专利名称：用于调节c-kit和pdgfr受体的组合物和方法
技术领域：
本发明涉及蛋白激酶抑制剂以及使用该化合物的方法。
背景技术：
蛋白激酶代表一大族蛋白质，它们在调节各种细胞过程和保持对细胞功能的控制中扮演重要角色。这些激酶的部分非限制性列表包括受体酪氨酸激酶例如血小板衍生生长因子受体激酶(PDGFR)、干细胞因子(c-kit)、神经生长因子受体(trkB)、成纤维细胞生长因子受体(FGFR3)和集落刺激因子1受体(CSF1R)的受体激酶；非受体酪氨酸激酶如Abl、融合激酶BCR-Abl、Fes、Lck和Syk；和丝氨酸/苏氨酸激酶如b-RAF、MAP激酶(例如，MKK6)和SAPK2β。在许多疾病状态中观察到了异常的激酶活性，所述疾病状态包括良性和恶性的增殖性疾病以及由免疫和神经系统不合适的激活所导致的疾病。
发明的公开 本发明提供了可用作蛋白激酶抑制剂的化合物及其药物组合物。
本发明一方面提供了式(1)的化合物
或其可药用的盐，其中 Y和Z独立地是CR或N； L是NR-C(O)、C(O)NR、C(O)NRC(O)NR、NRC(O)NR、NRC(O)NRC(O)、NRC(S)NRCO、NRS(O)0-2或NRCONRS(O)0-2； R1和R3独立地是卤素、(CR2)kR6、(CR2)kNR7R8、(CR2)kOR9、(CR2)kSR9或任选地被取代的C1-6烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基； R2是(CR2)kR6、(CR2)1-4OR9、(CR2)1-4NR7R8或任选地被取代的C1-6烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基； R4是(CR2)kR6、(CR2)kOR9或任选地被取代的C1-6烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基； R5是H、卤素或C1-6烷基； R6是任选地被取代的C3-7环烷基、或任选地被取代的5-12员芳基、杂环或杂芳基； R7和R8独立地是H、(CR2)kNR7R8、(CR2)kOR9、(CR2)k-R6或任选地被取代的C1-6烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基；或者R7和R8可以与各NR7R8中的N一起形成一种任选地被取代的环； R9是H、(CR2)k-R6或任选地被取代的C1-6烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基； 各R是H或具有任选地被N、O、＝O、S取代或替代的碳的C1-6烷基；或者(CR2)k中的两个亚烷基可以形成链烯基或炔基； 各任选地被取代的C1-6烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基任选地被卤化或任选地被N、O或S取代； k是0-6；且 n是0-2； 条件是，当R1是卤素、(CR2)kNR7R8或C5-8杂环烷基且R2是C1-6烷基时，L 是C(O)NRC(O)NR、NRC(O)NR、NRC(O)NRC(O)、NRC(S)NRCO或NRCONRS(O)0-2。
在上面的式(1)中，Y可以是CH。在另一些实例中，Z是N。在另一些实例中，n是1；且R3是卤素或C1-6烷基。
在上面的式(1)中，R4可以是C1-6烷基、(CR2)kO(C1-6烷基)或(CR2)kR6； R6是任选地被取代的苯基、C3-7环烷基或包含N、O或S的5-12员杂环或杂芳基；且 k是0-4。
在一个实施方案中，本发明提供了式(2)的化合物
其中R1是卤素、(CR2)kR6、(CR2)kNR7R8、(CR2)kOR9、(CR2)kSR9或任选地被取代的C1-6烷基或C2-6链烯基； R2是C1-6烷基、(CR2)R6’、(CR2)1-4OR9或(CR2)1-4NR7R8； R3是卤素或C1-6烷基； R4是C1-6烷基、(CR2)kO(C1-6烷基)或(CR2)kR6； R6’是任选地被取代的苯基、C3-7环烷基或包含N、O或S的5-7员杂环或杂芳基； R6是任选地被取代的苯基、C3-7环烷基或包含N、O或S的5-12员杂环或杂芳基； R7、R8和R9独立地是H或C1-6烷基；或者R7和R8可以一起形成一种任选地被取代的5-7员杂环；且 各k是0-4。
在上面的式(2)中，R6’可任选地被卤素或任选地被卤化的C1-6烷基所取代；且R6可任选地被一个或多个下面所定义的取代基所取代。
在另一些实施方案中，本发明提供了式(3)的化合物
在上面的式(1)、(2)或(3)中，R1是卤素、(CR2)kR6、(CR2)kNR7R8、(CR2)kOR9、(CR2)kSR9或任选地被取代的C1-6烷基或C2-6链烯基； R2是C1-6烷基、C2-6链烯基、(CR2)kR6、(CR2)1-4OR9或(CR2)1-4NR7R8； R6是苯基、C3-7环烷基或一种包含N、O或S的5-7员杂环或杂芳基，其各自任选地被卤素或任选地被卤化的C1-6烷基所取代； R7、R8和R9独立地是H或C1-6烷基；或者R7和R8可以一起形成一种任选地被取代的5-7员杂环；且 各k是0-4。
上面的式(1)、(2)和(3)中适宜的5-12员杂环或杂芳基R6基团的实例非限制性地包括噻唑基、噻吩基、哌啶基、哌嗪基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、吡唑基、呋喃基、吡咯基、二氢吡咯基、噁唑基、异噁唑基、三唑基、氮杂环丁烷基、噻二唑基、苯并咪唑基、喹啉基、四氢喹啉基、苯并噻唑基、苯并噻吩基、苯并间二氧杂环戊烯基、吲唑基、吲哚基、茚基、二氢茚基或二氢苯并呋喃。
适宜R10基团的实例非限制性地包括任选地被取代的苯基、哌嗪-2-酮基、吗啉基、噻唑基、噻吩基、哌啶基、哌嗪基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、咪唑烷-2-酮基、吡唑基、呋喃基、吡咯基、二氢吡咯基、噁唑基、异噁唑基、三唑基、氮杂环丁烷基、噻二唑基或四氢吡喃基。
在上面的式(1)、(2)或(3)中，各任选地被取代的C1-6烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基可任选地被卤化或任选地被N、O或S所取代(例如，羟基、脲基或胍基)。
在上面的式(1)、(2)或(3)中，所述各任选地被取代的苯基、C3-7环烷基或包含N、O或S的5-12员杂环或杂芳基可任选地被一个或多个选自卤素、氰基、硝基、NR7R8、NRCOR7、NRCO(CR2)pNR7R8、NRCONR(CR2)pNR7R8、(CR2)pOR9、(CR2)pR10和任选地被卤素、羟基、C1-6烷氧基或氰基取代的C1-6烷基的取代基所取代； 各R是H或具有任选地被N、O、＝O、S取代或替代的碳的C1-6烷基；或者(CR2)p中的两个亚烷基可以形成一种链烯基或炔基； R7和R8独立地是H、C1-6烷基或(CR2)p-R10；或者R7和R8可以和各NR7R8中的N一起形成一种任选地被取代的环； R9是H、任选地被卤化的C1-6烷基或(CR2)pR10； R10是C3-7环烷基、芳基、或包含N、O或S的5-7员杂环或杂芳基，其各自任选地被一个或多个所述取代基所取代；且 p是0-4。
本发明另一方面提供了药物组合物，其包含治疗有效量的式(1)、(2)或(3)的化合物和可药用的赋形剂。
本发明另一方面还提供了调节激酶活性的方法，其包括给需要其的系统或个体施用治疗有效量的式(1)、(2)或(3)的化合物或其可药用的盐或药物组合物，藉此调节所述激酶活性。在一个实施方案中，本发明提供了调节c-kit、PDGFRα、PDGFRβ、CSF1R、Abl、BCR-Abl、CSK、JNK1、JNK2、p38、p70S6K、TGFβ、SRC、EGFR、trkB、FGFR3、FLT3、Fes、Lck、Syk、RAF、MKK4、MKK6、SAPK2β、BRK、KDR、c-raf或b-raf激酶或其突变型的方法。在另一些实施方案中，本发明提供了调节c-kit、PDGFRα、PDGFRβ或其突变型的方法，并且可以在体外或体内直接接触c-kit、PDGFRα或PDGFRβ。
本发明还提供了治疗其中激酶活性的调节可阻止、抑制或改善所述疾病或情况的病理学和/或症状的疾病或情况的方法，其包括给系统或个体施用治疗有效量的式(1)、(2)或(3)的化合物或其可药用的盐或药物组合物，并任选地联用治疗有效量的第二种活性剂。当与第二种活性剂一起给药时，式(1)、(2)或(3)的化合物或其可药用的盐或药物组合物可以在第二种活性剂给药前被给药、与其同时给药或者在第二种活性剂给药后被给药。在一个实例中，所述第二种活性剂是支气管扩张药、抗炎药、白三烯拮抗剂或IgE阻滞剂。
在一个实施方案中，本发明提供了治疗由c-kit、PDGFRα、PDGFRβ、CSF1R、Abl、BCR-Abl、CSK、JNK1、JNK2、p38、p70S6K、TGFβ、SRC、EGFR、trkB、FGFR3、FLT3、Fes、Lck、Syk、RAF、MKK4、MKK6、SAPK2β、BRK、KDR、c-raf或b-raf激酶或其突变型介导的疾病或情况的方法，其包括给系统或个体施用治疗有效量的式(1)、(2)或(3)的化合物或其可药用的盐或药物组合物。在一些特定的实例中，本发明提供了治疗由c-kit、PDGFRα或PDGFRβ或其突变型介导的疾病或情况的方法。
可以用本发明化合物和组合物调停的激酶介导的疾病或情况的实例非限制性地包括肿瘤性病症、过敏性病症、炎性病症、肠易激综合征(IBS)、自身免疫性病症、移植物抗宿主疾病、肥大细胞介导的疾病、代谢综合征、CNS相关病症、神经变性病症、疼痛情况、物质滥用、朊病毒病、癌症、心脏病、纤维变性疾病、特发性动脉压过高(IPAH)、原发性肺动脉高压(PPH)、神经胶质瘤和心血管疾病。
可以用本发明化合物和组合物治疗的肥大细胞介导的疾病的实例非限制性地包括痤疮和痤疮丙酸杆菌、进行性骨化性纤维发育不良(FOP)、炎症和由于接触化学或生物武器(如炭疽和硫-芥子气)引起的组织破坏、囊性纤维化病；肾病、炎性肌肉病症、HIV、II型糖尿病、脑局部缺血、肥大细胞增多症、黄斑变性、鼻息肉症、药物依赖和戒断症状、CNS病症、预防和最小化脱发、细菌感染、间质性膀胱炎、炎性肠病(例如，克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、不确定的结肠炎和感染性结肠炎)、肿瘤血管生成、自身免疫性疾病、炎性疾病、多发性硬化(MS)、过敏性病症(包括哮喘)和骨损失。
可以用本发明化合物和组合物治疗的肿瘤性病症的实例非限制性地包括肥大细胞增多症、胃肠道间质瘤、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、急性髓细胞性白血病、急性淋巴细胞性白血病、脊髓发育不良综合征、慢性髓细胞性白血病、结肠直肠癌、胃癌、睾丸癌、成胶质细胞瘤和星形细胞瘤。
可以用本发明化合物和组合物治疗的过敏性病症的实例非限制性地包括哮喘、过敏性鼻炎、过敏性鼻窦炎、过敏性综合征、荨麻疹、血管性水肿、特应性皮炎、变应性接触性皮炎、结节性红斑、多形性红斑、皮肤坏死性静脉炎(cutaneous necrotizing venulitis)、昆虫叮咬皮肤炎症和吸血性寄生虫感染。
可以用本发明化合物和组合物治疗的炎性病症的实例非限制性地包括类风湿性关节炎、结膜炎、类风湿性脊椎炎、骨关节炎和痛风性关节炎。
可以用本发明化合物和组合物治疗的自身免疫性病症的实例非限制性地包括多发性硬化、牛皮癣、肠的炎性疾病、炎性肠病(IBD)、溃疡性、不确定的或感染性结肠炎、克罗恩氏病、类风湿性关节炎、多关节炎、局部或全身性硬皮病、全身性红斑狼疮、盘状红斑狼疮、皮肤红斑、皮肌炎、多发性肌炎、斯耶格伦氏综合征、结节性全动脉炎、自身免疫性肠病和增生性肾小球肾炎。
可以用本发明化合物和组合物治疗的移植物抗宿主疾病的实例非限制性地包括器官移植，如肾移植、胰腺移植、肝移植、心脏移植、肺移植、和骨髓移植的移植物排斥。
可以用本发明化合物和组合物治疗的代谢综合征的实例非限制性地包括I型糖尿病、II型糖尿病和肥胖。
可以用本发明化合物和组合物治疗的CNS相关病症的实例非限制性地包括抑郁、心境恶劣障碍、循环型情感性障碍、厌食症、易饿病、月经前期综合征、绝经后综合征、精神迟缓(mental slowing)、集中力缺失、悲观烦恼、精神激动、自嘲和性欲降低、焦虑症、精神病学病症和精神分裂症。
可以用本发明化合物和组合物治疗的抑郁情况的实例非限制性地包括双相性抑郁、严重的或忧郁性抑郁、非典型的抑郁、难治性抑郁和季节性抑郁。可以用本发明化合物和组合物治疗的焦虑症的实例非限制性地包括与换气过度和心律失常有关的焦虑、恐怖症、强迫症、创伤后应激障碍、急性应激障碍和泛化性焦虑症。可以用本发明化合物和组合物治疗的精神病学病症的实例非限制性地包括恐慌发作，包括精神病、妄想性障碍、转换障碍、恐怖症、躁狂症、谵妄、分离性发作(dissociative episode)，包括分离性遗忘症、分离性漫游和分离性自杀行为、自我忽视、剧烈的或攻击性行为、创伤、边缘型人格、和急性精神病如精神分裂症，包括偏执型精神分裂症、错乱型精神分裂症、紧张型精神分裂症和未分化型精神分裂症。
可以用本发明化合物和组合物治疗的神经变性病症的实例非限制性地包括阿尔茨海默氏病、帕金森病、亨廷顿病、朊病毒病、运动神经元病(MND)和肌萎缩性侧索硬化(ALS)。
可以用本发明化合物和组合物治疗的疼痛情况的实例非限制性地包括急性痛、术后痛、慢性痛、伤害性疼痛、癌症痛、神经性疼痛和心理性疼痛综合征。
可以用本发明化合物和组合物治疗的物质使用障碍的实例非限制性地包括药物成瘾、药物滥用、药物习惯性、药物依赖性、戒断综合征和超剂量用药。
可以用本发明化合物和组合物治疗的癌症的实例非限制性地包括黑素瘤、胃肠道间质瘤(GIST)、小细胞肺癌和其它实体肿瘤。
可以用本发明化合物和组合物治疗的纤维变性疾病的实例非限制性地包括心脏纤维化、丙型肝炎(HCV)、肝纤维化、非酒精性脂肪肝(NASH)、肝硬化、肺纤维化和骨髓纤维化。
可以用本发明化合物和组合物治疗的心血管疾病的实例非限制性地包括心绞痛、心肌梗死、充血性心力衰竭、心肌病、高血压、动脉狭窄和静脉狭窄。
在一个实施方案中，可以用式(1)、(2)或(3)的化合物来治疗嗜曙红细胞增多症、纤维化、肺动脉高压、神经胶质瘤和心血管疾病。
此外，本发明还提供了式(1)、(2)或(3)的化合物或其可药用的盐或药物组合物任选地与治疗有效量的第二种活性剂联合在制备治疗由激酶活性调节的疾病或情况的药物中的应用，所述激酶特别是c-kit、PDGFRα、PDGFRβ、CSF1R、Abl、BCR-Abl、CSK、JNK1、JNK2、p38、p70S6K、TGFβ、SRC、EGFR、trkB、FGFR3、FLT3、Fes、Lck、Syk、RAF、MKK4、MKK6、SAPK2β、BRK、KDR、c-raf或b-raf激酶或其突变型。在一些特定的实施方案中，本发明的化合物被用于制备治疗由PDGFRα、PDGFRβ、c-kit激酶受体或其突变型调节的疾病或情况的药物。
在上面使用本发明化合物的方法中，可以将式(1)、(2)或(3)的化合物给药于一种包含细胞或组织的系统中。在另一些实施方案中，可以将式(1)、(2)或(3)的化合物给药于人或动物个体。
定义 “烷基”是指一种基团和作为其它基团例如卤代烷基和烷氧基的结构元素，并且可以是直链或支链的。本文所用的任选地被取代的烷基、链烯基或炔基可以任选地被卤化(例如，CF3)，或者可以具有一个或多个被杂原子，如NR、O或S取代或替代的碳(例如，-OCH2CH2O-、烷基硫醇、硫代烷氧基、烷基胺等)。
