(3s)-n-(l-氨基酰)-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸、其制备方法及应用的制作方法

专利名称：：(3s)-n-(l-氨基酰)-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸、其制备方法及应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及杂环化合物，尤其涉及(3S)-N-(L-氨基酰)-l，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸、其制备方法及作为抗血栓剂的应用，属于生物医药领域。
背景技术：
：血管栓塞性疾病对心脑血管疾病的高死亡率负最重要的责任。血栓形成是血管栓塞性疾病发病的最重要的病因。寻找抗血栓药物是新药研究的热点之一。本发明人注意到，1，2，3，4-四氢-P-咔啉-3-S-羧酸是中药薤白中的一种成分，具有抗血小板聚集活性(姚新生等，中国药物化学杂志，1995，5，134)。针对1，2，3，4-四氢-P-咔啉-3-S-羧酸在极性溶剂和非极性溶剂中溶解度都不好带来的低生物利用度，本发明人通过在(3S)-l,2,3,4-四氢-P-咔啉-3-羧酸中引入L-氨基酸，获得了一类抗血栓剂，所获得的上述抗血栓剂虽然具有良好的抗血栓活性，但是由于(3S)-l，2,3，4-四氢-P-咔啉-3-羧酸结构复杂的缘故，以此为原料所制备的抗血栓剂也同样存在着结构复杂，由此带来的问题是制备工艺复杂，相应的必然会提高生产成本。如果从(3S)-l，2,3,4-四氢-l3-咔啉-3-羧酸结构中去除吡咯环，一是由此得到的(3S)-l，2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸是否还具有抗血栓活性，显然是无法预测的，二是(3S)-l，2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸无论是在极性溶剂还是在非极性溶剂中，其溶解度都不好，以至生物利用度不高。
发明内容本发明首先所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一类新的具有抗血栓活性的化合物，该化合物的结构相对更为简单，在极性溶剂和非极性溶剂中均具有良好的溶解度。本发明首先所要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的4<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>通式I其中，AA选自L-丙氨酰基、甘氨酰基、L-缬氨酰基、L-苯丙氨酰基、L-亮氨酰基、L-异亮氨酰基、L-色氨酰基、L-丝氨酰基、L-苏氨酰基、L-酪氨酰基、L-脯氨酰基、L-蛋氨酰基、L-天冬酰胺酰基、L-谷氨酰胺酰基、L-组氨酰基、L-赖氨酰基、L-天冬氨酰基、L-谷氨酰基或L-精氨酰基。本发明还提供了通式I化合物的两种中间体化合物(通式II-III):其中，AA选自L-丙氨酰基、甘氨酰基、L-缬氨酰基、L-苯丙氨酰基、L-亮氨酰基、L-异亮氨酰基、L-色氨酰基、L-侧链0BZ1保护丝氨酰基、L-苏氨酰基、L-侧链OBzl保护酪氨酰基、L-脯氨酰基、L-蛋氨酰基、L-天冬酰胺酰基、L-谷氨酰胺酰基、L-组氨酰基、L-侧链Boc保护赖氨酰基、L-侧链Bzl保护天冬氨酰基、L-侧链Bzl保护谷氨酰基或L-侧链N02保护精氨酰基。通式III<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中，AA选自L-丙氨酰基、甘氨酰基、L-缬氨酰基、L-苯丙氨酰基、L-亮氨酰基、L-异亮氨酰基、L-色氨酰基、L-侧链OBzl保护丝氨酰基、L-苏氨酰基、L-酪氨酰基、L-脯氨酰基、L-蛋氨酰基、L-天冬酰胺酰基、L-谷氨酰胺酰基、L-组氨酰基、L-侧链Boc保护赖氨酰基、L-天冬氨酰基、L-谷氨酰基或L-侧链N02保护精氨酰基。本发明采用L-氨基酸修饰(3S)-l，2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸制备得到一系列新的(3S)-N-(L-氨基酰)-l,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸[通式(I)化合物]，本发明通式(I)化合物不仅具有较好的抗血栓活性，相对于用L-氨基酸修饰(3S)-l,2,3，4-四氢-P-咔啉-3-羧酸中所获得的一类抗血栓剂，其结构更为简单。此外，本发明通式(I)化合物不论是在极性溶剂抑或非极性溶剂中均有良好的溶解度，生物利用度高。本发明所要解决的另一个技术问题是提供一种制备通式(I)化合物的方法。本发明所要解决的另一个技术问题是通过以下技术方案来实现的将1^-氨基酸按照本领域常规方法引入到(38)-1^-8001，2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸的2位N上，水解并脱去保护基后，即得。优选的，一种制备通式(I)化合物的方法，包括1.按照现有技术方法制备(3S)-1,2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸；2.在氯化亚砜和甲醇存在下将(3S)-l,2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸转化为(3S)-l,2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯；3.在二环己基羰二亚胺(DCC)和N-甲基吗啉存在下将(3S)-l，2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯与Boc-L-氨基酸偶联制备(3S)-N-(Boc-L-氨基酰)-l，2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯；4.在碱水溶液中将(3S)-N-(Boc-L-氨基酰)-l，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯水解制备(3S)-N-(Boc-L-氨基酰)-l，2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸；5.在氯化氢-乙酸乙酯溶液中将(3S)-N-(Boc-L-氨基酰)-l,2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸脱Boc制备(3S)-N-(L-氨基酰)-l，2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸；其中，步骤1中(3S)-1，2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸的制备方法可参考以下方法(在浓盐酸存在下苯丙氨酸与甲醛进行Pictet-Spengler縮合制备(38)-1，2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸。步骤4中所述的碱可以是NaOH、KOH等，优选为NaOH，更优选为浓度为2N的NaOH。步骤5中所述的氯化氢-乙酸乙酯溶液优选为浓度为6N的氯化氢-乙酸乙酯溶液。动物抗血栓模型试验证实，本发明通式(I)化合物具有良好的溶血栓活性，可作为抗血栓剂应用。为了进一步阐述本发明，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本发明进行具体描述，不应当理解为对本发明的限制。本发明中所出现的术语或縮略语的说明THF四氢呋喃DCC二环己基酰亚胺DCU二环己基脲OBzl苄氧基Boc叔丁氧羰基HOBtN-羟基苯并三唑TLC薄层层析DMF二甲基甲酰胺NMMN-甲基吗啉具体实施例方式3a-s2a-sla-s本发明通式(I)化合物Ga-s)的合成路线.1)甲醛和浓盐酸；II)氯化亚砜和甲醇；HI)Boc-AA-OH、DCC和NMM;IV)2NNaOH水溶液；V)6N氯化氢-乙酸乙酯溶液.其中，在3a-s中，AA选自L-丙氨酰基、甘氨酰基、L-缬氨酰基、L-苯丙氨酰基、L-亮氨酰基、L-异亮氨酰基、L-色氨酰基、L-丝氨酰基、L-苏氨酰基、L-酪氨酰基、L-脯氨酰基、L-蛋氨酰基、L-天冬酰胺酰基、L-谷氨酰胺酰基、L-组氨酰基、L-赖氨酰基、L-天冬氨酰基、L-谷氨酰基或L-精氨酰基；在la-s中，AA选自L-丙氨酰基、甘氨酰基、L-缬氨酰基、L-苯丙氨酰基、L-亮氨酰基、L-异亮氨酰基、L-色氨酰基、L-侧链OBZ1保护丝氨酰基、L-苏氨酰基、L-侧链()Bzl保护酪氨酰基、L-脯氨酰基、L-蛋氨酰基、L-天冬酰胺酰基、L-谷氨酰胺酰基、L-组氨酰基、L-侧链Boc保护赖氨酰基、L-侧链Bzl保护天冬氨酰基、L-侧链Bzl保护谷氨酰基或L-侧链N02保护精氨酰基；在2a-s中，AA选自L-丙氨酰基、甘氨酰基、L-缬氨酰基、L-苯丙氨酰基、L-亮氨酰基、L-异亮氨酰基、L-色氨酰基、L-侧链OBzl保护丝氨酰基、L-苏氨酰基、L-酪氨酰基、L-脯氨酰基、L-蛋氨酰基、L-天冬酰胺酰基、L-谷氨酰胺酰基、L-组氨酰基、L-侧链Boc保护赖氨酰基、L-天冬氨酰基、L-谷氨酰基或L-侧链N02保护精氨酰基。为了进一步阐述本发明，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本发明进行具体描述，不应当理解为对本发明的限制。实施例1制备(3S)-l，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸往5.0g(0.03mmol)L-苯丙氨酸中先逐滴加入27ml甲醛，再逐滴加入45ml浓盐酸。得到的混悬液油浴加热至80-90°C搅拌10h，TLC(CC13:CH3OH=10:1)显示苯丙氨酸消失。反应混合物冷却至室温，过滤。滤餅先用水洗(30mlX3)，再用丙酮洗(30mlX3)，得到4.5g(83.9%)标题化合物，为无色固体。Mp.302-303;ESI-MS(m/e)178[M+H]+;'HNMR(CDClrd)S/ppm=11.0(s,lH)，7.0(m，4H)，3.80(m,3H)，3.03(d.lH)，2.78(d，lH)，2.0(s，lH);13C-NMR(CDCl3-d)S/ppm=174.9,136.2,134.2,127.2，126.0，57.6，47.4,29.4.