作为雄激素受体调节剂的四氢环戊二烯并[b]吲哚化合物的制作方法

专利名称：：作为雄激素受体调节剂的四氢环戊二烯并[b]吲哚化合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及用作治疗剂的四氢环戊二烯并[b丐l哚化合物或其药学上可接受的盐、包含所述化合物或盐的药物组合物、使用所述化合物或盐治疗患者中的疾病的方法、以及用于合成所述化合物的中间体和方法。
背景技术：
：内源性甾体雄激素对很多生理功能有显著影响。甾体雄激素(例如睾酮和5a-二氢睾酮(DHT))的作用受雄激素受体(AR)调节，其可表征为合成代谢或促雄(androgenic)性质。与雄激素结合后，AR经历构象变化然后移位到细胞核中，在那里它与称为雄激素反应元件(AREs)的特定DNA序列结合，启动或抑制靶基因的转录。雄激素的合成代谢(即组织构建)效应包括增加肌肉质量和强度以及骨质量，而促雄(即雄性化)效应包括雄性副性征的发育，比如内部生殖组织(即前列腺和精嚢腺)、外部生殖器(genetalia)(阴茎和阴嚢)、性欲和毛发生长模式。随着年龄增长而发生的雄激素水平的减少对男性和女性的很多严重后果均相关。例如，随着男性年龄增长和睾酮水平下降，骨弱化、糖尿病和心血管疾病发生率增加，肌肉质量和脂肪的比率减少。在女性中，血浆中较低的循环睾酮水平与性欲减退、原因不明的疲劳、普遍缺乏健康、以及绝经后女性中的骨矿物质密度损失有关。临床上，雄激素疗法主要用于治疗男性性腺机能减退。值得注意的是，雄激素替代疗法在性腺机能减退的男性中还已显示减少骨吸收和增加骨质量。临床上使用雄激素的其它适应症包括男孩青春期延迟、贫血、原发性骨质疏松和肌肉消耗疾病(musclewastingdiseases)。此外，雄激素替代疗法最近已用于老年男性并用于调节男性生殖力。在女性中，临床上已使用雄激素疗法来治疗性功能障碍或性欲减退。但是，雄激素疗法有其限制性。例如，甾体雄激素疗法的不良副作用包括对前列腺和精嚢的生长刺激。此外，雄激素的使用与刺激前列腺肿瘤以及升高前列腺特异性抗原(PSA)(前列腺癌风险增加的指征)有关。而且，已发现，未经修饰和经修饰的甾体雄激素制剂在肝脏中快速降解，导致口服生物利用度差，胃肠外给药后活性持续时间短，血浆水平变化，肝毒性，或与其它甾体激素受体(例如，糖皮质激素受体(GR)、盐皮质激素受体(MR)和孕酮受体(PR)有交叉反应。此外，在女性中，使用甾体雄激素可能会造成多毛症或男性化。因此，本领域仍然需要甾体雄激素疗法的替代治疗方法，其具有甾体雄激素的有益药理特性，但是与甾体雄激素疗法相关的典型限制的发生率或可能性减小。近来，鉴定甾体雄激素的合适替代疗法的努力集中于鉴定组织选择性雄激素受体调节剂(SARMs)，其在促雄组织中显示出差异活性特征。具性，但在其它促雄組织例如前列腺或精嚢中只显示部分激动剂活性，甚至显示拮抗剂活性。因此，本发明的一个目的是提供具有雄激素激动剂活性的非甾体AR配体。更具体地说，本发明的一个目的是提供非甾体雄激素激动剂，相对于其它甾体激素受体，所述雄激素受体激动剂以较大的亲和力结合AR。甚至更具体地说，本发明的一个目的是提供组织选择性雄激素受体调节剂(SARMs),其在肌肉或骨中显示雄激素激动剂活性，但在促雄组织例如前列腺或精嚢中只显示部分激动剂活性、部分拮抗剂活性或拮抗剂活性。以下参考文献提供了与本发明相关的本领域当前状况的实例Brown，E"rfocW朋to^v(2004);145(12):5417-5419提供了非甾体选捧性雄激素受体调节剂的综述。Cadilla等，C"/r.rop.C7^附(2006);6(3):245-270提供了雄激素受体调节剂的综述。Segal等，Ea:/^"0/;z"./m^W/g.Drw^(2006);15(4);377-387提供了雄激素受体调节剂的综述。共同未决申请的(Co-pending)国际申请PCT/US2006/024122公开了作为雄激素受体调节剂的四氢啼唑化合物。发明概述本发明涉及以下发现由下式(I)所定义的某些四氢环戊二烯并[b丐l咮化合物具有特定的活性特征(profilesofactivity),这些特征提示，它们有用于治疗响应于甾体雄激素疗法的疾病。因此，本发明提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>式(I)其中，"C*，，碳中心可以是及、S或i/S"构型；W代表氰基、-CH=NOCH3、-OCHF2或-OCF3;R2代表-COR2a或-SO;jR2b;R2a代表(C广C4)烷基、(d-CO烷氧基、环丙基或-NRaRb;R2b代表(d-C4)烷基、环丙基或-NRaRb;Ra和Rb每次出现时各自独立地代表H或(d-Ct)烷基;和R3代表选自以下的杂芳基吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、噻唑基、异噻唑基和噻二唑基，各基团任选被1或2个独立地选自以下的基团取代甲基、乙基、溴、氯、氟、-CHF2、-CF3、羟基、氨基和-NHCH;jC02H。另一种实施方式中，本发明提供治疗以下疾病的方法性腺功能减退、骨质量或密度减少、骨质疏松、骨质减少、肌肉质量或强度降低、老年性肌肉萎缩、年龄相关的机能衰退、男孩青春期延迟、贫血、男性或女性性功能障碍、勃起功能障碍、性欲减退、抑郁或嗜睡，所述方法包括对需要其的患者给予有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。更具体地说，本发明提供治疗以下疾病的方法骨质量或密度减少、骨质疏松、骨质减少、或肌肉质量或强度降低。此外，本发明提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐作为治疗以下疾病的药剂的用途性腺机能减退、骨质量或密度减少、骨质疏+〉、骨质减少、肌肉质量或强度降低、老年性肌肉萎缩、年龄相关的机能衰退、男孩青春期延迟、贫血、男性或女性性功能障碍、勃起功能障碍、性欲减退、抑郁或嗜睡。更具体地说，本发明提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐作为治疗以下疾病的药剂剂的用途骨质量或密度减少、骨质疏^s骨质减少、或肌肉质量或强度降低。此外，本发明提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗。另一种实施方式中，本发明提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗以下疾病的药物中的用途性腺机能减退、骨质量或密度减少、骨质疏松、骨质减少、肌肉质量或强度降低、老年性肌肉萎缩、年龄相关的机能衰退、男孩青春期延迟、贫血、男性或女性性功能障碍、勃起功能障碍、性欲减退、抑郁或嗜睡。更具体地说，本发明提供式(I)化合物在制备用于治疗以下疾病的药物中的用途骨质量或密度减少、骨质疏松、骨质减少、或肌肉质量或强度降低。此外，本发明提供药物組合物，其包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。更具体地说，本发明提供用于治疗骨质量或密度减少、骨质疏松、骨质减少、或肌肉质量或强度降低的药物组合物，其包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。本发明还包括有用于合成式(I)化合物的新颖中间体和方法。发明详述本发明涉及如这里式(I)所示的新颖四氢-环戊二烯并吲哚(cyclopentaindole)化合物。经体外和体内检测证明，式(I)所示的化合物所具有的活性特征显示它们可用于治疗响应于甾体雄激素疗法的疾病。尤其，式(I)所示的化合物是强效的AR配体，其对雄激素受体具有激动作用(agonize).此外，相对于MR、GR或PR中的每一种，式(I)所示化合物选择性地结合于AR。式(I)化合物或其药学上可接受的盐据信有用于治疗通常用雄激素疗法治疗的疾病。因此，对响应于雄激素疗法的疾病的治疗方法构成了本发明的重要实施方式。此类疾病包括性腺机能减退、骨质量或密度减少、骨质疏松、骨质减少、肌肉质量或强度减少、老年性肌肉萎缩、年龄相关的机能衰退、男孩青春期延迟、贫血、男性或女性性功能障碍、勃起功能障碍、性欲减退、抑郁或嗜睡。更具体地说，据信式(I)化合物可用于治疗骨质量或密度减少、骨质疏松、骨质减少、肌肉质量或强度降低等疾病。本发明还涉及式(I)化合物或式(I)化合物的药学上可接受的盐的溶剂合物。这样，本文所用的术语"式(I)"或式(I)的任何具体化合物的含义包括任何药学上可接受的盐和所述化合物或其药学上可接受的盐的任何溶剂合物。药学上可接受的盐的例子及其制备方法是本领域技术人员熟知的。参见例如Stahl等，"HandbookofPharmaceuticalSalts:Properties,SelectionandUse",VCHA/Wiley-VCH,(2002);Gould,P丄.，"Saltselectionforbasicdrugs,，，//1,mmft》厢//o/7ifl/0//^flr麵ceM"cs，33:201-217(1986);Berge等，"PharmaceuticalSalts,"/o/7ifl/0/i^fl/7Mflc^/"c"/Sc/e/ices,66,No.1，(1977年1月)；和Bastin等,"SaltSelectionandOptimizationProceduresforPharmaceuticalNewChemicalEntities,"尸/w柳及麼a/r/rZ)ev鄉舰w"4:427-435(2000)。本发明化合物具有一个或多个手性中心，因此可存在各种立体异构构型。由于存在这些手性中心，本发明化合物可以是外消旋体、对映异构体混合物、单独的对映异构体以及非对映异构体和非对映异构体混合物。除了本文所说明的，所有此类外消旋体、对映异构体和非对映异构体均在本发明范围内。本发明所提供的化合物的对映异构体可被拆分，例如由本领域普通技术人员使用标准技术(例如J.Jacques等，"Enantiomers,RacematesandResolutions",JohnWileyandSons、Inc.,1981中所述的那些技术)以及本文"方案"和"实施例"中提供的那些技术进行拆分。本文所用的术语"R"和"S"如同有机化学中通常使用的那样，指手性中心的特定构型。术语"(士)"或"RS"指包含外消旋体的手性中心的构型。部分优先级列表和立体化学讨论见"NomenclatureofOrganicCompounds:PrinciplesandPractice"(J.H.Fletcher等编，1974)中。本领域普通技术人员可采用众所周知的技术和方法制备式I化合物的特定立体异构体和对映异构体，所述技术和方法例如为Eliel和Wilen，"StereochemistryofOrganicCompounds",JohnWiley&Sons，Inc.,1994，第7章；SeparationofStereoisomers,Resolution,Racemizati0n5ColletandWile，"Enantiomers,RacematesandResolutions",JohnWiley&Sons,Inc.,1981中所乂>开的那些。例如，可4吏用纯对映体(enantiomericallypure)和纯几何异构体(geometricallypure)或对映体富集或几何异构体富集的原料，通过立体特异性合成来制备特定的立体异构体和对映异构体。此外，可通过诸如手性固定相色谱、酶促拆分或用于该目的的试剂形成的加成盐的分级重结晶之类的技术来拆分和回收特定的立体异构体和对映异构体。本文所用的术语"(d-C4)烷基"指1-4个碳原子的直链或支链的单价饱和脂族链。本文所用的术语"(d-C4)烷氧基"指连接有1-4个碳原子的直链或支链单价饱和脂族链的氧原子。除非本文另有说明，本文所用的术语"卤素(halo或Hal)"或"卤化物(halide)"指氯、溴、碘或氟原子。本领域普通技术人员应理解，式(I)化合物的某些杂芳基部分可以位置异构体和互变异构体的形式存在。本发明涵盖式I化合物杂芳基部分的所有位置异构体、单独的互变异构体形式以及它们的任何組合。符号"^^"代表向前伸出纸页平面的键。符号"…'"HH"代表向后伸出纸页平面的键。符号"一A/V"代表以向前和向后伸出纸页平面的键的混合形式存在的键。如本领域技术人员所理解的，生理疾病可以是"慢性"病症或"急性"发作。本文所用的术语"慢性"指病症緩慢发展并长期持续。因此，当慢性病症被诊断时给予治疗，并且在整个疾病过程中持续治疗。相反，术语"急性"表示短时期内的恶化事件或发作，随后为緩解期。因此，疾病治疗考虑急性事件和慢性病症。在急性事件中，在症状出现时给予化合物，症状消失时停止。如上所述，慢性病症的治疗贯穿整个病程。本文所用的术语"患者"指人或非人哺乳动物，如狗、猫、牛、猴、马、猪或羊。但是应理解，给予式(I)化合物或其药学上可接受的盐的优选患者是人。本文所用的术语"治疗"包括抑制、防止、限制、减慢、停止或逆转症状或疾病的进展或严重性。因此，本发明的方法包括治疗性使用和预防性使用。本发明化合物可配制为药物组合物的一部分。由此，包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物是本发明的重要实施方式。药物組合物的例子及其制备方法是本领域熟知的。参见例如，REMINGTON:THESCIENCEANDPRACTICEOFPHARMACY(A.Gennaro等编，第19版，MackPublishing(1995))。