专利名称：利用复合蛋白酶酶解技术生产低蛋白浓缩天然胶乳的方法
技术领域：
本发明属于一种利用复合蛋白酶酶解技术生产低蛋白浓缩天然胶乳的方法，具体涉及到天然胶乳分阶段稳定处理、利用复合蛋白酶分解天然橡胶粒子中的蛋白质，脱除天然胶乳中的蛋白质和酶活性抑制技术。
背景技术：
国内外对胶乳制品的需求量每年都以59TlO%的速度递增，其市场容量将会越来越大。但由于天然橡胶中含有相当数量的蛋白质，增加了天然橡胶制品的吸湿性、导电性和生热性，尤其是会引起与天然橡胶制品接触的过敏症，因而限制了蛋白质含量高的天然橡胶制品在医用、保健及电绝缘等制品中的应用。因此，研究低蛋白橡胶对降低其制品的吸湿性、导电性和生热性以及减少其接触性过敏症，将天然橡胶制成无毒、安全的“医用级”材料，从而扩大它在医用、保健、电工以及其它对蛋白质含量有特殊要求制品中的应 用，满足市场需求等都具有十分重要的意义。现有低蛋白浓缩天然胶乳的生产方法，比较通用的方法是在鲜胶乳中加入碱性蛋白酶，利用蛋白酶把天然橡胶粒子上的大部分蛋白质分解，离心分离后获得低蛋白浓缩胶乳。但是生产过程中涉及到鲜胶乳的稳定性及残留酶对浓缩胶乳化学稳定性有显著影响。解决的方法往往采用多种表面活性剂，如月桂酸铵，月桂酸钾，十二烷基硫酸钠等作为稳定剂以及灭酶处理。常见的灭酶方法是在70°C下经3h或在85°C的条件经过IOmin的处理，这样存在的问题在于设备投资大，能耗高，操作困难等缺点。另一方面，酶活性可能会因为温度的因素而影响蛋白酶的活性。这些生产方法中，主要存在的问题是酶在不同温度条件下其活性不同，这样会影响浓缩天然胶乳的脱蛋白效果，同时会导致稳定性及其加工特性的差异。
发明内容
本发明针对上述生产方法中存在的问题和不足，提供了一种成本低、效率高且操作更易的分阶段稳定处理、用复合酶法分解蛋白以及用化学试剂抑制残留蛋白酶技术来生产低蛋白浓缩天然胶乳的方法。该方法工艺流程简单、无环境污染。与目前为止其他方法比较，在此生产方法中，一个最具吸引力的特点就是用复合蛋白酶酶解技术来分解天然橡月父蛋白。为实现上述目的，本发明的低蛋白浓缩天然胶乳的生产方法，主要包括如下步骤
1)在新鲜胶乳中加入月桂酸铵做稳定处理，搅拌2-4h，在2(T40°C的温度条件下，按每千克鲜胶乳加入0. 02 0. Ig的碱性蛋白酶2709，搅拌5 IOh ；
2)在上述酶解反应中加入质量分数为0.079T0. 14%的阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠，搅拌2飞h，按每千克鲜胶乳加入0. 02、. 2g的蛋白酶K，在20-40°C的温度下搅拌6 12h ；3)待浓缩胶乳的氮含量降至小于0. 12%质量百分比时，离心浓缩后补加月桂酸铵并作补氨处理，最后及时在浓乳中加入浓缩胶乳总质量0. 005%-0. 010%的EDTA以抑制酶的活性并保存。本发明与现有方法相比，优点如下
1.针对不同的蛋白酶的不同的酶切位点，用复合蛋白酶分解橡胶蛋白，在提高酶解效率的同时可以降低酶的用量，降低生产成本；
2.所使用的碱性蛋白酶2709和蛋白酶K，其在2(T40°C的条件下，其活性较稳定，即使反应温度有波动也不会影响脱蛋白的效果；
3.所使用的阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠可以使蛋白酶部分变性，从而导致蛋白更容易被分解，而该条件下蛋白酶K的活性也将会保持不变。4.避免高温灭酶处理，采用常见的化学试剂抑制残留蛋白酶的活性，原料成本低，同时，该生产方法无需高温加热设备，能耗低，可操作性强；
5.所得到的低蛋白天然浓缩胶乳的成熟期短，为1(T20天；
6.产品质量稳定，可直接用于现有的工业化生产，如用于生产一次性医用检查手套、避孕套、医用导管、电工手套等天然胶乳制品。
具体实施例方式实施例I :