实施例2制备(3S)-l，2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯冰盐浴下往20ml甲醇中逐滴加入5.2ml氯化亚砜，滴毕后搅拌10min。之后，加入4,27g(20mmo1)(3S)-l,2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸。反应混合物室温搅拌100h，TLC(CC13:CH30H=5:1)显示(3S)-l,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸消失。反应混合物减压浓縮。残留物用20ml甲醇溶解，再减压浓縮。该操作反复3次。残留物用20ml乙醚溶解，再减压浓縮。该操作反复3次。残留物用甲醇/乙醚结晶，得到4.2g(92%)标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/e)192[M+H]+;'HNMR(CDClrd)S/ppn^7.0(m,4H)，3.80(m，3H)，3.67(s，3H)，3.13(d.lH)，2.78(d，lH)，2.0(s,lH);13C-NMR(CDClrd)S/ppm=174.9，136.2，134.2，127.2，126.0，57.6,47.4,29.4。实施例3制备(3S)-N-(Boc-L-丙氨酰)-l,2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯(la)将0.832g(4.4mmol)Boc-Ala-OH溶于10ml四氢呋喃(THF)。冰浴下往得到的溶液中加入0.594g(4.4mmol)N-羟基苯并三唑(HOBt)。搅拌。将0.91g(4.0mmol)(3S)-l,2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯先与5mlTHF混合，再用三乙胺调节pH8-9，搅拌30min后先与刚刚得到的Boc-Ala-OH溶液在冰浴下混合，再加入1.071g(5.2mmol)二环己基羰二亚胺(DCC)。反应混合物冰浴搅拌2h，室温搅拌12h。TLC(乙酸乙酯石油醚=1:2)显示(38)-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯消失。滤除二环己基脲(DCU)，滤液减亚浓縮至干。残留物用50ml乙酸乙酯溶解，乙酸乙酯溶液用饱和NaHC03水溶液洗三次，用5。/。KHS04水溶液洗三次，用饱和NaCl水溶液洗三次。乙酸乙酯溶液用无水Na2S04干燥过夜。滤除Na2S04，滤液减亚浓縮至干，得到l.Og(70%)标题化合物，为糖浆状。ESI-MS(m/e)363[M+H]+;!HNMR(CDClrd)S/ppm=8.0(d，lH)，7.25(m，4H)，4.83(d,lH)，4.68(m，lH)，4.55(d，lH)，4.49(d，lH)，3.63(s，3H)，3.30(d,IH)，3.10(d，1H)，1.46(d，3H)，1.41(s，9H);13C-NMR(CDClrd)5/ppm=171.6，172.9,155.1,132.1，131.7，127.2，80.8,55.8，52.2，46.9，44,6，28.4，27.0，19.0。实施例4制备(3S)-N-(Boc-甘氨酰)-l,2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯(lb)按照实施例3的操作，从0.77g(4.4mmol)Boc-Gly-OH制得1.20g(72%)标题化合物，为糖桨状。ESI-MS(m/e)349[M+H]+;'HNMR(CDCl3-d)S/ppm=8.0(d,lH)，7.22(m，4H)，4.80(d,lH)，4.51(m,2H)，3.85(d,2H)，3.63(s，3H)，3.25(m,2H)，1.41(s，9H);13C-NMR(CDClrd)5/ppm=171.6，168.6，155.8，131.9，130.9,128.4,127.2，126.6,80.8，55.8，52.0,44.6，43.0,28.4,27.0。实施例5制备(3S)-N-(Boc-L-缬氨酰)-l,2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯(lc)按照实施例3的操作，从0.7161g(3.3mmo1)Boc-Val-OH和0.6825g(3.0mmo1)(3S)-l，2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得0.988g(85%)标题化合物，为糖浆状。ESI-MS(m/e)391[M+H]+;'HNMR(CDCl3-d)S/ppm-8.0(d,lH)，7.22(m,4H)，4.80(d,lH),4.61(d，lH),4.51(m，2H)，4.24(m,lH),3.63(s,3H),3.25(m,2H),2.0(s，lH),1.41(s,9H)，1.21(d,3H);13C-NMR(CDClrd)S/ppm=171.6,跳6，155.8，135.9,133.9，128.4,127.2,126.6，80.8,67.8，58.4,55.8，52.0,44.6,28.4，27.0,18.9。实施例6制备(3S)-N-(Boc-L-苯丙氨酰)-l,2,3，4-四氢异喹啉-3-S-羧酸甲斷ld)按照实施例3的操作，从0.8745g(3.3mmo1)Boc-Phe-OH和0.6825g(3.0mmol)(3S)-l,2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得1.10g(87%)标题化合物，为糖浆状。ESI墨MS(m/e)439[M+H]+;'HNMR(CDCl3-d)5/ppm:8.0(d，lH)，7.22(m，9H)，4.92(d,lH)，4.80(d,lH)，4.51(d，lH)，4.41(d,lH)，3.63(s，3H)，3.10(m,4H)，1,41(s,9H);13C-NMR(CDClrd)S/ppm=171.6,170.1,155.8,139.5,135.9，134.2,128.4，127.2,126.6,79.5,55.8，52.0,44.6,37.8,28.4，27.0。实施例7制备(3S)-N-(Boc-L-亮氨酰)-l,2，3，4-四氢异喹啉-3-S-羧酸甲酯(le)按照实施例3的操作，从0.7623g(3.3mmol)Boc-Leu-OH和0.6825g(3.0mmol)(3S)-l，2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得1.08g(89%)标题化合物，为糖浆状。ESI-MS(m/e)405[M+H]+;1HNMR(CDClrd)S/ppm=8.0(d，lH)，7.22(m，4H)，4.80(d，lH)，4.51(m,3H)，3.63(s,3H)，3.10(m，2H)，1.78(m，3H)，1.41(s,9H)，1.01(d，6H);13C-NMR(CDCl3-d)5/ppm=171.6，170.1，155.8，135.9，134.2，128.4,127.2，126.6，79.5,55.8,52.0，50.7，44.6,41.6,28.4，27.0，22.3。实施例8制备(3S)-N-(Boc-L-异亮氨酰)-l,2,3,4-四氢异喹啉-3-S-羧酸甲酯(lf)的制备按照实施例3的操作，从0.7623g(3.3mmol)Boc-Ile-OH和0.6825g(3.0mmol)(3S)-l，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得1.08(89%)标题化合物，为糖浆状。ESI-MS(m/e)405[M+H]+;1HNMR(CDCl3-d)5/ppm=8.0(d,lH)，7.22(m，4H)，楊(d，lH)，4.51(m,3H)，3.63(s，3H)，3.10(m,2H)，2.5(m，lH)，1.41(s,9H)，1.29(m，2H)，1.06(d，3H)，0.96(d，3H);13C-NMR(CDCl3-d)S/ppm=171.6,170.1,155.8，135.9，134.2,128.4,127.2,126.6，79.5，55.8,52.0,44.6,28.4，27.0,24.3，14.6,10.9。实施例9制备(3S)-N-(Boc-L-色氨酰)-l，2，3,4-四氢异喹啉-3-S-羧酸甲酯(lg)按照实施例3的操作，从1.003g(3.3mmol)Boc-Trp-OH和0.6825g(3.0mmol)(3S)-l，2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得1.210g(84%)标题化合物，为糖浆状。ESI-MS(m/e)478[M+H]+;!11>^11(^0(:13曙(1)3尔口111=10.1(5,111)，8.0(d，lH)，7.18(d，4H)，7.01(m,4H)，6.80(s,lH)，4.90(d,lH)，4.81(d，lH)，4.51(m,2H)，3.63(s，3H)，3.10(m，4H)，1.41(s，9H);13C-NMR(CDCl3-d)S/ppm=171.6，170.1,155.8，135.9，134.2,128.4,127.2,126.6，122.9，119.0,110.9,79.5,55,8，52.0，31.5，44.6，28.4，27.0。实施例10制备(3S)-N-(Boc-L-侧链0BZ1保护丝氨酰)-l，2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯(lh)按照实施例3的操作，从1.298g(4.4mmo1)Boc-Ser(Bzl)-OH和0.91g(4.0mmol)(3S)-l，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得1.5g(80%)标题化合物，为糖浆状。ESI陽MS(m/e)469[M+H]+;'HNMR(CDCl3-d)S/ppn^8.0(d，lH)，7.19(d，5H)，7.01(m，4H)，4.83(m,2H)，4.63(s，2H)，4.51(m，2H)，3.86(m,2H)，3.63(s，3H)，3.29(d,lH)，3.05(d，lH)，1.41(s,9H);13C-NMR(CDCl3-d)S/ppm=171.6,170.1,155.8，137.2，135.9,134.2,128.4，127.2,125.6，79.5，74.3,70.2，55.8,52.0，50.7,44.6，28.4，27.0。