包含式(1)化合物的示例性组合物包括例如含式(1)化合物和1%羧甲基纤维素钠、0.25%聚山梨酯80和0.05%消泡剂(Antifoam)1510(DowCorning)的悬浮液;含式(I)化合物和0.5%甲基纤维素、0.5%月桂基硫酸钠和0.1%消泡剂1510在0.01NHC1中的悬浮液(最终pH为约2.5-3)。优选的本发明组合物包含配制在胶嚢或片剂中的式(I)化合物或其药学上可接受的盐式(I)化合物给药，包括口服和胃肠外途径。本领域技术人员将理解，粒径可影响药剂的体内溶解，进而影响药剂的吸收。本文所用的"粒径"指通过常规技术测定的药剂颗粒的直径，所述技术例如激光散射、激光衍射、Mie散射、沉降场流分离(sedimentationfieldflowfractionation)、光子相关光谱等。药剂溶解性差时，小的或减小的粒径可有助于溶解，从而增加药剂的吸收。Amidon等，/^"r附.i"eflrd12;413-420(1995)。用于减小或控制粒径的方法是本领域常规方法，包括粉碎、湿法研磨、微粉化等。控制粒径的其它方法包括在纳米悬浮液中制备药剂。本发明的一种具体实施方式包括式(I)化合物或包含式(I)化合物的药物组合物，其中所述化合物的平均粒径小于约20pm或d90粒径(即，90%的颗粒的最大尺寸)小于约5(Hrni。一种更优选的实施方式包括平均粒径小于约10pm或d90粒径小于约30nm的式I化合物。本文所用的术语"有效量，，指式(I)化合物的量或剂量，当以单剂或多剂给予患者时，该量或剂量为诊断或治疗中的患者提供所需效果。作为本领域技术人员，主治诊断医师通过考虑多种因素容易地确定有效量，所述因素例如哺乳动物物种；其体型大小(size)、年龄和总体健康状况；所涉及的具体疾病；疾病的程度和严重性；个体患者的反应；给予的具体化合物；给药方式；所给予的制剂的生物利用度特征；所选择的剂量方案；以及同时采用的任何药物治疗。当与本发明的方法和用途联合使用时，本发明的化合物和组合物可单独施用或与用于治疗特定疾病或病症的常规治疗剂联合施用。当本发明的化合物或组合物用作联合给药的一部分时，所述化合物或包含式(I)化合物的组合物可独立施用或作为包含与其联合的治疗剂的制剂的一部分施用。用于骨质丧失(boneloss)、骨质疏松或骨质减少的联合治疗用于治疗骨质疏松的常规治疗剂可有利地与式(I)化合物或包含式(I)化合物的组合物联合。用于治疗骨质疏松的常规治疗剂包括激素替代治疗剂，如缀合马雌激素(Premarin，)、合成缀合雌激素(CenestinM)、酯化雌激素(Estratab或Menest)、雌酮硫酸酯旅,(estropiate)(Ogen或Ortho-est);以及透皮雌二醇制剂，如Alora、Climara、Estraderm和Vivelle。组合的雌激素-孕激素制剂也可用于治疗骨质疏术>，所述制剂包括Prempro(缀合马雌激素和醋酸曱羟孕酮)、Premphase(缀合马雌激素和诺孕酯(norgestimate))、Ortho-Prefest(雌二醇和诺孕酯)、Femhrt(乙炔雌二醇和醋酸炔诺酮)和Combipatch，(透皮雌二醇和醋酸炔诺酮)。可与本发明化合物或组合物联合的其它常规骨质疏松疗法包括双膦酸酯，如阿仑膦酸(alendronate)(Fosamax)、利塞膦酸钠(risedronate)(Actonel)和帕米膦酸(pamidronate)(Aredia);选择性雌激素受体调节剂(SERM)例如雷洛昔芬(raloxifene)(Evista);降钙素(Calcimar加或Miacalcin);甲状旁腺激素(Forteo^);钙；维生素D;利尿剂(减少Ca"排泄)；氟化物；以及雄激素(例如睾酮或5a-二氢睾酮)。因此，用于治疗骨质疏松的联合治疗制剂包含成分(A1):式(I)化合物；成分(A2):常规用于治疗骨质疏松的一种或多种共用药剂，其选自Premarin、Cenestin.Estratab、Menest、Ogen、Ortho-est、Alora、Climara、Estraderm、Vivelle、Prempro、Premphase、Ortho-Prefest、Femhrt、Combipatch、Fosamax)、Actonel、Aredia);Evista;Calcimar、Miacalcin、Forteo、钙、维生素D、利尿剂、氟化物、睾酮和5a-二氢睾酮;和任选的成分(A3):药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。本发明的具体方面以下列出了关于式(I)化合物的几组具体取代基和具体变量。应理解，具有此类具体取M或变量的式(I)化合物以及采用此类化合物的方法和用途代表了本发明的具体方面。因此，本发明的一个具体方面是式(I)化合物是其中W和113具有本文所定义的任何含义的化合物，且(a)W代表氰基、-CH=NOCH3、-OCHF2或國OCF3;或(b)!^代表氰基或-CH-NOCH3;或(c)Ri代表f^;或(d)Ri代表-CH-NOCH3。本发明的另外具体方面是那些方面其中式(I)化合物是其中W和F^具有本文所定义的任何含义的化合物，且(a)R2代表-COR2a或-S02R215，其中R2a代表(C广C4)烷基、(Q-C4)烷氧基、环丙基或-N(CH3)2,R2b代表(d-d)烷基、环丙基、-1\((:113)2或-1\((:2115)2;或(b)W代表-CORh或-S02R^其中Rh代表乙基、异丙基、曱氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、异丁氧基、叔丁氧基、环丙基或-N(CH3)2,R2b代表甲基、乙基、丙基、环丙基、-1\((:113)2或-]\(<:2115)2;或(c)W代表-COR23，其中Rh代表乙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、异丁氧基、叔丁氧基、环丙基或-N(CH3)2;或(d)W代表-CORh,其中Rh代表异丙基、乙氧基、异丙氧基或环丙基；或(e)W代表-COR2、其中Rh代表异丙氧基；或(f)R2代表-SO;jR2b，其中R2b代表甲基、乙基、丙基、环丙基、-N(CH3)2或-N(C2Hs)2;或(g)!^代表-S02R215,其中R"代表环丙基或-N(CH3)2;或(h)112代表-8021^，其中R2b代表-N(CH;j)2。本发明的另外具体方面是那些方面其中式(I)化合物是其中W和I^具有本文所定义的任何含义的化合物，且(a)r2代表-COR23,"0"碳中心为51构型；或(b)R2代表-S02R215，"O，，碳中心为及构型。本发明的另外具体方面是那些方面其中式(I)化合物是其中Ri和R"具有本文所定义的任何含义的化合物，且(a)W选自以下的杂芳基吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、噻唑基、异噻唑基和噢二唑基，各基团任选被1或2个独立地选自以下的基团取代甲基、溴、氯、氟、-CHF2、羟基、氨基和-NHCH2CO:jH;或(b)W代表6-氟-吡啶-2-基、吡啶-2-基、3-鞋基-吡啶-2-基、6-二氟甲基-吡啶-2-基、2-氨基-吡啶-3-基、2-羧曱基氨基-吡啶-3-基、嘧啶-4-基、嘧啶-2-基、2-氯画嘧啶國4-基、噻唑-4誦基、2-甲基-噻唑-4-基、2-氯-嚷喳-4國基、噻唑-2國基、噻唑-5-基、4-氨基-噻唑-5-基、吡溱-2-基、5-甲基-吡溱-2-基、3-氯-吡溱-2-基、6-曱基-吡溱-2-基、3-氨基-吡溱-2-基、3-曱基-p比溱-2-基、哒溱-3-基、5-溴-异噻唑-3-基、异噻唑-3-基、4，5-二氯-异噻唑-3-基或[1,2,51噻二唑-3-基;(c)113代表6-氟-吡啶-2-基、吡啶-2-基、3-羟基-吡啶-2-基、6-二氟曱基-吡啶-2-基、2-氨基-吡啶-3-基、2-羧甲基氨基-吡啶-3-基、噻唑-4-基、2-甲基-噻唑-4-基、2-氯-瘗峻-4-基、噻唑-2-基、噻唑-5-基、4-氨基-噻唑-5-基、吡溱-2-基、5-甲基-吡溱-2-基、3-氯-吡嗪-2-基、6-曱基-吡嗪-2-基、3-氨基-吡秦-2-基或3-曱基-吡嗪-2-基；(d)W代表6-氟-吡啶-2-基、吡啶-2-基、2-氨基-吡啶-3-基、噻唑-5-基或4-氨基-噻唑-5-基；或(e)R3代表吡啶-2-基、2-氨基-吡啶-3-基、噻唑-5-基或4-氨基-噻唑-5-基。本发明的一个更具体方面是其中式(I)化合物中，当R2代表-COR2a时，"O，，碳中心为S构型，当R2代表-SO;jR2b时，"O"碳中心为及构型；R1代表氰基或-CH-NOCH3;R2代表-COR2a或-S02R215，其中R2a代表(d-C4)烷基、(C广C4)烷氧基、环丙基或-N(CH3)2，R2b代表(d-C4)烷基、环丙基、->^((:113)2或^(<:2115)2;和W选自以下的杂芳基吡咬基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、噻唑基、异蓉唑基和瘗二唑基，各基团任选被1或2个独立地选自以下的基团取代甲基、溴、氯、氟、-CHF2、羟基、氨基和-NHCH:jC02H;本发明的一个甚至更具体方面是其中式(I)化合物中，当R2代表-COR2a时，"O"碳中心为5*构型，当R2代表-SO;jR2b时，"0"碳中心为及构型；R1代表氰基或-CH-NOCH3;W代表-CORh或-S02R215，其中Rh代表乙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、异丁氧基、叔丁氧基、环丙基或-N(CH3)2，R"代表曱基、乙基、丙基、环丙基、-]\(<:113)2或^(0:2115)2;和W代表6-氟-吡啶-2-基、吡啶-2-基、3-羟基-吡啶-2-基、6-二氟甲基-吡啶-2-基、2-氨基-吡啶-3-基、2-羧甲基氨基-吡啶-3-基、嘧啶-4-基、嘧啶-2-基、2-氯-嗜咬-4-基、噢唑-4-基、2-甲基-噻唑-4-基、2-氯-噢唾-4-基、噻唑-2-基、噻唑-5-基、4-氨基-噻唑-5-基、吡嗪-2-基、5-甲基-吡嗪-2-基、3-氯-吡嗪-2-基、6-曱基-吡溱-2-基、3-氨基-吡溱-2-基、3-甲基-吡溱-2-基、哒嗪-3-基、5-溴-异噻唑-3-基、异噢哇-3-基、4，5-二氯-异噻唑-3-基或[l，2，5]噻二唑-3-基;本发明的一个甚至更具体方面是其中式(I)化合物中，当R2代表-COR2a时，"C"，碳中心为S构型，当R2代表-S02R2b时，"0"碳中心为及构型；R1代表氰基；W代表-CORh或-S02R215,其中Rh代表异丙基、乙氧基、异丙氧基或环丙基，R2b代表环丙基或-N(CH3)2;和R3代表6-氟-吡啶-2-基、吡啶-2-基、2-氨基-吡啶-3-基、噻唑-5-基或4-氨基-噻唑-5-基。本发明的一个甚至更具体方面是其中式(I)化合物中，当R2代表-COR2a时，"O"碳中心为S构型，当R2代表-S02R2b时，"O"碳中心为及构型；R1代表氰基；R2代表-COR2a或-S02R2b，其中1^代表异丙氧基，代表-1\(013)2;和W代表吡啶-2-基、2-氨基-吡啶-3-基、噻唑-5-基或4-氨基-噻唑-5-基。是通过下式I(a)和I(b)的化合物提供本发明的其它具体方面。应理解，它具体方面。因此，由式I(a)的化合物提供本发明的一个具体方面<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>其中，W代表氰基、國CH-NOCH3或誦OCF3;R2a代表(CrCt)烷基、(d-Ct)烷氧基、环丙基或-N(CH3)2;R3代表选自以下的杂芳基吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、噻唑基、异噢唑基和噢二唑基，各基团任选被1或2个独立地选自以下的基团取代曱基、溴、氯、氟、-CHF2、羟基、氨基和-NHCH2C02H。甚至更具体的是式I(a)的化合物，其中R1代表氰基或-CH-NOCH3;Rh代表乙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、异丁氧基、叔丁氧基、环丙基或-N(CH3)2;R3代表6-氟-吡啶-2-基、吡啶-2-基、3-羟基-吡啶-2-基、6-二氟甲基^比咬-2-基、2-氨基-吡啶-3-基、2-羧甲基氨基-吡啶-3-基、嘧啶-4-基、嘧啶-2-基、2-氯-嘧啶-4-基、噻唑-4-基、2-甲基-噻唑-4-基、2-氯-噻唑-4-基、噻唑-2-基、噻唑-5-基、4-氨基-噻唑-5-基、吡嗪-2-基、5-曱基-吡嗪-2-基、3-氯-吡溱-2-基、6-甲基-吡溱-2-基、3-氨基-吡溱-2-基、3-甲基-吡嗪-2-基、哒嗪-3-基、5-溴-异噻唑-3-基、异噻唑-3-基、4，5-二氯-异噻唑-3-基或[1，2,51噻二唑-3-基。由式I(a)提供更具体的方面，其中R1代表氰基；Rh代表异丙基、异丙氧基、乙氧基或环丙基；W代表6-氟-吡啶-2-基、吡啶-2-基、2-氨基-吡啶-3-基、噻唑-5-基或4-氨基-噻唑-5-基。如述，由式I(b)提供本发明的另一具体方面，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>其中，R1代表氰基或-CH-NOCH3;R2b代表(d-C4)烷基、环丙基、誦N(CH3)2或-N(C2Hs)2;W代表选自以下的杂芳基吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、噻唑基、异噻唑基和噻二唑基，各基团任选被1或2个独立地选自以下的基团取代甲基、溴、氯、氟、-CHF2、羟基、氨基和-NHCH2C02H。