通道调节剂的制作方法

相关申请的引证本专利申请是要求于2014年11月14日提交的美国临时申请序列号62/080,217；于2014年11月26日提交的美国临时申请序列号62/085,226；于2015年4月10日提交的美国临时申请序列号62/146,128；于2015年4月14日提交的美国临时申请序列号62/147,488；于2014年8月22日提交的新西兰申请序列号628630；以及于2015年7月2日提交的新西兰申请序列号709673的优先权的美国专利申请；所述专利申请各自的内容以引用的方式整体并入本文。本发明涉及连接蛋白和泛连接蛋白通道调节剂和调节。
背景技术：
：下述包括可用于理解本发明的信息。它并非承认本文明确或暗示引用的信息、出版物或文献中的任何是对于目前描述或请求保护的本发明的现有技术或必不可少的。本文提及或鉴定的所有出版物、专利、相关专利申请和其他书面或电子材料以引用的方式在此整体并入本文。所并入的信息与提交的申请的部分一样多，如同所有文本和其他内容在专利申请中重复一样，并且应当被视为所提交的专利申请的文本和内容的部分。间隙连接是在大多数动物细胞类型之间发现的专门的细胞间连接。它们在身体的几乎所有组织中表达，除了成熟的骨骼肌和移动细胞类型例如精子和红细胞之外。间隙连接直接连接两个细胞的细胞质，这允许不同分子、离子和电脉冲直接通过细胞之间的调节门。与关闭(紧密)连接和锚定(粘附和桥粒)连接形成对比，间隙连接不将膜密封在一起，它们的功能也不是限制材料在膜之间的通过。相反，间隙连接通道允许某些分子从一个细胞穿梭到另一个，因此通过直接连接邻近细胞的内部而提供物理连通通道。一个间隙连接通道由两个连接子(或半通道)组成，所述连接子连接穿过邻近细胞之间的细胞间隙并且允许细胞内分子在这些细胞之间流动。间隙连接的每个连接子驻留在相邻的细胞膜中，并且通过六个个别连接蛋白(“cx”或“cxn”)的共价寡聚形成。yeager(1998)structureofcardiacgapjunctionintercellularchannels,jstructbiol121:231-245。连接子可包含一种或多种不同的连接蛋白，尽管它们通常以同六聚体的形式。人类连接蛋白基因和蛋白质家族现在编号为21。(g&willeckek.(2004).gapjunctionsandtheconnexinproteinfamily.cardiovascres.62:228-232)。structuralandfunctionaldiversityofconnexingenesinthemouseandhumangenome,biolchem383:725-737。在不同组织类型中表达的连接蛋白的范围存在很多变化，并且通常在细胞类型中存在超过一种连接蛋白形式。参见sohl和willecke(2004)。尽管存在相容性限制，但连接蛋白和连接子的不同组合能够彼此相互作用。marziano等人hummolgenet.12:805-812(2003)。连接蛋白及其相关的间隙连接通道具有一系列尺寸和构型，其被认为对可通过的化学物种提供一定特异性。niessen等人(2000)selectivepermeabilityofdifferentconnexinchannelstothesecondmessengerinositol1,4,5-trisphosphate,jcellsci113(pt8):1365-1372。所有连接蛋白均共享共有结构，其具有四个跨膜结构域、两个细胞外环、细胞质环、短细胞质氨基末端和长度可显著不同的羧基末端。unger等人(1999)electroncryo-crystallographyofarecombinantcardiacgapjunctionchannel,novartisfoundsymp219:22-30&discussion31-43。连接蛋白通常根据其分子量命名，例如，cx26是26kda的连接蛋白。连接蛋白之间的主要结构差异是c末端细胞质尾部的长度，其中连接蛋白26几乎没有尾部(16个氨基酸)，而连接蛋白43和32具有长尾部和中等尾部(分别为156和73个氨基酸)。已预测不同连接蛋白的细胞质尾部的大小和氨基酸序列的差异尤其涉及通道开放和关闭构象。间隙连接的功能和/或功能障碍已牵涉许多病症。例如，连接蛋白30在克鲁斯顿综合征(有汗性外胚层发育不良)中突变，并且连接蛋白26基因中的突变是遗传性耳聋的最常见原因。人类连接蛋白32基因中的突变引起x-连锁的夏-马-图三氏病，这是遗传性神经病，而眼牙指发育不良一般被认为由编码连接蛋白43的基因中的突变引起。泛连接蛋白是跨膜通道糖蛋白家族，包括panx1、panx2和panx3。泛连接蛋白与连接蛋白共享相似的结构特征，其由4个跨膜结构域、2个细胞外环和1个细胞内环，连同细胞内n末端尾部和c末端尾部组成。panx1在许多哺乳动物组织中表达，而panx2和panx3表达更受限制。panx1已与钙波的传播、声音(tone)的调节、粘液纤毛肺清除和味蕾功能相关。panx1在脑、膀胱、睾丸和卵巢中表达，而panx2主要在脑中表达，并且panx3在皮肤、软骨、心脏、肾和耳蜗中表达。panx1半通道已牵涉atp释放、钙信号传导、角质形成细胞和成骨细胞分化、味觉接受、细胞死亡、缺血后神经变性、肿瘤抑制和癫痫发作。panx2涉及神经元的分化，而panx3在软骨细胞、成骨细胞的分化以及精子的成熟和转运中起作用。panx1定位于质膜，而panx2细胞内定位。连接蛋白和泛连接蛋白通道之间的一个主要区别是泛连接蛋白通道不形成细胞-细胞通道，并且已提示泛连接蛋白的高度糖基化的细胞外环干扰对接过程。与连接蛋白半通道一样，泛连接蛋白通道据说由许多因素激活，但也显示一些差异。连接蛋白半通道和泛连接蛋白通道两者均促成于谷氨酸和atp释放，尽管泛连接蛋白通道对钙离子浓度的减少不敏感。技术实现要素：本文描述和请求保护的本发明具有许多属性和实施例，包括但不限于在本
发明内容中阐述或描述或引用的那些。它并不预期是包括所有的，并且本文描述和请求保护的本发明并不限于本引言中鉴定的特征或实施例或者并不由所述特征或实施例限制，其仅被包括用于举例说明性目的而不是限制性目的。本发明的一个目的是提供用于调节间隙连接通道、半通道和/或泛连接蛋白通道和/或用于治疗病症的化合物、组合物、制剂、试剂盒和方法，所述病症将受益于间隙连接通道、半通道和/或泛连接蛋白通道的调节。因此，在一个方面，本发明涉及用于调节间隙连接通道、间隙连接半通道和/或泛连接蛋白通道的方法，并且特别地但不排他地，涉及用于治疗对于其间隙连接通道、间隙连接半通道和/或泛连接蛋白通道的调节可以是有益的病症的方法，该方法包括施用间隙连接通道调节剂，例如式i化合物(例如托那博沙)，连接蛋白拟肽化合物，和/或其前述化合物中任何的一种或多种类似物或前药，和/或施用泛连接蛋白调节剂，例如式vi化合物(例如丙磺舒)和/或其前述化合物中任何的一种或多种类似物或前药，和/或泛连接蛋白拟肽化合物和/或其前述化合物中任何的一种或多种类似物或前药。在一个方面，本发明提供了使用间隙连接通道调节剂或半通道调节剂用于调节间隙连接通道和/或半通道的方法。在一些方面，间隙连接通道调节剂或半通道调节剂可以是小分子调节剂。小分子间隙连接通道调节剂包括例如式i化合物，例如托那博沙，及其类似物和/或前药。在一些方面，间隙连接通道调节剂或半通道调节剂可以是拟肽化合物。拟肽间隙连接通道调节剂包括例如肽5(vdcflsrptekt)及其类似物。在其他方面，间隙连接通道调节剂或半通道调节剂可以是反义寡核苷酸，其可以是化学修饰的或未经修饰的寡核苷酸，例如未经修饰的dna寡核苷酸。在一些方面，本发明提供了使用泛连接蛋白调节剂用于调节泛连接蛋白通道的方法。在一些方面，泛连接蛋白调节剂可以是小分子调节剂。小分子泛连接蛋白通道调节剂包括例如式vi化合物，例如丙磺舒，以及前述化合物中任何的类似物和/或前药。在一些方面，泛连接蛋白调节剂可以是泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂。拟肽泛连接蛋白通道调节剂包括例如10panx1或其类似物。在一些方面，泛连接蛋白调节剂可以是泛连接蛋白2的合成模拟肽阻滞剂。在一些方面，泛连接蛋白调节剂可以是泛连接蛋白3的合成模拟肽阻滞剂。在一些方面，该方法包括共施用间隙连接通道调节剂和泛连接蛋白调节剂。间隙连接通道调节剂的共施用可与泛连接蛋白调节剂施用同时、在泛连接蛋白调节剂施用之后或泛连接蛋白调节剂施用之前施用。在一些方面，式i化合物例如托那博沙、和/或肽5、或任一或两者的类似物可与泛连接蛋白拮抗剂例如式vi化合物例如丙磺舒，和/或前述化合物中任何的一种或多种类似物或前药，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂，例如10panx1或其类似物共施用。在另一个方面，本发明提供了半通道调节剂在制备用于调节间隙连接通道和/或半通道，或治疗本文的疾病、病症和/或状况中任何的药物中的用途。半通道调节剂包括例如本文所述的式i化合物例如托那博沙、和/或其类似物、和/或肽5或其类似物、和/或反义寡核苷酸。在另一个方面，本发明提供了用于调节间隙连接通道和/或半通道的间隙连接通道调节剂、半通道调节剂、连接蛋白调节剂和/或泛连接蛋白调节剂(例如式i化合物，例如托那博沙)、和/或前述化合物中任何的类似物、或肽5或其类似物。在一个方面，间隙连接通道调节剂、半通道调节剂、连接蛋白调节剂和/或泛连接蛋白调节剂优选分别调节人或其他动物中的间隙连接通道和/或半通道和泛连接蛋白。在一些方面，本发明的特征还在于用于调节泛连接蛋白通道的泛连接蛋白调节剂，例如式vi化合物，例如丙磺舒，和/或其前述化合物中任何的一种或多种类似物或前药，和/或泛连接蛋白例如泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂，例如10panx1或其类似物。优选的泛连接蛋白通道调节剂是泛连接蛋白1通道调节剂。在一些方面，间隙连接通道调节剂和/或半通道调节剂可连同用于调节间隙连接通道和/或半通道连同调节泛连接蛋白或泛连接蛋白通道的泛连接蛋白调节剂一起使用。在一些方面，泛连接蛋白和/或泛连接蛋白通道的调节可在连接蛋白通道的调节之前、连接蛋白通道的调节之后或连接蛋白通道的调节同时进行。在其他方面，连接蛋白通道的调节可在泛连接蛋白通道的调节之前或泛连接蛋白通道的调节之后进行。在另一个方面，本发明提供了通过调节间隙连接通道和/或半通道用于治疗病症的方法，在所述病症中间隙连接通道和/或半通道的调节可能是有益的，该方法包括将连接蛋白通道调节剂和/或半通道调节剂施用于受试者。在一些方面，通道调节剂可以是例如给受试者的式i化合物，例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物，和/或拟肽化合物，例如肽5或其类似物。在其中泛连接蛋白通道的调节可能是有益的一些方面，该方法还包括施用泛连接蛋白拮抗剂或泛连接蛋白通道调节剂。泛连接蛋白调节剂包括例如式vi化合物，例如丙磺舒，和/或前述化合物中任何的类似物或前药和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂，例如10panx1或其类似物。在一些方面，该方法包括施用式i化合物(例如托那博沙)和/或前述化合物中任何的类似物，连同泛连接蛋白拮抗剂(例如式vi化合物，例如丙磺舒)和/或前述化合物中任何的一种或多种类似物或前药，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂，例如10panx1或其类似物。式i化合物(例如托那博沙)和/或前述化合物中任何的类似物的施用可在泛连接蛋白拮抗剂施用同时、在泛连接蛋白拮抗剂施用之后或泛连接蛋白拮抗剂施用之前。泛连接蛋白拮抗剂的施用可在连接蛋白通道拮抗剂，例如式i化合物，例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物施用之后或之前。在一些方面，治疗方法应用于人。在一些方面，治疗方法应用于哺乳动物，例如人。在另一个方面，本发明的特征在于泛连接蛋白调节剂在制备用于调节泛连接蛋白通道或治疗本文的疾病、病症和/或状况中的一种或多种的药物中的用途。泛连接蛋白调节剂包括例如式vi化合物，例如丙磺舒，和/或前述化合物中任何的类似物和前药，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂，例如10panx1或其类似物。在一些方面，间隙连接通道调节剂或半通道调节剂和泛连接蛋白调节剂可用于制备用于调节间隙连接通道和/或半通道以及调节泛连接蛋白通道的单一药物或一对药物。在另一个方面，本发明提供了连接蛋白调节剂例如式i化合物，例如托那博沙，和/或其类似物或肽5或其类似物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗其中间隙连接通道和/或半通道的调节可能是有益的病症。