“芳基”是指包含碳原子的单环或稠合的二环芳族环。例如，芳基可以是苯基或萘基。“亚芳基”是指由芳基衍生的二价基团。
本文所用的“杂芳基”是其中一个或多个环成员是杂原子的上面所定义的芳基。杂芳基的实例非限制性地包括吡啶基、吲哚基、吲唑基、喹喔啉基、喹啉基、苯并呋喃基、苯并吡喃基、苯并噻喃基、苯并[1，3]间二氧杂环戊烯、咪唑基、苯并-咪唑基、嘧啶基、呋喃基、噁唑基、异噁唑基、三唑基、四唑基、吡唑基、噻吩基等。
本文所用的“碳环”是指包含碳原子的饱和或部分不饱和的单环、稠合的二环或桥连的多环，其可任选地被取代，例如，被＝O取代。碳环的实例非限制性地包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环丙烯、环己酮等。
本文所用的“杂环”是其中一个或多个环碳是杂原子的上面所定义的碳环。例如，杂环可以包含N、O、S、-N＝、-S-、-S(O)、-S(O)2-或-NR-，其中R可以是氢、C1-4烷基或一种保护基团。杂环的实例非限制性地包括吗啉代、吡咯烷基、吡咯烷基-2-酮、哌嗪基、哌啶基、哌啶酮基、1，4-二氧杂-8-氮杂-螺环[4.5]癸-8-基等。
除非另有说明，否则当一个取代基被认为是“任选地被取代的”时，其是指该取代基是一种可以被一个或多个各自独立地选自例如任选地被卤化的烷基、链烯基、炔基、烷氧基、烷基胺、烷硫基、炔基、酰胺、氨基(包括单-和二-取代的氨基)、芳基、芳氧基、芳硫基、羰基、碳环、氰基、环烷基、卤素、杂烷基、杂链烯基、杂炔基、杂芳基、杂环、羟基、异氰酰基、异硫氰酸根合、巯基、硝基、O-氨基甲酰基、N-氨基甲酰基、O-硫代氨基甲酰基、N-硫代氨基甲酰基、C-酰氨基、N-酰氨基、S-磺酰氨基、N-磺酰氨基、C-羧基、O-羧基、全卤代烷基、全氟代烷基、甲硅烷基、磺酰基、硫代羰基、硫氰酸根合、三卤代甲磺酰基及其被保护的化合物的基团所取代的基团。可以形成上面取代基的被保护化合物的保护基团是本领域技术人员已知的并且可以在参考文献如Greene和Wuts，有机合成中的保护基团(Protective Groups in Organic Synthesis)，第3版，John Wiley & Sons，纽约，NY，1999和Kocienski，保护基团(Protective Groups)，Thieme Verlag纽约，NY，1994中找到，二者被全部引入本文作为参考。
本文所用的术语“共同给药”或“联合给药”等意指包括给单一患者施用所选择的治疗剂，并且意指包括其中这些治疗剂不一定通过相同给药途径或同时被给药的治疗方案。
本文所用的术语“药物组合”是指通过将活性成分混合或合并获得的产品，并且既包括活性成分的固定组合，又包括活性成分的非固定组合。术语“固定组合”是指活性成分例如式(1)的化合物和共活性剂以单一实体或剂量的形式被同时给药与患者。术语“非固定组合”是指活性成分，例如式(1)的化合物和共活性剂以独立实体的形式被同时、并行或在没有特定时间限制的情况下相继给药于患者，其中该类给药在患者体内提供了活性成分的治疗有效水平。后一种情况也适用于鸡尾酒疗法，例如三种或多种活性成分的给药。
术语“治疗有效量”是指将在细胞、组织、器官、系统、动物或人体内引起研究者、兽医、医生或其它临床医师所寻求的生物学或医学响应的主题化合物的数量。
术语主题化合物的“给药”或“施用”是指为需要其的个体提供本发明的化合物或其前体药物。
“BCR-Abl的突变型”是指野生型序列的单个或多个氨基酸变化。一组突变(G250E、Q252R、Y253F/H、E255K/V)包括形成ATP的磷酸结合环(也被称为P-环)的氨基酸。第二组突变(M351T、E355G)聚集在催化结构域附近。第三组突变(H396R/P)位于活化环中，其构象是控制激酶活化/失活的分子开关。还报道了第四组突变(V289A、F311L、T315I、F317L)。除非本发明另有说明，否则Bcr-Abl是指该酶的野生型和突变型。
本发明的实施方式 本发明提供了可用作蛋白激酶抑制剂的化合物以及其药物组合物。
在一个方面，本发明提供了式(1)的化合物
或其可药用的盐，其中 Y和Z独立地是CR或N； L是NR-C(O)、C(O)NR、C(O)NRC(O)NR、NRC(O)NR、NRC(O)NRC(O)、NRC(S)NRCO、NRS(O)0-2或NRCONRS(O)0-2； R1和R3独立地是卤素、(CR2)kR6、(CR2)kNR7R8、(CR2)kOR9、(CR2)kSR9或任选地被取代的C1-6烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基； R2是(CR2)kR6、(CR2)1-4OR9、(CR2)1-4NR7R8或任选地被取代的C1-6烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基； R4是(CR2)kR6、(CR2)kOR9或任选地被取代的C1-6烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基； R5是H、卤素或C1-6烷基； R6是任选地被取代的C3-7环烷基、或任选地被取代的5-12员芳基、杂环或杂芳基； R7和R8独立地是H、(CR2)kNR7R8、(CR2)kOR9、(CR2)k-R6或任选地被取代的C1-6烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基；或者R7和R8可以和各NR7R8中的N一起形成一种任选地被取代的环； R9是H、(CR2)k-R6或任选地被取代的C1-6烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基； 各R是H或具有任选地被N、O、＝O、S取代或替代的碳的C1-6烷基；或者(CR2)k中的两个亚烷基可以形成链烯基或炔基； 各任选地被取代的C1-6烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基任选地被卤化或任选地被N、O或S取代； k是0-6；且 n是0-2； 条件是当R1是卤素、(CR2)kNR7R8或C5-8杂环烷基且R2是C1-6烷基时，L是C(O)NRC(O)NR、NRC(O)NR、NRC(O)NRC(O)、NRC(S)NRCO或NRCONRS(O)0-2。
在一个实施方案中，本发明提供了式(2)的化合物
其中R1是卤素、(CR2)kR6、(CR2)kNR7R8、(CR2)kOR9、(CR2)kSR9或任选地被取代的C1-6烷基或C2-6链烯基； R2是C1-6烷基、(CR2)R6’、(CR2)1-4OR9或(CR2)1-4NR7R8； R3是卤素或C1-6烷基； R4是C1-6烷基、(CR2)kO(C1-6烷基)或(CR2)kR6； R6’是任选地被取代的苯基、C3-7环烷基或一种包含N、O或S的5-7员杂环或杂芳基； R6是任选地被取代的苯基、C3-7环烷基或一种包含N、O或S的5-12员杂环或杂芳基； R7、R8和R9独立地是H或C1-6烷基；或者R7和R8可以一起形成一种任选地被取代的5-7员杂环；且 各k是0-4。
在另一些实施方案中，本发明提供了式(3)的化合物，
在上面的式(1)、(2)或(3)中，对于R1、R2和R3而言，可以使用其它对于本领域技术人员而言将是显而易见的取代基。例如，R1和R3可以是氰基、硝基或其它吸电子或供电子取代基。
式(1)、(2)或(3)的化合物可用作蛋白激酶抑制剂。例如，式(1)、(2)或(3)的化合物以及其可药用的盐、溶剂化物、N-氧化物、前体药物和异构体可用于治疗激酶介导的情况或疾病，如由c-kit、PDGFRα、PDGFRβ、CSF1R、Abl、BCR-Abl、CSK、JNK1、JNK2、p38、p70S6K、TGFβ、SRC、EGFR、trkB、FGFR3、FLT3、Fes、Lck、Syk、RAF、MKK4、MKK6、SAPK2β、BRK、KDR、c-raf或b-raf激酶或其突变型介导的疾病。
本发明的化合物还可以与第二种治疗剂联用来改善由蛋白激酶介导的情况，如c-kit、PDGFRα或PDGFRβ-介导的情况。在一些实施方案中，可以将本发明的化合物与用于治疗哮喘的第二种治疗剂联用。例如，所述第二种治疗剂可以是支气管扩张药、抗炎药、白三烯拮抗剂或IgE阻滞剂。
还可以将本发明的化合物与治疗细胞增殖性病症的化疗剂联用，所述增殖性病症非限制性地包括淋巴瘤、骨肉瘤、黑素瘤、或乳房、肾、前列腺、结肠直肠、甲状腺、卵巢、胰脏、神经元、肺、子宫或胃肠肿瘤。可用于本发明组合物和方法中的化疗剂的实例非限制性地包括蒽环类抗生素、烷化剂(例如，丝裂霉素C)、烷基磺酸酯、氮丙啶类、乙撑亚胺类、甲基密胺类、氮芥类、亚硝基脲类、抗生素、抗代谢物、叶酸类似物(例如，二氢叶酸盐还原酶抑制剂如甲氨蝶呤)、嘌呤类似物、嘧啶类似物、酶类、鬼臼毒素类、含铂活性剂、干扰素类和白介素类。可用于本发明组合物和方法中的已知化疗剂的特定实例非限制性地包括白消安、英丙舒凡、哌泊舒凡、苄替派、卡波醌、美妥替哌、乌瑞替派、六甲蜜胺、三亚乙基密胺、三亚乙基磷酰胺、三亚乙基硫代磷酰胺、三羟甲蜜胺(trimethylolomelamine)、苯丁酸氮芥、萘氮芥、环磷酰胺、雌莫司汀、异环磷酰胺、双氯乙基甲胺、氧氮芥盐酸盐、美法仑、新氮芥、苯芥胆甾醇、泼尼莫司汀、曲酰胺、乌拉莫司汀、卡莫司汀、氯脲菌素、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀、雷莫司汀、达卡巴嗪、甘露莫司汀、二溴甘露醇、二溴卫矛醇、溴丙哌嗪、阿克拉霉素、放线菌素F(1)、氨茴霉素、氮丝氨酸、博来霉素、放线菌素C、卡柔比星、嗜癌霉素、色霉素、更生霉素、柔红霉素、道诺霉素、6-重氮基-5-氧代-1-正亮氨酸、多柔比星、表柔比星、丝裂霉素C、麦考酚酸、诺加霉素、橄榄霉素、培洛霉素、普卡霉素、泊非霉素、嘌呤霉素、链黑霉素、链佐星、块菌素、乌苯美司、新制癌菌素、佐柔比星、二甲叶酸、甲氨蝶呤、蝶罗呤、三甲曲沙、氟达拉滨、6-巯基嘌呤、硫咪嘌呤、硫鸟嘌呤、安西他滨、氮杂胞苷、6-氮杂尿嘧啶核苷、卡莫氟、阿糖胞苷、双脱氧尿苷、去氧氟尿苷、依诺他滨、氟嘧啶脱氧核苷、氟尿嘧啶、替加氟、L-天门冬酰胺酶、阿法链道酶、醋葡醛内酯、醛磷酰胺糖苷、氨基乙酰丙酸、安吖啶、Bestrabucil、比生群、卡铂、顺铂、Defofamide、秋水仙胺、地吖醌、依氟鸟氨酸(elfornithine)、依利醋铵、依托格鲁、依托泊苷、氟他胺、硝酸镓、羟基脲、干扰素-α、干扰素-β、干扰素-γ、白介素-2、香菇多糖、氯尼达明、丙米腙、米托蒽醌、莫哌达醇、二胺硝吖啶、喷司他汀、氮氨氮芥、吡柔比星、鬼臼酸、2-乙基酰肼、丙卡巴肼、雷佐生、西佐喃、螺旋锗、紫杉醇、他莫昔芬、替尼泊苷、细格孢氮杂酸、三亚胺醌、2，2′，2″-三氯三乙基胺、乌拉坦、长春碱、长春新碱和长春地辛。
药理和用途 本发明的化合物可调节蛋白酪氨酸激酶的活性并因此可用于治疗其中蛋白酪氨酸激酶与疾病的病理和/或症状有关的的疾病或病症，所述激酶特别是c-kit、PDGFRα、PDGFRβ、CSF1R、Abl、BCR-Abl、CSK、JNK1、JNK2、p38、p70S6K、TGFβ、SRC、EGFR、trkB、FGFR3、FLT3、Fes、Lck、Syk、RAF、MKK4、MKK6、SAPK2β、BRK、KDR、c-raf或b-raf激酶或其突变型。
c-Kit 肥大细胞是得自表达CD34、c-kit和CD13抗原的造血干细胞的特定亚型的组织成分。肥大细胞的特征在于其异质性，其不仅组织定位和结构不均匀，而且在功能和组织化学水平方面也不均匀。未成熟的肥大细胞祖细胞在血流中循环并分化成各种组织。这些分化和增殖过程受细胞因子(一种重要的因子是干细胞因子(SCF)、也被称为Kit配体、青灰因子或肥大细胞生长因子)的影响。该干细胞因子受体被原癌基因，c-kit所编码，该基因在造血组细胞、肥大细胞、胚细胞、Cajal的间质细胞(ICC)和一些人类肿瘤中进行表达并且也被非造血细胞表达。
酪氨酸激酶是受体型或非受体型蛋白，其将ATP的末端磷酸根转移给蛋白的酪氨酸残基，从而活化或灭活信号传导途径。该干细胞因子受体c-kit是一种III型跨膜受体蛋白酪氨酸激酶，其发动细胞生长和响应于SCF结合的增殖信号传导级联。SCF对c-kit受体的结合诱导了其二聚化，然后诱导了其转磷酸化(transphorylation)，从而导致了各种胞浆内底物的募集和活化。这些被活化的底物诱导了许多负责细胞增殖和活化的细胞内发信号途径。已知在许多细胞机制中都涉及这些蛋白，在其被破坏的情况中，会导致一些病症如异常细胞增殖和迁移以及炎症。本发明的化合物可以抑制涉及SCF的细胞过程，如抑制SCF受体自磷酸化和SCF-刺激的MAPK激酶(促细胞分裂剂-活化的蛋白激酶)的活化。
在正常细胞中，c-kit受体蛋白酪氨酸激酶的活性受到调控，并且c-kit基因产物的正常功能活性对于正常造血作用、黑素生成、genetogensis以及肥大细胞的生长和分化的维持都是很重要的。除其在正常细胞生理学活性中的重要性外，c-kit还在一些人类癌症的生物学方面起效，并且在人癌症的发病机理中和一些类型的肿瘤中涉及不受调节的c-kit激酶活性。可通过导致配体非依赖性活化的c-kit多肽的特定突变或通过该受体的自分泌刺激来发生c-kit介导的肿瘤细胞生长的增殖。在前一种情况中，在人恶性癌症(包括干细胞肿瘤、肥大细胞肿瘤、胃肠道间质瘤、小细胞肺癌、黑素瘤、乳癌、急性骨髓性白血病、成神经细胞瘤和肥大细胞增多症)中涉及一些在缺乏SCF结合的情况下造成c-kit激酶活性的组成活化的突变。
存在于患者组织中的肥大细胞参与或有助于一些疾病的发生，所述疾病如自身免疫性疾病(多发性硬化、类风湿性关节炎、炎性肠病(IBD))、过敏性疾病(过敏性鼻窦炎、过敏性鼻炎和哮喘)、肿瘤血管生成、炎性疾病和间质性膀胱炎。在这些疾病中，肥大细胞通过释放不同蛋白酶和介质如组胺、中性蛋白酶、脂质衍生的介质(前列腺素类、血栓烷类和白三烯类)和各种细胞因子(IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、TNF-A、GM-CSF、MIP-LA、MIP-lb、MIP-2和IFN-y)的混合物来参与组织的破坏。
在现代社会中，越来越多的人受到过敏性病症如过敏性鼻窦炎、过敏性鼻炎和哮喘的折磨。例如，仅在USA，估计八千七百万以上的人口正在与一些形式的过敏性疾病抗争。这些过敏性疾病包括过敏性鼻炎、过敏性鼻窦炎、过敏性综合征、红斑、血管性水肿、特应性皮炎、变应性接触性皮炎、结节性红斑、多形性红斑、皮肤坏死性静脉炎和昆虫叮咬皮肤炎症，但是，支气管哮喘是严重影响人群的最为常见的复发性疾病。
哮喘的特征在于气流阻塞、支气管过反应性和气道炎症。气道炎症是哮喘形成和持续存在的主要因素。在过敏性哮喘中，认为变应原通过诱导T-淋巴细胞介导的响应(TH2)(其导致产生变应原特异性的IgE)来引发炎性过程。IgE与肺肥大细胞上的其高亲合力受体FcεRI结合，触发I型(IgE-介导的)速发型过敏性响应。
肥大细胞活化诱导了不同的效应器响应，如分泌过敏性介质、蛋白酶、趋化因子如MCP-1和RANTES、白三烯类、前列腺素和神经营养因子类；和诱导细胞因子基因转录(IL-4、IL-5、IL-6、IL-13、TNFA和GM-CSF)。这些介质通过其对内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞的作用和对细胞外基质的作用和通过募集其它炎症细胞而有助于产生哮喘表型。