甚至更具体的是式I(b)的化合物，其中R1代表氰基或-CH-NOCH3;R化代表曱基、乙基、丙基、环丙基、-((:113)2或^(<:2115)2;R3代表异噢唑-3-基、6-氟-吡啶-2-基、吡啶-2-基、2-氨基-吡啶-3-基、吡溱-2-基、噻唑-4-基、噻唑-2-基、噻唑-5-基、4-氨基-噻唑-5-基或[l,2，51噻二唑-3-基。由式I(b)提供更具体的方面，其中R1代表氰基；R2b代表环丙基或-N(CH;j)2;W代表噻唑-4-基、噻唑-2-基、噻唑-5-基或4-氨基-噻唑-5-基。此外，应理解由本文所例举的式(I)的那些化合物提供本发明一个最具体的方面，最更具体地，化合物(5)-(7-氰基-4-吡啶-2-基曱基-1，2，3，4-四氢-环戊二烯并[6]吲哚-2-基)-氨基甲酸异丙酯；(5)-(7-氰基-4-噻唑-5-基甲基-1，2,3,4-四氢-环戊二烯并[6]吲哚-2-基)-氨基甲酸异丙酯；(5>[4-(2-氨基-吡啶-3-基曱基)-7-氰基-1，2，3，4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-2-基-氨基甲酸异丙酯；(i)-N'-[4-(4-氨基-噻唑-5-基甲基)-7-氰基-l，2，3，4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-2-基I-N，N-二甲基硫酰胺(sulfamide);或(S)-[4-(4-氨基-噻唑-5-基甲基)-7-氰基-1，2,3，4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-2-基-氨基甲酸异丙酯。可通过化学方法制备本发明化合物，例如按照以下"方案"、"中间体"和"实施例"中所述的合成路线制备。但是，以下讨论并无意以任何方式限制本发明的范围。例如，每一所述路线的具体合成步骤可以不同的方式组合，或可与不同方案中的步骤联合来制备其它的式(I)化合物。除非另有说明，所述取代基如前所定义。试剂和原料是本领域普通技术人员容易得到的。其它必需的试剂和原料可通过选自有机和杂环化学领域的标准方法、与已知的结构类似的化合物的合成类似的技术、和以下实施例中所述方法(包括任何新方法)的方法来制备。方案I<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>方案I描述了R3-CH2-X或R3-CH2-OMs的制备方法，所述化合物用于随后的四氢环戊二烯并[b吲哚化合物的烷基化。方案I步骤A中，通过还原式(1)的酯得到式(2)的醇。必要时，利用本领域熟知的方法从羧酸经由酰基氯(例如草酰氯)获得所述酯。本领域技术人员熟知众多将羧酸酯还原为醇的方法，可参见R.C.Larock的i果文("ComprehensiveOrganicTransformations",VCHPublishers,1989,p.549-551)。优选方法是在非质子溶剂(例如四氢呋喃)中于室温至回流温度下，用硼氢化锂还原约1-48小时。方案I步骤B中，将式(2)的醇转化为式(3)的曱磺酸酯。将醇与有机碱(例如三乙胺或二异丙基乙胺)混合，在惰性溶剂(例如二氯曱烷)中用甲烷磺酰氯处理。将反应物在0'C至室温下保持15分钟至4小时。用本领域技术人员已知的萃取技术分离产物。方案I步骤C中，将其中W是杂芳基的式(4)化合物卤化，以提供式(5)的烷基卣。在用或不用紫外光照射的情况下，在溶有N-氯代琥珀酰亚胺或N-溴代琥珀酰亚胺的四氯化碳或乙酸乙酯中用自由基引发剂(例如过氧化苯甲酰或l，l，-偶氮二异丁腈或1，1，-偶氮二(环己烷腈)处理式(4)化合物。优选方法是在约室温至四氯化碳的回流温度下，用l，l，-偶氮二(环己烷腈)或l，l，-偶氮二异丁腈和N-溴代琥珀酰亚胺处理4-48小时。然后可使用标准技术(例如不溶性成分的过滤和随后的硅胶色镨)来纯化产物。或者，方案I步骤C中，使用三氯异氰尿酸将其中X是C1的式(4)的杂芳基甲基氯化，得到烷基氯。在惰性溶剂(例如氯仿)中进行反应，回流4-72小时。通过二氧化硅垫过滤，然后进行色谱来分离产物。方案I步骤D中，使用双(2-甲氧基乙基)氨基三氟化硫将式(6)的曱酰吡啶转化为式(7)的二氟曱基吡啶。反应在惰性溶剂(例如二氯甲烷)中进行4-24小时，然后用饱和NaHC03溶液猝灭。用常规的萃取技术分离产物。方案I步骤E中，如先前在方案I步骤C中所述，将式(7)的二氟曱基吡啶转化为式(5)的烷基溴(X是Br)。方案II方案II步骤A中，使环戊烯酮(8)与邻苯二甲酰亚胺发生迈克尔(Michael)加成反应，产生(±)-2-(3-氧代-环戊基)-异吲哚-1，3-二酮(9)。在体积比为10/1的甲醇/2NNa2C03中于室温进行反应，反应条件类似于O.Nowitzki等，rCni/^/fWi1996，52,11799-11810中所述的那些。通过加入水来分离产物，得到白色固体状的(9)。方案II步骤B中，在典型的费希尔(Fischer)吲哚合成中使(±)-2-(3-氧代-环戊基)-异吲哚-l,3-二酮(9)与式(10)的苯基肼发生反应，得到式(ll)的四氢环戊二烯并[W丐I哚。本领域技术人员认识到，各种酸性条件可实现费希尔吲咮合成，包括质子酸和路易斯(Lewis)酸。优选的条件使用冰醋酸和4NHC1在二噁烷中的混合物，在50。C至溶剂回流温度下反应4-24小时。通过加入水，然后将所得固体过滤来分离产物。在甲醇中对固体进行声处理，得到足够纯的物质。或者，使用约2-4当量的路易斯酸(例如氯化锌)进行反应。步骤B的其它优选条件使用乙醇在回流温度下反应4-24小时。分离产物，并可通过过滤反应混合物，然后对滤液进行硅胶色谱来纯化。方案II步骤C中，使用M.Alajarin等(五wr./Org.2002，4222-4227)所描述的条件，用肼或水合肼使式(ll)的邻苯二甲酰亚胺基团断裂，以得到式(12)的氨基四氢环戊二烯并[b丐l哚。优选的条件使用体积比约5.5/1的四氬呋喃/乙醇混合物，在0-50r的温度，优选约室温下，反应4-72小时。过滤除去所得的邻苯二曱酰肼，浓缩滤液来分离产物，然后可以用本领域已知的技术通过色谱纯化产物。方案II步骤D中，使用本领域技术人员熟知的条件，用合适的酰基氯、氯曱酸酯、二碳酸二烷基酯或曱氨酰氯将式(12)的胺酰化，得到式(13)的酰胺、氨基甲酸酯或脲，其中RS是C(0)R23。胺与过量的有机胺碱(例如三乙胺或二异丙基乙胺)在惰性溶剂(例如四氢呋喃、二氯乙烷或二氯甲烷、N-甲基吡咯烷酮或N，N-二甲基甲酰胺或它们的混合物)中混合。优选的条件是在例如氯曱酸异丙酯的存在下，使用二氯甲烷中的二异丙基乙胺在0-40匸的温度下反应1-72小时。通过加入水和二乙醚，然后搅拌并收集所得的固体来分离产物。如果产物在合适的有机溶剂中的溶解度足够大，则可用萃取技术分离该产物，然后在合适的有机溶剂(例如庚烷)中形成浆液，然后通过过滤分离。本领域技术人员认识到，诸如式(12)的那些的胺通常更适于以式(13)的中间体形式存储和处理，在该中间体中，胺被适当地保护，例如用叔丁氧羰基(BOC)基团(其中R2a是O-叔丁基)保护或通过形成酸加成盐而得到保护。随后除去BOC基团，并使胺酰化，以得到所需的本发明化合物的酰胺或氨基曱酸酯。方案II步骤E中，用R3CH2-X(其中X是Cl或Br)或R3CH2OS02Me(见方案1)将式(13)的四氢环戊二烯并[b丐l哚烷基化，得到式(14)的四氢环戊二烯并[b]巧l哚。优选的条件使用Cs2C03，在惰性溶剂(例如DMF、DMSO或7V-甲基吡咯烷酮)中，于20-100'C(优选45-60°C)的温度反应2-24小时。用本领域已知的萃取技术分离产物，通过硅胶色镨纯化。或者，可使用强碱(例如氢化钠、氢化钾、双(三甲基甲硅烷基)酰胺钾或双(三甲基曱硅烷基)酰胺钠)在惰性溶剂(例如二甲基甲酰胺、JV-曱基吡咯烷酮或四氢呋喃)中进行烷基化反应。优选的条件使用氢化钠，在二甲基曱酰胺中于0-80。C的温度下反应4-48小时。用本领域技术人员已知的萃取和色谱技术分离式(14)的烷基化产物。方案III<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>方案III步骤A中，如方案II步骤E所述，用F^CH2X(其中X是C1、Br)或用RSCH20S02Me将式(15)或式(17)的四氢环戊二烯并[b]吲哚烷基化，得到式(16)或(18)的四氬环戊烷吲咮(tetrahydrocyclopentaneindole)。方案III步骤B中，如方案II步骤C所述，用水合肼或肼使式(16)的邻苯二甲酰亚胺基团断裂，得到式(19)的氨基四氢环戊二烯并[bl-引哚。或者，方案III步骤C中，可使式(18)的叔丁氧羰基(BOC)保护的胺脱保护，产生式(19)的氨基四氢环戊二烯并[b吲哚。用于脱除BOC基团的常规脱保护条件是本领域技术人员熟知的，可参见T.W.Green和P.G.M.Wuts的文章("ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis"，JohnWiley&Sons、Inc.,1991，328-330)。优选的条件使用二噁烷中的4M氯化氢，于约0-50。C的温度下，反应约10分钟-24小时。方案HI步骤D中，于50-60'C在合适的溶剂(例如氯仿或二氯甲烷)中，使用碱(如三乙胺、Hunig，s碱或1，4-二氮杂二环[2.2.2-辛烷(DABCO))，通过分别与相应的氨磺酰氯或磺酰氯反应将式(19)的胺转化为式(20)的硫酰胺(sulfamide)或磺酰胺(sulfonamide)。优选的条件使用氯仿，以DABCO作为碱。或者，可如方案III步骤E中所示，通过使合适的酰基氯、氯甲酸酯或氨基甲酰氯与式(19)的胺反应，基本如方案II步骤D所述制备(14)。方案IV<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>方案IV步骤A中，如方案II步骤E所述，使式(21)的四氢环戊二烯并[b吲哚烷基化，产生式(22)的取代的四氢-环戊二烯并[b丐l哚。方案IV步骤B中，将式(21)或(22)的腈还原成式(23)或(24)的醛。在比例为1/10-1/2的水/甲酸溶剂混合物中用铝-镍催化剂处理腈。所用的甲酸可以是98%、96%或88%。在室温至溶剂的回流温度下进行反应约2-48小时。通过加入质子溶剂(如甲醇)，然后过滤并浓缩滤液来分离产物。用常规萃取技术(如用碳酸氢钠溶液和乙酸乙酯)进一步纯化残留物，获得醛，或者在乙醇中进行声处理，未经进一步纯化而使用。或者，方案IV步骤B中，当W是叔丁氧羰基(BOC)时，使用非酸性条件(如用金属氢化物还原剂，例如二异丁基氢化铝)还原式(21)或(22)的腈。反应在惰性溶剂(如二氯曱烷)中进行，先后加入二异丁基氢化铝和乙酸乙酯，室温搅拌30分钟至2小时。反应物与20%的酒石酸钠水溶液一起搅拌l小时，然后用萃取技术分离。方案IV步骤D中，分别将式(23)或(25)的醛转化为式(25)或(26)的甲肟(methoxime)。在碱(如碳酸钾、碳酸钠或氢氧化钠)的存在下，在乙醇或甲醇中，用甲氡基胺的盐酸盐于0-100。C处理醛2-24小时(优选在室温下处理l小时)。浓缩并在水中研制产物，从而分离产物。或者，用乙酸乙酯稀释反应物，用萃取技术进行分离，然后可以用标准技术(如色语)进行纯化。方案IV步骤E中，如方案II步骤E所述，使式(25)的甲肟四氢环戊烷吲哚烷基化，得到式(26)的N-取代的甲肝四氬环戊烷丐l咮。生物学活性测定本文使用的"Kd"指配体-受体复合物的平衡解离常数；"Ki"指药物-受体复合物的平衡解离常数，指示平衡时结合于一半的结合位点的药物浓度；"IC50"指产生某试剂可能产生的最大抑制反应的50%时的该试剂浓度，或者指取代50%的结合于受体的配体时的试剂浓度；"EC50"指产生某试剂可能产生的最大反应的50%时的该试剂浓度；"ED50"指产生对所施用的某治疗剂的最大反应的50%时的该治疗剂的剂量。甾体激素核受体结合试验用过度表达人GR(糖皮质激素受体)、AR(雄激素受体)、MR(盐皮质激素受体)或PR(孕酮受体)的人胚胎肾HEK293细胞的细胞裂解物进行受体-配体竟争结合试验，以测定Ki值。简言之，在含有以下成分的緩沖液中进行甾体受体竟争结合试验:20mMHepes緩沖液(pH-7.6)、0.2mMEDTA、75mMNaCl、1.5mMMgCl2、20%甘油、20mM钼酸钠、0.2mMDTT(二硫苏糖醇)、2(Hig/mL抑蛋白酶肽和2(Hig/mL亮抑酶肽。通常，甾体受体结合试验包括放射性标记的配体，如用于结合GR的0.3nM卩H卜地塞米松、用于结合AR的0.36nM卩H卜甲雌三烯醇酮、用于结合MR的0.25nM卩H]-醛固酮和用于结合PR的0.29nM卩H卜甲雌三蹄醇酮，并且每孔包括20ng293-GR裂解物、22pg293-AR裂解物、20pg293-MR裂解物或40pg293-PR裂解物。通常以96孔形式进行试验。加入范围约在0.01nM-lOnM的各种浓度的竟争性测试化合物。在存在500nM地塞米松(用于GR结合)、500nM醛固酮(用于MR结合)或500nM甲雌三烯醇酮(用于AR和PR结合)的情况下测定非特异性结合。将结合反应物(140inL)在4t:下孵育过夜，然后向各反应物中加入70pL冷的炭-葡聚糖緩冲液(每50mL试验緩冲液含有0.75g炭和0.25g葡聚糖)。4X:下，将各板在定轨振荡器(orbitalshaker)上混合8分钟。然后将板于4X:，以3,000rpm离心10分钟。然后将结合反应混合物的120^L等分试样转移到另一个96孔板上，在各孔中加入175^LWallacOptiphaseHisafe3闪烁液。