在其中泛连接蛋白通道的调节可能是有益的一些方面，本发明的特征在于泛连接蛋白拮抗剂或泛连接蛋白通道调节剂(例如式vi化合物，例如丙磺舒，和/或前述化合物中任何的一种或多种类似物或前药和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂，例如10panx1或其类似物)在制备药物中的用途，所述药物用于治疗其中泛连接蛋白通道的调节可能是有益的病症，包括用于治疗本文的疾病、病症和/或状况。在一些方面，式i化合物，例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物可连同泛连接蛋白拮抗剂一起用于制备药物，所述药物用于治疗其中间隙连接通道和/或半通道和泛连接蛋白通道的调节是有益的病症。在另一个方面，本发明提供了间隙连接通道调节剂，例如式i化合物，例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物或肽5或其类似物或另一种间隙连接通道调节剂，用于治疗其中间隙连接通道和/或半通道的调节可能是有益的病症。在其中泛连接蛋白通道的调节可能是有益的一些方面，本发明的特征还在于用于治疗其中泛连接蛋白通道的调节可能是有益的病症，包括用于治疗本文描述或引用的疾病、病症和/或状况的泛连接蛋白拮抗剂，例如式vi化合物，例如丙磺舒，和/或其前述化合物中任何的一种或多种类似物或前药和/或泛连接蛋白例如泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂，例如10panx1或其类似物，或另一种泛连接蛋白通道调节剂。在一些方面，式i化合物，例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物或前药或肽5或其类似物可连同泛连接蛋白拮抗剂一起用于治疗病症，在所述病症中间隙连接通道和/或半通道和泛连接蛋白通道的调节可能是有益的。式i化合物(例如托那博沙)和/或前述化合物中任何的类似物的施用可在泛连接蛋白拮抗剂施用同时、在泛连接蛋白拮抗剂施用之后或泛连接蛋白拮抗剂施用之前。在本发明的任何方面，下述中的任何可用作间隙连接通道调节剂，例如：式i化合物，例如托那博沙或其类似物，肽5或其类似物。具有一些间隙连接通道和/或半通道调节活性的其他化合物包括麻醉剂(包括例如异氟烷、氟烷、乙烷)、辛醇、庚醇、18α-甘草次酸(包括其代谢产物)、甘珀酸、灭酸酯(包括例如氟灭酸或尼氟酸)、强心苷(包括例如哇巴因)、血小板衍生生长因子(pdgf)、igf-1、碳醇、佛波醇酯和花生四烯酸、油酸或棕榈油酸(关于更多例子，参见salameha,等人，(2005)biochimbiophysacta1719:36-58)、和/或喹啉或甲氟喹化合物(参见例如dass等人，biochembiophysrescommun(2008)373:504-508)。在不同实施例中，被调节的间隙连接通道和/或半通道包含连接蛋白23、25、26、30、30.2、30.3、31、31.1、31.9、32、36、37、40、40.1、43、45、46、47、50、59和62中的一种或多种。在一个实施例中，被调节的间隙连接通道和/或半通道包含连接蛋白26、30、32、36、37、40、45和47中的一种或多种。在一个特定实施例中，被调节的间隙连接通道和/或半通道包含连接蛋白30和/或连接蛋白43。在不同实施例中，被调节的泛连接蛋白和/或泛连接蛋白通道是泛连接蛋白1、泛连接蛋白2和泛连接蛋白3中的一种或多种。在另一个方面，本发明提供了用于治疗本文提及的一种或多种疾病、病症或状况的方法，该方法包括将间隙连接通道调节剂施用于受试者。在一些方面，间隙连接通道调节剂可以是例如式i化合物，例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物或肽5或其类似物。在一些方面，本发明还提供了用于治疗本文提及的一种或多种疾病、病症或状况的方法，该方法包括单独或与一种或多种间隙连接通道或半通道调节剂组合施用泛连接蛋白调节剂。在一些方面，泛连接蛋白调节剂可以是例如式vi化合物，例如丙磺舒，和/或其前述化合物中任何的一种或多种类似物或前药和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂，例如10panx1或其类似物。在某些实施例中，一种或多种疾病、病症或状况选自包括例如下述的组：慢性伤口，未以预期速率愈合的伤口，开裂伤口；纤维化，纤维化疾病、病症或状况；异常或过度瘢痕形成；血管病症；组织损伤；骨科疾病或病症；炎症或炎性疾病；水肿。在另一个方面，本发明提供了间隙连接通道调节剂或半通道调节剂(例如肽5和/或其类似物)，式i化合物(例如托那博沙)和/或前述化合物中任何的类似物在制备用于治疗本文提及的一种或多种疾病、病症和状况的药物中的用途。在一些方面，本发明还提供了泛连接蛋白调节剂，例如式vi化合物，例如丙磺舒，和/或其前述化合物中任何的一种或多种类似物或前药和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其任一种的类似物在制备用于治疗本文提及的一种或多种疾病、病症和状况的药物中的用途。在一些方面，间隙连接通道调节剂可连同泛连接蛋白调节剂一起用于制备用于治疗本文提及的一种或多种疾病、病症和状况的分开药物或组合药物。在某些实施例中，一种或多种病症选自包括例如下述的组：慢性伤口，未以预期速率愈合的伤口，开裂伤口；纤维化，纤维化疾病、病症或状况；异常或过度瘢痕形成；血管病症；组织损伤；骨科疾病或病症；炎症或炎性疾病；以及水肿。在另一个方面，本发明提供了用于治疗本文提及的一种或多种疾病、病症和状况的间隙连接通道调节剂或半通道调节剂，例如肽5和/或其类似物，式i化合物，例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物。在一些方面，本发明还提供了泛连接蛋白调节剂，例如式vi化合物，例如丙磺舒，和/或其前述化合物中任何的一种或多种类似物或前药，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其任一种的类似物，例如单独或与本公开内容的间隙连接通道和/或半通道调节剂组合用于治疗本文提及的一种或多种疾病、病症和状况的用途。在某些实施例中，一种或多种疾病、病症或状况选自包括例如下述的组：慢性伤口，未以预期速率愈合的伤口，开裂伤口；纤维化，纤维化疾病、病症或状况；异常或过度瘢痕形成；血管病症；组织损伤；骨科疾病或病症；炎症或炎性疾病；以及水肿。在另一个方面，本发明提供了例如用于治疗本文提及的一种或多种疾病、病症和状况的间隙连接通道或半通道调节剂，例如肽5和/或其类似物，式i化合物，例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物。在一些方面，本发明还提供了泛连接蛋白调节剂，例如式vi化合物，例如丙磺舒，和/或前述化合物中任何的一种或多种类似物或前药，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其任一种的类似物，例如单独或与间隙连接通道调节剂包括本公开内容的那些组合用于治疗本文提及的一种或多种病症的用途。在某些实施例中，一种或多种疾病、病症或状况选自下述：例如缺血(包括例如围产期缺血、皮肤缺血和心脏缺血)、脑中风、窒息、脑外伤、脊髓损伤、心脏病发作、炎性心脏损伤(包括例如心包炎)、再灌注损伤(包括例如手术或移植后的心脏再灌注)、手术或移植后的肝再灌注、视网膜神经节细胞(rgc)丧失和/或视网膜缺血或眼纤维化。在一些方面，本发明提供了改善从手术或程序的恢复和/或治疗手术后挛缩的方法，该方法包括将间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物施用于受试者。在相关实施例中，本发明提供了间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物在制备改善从手术或程序的恢复和/或治疗手术后挛缩的药物中的用途。在相关实施例中，本发明提供了间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物，例如以改善从手术或程序的恢复和/或治疗手术后挛缩。在一些方面，本发明提供了改善从手术或程序的恢复和/或治疗手术后挛缩的方法，该方法包括将泛连接蛋白调节剂，例如式vi化合物，例如丙磺舒，和/或其前述化合物中任何的一种或多种类似物或前药，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂，例如10panx1，或其任一种的类似物施用于受试者。在相关实施例中，本发明提供了泛连接蛋白调节剂，例如式vi化合物，例如丙磺舒，和/或其前述化合物中任何的一种或多种类似物或前药，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂，例如10panx1或其任一种的类似物在制备改善从手术或程序的恢复和/或治疗手术后挛缩的药物中的用途。在相关实施例中，本发明提供了泛连接蛋白调节剂，例如式vi化合物，例如丙磺舒，和/或其前述化合物中任何的一种或多种类似物或前药和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂，例如10panx1或其任一种的类似物，例如以改善从手术或程序的恢复和/或治疗手术后挛缩。在一个实施例中，手术或程序是骨科手术或程序。在一个实施例中，手术后挛缩是骨科手术后关节挛缩。在另一个方面，本发明提供了治疗或减少受试者中的粘连形成的方法，该方法包括将间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物施用于受试者。在相关实施例中，本发明提供了间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物或前药在制备治疗或减少受试者中的粘连形成的药物中的用途。在相关实施例中，本发明提供了间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物，例如以治疗或减少受试者中的粘连形成。在另一个方面，本发明提供了治疗或减少受试者中的粘连形成的方法，该方法包括将泛连接蛋白调节剂，例如式vi化合物，例如丙磺舒，和/或其前述化合物中任何的一种或多种类似物或前药，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂，例如10panx1，或其任一种的类似物施用于受试者。在相关实施例中，本发明提供了泛连接蛋白调节剂，例如式vi化合物，例如丙磺舒，和/或其前述化合物中任何的一种或多种类似物或前药，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂，例如10panx1或其任一种的类似物在制备治疗或减少受试者中的粘连形成的药物中的用途。在相关实施例中，本发明提供了泛连接蛋白调节剂，例如式vi化合物，例如丙磺舒，和/或其前述化合物中任何的一种或多种类似物或前药和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂，例如10panx1或其任一种的类似物，例如以治疗或减少受试者中的粘连形成。在另一个方面，本发明涉及式i化合物，例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物的用途，例如以直接和立即阻断cx43半通道并且引起gj偶联的浓度和时间依赖性减少。在另外其他方面，可通过本发明的组合物和方法治疗不同病症，包括用单独或连同泛连接蛋白通道调节剂一起的间隙连接通道(例如半通道)调节剂的治疗方法。这些病症包括但不限于神经退行性疾病(例如阿尔茨海默氏病、aids相关性痴呆、帕金森氏病、肌萎缩侧索硬化、色素性视网膜炎、脊髓性肌萎缩和小脑变性)；缺血性损伤；肺、肾或肝的纤维化；血管疾病(例如再狭窄、动脉粥样硬化、动脉粥样硬化斑块、冠状动脉疾病或高血压)，呼吸系统疾病(例如哮喘、慢性支气管炎、支气管扩张或囊性纤维化)，不期望的或异常的肥大，关节炎，类风湿性关节炎(ra)，银屑病，银屑病斑块，结节病，cns创伤包括脊髓损伤和视神经损伤，糖尿病性和其他增殖性视网膜病变包括早产儿视网膜病变，晶体后纤维增生症，青光眼包括开角型青光眼、闭角型青光眼和正常眼压型青光眼，以及开角型青光眼和闭角型青光眼的变体例如继发性青光眼、色素性青光眼、假性剥脱性青光眼、外伤性青光眼、新生血管性青光眼和虹膜角膜内皮综合征(ice)和新生血管性青光眼，年龄相关性黄斑变性，糖尿病性黄斑水肿，角膜新生血管形成，角膜移植物新生血管形成，角膜移植物排斥，视网膜/脉络膜新生血管形成，房角新生血管形成(红变)，眼新生血管疾病，血管再狭窄，葡萄膜炎，干眼病，眼部和角膜持续性上皮缺损，动静脉畸形(avm)，甲状腺增生(包括格雷夫斯氏病)，角膜和其他组织移植，慢性炎症，肺炎症，眼部炎症，急性肺损伤/ards，脓毒症，系统性毛细血管渗漏综合征，多器官功能障碍综合征(mods)，全身性炎症反应综合征(sirs)，急性呼吸窘迫综合征，烧伤后血管通透性综合征，由腹水标记的状况，胸腔积液和心包积液，心肺分流术后的渗透性变化(特别是在婴儿和幼儿中)，再灌注损伤，蛇咬伤，原发性肺高血压，恶性肺积液，脑水肿(例如与急性中风/闭合性头部损伤/创伤有关)，滑膜炎症，骨关节炎(oa)，第三间隔的流体疾病(胰腺炎、间隔室综合征、烧伤、肠病)，慢性炎症例如炎性肠病(ibd)(包括克罗恩氏病和溃疡性结肠炎)，肾同种异体移植排斥，炎性肠病，肾病综合征，血友病性关节，肥厚性瘢痕，osler-weber综合征，化脓性肉芽肿，晶体后纤维增生症，硬皮病，沙眼，血管粘连，滑膜炎，皮炎，先兆子痫，腹水，心包积液(例如与心包炎相关的那种)，胸腔积液，手术后组织水肿，急性骨科损伤，过敏反应，囊性纤维化和慢性皮肤伤口，溃疡或溃疡性病灶，包括糖尿病足溃疡、静脉性腿部溃疡和压力性溃疡，以及传染病，包括疟疾、登革热和肺炎。