如通过人源化抗-IgE单克隆抗体治疗所表明的那样，肥大细胞可能在哮喘中起一定的作用。抗-IgE治疗的原理是特异性靶向IgE，从而导致游离抗-IgE的灭活和阻止IgE的进一步产生。此外，因为IgE水平是IgE受体FcεRI表达水平的主要调节剂，因此这一治疗的一个目标就是降低肥大细胞和嗜碱细胞上的FcεRI表达，并因此降低这些细胞被活化的能力。已经在嗜碱细胞上证明了抗-IgE疗法降低FcεRI表达的能力。嗜碱细胞上FcεRI表达的降低与嗜碱细胞在活化时分泌介质的能力降低有关。
C-kit抑制剂也可被用于治疗非胰岛素依赖性糖尿病(NLDDM)，其也被称为II型糖尿病，其是一种当胰岛素不能有效促进细胞吸收葡萄糖，从而使得血糖水平增加时表现出来的慢性病。这种疾病在世界范围内影响着约1亿人，其中75％在确诊时也伴有肥胖。在多年中不能调节葡萄糖吸收导致形成II型糖尿病，并需要用药品来调节血糖水平。最后，未受调节的血糖水平造成血管、肾和眼睛损害以及心血管疾病。这种组织损害是造成糖尿病死亡率的原因。
此外，不同刺激如应激、创伤、感染以及神经递质对肥大细胞的活化也会加剧造成CNS病症的化学物质失衡。更具体地讲，肥大细胞的脱粒受常见的神经递质如神经降压素、生长抑素、P物质和乙酰胆碱的刺激，以及生长或存活因子，特别是如NGF的刺激。参与对该刺激的响应的肥大细胞可以是脑肥大细胞，但是也可以是在血流中释放其颗粒的内含物(最终达到感觉、运动或脑神经元)的其它肥大细胞。脑肥大细胞染色是CTMC染色样，但是其表现出MMC的分泌模式，暗示其组成了肥大细胞呈递特异性的一个特定子集。
在肥大细胞活化后，被释放出来的颗粒释放各种能调节和改变神经传递和神经元存活的因子。因为在抑郁患者中已经观察到游离血清素水平的增加，因此在该类因子中，血清素很重要。或者，血清素的突释后可能是一段血清素不足的时期，从而导致疼痛和偏头痛。因此，认为肥大细胞以自分泌或旁分泌的方式加剧神经传递的失控。例如，焦虑或应激诱导的神经递质如血清素释放活化了肥大细胞，其又释放了其颗粒内含物，从而进一步促进了导致CNS病症的脑中的化学失衡。
肥大细胞释放的其它介质可以被分类成作用于血管的、感受伤害的、促炎症反应的和其它神经递质。这些因子结合起来能诱导神经元(不管其是感觉神经元、运动神经元、还是CNS神经元)活性严重紊乱。此外，受肥大细胞增多症折磨的患者比正常群体更容易形成CNS病症。可以用在c-kit受体中存在活化突变来解释这一点，这些突变诱导了肥大细胞的脱粒以及造成化学失衡和神经传递改变的因子的突释。
在一些情况中，活化的肥大细胞也可通过释放不同蛋白酶和介质的混合物来参与神经元组织的破坏，所述蛋白酶和介质被分类成三组预先形成的颗粒相关的介质(组胺、蛋白聚糖类和中性蛋白酶)、脂质衍生的介质(前列腺素类、血栓烷类和白三烯类)和各种细胞因子(IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、TNF-A、GM-CSF、MIP-LA、MIP-lb、MIP-2和IFN-y)。活化的肥大细胞释放介质(TNF-A、组胺、白三烯类、前列腺素等)以及蛋白酶可以i)诱导炎症和血管舒张和ii)参与神经元组织破坏过程。c-kit活性的抑制降低了细胞增生、耗竭了引起疾病和/或情况的肥大细胞，从而表明可以用c-kit抑制剂来治疗c-kit依赖性疾病和/或情况，如CNS病症。
还已经确定了肥大细胞参与或有助于药物依赖性和戒断症状。药物依赖性是一种被称为耐受性的现象(对于这种现象而言，需要增加药物的剂量以维持其完整的作用)和生理依赖性(其是机体对药物的习惯)的结果。当停止使用药物时，个体可能经历令人不愉快的戒断综合征。
不同药物(非限制性地包括水杨酸衍生物、吗啡衍生物、阿片样物质、海洛因、苯丙胺类、酒精、尼古丁、镇痛药、麻醉剂和抗焦虑药)对肥大细胞的活化导致了肥大细胞的脱粒，其加剧了造成药物习惯性和戒断综合征的化学失衡。在肥大细胞活化后，被释放出来的颗粒释放出各种能调节和改变神经传递的因子。该类因子中有吗啡，其被结合或储存在肥大细胞颗粒中。烟草烟雾也诱导了由犬科肥大细胞释放介质并调节导致哮喘的前列腺素的产生。此外，受肥大细胞增多症折磨的患者比正常群体更容易形成物质使用障碍。这一点可以用在c-kit受体中存在活化突变来解释，这些突变诱导了肥大细胞的脱粒和造成化学失衡和神经传递改变的因子的突释。
目前还没有治疗方法能够缓解和帮助个体由其成瘾的物质脱瘾。C-kit抑制剂可以被用于治疗物质滥用，特别是药物成瘾、药物滥用、药物习惯性、药物依赖性、戒断综合征和超剂量用药，其包括给需要该类治疗的人施用能耗竭肥大细胞的化合物。
c-Kit与PDGF受体和CSF-1受体(c-Fms)具有相当高的同源性。对各种红系细胞和骨髓细胞系进行的研究表明c-Kit基因在分化早期进行表达(Andre等人，Oncogene 1989 41047-1049)。某些肿瘤如成胶质细胞瘤细胞同样表现出显著的c-Kit基因表达。
PDGF(血小板衍生生长因子) PDGF(血小板衍生生长因子)是一种普遍存在的生长因子，其在正常生长中起重要作用，并且如在致癌作用和血管平滑肌细胞的疾病例如动脉粥样硬化和血栓形成中看到的那样，其在病理学细胞增殖中也起重要作用。本发明的化合物可抑制PDGF受体(PDGFR)活性，并且因此适于治疗肿瘤疾病，如神经胶质瘤、肉瘤、前列腺肿瘤、以及结肠、乳房和卵巢的肿瘤。
本发明的化合物不仅可用作抑制肿瘤的物质(例如用于小细胞肺癌)，而且还可用作治疗非恶性增殖性病症，如动脉粥样硬化、血栓形成、牛皮癣、硬皮病和纤维化的活性剂。本发明的化合物还可用于保护干细胞，例如对抗化疗剂如5-氟尿嘧啶的血毒素作用；并且还可用于治疗哮喘和嗜曙红细胞增多症。本发明的化合物尤其是可用于治疗对PDGF受体激酶的抑制有响应的疾病。
本发明的化合物可在由移植例如同种异体移植导致的病症的治疗中表现出有用的作用，所述病症尤其是组织排斥，如闭塞性细支气管炎(OB)，即同种异体肺移植物的慢性排斥。与未患OB的患者相反，那些患有OB的患者常常表现出支气管肺泡灌洗液中的PDGF浓度升高。
本发明的化合物还可有效对抗纤维化和对抗与血管平滑肌细胞迁移和增殖有关的疾病(在这些疾病中，PDGF和PDGFR也常常起一定作用)，如再狭窄和动脉粥样硬化。可以通过给予本发明的化合物在体外和体内证实对于血管平滑肌细胞增殖或迁移的这些作用及其后果，并且还可以通过研究其对体内机械损伤后血管内膜增厚的作用来证明这一点。
CSF1R(FMS) 由这种基因编码的蛋白是集落刺激因子1的受体，该因子是一种控制巨噬细胞的产生、分化和功能的细胞因子。即使不是全部，CSFR1也介导着这种细胞因子的大部分生物学作用。其所编码的蛋白是酪氨酸激酶跨膜受体和酪氨酸-蛋白激酶CSF1/PDGF受体族的成员。已经表明该基因的突变与恶性骨髓瘤易感性有关。(见例如，Casas等人，Leuk.Lymphoma 2003，441935-41)。
Abl、Trk、Syk、Ras、Raf、MAPK、TGFβ、FGFR3、c-Src、SAPK、Lck、Fes、Csk Abelson酪氨酸激酶(即Abl，c-Abl)参与细胞周期的调节、对遗传毒性应激的细胞响应、和通过整联蛋白信号传导来传递关于细胞环境的信息。Abl蛋白似乎起作为细胞模块的复杂作用，该细胞模块整合来自各种细胞外和细胞内来源的信号并影响关于细胞周期和细胞凋亡的决定。Abelson酪氨酸激酶包括一些亚型衍生物如具有失调的酪氨酸激酶活性的嵌合体融合(癌蛋白)BCR-Abl或v-Abl。
融合蛋白BCR-Abl是融合Abl原癌基因与Bcr基因的相互易位的结果。然后，BCR-Abl能通过增加促有丝分裂活性来转化B-细胞。这种增加导致对细胞凋亡的敏感性降低并改变CML祖细胞的粘附和归巢。
BCR-Abl在95％的慢性髓细胞性白血病(CML)和10％的急性淋巴细胞性白血病的发病中都是重要的。STI-571
是致癌的BCR-Abl酪氨酸激酶的抑制剂并且可用于治疗慢性髓细胞白血病(CML)。但是，在CML的急性发作阶段，一些患者由于BCR-Abl激酶的突变而耐受STI-571。迄今为止，已经报告了超过22种突变，如G250E、E255V、T315I、F317L和M351T。
本发明的化合物可抑制abl激酶，例如，v-abl激酶。本发明的化合物还可抑制野生型BCR-Abl激酶和BCR-Abl激酶的突变型，并且因此适用于治疗Bcr-abl-阳性的癌症和肿瘤疾病，如白血病(尤其是慢性髓细胞白血病和急性成淋巴细胞性白血病，其中尤其是发现了作用的细胞凋亡机理)。本发明的化合物也可有效对抗白血病干细胞，并且在将所述细胞(例如骨髓细胞)取出后，可将本发明的化合物用于这些细胞的体外纯化并且一旦清除了这些细胞中的癌细胞，可用于这些细胞的再植入(例如，进行了纯化的骨髓细胞的再植入)。
神经营养因子受体的Trk族(trkA、trkB、trkC)能控制肿瘤细胞生长和存活以及分化、迁移和转移。Trk受体的信号途径下游涉及贯穿Shc、活化的Ras、ERK-1和ERK-2基因的MAPK活化的级联、和PLC-γ转导途径(Sugimoto等人，Jpn J Cancer Res.2001，92152-60)。有迹象表明，Trk酪氨酸激酶在许多癌症的发展中起一定作用，所述癌症包括例如乳癌和前列腺癌。(Guate等人，p75LNGFR和Trk神经营养因子受体在正常和瘤性人前列腺中的表达，BJU Int.1999，84495502；Tagliabue等人，J.BiolChem.2000，27553885394)。此外，还有迹象表明Trk激酶发信号的调停将提供有益的生物学作用。(LeSauteur等人，Adv.Behav.Biol.1998，49615625；Zhu等人，(1999)J.Clin.Oncology，1999，17241928；Friess等人，Annals of Surgery 1999，230615-24)。
Syk是一种在肥大细胞脱粒和嗜曙红细胞活化中起重要作用的酪氨酸激酶。因此，Syk激酶参与许多过敏性病症，特别是哮喘。已经表明Syk通过N-末端SH2结构域与FcεR1受体被磷酸化的γ链结合并且对于下游信号传导而言很重要。
Ras-Raf-MEK-ERK信号传导途径介导了对生长信号的细胞响应。在约15％的人类癌症中，Ras突变成致癌形式。Raf族属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶并且包括三个成员——A-Raf、B-Raf和c-Raf(或Raf-1)。B-Raf在不需要活化的Ras等位基因的某些肿瘤的形成中有重要作用(Nature 2002，417949-954)。在很大百分比的恶性黑素瘤中已经探测到B-Raf突变。
现有的黑素瘤的医学治疗的效力有限，对于晚期黑素瘤而言尤其如此。本发明的化合物还抑制了一些涉及b-Raf激酶的细胞过程，从而提供了治疗人类癌症，尤其是黑素瘤的新治疗机遇。
细胞分裂素-活化蛋白激酶(MAPK)是活化转录因子、翻译因子和对许多细胞外信号发生响应的其它目标分子的保守信号传导途径的成员。MAPK通过细胞分裂素-活化蛋白激酶激酶(MKK)在具有Thr-X-Tyr序列的双重磷酸化基序上磷酸化而被活化。在高级真核生物中，已经将MAPK信号传导的生理学作用与一些细胞事件如增殖、肿瘤生成、发展和分化联系起来。因此，调节通过这些途径(特别是通过MKK4和MKK6)的信号传导的能力使得可以开发出用于与MAPK信号传导有关的人类疾病如炎性疾病、自身免疫性疾病和癌症的治疗和预防性疗法。
p38 MAPK的多重形式(α、β、γ、δ)(其各自由独立的基因编码)形成了参与许多刺激的细胞响应的激酶级联的一部分，所述刺激包括渗透性应激、UV线和细胞因子介导的事件。认为p38的这四种亚型调节细胞内信号传导的不同方面。它的活化是导致致炎细胞因子如TNFα的合成和产生的信号传导事件级联的一部分。P38通过磷酸化下游底物(包括其它激酶和转录因子)来发挥作用。已经表明抑制p38激酶的活性剂阻断了细胞因子(非限制性地包括TNFα、IL-6、IL-8和IL-1β)的产生。
当在体外用脂多糖(LPS)进行刺激时，已经表明外周血单核细胞(PBMC)表达和分泌致炎细胞因子。当在用LPS刺激前用该化合物预处理PBMC时，P38抑制剂有效地阻断了这种作用。P38抑制剂在炎性疾病的动物模型中有效。许多疾病状态的破坏性作用都是由致炎细胞因子的过度产生造成的。p38抑制剂调节这种过度产生的能力使其可用作疾病改善剂。
已经表明阻断p38功能的分子可有效抑制骨再吸收、炎症以及其它基于免疫和炎症的疾病。因此，安全和有效的p38抑制剂将提供一种治疗方法，可以用该方法来治疗可通过调节p38信号传导来进行控制的使人虚弱的疾病。因此，抑制p38活性的本发明的化合物可用于治疗炎症、骨关节炎、类风湿性关节炎、癌症、自身免疫性疾病和用于治疗其它细胞因子介导的疾病。
转化生长因子-β(TGFβ)表示一种包括例如GFβ1、TGFβ2和TGFβ3的蛋白的超家族，其是细胞生长和分化、胚胎和骨发育、细胞外基质形成、血细胞生成、免疫和炎性响应的多效调节剂。TGFβ族的成员引发一些细胞内信号传导途径，这些信号传导途径最终导致一些基因的表达，这些基因调节细胞周期、控制增殖响应或与介导细胞外信号内传、细胞粘附、迁移和细胞间通讯的细胞外基质蛋白有关。
因此，作为TGFβ细胞内信号传导途径抑制剂的本发明化合物是纤维增生性疾病的有用治疗剂，所述疾病包括与TGFβ活性失调有关的肾病症和过度纤维化，包括肾小球肾炎(GN)，如肾小球系膜增殖性GN、免疫性GN和新月体性GN。另一些肾情况包括糖尿病性肾病、肾间质纤维化、接受环孢菌素的移植患者的肾纤维化和与HIV有关的肾病。胶原血管病症包括进行性全身性硬化症、多发性肌炎、硬皮病、皮肌炎、嗜曙红细胞筋膜炎、局限性硬皮病或那些与雷诺氏综合征的发生有关的疾病。由TGFβ活性过度造成的肺纤维化包括成人呼吸窘迫综合征、COPD、特发性肺纤维化和常常与自身免疫性病症如全身性红斑狼疮和硬皮病、化学品接触或变态反应有关的间质性肺纤维化。另一种伴有纤维增殖特性的自身免疫性病症是类风湿性关节炎。纤维增殖性情况可能与眼睛手术操作有关。这些操作包括伴有增殖性玻璃体视网膜病的视网膜复置术、伴有人工晶状体植入的白内障摘除术和青光眼后的引流术。
已证实成纤维细胞生长因子受体3对骨生长发挥负调节作用并对软骨细胞增殖发挥抑制作用。致死性骨发育不全是由成纤维细胞生长因子受体3的不同突变造成的。一种突变——TDII FGFR3具有活化转录因子Stat1的组成酪氨酸激酶活性，从而导致了细胞周期抑制剂的表达、生长抑制和骨发育异常(Su等人，Nature 1997，386288-292)。FGFR3也常常在多发性骨髓瘤型癌症中进行表达。
激酶c-Src传递许多受体的致癌信号。例如，EGFR或HER2/neu在肿瘤中的过表达导致了c-src的组成活化，其是恶性细胞的特征，正常细胞并不具有该特征。另一方面，c-src表达不足的小鼠表现出一种骨硬化表型，表明c-src在破骨细胞功能中起关键作用并且可能在相关病症中被涉及。
人核蛋白体S6蛋白激酶族由至少8个成员(RSK1、RSK2、RSK3、RSK4、MSK1、MSK2、p70S6K和p70S6Kb)组成。核蛋白体蛋白S6蛋白激酶发挥重要的多效性功能，其中，一种关键作用是在蛋白生物合成期间调节mRNA翻译(Eur.J.Biochem 2000，267(21)6321-30；Exp Cell Res.1999，253(1)100-9；Mol Cell Endocrinol.1999，151(1-2)65-77)。已经表明在细胞活力的调节(Immunol.Cell Biol.2000，78(4)447-51)和细胞生长(Prog.Nucleic Acid Res.Mol.Biol.2000，65101-27)中涉及p70S6对S6核蛋白体蛋白的磷酸化，因此，其在肿瘤转移、免疫应答和组织修复以及其它一些疾病情况中可能很重要。
SAPK′s(也被称为“jun N-末端激酶”或“JNK′s”)是代表了一些信号传导途径中的次末级步骤的蛋白激酶族，所述信号传导途径导致了c-jun转录因子的活化和c-jun调节的基因的表达。具体地讲，c-jun参与基因的转录，所述基因编码因遗传毒性损伤而被损害的DNA的修复中所涉及的蛋白。抑制细胞中SAPK活性的物质阻止了DNA修复并使细胞对那些通过诱导DNA损害来起作用的癌症治疗药物敏感。
