病毒载体制造的制作方法

文档序号:12480932阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种经修饰的哺乳动物细胞,其中所述细胞的基因组被修饰以包含在启动子的控制下编码CP77的序列,使得所述经修饰的细胞系维持在未经修饰的细胞中较不能繁殖或不能繁殖的痘病毒的繁殖。

2.根据权利要求1所述的细胞,其中所述细胞的基因组还包含在启动子的控制下编码D13L的序列。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的细胞,其中所述细胞的基因组还包含在启动子的控制下编码K1L的序列。

4.根据权利要求1至4中任一项所述的细胞,其中所述细胞是连续细胞系。

5.根据权利要求1至5中任一项所述的细胞,其中所述细胞是CHO细胞。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的细胞,其中所述细胞是人细胞、灵长动物细胞、仓鼠细胞或兔细胞。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的细胞,其中所述CP77基因的表达是在哺乳动物启动子的控制下。

8.根据权利要求2至7中任一项所述的细胞,其中所述D13L基因的表达是在哺乳动物启动子的控制下。

9.根据权利要求3至8中任一项所述的细胞,其中所述K1L基因的表达是在哺乳动物启动子的控制下。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的细胞,其中所述CP77基因的表达支持所述病毒的繁殖,以产生与在允许细胞系中观察到的病毒产量等价的病毒产量。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的细胞,其中所述CP77基因的表达支持大于500的病毒复制扩增率。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的细胞,其中所述CP77由为了在哺乳动物细胞中表达而密码子优化的连续的核苷酸序列编码。

13.一种用于繁殖在CHO细胞中不繁殖的正痘病毒的方法,所述方法包括在哺乳动物细胞系中体外繁殖所述痘病毒,其中所述细胞系被修饰以在启动子的控制下编码并表达CP77。

14.根据权利要求13所述的方法,其中经修饰的所述细胞系被修饰以在启动子的控制下编码并表达D13L。

15.根据权利要求13或权利要求14所述的方法,其中经修饰的所述细胞系被修饰以在启动子的控制下编码并表达K1L。

16.根据权利要求13至15中任一项所述的方法,其中经修饰的所述细胞系是人细胞、灵长动物细胞系、仓鼠细胞系或兔细胞系。

17.根据权利要求16所述的方法,其中所述细胞系是CHO细胞系。

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