用于这些疾病、病症和状况的某些优选治疗包括施用间隙连接通道调节剂，例如式i化合物(例如托那博沙)，连接蛋白拟肽化合物和/或其前述化合物中任何的一种或多种类似物或前药，和/或施用泛连接蛋白调节剂，例如式vi化合物(例如丙磺舒)和/或其前述化合物中任何的一种或多种类似物或前药，和/或泛连接蛋白拟肽化合物和/或其前述化合物中任何的一种或多种类似物或前药。特别优选的化合物是式i化合物，例如托那博沙，和式vi化合物，例如丙磺舒。在一些方面，间隙连接通道调节剂或连接蛋白调节剂是血管中存在的间隙连接和/或连接蛋白的调节剂，例如连接蛋白43间隙连接通道调节剂或连接蛋白43调节剂、连接蛋白40间隙连接通道调节剂或连接蛋白40调节剂、或者连接蛋白45间隙连接通道调节剂或连接蛋白45调节剂。优选地，连接蛋白调节剂是连接蛋白43调节剂。连接蛋白调节剂和连接蛋白43调节剂包括用于下调连接蛋白转录或连接蛋白的翻译的工具，例如反义分子。在连接蛋白43的情况下，它们还包括zo-1结合肽。优选地，间隙连接通道调节剂是连接蛋白43间隙连接通道调节剂。优选的连接蛋白43间隙连接通道调节剂是托那博沙或另一种式i化合物。用于本文特征的任何用途的本发明的药物组合物还可包含间隙连接通道调节剂，例如多核苷酸，其可抑制或阻断例如连接蛋白26(cx26)、连接蛋白30(cx30)、连接蛋白31.1(cx31.1)、连接蛋白36(cx36)、连接蛋白37(cx37)、连接蛋白40(cx40)、连接蛋白45(cx45)、连接蛋白50(cx50)或连接蛋白57(cx57)、或者眼或血管中的任何其他连接蛋白、或连接蛋白间隙连接或连接蛋白半通道。在另一个实施例中，用于本文特征的任何用途的本发明的药物组合物还可以是至少一种泛连接蛋白调节剂，并且还可包含本文描述或引用的间隙连接通道调节剂或连接蛋白调节剂中的任何。在一个方面，本发明涉及通过将治疗有效量的至少一种泛连接蛋白调节剂施用于所述受试者的眼，用于治疗眼部病症和其他病症的药物组合物、制造物品和方法，所述眼部病症和其他病症包括例如青光眼、糖尿病视网膜病变(dr)、糖尿病性黄斑水肿(dme)、年龄相关性黄斑变性(amd)、眼纤维化和/或神经性眼部病症。在一些方面，神经性眼部病症可以是例如青光眼、rgc的丧失和/或青光眼性眼部神经病变。在一些方面，青光眼可起因于高眼压。在一些方面，青光眼可起因于低眼压性青光眼或正常眼压性青光眼。在一些方面，施用治疗有效量的至少一种连接蛋白调节剂有效治疗(例如治疗、预防、减缓、减少、停止或改善)青光眼、视网膜神经节细胞的丧失和/或减少玻璃体谷氨酸盐浓度。用于本文特征的任何用途的本发明的药物组合物还可包含可抑制或阻断例如泛连接蛋白通道的泛连接蛋白调节剂。在一些方面，泛连接蛋白调节剂可包括或排除panx1、panx2或panx3调节剂。在一些方面，泛连接蛋白调节剂可包括或排除panx1调节剂。在另一个方面，本发明涉及通过将治疗有效量的至少一种泛连接蛋白调节剂施用于所述受试者的眼，用于治疗眼部病症和其他病症的药物组合物、制造物品和方法，所述眼部病症和其他病症包括例如dr、青光眼、dme、amd、眼纤维化和/或神经性眼部病症。在一些方面，神经性眼部病症可以是例如视网膜神经节细胞(rgc)的丧失和/或青光眼性眼部神经病变。在一些方面，施用治疗有效量的至少一种泛连接蛋白调节剂有效治疗(例如治疗、预防、减缓、减少、停止或改善)视网膜神经节细胞的丧失进一步可用于减少玻璃体谷氨酸盐浓度。在一个方面，本发明涉及用于治疗高眼压的药物组合物、制造物品和方法。在一些方面，治疗高眼压治疗或预防眼内压相关神经病变。在一些方面，用于治疗高眼压的方法包括例如将治疗有效量的至少一种半通道或连接蛋白调节剂和/或至少一种泛连接蛋白通道或泛连接蛋白调节剂施用于所述受试者的眼。在一个方面，本发明涉及例如用于治疗青光眼的药物组合物和方法。本文的方法以足以降低眼内压的量提供眼内压相关的视神经病变例如青光眼的治疗。在一些方面，连接蛋白调节剂和/或泛连接蛋白调节剂可用于治疗与眼内压升高相关的创伤。在一些方面，连接蛋白调节剂是连接蛋白43调节剂。在一些方面，本发明的组合物和方法可用于治疗高眼压并将眼内压降低至正常水平，例如21mmhg以下，例如降至8-21mmhg之间的水平。在一些方面，本发明的组合物和方法可用于将眼内压降低至约22mm、21mm、20mmhg以下或更低。在一个方面，本文所述的组合物、制造物品和方法可用于治疗青光眼而无毒性副作用。在一些方面，青光眼可以是开角型青光眼或闭角型青光眼。在一些方面，将治疗有效量的至少一种连接蛋白或半通道调节剂，例如连接蛋白43调节剂或连接蛋白43半通道调节剂，和/或至少一种泛连接蛋白调节剂施用于有此需要的受试者的眼组织增加通过小梁网的流量。在一个方面，本发明涉及用于治疗正常眼压性青光眼或正常眼压型青光眼的药物组合物、制造物品和方法。在一些方面，该方法包括例如将治疗有效量的至少一种连接蛋白或半通道调节剂和/或至少一种泛连接蛋白调节剂施用于所述受试者的眼。在一个方面，本发明涉及例如用于治疗青光眼的药物组合物和方法。在一些方面，连接蛋白调节剂是连接蛋白43或连接蛋白43半通道调节剂。在一些方面，连接蛋白调节剂是例如下述并且可包括或排除下述：cx26、cx30、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx45、cx50、cx57或者眼或血管中包含所述连接蛋白的任何其他连接蛋白或半通道的调节剂，和/或至少一种泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂。在一些方面，本发明的组合物和方法可用于治疗青光眼，即使当眼内压处于正常水平下，例如21mmhg以下时。在一些实施例中，调节剂可包括或排除前述中的任何。在一些方面，本发明涉及用于治疗眼部病症的药物组合物、制造物品和方法，所述眼部病症可包括或排除青光眼包括高眼压型青光眼和正常眼压型青光眼，临床性地图状萎缩；amd包括干性amd和渗出性amd、异常或损伤，慢性黄斑缺血，眼纤维化，特发性息肉样脉络膜血管病变(ipc)；糖尿病性黄斑病变，糖尿病视网膜病变；高血压性视网膜病变，炎性脉络膜新生血管形成；中心性浆液性脉络膜视网膜病变(csr)；黄斑毛细血管扩张；模式营养不良；视网膜下/prd下新生血管形成；感觉神经性视网膜的浆液性脱离；rpe脱离；出血(视网膜下色素上皮、视网膜下、视网膜内或视网膜前(piretinal)，包括进入玻璃体内的突破性出血)；视网膜前、视网膜内、视网膜下或色素上皮下瘢痕/神经胶质组织或纤维蛋白样沉积物；视网膜纤维化，视网膜血管瘤性增生和视网膜脉络膜血管吻合；脉络膜新生血管形成(cnv)；囊性黄斑病变；视网膜增厚；非渗出性amd；和视网膜瘢痕形成，葡萄膜炎包括后葡萄膜炎，巩膜炎，巩膜外层炎病毒性视网膜炎(包括巨细胞病毒(cmv)视网膜炎)，早产儿视网膜病变，视网膜缺氧，弥漫性脉络膜硬化，脉络膜毛细血管硬化，干眼，糖尿病性黄斑水肿(dme)，神经性眼部病症，创伤诱导的眼内压降低，上皮基底膜营养不良和/或其他眼部病症。可用于本文所述的治疗方法中任何的组合物和制造物品包含治疗有效量的至少一种连接蛋白或半通道调节剂，例如连接蛋白调节剂，或至少一种泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂。在一些方面，连接蛋白调节剂是例如包含连接蛋白43(cx43)、cx26、cx30、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx45、cx50、cx57或这样的连接蛋白，或者眼或血管中的任何其他连接蛋白或连接蛋白半通道的调节剂。在治疗糖尿病视网膜病变的实施例中，组合物可包含例如泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂，和/或小分子连接蛋白或半通道调节剂，例如连接蛋白43半通道或连接蛋白43本身的小分子抑制剂。在一些方面，用于治疗本文的糖尿病视网膜病变或其他疾病、病症或状况的连接蛋白调节剂可以是本公开内容的任何连接蛋白43调节剂，包括或排除具有seqidno.1-3和/或其修饰形式的多核苷酸。在一些实施例中，调节剂可包括或排除前述中的任何。本文描述和请求保护的本发明也可用于治疗白内障。视网膜中央动脉将血液提供给眼，而分支提供给灌注眼背部的脉络膜以及供给前视网膜的浅表和深部血管丛。另外，长分支灌注虹膜和睫状体以将营养和氧提供给眼的前部，包括(经由睫状体)晶状体。本发明人已惊讶地确定影响血管床的疾病，包括糖尿病视网膜病变和年龄相关性黄斑变性也将影响到前段的流动并因此促成白内障形成，并且注意白内障是患有糖尿病的人中的视力损伤的最常见原因之一，以及眼中的严重白内障也可能与晚期amd的更高患病率相关。在一些方面，本发明涉及用于治疗眼部病症的药物组合物、制造物品和方法，所述眼部病症可包括或排除黄斑裂孔、黄斑变性、视网膜撕裂、dme、糖尿病视网膜病变(dr)、玻璃体视网膜病变、屈光不正、干眼、病毒性结膜炎、溃疡性结膜炎和伤口愈合中的瘢痕形成、角膜上皮伤口、干燥综合征、白内障、放射状角膜切开术后遗症、角膜组织厚度增加。在该实施例中，组合物可包含例如泛连接蛋白调节剂或连接蛋白调节剂，例如连接蛋白43的小分子抑制剂或肽抑制剂。在一些方面，连接蛋白调节剂是例如cx43的调节剂，cx26、cx30、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx45、cx50和cx57或者眼或血管中的任何其他连接蛋白的调节剂。在该实施例的一些方面，组合物可包含例如本公开内容的任何连接蛋白43调节剂，包括或排除具有seqidno.1-3的多核苷酸。在一些实施例中，调节剂可包括或排除前述中的任何。在一些方面，本发明涉及用于治疗白内障的药物组合物、制造物品和方法。在该实施例中，组合物可包含例如泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂、间隙连接调节剂、间隙连接或半通道磷酸化试剂或连接蛋白拮抗剂，例如连接蛋白的多核苷酸、肽或拟肽或小分子拮抗剂。在一些方面，连接蛋白调节剂是cx43、cx26、cx30、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx45、cx50、cx57或者眼或血管中的任何其他连接蛋白的调节剂。在该实施例的一些方面，组合物可包含例如本公开内容的任何cx43调节剂，排除托那博沙。在一些实施例中，调节剂可包括或排除前述中的任何。在一些方面，本发明涉及用于治疗眼部病症的药物组合物、制造物品和方法，所述眼部病症可包括或排除视网膜静脉或动脉阻塞、青光眼、视网膜中风、导致眼内压升高的创伤、糖尿病视网膜病变、囊样黄斑水肿。在该实施例中，组合物可包含例如泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂、间隙连接调节剂、间隙连接或半通道磷酸化试剂、在cx43的情况下的zo-1结合位点拟肽或另一种连接蛋白拮抗剂，例如连接蛋白的多核苷酸、肽或拟肽或小分子拮抗剂。在一些方面，连接蛋白调节剂是cx43、cx26、cx30、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx45、cx50、cx57或者眼或血管中的任何其他连接蛋白的调节剂。在该实施例的一些方面，组合物可包含例如本公开内容的任何cx43调节剂，排除托那博沙。在一些实施例中，调节剂可包括或排除前述中的任何。在一些方面，本发明涉及用于治疗阿尔茨海默氏病、帕金森氏病、亨廷顿病和肌萎缩侧索硬化、偏头痛、或者有先兆偏头痛或无先兆偏头痛、坐骨神经痛/神经根病的药物组合物、制造物品和方法。在该实施例中，组合物可包含例如单独或组合的例如泛连接蛋白调节剂、间隙连接或半通道磷酸化试剂、或连接蛋白拮抗剂。在一些方面，连接蛋白调节剂是例如cx43、cx26、cx30、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx45、cx50、cx57或者眼或血管中的任何其他连接蛋白的调节剂。