实施例11制备(3S)-N-(Boc-L-苏氨酰)-l,2,3,4-四氢异喹啉-3-S-羧酸甲酯(li)按照实施例3的操作，从0.964g(4.4mmo1)Boc-Thr-OH和0.91g(4.0mmol)(3S)-l，2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得1.44g(89%)标题化合物，为糖浆状。ESI-MS(m/e)393[M+l]+;'HNMR(CDCl3-d)S/ppm-8.0(d,lH)，7.02(m，4H)，4.80(t，lH)，4.61(d,lH)，4.46(m,2H)，4.24(m，lH)，3.63(s，3H)，3.29(d，lH)，3.05(d，lH)，2.0(s,lH)，1.48(s，9H)，1.21(d，3H);13C-NMR(CDCl3-d)S/ppm=171.6,170.1,155.8,135.9,134.2,128.4,127.2,126.6，79.5,67.8，58.8,55.0，51.7,44.6,28.4，27.0,10.9。实施例12制备(3S)-N-(Boc-L-侧链OBzl保护酪氨酰)-l，2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯(lj)按照实施例3的操作，从L76g(4.0mmol)Boc-Tyr(OBZl)-OH和0.91g(4.0mmol)(3S)-l,2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得1.80g(82%)标题化合物，为糖浆状。ESI-MS(m/e)545[M+H]+;1HNMR(CDClrd)S/ppm=8.0(d,lH)，7.19(s，5H)，7.02(m,4H)，6.72(d,2H)，5.20(s,2H)，4.92(m,lH)，楊(t，lH)，4.51(d，lH)，4.41(d，lH)，3.63(d,3H)，3.29(d，lH)，3.05(d，lH)，2.92(m，2H)，1.41(s,9H);13C-NMR(CDCl3-d)S/ppm=171.6,170.1,157.9，155.8，141.2，136.5,134.9,131.2，129.0，128.4，127.2，126.6,114.2，79.5，70.9，55.8，52.9,52.0,44.6,37.8,28.4,27.0。实施例13制备(3S)-N-(Boc-L-脯氨酰)-l,2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯(lk)按照实施例3的操作，从0.473g(2.2mmol)Boc-Pro-OH和0.455g(2.0mmol)(3S)-l，2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得0.715g(92%)标题化合物，为糖浆状。ESI-MS(m/e)389[M+H]+;'HNMR(CDClrd)S/ppn^7.02(m,4H)，4.80(t，lH)，4.51(m,2H)，4.29(t，lH)，3.63(s,3H)，3.20(m,4H)，1.71(m，2H)，1.60(m,2H)，1.41(s，9H);13C-NMR(CDCl3-d)S/ppm=171.6,170.1,155.8，135.9,134.2，128.4，127.2,126.6，79.5，55.8,52.0，47.1，44.6,29.7,28.4，27.0，22.1。实施例14制备(3S)-N-(Boc-L-蛋氨酰)-l,2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯(11)按照实施例3的操作，从L096g(4.4mmo1)Boc-Met-OH和0.9lg(4.0mmol)(3S)-l，2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得1.10g(87%)标题化合物，为糖浆状。ESI-MS(m/e)423[M+H]+;!HNMR(CDCl3-d)5/ppm:8.0(d，lH)，7.02(m，4H)，4.80(t,lH),4.51(m，3H)，3,63(s，3H)，3.29(d，lH)，3.05(d,lH)，2.44(m,2H)，2.16(t，2H)，2.09(s，3H)，1.41(s,9H);13C-NMR(CDCl3-d)S/ppm=171.6，170.1，155.8:135.9，134.2，128.4，127,2，126.6,79.5，55.8,52.0，51.6,44.6,31.9，29.3，28.4，27.0，17.4。实施例15制备(3S)-N-(Boc-L-天冬酰胺酰)-l,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯(lm)按照实施例3的操作，从1.021g(4.4mmol)Boc-Asn-OH和0.91g(4.0mmol)(3S)-l,2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得0.89g(55%)标题化合物，为糖浆状。ESI-MS(m/e)406[M+1〗+;'HNMR(CDClrd)5/ppm:8.0(d，lH)，7.02(m，4H)，6.0(s，2H)，4.78(m,2H)，4.51(d,lH)，4.41(d,lH)，3.63(s，3H)，3.29(d，lH)，3.05(d，lH)，2.68(m，2H)，1.41(s,9H);13C-NMR(CDCl3-d)S/ppm=174.5,171.6,170.1，155.8,135.9,134.2，128.4,127.2，126.6,79.5,55.8,52.0,51.6，44.6，37.9，28.4,27.0。实施例16制备(3S)-N-(Boc-L-谷氨酰胺酰)-l，2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯(ln)按照实施例3的操作，从1.082g(4.4mmol)Boc-Gln-OH和0.91g(4.0mmol)(3S)-l，2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得0.75g(45%)标题化合物，为糖浆状。ESI-MS(m/e)420[M+1]+;1HNMR(CDClrd)S/ppm=8.0(d,lH)，7.02(m，4H)，6.0(s,2H)，4.78(t，lH)，4.48(m，3H)，3.63(s,3H)，3.29(d，lH)，3.05(d，lH)，2.18(t,2H)，2.07(m,2H)，1.41(s，9H);13C-NMR(CDCl3-d)S/ppm=174.5,171.6,170.1，155.8,135.9,134.2,128.4，127.2，126.6，79.5，55.8,52.0，51.6，44.6，32.6，28.4,27.6,27.0。实施例17制备(3S)-N-(Boc-L-组氨酰)-l，2,3，4-四氢异喹啉-3-S-羧酸甲酯(10)按照实施例3的操作，从1.122g(4.4mmol)Boc-His-OH和0.91g(4.0mmol)(3S)-l,2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得1.10g(65%)标题化合物，为糖浆状。ESI-MS(m/e)429[M+H]+;!HNMR(CDCl3-d)S/ppm-13.4(d，lH)，8.0(s，lH)，7.44(s,lH)，7.02(m，4H)，6.80(d,lH)，4.92(t，lH)，4.80(t,lH)，4.51(d，lH)，4.41(d,lH)，3.63(s,3H)，3.17(m，lH)，2.92(m，lH)，1.41(s，9H);13C-NMR(CDCl3-d)5/ppm=171.6，170.1，155.8，135.9,134.2，133.5，128.4，127.2，126.6,119.6,79.5,55.8,52.0，51.6，44.6，30.5,28.4，27.0。实施例18制备(3S)-N-(Boc-L-侧链Boc保护赖氨酰)-l，2,3,4-四氢异喹啉-3-S-羧酸甲酯(lp)按照实施例3的操作，从1.522g(4.4mmol)Boc-Lys(Boc)-OH和0.91g(4.0mmol)(3S)-l，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得1.40g(67%)标题化合物，为糖桨状。ESI-MS(m/e)520[M+1]+;!HNMR(CDCl3-d)S/ppn^8.0(d，2H)，7.02(m,4H)，4.78(t，lH)，4.52(m,2H)，4.41(d，lH)，3.63(s，3H)，3.29(d,lH)，3.05(d，lH)，2.96(m，2H)，1.79(m，2H)，1,55(m，2H)，1.41(s，18H)，，1.29(m，2H);13C-NMR(CDClrd)5/ppm=171.6，170.1,155.8,135.9，134.2,128.4，127.2,126.6，79.5，55,8,52.0，51.6,44.6,41.9,31.9,28.4,27.0,20.7。实施例19制备(3S)-N-(Boc-L-侧链Bzl保护天冬氨酰)-l,2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯(lq)按照实施例3的操作，从1.292g(4.0mmol)Boc-Asp(OBZl)-OH和0.91g(4.0mmol)(3S)-l,2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得1.50g(75%)标题化合物，为糖浆状。ESI-MS(m/e)497[M+l]+;'HNMR(CDCl3-d)S/ppn^8.0(d，lH)，7.19(s，5H)，7.02(m，4H)，5.34(s，2H)，5.17(t，lH)，4.81(t，lH)，4.51(d，lH)，4.41(d，lH)，3.63(s，3H)，3.29(d,lH)，3.05(d,lH)，2.88(m，lH)，2.63(m，lH)，1.48(s，9H);13C-NMR(CDClrd)S/ppm=174.5,171,6,170.1,155.8,141,2，135.9，134.2，129.4,127.2，126.6，79.5,68.5,55.8，52.0，51.6，49.7,44.6,37.9，28.4,27.0。