专利名称：一种从紫锥菊中提取纯化菊苣酸的方法
技术领域：
本发明属于天然药物分离纯化领域，涉及一种从紫锥菊中提取纯化菊苣酸的方法。
背景技术：
紫锥菊(Echinacea purpurea (L. )M0enCh)，属于菊科紫锥菊属植物，原产于北美， 历史上印第安人曾用来治疗创伤、湿疹、伤寒等病症。含有多糖、咖啡酸衍生物、烷酰胺类、 多炔类等化合物。紫锥菊的临床应用较广泛，可用于治疗各种炎症和感染，最近的研究表明，紫锥菊 提取物菊苣酸等还有抗氧化、抗衰老、调控细胞调亡、抗肿瘤的作用，其疗效得到了越来越 多的临床肯定，是国际市场需求量最大的植物药之一。我国部分地区近年先后从欧洲和美 洲成功引种该植物，对该属药用植物研究正在升温，相应的一些药物制剂也应运而生，但是 其质量标准并不统一。菊苣酸(Chicoric acid)是紫锥菊的特征性成分，为咖啡酸衍生物，可增强机体免 疫功能，并具有较好的抗炎作用，还能抑制玻璃酸酶，保护胶原蛋白III免受可导致降解的 自由基的影响。另有研究表明，菊苣酸还具有抑制人类免疫缺陷病毒I型(Hiv-I)和HIV-I 整合酶的作用。在菊苣酸的提取纯化工艺上，CN1587251A报道了有机溶剂提取、酸化、溶剂萃取、 树脂分离、溶剂结晶等工序提取纯化菊苣酸的方法，该制备过程使用大量乙酸乙酯等有机 溶剂，存在安全隐患。CN101148410A报道了通过乙醇提取、大孔树脂吸附洗脱、高速逆流 色谱纯化得到菊苣酸，此法虽然能得到高纯度的菊苣酸，但需要两次过柱分离，生产周期 长，操作繁琐。CN101367728A报道了以市售3_5 %的紫锥菊提取物为原料，加水溶解，酸调 PH1-4，非极性大孔吸附树脂柱层析，得到菊苣酸和单咖啡酰酒石酸。CN1957961A报道了 紫锥菊提取物的制备方法，采用新鲜状态的紫锥菊全草，经乙醇提取、浓缩得到紫锥菊提取 物。CN101766667A公开了一种紫锥菊提取物和其制备方法及其酚类成分的检测方法，该方 法所得菊苣酸含量仅为4. 4-5. 7%，得到的是粗提取物，需其他分离纯化过程才能得到高纯 度广品。
发明内容
本发明的目的是解决上述技术中的不足而提供的一种从紫锥菊中提取纯化菊苣 酸的方法，该方法避免了使用大量有毒有机溶剂，安全、环保、低成本高收率。为达到上述目的，本发明设计的工艺方法如下一种从紫锥菊中提取纯化菊苣酸的方法，其特征是将紫锥菊粉碎，用少量酸水浸 润，再加入乙醇液超声提取，提取液用超滤膜滤过，减压回收溶剂，浓缩，干燥即得紫锥菊粗 提物，然后利用超临界(X)2及其夹带剂进行萃取，得到萃取物，再将萃取物加二乙胺四乙酸 二钠分散，再以碱调PH8-9，过滤，加入阴离子交换树脂搅拌均勻，装柱，先以去离子水冲洗杂质，再以碱水洗脱，洗脱液加入阳离子树脂柱，收集下注液，浓缩、干燥即得菊苣酸。所述浸润药材用酸为醋酸、稀盐酸，浓度为0.5-2%，液料比为1-3 1。所述超滤膜为3000-8000的中空纤维膜。所述超临界CO2夹带剂为乙酸乙酯、丙酮、甲醇中的任一种。收集萃取时间为1-4小时的萃取物，CO2流量为2-Mkg/h，夹带剂通入量为(X)2质 量的5-10%，萃取釜中CO2温度为30-80°C，萃取压力为10-60Mpa。采用的阴离子交换树脂可选D201、D311、D301中的一种或两种组合；采用的阳离 子交换树脂可选D111、001X7、724中的一种或两种组合。本发明与现有技术相比具有的优点和有益效果本发明采用膜分离可节省能耗， 采用超临界流体选择性的溶解紫锥菊中的咖啡酸类衍生物，流出的萃取物再经离子交换树 脂，生产过程条件温和，分离过程快速、安全、操作稳定性佳，具有较广的规模化生产前景。