取IOOkg鲜胶乳，加入200g月桂酸铵稳定剂，搅拌2h，在25°C的温度条件下，在鲜胶乳加入5g碱性蛋白酶2709 (溶解于水)，搅拌8h ;在上述酶解反应中加入质量分数为0. 09%的阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠，搅拌3h，在鲜胶乳加入5g蛋白酶K，在30°C的温度下反应7h ;待浓缩胶乳的氮含量降至小于0. 12%质量百分比时，补加月桂酸铵30g，离心浓缩 后补氨至0.07% (质量百分比)，最后在浓乳中加入7g的EDTA以抑制酶的活性并保存。得到16. 8kg的低蛋白天然浓缩胶乳，其氮含量为0. 11%。实施例2
取IOOkg鲜胶乳，加入200g月桂酸铵稳定剂，搅拌2h，在37°C的温度条件下，在鲜胶乳加入8g碱性蛋白酶2709(溶解于水)，搅拌8h ;在上述酶解反应中加入质量分数为0. 09%的阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠，搅拌3h，在鲜胶乳加入IOg蛋白酶K，在37°C的温度下反应7h ;待浓缩胶乳的氮含量降至小于0. 12%质量百分比时，补加月桂酸铵30g，离心浓缩后补氨至0.07% (质量百分比)，最后在浓乳中加入Sg的EDTA以抑制酶的活性并保存。得到17. 2kg的低蛋白天然浓缩胶乳，其氮含量为0. 09%。实施例3
取IOOkg鲜胶乳，加入200g月桂酸铵稳定剂，搅拌2h，在30°C的温度条件下，在鲜胶乳加入7g碱性蛋白酶2709 (溶解于水)，搅拌8h ;在上述酶解反应中加入质量分数为0. 09%的阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠，搅拌3h，在鲜胶乳加入9g蛋白酶K，在37°C的温度下反应7h ;待浓缩胶乳的氮含量降至小于0. 12%质量百分比时，补加月桂酸铵30g，离心浓缩后补氨至0.07% (质量百分比)，最后在浓乳中加入Sg的EDTA以抑制酶的活性并保存。得到17. 7kg的低蛋白天然浓缩胶乳，其氮含量为0. 10%。
权利要求
1.一种利用复合蛋白酶酶解技术生产低蛋白浓缩天然胶乳的方法，其特征主要包括如下步骤 在新鲜胶乳中加入月桂酸铵做稳定处理，搅拌2-4h，在2(T40°C的温度条件下，按每千克鲜胶乳加入0. 02 0. Ig的碱性蛋白酶2709，搅拌5 IOh ； 在上述酶解反应中加入质量分数为0. 079T0. 14%的阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠，搅拌2飞h，按每千克鲜胶乳加入0. 02、. 2g的蛋白酶K，在20-40°C的温度下搅拌6 12h ； 待浓缩胶乳的氮含量降至小于0. 12%质量百分比时，离心浓缩后补加月桂酸铵并作补氨处理，最后及时在浓乳中加入浓缩胶乳总质量0. 005%-0. 010%的EDTA以抑制酶的活性并保存。
全文摘要
本发明涉及一种利用复合酶法生产低蛋白浓缩天然胶乳的方法，其特征在于在新鲜胶乳中加入月桂酸铵做稳定处理，搅拌2-4h，在20~40oC的温度条件下，按每千克鲜胶乳加入0.02~0.1g的碱性蛋白酶2709，搅拌5~10h；在上述酶解反应中加入质量分数为0.07%~0.14%的阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠，搅拌2~5h，按每千克鲜胶乳加入0.02~0.2g的蛋白酶K，在20-40oC的温度下搅拌6~12h；待浓缩胶乳的氮含量降至小于0.12%质量百分比时，离心浓缩后补加月桂酸铵并作补氨处理，最后及时在浓乳中加入浓缩胶乳总质量0.005%-0.010%的EDTA以抑制酶的活性并保存。
文档编号C08C1/04GK102702393SQ201210193040
公开日2012年10月3日 申请日期2012年6月13日 优先权日2012年6月13日
发明者和智坤, 李灿鹏, 欧灵澄, 赵卉 申请人:云南大学