实施例20制备(3S)-N-(Boc-L-侧链Bzl保护谷氨酰)-l,2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯(lr)按照实施例3的操作，从1.348g(4.0mmol)Boc-Glu(OBZl)-OH和0.91g(4.0mmol)(3S)-l，2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得1.60g(78%)标题化合物，为糖桨状。ESI-MS(m/e)511[M+H]+;1HNMR(CDClrd)S/ppm=8.0(d,lH)，7.19(s,5H)，7.02(m，4H)，5.34(s，2H)，4.81(t,lH)，4.53(m，lH)，4.51(d,lH)，4.41(d，lH)，3.63(s，3H)，3.29(d,lH)，3.05(d,lH)，2.21(m,4H)，1.41(s，9H);13C-NMR(CDCl3-d)S/ppm=174.5,171.6，170.1，155.8，141.2,135.9,134.2，129.4,127.2,126.6，79.5，68.5，55.8,52.0,51.6,44.6，37.9,28.4,27,0。实施例21制备(3S)-N-(Boc-L-侧链N02保护精氨酰)-l,2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯(ls)按照实施例3的操作，从1.403g(4.4mmo1)Boc-Arg(N02)-OH和0.91g(4.0mmol)(3S)-l，2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得l.Og(51%)标题化合物，为糖浆状。ESI-MS(m/e)494[M+H]+;'HNMR(CDCl3-d)S/ppn^8.0(d,2H)，7.02(m，4H)，4.84(m，lH)，4.53(m，lH)，4.51(d,lH)，4.41(d,lH)，3.63(s，3H)，3.27(m，lH)，3.04(m，lH)，2.65(m,2H)，2.0(d,2H)，1.79(m，2H)，1.55(m，2H)，1.41(s,9H);13C-NMR(CDCl3-d)S/ppm=171.8,170.1，158.2，155.8,135.9,134.2,129.4，127.2,126.6，79.5,71.7，55.8,53.8，51.2，44,6，37.1,28.4,27.0，24.3。实施例22制备(3S)-N-(Boc-L-丙氨酰)-l，2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸(2a)将0.362g(lMmol)制备(3S)-N-(Boc-L-丙氨酰)-l,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯溶于5ml甲醇，冰浴下向得到的溶液中滴入7ml2NNaOH水溶液，调节pHll。反应混合物0°C搅拌3h，TLC(CCl3:CH3OH=5:l)显示制备(3S)-N-(Boc-L-丙氨酰)-l，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯消失。反应混合物用饱和KHS04水溶液调pH7，减压浓縮除尽甲醇，残留物先用饱和KHS04水溶液调pH2，再用乙酸乙酯萃取三次。合并的乙酸乙酯层用饱和NaCl水溶液洗两次，无水Na2S04干燥过夜。滤除Na2S04，滤液减压浓縮至干，得到0.348g(99%)标题化合物，为无色固体。！HNMR(CDClrd)S/ppn^ll.0(s，lH)，8.0(d，lH)，7.25(m,4H)，4.83(d，lH)，4.68(m,IH)，4.55(d，lH)，4.49(d,lH)，3.20(d,IH)，2.90(d,lH)，1.48(d,3H)，1.41(s，9H)。实施例23制备(3S)-N-(Boc-甘氨酰)-l，2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸(2b)按照实施例22的操作，从0,348g(lmmol)(38)^-(800甘氨酰)-1，2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得0.334g(99%)标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/e)333[M-H]-;iHNMR(CDClrd)S/ppm:11.0(s,lH)，8.0(d，lH)，7.22(m,4H)，4.80(d，lH)，4.51(m,2H)，3.85(d,2H)，3.25(m，2H)，1.41(s,9H)。实施例24制备(3S)-N-(Boc-L-缬氨酰)國l,2,3，4陽四氢异喹啉-3-羧酸(2c)按照实施例22的操作，从0.390g(1!1111101)(38)->^(80(^-缬氨酰)-1,2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得0.35g(93%)标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/e)375[M-H]-;1HNMR(CDCl3-d)S/ppm=11.0(s,lH)，8.0(d,lH)，7.22(m,4H)，4.80(d,lH)，4.61(d，lH)，4.51(m,2H)，4.24(m,lH)，3.25(m,2H)，2.0(s，lH)，，1.41(s，9H)，1.21(d，3H)。实施例25制备(3S)-N-(Boc-L-苯丙氨酰)-l,2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸(2d)按照实施例22的操作，从0.438g(lmmol)(3S)-N-(Boc-L-苯丙氨酰)-l，2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得0.41g(96%)标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/e)423[M-H]-;'HNMR(CDCl3-d)S/ppm:11.0(s,lH)，8.0(d，lH)，7.22(m，9H)，4.92(d，lH)，4.80(d，lH)，4.51(d,lH)，4.41(d，lH)，3.10(m，4H)，1.41(s,9H)。实施例26制备(3S)-N-(Boc-L-亮氨酰)-l,2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸(2e)按照实施例22的操作，从0.404g(111111101)(38)->4-(8001^缬氨酰)-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得0.39g(100%)标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/e)389[M-H]-;!HNMR(CDClrd)5/ppn^ll.0(s，lH)，8.0(d,lH)，7.22(m,4H)，4.80(d，lH)，4.51(m,3H)，3.10(m，2H)，1.78(m，3H)，1.41(s，9H)，1.01(d，6H)。实施例27制备(3S)-N-(Boc-L-异亮氨酰)-l,2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸(2f)按照实施例22的操作，从0.404g(lmmol)(3S)-N-(Boc-L-苯丙氨酰)-l，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得0.39g(100%)标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/e)389[M-H]-;iHNMR(CDClrd)S/ppn^ll.O(s,lH)，8.0(d，lH)，7.22(m，4H)，4.80(d，lH)，4.51(m,3H);3.10(m,2H)，2.5(m，lH)，1.41(s，9H)，1.29(m，2H)，1.06(d，3H)，0.96(d,3H)。实施例28制备(3S)-N-(Boc-L-色氨酰)-l，2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸(2g)按照实施例22的操作，从0.477g(lmmol)(38)-^(80(>1^色氨酰)-1，2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得0.41g(88%)标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/e)462[M-H]-;'HNMR(CDCl3-d)5/ppm二11.0(s,lH)，10.1(s,lH)，8.0(d,lH)，7.18(d,4H)，7.01(m,4H)，6.80(s，lH)，4.90(d,lH)，4.81(d,lH)，4.51(m,2H)，3.10(m,4H)，1.41(s,9H)。实施例29制备(3S)-N-(Boc-L-侧链OBzl保护丝氨酰)-l,2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸(2h)按照实施例22的操作，从0.468g(lmmol)(3S)-N-(Boc-L-侧链OBZ1保护丝氨酰)-l,2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得0.42g(93)标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/e)453[M-H]-;'HNMR(CDCl3-d)5/ppn^ll.0(s,lH)，8.0(d,lH)，7.19(d，5H)，7.01(m，4H)，4.83(m，2H)，4.63(s，2H)，4.51(m，2H)，3.86(m,2H)，3.29(d,lH)，3.05(d，lH)，实施例30制备(3S)-N-(Boc-L-苏氨酰)-l,2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸(2i)按照实施例22的操作，从0.392g(lmmol)(3S)-N-(Boc-L-苏氨酰)-l,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得0.312g(82%)标题化合物，，为无色固体。