将板密封，在定轨振荡器上剧烈振荡。孵育2小时后，在WallacMkrobeta计数器上读板。数据用于计算估测的IC50和10iaM时的抑制百分比。通过饱和结合来测定[3111-地塞米松(用于GR结合)、卩H卜甲雌三烯醇酮(用于AR结合)、卩H]-醛固酮(用于MR结合)或卩H-曱雌三烯醇酮(用于PR结合)的Kd。用Cheng-Prusoff方程将化合物的IC50值转化为Ki值。按照基本如上所述的规程，本发明示例性化合物在AR结合试验中的Ki《500nM。优选本发明化合物AR结合试验中的KiSlOOnM，更优选Ki《50nM。此外，相对于人MR、人GR和PR，本发明示例性化合物选择性地结合于AR(Ki较低)。为证明本发明化合物调节(即，激动、部分激动、部分拮抗或拮抗)甾体激素受体活性的能力，进行生物试验，以检测在用核受体蛋白和激素响应元件-报道基因构建物瞬时转染的细胞中靶基因表达的功能性调控。容易通过商业途径获得功能性试验中所用的溶剂、试剂和配体，或可由本领域技术人员制备。甾体激素核受体调节的功能性试验使用Fugene(RocheDiganostics)转染试剂将甾体激素受体和报道基因质粒转染到人胚胎肾HEK293细胞中。简言之，使用病毒CMV(巨细胞病毒)启动子，将含有两拷贝probasinARE(雄激素响应元件5'GGTTCTTGGAGTACT3，(SEQIDNO:l))和位于荧光素酶报道基因cDNA上游的TK(胸苷激酶)启动子的报道质粒，用组成型表达人雄激素受体(AR)的质粒转染到HEK293细胞中。使用病毒CMV启动子，将含有两拷贝GRE(糖皮质激素响应元件5，TGTACAGGATGTTCT，3(SEQIDNO:2))和位于荧光素酶报道基因cDNA上游的TK启动子的报道质粒用组成型表达人糖皮质激素受体(GR)、人盐皮质激素受体(MR)或人孕酮受体(PR)的质粒转染。在T150cm烧瓶中，在含有5%炭吸附的(charcoal-stripped)胎牛血清(FBS)DMEM培养基中转染细胞。孵育过夜后，转染的细胞用胰蛋白酶消化，接种于96孔皿中含5%炭吸附的FBS的DMEM培养基中，孵育4小时，然后暴露于约O.OlnM-10pM的各种浓度的测试化合物。在拮抗剂模式测试中，将针对各受体的低浓度激动剂(对于GR为0.25nM地塞米松；对于AR为0.3nM甲雌三烯醇酮；对于PR为0.05nM普美孕酮(promegestone);对于MR为0.05nM醛固酮)加入培养基中。与测试化合物孵育24小时后，用标准技术裂解细胞，测定营光素酶活性。将数据拟合于四参数-拟合对数曲线(fourparameter-fitlogisticcurvefit)以确定EC50值。相对于用下列参照激动剂获得的最大刺激来确定效力百分比(具有饱和的最大响应的化合物)或最大刺激百分比(具有不饱和的最大响应的化合物)100nM甲雌三烯醇酮(对于AR试验)、30nM普美孕酮(对于PR试验)、30nM醛固酮(对于MR试验)，100nM地塞米松(对于GR试验)。可用拮抗剂模式试验数据类似地确定IC50值。在拮抗剂模式中，通过将存在低浓度激动剂(对于GR为0.25nM地塞米松；对于AR为0.3nM甲雌三烯醇酮；对于PR为t).05nM普美孕酮；对于MR为0.05nM醛固酮)时测试化合物的活性与不存在测试化合物时相同的低浓度激动剂产生的响应进行比较来确定抑制百分比。C2C12AR/ARE报道基因试验作为肌肉组织中的激动剂活性的指示，进行C2C12AR/ARE报道基因试验。简言之，用Fugene^试剂共转染小鼠成肌C2C12细胞。使用病毒CMV启动子，将含有GRE/ARE(糖皮质激素响应元件/雄激素响应元件5，TGTACAGGATGTTCT，3(SEQIDNO:3)和位于萸光素酶报道基因cDNA上游的TK启动子的报道质粒，用组成型表达人雄激素受体(AR)的质粒转染。在T150cn^烧瓶中，在含有4%或1(T/。胎牛血清(FBS)的DMEM培养基中转染细胞。孵育5小时后，转染的细胞用胰蛋白酶消化，接种于96孔皿中的含有10%炭吸附的FBS的DMEM培养基中，孵育2小时，然后暴露于约O.OlnM-lO^M范围内的各种浓度的测试化合物。与测试化合物孵育48小时后，用标准技术裂解细胞，测定萤光素酶活性。将数据拟合于四参数-拟合对数曲线以确定EC50值。相对于用10nM曱雌三烯醇酮获得的最大刺激确定效力百分比。本领域技术人员容易设计与上述甾体激素核激素受体调节功能试验类似的试验。按照基本如上所述的规程，本发明示例性化合物在C2C12AR/ARE报道基因试验中显示的EC50值《1000nM。优选本发明化合物在C2C12AR/ARE报道基因试验中显示的EC50值《100nM，更优选《50nM。体内效力和选择性模型根据批准的程序(CharlesRiverLabs)将雄性Wistar大鼠(12周龄)阉割(性腺切除或"GDX")，使其消耗(waste)8周。还准备了年龄匹配的假手术鼠(假手术鼠是暴露于与阉割的动物相同的手术程序，但它们的睾丸没有移除的动物)。将动物养于温控室(241C)、颠倒的12小时光照/黑暗循环(黑暗10:00/22:00)中，自由饮水和采食。为证明体内效力，每日通过管飼或皮下注射对阉割的20周龄大鼠(体重约400-450g)给予本发明化合物。在划归testslot之前根据动物体重随机分组，以使所有处理组的起始体重彼此差别在5%之内。使用常规载体将测试化合物给予这些动物。例如，无菌水中的1。/。羧甲基纤维素钠(CMC)+0.25%Tween80可用于口服给药，6。/。乙醇(EtOH)+94%环右旋糖酐(cyclodexitrane)(CDX)可用于皮下注射。仅用栽体处理的假手术大鼠用作治疗阳性对照，而仅用载体处理的阉割大鼠用作治疗阴性对照。经2周的时间，对测试动物口服或皮下给予例如0.3、1、3、10或30mg/kg/天的本发明化合物。治疗两周后，作为活性的指示，测定测试组中的LevatorAni(LA)肌肉湿重，并与阉割的、仅用载体处理的对照组的湿重进行比较。相对于总体重将测试组和仅载体组获得的肌肉湿重归一化(normalized)。作为組织选择性的指示，类似地将测试动物的精嚢(SV)湿重与假手术、仅载体处理组的精嚢湿重比较。同样，相对于总体重将测试组和仅栽体组获得的精嚢湿重归一化。除了测定LevatorAni湿重，尸检时分离大鼠的左胫骨，打开骺(epiphysis)之后，小心地除去骨周围的软组织。然后将该样品置于含有0.2%胶原酶的Tris緩冲溶液(pH7.5)中。酶法切除得到的外骨膜层立即进行试验以测定碱性磷酸酶活性(成骨细胞/骨合成代谢活性的指标)。简言之，将30jiL样品置于含有200pL磷酸对硝基苯酯(PNPP)底物緩冲液(PierceCat#37621)的移液管(epitube)中。用纯化的碱性磷酸酶(SigmaCat.#P4252)绘制标准曲线，在读板仪中于AbS405处阅读各样本，以确定骨膜碱性磷酸酶(PALP)活性。相对于总体重可将测试组和仅载体组获得的结果归一化。可如下测定效力百分比(％Eff.):%Eff.=《测试动物的LA湿重或SV湿重或PALP活性/测试动物总体重)/(对照动物的LA湿重或SV湿重或PALP活性/对照动物总体重))X100。按照基本如上所述的方法，实施例74的化合物在上述大鼠体内效力和选择性模型中显示以下活性<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>p.o.=口服给药途径LA=leviatorani肌肉；SV=精嚢GDX=性腺切除骨丧失相关疾病的体内模型为证明本发明化合物具有治疗骨丧失相关疾病例如骨质疏松或骨质减少的能力，可使用本领域熟知的其他动物模型。此类模型的实例提供于Y.L.Ma等,/"/;fl&ye23(增刊)62-68(2005);Y.L.Ma等，五"^cW"0/tf5j144:2008-2015(2003);和K.Hanada等，iV^m26(11):1563-1569(2003)中。特别提到卵巢切除引起的雌激素缺乏性骨质减少雌性大鼠模型和睾丸切除引起的雄激素缺乏性骨质减少雄性大鼠模型。卵巢切除引起的雌激素缺乏性骨质减少模型以自由釆食(含0.5%钧和0.4%磷的TD89222，Teklad，Madison,WI)和饮水方式饲养体重约220g的六月龄未交配SpragueDawley雌性大鼠(HarlanIndustries,IndianapolisIN)。对动物进行双边卵巢切除(Ovx)(假手术对照除外)，然后随机分为几个处理组，每组7-8只大鼠。各试验通常包括至少2组对照，包括假卵巢切除(假手术)和仅用载体处理的卵巢切除对照(Ovx)。允许Ovx大鼠骨质损失l个月，以产生骨质减少，然后用测试化合物治疗。通过管饲将测试化合物口服给予Ovx动物，持续8周。作为阳性对照，可将重组人PTH(1-38)(约10ug/kg/d，皮下)给予一个亚组(subset)的Ovx动物。测试步骤完成之后，用定量计算层析成像(QCT，Norland/Stratec，FortAtkinson,WI)分析腰推L-5和股骨的容积骨矿物质密度(BMD，mg/cc)。使用材料机械测试机(型号661.18c-01，MTSCorp，Minneapolis,MN)进行股骨中间层(femoralmidshaft)的三点弯曲(threepointbending)和近端股骨的荷载破坏(loadtofailure)的生物机械分才斤，用TestWorks4⑧软件(MTSCorp.)进行分析。睾丸切除引起的雄激素缺乏性骨质减少模型以自由采食(含0.5°/。钙和0.4%磷的TD89222，Teklad，Madison,WI)和饮水方式饲养体重约485g的六月龄SpragueDawley雄性大鼠(HarlanIndustries,IndianapolisIN)。对动物进行双边睾丸切除(Orx)(假手术对照除外)，然后随机分为几个处理组，每组7-8只大鼠。各试验通常包括至少2组对照，包括假睾丸切除(假手术)和仅用栽体处理的睾丸切除对照(Orx)。允许Orx大鼠骨质损失2个月，以产生骨质减少，然后开始用测试化合物治疗。通过管飼将测试化合物口服给予Orx动物，持续8周。作为阳性对照，可将重组人PTH(1-38)(约10ug/kg/d，皮下)给予一个亚组的Orx动物。测试步骤完成之后，可用如上文针对卵巢切除的雌性大鼠模型所述进行脊推和股骨的BMD以及股骨的生物机械分析。(参见Ma等，/5M及17:2256-2264(2002)和Turner等，[综述J14:595-608(1993))。如本领域普通技术人员所理解，可容易地改变上述动物模型方案使其适于和本发明化合物及方法联合使用。以下制备例和实施例进一步阐述了本发明，代表了如上所一般描述的式(I)化合物(包括任何新颖化合物)的典型合成方法。本领域普通技术人员容易得到或者容易合成试剂和原料。应理解，这些制备例和实施例用于举例说明本发明，并非限制本发明，本领域普通技术人员可进行各种改变。本文所用的"TLC"指薄层色镨；"HPLC"指高效液相色谱；"GC/MS"指气相色谱-质镨；"LC-ES/MS"指液相色谱-电喷雾质谱；"Rf"指保留因子;"Rt"或"TR"指保留时间；"5"指从四甲基硅烷的百万分之低磁场(down-field)移动；"TFA，，指三氟乙酸；"THF"指四氢呋喃；"DMF"指N，N-二曱基曱酰胺；"DMSO"指二甲基亚砜；"MTBE"指叔丁基甲基醚；"PPh3"指三苯基膦；"DEAD"指偶氮二羧酸二乙酯；"Pd-C"指碳载钯；NaBH(OAc)3指三乙酸基硼氢化钠；"Bn"指卡基；"BnNH2"指节胺；"MeOH"指甲醇；"EtOH"指乙醇；"EtOAc"指乙酸乙酯；"NBS"指N-溴代琥珀酰亚胺；AIBN指2，2，-偶氮二异丁腈；"ee"指对映体过量。用标准技术(例如使用旋光计)来测定旋光度。可通过标准技术(例如X-射线分析以及与手性-HPLC保留时间的相关性)来测定本发明化合物的R或S构型。本发明化合物的命名一般由ChemDraw⑧第7.0.1版提供。中间体1(±)-2-(3-氧代-环戊基)-异吲哚-l，3-二酮将环戊烯酮(100g，1.2mol)和邻苯二甲酰亚胺(170g，1.2mmol)在甲醇(900mL)中混合，并室温搅拌18小时。用机械搅拌器剧烈搅拌，加入2MNa2CO3水溶液(80mL)。约2小时后，形成粘稠的白色沉淀物。室温搅拌48小时。通过真空过滤收集白色固体，并用曱醇洗涤。将固体悬浮在水(300mL)中，搅拌3小时。收集固体，在真空烘箱中于40'C干燥过夜，得到195g(71%)标题化合物，为白色固体。力NMR(DMSO-A)57.85-7.77(m，4H)，4.90(m，1H),2.67(ddd，1H，/=18.5，6,2,1.3Hz)，2.54(dd，1H,/=18.5,9.2Hz)，2.45(m，1H)，2.32-2.21(m,3H);MS(m/z):230(M+1,弱)。中间体2(±)-2-(1，3-二氧代-l，3-二氢-异吲哚-2-基)-l，2，3，4-四氢-环戊二烯并[6吲哚-7-腈将(±)-2-(3-氧代-环戊基)-异吲咮-1，3-二酮(12.7g,55.3mmol)和4-氰基苯肼-HCl(8.53g，50.3mmo1)在HOAc(200mL)和4NHC1二噁烷(50mL)中混合。机械搅拌下将反应物加热至卯。C，保持18h,然后加入另外的4NHC1二噁烷(20mL)。加热反应物至100。C，保持18小时。用水(600mL)稀释反应混合物，真空过滤收集黑色固体。在MeOH(200mL)中声处理该固体，然后收集并在真空烘箱中干燥，得到10.94g(66。/。)灰褐色固体。MS(m/z):328(M+l),326(M-l)。