Lck在T-细胞信号传导中起作用。缺乏Lck基因的小鼠形成胸腺细胞的能力差。Lck作为T-细胞信号传导的阳性活化剂的功能表明Lck抑制剂可以用于治疗自身免疫性疾病如类风湿性关节炎。
Fes在骨髓造血细胞中强烈表达并参与骨髓粒细胞的分化和存活信号传导途径。在癌症，特别是结肠直肠癌和乳癌中涉及CSK。
根据前述，本发明进一步提供了一种预防或治疗需要该类治疗的个体的任何上述疾病或病症的方法，该方法包括给所述个体施用治疗有效量的式(1)、(2)或(3)的化合物或其可药用的盐。对于任何上面的应用而言，所需剂量将根据给药方式、所治疗的特定情况和所需作用来进行变化。(参见下文的“给药和药物组合物”)。
给药和药物组合物 本发明的化合物通常通过本领域已知的任何常规和可接受的方式、单独地或与一种或多种治疗药物组合来以治疗有效量进行给药。治疗有效量可随疾病的严重程度、个体的年龄和相对健康状况、所用化合物的效能和其它因素而在宽范围内进行变化。表明以每日每公斤体重约0.03至2.5mg的日剂量系统给药通常可获得满意结果。对于大型哺乳动物例如人而言，每日推荐剂量为约0.5mg至约100mg，例如方便地以每日最多4次的分次剂量或以缓释剂型进行给药。口服给药的适宜单位剂型包含大约1至50mg活性成分。
本发明化合物可通过任何常规途径以药物组合物的形式给药，特别是可以被经肠给药，例如，口服给药，例如以片剂或胶囊剂的形式进行给药；或胃肠外给药，例如，以可注射的溶液或混悬液的形式进行给药；局部给药，例如，以洗剂、凝胶剂、软膏剂或霜剂的形式进行给药；或以鼻腔制剂或栓剂的形式进行给药。
包含游离形式或可药用盐形式的本发明化合物和至少一种可药用载体或稀释剂的药物组合物可按照常规方式，通过混合、制粒或包衣方法来进行制备。例如，口服组合物可以是片剂或明胶胶囊，它含有活性组分和a)稀释剂，例如，乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素和/或甘氨酸；b)润滑剂，例如，二氧化硅、滑石粉、硬脂酸、其镁盐或钙盐和/或聚乙二醇；对于片剂来说还可以含有c)粘合剂，例如，硅酸镁铝、淀粉糊、明胶、西黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮；如果需要还可以含有d)崩解剂，例如，淀粉、琼脂、藻酸或其钠盐，或泡腾混合物；和/或e)吸收剂、着色剂、矫味剂和甜味剂。可注射的组合物可以是等渗水溶液或混悬液，并且栓剂可以由脂肪乳剂或混悬液来进行制备。
组合物可以被灭菌和/或含有辅助剂，如防腐剂、稳定剂、润湿剂或乳化剂、溶解促进剂、调节渗透压的盐和/或缓冲剂。另外，它们还可以含有其它有治疗价值的物质。适宜的经皮用制剂包含有效量本发明的化合物和载体。载体包括有助于通过宿主皮肤的可吸收的药理学上可接受的溶剂。例如，经皮吸收装置是一种含有背衬膜、含有所述化合物并任选地含有载体和使所述化合物在较长的一段时间内以受控和预定速度释放到宿主皮肤的控速屏障的贮药库、以及确保所述装置附着在皮肤上的部件的绷带形式。也可以使用基质经皮制剂。合适的局部用，例如皮肤和眼睛用制剂优选为本领域众所周知的水溶液、软膏剂、霜剂或凝胶。所述制剂可包含增溶剂、稳定剂、张力增强剂、缓冲剂和防腐剂。
本发明化合物可以与一种或多种治疗剂一起以治疗有效量进行给药(药物组合形式)。例如，可以与其它免疫调节或抗炎物质一起产生协同作用，例如，当与环孢菌素、雷帕霉素或子囊霉素或其免疫抑制剂类似物，例如环孢菌素A(CsA)、环孢菌素G、FK-506、雷帕霉素或相当的化合物、皮质类固醇、环磷酰胺、硫唑嘌呤、甲氨蝶呤、布喹那、来氟米特、咪唑立宾、麦考酚酸、麦考酚酸莫酯、15-脱氧精胍菌素、免疫抑制剂抗体，尤其是白细胞受体的单克隆抗体例如MHC、CD2、CD3、CD4、CD7、CD25、CD28、B7、CD45、CD58或它们的配体，或其它免疫调节化合物，如CTLA41g联用时。当本发明化合物与其它治疗剂一同给药时，共同给药的化合物的剂量当然将根据一起使用的药物类型、所使用的特定药物、被治疗的情况等来进行调节。
本发明也提供了一种药物组合形式，例如药盒，其包含a)游离形式或可药用盐形式的第一种药物，它是本文所公开的本发明化合物，和b)至少一种联用的药物。该药盒可包含用于指导给药的使用说明。
制备本发明化合物的方法 在下文的实施例中描述了制备本发明化合物的一般操作(A-N)。在所述反应中，可能有必要保护在终产物中所需的反应性官能团，例如羟基、氨基、亚氨基、巯基或羧基，以避免它们不必要地参与反应。可按照标准操作使用常规的保护基团，例如，参见T.W.Greene和P.G.M.Wuts，“有机化学中的保护基团(Protective Groups in Organic Chemistry)”，JohnWiley和Sons，1991。
可通过将游离碱形式的化合物与可药用的无机或有机酸反应来将本发明化合物制备为可药用酸加成盐的形式。或者，可通过将游离酸形式的化合物与可药用的无机或有机碱反应来制备本发明化合物的可药用的碱加成盐。或者，盐形式的本发明化合物可利用起始材料或中间体的盐来进行制备。
游离酸或游离碱形式的本发明化合物可分别从相应的碱加成盐或酸加成盐制备。例如可通过用合适的碱(例如，氢氧化铵溶液、氢氧化钠等)进行处理来将酸加成盐形式的本发明化合物转化为相应的游离碱。可通过用合适的酸(例如，盐酸等)进行处理来将碱加成盐形式的本发明化合物转化为相应的游离酸。
非氧化形式的本发明化合物可通过在适宜的惰性有机溶剂(例如乙腈、乙醇、二噁烷水溶液等)中，于0至80℃下，用还原剂(例如，硫、二氧化硫、三苯基膦、硼氢化锂、硼氢化钠、三氯化磷、三溴化磷等)处理本发明化合物的N-氧化物而制备。
本发明化合物的前药衍生物可用本领域普通技术人员已知的方法(例如，详情见Saulnier等人(1994)，Bioorganic and Medicinal ChemistryLetters，第4卷，第1985页)来进行制备。例如，合适的前药可通过将未衍生化的本发明化合物与适宜的氨基甲酰化试剂(例如，1，1-酰氧基烷基羰基氯(carbanochloridate)、对硝基苯基碳酸酯等)反应来制备。
本发明化合物的被保护衍生物可用本领域普通技术人员已知的方法进行制备。用于产生保护基团和除去保护基团的技术的详细描述可见于T.W.Greene，“有机化学中的保护基团(Protecting Groups in OrganicChemistry)”，第3版，John Wiley和Sons，Inc.，1999。
在本发明化合物的制备过程中，本发明化合物可方便地被制备为或形成溶剂化物(例如水合物)。本发明化合物的水合物可通过采用有机溶剂如二噁英、四氢呋喃或甲醇，在水/有机溶剂混合物中重结晶来方便地制备。
本发明化合物可通过将化合物的外消旋混合物与光学活性的拆分剂反应以形成一对非对映异构体化合物、分离非对映异构体并回收光学纯的对映异构体来制备其单个的立体异构体。对映异构体的拆分可利用本发明化合物的共价非对映异构体衍生物来进行，或者可以用易于解离的复合物(例如，结晶的非对映异构体盐)来进行。非对映异构体具有不同的物理性质(例如，熔点、沸点、溶解度、反应性等)并且可以很容易地利用这些差异进行分离。非对映异构体可以通过色谱法分离，或者可以通过基于溶解度差异的分离/拆分技术进行分离。然后通过任何不会导致消旋化的操作方法回收光学纯的对映异构体与拆分剂。用于从外消旋混合物中拆分化合物的立体异构体的技术的更详细描述可见于Jean Jacques，Andre Collet，Samuel H.Wilen，“对映异构体，外消旋体和拆分(Enantiomers，Racematesand Resolutions)”，John Wiley And Sons，Inc.，1981。
总之，式(1)、(2)或(3)的化合物可通过下述方法制备，其包括 (a)下面实施例中所述的一般操作；和 (b)任选地将本发明化合物转化为可药用盐； (c)任选地将盐形式的本发明化合物转化为非盐形式； (d)任选地将非氧化形式的本发明化合物转化为可药用的N-氧化物； (e)任选地将N-氧化物形式的本发明化合物转化为其非氧化物形式； (f)任选地从异构体混合物拆分本发明化合物的单个的异构体； (g)任选地将未衍生化的本发明化合物转化为可药用的前药衍生物；和 (h)任选地将本发明化合物的前药衍生物转化为其未衍生化的形式。
用下面的实施例来对本发明进行非限制性说明。只要没有对起始材料的制备进行特别描述，则该化合物是已知的或者可以用与本领域已知方法或下文实施例中所公开方法类似的方法来进行制备。本领域技术人员将意识到，下面的实施例仅仅是本发明化合物制备方法的代表，也可以类似地使用其它众所周知的方法。
实施例1 中间体的合成 3-(5-氨基-2-甲基苯基)-7-氯-1-甲基-1，6-萘啶-2(1H)-酮(8)
流程
图1 向一个2L的烧瓶中加入1，3-丙酮二甲酸二乙酯1(160g，0.79mol)、原甲酸三乙酯(129g，0.87mol)和乙酸酐(161g，1.58mol)。将所得的混合物加热至120℃达1.5h。将该混合物冷却至室温并通过在90-100℃下真空蒸馏(150-200mmHg)来除去挥发物。在冷凝器中收集亮黄色油状物。然后，将烧瓶中的残余物在冰浴上冷却并将其与30％的氨水(65mL)混合到一起。使该反应在冰浴上静置1小时，然后用2N HCl将其酸化至pH＜5。将该混合物真空浓缩并将粗品用快速柱色谱进行纯化(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶1)。分离出无色油状物形式的产物2。
将4，6-二羟基烟酸乙酯2(5g，0.3mol)与POCl3(500mL)在一个2L的烧瓶中混合到一起并将其加热至110℃达3小时。在将其冷却至室温后，真空除去大部分POCl3。将深色的粗产物倾倒到少量冰-水混合物中并用饱和碳酸钠水溶液对其进行中和。将产物用乙酸乙酯萃取两次。将所合并的有机层用饱和氯化钠水溶液洗涤并用Na2SO4进行干燥。用快速柱色谱进行纯化(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶3)，得到白色固体形式的产物，4，6-二氯烟酸乙酯3。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.85(s，1H)，7.47(s，1H)，4.43(q，J＝7.2Hz，2H)，1.41(t，J＝7.2Hz，3H)。
将4，6-二氯烟酸乙酯3(43g，195mmol)溶解于乙腈(600mL)中，冷却至0℃并缓慢向其中加入甲基胺(125mL 40％水溶液，977mmol)。将该反应在0℃下搅拌30分钟并将其再加温至室温达3小时。真空除去溶剂并将粗产物用快速柱色谱进行纯化(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶1)。分离出白色固体形式的产物4。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.66(s，1H)，8.12(bs，1H)，6.53(s，1H)，4.34(q，J＝7.2Hz，2H)，2.92(s，3H)，1.37(t，J＝7.2Hz，3H)。
将6-氯-4-甲基氨基烟酸乙酯4(33g，156mmol)溶解于无水THF(500mL)中并将其冷却至-78℃。向该溶液中缓慢加入LAH(12.5g，329mmol)在THF(500mL)中的溶液。在完全加入后，将该反应在-78℃下保持1小时。将该混合物加温至室温并缓慢加入少量MeOH∶乙酸乙酯＝1∶1以破坏过量的LAH。将粗产物用硅藻土塞过滤并将其用乙酸乙酯洗涤两次。在真空除去溶剂后，将粗产物用快速柱色谱进行纯化(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶1)。获得白色固体形式的产物5。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.36(s，1H)，6.48(s，1H)，5.55(bs，1H)，4.63(s，2H)，2.89(d，J＝5.1Hz，3H)。
将化合物5(20g，116mmol)溶解于DCM(250mL)中并向其中加入MnO2(100g，1.16mol)。将该反应在室温下搅拌一夜，然后用硅藻土塞过滤并用乙酸乙酯进行洗涤。在真空除去溶剂后，得到6并将其不进行进一步纯化地用于下一步。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.85(s，1H)，8.59(bs，1H)，8.31(s，1H)，6.59(s，1H)，2.96(d，J＝5.1Hz，3H)。
将6-氯-4-甲基氨基-吡啶-3-甲醛6(19.8g，116mmol)与2-(5-氨基-2-甲基-苯基)乙酸甲酯7(27g，151mmol)和碳酸钾(48.1g，348mmol)一起在DMF(1L)中进行混合。将该混合物加热至100℃达16小时。在冷却至室温并真空除去溶剂后，将粗产物用快速柱色谱进行纯化(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶1)。得到灰色固体形式的题化合物8。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.56(s，1H)，7.63(s，1H)，7.27(s，1H)，7.06(d，J＝8.1Hz，1H)，6.74(dd，J＝2.4，8.1Hz，1H)，6.58(d，J＝2.4Hz，1H)，3.71(s，2H)，2.10(s，3H)。
2-(5-氨基-2-甲基苯基)乙酸甲酯(7)
流程图2 将2-甲基-5-硝基苯甲酸9(125g，690mmol)溶解于无水THF(1.25L)中。在加入硼烷(517mL 2M的THF溶液，1.04mol)后，将该反应在室温下搅拌18h。用碳酸钾水溶液(112.5g，位于2.5L水中)将该反应淬熄。在真空除去THF后，将该水溶液用DCM进行萃取并将所合并的有机层用盐水洗涤并用硫酸钠干燥。在过滤和真空除去溶剂后，得到浅黄色固体形式的产物10。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.29(d，J＝3Hz，1H)，8.50(m，1H)，7.29(m，1H)，4.78(s，2H)，2.41(s，3H)。
将(2-甲基-5-硝基苯基)甲醇10(96g，574mmol)溶解于无水DCM(2.5L)中，冷却至0℃，用甲磺酰氯(72g，632mmol)和二-异丙基乙基胺(89g，689mmol)处理30分钟。将该反应加温至室温并将其再搅拌30分钟。通过加入水(600mL)将其淬熄。将有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并对其进行过滤。在真空除去溶剂后，分离出黄色油状物形式的产物11并将其不进行进一步纯化地用于下一步。
向粗品11(141g，0.575mol)在乙腈(4L)中的溶液中加入氰化钠(84.4g，1.7mol)并将所得的混合物在回流下加热8小时。将该反应冷却至室温并真空除去溶剂。将粗产物溶解于DCM中并对其进行过滤。将滤液用盐水洗涤并用硫酸钠干燥。在真空除去溶剂后，将粗产物用快速柱色谱进行纯化(乙酸乙酯∶石油醚＝1∶1)。得到黄色固体形式的产物12。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.25(d，J＝2.4Hz，1H)，8.13(dd，J＝2.4，8.1Hz，1H)，7.41(d，J＝8.1Hz，1H)，3.78(s，2H)，2.48(s，3H)。