ESI-MS(m/e)377[M-H]-;!HNMR(CDClrd)S/ppm:11.0(s，lH)，8.0(d，lH)，7.02(m，4H)，4.80(t,lH)，4.61(d，lH)，4.46(m，2H)，4.24(m，lH)，3.29(d，lH)，3.05(d,lH)，2.0(s，lH)，1.41(s，9H)，1.21(d，3H)。实施例31制备(3S)-N-(Boc-L-酪氨酰)-l，2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸(2j)按照实施例22的操作，从0.454g(lmmol)(3S)-N-(Boc-L-侧链0BZ1保护酪氨酰)-l，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得0.41g(93%)标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/e)439[M-l]-;1HNMR(CDCl3-d)S/ppm=11.0(s,lH)，8.0(d，lH)，7.00(m，6H)，6.72(d，2H)，4,92(m,3H)，4.51(d，lH)，4.41(d,lH)，3.29(d,lH)，3.05(d,lH)，2.92(m,2H)，1.41(s,9H)。实施例32制备(3S)-N-(Boc-L-脯氨酰)-l,2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸(2k)按照实施例22的操作，从0.388g(lmmol)(3S)-N-(Boc-L-脯氨酰)-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得0.326g(87%)标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/e)373[M-l]";'HNMR(CDCl3-d)5/ppn^ll.0(s,lH)，7.02(m，4H)，4瑪，1H)，4.51(m,2H)，4.29(t,lH)，3.20(m,4H)，1.71(m,2H)，1.60(m，2H)，1.41(s，9H)。实施例33制备(3S)-N-(Boc-L-蛋氨酰)-l，2，3,4-四氢异喹啉-3-羧斷21)按照实施例22的操作，从0.422g(lmmol)(38>^-(8001^-蛋氨酰)-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得0.356g(87%)标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/e)407[M-l]-;1HNMR(CDClrd)S/ppm=11.0(s,lH)，8.0(d，lH)，7.02(m，4H)，4.80(t,lH);4.51(m，3H)，3.29(d，lH)，3.05(d,lH)，2.44(m,2H)，2.16(t，2H)，2.09(s，3H)，1.41(s,9H)。实施例34制备(3S)-N-(Boc-L-天冬酰胺酰)-l,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸(2m)按照实施例22的操作，从0.405g(lmmol)(3S)-N-(Boc-L-天冬酰胺酰)-l,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得0.305g(78%)标题化合物，为无色固体。ESI-MS(//z)390[M-H]-;'HNMR(CDCl3-d)S/ppn^ll.0(s，lH)，8.0(d,lH)，7.02(m，4H)，6.0(s，2H)，4.78(m，2H)，4.51(d,lH)，4.41(d，lH)，3.29(d，lH)，3.05(d,lH)，2.68(m，2H)，1.41(s，9H)。实施例35制备(3S)-N-(Boc-L-谷氨酰胺酰)-l,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸(2n)按照实施例22的操作，从0.419g(lmmol)(3S)-N-(Boc-L-谷氨酰胺酰)-l,2，3,4-四氢异喹啉-3-S-羧酸甲酯制得0.298g(74%)标题化合物，，为无色固体。ESI-MS(m/e)404[M-l]-;'HNMR(CDCl3-d)S/ppm-11.0(s，lH)，8.0(d,lH)，7.02(m，4H)，6.0(s，2H)，4.78(t，lH)，4.48(m,3H)，3,29(d，lH)，3.05(d，lH)，2.18(t,2H)，2.07(m,2H)，1.41(s，9H)。实施例36制备(3S)-N-(Boc-L-组氨酰)-l,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸(20)按照实施例22的操作，从0.428g(lmmol)(3S)-N-(Boc-L-组氨酰)-l,2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得0.20g(48%)标题化合物，，为无色固体。ESI-MS(m/e)413[M-H]-;1HNMR(CDCl3-d)5/ppm=13.4(d，lH)，ll.O(s，lH)，8.0(s,lH)，7.44(s，lH)，7.02(m,4H)，6.80(d,lH)，4.92(t，lH)，4,80(t，lH)，4.51(d，lH)，4.41(d,lH)，3.17(m，lH)，2.92(m,lH)，1.41(s，9H)。实施例37制备(3S)-N-(Boc-L-侧链Boc保护赖氨酰)-l，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸(2p)按照实施例22的操作，从0.519glmmol)(3S)-N-(Boc-L-侧链Boc保护赖氨酰)-l，2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得0.502g(95%)标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/e)504[M-H]-;iHNMR(CDCl3-d)5/ppn^ll.0(s,lH)，8.0(d，2H)，7,02(m,4H)，4.78(t，lH)，4.52(m,2H)，4.41(d,lH)，3.29(d，lH)，3.05(d,lH)，2.96(m，2H)，1.79(m,2H)，1.55(m,2H)，1.41(s，18H),1.29(m，2H)。1.41(s，9H)。实施例38制备(3S)-N-(Boc-L-天冬氨酰)-l,2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸(2q)按照实施例22的操作，从0.496g(lmmol)(3S)-N-(Boc-L-侧链Bzl保护天冬氨酰)-1，2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得0.2568(65%)标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/e)391[M-H]陽；'HNMR(CDCl3-d)S/pprr^ll.0(s，2H)，8.0(d,lH)，7.02(m，4H)，4.85(m，2H)，4.51(d，lH)，4.41(d,lH)，3.16(d，lH)，2.88(m,2H)，2.63(d，lH)，1.41(s，9H)。实施例39制备(3S)-N-(Boc-L-谷氨酰)-l，2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸(2r)按照实施例22的操作，从0.510g(lmmol)(3S)-N-(Boc-L-侧链Bzl保护谷氨酰)-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得0.249§(61。％)标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/e)405[M-H]-;!HNMR(CDCl3-d)S/pprr^ll.0(s，2H)，8.0(d，lH)，7.02(m，4H)，4.85(t,lH)，4.53(m,lH)，4.51(d,lH)，4.41(d，lH)，3.16(d，lH)，2.91(d,lH)，2.11(m,4H)，L41(s，9H)。实施例40制备(3S)-N-(Boc-L-侧链N02保护精氨酰)-l,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸(2s)按照实施例23的操作，从0.493g(lmmol)(3S)-N-(Boc-L-侧链NO2保护精氨酰)-l,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得0.412g(86%)标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/e)478[M-H].;HNMR(CDCl3-d)5/ppn^ll.0(s,lH)，8.0(d,2H)，7.02(m，4H)，4.84(m，lH)，4.53(m,lH)，4.51(d,lH)，4.41(d,lH)，3.27(m，lH)，3.04(m，lH)，2.65(m,2H)，2.0(d，2H)，1.79(m，2H)，1.55(m，2H)，1.41(s,9H)。实施例41制备(3S)-N-(Boc-L-精氨酰)-l,2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸(2a，)先将0.400g(0.84mmol)(3S)-N-(Boc-L-侧链N02保护精氨酰)-l，2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸溶于10ml无水乙醇，往得到的溶液中加入0.300gPt/C。