过滤，滤饼重复提取、过滤至提取液无黄色或者色泽很浅；合并提取液，闪蒸，得到黄色粉末产品，经检测含总黄酮88％(UV)。
实施例5〔1〕40～80目的苦参粉末100g加入pH＝2的盐酸水溶液400ml，30℃超声提取至提取液无生物碱；过滤，滤液经过处理，可获得各种苦参生物碱产品。
〔2〕将(1)中过滤得到的滤饼加入500ml丙酮和乙醇的混合液(1∶1，V/V)浸泡6小时，过滤，滤饼重复提取、过滤至提取液无黄色或者色泽很浅；合并提取液，减压蒸溜，得到黄色粉末产品，经检测含总黄酮85％(UV)。
实施例6〔1〕40～80目的苦参粉末100g加入pH＝3的盐酸水溶液400ml，30℃超声提取至提取液无生物碱；过滤，滤液经过处理，可获得各种苦参生物碱产品。
〔2〕将(1)中过滤得到的滤饼加入500ml丙酮和乙醚的混合液(1∶1，V/V)回流2小时，过滤，滤饼重复提取、过滤至提取液无黄色或者色泽很浅；合并提取液，自然蒸发晾干，得到黄色粉末产品，经检测含总黄酮86％。
实施例7〔1〕40～80目的苦参粉末100g加入pH＝3的盐酸水溶液400ml，30℃超声提取至提取液无生物碱；过滤，滤液经过处理，可获得各种苦参生物碱产品。
〔2〕将(1)中过滤得到的滤饼加入500ml乙酸甲酯和甲醇的混合液(3∶1，V/V)超声提取，过滤，滤饼重复提取、过滤至提取液无黄色或者色泽很浅；合并提取液，真空冷冻干燥，得到黄色粉末产品，经检测含总黄酮84％。
实施例8〔1〕40～80目的苦参粉末100g加入pH＝3的醋酸水溶液400ml，30℃超声提取至提取液无生物碱；过滤，滤液经过处理，可获得各种苦参生物碱产品。
〔2〕将(1)中过滤得到的滤饼加入氢氧化钠水溶液(pH＝9)超声提取，过滤，滤饼重复提取、过滤至提取液无色或者色泽很浅；合并提取液，喷雾干燥，得到红棕色粉末产品。
实施例9〔1〕40～80目的苦参粉末100g加入pH＝3的盐酸水溶液400ml，30℃超声提取至提取液无生物碱；过滤，滤液经过处理，可获得各种苦参生物碱产品。
〔2〕将(1)中过滤得到的滤饼用碳酸氢纳水溶液(pH＝10)渗漉提取液无色或者色泽很浅；合并提取液，自然蒸发晾干，得到红棕色粉末产品。
实施例10〔1〕40～80目的苦参粉末100g加入pH＝3的盐酸水溶液400ml，30℃超声提取至提取液无生物碱；过滤，滤液经过处理，可获得各种苦参生物碱产品。
〔2〕将(1)中过滤得到的滤饼用碳酸氢纳水溶液(pH＝10)渗漉提取液无色或者色泽很浅；合并提取液，加入盐酸中和至中性，过滤，滤饼自然蒸发晾干，得到黄色色粉末产品，经检测含总黄酮81％。
实施例11〔1〕40～80目的苦参粉末100g加入pH＝3的盐酸水溶液400ml，30℃超声提取至提取液无生物碱；过滤，滤液经过处理，可获得各种苦参生物碱产品。
〔2〕将(1)中过滤得到的滤饼用氢氧化钾水溶液(pH＝12)渗漉提取液无色或者色泽很浅；合并提取液，加入醋酸中和至中性，过滤，滤饼真空冷冻干燥，得到黄色色粉末产品，经检测含总黄酮82％。
实施例12〔1〕40～80目的苦参粉末100g加入pH＝3的盐酸水溶液400ml，30℃超声提取至提取液无生物碱；过滤，滤液经过处理，可获得各种苦参生物碱产品。
〔2〕将(1)中过滤得到的滤饼用碳酸钠水溶液(pH＝10)渗漉提取液无色或者色泽很浅；合并提取液，加入醋酸中和至中性，过滤，滤饼真空冷冻干燥，得到黄色色粉末产品，经检测含总黄酮80％。
权利要求