具体实施例方式实施例1 将紫锥菊药材粉碎，取8kg加入8L2%盐酸浸泡2小时，再加入40L70%乙醇超声 提取40分钟，提取2次，得到提取液，提取液加入截留分子量5000的中空纤维膜超滤，收集 透过液，减压回收乙醇，浓缩、干燥得到紫锥菊提取物；将紫锥菊提取物置于萃取釜中，连续 通入CO2和夹带剂丙酮进行萃取，(X)2流量为^g/h，夹带剂通入量为(X)2质量的8%，萃取釜 中温度为43°C，萃取压力为42MPa，萃取时间为3小时，泄压至常压，获得萃取物，用EDTA水 溶液分散，再以碳酸钠溶液调PH至8. 0，过滤，滤液加入D201阴离子交换树脂搅拌均勻，装 柱，先以去离子水冲洗杂质，再以氢氧化钠溶液洗脱，洗脱流速为3ml/min，洗脱液加入 724阳离子交换树脂柱，收集下注液，浓缩、干燥最终得到含量为93. 41%的菊苣酸产品。实施例2:将紫锥菊药材粉碎，取8kg加入17L1 %醋酸浸泡4小时，再加入48L70%乙醇超声 提取45分钟，提取2次，得到提取液，提取液加入截留分子量3000的中空纤维膜超滤，收集 透过液，减压回收乙醇，浓缩、干燥得到紫锥菊提取物；将紫锥菊提取物置于萃取釜中，连续 通入(X)2和夹带剂丙酮进行萃取，CO2流量为10kg/h，夹带剂通入量为(X)2质量的5%，萃取 釜中温度为49°C，萃取压力为52MPa，萃取时间为4小时，泄压至常压，获得萃取物，用EDTA 水溶液分散，再以氨水溶液调PH至8. 5，过滤，滤液加入D311阴离子交换树脂搅拌均勻， 装柱，先以去离子水冲洗杂质，再以2%氢氧化钠溶液洗脱，洗脱流速为3ml/min，洗脱液加 入001X7阳离子交换树脂柱，收集下注液，浓缩、干燥最终得到含量为89. 94%的菊苣酸产品。
实施例3:将紫锥菊药材粉碎，取8kg加入10L0. 5%盐酸浸泡3小时，再加入45L70%乙醇超 声提取60分钟，提取2次，得到提取液，提取液加入截留分子量8000的中空纤维膜超滤，收 集透过液，减压回收乙醇，浓缩、干燥得到紫锥菊提取物；将紫锥菊提取物置于萃取釜中，连 续通入CO2和夹带剂丙酮进行萃取，(X)2流量为^g/h，夹带剂通入量为(X)2质量的9%，萃取 釜中温度为33°C，萃取压力为36MPa，萃取时间为2小时，泄压至常压，获得萃取物，用EDTA 水溶液分散，再以氢氧化钠溶液调PH至8. 2，过滤，滤液加入D201阴离子交换树脂搅拌均勻，装柱，先以去离子水冲洗杂质，再以2%氢氧化钠溶液洗脱，洗脱流速为;3ml/min，洗脱 液加入724阳离子交换树脂柱，收集下注液，浓缩、干燥最终得到含量为93. 93%的菊苣酸产品。实施例4:将紫锥菊药材粉碎，取IOkg加入20L1. 5%盐酸浸泡4小时，再加入46L70%乙醇 超声提取30分钟，提取2次，得到提取液，提取液加入截留分子量7000的中空纤维膜超滤， 收集透过液，减压回收乙醇，浓缩、干燥得到紫锥菊提取物；将紫锥菊提取物置于萃取釜中， 连续通入(X)2和夹带剂丙酮进行萃取，CO2流量为Ukg/h，夹带剂通入量为(X)2质量的7%， 萃取釜中温度为46°C，萃取压力为47MPa，萃取时间为3小时，泄压至常压，获得萃取物，用 EDTA水溶液分散，再以碳酸氢钠溶液调pH至9，过滤，滤液加入D301阴离子交换树脂搅拌 均勻，装柱，先以去离子水冲洗杂质，再以氢氧化钠溶液洗脱，洗脱流速为3ml/min，洗 脱液加入001X7阳离子交换树脂柱，收集下注液，浓缩、干燥最终得到含量为92. 