室温下往该悬浮液，通入H2l40h，TLC(CC13:CH30H=5:1)显示(3S)-N-(Boc-L-侧链N02保护精氨酰)-l,2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸消失。反应混合物过滤，滤液减压浓縮，得到0.256g(75%)标题化合物，为糖浆。ESI-MS(m/e)432[M-H]—;'HNMR(CDClrd)S/ppn^ll.O(s,lH)，8.0(d，2H)，7.02(m，4H)，4.84(m，lH)，4.53(m，lH)，4.51(d,lH)，4.41(d,lH)，3.27(m，lH)，3.04(m,lH)，2.65(m，2H),2.0(d，2H)，1.79(m,2H)，1.55(m,2H)，1.41(s,9H)。实施例42制备(3S)-N-(L-丙氨酰)-l，2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸(3a)先将0.300g(0.86mmo1)(3S)-N-(Boc-L-丙氨酰)-l，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸溶于2ml乙酸乙酯中，再往得到的溶液中加6ml4N氯化氢-乙酸乙酯溶液。反应混合物室温搅拌4h，TLC(CC13:CH30H=5:1展开剂)显示(3S)-N-(Boc-L-丙氨酰)-l，2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸消失。反应混合物减压浓縮至干。残留物用乙酸乙酯溶解，得到的溶液减压浓縮至干。该操作重复抽三次，除去游离氯化氢。残留物用无水乙醚溶解，得到的溶液减压浓縮至干。该操作重复抽三次。得0.210g(99%)标题化合物，为无色固体。Mp.l25-126。C;ESI-MS(m/e)247[M-H]-;IR3411，2969，1734，1648，1497，1457，1375，1198，1111，750，599;[a]D2()=-78(c=1.0，H20);'HNMR(CDCl3-d)S/ppm二11.0(s，lH)，7.02(m，4H)，4.83(d，lH)，4.51(d，lH)，4.43(d，lH)，3.74(m，lH)，3.16(d，lH)，2.91(d，lH)，2.0(s，2H)，128(d,3H);13C-NMR(CDClrd)S/ppm=172.9，171.6,136.1,134.7,127.2,126.3,125.8,58.3,46.9,44.6,26.7,20.8。实施例43制备(3S)-N-(甘氨酰)-l,2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸(3b)按照实施例42的操作，从0.300g(0.90mmol)制备(3S)-N-(Boc-甘氨酰)-l，2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸制得0.198g(94%)标题化合物，为无色固体。Mpl82-183。C，ESI-MS(m/e)233[M-町；IR3411，2969，1734，1648，1497，1457，1375，1198，1111，750，599;[a]u20=-20(c=1.0，H20);'HNMR(CDClrd)5/ppn^ll.0(s，lH)，7.02(m,4H)，4.80(d，1H)，4.51(m，2H)，3.54(d，2H)，3.16(d，lH)，2.91(d，lH)，2.0(s，2H);13C-NMR(CDCl3-d)S/ppm=171.6,168.6,135.9,132.9，128.4，127.2,126.6,57.8,52.0，43.6,41.5,27.0。实施例44制备(3S)-N-(L-缬氨酰)-l，2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯(3c)按照实施例42的操作，从0.30gC0.80mmo1)制备(3S)-N-(Boc-L-缬氨酰)-l，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸制得0.188g(85%)标题化合物，为无色固体。Mpll7-1210C;ESI-MS(m/e)275[M-H]-;IR3411，2969，1734，1648，1497，1457，1375，1198，1111，750，599;[a]D20=-26(c=1.0，H20);'HNMR(CDCl3-d)S/ppn^ll.0(s，lH)，7.02(m，4H)，4.80(d,lH)，4.51(m，2H)，3.53(m，lH)，3.08(m,2H)，2.29(m,lH)，2.0(s,2H)，1.21(s，6H);13C-NMR(CDCl3-d)S/ppm=171.6，168.6，135.9，133.9，128.4，127.2,126.6,58.4，55.8，44.6,34.4,27.0，17.9。实施例45制备(3S)-N-(L-苯丙氨酰)-l,2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸(3d)按照实施例42的操作，从0.30g(0.93mmol)(3S)-N-(Boc-L-苯丙氨酰)-l,2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸制得0.211g(92%)标题化合物，为无色固体。Mpl21-123。C;ESI-MS(m/e)323[M-H]國；IR3464,2948,2769，2685,2643，2498,1746,1574;[a]D20=-16(c=1.0，H20);'HNMR(CDCl3墨d)S/ppm-11.0(s，lH)，7.12(m，9H)，4.85(d,lH)，4.51(d,lH)，4.41(d,lH)，3.95(m，lH)，3.16(d,lH)，2.92(m,3H)，2.0(s,2H);13C-NMR(CDCl3-d)S/ppm=171.6,170.1，139.5,135.9，134.2,128.4，127.2，126.6,57.8，52.0，44.6,40.8,27.0。实施例46制备(3S)-N-(L-亮氨酰)-l,2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸(3e)按照实施例42的操作，从0.30g(0.77mmol)(3S)-N-(Boc-L-缬氨酰)-l,2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸制得0.20g(89%)标题化合物，为无色固体。Mpl36-137°C;ESI-MS(m/e)289[M-H]-;IR3464,2948,2769，2685,2643,2498，1746，1574;[a]D20=-16(c二l.O，H20);[a]D=-28(c=1.0，H20);!HNMR(CDCl3-d)S/ppn^ll.0(s，lH)，7.22(m，4H)，4.85(d，lH)，4.51(d,lH)，4.41(d，lH)，3.58(m,lH)，3.10(m,2H)，2.0(s，2H)，1.78(m，3H)，1.01(d，6H);13C-NMR(CDCl3-d)S/ppm=171.6,170.1，135.9，134.2，128.4，127.2，126,6,58.3，50.7，44.6,28.4，27.0,22.3。实施例47制备(3S)-N-(L-异亮氨酰)-l，2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸(3f)按照实施例42的操作，从0.30gC0.77mmo1)(3S)-N-(Boc-L-苯丙氨酰)-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸制得0.202§(89%)标题化合物，为无色固体。Mpl25-126。C;ESI-MS(m/e)289[M-H]-;IR3414，2967，1736，1648，1497，1457，1378，1200,749;[a]D20=-4(c=1.0，H20);'HNMR(CDCl3-d)S/ppn^ll.0(s，lH)，7.02(m，4H)，4.80(m,lH)，4.51(m,2H)，3.53(d,lH)，3.10(m,2H)，2.05(m，3H)，1.29(m,2H)，1.06(d，3H)，0.96(d，3H);13C-NMR(CDClrd)S/ppm=171.6，170.1,135.9，134.2，128.4，127.2,126.6，58.8，55.0,44.6,39.0，26.4，24.3，14.6，10.9。实施例48制备(3S)-N-(L-色氨酰)-l,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧斷3g)按照实施例42的操作，从0.30g(0.65mmol)(38)^-(80(;丄-色氨酰)-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸制得0.213g(91%)标题化合物，为无色固体。Mpl34-138。C;ESI-MS(m/e)362[M-H]-;IR3411，2969，1734，1648，1497，1457，1375，1198，1111，750，599;[a]D=-86(c:=1.0，H20);iHNMR(CDCl3-d)S/ppm^ll.0(s，lH)，lO.l(s，lH)，7.18(d，4H)，7.01(m，4H)，6.80(s,lH)，4.85(d，lH)，4.51(m，2H)，3.95(m,lH)，2.9(m，4H)，2.0(d，2H);13C-NMR(CDCl3-d)S/ppm=171.6，170.1，135.9,134.2，128.4，127.2，126.6,122.9,119.0，110.9，57.8,53.1，44.6,34.2，27.0。实施例49制备(3S)-N-(L-丝氨酰)-l,2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸(3h)按照实施例42的操作，从0.30g(0.83mmol)(38)-^(80(^-丝氨酰)-1,2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸制得0.204g(94%)标题化合物，为无色固体。Mplll-113。