专利名称：一种从南方红豆杉叶中提取金松双黄酮的方法
技术领域：
本发明涉及黄酮的提取技术，具体涉及一种从南方红豆杉叶中提取金松双黄酮的 方法。
背景技术：
红豆杉叶中含有紫杉醇、紫杉黄酮和红豆杉多糖等药效成份，紫杉黄酮含有共同 的母核C6-C3-C6结构，具有调节心脏血管系统作用、抗炎及抗免疫作用、抗微生物作用、对 消化性溃疡的作用和抗肿瘤作用等。公开号为CN101716197A的中国发明专利申请，就公 开了一种南方红豆杉叶片的提取物及提取方法，提取物主要成份包括3-0-芦丁 -槲皮素、 3-0-芦丁 -山奈酚、3-0-芦丁 -杨梅酮、7-0-葡萄糖-山奈酚和7-0-葡萄糖-槲皮素；提 取方法包括叶片烘干、粉碎过筛、浸入乙醇溶剂、搅拌下超声提取、提取液减压浓缩去醇、氯 仿萃取脱脂、水相浓缩干燥步骤。该提取方法提取的是各种黄酮的混合物，无法提取单体， 而南方红豆杉叶还含有金松双黄酮(C3tlH15O7)等，从南方红豆杉叶中提取金松双黄酮单体的 方法未见报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种从南方红豆杉叶中提取金松双黄酮的方 法，该方法可以提取得到纯度较高的金松双黄酮单体，为金松双黄酮的药理研究和应用创 造了条件。本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为一种从南方红豆杉叶中提取金松 双黄酮的方法，包括下述步骤
1、将新鲜的南方红豆杉叶片经50°C温度条件下烘干Mh，粉碎，过0.45ym筛为原 料，装入超声萃取釜中；
2、在所述超声萃取釜中加入质量百分浓度为75%乙醇，所述原料与所述乙醇的质量体 积比(Kg/L)为1 :10 12，于30°C在气升式搅拌条件下超声提取36min，得到提取液，超声 发生方式它激式超声发声，径向振动柱状换能器，超声波功率为100W，超声频率为^kHz, 超声提取方式为每次超声3min、间隔;3min ；
3、按体积比1:1的比例，在步骤2中的提取液加入氯仿，醇相500P减压浓缩60min得 到第一浓缩液，第一浓缩液用AB-8树脂层析，用由氯仿、甲醇和乙酸乙脂混合液洗脱，得到 第一洗脱液，第一洗脱液500P减压浓缩35min得到第二浓缩液，第二浓缩液用100目硅胶 柱层析，用由氯仿、甲醇和乙酸乙脂混合液洗脱，洗脱流速lmol/min，收集27 四min的 洗脱液，浓缩干燥，得到白色结晶化合物，该白色结晶化合物为金松双黄酮，上述氯仿、甲醇 和乙酸乙脂混合液中氯仿、甲醇和乙酸乙脂的体积比为45:35 :20。采用高效液相色谱法测 定，得到纯度达到98. 76%。与现有技术相比，本发明的优点在于一种从南方红豆杉叶中提取金松双黄酮的方 法，通过烘干、粉碎、以乙醇为溶剂它激式间息超声提取、再用氯仿进一步去杂提取，醇相先在AB-8树脂层析洗脱，再在100目硅胶柱层析洗脱，在洗脱流速lmol/min下，收集27 四 min的洗脱液，浓缩干燥得到金松双黄酮白色结晶，该方法可以得到纯度达到98. 76%的金 松双黄酮单体。本发明提取方法简单，提取的金松双黄酮白色结晶纯度较高，为金松双黄酮 的药理研究和应用创造了条件。
具体实施例方式以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。 实施例—种从南方红豆杉叶中提取金松双黄酮的方法，先将新鲜的南方红豆杉叶片经 50°C恒温下烘干Mh，粉碎，过0. 45 μ m筛为原料，称重1 Kg，装入超声萃取釜中；然后在超 声萃取釜中加入质量百分浓度为75%乙醇10 12升，于30°C在气升式搅拌条件下超声提 取36min，得到提取液，超声发生方式它激式超声发声，径向振动柱状换能器，超声波功率 为100W，超声频率为^kHz,超声提取方式为每次超声3min、间隔^iin ；再按体积比1 :1的 比例，在提取液加入氯仿，醇相500P减压浓缩60min得到第一浓缩液，第一浓缩液用AB-8 树脂(市售)层析，用由氯仿、甲醇和乙酸乙脂混合液洗脱，得到第一洗脱液，AB-8树脂为弱 极性，表面积480-520 ( m2/g )，粒子半径13-14nm，含水量64% ；第一洗脱液500P减压浓缩 35min得到第二浓缩液，第二浓缩液用100目硅胶柱(市售)层析，用由氯仿、甲醇和乙酸乙 脂混合液洗脱，在洗脱流速lmol/min下，收集27 四min的洗脱液，浓缩干燥，得到白色 结晶化合物，该白色结晶化合物为金松双黄酮，上述氯仿、甲醇和乙酸乙脂混合液中氯仿、 甲醇和乙酸乙脂的体积比为45:35 :20。采用高效液相色谱法测定金松双黄酮白色结晶，其 纯度为98. 76%。
权利要求
1. 一种从南方红豆杉叶中提取金松双黄酮的方法，其特征在于包括下述步骤1)、将新鲜的南方红豆杉叶片经50°c温度下烘干Mh，粉碎，过0.45 μ m筛为原料，装 入超声萃取釜中；2)、在所述超声萃取釜中加入质量百分浓度为75%乙醇，所述原料与所述乙醇的质量 体积比为1 :10 12，于30°C在气升式搅拌条件下超声提取36min，得到提取液，超声发生 方式它激式超声发声，径向振动柱状换能器，超声波功率为100W，超声频率为^kHz,超声 提取方式为每次超声3min、间隔;3min ；3)、按体积比1:1的比例，在步骤2中的提取液加入氯仿，醇相500P减压浓缩60min得 到第一浓缩液，第一浓缩液用AB-8树脂层析，用由氯仿、甲醇和乙酸乙脂混合液洗脱，得到 第一洗脱液，第一洗脱液500P减压浓缩35min得到第二浓缩液，第二浓缩液用100目硅胶 柱层析，用由氯仿、甲醇和乙酸乙脂混合液洗脱，洗脱流速lmol/min，收集27 四min的洗 脱液，浓缩干燥，得到白色结晶化合物，该白色结晶化合物为金松双黄酮，上述氯仿、甲醇和 乙酸乙脂混合液中氯仿、甲醇和乙酸乙脂的体积比为45:35 :20。
全文摘要
本发明公开了一种从南方红豆杉叶中提取金松双黄酮的方法，通过烘干、粉碎、以乙醇为溶剂它激式间息超声提取、再用氯仿进一步去杂提取，醇相先在AB-8树脂层析洗脱，再在100目硅胶柱层析洗脱，在洗脱流速1mol/min下，收集27～29min的洗脱液，浓缩干燥得到金松双黄酮白色结晶，该方法可以得到纯度达到98.76%的金松双黄酮单体。本发明提取方法简单，提取的金松双黄酮白色结晶纯度较高，为金松双黄酮的药理研究和应用创造了条件。
文档编号C07D311/30GK102070589SQ201010604150
公开日2011年5月25日 申请日期2010年12月24日 优先权日2010年12月24日
发明者王亚飞, 王强, 阮晓 申请人:宁波泰康红豆杉生物工程有限公司