将2-(2-甲基-5-硝基苯基)乙腈12(87g，494mmol)溶解于甲醇∶水＝1∶1(1.2L)中。加入位于水(1L)中的氢氧化钾(277g，4.94mol)并将该反应在回流下加热14小时。在将其冷却至室温并真空除去甲醇后，将水层用DCM和醚洗涤。将所合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并对其进行过滤。在真空除去溶剂后，得到橙色固体形式的产物13。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.07(m，2H)，7.35(d，J＝8.1Hz，1H)，3.78(s，2H)，2.43(s，3H)。
将2-(2-甲基-5-硝基苯基)乙酸13(30g，154mmol)溶解于甲醇(700mL)中并向其中加入HCl(79mL 4M位于1，4-二恶烷中的溶液，316mmol)。将该反应加热回流14小时。在冷却至室温并真空除去溶剂后，将粗产物溶解于水(500mL)中并用2N氢氧化钠将其碱化至pH＞12。将该溶液用乙酸乙酯萃取并将所合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并对其进行过滤。在真空除去溶剂后，得到深黄色固体形式的产物14。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.06(m，2H)，7.33(d，J＝8.4Hz，1H)，3.73(s，3H)，3.72(s，2H)，2.41(s，3H)。
将2-(2-甲基-5-硝基苯基)乙酸甲酯14(32g，153mmol)溶解于乙醇(750mL)中。向该溶液中加入10％钯披碳(3.2g)。在清除反应瓶中的氧后，安装填充了氢气的气囊。将该反应在室温下搅拌16小时。通过用硅藻土塞过滤除去催化剂并真空除去溶剂后，将粗产物用快速柱色谱进行纯化(乙酸乙酯∶石油醚＝5∶1)。分离出黄色油状物形式的产物7。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.9(d，J＝7.8Hz)，6.59(m，1H)，6.56(m，1H)，3.69(s，3H)。
3-(5-氨基-2-甲基苯基)-1，7-二甲基-1，6-萘啶-2(1H)-酮(15)
流程图3 向3-(5-氨基-2-甲基苯基)-7-氯-1-甲基-1，6-萘啶-2-酮8(0.53mmol)在二恶烷(3mL)中的溶液中加入三苯基膦(0.08mmol)、Pd2(dba)3(16umol)和三甲基铝(0.8mL 2.0M的甲苯溶液)。将该混合物脱气10分钟，然后将该反应密封并将其在150℃下微波加热10分钟。将该反应冷却至室温并将其倾倒到1M HCl(30mL)中并用EtOAc进行洗涤。用3M NaOH使水层呈碱性并用EtOAc(3×20mL)对其进行萃取。将所合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤并将其减压干燥。将该黄色油状物粗品用二氧化硅快速柱色谱进行纯化，用二氯甲烷3-5％MeOH作为洗脱剂，从而得到一种黄色的玻璃状固体15。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.67(s，1H)，7.63(s，1H)，7.08(s，1H)，7.05(d，J＝8.4Hz，1H)，6.65(dd，J＝8.4，2.4Hz，1H)，6.57(d，J＝2.4Hz，1H)，3.72(s，3H)，2.70(s，3H)，2.11(s，3H)。MS(m/z)(M+1)+280.1。
3-(5-氨基-2-甲基-苯基)-7-甲基-1-苯基-1H-[1，6]萘啶-2-酮(20)
流程图4 将4，6-二氯烟酸乙酯16(500mg，2.27mmol)溶解于无水二恶烷(10mL)中并向其中加入苯胺(0.66mL，7.72mmol)。将该反应在100℃下搅拌一夜。真空除去溶剂并将粗产物用快速柱色谱进行纯化(己烷∶乙酸乙酯＝10∶1)，从而得到6-氯-4-苯基氨基-烟酸乙酯17。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.77(s，1H)，8.70(s，1H)，7.33-7.37(m，2H)，7.15-7.21(m，3H)，6.80(s，1H)，4.31(q，2H)，1.34(t，3H)。
将6-氯-4-苯基氨基烟酸乙酯17(35mg，0.126mmol)溶解于1.2mL无水THF中并将其冷却至-78℃。向该溶液中缓慢加入LAH溶液(1M THF溶液，0.14mL，0.14mmol)。在完全加入后，将该反应在-78℃下再保持1小时。将该混合物在2小时内加温至室温并缓慢加入少量MeOH∶乙酸乙酯＝1∶1以破坏过量的LAH。将粗产物用硅藻土塞过滤并用乙酸乙酯进行洗涤。在真空除去溶剂后，将粗产物用快速柱色谱进行纯化(己烷∶乙酸乙酯＝4∶1)。获得黄色固体形式的相应的醇。将该醇(26mg，0.11mmol)溶解于DCM(2mL)中并向其中加入MnO2(56mg，0.55mmol)。将该反应在室温下搅拌一夜，然后用硅藻土塞过滤并用乙酸乙酯进行洗涤。在真空除去溶剂后，得到6-氯-4-苯基氨基-吡啶-3-甲醛18并将其不进行进一步纯化地用于下一步。
将6-氯-4-苯基氨基-吡啶-3-甲醛18(21mg，0.09mmol)与2-(5-氨基-2-甲基-苯基)乙酸甲酯7(18mg，0.1mmol)和碳酸钾(37mg，0.27mmol)一起在DMF(2mL)中进行混合。将该混合物加热至100℃达16小时。在冷却至室温并真空除去溶剂后，将粗产物用快速柱色谱进行纯化(己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)。得到灰色固体形式的标题化合物3-(5-氨基-2-甲基-苯基)-7-氯-1-苯基-1H-[1，6[萘啶-2-酮19。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.53(s，1H)，7.68(s，1H)，7.53-7.57(m，2H)，7.47-7.51(dt 1H)，7.20-7.23(m，2H)，6.96(d，1H)，6.59(dd，1H)，6.58(s，1H)，6.52(s，1H)，2.05(s，3H)。
向一个小瓶中装入19(208mg，0.575mmol)、Pd2(dba)3(26mg，0.028mmol)和Ph3P(37mg，0.14mmol)。将该小瓶抽空并用N2再填充。向该小瓶中加入二恶烷(12mL)并将该溶液用AlMe3(0.86mL 2M的己烷溶液1.72mmol)进行处理。将该混合物在微波烘箱中在140℃下加热20分钟。将该小瓶冷却至室温并将该混合物用乙酸乙酯进行萃取。将有机相用1NNaOH溶液、饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤。真空除去溶剂并将粗产物用快速柱色谱进行纯化(己烷∶乙酸乙酯＝2∶1)，从而得到3-(5-氨基-2-甲基-苯基)-7-甲基-1-苯基-1H-[1，6]萘啶-2-酮20。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.71(s，1H)，7.75(s，1H)，7.58-7.63(m，2H)，7.52-7.56(m，1H)，7.28-7.30(m，2H)，7.03(d，1H)，6.67(d，1H)，6.64(d，1H)，6.38(s，1H)，5.32(s，1H)，3.60(brs，2H)，2.46(s，3H)，2.18(s，3H)。
3-溴-5-(三氟甲基)-N-(3-(1，2-二氢-1，7-二甲基-2-氧代-1，6-萘啶-3-基)-4-甲基苯基)苯甲酰胺(22)
流程图5 在室温下，向3-溴-5-三氟甲基-苯甲酸21(193mg，0.716mmol)在DMF(5mL)中的溶液中加入HATU(272mg，0.716mmol)和二-异丙基乙基胺(278mg，2.15mmol)。将所得的混合物搅拌2分钟。向其中加入3-(5-氨基-2-甲基-苯基)-1，7-二甲基-1H-[1，6]萘啶-2-酮15(200mg，0.716mmol)在DMF(5mL)中的溶液。将该反应混合物在室温下搅拌一夜，用EtOAc稀释并用盐水洗涤三次。将有机层干燥(MgSO4)并将其浓缩。将残余物用自动色谱进行纯化，从而得到米白色固体形式的所需产物22。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.50(s，1H)，8.99(s，1H)，8.38(s，1H)，8.22(s，1H)，8.17(s，1H)，8.00(s，1H)，7.72(s，1H)，7.66(d，J＝2.1Hz，1H)，7.62(dd，J＝8.3，2.2Hz，1H)，7.25(d，J＝8.4Hz，1H)，3.63(s，3H)，2.65(s，3H)，2.08(s，3H)。
3-(1，7-二甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，6-萘啶-3-基)-4-甲基苯甲酸(29)
流程图6 将3-溴-4-甲基苯甲酸甲酯23(2.28g，10.0mmol)、硼酸酯(10mmol)、CsF(3.04g，20.0mmol)和Pd(PPh3)4(1.16g，1mmol)加入到一个配有搅拌棒的10-mL的Schlenk烧瓶中。将该烧瓶抽空并用氮气再填充五次。通过注射器加入THF(8mL)。将该Schlenk烧瓶密封并在140℃下在微波条件下加热20分钟。在其反应完全后，真空除去溶剂。将残余物溶解于DCM(200mL)中并用水洗涤。将有机相用Na2SO4干燥，过滤并将其浓缩，从而得到一种粗品。通过硅胶柱色谱进行纯化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶7)，得到两种异构体的混合物，可以将其不进行进一步纯化地用于下一步中。
将该包含3-烯丙基-4-甲基苯甲酸甲酯24的混合物(1.18g，6.18mmol)溶解于CCl4∶ACN∶H2O(60mL∶60mL∶80mL)中。然后，向其中加入NaIO4(6.6g)和RuCl3H2O(0.21g)。将该反应混合物在室温下搅拌10分钟。将该混合物倾倒到水(100mL)中并用DCM(100mL)进行萃取。将有机层用Na2SO4干燥，过滤并将其浓缩，从而得到粗品。将粗品25溶解于MeOH(100mL)中并缓慢向该溶液中加入TMSCHN2(18.0mL，2M的己烷溶液)。将该反应混合物在室温下再搅拌10分钟。在其反应完全后，除去溶剂，从而得到一种粗品26，用硅胶柱色谱对其进行纯化。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.86(s，1H)，7.84(d，J＝10Hz，1H)，7.23(d，J＝10Hz，1H)，3.88(s，3H)，3.68(m，5H)，2.34(s，3H)。LC/MS(M+Na，m/z)245。
将6-氯-4-甲基氨基-吡啶-3-甲醛6(233mg，1.36mmol)与3-((甲氧基羰基)甲基)-4-甲基苯甲酸甲酯26(303mg，1.36mmol)和碳酸钾(564mg，4.08mmol)一起在DMF(8mL)中进行混合。将该混合物加热至100℃达16小时。在冷却至室温并真空除去溶剂后，将粗产物用快速柱色谱进行纯化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶1)。得到固体形式的化合物27。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.73(s，1H)，8.05(s，1H)，7.88(dd，J＝9.4，2.5Hz，1H)，7.78(d，J＝2.5Hz，1H)，7.66(s，1H)，7.43(d，J＝9.4Hz，1H)，3.82(s，3H)，3.62(s，3H)，2.21(s，3H)。LC/MS(M+Na，m/z)365，367。
将3-(1，7-二甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，6-萘啶-3-基)-4-甲基苯甲酸甲酯27(3g，8.6mmol)、AlMe3(13.2mL，26.4mmol)、PPh3(318mg，1.29mmol)和Pd2(dba)3(240mg，0.018mmol)加入到一个配有搅拌棒的50mL的Schlenk烧瓶中。将该烧瓶抽空并用氮气再填充五次。通过注射器加入1，4-二恶烷(50mL)。将该Schlenk烧瓶密封并将其在100℃下加热16小时。在其反应完全后，缓慢加入1N HCl(100mL)以将该反应淬熄。将该混合物用DCM(200mL)进行萃取。将有机相用1N HCl(2×50mL)进一步洗涤。将所合并的水相用6N LiOH处理直至pH＝10。将该黄色固体滤出并将其真空干燥，从而得到产物28，用快速柱色谱对其进行纯化(5-10％MeOH的DCM溶液)。LC/MS(M+1，m/z)323.1。
将3-(1，7-二甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，6-萘啶-3-基)-4-甲基苯甲酸甲酯28(3g，9mmol)混悬于MeOH/水(1∶1，mL)的混合物中并用NaOH(2.2g，55mmol)在80℃下处理2小时。真空除去MeOH。将所得的混合物酸化至pH＝7，将固体滤出，用水洗涤并将其干燥一夜，从而得到29。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.8(s，1H)，8.02(s，1H)，7.88(dd，J＝7.9，1.8Hz，1H)，7.78(d，J＝1.7Hz，1H)，7.44(s，1H)，7.42(d，J＝8Hz，1H)，3.65(s，3H)，2.62(s，3H)，2.23(s，3H)。LC/MS(M+1，m/z)309.1。
3-(1，7-二甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，6-萘啶-3-基)-4-甲基苯甲酰基 异氰酸酯(31)
流程图7 将3-(1，7-二甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，6-萘啶-3-基)-4-甲基苯甲酸29(620mg，2mmol)在SOCl2(2mL)中的溶液在回流下加热2小时。真空除去过量的SOCl2，将所得固体混悬于THF中并将其在室温下加入到氨水中。将所得的固体滤出并将其真空干燥，从而得到白色固体形式的30。LC/MS(M+1，m/z)308.1。
将3-(1，7-二甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，6-萘啶-3-基)-4-甲基苯甲酰胺30(310mg，1mmol)与草酰氯(1mL)一起在1，2-二氯乙烷(2mL)中在回流下加热2小时。蒸发掉溶剂，从而得到白色固体形式的31，将其不进行纯化地进行应用。
实例性化合物的制备 实施例2 3-(5-氨基-2-甲基苯基)-7-氯-1-甲基-1，6-萘啶-2(1H)-酮(A1) 一般操作A