C;ESI-MS(m/e)262[M-H]國；IR3411，2969，1734，1648，1497，1457，1375，1198，1111，750，599;[a]D2()=-86(c=1.0，H20);1HNMR(CDCl3-d)S/ppm=11.0(s，lH)，7.02(m,4H)，4.83(m,2H)，4.51(m，2H)，3.86(m,2H)，3.65(m，lH)，3.19(d,lH)，2.92(d,lH)，2.0(s，3H);13C-NMR(CDClrd)S/ppm=171.6，170.1，137.2,135.9，134.2,128.4,127.2,125.6，65.8，58.0，55.7,44.6，27.0。实施例50制备(3S)-N-(L-苏氨酰)-l，2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸(3i)按照实施例42的操作，从0.30g(0.82mmol)(38)-^(8001^苏氨酰)-1，2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸制得0.15g(68%)标题化合物，为无色固体。Mp96-99°C;ESI-MS(m/e)277[M-H]-;IR3411，2969，1734，1648，1497，1457，1375，1198，1111，750，599;[a]D20=-10(c=1.0，H20);1HNMR(CDClrd)S/ppm=11.0(s，lH)，7.02(m,4H)，4.80(t，lH)，4.46(m，2H)，3.85(m，lH)，3.64(t，lH)，3.19(d，lH)，3.00(d,lH)，2.0(s,3H)，1.21(d,3H);13C-NMR(CDCl3-d)S/ppm=171.6,170.1，135.9，134.2,128.4，127.2，126.6，70,5,67.8,64.2，58.8，44.6，27.0,18.9。实施例51制备(3S)-N-(L-酪氨酰)-l，2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸(3j)按照实施例42的操作，从0.30g(0.79mmol)(38)->^(800丄-酪氨酰)-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸制得0.22g(95%)标题化合物，为无色固体。Mpll6-118°C;ESI-MS(m/e)339[M-H]-;IR34U，2969，1734，1648，1497，1457，1375，1198，1111，750，599;[a]D2o=-26(c=1.0，H20);!HNMR(CDClrd)S/ppm:11.0(s,lH)，7.01(m，6H)，6.85(d,2H)，5.O(s,lH)，4.82(m，lH)，4.51(d，lH)，4.41(d，lH)，3.93(t，lH)，3.19(m，lH)，2.92(m,3H)，2.0(d，2H);13C-NMR(CDClrd)S/ppm=171.6,170.1，155.9,136.5,134.9,131.2,129.0,128.4，127.2，126.6，116.2，57.8,52.0，44.6，40.8,27.0。实施例52制备(3S)-N-(L-脯氨酰)-l,2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸(3k)按照实施例22的操作，从0.30g(0.8mmol)(3S)-N-(Boc-L-脯氨酰)-l，2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯制得0.326g(87。/0标题化合物，为无色固体。Mp;ESI-MS(m/e)273[M-H]-;IR3411，2969,1734，1648，1497，1457，1375，1198，1111，750，599;[a]D=-114(c=1.0，H20);'HNMR(CDCl3-d)5/ppm-11.0(s,lH)，7.02(m，4H)，4.85(t，lH);4.51(m,2H)，3.69(m，lH)，3.00(m，2H)，2.75(m，2H),2.0(m，lH)，1.71(m，4H);13C-NMR(CDCl3-d)S/ppm=171.6,170.1,135.9，134.2,128.4,127.2，126.6,5线57.8,45.1，44.6,32.2，27.0,24.1。实施例53制备(3S)-N-(L-蛋氨酰)-l，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸(31)按照实施例42的操作，从0.30g(0.74mmol)(38)-1^(8001^蛋氨酰)-1,2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸制得0.199g(88%)标题化合物，为无色固体。Mp81-84°C;ESI-MS(m/e)307[M陽H]';IR;3411，2969，1734，1648，1497，1457，1375，1198，1111，750，599;[a]D20=-64(c=1.0，H20);'HNMR(CDCl3-d)S/ppm:11.0(s,lH)，7.02(m，4H)，4.85(t，lH)，4.51(d，lH)，4,41(d,lH)，3.56(m，2H)，3.15(m,lH)，2.91(m，lH)，2.44(t，2H)，2.16(t，2H)，2,09(s,3H)，2.0(m，2H);13C-NMR(CDCl3-d)S/ppm=171.6,170.1，135.9，134.2，128.4，127.2，126.6,58.8,52.0，44.6，33.9,29.3,27.0,17.4。实施例54制备(3S)-N-(L-天冬酰胺酰)-l,2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸(3m)按照实施例42的操作，从0.30g(0.77mmol)(3S)-N-(Boc-L-天冬酰胺酰)-l,2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸制得0.138g(62%)标题化合物，为无色固体。Mpl07-108。C;ESI-MS(m/e)290[M-H]-;IR3411，2969，1734，1648，1497，1457，1375,1198，1111，750，599;[a]D2()=-42(c=1.0，H20);!HNMR(CDCl3-d)S/ppm:11.0(s，lH)，7.02(m，4H)，6.0(s，2H)，4.85(m,lH)，4.51(d，lH)，4.41(d,lH)，3.79(d,lH)，3.15(d,lH)，2.90(m，lH)，2.56(m，2H),2.0(s，2H);13C-NMR(CDCl3-d)S/ppm=174.5,171.6,170.1,135.9，134.2,128,4，127.2，126.6,58.2，48.6，44,6，39.9,27.0。实施例55制备(3S)-N-(L-谷氨酰胺酰)-l,2,3,4-四氢异喹啉-3-S-羧酸(3n)按照实施例42的操作，从0.30g(0.74mmol)(38)-^(80(>1^谷氨酰胺酰)-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸制得0.146g(65%)标题化合物，为无色固体。Mp90-92°C;ESI墨MS(m/e)306[M-H]-;IR34U，2969，1734，1648，1497，1457，1375，1198，1111，750,599;[a]u20=-56(c=1.0，H20);!HNMR(CDCl3-d)S/ppn^ll.0(s,lH)，7.02(m，4H)，6.0(s,2H)，4.85(t,lH)，4.51(d,lH)，4.41(d,lH)，3.59(t,lH)，3.15(d,lH)，2.88(d，lH)，2.07(m，4H);13C-NMR(CDClrd)S/ppm=174.5,171.6,170.1,135.9,134.2，128.4，127.2，126.6，57.8,51.6,44.6,32.6，30.6,27.0。实施例56制备(3S)-N-(L-组氨酰)-l，2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸(30)按照实施例42的操作，从0.30g(0.72mmo1)(3S)-N-(Boc-L-组氨酰)-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸制得0.169g(74%)标题化合物，为无色固体。Mpl27-128。C;ESI掘(m/e)313[M-H]-;IR3411，2969，1734，1648，1497，1457，1375，1198，1111，750，599;[a]D20=-38(c=1.0，H20);1HNMR(CDClrd)S/ppm=13.4(d,lH),ll.O(s,lH)，7.44(s，lH)，7.02(m，4H)，6.80(d,lH)，4.85(t,lH)，4.51(d,lH)，4.41(d，lH)，3.95(t，lH)，3.17(m，lH)，2.92(m,lH)，2.0(d,2H);13C-NMR(CDCl3-d)5/ppm=171.6,170.1，135.9,134.2,133.5,128.4,127.2，126.6，119.6，57.8,52.0,44.6,33.5,27.0。实施例57制备(3S)-N-(L-赖氨酰)-l，2,3,4-四氢异喹啉-3-S-羧酸(3p)按照实施例22的操作，从0.30g(0.59mmol)(3S)-N-(Boc-L-侧链Boc保护赖氨酰)-l,2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸制得0.180g(100%)标题化合物，为无色固体。Mpl21-123。C;ESI-MS(m/e)304[M-H〗-;IR3411，2969，1734，1648，1497，1457，1375，1198，1111，750，599;[a]D20=-24(c=1.0，H20);1HNMR(CDCl3-d)5/ppm=11.0(s，lH)，7.02(m,4H)，4.85(t，lH)，4.51(d，lH)，4.41(d,lH)，3.56(m,lH)，3.19(d，lH)，2.92(d,lH)，2.65(m，2H)，2.0(m,4H)，1.79(m,2H)，1.55(m,2H)，1.29(m,2H);13C-NMR(CDCl3-d)S/ppm=171.6，170.1，135.9,134.2，128.4，127.2，126.6，57.8，52.0,44.6，41.9，34.2,31.9,27.0，20.7。