在该实施例的一些方面，组合物可包含例如靶向眼的本公开内容的任何连接蛋白43调节剂，包括式i化合物，例如托那博沙，以及前述化合物中任何的类似物，以及例如托那博沙前药和本公开内容的式i化合物的前药。在一些实施例中，调节剂可包括或排除前述中的任何。在一个方面，本发明涉及用于治疗眼部缺氧、眼部血管损伤和/或血管渗漏的药物组合物、制造物品和方法。在一些方面，治疗或预防眼部缺氧包括治疗或预防血管渗漏、血管破裂和/或导致低于对眼中的脉络膜或其他血管的正常氧合血流的任何其他状况。在一些方面，治疗或预防眼部缺氧包括治疗导致血管压迫或以其他方式影响对眼的血流的状况。在一些方面，用于治疗眼部病症例如眼部缺氧、青光眼、amd、dme、眼纤维化和/或视网膜灌注障碍的方法包括例如将治疗有效量的至少一种间隙连接调节剂或连接蛋白调节剂或至少一种泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂施用于所述受试者的眼。在一个方面，本发明涉及例如用于治疗青光眼或用于治疗amd的药物组合物和方法。在一些方面，本发明的组合物可用作佐剂以改善小梁切除术成功率。眼的前部填充有房水，这是向眼前部部分中的结构提供营养的清澈流体。这种流体不断地由围绕眼晶状体的睫状体产生。房水流过瞳孔并通过小梁网通道流出眼，所述小梁网通道位于角膜附着到虹膜的连接处，这被称为眼的引流角。在本发明的一些方面，将一种或多种间隙连接或连接蛋白调节剂或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂施用于小梁网或睫状体。在本发明一个方面，特征还在于用于治疗受试者中的其他眼部状况例如视网膜缺血性疾病或眼部缺血性疾病的组合物、制造物品和方法，其包括施用治疗有效量的间隙连接调节剂、连接蛋白调节剂、或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂，包括例如有效减少内部视网膜中的炎症的量。在一些方面，视网膜缺血性疾病是视网膜动脉阻塞或视网膜中央静脉阻塞。在一些方面，眼部缺血性疾病是例如前部缺血性视神经病变。在一些方面，连接蛋白调节剂是连接蛋白43调节剂。本发明的特征还在于用于减少受试者中的脉络膜灌注损伤和/或脉络膜炎症或脉络膜过度灌注的组合物、制造物品和方法，其包括将一定量的间隙连接调节剂、连接蛋白调节剂或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂施用于受试者的脉络膜，有效减少脉络膜灌注损伤和/或脉络膜炎症，或内部视网膜中的脉络膜过度灌注。在本发明的一些方面，将治疗有效量的间隙连接调节剂、连接蛋白调节剂或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂施用于受试者的脉络膜，有效减少脉络膜灌注损伤和/或脉络膜炎症或脉络膜过度灌注，也减少脉络膜毛细血管内皮细胞丧失和/或脉络膜毛细血管脱落，由此治疗或预防眼部病症。在一些方面，减少脉络膜灌注损伤和/或脉络膜炎症或脉络膜过度灌注还减少视网膜色素上皮变性和/或玻璃疣发展，或者以其他方式改善、停止、减慢和/或逆转黄斑变性或黄斑营养不良(其可以是干性黄斑变性或湿性黄斑变性)的进展。在一些方面，用于减少脉络膜灌注损伤和/或脉络膜炎症或脉络膜过度灌注的间隙连接调节剂、连接蛋白调节剂或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂是cx43调节剂。用于减少脉络膜灌注损伤和/或脉络膜炎症或脉络膜过度灌注的间隙连接调节剂、连接蛋白调节剂或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂也可与眼部治疗试剂一起施用。脉络膜灌注损伤和/或脉络膜炎症或脉络膜过度灌注可诱发脉络膜中的血管渗漏，并导致视网膜色素上皮中的内皮细胞丧失。如本文所述，已惊讶地发现，脉络膜灌注损伤和/或脉络膜炎症和脉络膜毛细血管脱落起因于cx43上调，并且cx43上调是amd的主要原因。在amd器官供体视网膜的脉络膜中观察到与cx43表达的变化相关的异常脉管系统，这支持了cx43上调在amd中的作用。在一些实施例中，治疗或预防血管渗漏和脉络膜灌注损伤和/或脉络膜炎症或脉络膜过度灌注可用于治疗或预防与状况相关的视网膜色素上皮变性或视网膜新生血管形成，所述状况例如非渗出性amd或干性amd、新生血管形成amd或湿性amd、以及玻璃疣发展。如本文惊讶地发现且描述的，上游事件例如血管渗漏和脉络膜灌注损伤和/或脉络膜炎症与amd脉络膜变化相关，并且随后与症状例如视网膜色素上皮变性或视网膜新生血管形成相关。因此，在一个方面，本发明的特征在于施用单独的或者连同用于治疗amd的一种或多种眼部治疗试剂一起的本发明的间隙连接调节剂、连接蛋白调节剂和/或泛连接蛋白蛋白或泛连接蛋白通道调节剂的方法，所述眼部治疗试剂包括用于治疗新生血管形成amd、湿性amd、玻璃疣发展、干性amd、视网膜色素上皮变性或地图状萎缩的眼部试剂。本发明的间隙连接调节剂、连接蛋白调节剂或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂可与眼部治疗试剂分开、同时或以合并的组合物施用。在一些方面，本发明的连接蛋白或泛连接蛋白寡核苷酸和多核苷酸是化学制备、合成制备或以其他方式制造的。在一些实施例中，连接蛋白调节剂是连接蛋白寡核苷酸或多核苷酸。在一个实施例中，连接蛋白调节剂是无论是化学修饰还是未经修饰的连接蛋白反义寡脱氧核苷酸，例如cx43反义寡脱氧核苷酸，或者针对cx26、cx30、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx45、cx50、cx57或者眼或血管中的任何其他连接蛋白的反义寡脱氧核苷酸。在一些方面，经修饰的连接蛋白反义多核苷酸或寡核苷酸可包含经修饰的和未经修饰的核苷酸的混合物。在一些方面，在本文方法中使用的连接蛋白反义化合物是包含天然存在的核苷酸和未经修饰的核苷间键的反义寡核苷酸。在一些实施例中，连接蛋白寡核苷酸或多核苷酸和/或连接蛋白反义寡脱氧核苷酸可以是例如cx43反义寡核苷酸、多核苷酸和/或cx43反义寡脱氧核苷酸。在一些实施例中，调节剂可包括或排除前述中的任何。本发明的特征在于包含至少一个未经修饰的核苷酸的连接蛋白反义寡核苷酸或多核苷酸。在一个方面，连接蛋白反义寡核苷酸或多核苷酸可包含至少一个经修饰的核苷酸，和/或具有至少一个经修饰的核苷间键和/或至少一个经修饰的糖部分。经修饰的核苷间键可以是例如硫代磷酸酯键。在一些方面，例如，连接蛋白多核苷酸可包括包含构象应变核苷酸的至少一个核苷酸，例如锁定核酸(lna)或桥接核酸(bna)。锁定核苷酸可选自下述类型之一，例如：2′-o—ch2-4′(氧基-lna)、2′-ch2—ch2-4′(亚甲基-lna)、2′—nh—ch2-4′(氨基-lna)、2′—n(ch3)—ch2-4′(甲基氨基-lna)、2′-s—ch2-4′(硫代-lna)和2′-se—ch2-4′(硒基-lna)。在一些方面，经修饰的核苷酸可以是锁定核酸或解锁核酸。在一些方面，经修饰的和未经修饰的连接蛋白反义寡核苷酸或多核苷酸是经修饰的和未经修饰的cx43反义寡核苷酸或多核苷酸。在一些方面，经修饰的和未经修饰的连接蛋白反义寡核苷酸或多核苷酸是经修饰的和未经修饰的cx26反义寡核苷酸或多核苷酸、cx31.1反义寡核苷酸或多核苷酸、cx30反义寡核苷酸或多核苷酸、cx45反义寡核苷酸或多核苷酸、cx36反义寡核苷酸或多核苷酸、cx37反义寡核苷酸或多核苷酸、cx40反义寡核苷酸或多核苷酸、cx50反义寡核苷酸或多核苷酸、或者cx57反义寡核苷酸或多核苷酸。在一些方面，连接蛋白反义寡核苷酸或多核苷酸包含手性磷部分，例如wo2013012758中所述的那些。本文的特征还在于示例性的经修饰的或未经修饰的连接蛋白43反义化合物，其包含选自seqidno:1-16的核苷酸序列或从选自seqidno:1-16的核苷酸序列修饰的。本发明的多核苷酸包括具有小于80个核苷酸的长度，例如12-18至约50-80个核苷酸，优选约30个核苷酸或更少，例如12至约30个核苷酸，且更优选约15至约30个核苷酸的多核苷酸。在一个例子中，多核苷酸具有30个核苷酸。在一些方面，本发明的方法的特征在于使用包含选自seqidno:1-17、seqidno:4-17的核苷酸序列的长度高达40个核苷酸，例如长度15至40个核苷酸，或包含seqidno:17的约8至40个核苷酸的连接蛋白43反义化合物。在一些实施例中，可通过用一个或多个尿苷核苷酸残基置换seqidno:4-17或seqidno1-3中的一个或多个胸腺嘧啶核苷酸来修饰cx43反义化合物。本文的特征还在于包含seq.id.no:217的8至约80个核苷酸的经修饰的或未经修饰的cx45反义多核苷酸，以及包含seq.id.no:279的8至约80个核苷酸的经修饰的和未经修饰的泛连接蛋白反义多核苷酸。本发明的多核苷酸包括具有小于80个核苷酸的长度，例如12-18至约50-80个核苷酸，优选约30个核苷酸或更少，例如12至约30个核苷酸，且更优选约15至约30个核苷酸的合成多核苷酸。在一个例子中，多核苷酸具有30个核苷酸。在一些方面，本发明的方法的特征在于使用长度高达40个核苷酸，例如长度15至40个核苷酸，例如包含seqidno:217的约8至约40个或约15至约40个核苷酸的连接蛋白45反义化合物。在一些方面，本发明的方法的特征在于使用长度高达40个核苷酸，例如长度15至40个核苷酸，例如包含seqidno:283-287的约8至约40个或约15至约40个核苷酸的泛连接蛋白反义化合物。在一些实施例中，可通过用一个或多个尿苷核苷酸残基置换seqidno:217或seqidno:283-287中的一个或多个胸腺嘧啶核苷酸来修饰连接蛋白45或泛连接蛋白反义化合物。特征还在于用于本文特征的任何方法中的是经修饰的或未经修饰的cx26多核苷酸、cx31.1多核苷酸、cx36多核苷酸、cx37多核苷酸、cx40多核苷酸、cx50多核苷酸或cx57多核苷酸，或者针对眼或血管中的任何其他连接蛋白的经修饰的或未经修饰的反义多核苷酸。用于本文特征的任何用途的本发明的药物组合物还可包含泛连接蛋白反义多核苷酸调节剂，其可抑制泛连接蛋白通道，例如panx1或panx2、或panx3。在一些实施例中，调节剂可包括或排除前述中的任何。在本发明的一些方面，连接蛋白43反义寡核苷酸或多核苷酸与具有选自seqidno:1至17的序列的多核苷酸具有至少约80％、85％、90％、95％、97％、98％或99％同源性。其为寡核苷酸或多核苷酸的连接蛋白或泛连接蛋白调节剂可与其分别序列的8至80个氨基酸部分具有至少约80％、85％、90％、95％、97％、98％或99％同源性。例如，其为寡核苷酸或多核苷酸的连接蛋白45调节剂可与seqidno:217的8至80个核苷酸部分具有至少约80％、85％、90％、95％、97％、98％或99％同源性，而其为寡核苷酸或多核苷酸的泛连接蛋白调节剂可与seqidno:283(panx1多核苷酸)(panx1多核苷酸refseqidnm_015368.3)、seqidno:284(panx2多核苷酸)(关于变体1的panx2多核苷酸refseqidnm_052839.3)、seqidno:285(关于panx2多核苷酸变体2的refseqidnm_001160300.1)、seqidno:286(关于panx2多核苷酸变体3的refseqidnr_027691.1)、或seqidno:287(panx3多核苷酸)(panx3多核苷酸refseqidnm_052959.2)或其变体的8至80个核苷酸部分具有至少约80％、85％、90％、95％、97％、98％或99％同源性。在一些方面，泛连接蛋白调节剂可包括或排除泛连接蛋白肽序列。泛连接蛋白肽序列可包含多肽seqidno:288(panx1肽)、seqidno:289(panx2肽)、或seqidno:290(panx3肽)或其变体的8-40个连续氨基酸、细胞外结构域、细胞内结构域、羧基末端部分或氨基末端部分。在一些实施例中，调节剂可包括或排除前述中的任何。在其他实施例中，间隙连接调节剂或连接蛋白调节剂是连接蛋白肽或拟肽，有时称为抗连接蛋白肽或拟肽，例如抗连接蛋白半通道阻断肽或拟肽，例如包含连接蛋白细胞外结构域、跨膜区和连接蛋白羧基末端肽的经修饰的或未经修饰的肽或拟肽。间隙连接调节剂或抗连接蛋白半通道阻断肽或拟肽可以是经修饰的或未经修饰的。间隙连接调节剂和抗连接蛋白半通道阻断肽或拟肽是化学制备、合成制备或以其他方式制造的。在一些实施例中，间隙连接调节剂或连接蛋白调节剂是cx43肽或拟肽。在一些方面，治疗有效的经修饰的或未经修饰的肽或拟肽包含连接蛋白例如cx43或cx45的细胞外或跨膜结构域的一部分。在其他实施例中，泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂是泛连接蛋白肽或拟肽，有时称为抗泛连接蛋白肽或拟肽，例如，经修饰的或未经修饰的肽或拟肽。