1.一种生产苦参总黄酮及黄酮盐类的方法，其特征在于包括如下步骤(1)以粒度为10～120目的苦参为原料与酸水以1∶5～10重量比例混合，在10～40℃，完全提取苦参生物碱，过滤，滤液用来提纯制备苦参生物碱，滤渣抽干；(2)将(1)所得滤渣与溶剂按1g∶4～12ml的比例混合，提取，过滤，滤液经过处理得到苦参总黄酮或黄酮盐类产品。
2.如权利要求1所述的一种生产苦参总黄酮及黄酮盐类的方法，其特征在于如(1)所述酸水为酸性水溶液。
3.如权利要求2所述的一种生产苦参总黄酮及黄酮盐类的方法，其特征在于所述的酸性水溶液为盐酸、硫酸、醋酸或硝酸水溶液，酸水的pH值为2～6。
4.如权利要求1所述的一种生产苦参总黄酮及黄酮盐类的方法，其特征在于如(2)所述溶剂为低级醇、低级酯、低级酮、醚类以及其混合溶液或碱的水溶液。
5.如权利要求4所述的一种生产苦参总黄酮及黄酮盐类的方法，其特征在于所述的溶剂为甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙酸甲酯、丙酮、乙醚或者其混合溶液。
6.如权利要求4所述的一种生产苦参总黄酮及黄酮盐类的方法，其特征在于所述的碱的水溶液为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠或碳酸氢纳的水溶液，pH值为9～14。
7.如权利要求4所述的一种生产苦参总黄酮及黄酮盐类的方法，其特征在于所述的pH值为9～11。
8.如权利要求1所述的一种生产苦参总黄酮及黄酮盐类的方法，其特征在于如(2)所述滤液经过的处理为如果提取苦参黄酮用的溶剂为碱的水溶液，将提取液加酸至pH值为中性，然后固液分离，固体干燥，即得苦参总黄酮固体粉末。
9.如权利要求8所述的一种生产苦参总黄酮及黄酮盐类的方法，其特征在于所述的酸是任何溶于水的有机酸或无机酸。
10.如权利要求9所述的一种生产苦参总黄酮及黄酮盐类的方法，其特征在于所述的酸为盐酸、硫酸、硝酸或醋酸。
11.如权利要求8所述的一种生产苦参总黄酮及黄酮盐类的方法，其特征在于所述的固液分离是过滤或离心沉淀。
12.如权利要求8所述的一种生产苦参总黄酮及黄酮盐类的方法，其特征在于所述的干燥优选喷雾干燥、减压蒸馏、真空冷冻干燥、闪蒸或自然蒸发晾干。
13.如权利要求1所述的一种生产苦参总黄酮及黄酮盐类的方法，其特征在于如(2)所述滤液经过的处理为如果提取苦参黄酮用的溶剂为碱的水溶液，直接将滤液干燥得到苦参总黄酮的盐。
14.如权利要求1所述的一种生产苦参总黄酮及黄酮盐类的方法，其特征在于所述的如(2)所述滤液经过的处理为如果提取液为低级醇、低级酯、低级酮或醚类时，将溶剂回收，然后干燥得到苦参总黄酮固体粉末。
全文摘要
一种生产苦参总黄酮及黄酮盐类的方法是以粒度为10～120目的苦参为原料与酸水以1∶5～10重量比例混合，在10～40℃，完全提取苦参生物碱，过滤，滤液用来提纯制备苦参生物碱，滤渣抽干；所得滤渣与溶剂按1g∶4～12ml的比例混合，提取，过滤，滤液经过处理得到苦参总黄酮或黄酮盐类产品。本发明具有实现分别提取苦参生物碱和苦参黄酮，原料成本低，工艺简单，适合工业生产的优点。
文档编号C07D311/62GK1793136SQ200510048249
公开日2006年6月28日 申请日期2005年12月27日 优先权日2005年12月27日
发明者侯相林, 邓天昇, 刘鹏飞 申请人:中国科学院山西煤炭化学研究所