实施例58制备(3S)-N-(L-天冬氨酰)-l，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸(3q)按照实施例42的操作，从0.30g(0.76mmo1)(38)-^(80(:丄-天冬氨酰)-1，2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸制得0.150g(67%)标题化合物，为无色固体。Mpll3-116°C;ESI-MS(m/e)291[M-H]-;IR;3411，2969，1734，1648，1497，1457，1375，1198，1111，750，599;[a]D2。=-36(c=1.0，H20);!HNMR(CDCl3-d)S/ppn^ll.0(s,2H)，7.02(m,4H)，4.85(t,lH)，4.51(d，lH)，4.41(d，lH)，3.89(m,lH)，3.19(d，lH)，2.92(d，lH)，2.73(m，2H)，2.0(s，2H);13C-NMR(CDCl3-d)5/ppm=174.5,171.6,170.1,141.2,135.9,134.2,129.4，127.2，126.6，57.8，49.7,44.6,43.1，27.0。实施例59制备(3S)-N-(L-谷氨酰)-l，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸(3r)按照实施例42的操作，从0.30g(mmol)(3S)-N-(Boc-L-谷氨酰)-l，2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸制得0.158g(70%)标题化合物，为无色固体。Mpll3-116°C;ESI誦MS(m/e)305[M-H]—;IR;3411，2969，1734，薩，1497，1457，1375，1198，1111，750，599;[a]D=-120(c=1.0，H20);1HNMR(CDCl3-d)S/ppm=11.0(s,2H)，7.02(m，4H)，4.85(t,lH)，4.51(d，lH)，4.41(d，lH)，3.56(m，lH)，3.19(d，lH)，2.92(d，lH),2.21(m，2H)，2.03(m,4H);13C-NMR(CDClrd)S/ppm=174.5,171.6,170.1,141.2,135.9，134.2,129.4，127.2,126.6,57.8,52.0,44.6,29.4,27.0。实施例60制备(3S)-N-(L-精氨酰)-l，2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸(3s)按照实施例42的操作，从0.30g(0.9mmo1)(38)-^(8001^精氨酰)-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸制得0.150g(65%)标题化合物，为无色固体。Mpl99-202。C;ESI-MS(m/e)334[M+H]+;IR3411，2969，1734，1648，1497，1457，1375，1198，1111，750，599;[a]D=-10(c=1.0，H20);!HNMR(CDCl3-d)S/ppm-11.0(s,lH)，7.02(m,4H)，4.84(m,lH)，4.51(d,lH);4.41(d，lH)，3.56(t,lH)，3.19(d,lH)，2.92(d,lH)，2.65(m，2H)，2.0(d,6H)，1.79(m,2H)，1.55(m，2H);13C-NMR(CDClrd)S/ppm=171.8，170.1，158.2,135.9,134.2，129.4,127.2，126.6,58.8,51.8，44.6,37.1,32.1,27.0,24.3。试验例1本发明化合物(3a-s)的抗血栓活性试验测定前将3a-s溶于生理盐水。雄性Wistra大鼠(220-240g诉戊巴比妥钠(5.0mg/ml，3ml/kg)麻醉后分离右颈动脉和左颈静脉。把一根6cm长的事先精密称重的丝线放在聚乙烯管中，将插管充满肝素钠的生理盐水溶液(50IU/ml)后，一端插入左侧静脉，从一端加入定量肝素钠抗凝，并加入3a-s的生理盐水溶液(浓度为0.67mg/ml,剂量为5pmol/kg)，然后插入右侧动脉。血流从右侧动脉流经聚乙烯管流入左侧静脉，15分钟后取出附有血栓的丝线并记录湿重，附有血栓的丝线在干燥器中放置两周后，称量干重。以生理盐水(NS，3ml/kg)作空白对照，以阿司匹林(剂量1组为0.2mol/kg，剂量2组为500pmol/kg)作阳性对照。结果见表l。表1的数据表明在5nmol/kg剂量下3a-s具有明显的抗血栓活性。从表1的数据还可以看出，虽然3a-s在相当于1/40000阿司匹林剂量下抗血栓活性弱于阿司匹林，但是在相当于1/100阿司匹林剂量下3a-s的抗血栓活性非常显著地强于阿司匹林。在剂量仅是3a-sl00倍的情形下，阿司匹林不显示抗血栓作用。该结果说明，3a-s是优秀的抗血栓剂。表13a-s治疗对大鼠血栓形成的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>n=12,a)与NS及Aspirin2组血栓湿重比，pO.OOl;b)与NS及Aspirin2组血栓干重比，pO.OOl.权利要求1、具有溶血栓活性的通式I化合物id="icf0001"file="A2006101649780002C1.gif"wi="37"he="12"top="38"left="55"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="no"/>通式I其中，AA选自L-丙氨酰基、甘氨酰基、L-缬氨酰基、L-苯丙氨酰基、L-亮氨酰基、L-异亮氨酰基、L-色氨酰基、L-丝氨酰基、L-苏氨酰基、L-酪氨酰基、L-脯氨酰基、L-蛋氨酰基、L-天冬酰胺酰基、L-谷氨酰胺酰基、L-组氨酰基、L-赖氨酰基、L-天冬氨酰基、L-谷氨酰基或L-精氨酰基。2、权利要求1通式I化合物的中间体化合物<formula>seeoriginaldocumentpage2</formula>其中，AA选自L-丙氨酰基、甘氨酰基、L-缬氨酰基、L-苯丙氨酰基、L-亮氨酰基、L-异亮氨酰基、L-色氨酰基、L-侧链0BZ1保护丝氨酰基、L-苏氨酰基、L-侧链OBzl保护酪氨酰基、L-脯氨酰基、L-蛋氨酰基、L-天冬酰胺酰基、L-谷氨酰胺酰基、L-组氨酰基、L-侧链Boc保护赖氨酰基、L-侧链Bzl保护天冬氨酰基、L-侧链Bzl保护谷氨酰基或L-侧链N02保护精氨酰基。3、权利要求1通式I化合物的中间体化合物<formula>seeoriginaldocumentpage2</formula>其中，AA选自L-丙氨酰基、甘氨酰基、L-缬氨酰基、L-苯丙氨酰基、L-亮氨酰基、L-异亮氨酰基、L-色氨酰基、L-侧链OBzl保护丝氨酰基、L-苏氨酰基、L-酪氨酰基、L-脯氨酰基、L-蛋氨酰基、L-天冬酰胺酰基、L-谷氨酰胺酰基、L-组氨酰基、L-侧链Boc保护赖氨酰基、L-天冬氨酰基、L-谷氨酰基或L-侧链N02保护精氨酰基。4、一种制备权利要求1通式(I)化合物的方法，包括(1)、在浓盐酸存在下苯丙氨酸与甲醛进行Pictet-Spengler縮合制备(3S)-1，2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸；(2)、在氯化亚砜和甲醇存在下将(3S)-l，2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸转化为(3S)-l，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯；(3)、在二环己基羰二亚胺(DCC)和N-甲基吗啉存在下将(3S)-l,2,3，4-四氢异喹啉_3_羧酸甲酯与Boc-L-氨基酸偶联制备(3S)-N-(Boc-L-氨基酰)-l，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯；(4)、在碱水溶液中将(3S)-N-(Boc-L-氨基酰)-l,2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸甲酯水解制备(3S)-N-(Boc-L-氨基酰)-l，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸；(5)、在氯化氢-乙酸乙酯溶液中将(3S)-N-(Boc-L-氨基酰)-l，2，3,4-四氢异喹啉-3-羧酸脱Boc得到(3S)-N-(L-氨基酰)-l,2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸。5、按照权利要求4的方法，其特征在于，步骤(1)中所述的(3S)-1,2,3,4-四氢异喹啉-3-羧酸的按照以下方法制备得到在浓盐酸存在下将苯丙氨酸与甲醛进行Pictet-Spengler縮合制备(3S)-1,2,3，4-四氢异喹啉-3-羧酸。6、按照权利要求4的方法，其特征在于，步骤(4)中所述的碱是NaOH或KOH。7、按照权利要求6的方法，其特征在于，步骤(4)中所述的碱是浓度为2N的NaOH。8、按照权利要求4的方法，其特征在于，步骤(5)中所述的氯化氢-乙酸乙酯溶液是6N的氯化氢-乙酸乙酯溶液。9、权利要求1所述通式(I)化合物在制备抗血栓药物中的用途。全文摘要本发明公开了具有抗血栓活性的通式(I)化合物，本发明还公开了该化合物的制备方法及其作为抗血栓剂的应用。本发明在(3S)-1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸的2位N上引入氨基酸残基，制备得到本发明通式(I)化合物。本发明化合物不仅具有较好的抗血栓活性，相对于用L-氨基酸修饰(3S)-1，2，3，4-四氢-β-咔啉-3-羧酸中所获得的一类抗血栓剂，其结构更为简单，其制备成本因此更低。此外，本发明通式(I)化合物不论是在极性溶剂抑或非极性溶剂中均有良好的溶解度，生物利用度高。文档编号C07K5/06GK101200493SQ200610164978公开日2008年6月18日申请日期2006年12月11日优先权日2006年12月11日发明者崔国辉,彭师奇,明赵,郑美青申请人:首都医科大学