在一些实施例中，本发明的调节剂包括抗cx43肽或拟肽，例如，本文所述的任何肽，包括包含连接蛋白的细胞外结构域的一部分的肽，以及包含可用于本发明的方法中的连接蛋白的羧基末端部分的一部分的肽，其是治疗有效的，例如有效治愈本文所述的神经性眼部病症中的任何。在一些方面，治疗有效的经修饰的或未经修饰的肽或拟肽包含连接蛋白(例如cx43)的细胞外或跨膜结构域的一部分。在一些实施例中，调节剂可以是间隙连接关闭化合物和半通道关闭化合物。在一些实施例中，间隙连接关闭化合物和半通道关闭化合物是连接蛋白43间隙连接关闭化合物和连接蛋白43半通道关闭化合物。优选的连接蛋白羧基末端多肽是连接蛋白43羧基末端多肽。在其他实施例中，间隙连接调节剂是间隙连接肽或拟肽，有时称为抗间隙连接肽或拟肽，例如抗间隙连接或半通道阻断肽或拟肽，例如包括包含眼内的间隙连接的蛋白质的细胞外结构域、跨膜区或连接蛋白羧基末端肽的经修饰的或未经修饰的肽或拟肽，所述间隙连接包括cx43、cx26、cx30、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx45、cx50和cx57。抗间隙连接或半通道阻断肽或拟肽可以是经修饰的或未经修饰的。抗间隙连接或半通道阻断肽或拟肽是化学、合成制备的或以其他方式制造的。在一些实施例中，间隙连接调节剂是cx43、cx26、cx30、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx45、cx50和cx57肽或拟肽。使用本发明的一种或多种药物组合物，例如抗连接蛋白odn和间隙连接调节剂例如连接蛋白半通道阻滞剂例如肽或拟肽，或第一抗连接蛋白试剂和第二抗连接蛋白试剂来治疗受试者的本文描述的眼部状况中的任何，例如如本文提及的青光眼、dme、眼纤维化、amd或其他眼部病症可包含它们的同时、分开、序贯或持续施用。在本发明的一些方面，调节剂是间隙连接关闭或阻断化合物或者半通道关闭或阻断化合物，例如托那博沙。在一些实施例中，间隙连接调节剂可以是小分子，其在本文中也可称为抗连接蛋白或连接蛋白调节剂。在一些方面，抗连接蛋白调节剂药物可具有式i中的结构：其中y是c—r1；r1是乙酰基；r2是氢、c3-8环烷基、任选被氧中断或被羟基取代的c1-6烷基、c1-6烷氧基或取代的氨基羰基、c1-6烷基羰基、c1-6烷氧基羰基、c1-6烷基羰基氧基、c1-6烷氧基、硝基、氰基、卤素、三氟甲基或cf3s；或基团cf3-a-，其中a是—cf2—、—co—、—ch2—、ch(oh)、so2、so、ch2—o或conh；或基团cf2h-a′-，其中a′是氧、硫、so、so2、cf2或cfh；三氟甲氧基，c1-6烷基亚磺酰基，全氟c2-6烷基磺酰基，c1-6烷基磺酰基，c1-6烷氧基亚磺酰基，c1-6烷氧基磺酰基，芳基，杂芳基，芳基羰基，杂芳基羰基，膦酰基，芳基羰基氧基，杂芳基羰基氧基，芳基亚磺酰基，杂芳基亚磺酰基，芳基磺酰基或杂芳基磺酰基(其中任何芳香族部分任选被取代)，c1-6烷基羰基氨基，c1-6烷氧基羰基氨基，c1-6烷基硫代羰基，c1-6烷氧基-硫代羰基，c1-6烷基-硫代羰基氧基，1-巯基c2-7烷基，甲酰基或氨基亚磺酰基，氨基磺酰基或氨基羰基(其中任何氨基部分任选地被一个或两个c1-6烷基取代)，或c1-6烷基亚磺酰基氨基，c1-6烷基磺酰基氨基，c1-6烷氧基亚磺酰基氨基或c1-6烷氧基磺酰基氨基，或者被c1-6烷基羰基、硝基或氰基末端取代的亚乙基，或—c(c1-6烷基)noh或—c(c1-6烷基)nnh2；或任选被一个或两个c1-6烷基或c2-7烷酰基取代的氨基；r3和r4之一是氢或c1-4烷基，并且另一个是c1-4烷基、cf3或ch2xa是氟、氯、溴、碘、c1-4烷氧基、羟基、c1-4烷基羰基氧基、—s—c1-4烷基、硝基、任选被一个或两个c1-4烷基取代的氨基、氰基或c1-4烷氧基羰基；或r3和r4一起是任选被c1-4烷基取代的c2-5聚亚甲基；r5是c1-6烷基羰基氧基、苯甲酰氧基、ono2、苄氧基、苯氧基或c1-6烷氧基，并且r6和r9是氢或r5是羟基，并且r6是氢或c1-2烷基，并且r9是氢；r7是杂芳基或苯基，这两个基团任选独立地被选自氯、氟、溴、碘、硝基、任选被c1-4烷基取代一次或两次的氨基、氰基、叠氮基、c1-4烷氧基、三氟甲氧基和三氟甲基的基团或原子取代一次或多次；r8是氢、c1-6烷基、or11或nhcor10，其中r11是氢、c1-6烷基、甲酰基、c1-6烷酰基、芳酰基或芳基-c1-6烷基，并且r10是氢、c1-6烷基、c1-6烷氧基、单或二c1-6烷基氨基、氨基、氨基-c1-6烷基、羟基-c1-6烷基、卤代-c1-6烷基、c1-6酰氧基-c1-6烷基、c1-6烷氧基羰基-c1-6烷基、芳基或杂芳基；r8—n—co—r7对于r5基团是顺式的；并且x是氧或nr12，其中r12是氢或c1-6烷基。对于上文阐述的马库什组中的任何，在一些实施例中，每个组可包括或排除对于该组列出的种类中的任何。在一些实施例中，小分子连接蛋白调节剂可以是托那博沙、卡拉博沙或sb-204269。sb-204269也称为(反式-(+)-6-乙酰基-4s-(4-氟苯甲酰氨基)-3,4-二氢-2,2-二甲基-2h-苯并[b]吡喃-3r-醇)。卡拉博沙也称为n-[(3r,4s)-6-乙酰基-3-羟基-2,2-二甲基-3,4-二氢-2h-色烯-4-基]-4-氟苯甲酰胺。托那博沙也称为n-(6-乙酰基-3-羟基-2,2-二甲基-3,4-二氢-2h-色烯-4-基)-3-氯-4-氟苯甲酰胺。对于上文阐述的马库什组中的任何，该组可包括或排除对于该组列出的种类中的任何。在一些实施例中，连接蛋白调节剂可以是用于本发明中的任何化合物的前药。在一个方面，本发明的连接蛋白调节剂前药可以是式ii化合物：其中q是o或肟，r2是h，a是直接键、-c(o)o*-、-c(r3)(r4)o*-、-c(o)o-c(r3)(r4)o*-、或-c(r3)(r4)oc(o)o*-，其中标记*的原子直接连接到r1、r3和r4，独立地选自h、氟、c1-4烷基或c1-4氟烷基，或r3和r4连同它们与之附着的原子一起形成环丙基，r1选自组[1]、[2]、[2a]、[3]、[4]、[5]或[6]，其中标记**的原子直接连接到a：r5和r6各自独立地选自h、c1-4烷基、c1-4氟烷基或苄基；r7独立地选自h、c1-4烷基或c1-4氟烷基；r8选自：(i)h、c1-4烷基或c1-4氟烷基，或(ii)天然或非天然α-氨基酸的侧链，或如本文所述的肽，或(iii)生物素或与生物素化学连接；r9选自h、-n(r)(r12)、或–n+(rl)(r12)(r13)x-、或-n(rll)c(o)r14，其中r11、r12和r13独立地选自h、c1-4烷基或c1-4氟烷基，r14是h、c1-4烷基或c1-4氟烷基，r10和r15独立地选自c1-4烷基或c1-4氟烷基，x是药学上可接受的阴离子。在一些方面，r2是b-r21，其中b是直接键、-c(o)o*-、-c(r23)(r24)o*、c(o)oc(r23)(r24)*或c(r23)(r24)oc(o)o*，其中标记*的原子直接连接至r21，r23和r24独立地选自h、氟、c1-4烷基或c1-4氟烷基，r21选自组[21]、[22]、[22a]、[23]、[24]、[25]和[26]，其中标记**的原子直接连接至b：r25和r26各自独立地选自h、c1-4烷基、c1-4氟烷基或苄基；r27独立地选自h、c1-4烷基或c1-4氟烷基；r28选自：(i)h、c1-4烷基或c1-4氟烷基，或(ii)天然或非天然α-氨基酸的侧链，或如本文所述的肽，或(iii)生物素或与生物素化学连接；r29选自h、-n(r31)(r32)、或-n*(r31)(r32)(r33)x-、或-n(r31)c(o)r34，其中r31、r32和r33独立地选自h、c1-4烷基或c1-4氟烷基，r34是h、c1-4烷基或c1-4氟烷基，x是药学上可接受的阴离子，r30和r35独立地是c1-4烷基或c1-4氟烷基。对于上文阐述的马库什组中的任何，该组可包括或排除对于该组列出的种类中的任何。在一些方面，如本文所述的肽可以是连接蛋白调节剂、钙调蛋白调节剂或泛连接蛋白调节剂。在一些方面，q是式＝nhor43的肟，其中r43(i)选自h、c1-4氟烷基或任选取代的c1-4烷基，或(ii)是-a300-r300，其中a300是直接键、-c(o)o*-、-c(r3)(r4)o*-、-c(o)o-c(r3)(r4)o*-或-c(r3)(r4)oc(o)o*-，其中标记*的原子直接连接至r30，r3和r4独立地选自h、氟、c1-4烷基或c1-4氟烷基，或r3和r4连同它们与之附着的原子一起形成环丙基，r300选自组[1]、[2]、[2a]、[3]、[4]、[5]或[6]，其中标记**的原子直接连接至a300：r5和r6各自独立地选自h、c1-4烷基、c1-4氟烷基或苄基；r7独立地选自h、c1-4烷基或c1-4氟烷基；r8选自：(iii)h、c1-4烷基或c1-4氟烷基，或(iv)天然或非天然α-氨基酸的侧链，或如本文所述的肽，或(v)生物素或与生物素化学连接；r9选自h、-n(r)(r12)、或–n+(rl1)(r12)(r13)x-、或-n(rll)c(o)r14，其中r11、r12和r13独立地选自h、c1-4烷基或c1-4氟烷基，r14是h、c1-4烷基或c1-4氟烷基，r10和r15独立地选自c1-4烷基或c1-4氟烷基，x是药学上可接受的阴离子。在一个实施例中，r43是任选被磷酸基(p(o)or61r62)取代的c1-4烷基。在这样的实施例的例子中，or43是-och2p(o)or61or62，其中r61和r62独立地是h或c1-4烷基。在另一个实施例中，r43是具有结构c(o)ch(r100)nh2的氨基酸衍生物，其中基团r100是天然或非天然氨基酸的侧链或如本文所述的肽。在一个实施例中，or43是-oc(o)ch(ch(ch3)2)nh2。对于上文阐述的马库什组中的任何，在一些实施例中，每个组可包括或排除对于该组列出的种类中的任何。在一些方面，如本文所述的肽可以是本文公开的肽或拟肽调节剂中的任何，例如肽或拟肽连接蛋白调节剂或泛连接蛋白调节剂。在一些方面，肽连接蛋白调节剂可以是seqidno:140-200、237-313和343-356中的任一个。本文所述的组合物可用于眼部状况，包括或排除本文所述的那些。在一些方面，前药可以是wo2014/006407中描述的那些，并且以引用的方式并入本文。在一些方面，连接蛋白调节剂的前体部分(promoeity)可包含靶向眼的一个或多个区域或结构的伴侣蛋白部分。前体部分可以是本公开内容的任何拟肽或肽拮抗剂。在一些实施例中，前体部分可以是任选在其官能团上受保护的单个氨基酸。在一些实施例中，前体部分可以是靶向种类。在一些方面，前体部分可以是细胞膜上的流入或流出转运蛋白的底物。前体部分可以是例如化学连接的生物素。前体部分可以是例如化学连接的d-丝氨酸。在本发明方法的一个方面，如本文所述的一种或多种间隙连接调节剂、一种或多种泛连接蛋白通道调节剂、一种或多种半通道调节剂、一种或多种连接蛋白调节剂、或者一种或多种泛连接蛋白调节剂可与用于治疗眼部病症(包括例如青光眼、眼部纤维化、眼部缺氧、amd、dme、眼部缺氧和/或眼的神经性病症)的一种或多种眼部治疗试剂组合施用。在本发明的一些方面，施用用于治疗眼部病症例如湿性或干性amd，神经性眼部病症例如视网膜神经节细胞的眼内丧失、青光眼性眼部神经病变和/或眼内压相关的神经病变的一种或多种连接蛋白调节剂或泛连接蛋白调节剂，可与眼部治疗试剂一起施用。在一些实施例中，一种或多种间隙连接调节剂、一种或多种泛连接蛋白通道调节剂、一种或多种半通道调节剂、一种或多种连接蛋白调节剂、或者一种或多种泛连接蛋白调节剂可在制剂中共施用，所述制剂包含一种或多种间隙连接调节剂、一种或多种泛连接蛋白通道调节剂、一种或多种半通道调节剂、一种或多种连接蛋白调节剂、或者一种或多种泛连接蛋白调节剂和眼部治疗试剂。用于与本发明的一种或多种间隙连接调节剂、一种或多种泛连接蛋白通道调节剂、一种或多种半通道调节剂、一种或多种连接蛋白调节剂、或者一种或多种泛连接蛋白调节剂组合使用的眼部治疗试剂包括，例如抗vegf调节试剂例如vegf拮抗剂、mtor抑制剂、pdgf调节剂例如pdgf拮抗剂、s1p生产抑制剂、角鲨胺、pedf产生剂、微管蛋白结合剂、整联蛋白抑制剂或可用于治疗例如新生血管形成amd或湿性amd的其他治疗试剂。优选地，用于与本发明的调节剂中的一种或多种组合使用的眼部治疗试剂是pdgf调节剂。在一些方面，调节剂可包括或排除前述中的任何。在一些方面，vegf调节剂可以是抑制和/或阻断vegf或抑制和/或阻断vegf的上游激动剂的拮抗剂。在一些方面，vegf拮抗剂包括例如结合并抑制vegf的拮抗剂，抑制vegf表达的化合物，和/或包含vegf抑制剂或者编码阻断或抑制vegf的蛋白质或反义多核苷酸的病毒载体。