中间体3(±)-2-(7-三氟曱氧基-l,2，3,4-四氢-环戊二烯并[A]吲哚-2-基)-异吲哚-1，3-二烯酮(dionene)将(4-三氟甲氧基-苯基)-肼盐酸盐(1.5g,6.56mmol)和(土)-2-(3-氧代-环戊基)-异吲哚-l，3-二酮在EtOH(20mL)中混合，加热至回流保持14小时。真空浓缩反应混合物，用Et2O(150mL)稀释残留物。将混合物置于超声波浴中10分钟，然后滤除固体。浓缩滤出液得到粗产物。使用10-60%EtOAc/己烷下，在硅胶(120g)上纯化该物质，得到520mg(22。/。)标题化合物，为黄色固体。^-NMR(DMSO-A)S11.22(s,1H)，7.85(m，4H)，7.38(d，1H，/=8.8Hz),7.28(d,1H，/=1.3Hz)，6.96(dd，1H，/=8.8，1.3Hz),5.41(m,1H)，3.38-3.11(m，4H)。中间体4(±)-2-氨基-1，2，3，4-四氢-环戊二烯并[6]吲哚-7-腈在配备有机械搅拌器的三颈圓底烧瓶中制备THF(3100ml)和乙醇(550ml)的混合物。向该混合物中加入粗的2-(1，3-二氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-l，2，3，4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-7-腈(170g，t).52mo1)，搅拌15分钟。加入水合肼(90ml，1.9mol),室温搅拌该混合物16小时。用LC/MS检测，以确定无原料残余。真空过滤粗反应物，用THF(2x200mL)洗涤该固体。收集母液，真空下除去溶剂。使用(2MNH3/MeOH)/CH2Cl2(3-10。/。)下，通过硅胶(1.5，，高，很宽的Si02垫)过滤进行纯化。收集含有产物的级分，去除溶剂。加入乙腈(180ml)，回流该混合物15分钟，然后冷却到室温。过滤收集褐色固体，于40'C真空干燥过夜，得到外消旋的标题化合物55g(60%)。GC國MS:198(M+)，196(M國)；注意在此时刻，分离外消旋胺的对映异构体，或继续用外消旋物质进行合成反应并对最终的化合物进行手性制备HPLC分离。中间体4aCy)-2-氨基-l,2，3,4-四氢-环戊二烯并[6]吲哚-7-腈<formula>formulaseeoriginaldocumentpage30</formula>在配备有机械搅拌器和冷凝器的2L烧瓶中加入乙醇(945ml)和(土)-2-氨基-l，2，3,4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-7-腈(40g，0.203mmo1)。搅拌该混合物，加热至60-65'C，直到达到完全溶解。加入D-焦谷氨酸(28.4g,0.192mmo1)和水(55ml)。加热该混合物至回流，保持20分钟。经卯分钟冷却至40-45'C。在40-45。C搅拌1小时，然后经2小时冷却至24。C，在该温度下搅拌另外2小时。通过过滤分离结晶固体，用EtOH/水(95:5)(3x50mL)混合物洗涤。于50'C真空干燥固体过夜，得到23g焦谷氨酸盐。Specificrotation:游离碱的分离在水(150mL)中加入焦谷氨酸盐，搅拌直到达到完全溶解。通过硅藻土垫过滤。收集水溶液，调节pH至9，加入浓氨水。过滤收集灰白色固体，于50'C真空干燥过夜，得到13.5§(35%)(5)-2-氨基-1，2，3，4-四氢-环戊二烯并[6吲哚-7-腈，294%ee(柱,ChiracelOJ(4.6x250mm;10Jim);溶剂，20。/。EtOH/(0.2。/。二曱基乙基胺/己烷)，相对外消旋混合物检测)。比旋光度(Specificrotation):[a]D25-68.30(MeOH)。中间体4b(及)-2-氨基-l，2，3，4-四氢-环戊二烯并[6吲哚-7-腈使用L-焦谷氨酸，基本如针对中间体4a所述制备标题化合物。产物(97%ee)的比旋光度[aD25+63°(EtOH)。中间体5(±)-7-三氟甲氧基-l，2，3,4-四氢-环戊二烯并[6吲咮-2-基胺使用(±)-2-(7-三氟曱氧基-l，2，3,4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-2-基)-异吲哚-1,3-二烯酮，基本如针对中间体4所述进行制备。MS(m/z):257(M+l)，255(M陽l)。中间体6(±)-(7-氰基-1，2，3，4-四氢-环戊二烯并[6]吲哚-2-基)-氨基甲酸异丙酯氮气下，将(±)-2-氨基-1，2，3，4-四氢-环戊二烯并问吲哚-7-腈(7.0g,35.5mmol)和二异丙基乙基胺(7.4mL,42.6mmol)在CH2C12(70mL)中混合。加入氯甲酸异丙醋(1.0M甲苯溶液，42.6mL，42.6mmo1)，室温下搅拌过夜。用水(100mL)和乙醚(50mL)稀释，搅拌10分钟，收集固体。干燥后，获得7.42g(6r/。)标题化合物，为棕黄色(tan)固体。MS(m/z):284(M+l)，282(M-l)。PreparetheintermediatesinTable1essentiallyasdescribedforthepreparationofIntermediate6使用合适的酰基氯、氯甲酸酯或二碳酸二烷基酯，三乙基胺与二异丙基乙基胺可互换地作为碱，基本如针对中间体6所述，制备表l中的中间体。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>*或者，通过对中间体9的手性色谱获得中间体17。中间体18(±)_N-[7-(甲氧基亚氨基-曱基)-l，2，3，4-四氢-环戊二烯并[6吲哚-2-基卜异丁酰胺在水/96%甲酸(1/10，110mL)中混合(土)-N-7-氰基-l，2，3,4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-2-基卜异丁酰胺(5g，18.7mmol)和Al-Ni催化剂(15g)。回流18小时，加入Al-Ni催化剂(13g),另外回流5小时。冷却，用MeOH稀释，滤除无机物。浓缩滤液，加入EtOH(200mL),声处理15分钟。过滤不溶物，向粗制的醛溶液中加入溶于水(25mL)的O-甲氧基胺-HCl(120mmo1),用5.0NNaOH使该混合物呈碱性(pH=9-12)。室温搅拌18小时，减压下除去大多数溶剂。将残留物与水混合，声处理30分钟。分离褐色固体4.39g。使用30-100%EtOAc/己烷，在硅胶上纯化该物质，得到530mg(10%)标题化合物，为浅黄色固体。MS(m/z):300(M+l),298(M-l)。中间体19(及)-N-[7-(曱氧基亚氨基-甲基)-1，2，3，4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-2國基-2，2-二甲基-丙酰胺在氮气下，于室温混合二氯甲烷(15ml)和(及)-[7-氰基-l，2，3，4-四氢-环戊二烯并[6吲哚-2-基-氨基甲酸叔丁酯(2g，6.73mmo1),搅拌10分钟。经15分钟滴加二异丁基氢化铝(1M二氯曱烷溶液，14.1ml;14.1mmo1)。向反应混合物中加入乙酸乙酯(30mL)，室温搅拌1小时。加入20%酒石酸钠水溶液(30mL),室温搅拌lh。分离有机层，用乙酸乙酯(2x15mL)萃取水层。混合并干燥(Na;jS04)有机层，过滤并浓缩，得到2.2g[(及)-7-甲酰基-1，2,3，4-四氢-环戊二烯并[6吲哚-2-基l-氨基甲酸叔丁酯。通过硅胶色谱(使用二氯曱烷/丙酮(95/5))纯化，得到1.3g(64。/。)。MS(m/z):301(M+l)。在100mL圆底烧瓶中加入[(及)-7-曱酰基-l,2，3，4-四氢-环戊二烯并[6吲哚-2-基]-氨基甲酸叔丁酯(1.00g;3.33mmo1)、乙醇(10ml)、碳酸钾(552mg,4mmol)和盐酸0-甲基羟胺(334mg;4.0mmo1)。室温下搅拌该混合物1小时。真空除去溶剂，加入水(15mL)。搅拌该混合物30分钟，过滤得到7卯mg(720/))。MS(m/z):330(M+l).中间体202-溴甲基-6-氟-吡啶室温下，向6-氟-2-曱基吡咬(20mL，0.19摩尔)的EtOAc(400mL)溶液中加入NBS(35.6g，0.20摩尔)。温度达到45。C时，加入AIBN(400mg，2.4mmol)。于65'C加热该混合物6小时，然后冷却至室温，加入己烷(lL)。过滤移出白色沉淀物，用己烷/EtOAc(l:l)洗涤固体。用少量Na;jS203水溶液、NaHCO;j水溶液和盐水洗涤滤液。室温下，干燥有机物(Na;jS04),过滤，然后真空除去大多数溶剂。将剩余溶液转移到蒸馏装置上。通过常压蒸馏移出剩余的溶剂，接着于80mm移出未反应的原料(熔点约70'C;11.2g)，然后于lmm移出标题化合物(熔点约75°C;12.1g，32%)。NMR(300MHz;CDC13):7.82(1H;dd);7.35(1H;dd);6.90(1H;dd);4.50(2H;s)。中间体212-(3-溴曱基-吡啶-2-基)-异吲哚-1，3-二酮使用Goswami，S.等，/.爿附.1989，"7，3425-3426所描述的，Graczyk，P.WO2004013139,2004所例举的方法制备标题化合物，以2-氨基-3-甲基吡啶和邻苯二甲酸酐为原料，然后用NBS溴化，得到白色固体状产物，产率为33%。MS(m/z):317，319(M+l)。中间体223-溴甲基-异噻唑按照Buttimore,D.等，/.1963，2032-2039的步骤，从可商购的盐酸5-氨基-3-甲基异噻唑制备3-甲基异噻唑。将3-甲基异噻唑(3.61g，36.6mmo1)、N-溴代琥珀酰亚胺(6.8g,38.2mmol)和l，l-偶氮双(环己烷腈)(0.18g，0.73mmol)在CCl4(100mL)中的混合物回流18小时。冷却并过滤除去琥珀酰亚胺副产物。浓缩滤液，用硅胶色镨(使用EtOAc/己烷(1/5))纯化，获得2.78g(42.9%)产物。丄HNMR(400MHz,CDC13)S8.63(d，/=5.1Hz，1H),7.34(d，/=5.1Hz，1H)，4.59(s，2H)。中间体235-溴-3-溴甲基-异噻唑按照Adams,A.;Slack,R./.Ck柳.1959，3061-3072的方法制备5-溴-3-曱基异噻唑。基本如针对中间体22所述，使用NBS和5-溴-3-甲基异噻唑制备标题化合物。中间体242-溴甲基-6-二氟甲基-吡啶向6-曱基-2-吡啶羧基醛(carboxaldehyde)(2.6g，21.5mmol)的CH2C12(25mL)溶液中緩慢加入双(2-甲氧基乙基)氨基三氟化硫(9.2mL,50mmo1)。18小时后，小心地倒入容纳饱和NaHC03(300mL)的烧瓶中。与水/CH2Cl;j一起震荡并分离。干燥有机层(Na2S04)并浓缩，得到2.11g褐色油。在硅胶(50。/。EtOAc/己烷)上纯化，得到1.16g(38。/。)黄褐色油状的2-曱基-6-二氟甲基國吡啶。溶解(1.0g,7mmol)在CCl4(30mL)中，加入NBS(1.2g，6.8mmo1)和AIBN(100mg)。回流4小时，过滤并浓缩。在珪胶上(使用5-10%EtOAc/己烷)经30分钟纯化所得的残留物，获得670mg(43%)。GC/MS221+223。中间体252-氯甲基-3-氯p比嗪按照基本如Jeromin，G.E.等，DE3519364，1986和Russell,M.G.N.等，/.2005,1367-1383所述的氯化操作制备标题化合物。将2-甲基-3-氯吡溱(24.3g,189mmol)溶解在CHCb(100mL)中。加入苯甲酰胺(100mg，0.8mmol)，加热至回流。回流下，加入固体三氯异氰尿酸(17.6g,75.6mmo1)，继续回流96小时。冷却并过滤通过200g硅胶(用二氯曱烷洗脱)。通过硅胶色谱(使用35%氯仿/己烷至60%氯仿/己烷的梯度，历时1小时)纯化。获得无色油状标题化合物，5.39g纯标题化合物和9.4g纯度>70%的所需产物。卫H-醒R(CDCb)58.50(d，1H，/=2.2Hz)，8.37(d，1H，/=2.6Hz),4.80(s，2H)，2.50(s，3H);GC/MSM=162+164。按照基本如针对中间体25所述，使用2,3-二曱基吡嗪、2-氯-4-甲基吡啶、2-曱基噻唑和3-甲基哒溱制备中间体26-29。<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>基本按照Newkome，G.R.等，1984,676-679所述，使用2國甲基吡嗪、2，5-二甲基吡嗪和N-氯代琥珀酰亚胺(NCS)制备中间体30和31。<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>中间体32吲哚誦2-基异丁酰胺将(土)-N-(7-氰基-l，2，3,4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-2-基)-异丁酰胺(&28g，18.8mmol)、6-氟-2-溴甲基吡啶(3.93g,20.7mmol)和Cs2C03(12.25g，37.6mmol)在DMF(25mL)中混合。50。C加热反应物18小时。冷却，用EtOAc稀释，用水(3x200mL)洗涤。将有机层干燥(MgS04)，浓缩得到7.1g粗物质。经硅胶色语(5-20%EtOAc/CH2Cl2)纯化。获得4.0g(56%)黄褐色固体。MS(m/z):377(M+1)，375(M-l)。