在0℃下，向3-(5-氨基-2-甲基-苯基)-7-氯-1-甲基-1H-[1，6]萘啶-2-酮8(749mg，2.50mmol)和3-三氟甲基苯甲酰氯(521mg，2.50mmol)在DCM(25mL)中的溶液中加入二-异丙基乙基胺(452mg，3.5mmol)。将该反应混合物加温至室温并将其搅拌16小时。真空除去溶剂。将残余物用自动色谱进行纯化，用乙酸乙酯∶己烷(0∶100至100∶0)梯度洗脱，从而得到亮黄色固体形式的所需产物A1。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.59(s，1H)，8.25(s，1H)，8.13(s，1H)，8.08(d，J＝8.0Hz，1H)，7.78(d，J＝7.9Hz，1H)，7.71(s，1H)，7.65-7.60(m，2H)，7.45(dd，J＝8.2，2.0Hz，1H)，7.32(s，1H)，7.20(d，J＝8.4Hz，1H)，3.76(s，3H)，2.04(s，3H)。
也可以用可以根据流程图4合成的其它N-取代的萘啶酮，用同样的操作来制备A型结构的化合物。表1描述了按照实施例2所述的操作，用适宜的试剂制得的化合物。
表1
实施例3 N-[3-(1，7-二甲基-2-氧代-1，2-二氢-[1，6]萘啶-3-基)-4-甲基-苯基]-3-(4-乙基-哌嗪-1-基)-5-三氟甲基-苯甲酰胺(B1) 一般操作B
向3-(4-乙基-哌嗪-1-基)-5-三氟甲基-苯甲酸HCl盐(15.0mg，0.044mmol)和二-异丙基乙基胺(21uL，0.121mmol)在DMF(0.8mL)中的溶液中加入HATU(16.5mg，0.043mmol)。将其在室温下搅拌10分钟后，向该反应中加入3-(5-氨基-2-甲基-苯基)-1，7-二甲基-1H-[1，6]萘啶-2-酮15(11.4mg，0.041mmol)在DMF(0.25mL)中的溶液。将该反应混合物在室温下搅拌1小时。将该反应混合物用DMSO(1mL)稀释并用LCMS进行纯化，从而得到TFA盐形式的标题化合物B1。MS m/z 564.5(M+1)。
表2描述了按照实施例3所述的操作，用适宜的试剂制得的化合物。
表2
实施例4 N-[4-甲基-3-(7-甲基-2-氧代-1-苯基-1，2-二氢-[1，6]萘啶-3-基)-苯基]-3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-5-三氟甲基-苯甲酰胺(C1) 一般操作C
向胺20(18.7mg，0.0548mmol)和3-(三氟甲基)-5-(4-甲基哌嗪-1-基)苯甲酸(21.4mg，0.065mmol)在DCM(1mL)和DMF(0.3mL)中的溶液中加入二-异丙基乙基胺(28μL，0.16mmol)和HATU(21mg，0.082mmol)。将该混合物在室温下搅拌一夜。真空除去溶剂并将粗产物用快速柱色谱进行纯化(己烷∶乙酸乙酯＝2∶1)，从而得到C1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.36(s，1H)，8.88(s，1H)，8.11(s，1H)，7.70-7.73(m，3H)，7.58-7.67(m，4H)，7.40-7.42(m，2H)，7.36(s，1H)，7.27(d，1H)，6.31(s，1H)，3.25-3.30(m，4H)，2.3-2.50(m，4H)，2.40(s，3H)，2.21(s，3H)，2.18(s，3H)。
还可以用可以根据流程图4合成的其它N-取代的萘啶酮类，用同样的操作制备C型结构的化合物。表3描述了按照实施例4所述的操作，用适宜的试剂制得的化合物。
表3
实施例5 N-[3-(1，7-二甲基-2-氧代-1，2-二氢-[1，6]萘啶-3-基)-4-甲基-苯基]-3-哌嗪-1-基-5-三氟甲基-苯甲酰胺(D1) 一般操作D
在氮气气氛下，向一根密封的管中加入3-溴-N-[3-(1，7-二甲基-2-氧代-1，2-二氢-[1，6]萘啶-3-基)-4-甲基-苯基]-5-三氟甲基-苯甲酰胺22(25mg，0.047mmol)、哌嗪(4.9mg，0.056mmol)、Pd2(dba)3(4.3mg，0.0047mmol)、叔-丁醇钠(6.3mg，0.066mmol)、BINAP(5.9mg，0.094mmol)和甲苯(0.30mL)。将该密封的管在油浴中在80℃下加热16小时。真空除去溶剂。将残余物溶解于DMSO(2mL)中并用制备LCMS进行纯化，从而得到白色固体形式的产物D1。1H NMR(400MHz，MeOD)δ8.67(s，1H)，7.86(s，1H)，7.63(s，1H)，7.57-7.52(m，3H)，7.38(s，1H)，7.29(s，1H)，7.20(d，J＝7.7Hz，1H)，3.67(s，3H)，3.28-3.26(m，4H)，3.03-3.02(m，4H)，2.60(s，3H)，2.10(s，3H)，1.82(s，3H)。
表4描述了按照实施例5所述的操作，用适宜的试剂制得的化合物。
表4
实施例6 N-[4-甲基-3-(1-甲基-2-氧代-7-丙基-1，2-二氢-[1，6]萘啶-3-基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺(E2) 一般操作E
将N-[3-(7-氯-1-甲基-2-氧代-1，2-二氢-[1，6]萘啶-3-基)-4-甲基-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺A1(35.4mg，0.075mmol)、反式-丙烯基硼酸(9.7mg，0.113mmol)、PdCl2(PPh3)2(5.3mg，0.0075mmol)和Na2CO3(55.6mg，0.525mmol)在THF和水的混合物(4∶1，0.75mL)中的混悬液用氮气脱气并将其在90℃下加热16小时。真空除去溶剂。将残余物用制备LCMS进行纯化，从而得到白色固体形式的所需产物E1。1H NMR(400MHz，MeOD)δ8.97(s，1H)，8.26(s，1H)，8.21(d，J＝7.6Hz，1H)，8.04(s，1H)，7.90(d，J＝7.2Hz，1H)，7.84(s，1H)，7.76-7.73(m，2H)，7.61(d，J＝5.4Hz，1H)，7.33(d，J＝8.1Hz，1H)，7.18-7.12(m，1H)，6.73(d，J＝15.9Hz，1H)，3.84(s，3H)，2.23(s，3H)，2.10(d，J＝6.8Hz，3H)。
向N-[4-甲基-3-(1-甲基-2-氧代-7-丙烯基-1，2-二氢-[1，6]萘啶-3-基)-苯基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺E1(12mg，0.025mmol)在MeOH(2mL)中的溶液中加入10％钯披活性碳(潮湿的，12mg)。将所得的混合物在氢气下在室温下搅拌1小时。将Pd/C滤出并将滤液浓缩。将残余物用制备LCMS进行纯化，从而得到白色固体形式的所需产物E2。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.48(s，1H)，8.84(s，1H)，8.31(s，1H)，8.27(d，J＝8.0Hz，1H)，7.98(s，1H)，7.96(d，J＝8.0Hz，1H)，7.79(t，J＝7.7Hz，1H)，7.73(dd，J＝8.5，2.2Hz，1H)，7.67(s，1H)，7.41(s，1H)，7.29(d，J＝8.5Hz，1H)，3.67(s，3H)，2.84(t，J＝7.5Hz，2H)，2.14(s，3H)，1.78(q，J＝7.5Hz，3H)，0.96(t，J＝7.3Hz，3H)。
表5描述了按照实施例6所述的操作，用适宜的试剂制得的化合物。
表5
实施例7 1-(3-(1，7-二甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，6-萘啶-3-基)-4-甲基苯基)-3-(4-甲基苄基)脲(F24) 一般操作F
向3-(5-氨基-2-甲基苯基)-1，7-二甲基-1，6-萘啶-2(1H)-酮15(20mg，0.072mmol)在THF(1mL)中的溶液中加入三光气(6.38mg，0.022mmol)和DIEA(0.158mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌30分钟，然后向其中加入4-甲基苄基胺(0.108mmol)并将其继续在室温下搅拌8小时。将滤液浓缩。将残余物用制备LCMS进行纯化，从而得到所需产物F24。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.04(s，1H)，8.57(s，1H)，8.0(s，1H)，7.77(s，1H)，7.42(s，1H)，7.23(d，J＝8.8Hz，1H)，7.16(m，4H)，4.22(d，J＝5.6Hz，2H)，2.71(s，3H)，2.49(s，3H)，2.27(s，3H)，2.06(s，3H)。
表6描述了按照实施例7所述的操作，用适宜的试剂制得的化合物。
表6
实施例8 N-(3-(1，7-二甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，6-萘啶-3-基)-4-甲基苯基氨基甲酰基)-4-甲氧基苯甲酰胺(G8) 一般操作G
向4-甲氧基苯甲酰胺(50mg，0.33mmol)在1，2-二氯乙烷(2mL)中的溶液中加入草酰氯(0.33mmol)。将该反应混合物在55℃下加热1小时。在将该反应混合物冷却时，向其中加入3-(5-氨基-2-甲基苯基)-1，7-二甲基-1，6-萘啶-2(1H)-酮15(0.16mmol)并将其继续加热8小时。将该反应浓缩并用制备LCMS进行纯化，从而得到所需产物G8。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.03(s，1H)，8.05(m，3H)，7.76(s，1H)，7.50(m，2H)，7.28(d，J＝8.0Hz，1H)，7.06(d，J＝8.8Hz，2H)，2.72(s，3H)，2.51(s，3H)，2.13(s，3H)，2.07(s，3H)。
表7描述了按照实施例8所述的操作，用适宜的试剂制得的化合物。
表7
实施例9 1-苯乙酮基-3-(3-(1，2-二氢-1，7-二甲基-2-氧代-1，6-萘啶-3-基)-4-甲基苯基)硫脲(H1) 一般操作H
向苯甲酰氯(62μL，0.54mmol)在乙腈(3mL)中的溶液中加入KSCN(52mg，0.54mmol)并将其在55℃下加热1小时。在冷却至室温时，将该反应液浓缩至干燥，将其重新溶解于乙醇(2mL)中，然后用15在甲苯/乙醇(5/1mL)中的溶液对其进行处理。将该多相的反应混合物在室温下搅拌6小时，然后用冰浴冷却并用乙醇过滤。将沉淀用水和乙醇洗涤。将该白色固体真空风干。1H NMR 400MHz(DMSO-d6)δ12.65(s，1H)，11.60(s，1H)，8.83(s，1H)，8.00-7.97(m，3H)，7.72-7.65(m，2H)，7.57-7.52(m，3H)，7.47(s，1H)，7.34(d，J＝8Hz，1H)，3.66(s，3H)，2.62(s，3H)，2.17(s，3H)；MS m/z443.1(M+1)。
实施例10 N-(3-(1，2-二氢-7-甲氧基-1-甲基-2-氧代-1，6-萘啶-3-基)-4-甲基苯基)苯甲酰胺(I1)
将N-(3-(7-氯-1，2-二氢-1-甲基-2-氧代-1，6-萘啶-3-基)-4-甲基苯基)苯甲酰胺A6(70mg，0.17mmol)用甲醇钠(0.8mL 0.5M的甲醇溶液)处理并将其加热至65℃达3小时。将该反应冷却至室温并用EtOAc和氯化铵水溶液对其进行分配。将有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并除去溶剂。将粗产物溶解于DMF(1mL)中并用制备LCMS进行纯化，从而得到所需产物。1H NMR 400MHz(MeOD)δ8.56(s，1H)，7.92(d，J＝8Hz，2H)，7.88(s，1H)，7.64-7.46(m，5H)，7.28(d，J＝8Hz，1H)，6.84(1H)，4.05(s，3H)，3.71(s，3H)，2.20(s，3H)；MS m/z 400.2(M+1)。
表8描述了按照与上述那些方法类似的方法制得的本发明的其它实例性化合物。
表8
实施例11 N-(3-(7-(二甲基氨基)-1，2-二氢-1-甲基-2-氧代-1，6-萘啶-3-基)-4-甲基苯基)苯甲酰胺(J1)
将N-(3-(7-氯-1，2-二氢-1-甲基-2-氧代-1，6-萘啶-3-基)-4-甲基苯基)苯甲酰胺A6(45mg，0.11mmol)溶解于NMP(1mL)中并用二甲胺(0.56mL2.0M的甲醇溶液)进行处理。将该反应混合物加热至100℃达12小时。在冷却至室温时，将该反应用制备LCMS进行纯化。1H NMR 400MHz(DMSO-d6)δ10.23(s，1H)，8.51(s，1H)，7.97-7.94(m，2H)，7.78(s，1H)，7.68-7.66(m，2H)，7.61-7.51(m，3H)，7.23(d，J＝9Hz，1H)，6.37(s，1H)，3.61(s，3H)，3.20(s，6H)，2.12(s，3H)；MS m/z 413.2(M+1)。
实施例12 1-(3-(7-(二甲基氨基)-1，2-二氢-1-甲基-2-氧代-1，6-萘啶-3-基)-4-甲基苯基)-3-苯基脲(K1)
将1-(3-(7-氯-1，2-二氢-1-甲基-2-氧代-1，6-萘啶-3-基)-4-甲基苯基)-3-苯基脲A6(50mg，0.12mmol)溶解于NMP(1mL)中并用二甲胺(0.60mL2.0M的甲醇溶液)进行处理。将该反应混合物加热至100℃达12小时。在冷却至室温时，将该反应用制备LCMS进行纯化。1H NMR 400MHz(DMSO-d6)δ8.65(s，1H)，8.62(s，1H)，8.50(s，1H)，7.75(s，1H)，7.45-7.42(m，2H)，7.38(d，J＝2Hz，1H)，7.29-7.25(m，3H)，7.15(d，J＝8Hz，1H)，6.96(m，1H)，6.37(s，1H)，3.60(s，3H)，3.19(s，6H)，2.08(s，3H)；MS m/z428.2(M+1)。
实施例13 1-甲基-7-(甲硫基)-2-氧代-1，6-萘啶-3-基)-4-甲基苯基)苯甲酰胺(L1)
将N-(3-(7-氯-1，2-二氢-1-甲基-2-氧代-1，6-萘啶-3-基)-4-甲基苯基)苯甲酰胺A6(70mg 0.17mmol)溶解于NMP(1mL)中并用甲硫醇酸钠(15mg，0.21mmol)处理。将该反应混合物加热至100℃达12小时。将该反应冷却至室温并用EtOAc和水对其进行分配。将有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并除去溶剂。将粗产物溶解于DMF(1mL)中并用制备LCMS进行纯化。1H NMR 400MHz(MeOD)δ8.82(s，1H)，7.95-7.92(m，2H)，7.67-7.50(m，5H)，7.41(s，1H)，7.30(d，J＝8Hz，1H)，3.78(s，3H)，2.77(s，3H)，2.21(s，3H)；MS m/z 416.1(M+1)。
实施例14 3-(1，7-二甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，6-萘啶-3-基)-4-甲基-N-(5-甲基吡啶-2-基)苯甲酰胺(M6)