在一些方面，抑制vegf和/或vegf的上游激动剂的种类可以是抗体或抗体片段、纳米抗体、肽或拟肽、受体片段、重组融合蛋白、适体、小分子或单链可变片段(scfv)。在一些方面，vegf拮抗剂抗体可以是例如lucentistm(雷珠单抗)和/或avastintm(贝伐珠单抗(bivacizumab))。细胞中增加的mtor活性可导致vegf和pdgf的分泌，其通过增加血管细胞中的mtor活性来促进血管生成。在本发明的一些方面，vegf调节剂减少vegf-r或mtor的活性，由此减少血管生成。在一些方面，抑制和/或阻断vegf结合配偶体的上游激动剂并抑制vegf的vegf拮抗剂可以是rtp801抑制剂或redd1阻滞剂。另外，细胞中增加的mtor活性可导致vegf和pdgf的分泌，其通过增加血管细胞中的mtor活性来促进血管生成。因此，在一些方面，vegf调节剂可以是mtor抑制剂，例如大环内酯或小分子。用于与本发明的一种或多种间隙连接调节剂、一种或多种泛连接蛋白通道调节剂、一种或多种半通道调节剂、一种或多种连接蛋白调节剂、或者一种或多种泛连接蛋白调节剂组合使用的眼部治疗试剂还包括，例如补体调节剂和可用于例如治疗地图状萎缩、干性amd、非渗出性amd和/或玻璃疣发展的其他治疗试剂。补体调节剂可以是例如补体抑素(compstatin)、tp10、依库珠单抗、arc1905、jpe-1375、pmx53、拉姆帕力珠单抗(lampalizumab)或rhcfhp。在一些方面，用于与本发明的一种或多种间隙连接调节剂、一种或多种泛连接蛋白通道调节剂、一种或多种半通道调节剂、一种或多种连接蛋白调节剂、或者一种或多种泛连接蛋白调节剂组合使用的眼部治疗试剂可包括tnf-α抑制剂、c-raf激酶抑制剂、nsaid或nachr抑制剂。在本发明的施用、共施用、组合物、试剂盒或治疗方法的任何中使用的抗连接蛋白调节剂可以是cx43调节剂，cx45调节剂，cx26、cx30、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx50和cx57的调节剂，或眼部(或其他)血管中存在的任何连接蛋白的调节剂。可用于治疗眼部病症例如青光眼和/或视网膜灌注损伤、湿性和/或干性amd、或本文提及的任何其他眼部病症的眼部治疗试剂可以是例如α2激动剂例如溴莫尼定、碳酸酐酶抑制剂、β阻滞剂、f2α前列腺素类似物、抗凋亡剂、n-甲基-d-天冬氨酸(nmda)受体拮抗剂、rho激酶抑制剂或谷氨酸盐释放抑制剂。眼部治疗试剂还可以是组合疗法，其包括施用两种或更多种眼部治疗试剂，例如可包括或排除β阻滞剂和碳酸酐酶抑制剂，例如噻吗洛尔和曲伏前列素或噻吗洛尔和多佐胺，α2激动剂和β阻滞剂例如溴莫尼定和噻吗洛尔的组合，或α2激动剂和碳酸酐酶抑制剂例如布林佐胺和溴莫尼定的组合。在一些方面，眼部治疗试剂可包括或排除rho激酶抑制剂。在其他方面，眼部治疗试剂可以是腺苷模拟物。其他眼部治疗试剂可包括神经营养素，例如睫状神经营养因子或神经生长因子。在一些方面，眼部治疗试剂可包括或排除下述的一种或多种：阿柏西普、拉姆帕力珠单抗、松昔珠单抗(sonepcizumab)、芬维a胺、雷珠单抗(例如lucentistm)、贝伐珠单抗(例如avastintm)、蛋白质睫状神经营养因子、血管内皮生长因子调节化合物和低氧诱导因子1-α调节化合物、及其任何混合物。在一个方面，单独或与一种或多种眼部治疗试剂组合施用的间隙连接调节剂、泛连接蛋白通道调节剂、半通道调节剂、连接蛋白调节剂或泛连接蛋白调节剂可以是经修饰的或未经修饰的。在本发明的一些方面，经修饰的连接蛋白或者泛连接蛋白调节剂可包含经修饰的和未经修饰的部分，例如经修饰的和未经修饰的核苷酸或经修饰的和未经修饰的氨基酸。在一些方面，连接蛋白或其他调节剂可以是例如如本文所述的经修饰的寡核苷酸、经修饰的多核苷酸或经修饰的肽或拟肽。在一些方面，连接蛋白调节剂可在一种或多种眼部治疗试剂之前、与一种或多种眼部治疗试剂一起或在一种或多种眼部治疗试剂之后，或者在与一种或多种眼部治疗试剂相同或平行的施用时间表上，或者在与一种或多种眼部治疗试剂相同的制剂中共施用。在一些方面，泛连接蛋白或其他调节剂可以是例如如本文所述的经修饰的寡核苷酸、经修饰的多核苷酸或者经修饰的肽或拟肽。在一些方面，泛连接蛋白或其他调节剂可在一种或多种眼部神经性治疗之前、与一种或多种眼部神经性治疗一起或者在一种或多种眼部神经性治疗之后，或者在与一种或多种眼部神经性治疗相同或平行的施用时间表上共施用。在一些方面，泛连接蛋白或其他调节剂可以是例如如本文所述的经修饰的寡核苷酸、经修饰的多核苷酸或者经修饰的肽或拟肽。在一些方面，泛连接蛋白或其他调节剂可在一种或多种眼部神经性治疗之前、与一种或多种眼部神经性治疗一起或者在一种或多种眼部神经性治疗之后，或者在与一种或多种眼部神经性治疗相同或平行的施用时间表上共施用。在本发明方法的一些方面，可施用如本文所述的两种或更多种间隙连接调节剂，半通道调节剂，或例如两种或更多种连接蛋白调节剂，其可以是相同或不同类型的调节剂，例如两种或更多种多核苷酸、两种或更多种肽或拟肽化合物、或者两种或更多种化合物。例如，在本发明方法的一些方面，可施用如本文所述的两种或更多种cx43调节剂，其可以是相同或不同类型的调节剂，例如两种或更多种多核苷酸、两种或更多种肽或拟肽化合物、或者两种或更多种化合物。在一些实施例中，例如，一种或多种cx43多核苷酸可与一种或多种cx43肽或拟肽和/或一种或多种抗连接蛋白化合物或其任何亚组合共施用。在一些方面，本发明的方法可包括施用连接蛋白反义多核苷酸以瞬时调节间隙连接通道：通过调节蛋白质表达，并且还包括施用连接蛋白肽或拟肽以直接和更立即地调节间隙连接通道功能。例如，本发明的方法可包括施用cx43反义多核苷酸以瞬时调节间隙连接通道：通过调节蛋白质表达，并且还包括施用cx43肽或拟肽以直接调节间隙连接通道功能。调节剂还可靶向相同或不同的蛋白质，例如cx43、cx45和/或泛连接蛋白。连接蛋白调节剂和/或阻滞剂、泛连接蛋白调节剂和/或阻滞剂、间隙连接调节剂、半通道调节剂和/或阻滞剂可以是经修饰的或未经修饰的。在本发明方法的一些方面，如本文所述的一种或多种间隙连接和/或连接蛋白调节剂可与泛连接蛋白调节剂一起施用，所述泛连接蛋白调节剂可以是相同或不同类型的调节剂，例如两种或更多种多核苷酸、两种或更多种肽或拟肽化合物、或者两种或更多种化合物。在一些方面，连接蛋白调节剂是cx43调节剂。在本发明方法的一些方面，可施用如本文所述的两种或更多种泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂，其可以是相同或不同类型的调节剂，例如两种或更多种多核苷酸、两种或更多种肽或拟肽化合物、或者两种或更多种化合物。如本文进一步描述的，经修饰的寡核苷酸还包含下述选择组分中的一种或多种：经修饰的核苷间键例如硫代磷酸酯键，以及经修饰的糖部分例如构象应变的糖，例如lna或bna。在本发明的一些方面，本发明的连接蛋白调节剂(例如，cx26、cx30、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx43、cx45、cx50或cx57调节剂)或泛连接蛋白调节剂与药学上可接受的载体或稀释剂组合，以产生药物组合物。在一些方面，合适的载体和稀释剂包括缓冲的水性溶液、等渗盐水溶液例如磷酸盐缓冲盐水、等渗水等等。在另一个方面，p2x7受体拮抗剂单独或连同间隙连接调节剂，泛连接蛋白通道调节剂、半通道调节剂、连接蛋白调节剂和/或泛连接蛋白调节剂一起施用，以治疗本文提及的疾病、病症和状况。p2x7拮抗剂包括nf279苏拉明类似物)、卡米达佐(钙调蛋白拮抗剂)、kn-62(cam激酶ii拮抗剂)、锌、钙、镁和铜。不同的优选实施例包括使用单独或连同阻断或改善或以另外方式拮抗或抑制泛连接蛋白通道开放的小分子一起的阻断或改善或以另外方式拮抗或抑制半通道开放的小分子，以治疗本文提及的疾病、病症和状况。在不同的优选实施例中，阻断或改善或抑制半通道开放的小分子是托那博沙或其类似物，或任一的前药。在不同实施例中，阻断或改善或抑制泛连接蛋白通道开放的小分子是丙磺舒或其类似物，或任一的前药。在不同的优选实施例中，所述疾病、病症或状况是眼部新生血管性疾病、眼部水肿、眼部微血管病症和糖尿病性眼部疾病。在某些实施例中，所述疾病、病症或状况是糖尿病视网膜病变、缺血性视网膜病变、脉络膜新生血管形成、虹膜新生血管形成、角膜新生血管形成、视网膜新生血管形成、眼内新生血管形成、湿性年龄相关性黄斑变性、干性年龄相关性黄斑变性、眼部地图状萎缩、糖尿病性黄斑水肿、糖尿病视网膜病变、糖尿病性视网膜缺血、增生性糖尿病视网膜病变、coates病、视网膜中央静脉阻塞(crvo)、分支性视网膜中央静脉阻塞(brvo)、早产儿视网膜病变(rop)、结膜下出血和高血压性视网膜病变、葡萄膜炎或白内障。在其他优选实施例中，所述疾病、病症或状况是青光眼，包括开角型青光眼、闭角型青光眼和正常眼压型青光眼，以及开角型和闭角型青光眼的变体，例如继发性青光眼、色素性青光眼、假性剥脱性青光眼、创伤性青光眼、新生血管性青光眼和虹膜角膜内皮综合征(ice)和新生血管性青光眼。在另一个优选实施例中，所述疾病、病症或状况是干眼病。在另一个实施例中，所述疾病、病症或状况是眼部和角膜持续性上皮缺损。在另外其他优选实施例中，所述疾病、病症或状况是慢性皮肤伤口、溃疡或溃疡性病灶，包括糖尿病足溃疡、静脉性腿部溃疡和压力性溃疡。在另一个优选实施例中，所述疾病、病症或状况是cns创伤，包括脊髓损伤和视神经损伤。本发明的特征还在于用于治疗诊断有新生血管性病症或处于发展新生血管性病症风险中的患者的方法，其中除单独或连同阻断或改善或以其他方式拮抗或抑制泛连接蛋白通道开放的小分子一起施用阻断或改善或以其他方式拮抗或抑制半通道开放的小分子之外，该方法还包括对患者施用抗vegf试剂和/或抗pdgf试剂作为治疗性治疗。在一个方面，将pdgf拮抗剂和/或vegf拮抗剂与半通道拮抗剂和/或泛连接蛋白通道拮抗剂施用同时或在施用约1至5、10或90天内施用于患者，其量足以抑制患者的新生血管性病症。在本发明方法的一个特定实施例中，pdgf拮抗剂和/或vegf拮抗剂与半通道拮抗剂或抑制剂和/或泛连接蛋白通道拮抗剂或抑制剂同时施用。在一个实施例中，pdgf拮抗剂是pdgf-b拮抗剂。在另一个实施例中，vegf拮抗剂是vegf-a拮抗剂。在某些实施例中，pdgf拮抗剂是核酸分子、适体、反义rna分子、核酶、rnai分子、蛋白质、肽、环肽、抗体、抗体片段的结合片段、糖、聚合物或小分子。在另一个实施例中，vegf拮抗剂是核酸分子、适体、反义rna分子、核酶、rnai分子、蛋白质、肽、环肽、抗体、抗体片段的结合片段、糖、聚合物或小分子。在一个特定实施例中，本发明的这种方法涉及施用其为适体的vegf拮抗剂，例如eye001适体。在另一个实施例中，本发明的这种方法涉及施用其为抗体或其结合片段的vegf拮抗剂，例如(贝伐珠单抗)或(雷珠单抗)。在一个特定实施例中，本发明的这种方法涉及施用其为适体、抗体或其结合片段的pdgf拮抗剂。在另一个特定实施例中，本发明的这种方法包括施用其为反义寡核苷酸的pdgf拮抗剂。在本发明该方面的另外一个实施例中，pdgf拮抗剂和/或vegf拮抗剂是前药。在另一个实施例中，本发明的这种方法提供了用于抑制或治疗眼部新生血管性病症的方法。在一些实施例中，顺应通过本发明的方法治疗或抑制的眼部新生血管性病症包括缺血性视网膜病变、虹膜新生血管形成、眼内新生血管形成、年龄相关性黄斑变性、角膜新生血管形成、视网膜新生血管形成、脉络膜新生血管形成、糖尿病性视网膜缺血或增生性糖尿病视网膜病变。在另外一个实施例中，本发明的方法提供了用于在有此需要的患者或者诊断有这种病症或处于发展这种病症的风险中的患者中抑制或治疗银屑病或类风湿性关节炎的方法。本发明还提供了药物组合物，所述药物组合物包括pdgf拮抗剂和/或vegf拮抗剂以及药学上可接受的载体，连同阻断或改善或以其他方式拮抗或抑制半通道开放的一种或多种小分子，单独或连同阻断或改善或以其他方式拮抗或抑制泛连接蛋白通道开放的小分子一起。在这方面，pdgf和/或vegf拮抗剂以足以抑制患者的新生血管性病症的量存在。本发明的这种药物组合物可包括药学上可接受的载体，其包括微球、纳米颗粒或水凝胶制剂。本发明该方面的另一个实施例提供了药物包装，所述药物包装包括pdgf拮抗剂和/或vegf拮抗剂，连同阻断或改善或以其他方式拮抗或抑制半通道开放的小分子，单独或连同阻断或改善或以其他方式拮抗或抑制泛连接蛋白通道开放的小分子一起。在该方面的一个实施例中，药物包装包括其为pdgf-b拮抗剂的pdgf拮抗剂。在该方面的另一个实施例中，药物包装包括其为vegf-a拮抗剂的vegf拮抗剂。在另一个实施例中，药物包装的pdgf拮抗剂和vegf拮抗剂分开和以单独剂量的量配制。在另外一个实施例中，药物包装的pdgf拮抗剂和vegf拮抗剂一起配制。可见抗vegf试剂和/或抗pdgf试剂的组合还可提供用于治疗眼部新生血管性疾病的令人惊讶的协同治疗益处。附图说明图1.使用扩散到附近hcmvec细胞的萤光黄作为间隙连接偶联水平的指示的刮痕负载研究。在无处理的臂中，染料容易扩散到附近细胞。