实施例la&lb(R)-和(S)-N-[7-氰基-4-(6-氟-吡啶-2-基甲基)-l，2，3，4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-2-基卜异丁酰胺通过手性色镨(使用ChiralpakAD-H(MeOH))分离实施例1的对映异构体。异构体1(R):1.67g99。/。ee，HPLC:Rt=3.44(96.5%)，ifl-NMR(DMSO-A)S8.22(d,1H，/=7.5Hz),7.96-7.88(m，2H)，7.62(d，1H，/=8.3Hz)，7.38(dd，1H，/=8.4,1.8Hz),7.07(td，2H，/=10.9，3.9Hz)，5.44(dd，2H，/=19.2，16.5Hz)，4.86(m，1H)，3.28-3.12(m，2H)，2.69-2.61(m,2H)，2.32(m，1H)，0.97(t，6H,/=6.4Hz)。异构体2(S):1.45g98.9%ee，HPLC:Rt=3.44分钟(100%),力-NMR(DMSO-rf6)与异构体l的相同。(土)-(7-氰基-4-嘧啶-4-基甲基-l，2，3,4-四氢环戊二烯并[b]吲哚-2-基)-氨基甲酸异丙酯氮气下，向嘧咬-4-基曱醇(250mg，2.27mmol)的CH2C12(12mL)悬浮液实施例2中加入N，N-二异丙基乙基胺(475mg，640nL,3.68mmo1)，冷却至(TC。加入甲磺酰氯(275mg,186jiL、2.40mmo1),升至室温。室温搅拌1小时后，将反应混合物载至已用水(2mL)预处理的VarianChemElutCE1005固相萃取柱(Varian批次(part)编号12198006)。用CH2C12(30mL)洗脱通过该柱，收集并浓缩有机洗脱液。向洗脱液中加入DMF,真空浓缩得到甲磺酸盐的DMF溶液。向该溶液中加入(±)-(7-氰基-1，2，3，4-四氢环戊二烯并[1)1吲哚-2-基)-氨基甲酸异丙酯(495mg，1.75mmol)、Cs2C03(1.14g、3.5mmol)和DMF(10mL)。在密封的小瓶中加热该混合物至50。C,保持18小时。用EtOAc(100mL)稀释反应物，用水(3x60mL)洗涤有机物。用MgS04干燥有机层，过滤并浓缩，得到631mg红色油状粗产物。硅胶(40g)[40-90%EtOAc/(l:lCH2Cl2/己烷)]上纯化该油状物，得到487mg(74%)标题化合物，为白色固体。LCMS92%@4.34分钟(m/z):376(M+1)，374(M-1)，420(M+HC(V)。(S)-7-(氰基-4-噻唑-5-基甲基-l,2，3，4-四氢-环戊二烯并[6]吲哚-2-基)-氨基甲酸异丙酯在氮气下，将N，N-二异丙基乙基胺(2.39g,3.2mL,18.5mmol)和曱磺酰氯(1.27g,864jiL,11.1mmol)加入到冰冷(0。C)的5-(羟甲基)噻唑(1.22g，10.6mmol)的CH2Cl2(50mL)溶液中。室温搅拌反应物18小时。加入水(30mL)，分离各层，用MgS04干燥有机物。过滤，向有机层加入DMF(IOmL)。真空浓缩，得到甲磺酸盐的DMF溶液。向该溶液中另外加入DMF(40mL)、(5>7-(氰基-1,2，3，4-四氢-环戊二烯并[6吲哚-2-基)-氨基曱酸异丙酯(2.50g，8.82mmol)和Cs2C03(5.57g，17.6mmo1)。室温搅拌72小时。用EtOAc(300mL)稀释反应混合物，先后用水(3x130mL)和盐水(100mL)洗涤有机物。干燥(MgS04)、过滤并浓缩有机物，得到3.8g黄色油状粗产物。硅胶[120g,30-60%EtOAc/(l:l012<:12/己烷)1上纯化得到2.22g(66%)标题化合物，为白色固体。LCMS100%@4.46分钟(m/z)381(M+H),425(M+HC02)。实施例3使用以上实施例2或3中所述方法，将下述醇转化为甲磺酸盐2-羟甲基嘧啶、3-羟曱基-4，5-二氯异噻唑、2-氯-4-羟甲基噻唑、2-羟曱基噻唑和5-羟曱基噻唑。使用以上所述或可商购的合适的杂芳基甲基卣化物或杂芳基甲基甲磺酸酯，基本按照实施例1和实施例2中所述的方法，用合适的取代1,2,3,4-四氢环戊二烯并[bp引咮制备表2中的实施例4-53和中间体40-41。从上述制备的相应的手性1，2，3，4-四氢环戊二烯[6吲咮制备手性物质，或基本如实施例la和lb中所述分离外消旋物。<table>tableseeoriginaldocumentpage40</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage42</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage43</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage44</column></row><table>'2-溴曱基-3-羟基吡啶氢溴酸盐可购自LancasterSynthesis,"按照实施例la、lb所一般概述的方法，通过外消旋产物的手性分离来获得所示实施例。m室温下进行反应。中间体40的另选方法{05)-7-氰基-4-[2-(1，3-二氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基)-吡啶-3-基甲基卜1，2，3，4-四氢-环戊二烯并[b]吲哚-2-基}-氨基曱酸异丙酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage44</formula>将(5)-(7-^J^-l,2，3，4-四氢-环戊二烯并[6吲哚-2-基)-氣基甲酸异丙酯(20g，70.59毫摩尔；ee>98%，ChiracelOJ上的第2种异构体，己烷/EtOH[80:20]中的0.2%DMEA)溶解在二曱基亚砜(160mL)中，加入2-(3-溴曱基-吡啶-2-基)-异>I引咮-l，3-二酮(29.8g，84.71mmo1)。搅拌该混合物直到获得澄清溶液。一次性加入碳酸铯(46.4g，141.18毫摩尔)和二曱基氨基吡啶(875.5mg，7.06mmo1)。22/24。C下搅拌所得混合物2小时。将该混合物加到水(1.4L)上。搅拌所得的悬浮液30分钟并过滤。用水(10ml)洗涤所得的饼状物。将分离的湿固体溶解在二氯曱烷(750mL)中，分离有机层。用盐水洗涤有机层，蒸发有机溶剂。通过硅胶色谱(以己烷/丙酮/CH2Gb(3/1/1)洗脱)纯化所得的物质，获得24g(58%)。MS(m/z):520(M+l)。实施例54(S)-[4-(2-氨基-吡啶-3-基曱基)-7-氰基-l，2，3,4-四氢-环戊二烯并[6吲哚-2-基-氨基甲酸异丙酯在THF(22mL)和乙醇(4mL)的混合物中混入粗制的(^-{7-氰基-4-[2-(1，3-二氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-吡啶-3-基曱基1-1,2，3，4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-2-基卜氨基曱酸异丙酯(2.12mmo1，1100mg粗物质)，搅拌15分钟。加入水合肼(0.5mL，lOmmol)，室温搅拌该混合物18小时。真空过滤该粗反应物，用THF(50mL)洗涤固体。收集滤液，真空除去溶剂。所得的残留物经硅胶色谱(50-100。/。乙酸乙酯/CH2Cl2)纯化，获得110mg(13%)标题化合物。MS(m/z):3卯(M+l)。另选方法将(5)-{7-氰基-4-[2-(1，3-二氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基)-吡啶-3-基曱基]-l，2，3，4-四氢-环戊二烯并[6吲哚-2-基}-氨基曱酸异丙酯(20g;34.64毫摩尔)溶解于四氢呋喃(170mL)和乙醇(30mL)中。经30分钟用注射泵加入一水合肼(3.37mL,69.29毫摩尔)。22/24。C下搅拌该混合物3小时，然后过滤。用另外的四氢呋喃(50ml)洗涤所得的饼状物。蒸发合并的母液，通过硅胶色i普(用二氯甲烷/(2MNH3的曱醇溶液/)(98:2)洗脱)纯化所得的残留物。合并含有纯产物的级分，蒸发溶剂。干燥固体至恒重，然后加到乙醇(50mL)上。加热该混合物至回流，直至完全溶解，然后允许冷却至室温过夜。过滤固体，真空干燥至恒重，获得11.45g(84。/。)标题化合物。MS(m/z):390(M+l)。手性HPLC:ee>98%(异构体1，ChiralpakAD,EtOH/0.2。/o二甲基乙胺)。中间体42(±)-2-(1，3國二氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)國4國(6國氟-吡啶-2-基甲基)-l，2,3，4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-7-腈将(±)-2-(1,3-二氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基)-1，2，3，4-四氢-环戊二烯并[6吲哚-7-腈(6.88g,21.0mmol)和2-溴甲基-6-氟-吡啶(3.99g,21.0mmol)溶解在DMF(80mL)中。加入碳酸铯(7.51g,23.1mmo1,1.10当量)，在室温、氮气下搅拌反应混合物48小时。用乙酸乙酯稀释反应物，用水(3x)洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤并浓缩，获得半固体(8.10g)。在120g硅胶柱(用0-100%乙酸乙酯/己烷洗脱)上纯化粗产物，获得6.7g棕黄色/褐色固体。室温下，将产物悬浮在醚(100mL)中过夜。过滤固体，用醚冲洗，在高度真空下干燥，获得标题化合物，为棕黄色固体(5.70g，62%)。LCMS437.1(M+l)。中间体43(±)-2-(1，3誦二氧代國1，3-二氢-异吲哚國2國基)國4國吡啶-2國基甲基画1，2,3,4-四氢國环戊二烯并[6吲哚-7-腈<formula>formulaseeoriginaldocumentpage46</formula>将2-(l，3-二氧代-l，3-二氢-异吲哚-2-基)-l，2，3，4-四氢-环戊二烯并[6吲哚-7-腈(5g，15.3mmol)在DMF(25ml)中的混合物加热至40。C。加入碳酸铯(10.4g,32.4mmol)和2-溴曱基吡啶氢溴酸盐(4.05g,16mmo1)。于40。C搅拌该混合物24小时，将该混合物加到水(250mL)中，搅拌1小时。过滤固体，将收集到的物质真空干燥。将固体加入到乙醇(25mL)中，回流30分钟。冷却混合物至22'C并过滤。真空干燥该固体至恒重，获得4.8g(75W)标题化合物。MS(m/z):419(M+l)。中间体44(±)-2-氨基-4-(6-氟-吡啶-2-基甲基)-1，2，3，4-四氢-环戊二烯并[6j吲哚-7-腈<formula>formulaseeoriginaldocumentpage46</formula>将(±)-2隱(1，3國二氧代画1，3-二氢-异吲哚-2-基)-4-(6-氟-吡啶-2-基甲基)-l，2，3,4-四氢-环戊二烯并W吲哚-7-腈(5.31g,12.2mmol)溶解在乙醇(15mL)/四氢呋喃(85mL)中。于室温在氮气下，加入一水合肼(4.43ml，91.2mmo1，7.50当量)并搅拌过夜。用乙酸乙酯(150ml)稀释，滤除白色固体，用10°/。碳酸钾洗涤有机层两次，经无水硫酸钠过滤，过滤并浓缩，获得橙色油状标题化合物(3.42g，91%)。LCMS307.0(M+l),305.0(M誦l)。中间体45(土)-2-氨基-4-吡啶-2-基甲基-l，2，3，4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-7-腈盐酸盐将2-(l，3-二氧代-l,3-二氢-异吲哚-2-基)-4-吡啶-2-基甲基-l，2，3，4-四氢-环戊二烯并[6吲咮-7-腈(77g，184mmol)加到THF(1.3L)和乙醇(230mL)中。搅拌混合物10分钟，然后加入一水合肼(20mL,400mmo1)。于22。C搅拌混合物16小时。过滤混合物，蒸发母液。将残留物溶解在二氯甲烷(300mL)中。加入4M氯化氢的二噁烷(50mL)溶液，搅拌混合物2小时。过滤，将所分离的固体真空干燥至恒重，获得54g(90。/。)标题化合物。MS(m/z):289(M+l)。基本按照实施例1和实施例2中所述方法，使用中间体16，并用合适的杂芳基曱基卤化物或甲磺酸杂芳基甲酯烷基化来制备以下手性氨基甲酸叔丁酯，即表3中的中间体46-51。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage48</column></row><table>室温下，将(及)-(7-氰基-4-异噻唑-3-基曱基-l，2，3，4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-2-基)-氨基甲酸叔丁酯(1.16g，3,19mmol)在4MHC1的二噁烷(20mL)溶液中的悬浮液搅拌2小时，然后真空浓缩。于40'C真空干燥残留物过夜。MS(m/z):295(M+l)。基本按用于中间体52的方法中所述，使用合适的7-氰基-4-杂芳基曱基-1，2，3，4-四氢-环戊二烯并[61吲哚-2-基)-氨基甲酸叔丁酯制备下列胺，即表4中列举的中间体53-59。分离胺的盐酸盐或二盐酸盐。