将3-(1，7-二甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，6-萘啶-3-基)-4-甲基苯甲酸29(50mg，0.17mmol)在DMF(1mL)中的溶液用HATU(97mg，0.255mmol)、5-甲基吡啶-2-胺(22mg，0.2mmol)和DIPEA(0.089mL，0.51mmol)在80℃下处理2小时。将残余物用制备LC/MS进行纯化，从而得到米白色固体形式的所需产物M6。1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ9.12(s，1H)，8.26(m，1H)，8.22(d，J＝8.7Hz，1H)，8.16(s，1H)，8.07(dd，J＝8，1.6Hz，1H)，8.02(s，1H)，7.94(s，1H)，7.86(m，1H)，7.57(d，J＝8Hz，1H)，3.85(s，3H)，2.87(s，3H)，2.46(s，3H)，2.35(s，3H)；LC/MS(M+1，m/z)399.2。
实施例15 3-(1，7-二甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，6-萘啶-3-基)-N-(5-氟吡啶-2-基)-4-甲基苯甲酰胺(M32)
将3-(1，7-二甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，6-萘啶-3-基)-4-甲基苯甲酸29(154mg，0.5mmol)在SOCl2(1mL)中的溶液在回流下加热2小时。真空除去过量的SOCl2并将所得的固体在室温下加入到5-氟吡啶-2-胺(112mg，1mmol)和吡啶(0.4mL，5mmol)的溶液中。将所得的混合物搅拌30分钟并对其进行蒸发。将残余物用制备LC/MS进行纯化，从而得到米白色固体形式的所需产物M32。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.84(s，1H)，8.28(m，1H)，8.04(s，1H)，7.95(dd，J＝8，2Hz，1H)，7.86(d，J＝1.9Hz，1H)，7.65(dt，J＝9.1，2.9Hz，1H)，7.57(s，1H)，7.48(d，J＝8Hz，1H)，3.8(s，3H)，2.73(s，3H)，2.32(s，3H)；LC/MS(M+1，m/z)403.1。
表9描述了按照与上述那些方法类似的方法制得的本发明的其它实例性化合物。
表9
实施例16 3-(1，7-二甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，6-萘啶-3-基)-4-甲基-N-(苯基氨基甲酰基)苯甲酰胺(N1)
在室温下，将3-(1，7-二甲基-2-氧代-1，2-二氢-1，6-萘啶-3-基)-4-甲基苯甲酰基异氰酸酯31(10mg，0.03mmol)和苯胺(3mg，0.3mmol)一起混悬于DCM中达1小时。除去溶剂并将残余物用制备LC/MS进行纯化，从而得到所需产物N1。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11(s，1H)，10.8(s，1H)，8.99(s，1H)，8.1(s，1H)，8.01(d，J＝8Hz，1H)，7.95(s，1H)，7.69(s，1H)，7.59(s，1H)，7.57(s，1H)，7.48(d，J＝7.9Hz，1H)，7.36(m，2H)，7.12(t，J＝7Hz，1H)，2.7(s，3H)，2.51(s，3H)，2.25(s，3H)；LC/MS(M+1，m/z)427.2。
表10描述了按照与上述那些方法类似的方法制得的本发明的其它实例性化合物。
表10
表11描述了相关化合物(1-5)和可以用上述一般方法A-N中的任意一种制备的其它化合物。
表11
试验 用下面一般性描述的试验或现有技术中已知的试验对本发明的化合物进行测定以测量其抑制蛋白激酶如c-kit、PDGFRα、PDGFRβ、CSF1R、Abl、BCR-Abl、CSK、JNK1、JNK2、p38、p70S6K、TGFβ、SRC、EGFR、trkB、FGFR3、FLT3、Fes、Lck、Syk、RAF、MKK4、MKK6、SAPK2β、BRK、KDR、c-raf或b-raf激酶或其突变型的能力。例如，对本发明的化合物进行测定以测量其选择性抑制野生型Ba/F3细胞和用Tel c-kit激酶和Tel PDGFR融合的酪氨酸激酶转化的Ba/F3细胞增殖的能力和选择性抑制Mo7e细胞的SCF依赖性增殖的能力。
增殖试验BaF3 Library-Bright glo读数方案 对化合物抑制野生型Ba/F3细胞和用Tel融合的酪氨酸激酶转化的Ba/F3细胞增殖的能力进行分析。将未被转化的Ba/F3细胞维持在包含重组IL3的培养基中。将细胞以每孔50μL培养基中5,000个细胞的密度涂到384-孔TC板中，并以0.06nM至10μM的浓度向其中加入试验化合物。然后，将这些细胞在37℃、5％CO2下培养48小时。在对细胞进行培养后，按照制造商的指导向各孔中加入25μL BRIGHT
(Promega)，并用Analyst GT-Luminescence mode-50000积分时间在RLU中对这些板进行读数。由剂量响应曲线确定IC50值(50％抑制所需的化合物浓度)。
Ba/F3FL FLT3增殖试验 所用鼠科动物细胞系是过表达全长FLT3构建体的Ba/F3鼠科动物pro-B细胞系。将这些细胞维持在补加了青霉素50μg/mL、链霉素50μg/mL和L-谷酰胺200mM的RPMI 1640/10％胎牛血清(RPMI/FBS)中，同时加入鼠科动物重组IL3。Ba/F3全长FLT3细胞经历16小时的IL3饥饿，然后以每孔25μL培养基中5,000个细胞的密度将其涂到384-孔TC板中；并以0.06nM至10μM的浓度向其中加入试验化合物。在加入化合物后，以适宜的浓度向各孔25μL的培养基中加入FLT3配体或IL3来进行细胞毒性控制。然后，将这些细胞在37℃、5％CO2下培养48小时。在对细胞进行培养后，按照制造商的指导向各孔中加入25μL BRIGHT
(Promega)并用Analyst GT-Luminescence mode-50000积分时间在RLU中对这些板进行读数。
Mo7e试验 Mo7e细胞是人前巨核细胞白血病细胞系，其依赖SCF来进行增殖。用内源性表达c-kit的Mo7e细胞在96-孔板中对本文所述化合物抑制SCF依赖性增殖的作用进行试验。简单地说，对两倍系列稀释的试验化合物(Cmax＝10μM)对用人重组SCF刺激的Mo7e细胞的抗增殖活性进行评估。将其在37℃下培养48小时后，用得自Promega的MTT比色测定测量细胞活力。
对细胞BCR-Abl依赖性增殖的抑制(高通量方法) 可将鼠细胞系32D造血祖细胞系用BCR-Abl cDNA转化(32D-p210)。将这些细胞保持在补充有青霉素(50μg/mL)、链霉素(50μg/mL)和L-谷酰胺(200mM)的RPMI/10％胎牛血清(RPMI/FCS)中。将未转化的32D细胞保持在类似条件下并添加15％WEHI条件培养基作为IL3源。
将50μl 32D或32D-p210细胞混悬液以每孔5000个细胞的密度接种于Greiner 384孔微孔板(黑色)中。向各孔中加入50nl测试化合物(1mM，在DMSO储备液中)(包含STI571作为阳性对照)。在37℃、5％CO2下将细胞培养72小时。向各孔中加入10μl 60％的Alamar BlueTM溶液(Tek诊断试剂)并将细胞再培养24小时。使用AcquestTM系统(Molecular Devices)测定荧光强度(530nm激发，580nm发射)。
对细胞BCR-Abl依赖性增殖的抑制 将32D-p210细胞以每孔15,000个细胞的密度接种于96孔TC板中。向各孔中加入50μL测试化合物的两倍系列稀释液(Cmax为40μM)(包含STI571作为阳性对照)。将细胞在37℃、5％CO2下培养48小时后，向各孔中加入15μL MTT(Promega)并将细胞再培养5小时。通过分光光度法定量测定570nm处的光密度并通过量效曲线确定IC50值。
对细胞周期分布的影响 将32D和32D-p210细胞以每孔5mL培养基中2.5×106个细胞的数量接种于6孔TC板中并加入1或10μM的测试化合物(包含STI571作为对照)。然后，将细胞在37℃、5％CO2下培养24或48小时。用PBS洗涤2ml细胞混悬液，在70％EtOH中固定1小时并用PBS/EDTA/RNase A处理30分钟。加入碘化丙锭(Cf＝10μg/ml)并用流式细胞仪在FACScaliburTM系统(BD Biosciences)上测定荧光强度。在一些实施方案中，本发明的测试化合物显示对32D-p210细胞具有细胞凋亡作用但不在32D母本细胞中诱导细胞凋亡。
对细胞BCR-Abl自身磷酸化的影响 使用c-abl特异性捕获抗体和抗磷酸酪氨酸抗体通过捕获Elisa测定BCR-Abl的自身磷酸化作用。将32D-p210细胞以每孔50μL培养基中2×105个细胞的数量加入96孔TC板中。每孔加入50μL测试化合物的两倍系列稀释液(Cmax为10μM)(包含STI571作为阳性对照)。在37℃、5％CO2下培养细胞90分钟。然后，将细胞在冰上用150μL含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂的裂解缓冲液(50mM Tris-HCl，pH7.4，150mM NaCl，5mM EDTA，1mM EGTA和1％NP-40)处理1小时。将50μL细胞溶胞产物加到96孔光学板中，该板预先用抗-abl特异性抗体涂覆和封闭。在4℃下培养该板4小时。用TBS-吐温20缓冲液洗涤后，加入50μL结合有碱性磷酸酶的抗-磷酸酪氨酸抗体并将该板在4℃下培养过夜。用TBS-吐温20缓冲液洗涤后，加入90μL发光底物并用AcquestTM体系(Molecular Devices)定量测定发光情况。
对表达突变型BCR-Abl的细胞增殖的影响 测试本发明化合物对表达野生型或突变型BCR-Abl(G250E、E255V、T315I、F317L、M351T)的Ba/F3细胞的抗增殖作用，所述BCR-Abl可以引起对STI571耐受或对其敏感性降低。以10、3.3、1.1和0.37μM的浓度如上所述(培养基中不含IL3)测试这些化合物对表达突变型-BCR-Abl的细胞和未转化的细胞的抗增殖作用。由如上所述获得的量效曲线确定对未转化的细胞没有毒性的化合物的IC50值。
FGFR3(酶试验) 在终体积为10μL的含有0.25μg/mL酶的激酶缓冲液(30mM Tris-HClpH7.5、15mM MgCl2、4.5mM MnCl2、15μM Na3VO4和50μg/mL BSA)和底物(5μg/mL生物素-聚-EY(Glu，Tyr)(CIS-US，Inc.)和3μM ATP)中，使用纯化的FGFR3(Upstate)进行激酶活性试验。制备两种溶液首先将含有位于激酶缓冲液中的FGFR3酶的5μL的第一种溶液分配到384-型
(Perkin-Elmer)中，随后加入溶于DMSO中的50nL的化合物。然后，向各孔中加入含有位于激酶缓冲液中的底物(聚-EY)和ATP的第二种溶液(5μl)。将该反应在室温下培养1小时，通过加入10μL HTRF检测混合物来终止该反应，所述混合物含有30mM Tris-HCl pH7.5、0.5MKF、50mM ETDA、0.2mg/mL BSA、15μg/mL链霉抗生物素-XL665(CIS-US，Inc.)和150ng/mL结合有抗磷酸酪氨酸抗体的穴合物(CIS-US，Inc.)。于室温下培养1小时使链霉抗生物素-生物素相互作用后，在Analyst GT(Molecular Devices Corp.)上读取随时间改变的荧光信号。根据每一化合物在12个浓度下(从50μM到0.28nM的1∶3稀释液)的抑制百分比的线性回归分析计算IC50值。
FGFR3(细胞试验) 测试本发明化合物抑制转化的Ba/F3-TEL-FGFR3细胞增殖(其依赖于FGFR3细胞激酶的活性)的能力。将Ba/F3-TEL-FGFR3在混悬液中培养至多达800,000细胞/mL，用补充有10％胎牛血清的RPMI1640作为培养基。将细胞以每孔5000个细胞分配于384-孔板中的50μL培养基中。将本发明化合物在二甲基亚砜(DMSO)中溶解和稀释。用DMSO制备12个1∶3的系列稀释液以产生范围通常在10mM到0.05μM的浓度梯度。将50nL的稀释化合物加到细胞中，在细胞培养箱中培养48小时。向细胞中加入
(TREK Diagnostic Systems)(可用于监测由增殖细胞产生的还原性环境)，终浓度达到10％。在37℃的细胞培养器中再培养4小时后，在Analyst GT(Molecular Devices Corp.)上定量测定被还原的
的荧光信号(于530nm激发，于580nm发射)。根据每个化合物12个浓度的抑制百分比的线性回归分析来计算IC50值。
FLT3和PDGFRβ(细胞试验) 采用以上关于FGFR3细胞活性所述的相同方法，但分别采用Ba/F3-FLT3-ITD和Ba/F3-Tel-PDGFRβ代替Ba/F3-TEL-FGFR3，分析本发明化合物对FLT3和PDGFRβ的细胞活性的影响。
b-Raf(酶试验) 测试本发明化合物抑制b-RAF活性的能力。在黑色壁和透明底的384孔MaxiSorp板(NUNC)中进行测定。将底物IκBα在DPBS中稀释(1∶750)并向各孔中加入15μL。将这些板在4℃下培养过夜并用EMBLA板清洗器以TBST(25mM Tris，pH8.0，150mM NaCl和0.05％吐温-20)洗涤3次。在室温下用Superblock(15μL/孔)封闭板子3小时，用TBST洗涤3次并轻拍干燥。将含有20μM ATP(10μL)的测试缓冲液加入各孔，然后加入100nL或500nL化合物。将B-RAF在测试缓冲液中稀释(1μL稀释至25μl)并将10μl被稀释的B-RAF加入各孔(0.4μg/孔)。将这些板在室温下培养2.5小时。用TBST洗涤该板6次以终止激酶反应。以Superblock稀释Phosph-IκBα(Ser32/36)抗体(1∶10,000)并将15μL加入各孔。将这些板在4℃下培养过夜并用TBST洗涤6次。用Superblock稀释结合有AP的山羊-抗-小鼠IgG(1∶1,500)并将15μL加到各孔中。将这些板在室温下培养1小时并用TBST洗涤6次。在各孔中加入15μL Attophos AP底物并将这些板在室温下培养15分钟。在Acquest或Analyst GT上使用FluorescenceIntensity Nanxin BBT阴离子(505分色镜)对这些板进行读数。
b-Raf(细胞试验) 在A375细胞中测试本发明化合物抑制MEK磷酸化的能力。A375细胞系(ATCC)得自人类黑色素瘤患者，它在B-Raf基因上具有V599E突变。由于B-Raf突变使得磷酸化的MEK水平上升。在无血清培养基中，在37℃下将接近汇合至汇合的A375细胞与化合物一起培养2小时。然后用冷PBS洗涤细胞一次并用含有1％TritonX100的裂解缓冲液裂解细胞。离心后，上清液进行SDS-PAGE，接着将其转移到硝酸纤维素膜上。然后将膜用抗-磷酸MEK抗体(ser217/221)(细胞信号传导)进行蛋白质印迹分析。通过磷酸化MEK在硝酸纤维素膜上的条带密度考察磷酸化MEK的量。
人TG-HA-VSMC增殖试验 使人TG-HA-VSMC细胞(ATCC)在补加了10％FBS的DMEM中生长至80-90％的融合，然后将其以6e4个细胞/mL的数量重新混悬于补加了1％FBS和30ng/mL重组人PDGF-BB的DMEM中。然后，将这些细胞以50μL/孔的数量等分至384-孔板中，将其在37℃下培养20小时，然后用0.5μL 100x化合物将其在37℃下处理48小时。在处理后，向各孔中加入25μL CellTiter-Glo处理15分钟，然后在CLIPR(Molecular Devices)上对这些板进行读数。