在100μm的较低剂量下的肽5对偶联具有很少的作用，但在较高的500μm剂量下，存在扩散的立即减少。随着时间过去，到两小时，两种肽浓度均显示间隙连接解偶联。右图显示了比较肽5阻断功效(立即阻断，500μm)与非特异性间隙连接通道阻滞剂甘珀酸的相似实验的定量。图2.在用50μm托那博沙处理不同时间段的hcmvec细胞中的刮痕负载染料扩散的定量。托那博沙具有一定的立即通道阻断效应，并且其功效随者时间过去增加。*＝p<0.05，**＝p<0.001，***＝p<0.001。图3.托那博沙以剂量依赖性方式在apre-19细胞中击倒cx43。在对照培养基中以及在用以50和100微摩尔浓度的托那博沙预温育6小时后的arpe-19细胞。细胞已就连接蛋白43进行标记。在对照细胞中，间隙连接清楚地定位在细胞-细胞界面处，但在用50微摩尔托那博沙6小时后，大部分连接已被内化或丧失。在较高的100微摩尔托那博沙中6小时，非常少的连接蛋白43标记保留。图4.在arpe-19细胞中的间隙连接蛋白连接蛋白43的dapi(核染色)和标记(左图)以及匹配的仅连接蛋白43标记(右图)。在未经处理的细胞中，间隙连接标记主要在细胞-细胞界面处(上图)。在用肽5(500μm)处理一小时的细胞中，细胞-细胞界面仍然是明显的，但大部分间隙连接已被内化(下图)。图5.在连接蛋白43转染的hela细胞(顶部迹线)和连接蛋白空hela细胞(底部迹线)中的电生理记录。随着电压阶跃升高，在经转染的细胞中观察到增加的通道活性，但不存在于连接蛋白空细胞中。在经转染的细胞中的这种通道活性因此是connexin43半通道开放的结果。图6.来自已用非特异性通道阻滞剂甘珀酸和lacl3以及肽5(100μm)处理的连接蛋白43转染的hela细胞的电生理迹线。非特异性通道阻滞剂显示几乎完全的半通道阻断(与图7中未经处理的hela细胞相比较)，其中剩余少量通道活性。肽5也显示显著的半通道阻断。图7.电生理迹线形成与图5和6中所示的那些等价的实验。在这种情况下，在添加托那博沙(50μm)之前(上图)、在与托那博沙温育期间(中图)、以及在洗出三分钟后(下图)，显示hcmvec细胞。结果证明托那博沙几乎完全消除半通道活性，具有洗出后活性恢复的征兆，指示托那博沙是非常有效和直接的半通道阻滞剂。图8.托那博沙抑制来自受损的hcmvec细胞的半通道介导的atp释放。a.在体外暴露于损伤2小时后从hcmvec细胞释放的atp。总细胞外atp释放的定量呈现为关于每个处理组的损伤对照的百分比。与损伤对照相比较，在所有处理组中存在atp的显著减少：100μmcbx、100μm肽5和1mm丙磺舒、以及与1mm丙磺舒组合的100μm肽5；后面一个组合使总atp释放降低至与cbx相同的水平。b.总细胞外atp释放的定量呈现为关于每个处理组的损伤对照的百分比。与损伤对照相比较，在所有处理组中存在atp的显著减少：100μmcbx、与1mm丙磺舒组合的0.1μm至100μm托那博沙。c.在该实验中，在不存在1mm丙磺舒的情况下，托那博沙不减少来自hcmvec细胞的atp释放(p>0.09)单因素anova，tukey多重比较检验。值代表平均值±标准误。针对损伤对照***p<0.001。图9.缺氧再灌注：在2小时暴露于损伤，然后2小时暴露于体外再灌注之后，从亚汇合hcmvec细胞释放的atp。将atp定量为损伤-再灌注(ir)对照的百分比。使用100μmcbx、100μm肽5、以及100μm肽5和1mm丙磺舒，而不是使用单独的1mm丙磺舒观察到atp的显著减少。用10μm托那博沙也观察到atp的显著减少。值代表平均值±标准误。单因素anovatukey多重比较检验，针对ir对照*p<0.05。图10.用托那博沙的1小时处理经由arpe-19细胞中的溶酶体降解途径下调cx43gj噬斑。a.cx43在血清补充的培养基中的100μm托那博沙(上)和100μm托那博沙+nh4cl中免疫标记1小时(n＝3个孔，2次独立实验)。b.用托那博沙(5-500μm)处理1小时后，cx43噬斑总面积/细胞的定量。c.用托那博沙(50-500μm)与nh4cl处理6小时后，cx43噬斑总面积/细胞的定量。b和c针对未经处理的对照进行标准化。显著性差异表示为***p<.0001。条代表平均值±s.e.m和之间的差异。比例尺＝30μm。图11.托那博沙内化并且下调arpe-19细胞中的cx43gj噬斑。a.cx43在血清补充的培养基中的未经处理的对照(上)、100μm托那博沙(下)中免疫标记1小时(n＝3个孔，2次独立实验)。b.用托那博沙(5-500μm)处理1小时后，cx43噬斑总面积/细胞的定量。c.用托那博沙(5-500μm)处理6小时后，cx43噬斑总面积/细胞的定量。b和c针对未经处理的对照进行标准化。条代表平均值±s.e.m，并且显著性差异代表***p<.0001。统计检验单因素anova，比例尺＝30μm。图12.用托那博沙的6小时处理经由arpe-19细胞中的溶酶体降解途径下调cx43gj斑块。a.cx43在血清补充的培养基中的100μm托那博沙(上)和100μm托那博沙+nh4cl中免疫标记6小时(n＝3个孔，2次独立实验)。b.用托那博沙(5-500μm)处理1小时后，cx43噬斑总面积/细胞的定量。c.用托那博沙(50-500μm)与nh4cl处理6小时后，cx43噬斑总面积/细胞的定量。b和c针对未经处理的对照进行标准化。显著性差异***p<.0001。条代表平均值±s.e.m和之间的差异。比例尺＝30μm。图13.与dmso(媒介物对照)或50μm托那博沙温育1小时的arpe-19细胞的汇合单层中的cx43mrna水平。条代表平均值±s.e.m(n＝3)。与未经处理的对照(p＝0.7572)和媒介物对照(p＝0.10245)相比较，用50μm托那博沙处理后，arpe-19细胞中的cx43mrna不存在显著差异。单因素anovatukey多重比较检验。图14.对于不同处理组，相对于对照的a.atp浓度或b.％细胞活力的比较。图15.在120mmhg下视网膜缺血60分钟后7天的视网膜神经节细胞密度。显示了关于缺血眼和对侧眼两者的结果。平均值±标准误。n＝2、6、6、6、5、4、4。nt，无处理；t，托那博沙。与正常对照(242558±15840个细胞/cm2)相比较，在无处理的缺血眼中发现rgc的统计学显著的(p<0.01)31％丧失(167111±14188个细胞/cm2，平均值±标准误)。在用10mg/kg托那博沙处理的缺血眼(158739±26370个细胞/cm2)中发现统计学显著的(p＝0.03)35％rgc丧失。然而，用1mg/kg托那博沙处理的缺血眼维持比其他组更少的细胞丧失(18％，199927±26058个细胞/cm2)。该组与正常对照之间的差异是趋势(p＝0.17)。在所有对侧眼中未发现rgc的丧失。图16.托那博沙对体外hcmvec细胞中的细胞间通讯的功能作用。a.在媒介物对照中，ly染料经由偶联的gj容易地扩散到附近细胞。立即或2小时托那博沙处理(50μm)引起ly染料转移的减少，因为gj解偶联。b.用50μm托那博沙以立即至24小时时间间隔处理的ly阳性hcmvec细胞的定量。托那博沙介导的gj解偶联随着时间过去增加。c.较低浓度的托那博沙(10μm、1μm、0.1μm)在本实验中2小时后或在d.24小时后不引起gj解偶联。条表示平均值±s.e.m(单因素anova，随后为tukey事后检验)n＝3个孔，3次独立实验。*＝p<0.05，**＝p<0.001，***＝p<0.001。图17.关于几种选择的反义寡核苷酸的转染摄取的facs数据。图18.经由共焦显微镜检查的活细胞图像显示了在huvec细胞中(转染后4小时)fam标记的seq4-pto(经修饰的)的摄取。绿色代表寡核苷酸seq1-o(fam标记的)，蓝色代表被dapi染色的细胞核。图19.绿色代表寡核苷酸seq1-o(fam标记的)，蓝色代表被dapi染色的细胞核。图20.显示了如通过qpcr测量的连接蛋白43的击倒效率。数据显示了3次重复的标准差。图21.如通过蛋白质印迹测量的连接蛋白43的击倒效率(n＝3)。数据显示了3次重复的标准差。图22a和b.分别在转染后4小时和8小时通过qpcr测量的经修饰(pto)和未经修饰的序列的击倒效率。寡核苷酸浓度：(1)＝200nm；(3/4)＝150nm；(1/2)＝100nm；c：seq1；seq4：37501；cscr：seq1错义的；lp2scr：seq4错义的；橙色条：阴性对照。(每个结果n＝3)。图23.如通过蛋白质印迹测量的击倒效率。数据显示了3次重复的标准差。如通过蛋白质印迹(n＝3)测量的击倒效率。寡核苷酸浓度：(1)＝200nm；(3/4)＝150nm；(1/2)＝100nm；c：seq1；seq4：37501；cscr：seq1错义的；lp2scr：seq4错义的；橙色条：阴性对照。图24.通过qpcr就其连接蛋白43的击倒效率分析的不同序列。cscr：seq1错义的，csen：seq1有义链，lp2scr2：seq4错义的，lp2sen：seq4有义链，47001scr2：seq5错义的，47001sen：seq5有义链，nc1：通用阴性1，nc2：通用阴性2。图25.通过蛋白质印迹就其连接蛋白43的击倒效率分析的不同序列。cscr：seq1错义的，csen：seq1有义链，lp2scr2：seq4错义的，lp2sen：seq4有义链，47001scr2：seq5错义的，47001sen：seq5有义链，nc1：通用阴性1，nc2：通用阴性2。图26.不同细胞类型中的寡核苷酸序列的cxn43击倒结果。h：人，p：猪，lp2：seq4，c：seq1，cscr：seq1错义的，csen：seq1有义链，47001scr2：seq5错义的，47001sen：seq5有义链，其他编号代表针对连接蛋白43的其他反义序列，如本文所述的。图27.关于不同寡核苷酸序列通过qpcr在huvec细胞中的剂量-应答性能。lp2：seq4，coda：seq1，47001scr2：seq5错义的，其他编号代表针对连接蛋白43的其他反义序列，如本文所述的。图28a和b.如通过qpcr测量的，通过未经修饰的序列(主链中无硫代磷酸酯键)的cxn43击倒效率。寡核苷酸浓度：(1)＝200nm；(2)＝400nm；(3)＝600nmc：seq1；seq4：37501；cscr：seq1错义的；lp2scr：seq4错义的。图29a和b.经修饰的(具有全硫代磷酸酯主链)序列的击倒效率比较。寡核苷酸浓度：(1)＝200nm；(2)＝400nm；(3)＝600nmc：seq1；seq4：37501；cscr：seq1错义的；lp2scr：seq4错义的。图30a和b.未经修饰的寡核苷酸序列的体外击倒。cscr：seq1错义的；133704：针对连接蛋白43的另一种反义寡核苷酸。图31和32.来自表4的asn的比较击倒活性。图33.候选连接蛋白43反义寡核苷酸的剂量-应答曲线。图34.缺血后的伊文思蓝染料的染料灌注，以绘制缺血再灌注后的连接蛋白43。图35.根据缺血再灌注后的时间计算的(经由imagej，如本文描述的)染料渗漏面积或连接蛋白43斑点计数。结果显示了染料渗漏的基线性能。图36.在用和不用cxn43调节试剂处理后对总染料渗漏的作用。图37.与特定核心序列的变体相比较延迟cxn43表达(y-轴)的能力。肽5＝seqidno:168，mod1＝seqidno:171，mod2＝seqidno:172，mod3＝seqidno:173，mod4＝seqidno:174，mod5＝seqidno:175，mod6＝seqidno:176。图38.在释放培养基中三天之前(小图a和b)和之后(小图c和d)的纳米颗粒(np，小图a和c)和微粒(mp，小图b和d)的sem图像。图39.来自颗粒制剂的连接蛋白43调节剂的体外释放研究(数据点表示平均值±sd，n＝3)。图40.未经修饰的(cxn43mp)和化学修饰的(c12-c12cxn43mp)连接蛋白43调节剂肽的缺血后的血管渗漏测量。图41.染色组织和斑点计数定量的代表性图像，与未经修饰的肽相比较，所述斑点计数对于化学修饰的(c12-c12cxn43mp)连接蛋白43调节肽减少更多。图42.染色组织和定量的代表性图像，涉及用于递送的纳米颗粒的制剂导致比不含纳米颗粒的制剂更低的cxn43表达。图43.染色组织和定量的代表性图像，与未经处理的眼(仅缺血)的小于70％相比较，化学修饰的肽处理导致28天后超过93％的rgc存活。图44.染色组织的代表性图像，指示位于不含amd的年轻(29岁)供体(a)和诊断有amd的老年供体(b)的脉络膜内的cxn43分布。在年轻供体中，cxn43标记(红色，在“rpe”标记下)在布鲁赫膜附近尤其致密，并且标记主要区分内皮细胞之间的间隙连接(白色箭头)。用核标记物dapi染色的细长核是内皮细胞核。比例尺表示20μm。图45.染色组织的代表性图像，指示接近死人的视网膜样品的出血，拍摄的视网膜图像中的cxn43表达谱。用dapi染色的核(蓝色)和cxn43间隙连接噬斑(红色)的合并图像。图46.