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage48</formula>中间体52(及)-2-氨基-4-异噻唑-3-基甲基-1，2，3，4-盐酸盐<table>tableseeoriginaldocumentpage49</column></row><table>实施例55(±)-3-[7-氰基-4-(6-氟-吡啶-2-基曱基)-l，2，3，4-四氢-环戊二烯并[6]吲哚-2-基卜1，1-二甲基-脲<formula>formulaseeoriginaldocumentpage49</formula>向(±)-2-氨基-4-(6-氟-吡啶-2-基甲基)-l，2,3，4-四氢-环戊二烯并[6吲哚-7-腈(70mg，0.23mmol)和二异丙基乙胺(0.35mmo1,61pL)的二氯甲烷(lmL)溶液中加入N，N-二甲基氨甲酰氯(0.35mmol、32jiL),室温搅拌过夜。将溶液加载在硅胶上，并通过柱色谱(0-100%乙酸乙酯/二氯甲烷)纯化，获得标题化合物。LCMS378.1(M+l)'实施例56(±)-(7-氰基-4-吡啶-2-基甲基-1，2，3，4-四氢-环戊二烯并6吲哚-2-基)-氨基曱酸异丙酯向(±)_2-氨基-4-吡啶-2-基甲基-l，2,3,4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-7-腈(2.32g,8.05mmol)和二异丙基乙胺(9.65mmo1,1.68mL)的二氯曱烷(10mL)溶液中加入氯曱酸异丙酯(8.86mmo1，8.9mL)，室温搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释，用10%K2C03溶液(2x)洗涤。用Na;jS04干燥有机部分，过滤并浓缩，获得3.3g产物。经柱色语(0-100%乙酸乙酯/二氯甲烷)纯化，获得2.48g(82%)外消旋产物。LCMS375.2(M+l)。另选方法将(±)2-氨基-4-吡啶-2-基甲基-1，2，3，4-四氢-环戊二烯并[6p51哚-7-腈盐酸盐(35g,108mmol)加至二氯甲烷(350mL)和吡啶(70mL)的混合物中。氮气下搅拌混合物，并冷却至5。C。加入氯甲酸异丙酯(甲苯中的1M溶液，162mL，162mmo1)。移除水浴，于22。C搅拌该混合物。16小时后蒸发溶剂。将所得的残留物加入水(350mL)中，搅拌2小时。过滤，并于45'C真空干燥所收集的固体。将固体加至乙酸乙酯(400mL)中，加热混合物至回流。然后冷却至22。C,过滤固体。将湿固体加入到乙酸乙酯(200mL)中，加热至回流，保持30分钟。经1小时将混合物冷却至22'C，然后经5分钟冷却至0-5'C。过滤该混合物，真空干燥所分离的固体至恒重，获得23g(62。/。)标题化合物。MS(m/z):374(M+l)。实施例56a&56b(及)誦和(5)-(7-氰基-4-吡啶-2-基甲基國l,2，3，4-四氢-环戊二烯并[6吲哚誦2國基)-氨基甲酸异丙酯用制备型手性色镨(preparativechiralchromatography)分离实施例56的对映异构体，其中使用ChiralpakAD柱(8x33cm),用100%EtOH以375mL/min于250nm洗脱。异构体l(R):1.14g，99.9%ee(分析条件ChiralpakAD-H柱，用100%EtOH/0.2。/。二甲基乙胺洗脱；LCMS375.2(M+l)。异构体2(S):1.67g，99.4%ee;LCMS375.2(M+l)。制备56(b):0S)-(7-氰基-4-吡啶-2-基甲基-l，2，3，4-四氢-环戊二烯并W吲哚-2-基)-氨基甲酸异丙酯的第一种备选路线在DMF(100mL)中加入Oy)陽7國氰基國l，2，3，4曙四氢-环戊二烯并问吲哚-2陽基)-氨基甲酸异丙酯(中间体15)(13g，41.3迈mo1),使该溶液温热至40'C。一次性加入碳酸铯(42g，129mmo1),于40'C搅拌该混合物30分钟。经4小时分批加入2-溴甲基吡啶氢溴酸盐(21g，83mmo1)。40'C下搅拌混合物18小时。0-5'C下加入混合物至冷水(lL)中，搅拌30分钟。过滤分离固体，真空干燥至恒重。CH2Cl2/EtOAc(7/3)洗脱下，使物质通过硅胶垫。合并含有产物的级分，蒸发溶剂，得到灰褐色固体。从乙酸乙酯中重结晶，得到15.3g(77%)标题化合物。LC/MS(m/z)375(M+l)。制备56b的第二种备选路线(HPLC条件-柱ZorbaxSB-苯基，快速拆分(Resolution)，4.6x75mm，3.5微米;溶剂10%乙腈/90%水(含0.05%TFA);UV230nm)步骤1:(土)-(7-氰基-l，2，3，4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-2-基)-氨基曱酸叔丁酯12L的三颈圆底烧瓶配备有顶架式搅拌器(overheadagitation)、热电偶、加料漏斗、氮气进口和冷却浴。向该烧瓶中加入(±)-2-(1,3-二氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基)-l,2，3,4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-7-腈(500g,l.53摩尔)和THF(5L)。室温下搅拌所得的浆液。经10分钟从加料漏斗緩慢加入一水合肼(185.6mL，3.82摩尔)。室温下搅拌所得的混合物过夜(约18小时)。向浴中加入冷却水，使加料漏斗装有二碳酸酸二叔丁酯(875.1g,4.01摩尔；提前融化为液体)。经2小时加入反应混合物，保持反应釜温度低于30'C。15分钟后，用HPLC分析，发现中间体胺已完全消耗。将反应混合物过滤在不锈钢台式过滤器中的聚丙烯填料上，所得的饼状物用乙酸乙酯(2xlL)洗涤。真空浓缩滤液，以除去大部分THF。所得混合物(约1L)经硅胶塞(4KgKieselgel-60)纯化，其中用乙酸乙酯洗脱。将回收的洗脱液真空浓缩至黑色油状物。加入庚烷(2L)和乙酸乙酯(350mL)，室温下，在旋转蒸发器上使内容物旋转2小时。向浴中加入水，所得浆液于5'C另外旋转2小时。过滤固体，用90/10庚烷/乙酸乙酯(2x500mL)沖洗，35'C真空干燥。获得浅棕黄色固体状标题化合物，产率为91.6%。步骤2:(±)-(7-氰基-4-吡啶-2-基甲基-l,2，3，4-四氢-环戊二蜂并[6]吲哚-2-基)-氨基甲酸叔丁酯20L的底部出口(bottomoutlet)烧瓶配备有顶架式搅拌器、热电偶和氮气进口。该烧瓶装有(±)-(7-氰基-1，2，3,4-四氢-环戊二烯并61吲哚-2-基)-氨基曱酸叔丁酯(500g，1.68摩尔)和二氯曱烷(5L)。开始搅拌并先后加入四正丁基硫酸氲铵(58.9g，0.168mol)和2-(溴甲基)吡啶氢溴酸盐(510.4g，2.02摩尔)。先后加入去离子水(2L)和50%NaOH溶液(445.3mL,8.41摩尔)。将所得的混合物剧烈搅拌过夜(约21小时)。停止搅拌，使各层分离，弃去水层(上层)。用去离子水(3x4L)洗涤有机物，经硫酸钠干燥，真空浓缩至约500mL。硅胶塞(7KgKeiselgel60，使用1:1乙酸乙酯/庚烷作为洗脱剂)上纯化粗产物。真空浓缩洗脱液，获得560克标题化合物，为灰白色固体(81.4%)。步骤3:(R)-和C)-(7-氰基-4-吡啶-2-基曱基-l,2，3，4-四氢-环戊二烯并[6吲哚-2-基)-氨基曱酸叔丁酯寸吏用以下手性分析HPLC方法分析对映异构体4.6x150mmChiralpakAD-H柱(ChiralTechnologies),20:80:0.2乙腈/3A级变性乙醇/二甲基乙胺流动相，0.6mL/分钟流速，255nm处UV检测。对映异构体1在4.0分钟洗脱，对映异构体2在5.2分钟洗脱。8。/。的杂质(255nm)在3.6分钟洗脱。通过使用以下条件的手性制备HPLC純化(±)-(7-氰基-4-吡啶-2-基甲基-1，2，3，4-四氢-环戊二烯并[6吲咮-2-基)-氨基甲酸叔丁酯(528g):8x33cmChiralpakAD柱，与分析时所用流动相相同，375mL/分钟流速，270nm处UV检测。将108g样品溶解在流动相中，终浓度为75mg/niL。上样4.0g/注射，对映异构体1级分在3.5-5.5分钟之间洗脱。对映异构体2在6-10分钟之间洗脱。设定最终的跑样时间为7.5分钟/注射，部分对映异构体2在每次注射后即可洗脱，从而减少了溶剂消耗。硅胶塞纯化剩余的420g产物，其中使用Merck938560Angstrom230-400目硅胶，用1:2:7二氯甲烷/庚烷/甲基叔丁基瞇溶剂系统洗脱。使用3.5kg硅胶垫，以140g样品/塞进行真空过滤。在5个柱体积后开始出现外消旋体。先后使用100%甲基叔丁基醚和100%丙酮将其余的外消旋体推离塞。以这种方式获得总共358.5g的98+。/。纯度的外消旋体。如上所述用手性制备HPLC拆分该物质。获得208.8g(99.9%ee)外消旋体1(R异构体)和197g(99.6%ee)外消旋体2(S异构体)。步骤4:CS")-2-氨基-4-吡啶-2-基甲基-l，2，3，4-四氢-环戊二蜂并[6吲哚-7-腈盐酸盐3L三颈圆底烧瓶配备有加热罩(heatingmantle)、空气搅拌器、温度探测器、氮气进口和加料漏斗。在烧瓶中装有(5)-(7-氰基-4-吡啶-2-基甲基-1,2，3，4-四氢-环戊二烯并[61吲哚-2-基)-氨基曱酸叔丁酯(85.(^，0.22摩尔)和EtOH(850mL)。一次性加入浓HC1(180mL、2.20摩尔)。将所得溶液加热至45-50°C，搅拌90分钟，然后通过HPLC分析，显示原料完全消耗。将混合物转移到Buchi烧瓶，用去离子水(595mL)稀释，真空浓缩以除去EtOH。分两次加入EtOAc(2x170mL)，再汽提(re-strip)以除去EtOAc和残留的EtOH。将含水浓缩物转移到5L反应烧瓶中，冷却至10-15'C。将反应温度维持在<30°C，同时通过滴加5MNaOH(950mL)来调节该溶液的pH至11-12所得混合物用CH2Cl2(1300mL,800mL)萃取。合并的012<:12萃取物用去离子水(500mL)洗涤，经Na2S04干燥，真空浓缩获得标题化合物，为浅绿色固体(65.0g,103%)。步骤5:(S)-(7-氰基-4-吡啶-2-基甲基-l，2，3，4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-2-基)-氨基甲酸异丙酯2L反应烧瓶配备有冷却浴、空气搅拌器、温度探测器和加料漏斗。该烧瓶中装有(5)-2-氨基-4-吡啶-2-基曱基-1,2,3，4-四氢-环戊二烯并[6]吲哚-7-腈盐酸盐(62.8g，0.218摩尔)、DMF(188mL)和三乙胺(33.4mL、0.240mol)。用水/丙酮浴将所得的溶液冷却至0'C。维持温度〈10'C，同时经由加料漏斗滴加氯甲酸异丙酯(218mL，0.218mol，1M,甲苯溶液)。加料完成时，移除冷却浴，使混合物回暖至室温。l小时后，HPLC分析表明反应完全，将该混合物倒入去离子水(1256mL)和EtOAc(1884mL)的溶液中。分层，过滤有机层，并用1:1水:盐水溶液再洗涂，然后经Na2S04干燥。55'C下真空浓缩至约15体积，使所得产物冷却至室温，获得白色沉淀。加入庚烷(628mL),搅拌20分钟。将混合物浓缩回到约15体积。过滤固体，用庚烷洗涤，干燥，得到标题化合物，为蓬松的白色固体(68.9g，84.5%)。&NMR(500MHz，DMSO-A)，S8.49(dd，1H),7.86(d，1H,/=1.5)，7.71-7.75(m,1H)，7.60(d，1H,/=9.0)，7.57(d,1H，/=9.0)，7.36(dd，1H)，7.28-7.26(m,1H)，7.14(d，1H，/=7.5)，5.44(s，2H)，4.79-4.72(m，1H)，4.71-4.66(m，1H)，3.22-3.20(m，1H)，3.16-3.12(m，1H),2.73-2.66(m，2H)，1.16(dd，6H)。实施例57(及)-N'-[7-氰基-4-(异噻唑-3-基甲基)-l，2，3，4-四氢-环戊二烯并[6吲哚画2画基-N，N-二曱基硫酰胺将(及)-2-氨基-4-异噻唑-3-基甲基-l，2，3，4-四氢-环戊二烯并W吲哚-7-腈二盐酸盐(1.0g，2.72mmo1)、三乙胺(0.76mL,5.44mmol)和1，4-二氮杂二环[2,2，2辛烷(0.52g，4.63mmol)在CHCb(80mL)中混合，在油浴中加热，直到内部温度达到54X:。在氮气氛下，经30分钟经由加料漏斗向该反应混合物中滴加二曱基氨磺酰氯(0.35mL，3.26mmol)的CHCl3(10mL)溶液。将所得的混合物于54'C另外搅拌1小时，然后冷却到室温。用CH2Cl2(150mL)稀释，用饱和NaHC03洗涤有机层，经干燥(Na2S04)，过滤并真空浓缩。用硅胶色谱(使用EtOAc/己烷(8/2))纯化，获得0.82g(75。/。)标题化合物。力NMR(400MHz，DMSO-d6)S9.03(s，1H),7.88(s，1H),7.74(d，/=5.0Hz,1H)，7.64(d，/=5.1Hz，1H)，7.38(d,/=5.0Hz，1H)，7.17(s，1H)，5.52(s，2H)，4.52-4.40(m，2H)，3.31-3.18(m，2H)，2.62(s，6H)。使用合适的氯甲酸酯或酰基氯(基本按照实施例56中所述方法)或合适的磺酰氯或氨磺酰氯(基本按照实施例57中所述方法)，用合适的外消旋或手性4-(杂芳基甲基)-l，2，3,4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-2-基胺，制备表5中的实施例58-89和中间体60-61。