UPSTATE KINASE PROFILERTM-放射-酶促滤纸结合试验 对本发明化合物抑制激酶小组各成员的能力进行评价，所述激酶如c-kit、PDGFRα、PDGFRβ、CSF1R、Abl、BCR-Abl、CSK、JNK1、JNK2、p38、p70S6K、TGFβ、SRC、EGFR、trkB、FGFR3、FLT3、Fes、Lck、Syk、RAF、MKK4、MKK6、SAPK2β、BRK、KDR、c-raf和b-raf激酶。按照该一般方法一式两份地测定终浓度为10μM的化合物。需要注意的是激酶缓冲液成分和底物随“Upstate Kinase ProfilerTM”中所包含的激酶的不同而变化。在置于冰上的微量离心管中混合激酶缓冲液(2.5μL，10x，需要时可含有MnCl2)、活化的激酶(0.001-0.01个单位；2.5μL)、在激酶缓冲液中的特异性或多聚(Glu4-Tyr)肽(5-500μM或0.01mg/ml)和激酶缓冲液(50μM；5μL)。加入Mg/ATP混合物(10μL；67.5(或33.75)mM MgCl2、450或225μM ATP和1μCi/μl[γ-32P]-ATP(3000Ci/mmol))并在约30℃下将反应培养约10分钟。将反应混合物(20μl)点在2cm×2cm P81(磷酸纤维素，用于带正电的肽底物)或Whatman No.1(用于多聚(Glu4-Tyr)肽底物)方形纸上。用0.75％磷酸洗涤该方形纸4次，每次5分钟，并用丙酮洗涤一次，洗涤5分钟。将该方形纸转移到闪烁小瓶中，加入闪烁混合液(5ml)并用Beckman闪烁计数器定量掺入肽底物中的32P(cpm)。计算每个反应的抑制百分比。
游离形式或可药用盐形式的式(1)、(2)或(3)的化合物表现出有价值的药理学性质，例如，如本申请的体外试验所述。在上述实验中，IC50值是以产生的细胞计数比用不含抑制剂的对照所获得的细胞计数低50％的所讨论试验化合物的浓度的形式给出的。一般而言，本发明的化合物具有1nM至10μM的IC50值。在一些实施例中，本发明的化合物具有0.01μM至5μM的IC50值。在另一些实例中，本发明的化合物具有0.01μM至1μM的IC50值，或者更特定地具有1nM至1μM的IC50值。在另一些实例中，本发明的化合物具有低于1nM或高于10μM的IC50值。式(1)或(2)的化合物在10μM下对一种或多种下面的激酶可能表现出高于50％的抑制百分比，或者在另一些实施方案中，可能表现出高于约70％的抑制百分比c-kit、PDGFRα、PDGFRβ、CSF1R、Abl、BCR-Abl、CSK、JNK1、JNK2、p38、p70S6K、TGFβ、SRC、EGFR、trkB、FGFR3、FLT3、Fes、Lck、Syk、RAF、MKK4、MKK6、SAPK2β、BRK、KDR、c-raf或b-raf激酶或其突变型。
应当理解，本文所述的实施例和实施方案仅仅是出于举例说明的目的，本领域技术人员可以据此进行各种修饰或改变，并且这些修饰和改变均包括在本申请的精神和范围内以及所附权利要求的保护范围之内。本文所引用的所有公开出版物、专利和专利申请均引入本文作为参考并用于所有目的。
权利要求
1.式(1)的化合物
或其可药用的盐，其中
Y和Z独立地是CR或N；
L是NR-C(O)、C(O)NR、C(O)NRC(O)NR、NRC(O)NR、NRC(O)NRC(O)、NRC(S)NRCO、NRS(O)0-2或NRCONRS(O)0-2；
R1和R3独立地是卤素、(CR2)kR6、(CR2)kNR7R8、(CR2)kOR9、(CR2)kSR9或任选地被取代的C1-6烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基；
R2是(CR2)kR6、(CR2)1-4OR9、(CR2)1-4NR7R8或任选地被取代的C1-6烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基；
R4是(CR2)kR6、(CR2)kOR9或任选地被取代的C1-6烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基；
R5是H、卤素或C1-6烷基；
R6是任选地被取代的C3-7环烷基、或任选地被取代的5-12员芳基、杂环或杂芳基；
R7和R8独立地是H、(CR2)kNR7R8、(CR2)kOR9、(CR2)k-R6或任选地被取代的C1-6烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基；或者R7和R8可以和各NR7R8中的N一起形成任选地被取代的环；
R9是H、(CR2)k-R6或任选地被取代的C1-6烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基；
各R是H或具有任选地被N、O、＝O、S取代或替代的碳的C1-6烷基；或者(CR2)k中的两个亚烷基可以形成链烯基或炔基；
各任选地被取代的C1-6烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基任选地被卤化或任选地被N、O或S取代；
k是0-6；且
n是0-2；
条件是当R1是卤素、(CR2)kNR7R8或C5-8杂环烷基且R2是C1-6烷基时，L是C(O)NRC(O)NR、NRC(O)NR、NRC(O)NRC(O)、NRC(S)NRCO或NRCONRS(O)0-2。
2.权利要求1的化合物，其中Y是CH。
3.权利要求1的化合物，其中Z是N。
4.权利要求1的化合物，其中R1是卤素、(CR2)kR6、(CR2)kNR7R8、(CR2)kOR9、(CR2)kSR9或任选地被取代的C1-6烷基或C2-6链烯基；
R2是C1-6烷基、C2-6链烯基、(CR2)kR6、(CR2)1-4OR9或(CR2)1-4NR7R8；
R6是苯基、C3-7环烷基或包含N、O或S的5-7员杂环或杂芳基，其各自任选地被卤素或任选地被卤化的C1-6烷基所取代；
R7、R8和R9独立地是H或C1-6烷基；或者R7和R8可以一起形成一种任选地被取代的5-7员杂环；且
各k是0-4。
5.权利要求1的化合物，其中n是1；且R3是卤素或C1-6烷基。
6.权利要求1的化合物，其中R4是C1-6烷基、(CR2)kO(C1-6烷基)或(CR2)kR6；
R6是任选地被取代的苯基、C3-7环烷基或包含N、O或S的5-12员杂环或杂芳基；且
k是0-4。
7.权利要求6的化合物，其中所述5-12员杂环或杂芳基是噻唑基、噻吩基、哌啶基、哌嗪基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、吡唑基、呋喃基、吡咯基、二氢吡咯基、噁唑基、异噁唑基、三唑基、氮杂环丁烷基、噻二唑基、苯并咪唑基、喹啉基、四氢喹啉基、苯并噻唑基、苯并噻吩基、苯并间二氧杂环戊烯基、吲唑基、吲哚基、茚基、二氢茚基或二氢苯并呋喃。
8.权利要求6的化合物，其中所述任选地被取代的苯基、C3-7环烷基或包含N、O或S的5-12员杂环或杂芳基任选地被一个或多个选自卤素、氰基、硝基、NR7R8、NRCOR7、NRCO(CR2)pNR7R8、NRCONR(CR2)pNR7R8、(CR2)pOR9、(CR2)pR10和任选地被卤素、羟基、C1-6烷氧基或氰基取代的C1-6烷基的取代基所取代；
各R是H或具有任选地被N、O、＝O、S取代或替代的碳的C1-6烷基；或者(CR2)p中的两个亚烷基可以形成链烯基或炔基；
R7和R8独立地是H、C1-6烷基或(CR2)p-R10；或者R7和R8可以和各NR7R8中的N一起形成任选地被取代的环；
R9是H、任选地被卤化的C1-6烷基或(CR2)pR10；
R10是C3-7环烷基、芳基、或包含N、O或S的5-7员杂环或杂芳基，其各自任选地被一个或多个所述取代基所取代；且
p是0-4。
9.权利要求1的化合物，其中所述化合物是式(2)的化合物
10.权利要求9的化合物，其中R1是卤素、(CR2)kR6、(CR2)kNR7R8、(CR2)kOR9、(CR2)kSR9或任选地被取代的C1-6烷基或C2-6链烯基；
R2是C1-6烷基、(CR2)R6’、(CR2)1-4OR9或(CR2)1-4NR7R8；
R3是卤素或C1-6烷基；
R4是C1-6烷基、(CR2)kO(C1-6烷基)或(CR2)kR6；
R6’是任选地被取代的苯基、C3-7环烷基或包含N、O或S的5-7员杂环或杂芳基；
R6是任选地被取代的苯基、C3-7环烷基或包含N、O或S的5-12员杂环或杂芳基；
R7、R8和R9独立地是H或C1-6烷基；或者R7和R8可以一起形成一种任选地被取代的5-7员杂环；且
各k是0-4。
11.权利要求10的化合物，其中R6’任选地被卤素或任选地被卤化的C1-6烷基所取代；且R6任选地被一个或多个选自卤素、氰基、硝基、NR7R8、NRCOR7、NRCO(CR2)pNR7R8、NRCONR(CR2)pNR7R8、(CR2)pOR9、(CR2)pR10、任选地被卤素、羟基、C1-6烷氧基或氰基取代的C1-6烷基的取代基所取代；
各R是H或具有任选地被N、O、＝O、S取代或替代的碳的C1-6烷基；或者(CR2)p中的两个亚烷基可以形成链烯基或炔基；
R7和R8独立地是H、C1-6烷基或(CR2)p-R10；或者R7和R8可以和各NR7R8中的N一起形成任选地被取代的环；
R9是H、任选地被卤化的C1-6烷基或(CR2)pR10；
R10是任选地被取代的C3-7环烷基、芳基或包含N、O或S的5-7员杂环或杂芳基；并且
p是0-4；
其中所述任选地被取代的C3-7环烷基、芳基或包含N、O或S的5-7员杂环或杂芳基各自可进一步被一个或多个所述取代基所取代。
12.权利要求10的化合物，其中所述化合物是式(3)的化合物
13.权利要求1的化合物，其中所述化合物选自
14.一种药物组合物，其包含治疗有效量的权利要求1-13中任意一项的化合物和可药用的赋形剂。
15.权利要求1-13中任意一项的化合物或其药物组合物用于调节激酶活性的应用，其中所述激酶是c-kit、PDGFRα、PDGFRβ、CSF1R、Abl、BCR-Abl、CSK、JNK1、JNK2、p38、p70S6K、TGFβ、SRC、EGFR、trkB、FGFR3、Fes、Lck、Syk、RAF、MKK4、MKK6、SAPK2β、BRK、Fms、KDR、c-raf或b-raf激酶或其突变型。
16.一种调节激酶活性的方法，其包括给需要其的系统或个体施用治疗有效量的权利要求1的化合物或其可药用的盐或药物组合物，其中所述激酶是c-kit、PDGFRα、PDGFRβ、CSF1R、Abl、BCR-Abl、CSK、JNK1、JNK2、p38、p70S6K、TGFβ、SRC、EGFR、trkB、FGFR3、Fes、Lck、Syk、RAF、MKK4、MKK6、SAPK2β、BRK、Fms、KDR、c-raf或b-raf激酶或其突变型。
17.权利要求16的方法，其中使权利要求1的化合物在体外或体内直接接触c-kit、PDGFRα或PDGFRβ或其突变型。
18.权利要求1-13中任意一项的化合物或其药物组合物任选地与治疗有效量的第二种活性剂联合用于制备治疗激酶介导的情况的药物的应用，其中所述激酶是c-kit、PDGFRα、PDGFRβ、CSF1R、Abl、BCR-Abl、CSK、JNK1、JNK2、p38、p70S6K、TGFβ、SRC、EGFR、trkB、FGFR3、Fes、Lck、Syk、RAF、MKK4、MKK6、SAPK2β、BRK、Fms、KDR、c-raf或b-raf激酶或其突变型。
19.如权利要求18所述的化合物的应用，其中所述激酶介导的情况或疾病是由c-kit、PDGFRα或PDGFRβ激酶介导的。
20.如权利要求18所述的化合物的应用，其中第二种活性剂是支气管扩张药、抗炎药、白三烯拮抗剂或IgE阻滞剂；并且所述第二种活性剂在权利要求1的化合物给药前、给药后或给药的同时被给药。
21.如权利要求18所述的化合物的应用，其中所述激酶介导的疾病或情况是与肥大细胞有关的疾病、肿瘤性病症、过敏性病症、炎性病症、肠易激综合征(IBS)、自身免疫性病症、移植物抗宿主疾病、代谢综合征、CNS相关病症、神经变性病症、疼痛情况、物质滥用、朊病毒病、癌症、心脏病、纤维变性疾病、特发性动脉压过高(IPAH)、原发性肺动脉高压(PPH)、神经胶质瘤或心血管疾病。
22.如权利要求21所述的化合物的应用，其中与肥大细胞有关的疾病是痤疮、进行性骨化性纤维发育不良(FOP)、炎症和组织破坏、囊性纤维化病；肾病、炎性肌肉病症、HIV、脑局部缺血、肥大细胞增多症、黄斑变性、鼻息肉症、预防和最小化脱发、细菌感染、间质性膀胱炎、肿瘤血管生成或骨损失；
其中肿瘤性病症是肥大细胞增多症、胃肠道间质瘤、小细胞肺癌、非-小细胞肺癌、急性髓细胞性白血病、急性淋巴细胞性白血病、脊髓发育不良综合征、慢性髓细胞性白血病、结肠直肠癌、胃癌、睾丸癌、成胶质细胞瘤或星形细胞瘤；
其中过敏性病症是哮喘、过敏性鼻炎、过敏性鼻窦炎、过敏性综合征、荨麻疹、血管性水肿、特应性皮炎、变应性接触性皮炎、结节性红斑、多形性红斑、皮肤坏死性静脉炎、昆虫叮咬皮肤炎症或吸血性寄生虫感染；
其中炎性病症是类风湿性关节炎、结膜炎、类风湿性脊椎炎、骨关节炎或痛风性关节炎；
其中自身免疫性病症是多发性硬化、牛皮癣、肠的炎性疾病、炎性肠病(IBD)；溃疡性、不确定的或感染性结肠炎；克罗恩氏病、类风湿性关节炎、多关节炎、局部或全身性硬皮病、全身性红斑狼疮、盘状红斑狼疮、皮肤红斑、皮肌炎、多发性肌炎、斯耶格伦氏综合征、结节性全动脉炎、自身免疫性肠病或增生性肾小球肾炎；
其中移植物抗宿主疾病是器官移植的移植物排斥；
其中代谢综合征是I型糖尿病、II型糖尿病或肥胖；
其中CNS相关病症是抑郁、心境恶劣障碍、循环型情感性障碍、厌食症、易饿病、月经前期综合征、绝经后综合征、精神迟缓、集中力缺失、悲观烦恼、精神激动、自嘲和性欲降低、焦虑症、精神病学病症或精神分裂症；
其中神经变性病症是阿尔茨海默氏病、帕金森病、亨廷顿病、朊病毒病、运动神经元病(MND)或肌萎缩性侧索硬化(ALS)；
其中疼痛情况是急性痛、术后痛、慢性痛、伤害性疼痛、癌症痛、神经性疼痛或心理性疼痛综合征；
其中物质使用障碍是药物成瘾、药物滥用、药物习惯性、药物依赖性、戒断综合征或超剂量用药；
其中癌症是黑素瘤、胃肠道间质瘤(GIST)、小细胞肺癌或其它实体肿瘤；
其中纤维变性疾病是心脏纤维化、丙型肝炎(HCV)、肝纤维化、非酒精性脂肪肝(NASH)、肝硬化、肺纤维化或骨髓纤维化。
23.如权利要求22所述的化合物的应用，其中器官移植是肾移植、胰腺移植、肝移植、心脏移植、肺移植或骨髓移植。
24.选自
的化合物或其可药用盐。
全文摘要
本发明提供了可用作蛋白激酶抑制剂的化合物及其药物组合物、以及用该化合物来治疗、改善或预防与异常或失调的激酶活性有关的情况的方法。在一些实施方案中，本发明提供了用该类化合物来治疗、改善或预防涉及c-kit、PDGFRα、PDGFRβ、CSF1R、Abl、BCR-Abl、CSK、JNK1、JNK2、p38、p70S6K、TGFβ、SRC、EGFR、trkB、FGFR3、FLT3、Fes、Lck、Syk、RAF、MKK4、MKK6、SAPK2、BRK、KDR、c-raf或b-raf激酶或其突变型的异常活性的疾病或病症的方法。
文档编号C07D471/04GK101528744SQ200780039037
公开日2009年9月9日 申请日期2007年10月16日 优先权日2006年10月20日
发明者D·基亚内利, C·考, 耘 贺, 蒋松春, 李小林, 刘晓东, 刘佐胜, J·洛佐, V·莫尔泰尼, J·纳巴卡, 任平达, 沈台辅, 王晓冬, 游书力 申请人:Irm责任有限公司