57%的菊 苣酸产品。实施例5 将紫锥菊药材粉碎，取IOkg加入30L2%醋酸浸泡3小时，再加入50L70%乙醇超 声提取45分钟，提取2次，得到提取液，提取液加入截留分子量6000的中空纤维膜超滤，收 集透过液，减压回收乙醇，浓缩、干燥得到紫锥菊提取物；将紫锥菊提取物置于萃取釜中，连 续通入CO2和夹带剂丙酮进行萃取，CO2流量为Mkg/h，夹带剂通入量为(X)2质量的10%， 萃取釜中温度为M°C，萃取压力为38MPa，萃取时间为4小时，泄压至常压，获得萃取物，用 EDTA水溶液分散，再以氢氧化钠溶液调pH至8. 8，过滤，滤液加入D311阴离子交换树脂搅 拌均勻，装柱，先以去离子水冲洗杂质，再以2 %氢氧化钠溶液洗脱，洗脱流速为3ml/min， 洗脱液加入Dili阳离子交换树脂柱，收集下注液，浓缩、干燥最终得到含量为94. 11%的菊 苣酸产品。
权利要求
1.一种从紫锥菊中提取纯化菊苣酸的方法，其特征是将紫锥菊粉碎，用少量酸水浸润， 再加入乙醇液超声提取，提取液用超滤膜滤过，减压回收溶剂，浓缩，干燥即得紫锥菊粗提 物，然后利用超临界CO2及其夹带剂进行萃取，得到萃取物，再将萃取物加二乙胺四乙酸二 钠分散，再以碱调PH8-9，过滤，加入阴离子交换树脂搅拌均勻，装柱，先以去离子水冲洗杂 质，再以碱水洗脱，洗脱液加入阳离子树脂柱，收集下注液，浓缩、干燥即得菊苣酸。
2.根据权利要求1所述的从紫锥菊中提取纯化菊苣酸的方法，其特征在于，浸润药材 所用酸为醋酸、稀盐酸，浓度为0.5-2%，液料比为1-3 1。
3.根据权利要求1所述的从紫锥菊中提取纯化菊苣酸的方法，其特征在于，所述超滤 膜为3000-8000的中空纤维膜。
4.根据权利要求1所述的从紫锥菊中提取纯化菊苣酸的方法，其特征在于，所述超临 界CO2夹带剂为乙酸乙酯、丙酮、甲醇中的任一种。
5.根据权利要求1所述的从紫锥菊中提取纯化菊苣酸的方法，其特征在于，收集萃取 时间为1-4小时的萃取物，CO2流量为2-15kg/h，夹带剂通入量为(X)2质量的5-10%，萃取 釜中CO2温度为30-80°C，萃取压力为10-60Mpa。
6.根据权利要求1所述的从紫锥菊中提取纯化菊苣酸的方法，其特征在于，采用的阴 离子交换树脂可选D201、D311、D301中的一种或两种组合；采用的阳离子交换树脂可选 D111、001X7、724中的一种或两种组合。
全文摘要
本发明涉及天然药物领域，具体涉及一种从紫锥菊中提取纯化菊苣酸的方法，其特征是将紫锥菊粗提取，然后利用超临界CO2及其夹带剂进行萃取，得到菊苣酸，再经离子交换等分离纯化方法得到高含量的菊苣酸。本方法避免使用大量有毒有机溶剂、安全、环保、低成本高收率。
文档编号C07C69/732GK102060706SQ201010603968
公开日2011年5月18日 申请日期2010年12月24日 优先权日2010年12月24日
发明者刘东锋, 杨成东, 郭琴 申请人:南京泽朗医药科技有限公司