<table>tableseeoriginaldocumentpage55</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage56</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage57</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage58</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage59</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage60</column></row><table>基本按照关于实施例56a、56b所述的方法，通过外消旋产物的手性拆分来获得所示实施例。实施例90(if)-N'-[4-(2-氨基-吡啶-3-基甲基)-7-氰基-l,2，3，4-四氢-环戊二烯并6吲咮-2-基]-N，N-二甲基硫酰胺使用基本如实施例54中所述的方法，用(及)-N'-(7-氰基-4-[2-(l，3-二氧代-1,3-二氢-异吲哚-2-基)-吡啶-3-基甲基卜l，2，3,4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-2-基)-N，N-二曱基硫酰胺制备标题化合物，获得0.13g(61%)产物。MS(m/z):411.0(M+l)。中间体625-((5)-7-氰基-2-异丙氧羰基氨基-2，3-二氢-lH-环戊二晞并[W吲哚-4-基甲基)-噢唑-4-羧酸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage60</formula>用5MLiOH(8.3mL,41.4mmol)处理5-((5)-7-氰基-2-异丙氧基羰基氨基-2,3-二氢-lH-环戊二埽并[6吲咮-4-基曱基)-噻唑-4-羧酸乙酯(3.745g，8.28mmol)在EtOH(100mL)和THF(40mL)中的混合物，室温下搅拌18小时。加入5NHC1(9mL),使pH达到2。用旋转蒸发仪浓缩反应混合物，萃取入EtOAc(3x330mL),将有机物干燥(MgSO4)，过滤并浓缩，得到3.86g(>100%)5-((^)-7-氰基-2-异丙氧羰基氨基-2，3-二氢-lH-环戊二烯并W吲哚-4-基甲基)-噻唑-4-羧酸，为浅黄色固体。LC-ES/MSm/z425(M+l),423(M-H),TR=2.3分钟。基本如针对中间体62所述制备下列化合物。中间体63(及)-5-{2-[(二曱基氡基)-磺酰基j-氨基-7-氰基-2,3-二氢-1丑-环戊二烯并[61吲哚-4-基甲基}-噻唑-4-羧酸MSm/z446(M+l)中间体64{(5)-7-氰基-4-[4-(2-三甲基硅烷基(silanyl)-乙氧羰基氨基)-噻唑-5-基甲基卜l，2，3，4-四氢-环戊二烯并[6]吲哚-2-基卜氨基甲酸异丙酯向5-((5)-7-氰基-2-异丙氧羰基氨基-2，3-二氢-lH-环戊二烯并[W吲哚-4-基曱基)-噻唑-4國羧酸(3.82g，9.00mmo1)、Et3N(2.00g，2.76mL，19.8mmo1)和2-(三甲基甲硅烷基)-乙醇(10mL,8.25g，69.8mmol)在曱苯(270mL)中的回流混合物中緩慢加入叠氮磷酸二苯酯(diphenylphosphorylazide)(5.45g,4.27mL，19.8mmo1)。继续回流3小时，然后冷却至室温。浓缩反应混合物得到14.85g粗品。硅胶(115g,使用20-60。/。EtOAc/己烷)上纯化得到4.06g(84%)产物，为黄色固体。LC-ES/MSm/z562(M+Na)，538(M-H),TR=3.1分钟。基本如针对中间体64所述制备以下化合物。中间体65(及H5-[2-(二甲基氨基)磺酰基-氨基-7-氰基-2，3-二氢-Lff-环戊二烯并问吲哚-4-基甲基-噻唑-4-基}-氨基甲酸-2-三甲基硅烷基-乙酯MSm/z559(M-l)实施例91吲咮-2-基卜氨基甲酸异丙酯用四丁基氟化铵(1.0MTHF溶液，14.74mL，14.74mmol)处理{(5)画7-氰基_4-[4-(2-三甲基硅烷基-乙氧羰基氨基)-噻唑-5-基甲基1-1，2，3，4-四氢-环戊二烯并[^吲哚-2-基卜氨基甲酸异丙酯(3.98g,7.37mmol)在THF(40mL)中的混合物，加热至50。C。40分钟后冷却至室温，用水(40mL)稀释，真空蒸发THF。滤除所得含水浆液中的固体，于4(TC真空干燥，得到2.43g棕黄色固体状产物。将该产物溶解在250mL沸腾的EtOAc中，然后浓缩至体积约为100mL。加入50mL己烷，然后在冷冻器中冷却该混合物至-26。C过夜。收集固体并于40'C真空干燥，得到1.74g(60y。)褐色固体状产物。LC-ES/MS396(M+l)，Tr-2.2分奸。实施例92(及)-N，-[4-(4-氨基-噻唑-5-基曱基)-7-氰基-l，2,3，4-四氢-环戊二烯并[6吲咮-2-基l-N，N-二曱基硫酰胺/_N\手性H2N基本如针对实施例91所述，使用(及)-{5-[2-(二甲基氨基)磺酰基-氨基-7-氰基-2，3-二氢-lH-环戊二烯并[6]吲哚-4-基甲基]-噻唑-4-基卜氨基甲酸-2-三曱基硅烷基-乙酯制备标题化合物，加热反应物至60'C，保持3小时。冷却至室温后，用乙酸乙酯稀释反应物(200mL)，用水和盐水洗涤。有机部分(organicportion)经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过珪胶色镨(100%EtOAc至5。/。MeOH/EtOAc)纯化，获得0.94g(60。/o)产物。LCMS417.0(M+l)。o=s=o中间体66(^)-(7-曱酰基-4-吡啶-2-基甲基-l，2,3，4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-2-基)-氨基曱酸异丙酯将("-(7-氰基-4-吡啶-2-基甲基-l，2，3，4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-2-基)-氨基甲酸异丙酯(200mg，0.53mmol)溶解在88%甲酸(10ml)和水(lmL)中。加入铝-镍催化剂(50/50wt。/。)，90。C下加热24小时。加入水(lmL),加热另外24小时。冷却至室温后，加入甲醇，通过Celite⑧滤除催化剂。用乙酸乙酯稀释，用10%碳酸钾碱化至pH=10。分离各相，用10%碳酸钾洗涤有机相。用无水硫酸钠干燥有机部分，过滤并浓缩，获得橙色油状标题化合物(181mg，91%)。粗产物不经进一步处理而使用。MS(m/z):378.2(M+l)。(5)-[7-(甲氧基亚氨基-甲基)-4-吡啶-2-基曱基-l，2，3，4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-2-基-氨基甲酸异丙酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage63</formula>将(5)_(7-曱酰基-4-吡啶-2-基曱基-l，2，3，4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-2-基)-氨基甲酸异丙酯(181mg,0.48mmol)溶解在曱醇(10mL)和l.ON氢氧化钠(2.4ml，2.4mmol)中。加入盐酸曱氧基胺(methoxyaminehydrochloride)(120mg,1.44mmol)，室温下搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释，用10%碳酸钾洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。在12g硅胶柱(用30%乙酸乙酯/二氯曱烷洗脱)上纯化粗产物，获得纯的标题化合物(53mg,27%)。LCMS407.1(M+l)。基本按照针对中间体66和实施例93所述，用合适的腈制备肟，即表6中的实施例94-101。实施例93表6<table>tableseeoriginaldocumentpage64</column></row><table>实施例102(±)-[4-(3-氨基-吡嗪-2-基甲基)-7-氰基-l,2,3，4-四氢-环戊二烯并[6]吲哚-2-基卜氨基甲酸异丙酯在带有螺紋帽(screw-cap)的小瓶中，将(±)-[4-(3-氯-吡溱-2-基甲基)-7-氰基-1，2，3，4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-2-基卜氨基曱酸异丙酯(30mL，0.073mmol)溶解在l-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)(0.5mL)中，冷却至-78'C。使NH3冷凝到反应混合物(lmL)中，密封反应容器，经24小时温热至室温。加热反应物至50'C，保持18小时，然后在80'C保持72小时。在干冰浴中冷却反应物。小心地打开反应容器，使液氨蒸发。将残留物溶解在EtOAc(50mL)中，用水(3x20mL)洗涤有机物。将有机物干燥(MgS04),过滤并浓缩，得27mg粗产物，为无色膜。在4g硅胶[50-100%EtOAc/(l:lCH2CV己烷)上纯化，得到8mg(28。/。)标题化合物，为无色膜。LCMS100%@4.23分钟m/z391(M+H)，389(M-H)。实施例103(S)-4-(3-氨基-吡嗪-2-基甲基)-7-氰基-l，2，3，4-四氢-环戊二烯并[W吲哚-2-基卜氨基甲酸异丙酯将(5>[4-(3-氯-吡嗪-2-基甲基)-7-氰基-l，2，3，4-四氢-环戊二烯并[6吲哚-2-基1-氨基甲酸异丙酯(8.898,21.7mmol)溶解在NMP(36mL)中，将该混合物均匀分配到三个10-20mL的微波反应容器中。冷却各反应容器至0'C，喷洒无水NH315分钟。密封各容器，在微波反应器中加热至20(TC，保持1小时。将反应混合物在水(500mL)中合并在一起，声处理20分钟。滤出棕黄色固体，然后将固体溶解在EtOAc(500mL)中。将有机物干燥(MgS04)，过滤并浓缩至体积为10mL。用MeOH(20mL)和CH2Cl2(10mL)稀释有机物，并真空吸收至硅胶上。在硅胶(340g)(使用1-10%(2MNH3/MeOH)/(l:lCH2Cl2/己烷))上纯化，获得1.50g(18%)标题化合物，为黄色固体。MS(m/z)391(M+1)，389(M-l)。汇集并浓缩含有不纯产物的级分(1.2g),在硅胶(80g)上再次纯化(使用3-8%(2MNH3/MeOH)/(l:lCH2Ch/己烷))，获得第二批(503mg，6%)标题化合物，为黄色固体。实施例104吲哚-4-基甲基)-吡啶-2-基氨基-乙酸<formula>formulaseeoriginaldocumentpage66</formula>将吲哚-2-基)-氨基甲酸异丙酯;(S)-4-(2-氨基-吡啶-3-基曱基)-7-氰基-l,2,3，4-四氢-环戊二烯并[b]吲哚-2-基l-氨基甲酸异丙酯；(/)-^-[4-(4-氨基-噻唑-5-基甲基)-7-氰基-1，2，3，4-四氢-环戊二烯并[6]吲哚-2-基卜N，N-二甲基硫酰胺;和(S)-[4-(4-氨基-噻唑-5-基甲基)-7-氰基-l，2，3，4-四氢-环戊二烯并[b]吲哚-2-基卜氨基曱酸异丙酯。17.权利要求1-16中任一项所述的化合物或盐，其用于治疗。18.治疗性腺功能减退、骨质量或密度减少、骨质疏松、骨质减少、肌肉质量或强度降低、老年性肌肉萎缩、年龄相关的机能衰退、男孩青春期延迟、贫血、男性或女性性功能障碍、勃起功能障碍、性欲减退、抑郁或嗜睡的方法，所述方法包括对需要其的患者给予权利要求1-16中任一项所述的化合物或盐。19.根据权利要求18所述的方法，其用于治疗骨质量或密度减少、骨质疏松、骨质减少或肌肉质量或强度降低。20.权利要求1-16中任一项所述的化合物或盐在制备药物中的用途，所述药物用于治疗性腺功能减退、骨质量或密度减少、骨质疏^K骨质减少、肌肉质量或强度降低、老年性肌肉萎缩、年龄相关的机能衰退、男孩青春期延迟、贫血、男性或女性性功能障碍、勃起功能障碍、性欲减退、抑郁或嗜睡。21.根据权利要求20所述的在制备药物中的用途，所述药物用于治疗骨质量或密度减少、骨质疏松、骨质减少或肌肉质量或强度降低。22.药物组合物，其包含权利要求1-16中任一项所述的化合物或盐以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。全文摘要本发明提供右式化合物，式(I)或其药学上可接受的盐；包含式(I)化合物以及合适的载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物；以及治疗生理疾病，尤其是骨质量减少、骨质疏松、骨质减少或肌肉质量或强度降低的方法，该方法包括给予式(I)化合物或其药学上可接受的盐。文档编号C07D209/58GK101541749SQ200780043038公开日2009年9月23日申请日期2007年11月6日优先权日2006年11月20日发明者D·P·梅休斯,J·E·格林,K·加瓦迪纳斯,P·K·贾哈夫申请人:伊莱利利公司