染色组织的代表性图像，指示接近死人的视网膜样品的出血，拍摄的视网膜图像中的cxn43表达谱。该图显示了用dapi染色的核(蓝色)和cxn43间隙连接噬斑(红色)的合并图像。图47.指示arpe-19细胞中的cxn43表达谱的视网膜的代表性共焦显微镜图像。在暴露于天然肽8小时后(b)，arpe-19细胞中的cxn43水平略微降低，而在24小时后(c)，cxn43恢复正常(a)。与np(d)和mp(f)温育8小时后，cxn43标记中不存在显著差异，而在暴露24小时后，np(e)和mp(g)组均显示出cxn43水平的显著降低，指示持续的肽释放，并且因此用这些颗粒的更长期治疗的可能性可能减少新的间隙连接通道形成。该图显示了用dapi染色的核(蓝色)和cxn43间隙连接斑块(红色)的合并图像(比例尺表示50μm)。图48.就gfap(红色)、cxn43(绿色)和dapi(蓝色)标记的视网膜的代表性共焦显微镜图像。缺血再灌注后二十八天，cx43和gfap在未经处理的组中显著上调(b)。玻璃体内注射在溶液中的天然cxn43mp在28天后展示有限的cxn43上调(c)。np-cxn43mp处理组导致在损伤后28天cxn43上调的显著减少(d)，而mp-cxn43mp在缺血再灌注后28天(e)和90天(f)显示出类似的cxn43和gfap水平(比例尺表示50μm)。(g)不具有处理和具有处理的未受伤的对照视网膜和缺血再灌注后的平均cxn43斑点计数。星号表示每组之间的统计显著性(n＝3，平均值±sd，*p<0.05，**p<0.01)。图49.缺血再灌注后brn3a标记的rgc(红色)的平坦固定的视网膜的代表性共焦显微镜图像。rgc分布显著减少，其中在未经处理的视网膜中几乎完全丧失血管描绘(b)。用溶液中的cxn43mp和np-cxn43mp处理的眼显示出较少的rgc丧失块(c和d)。用mp处理的眼在28天(e)和90天(e)时仍显示出一定的rgc丧失。比例尺＝300lm。(g)rgc的平均密度。(h)星号表示每组之间的统计显著性(n＝6，平均值±sd，**p<0.01，*p<0.05)。具体实施方式本发明涉及间隙连接通道的调节剂，半通道的调节剂，泛连接蛋白通道的调节剂，泛连接蛋白转录、翻译、功能和/或活性的调节剂，以及连接蛋白转录、翻译、功能和/或活性的调节剂，包括小分子调节剂。调节剂可单独或组合使用以治疗如本文所述的疾病、病症或状况，包括前段、后段以及眼部血管包括视网膜、脉络膜和脉络膜毛细血管中的眼部疾病、病症或状况。托那博沙，苯甲酰氨基苯并吡喃，据报道是中枢神经系统特异性的，并且在下调连接蛋白26和/或p38表达的水平下起作用。本发明人已惊讶地鉴定，间隙连接通道调节剂例如托那博沙可调节许多不同细胞类型中的间隙连接通道和半通道的活性，所述细胞类型并不限于中枢神经系统，并且以对于特定连接蛋白(如连接蛋白26)非特异性的方式。特别地，本发明人已显示托那博沙可调节包含连接蛋白43的半通道的活性。虽然不希望受任何特定理论的束缚，但本发明人已惊讶地发现托那博沙直接作用于间隙连接通道和/或半通道，而不是通过细胞受体或通过影响连接蛋白(例如，连接蛋白26)和/或p38的表达间接起作用。如本文详细描述的，已显示间隙连接通道调节剂例如肽5在损伤期间和损伤之后，例如在缺血期间和缺氧再灌注中抑制cx43半通道活性和/或atp释放。还已显示泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒抑制损伤诱导的atp释放，例如，在缺血期间的atp释放。本发明尤其提供了(1)用于调节间隙连接通道和/或半通道的方法；(2)间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物或前药，和/或泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其任一种的类似物在制备用于调节间隙连接和/或半通道的药物中的用途；(3)用于调节间隙连接通道和/或半通道的间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物或前药，和/或泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其任一种的类似物；(4)通过施用间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物或前药，和/或泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其任一种的类似物，用于治疗其中间隙连接通道、半通道和/或泛连接蛋白通道的调节可能是有益的病症的方法；(5)间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物或前药，和/或泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其任一种的类似物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗其中间隙连接通道、半通道和/或泛连接蛋白通道的调节可能是有益的病症；和(6)用于治疗其中间隙连接通道和/或半通道的调节可能是有益的病症的间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物或前药，和/或泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其任一种的类似物。在一些实施例中，本发明涉及单独或与本公开内容的间隙连接通道调节剂组合，用于这些用途中的一种或多种的泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其任一种的类似物的用途。在某些实施例中，本发明人考虑了本发明提供下述方法中的一种或多种，所述方法包括将间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物或前药施用于受试者，和/或将单独或与间隙连接通道调节剂组合的泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其任一种的类似物施用于受试者：用于预防或减少经历外科手术的受试者中的异常或过度瘢痕形成的方法；通过切除瘢痕且然后将间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物或前药在切除部位施用于受试者，和/或将单独或与间隙连接通道调节剂组合的泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其任一种的类似物在切除部位施用于受试者，来治疗具有异常瘢痕形成的受试者的方法；间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物或前药，和/或施用单独或与间隙连接通道调节剂组合的泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其任一种的类似物在下述方法中任何中的用途：预防或减少受试者组织中的挛缩，并且由此减少纤维化的方法；用于与眼科手术相关的组织工程的方法；促进上皮细胞在眼或与眼相关的组织中的积累的方法；抑制眼或与眼相关的组织中的细胞过多的方法；用于预防、减少或减轻病灶扩散的方法；用于治疗血管渗漏或其中牵涉血管渗漏的任何病症的方法；用于治疗缺血(包括例如围产期缺血、皮肤缺血和心脏缺血)、脑中风、窒息、脑外伤、脊髓损伤、心脏病发作、炎性心脏损伤(包括例如心包炎)、再灌注损伤(包括例如手术或移植后的心脏再灌注、手术或移植后的肝再灌注)中的一种或多种的方法；用于治疗与外科手术或医学治疗(包括例如化学疗法、放射疗法、整形外科，并且例如包括与此类治疗相关的口腔炎或皮疹)相关的损伤、组织损害或炎症的方法；用于治疗表面伤口或病灶(包括例如角膜中的持续性上皮缺损、溃疡、烧伤、银屑病)的方法；用于治疗听力障碍的方法；用于治疗眼部病症(包括例如视网膜静脉或动脉阻塞、青光眼、视网膜中风、导致眼内压升高的创伤、糖尿病视网膜病变、囊样黄斑水肿、年龄相关性黄斑变性、感染、烧伤(包括例如化学和热的))的方法；用于治疗癫痫、帕金森氏病的方法；以及用于治疗创伤(包括例如与血管出血、水肿、病灶、病灶扩散和/或炎症相关的创伤)的方法。此外，本发明人考虑了本发明提供：用于预防和/或治疗纤维化或其他病症的敷料，其包含间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物或前药，和/或泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其任一种的类似物；和/或，间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物或前药，和/或施用泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其任一种的类似物在制备用于治疗如本文所述的病症的药物中的用途。在一些实施例中，本发明的特征在于使用式i化合物例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物或前药，来直接和立即阻断cx43半通道，并且引起gj偶联的浓度和时间依赖性减少。在一些方面，低浓度的式i化合物例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物或前药可用于本发明的治疗方法或用途的任何中。在一些实施例中，低剂量的式i化合物例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物或前药可在本发明的治疗方法或用途的任何中与泛连接蛋白通道调节剂组合。在一些实施例中，低剂量的式i化合物例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物或前药可与泛连接蛋白通道调节剂组合使用，例如可用作在缺血损伤期间的有效治疗、使rgc免于视网膜缺血后的损伤、或治疗视网膜缺血或眼纤维化、或在本发明的其他治疗方法或用途的任何中。通道调节剂例如，托那博沙可通过iupac名称n-[(3s,4s)-6-乙酰基-3-羟基-2,2-二甲基-3,4-二氢色烯-4-基]-3-氯-4-氟苯甲酰胺或(3s-顺式)-n-(6-乙酰基-3,4-二氢-3-羟基-2,2-(二甲基-d6)-2h-1-苯并吡喃-4-基)-3-氯-4-氟苯甲酰胺已知。在一个实施例中，托那博沙和/或其类似物或前药选自具有式i的化合物组：y是c—r1；r1是乙酰基；r2是氢、c3-8环烷基、任选被氧中断或被羟基取代的c1-6烷基、c1-6烷氧基或取代的氨基羰基、c1-6烷基羰基、c1-6烷氧基羰基、c1-6烷基羰基氧基、c1-6烷氧基、硝基、氰基、卤素、三氟甲基或cf3s；或基团cf3-a-，其中a是—cf2—、—co—、—ch2—、ch(oh)、so2、so、ch2—o—或conh；或基团cf2h-a′-，其中a′是氧、硫、so、so2、cf2或cfh；三氟甲氧基，c1-6烷基亚磺酰基，全氟c2-6烷基磺酰基，c1-6烷基磺酰基，c1-6烷氧基亚磺酰基，c1-6烷氧基磺酰基，芳基，杂芳基，芳基羰基，杂芳基羰基，膦酰基，芳基羰基氧基，杂芳基羰基氧基，芳基亚磺酰基，杂芳基亚磺酰基，芳基磺酰基或杂芳基磺酰基(其中任何芳香族部分任选被取代)，c1-6烷基羰基氨基，c1-6烷氧基羰基氨基，c1-6烷基硫代羰基，c1-6烷氧基-硫代羰基，c1-6烷基-硫代羰基氧基，1-巯基c2-7烷基，甲酰基或氨基亚磺酰基，氨基磺酰基或氨基羰基(其中任何氨基部分任选地被一个或两个c1-6烷基取代)，或c1-6烷基亚磺酰基氨基，c1-6烷基磺酰基氨基，c1-6烷氧基亚磺酰基氨基或c1-6烷氧基磺酰基氨基，或者被c1-6烷基羰基、硝基或氰基末端取代的亚乙基，或—c(c1-6烷基)noh或—c(c1-6烷基)nnh2；或任选被一个或两个c1-6烷基或c2-7烷酰基取代的氨基；r3和r4之一是氢或c1-4烷基，并且另一个是c1-4烷基、cf3或ch2xa是氟、氯、溴、碘、c1-4烷氧基、羟基、c1-4烷基羰基氧基、—s—c1-4烷基、硝基、任选被一个或两个c1-4烷基取代的氨基、氰基或c1-4烷氧基羰基；或r3和r4一起是任选被c1-4烷基取代的c2-5聚亚甲基；r5是c1-6烷基羰基氧基、苯甲酰氧基、ono2、苄氧基、苯氧基或c1-6烷氧基，并且r6和r9是氢或r5是羟基，并且r6是氢或c1-2烷基，并且r9是氢；r7是杂芳基或苯基，这两个基团任选独立地被选自氯、氟、溴、碘、硝基、任选被c1-4烷基取代一次或两次的氨基、氰基、叠氮基、c1-4烷氧基、三氟甲氧基和三氟甲基的基团或原子取代一次或多次；r8是氢、c1-6烷基、or11或nhcor10，其中r11是氢、c1-6烷基、甲酰基、c1-6烷酰基、芳酰基或芳基-c1-6烷基，并且r10是氢、c1-6烷基、c1-6烷氧基、单或二c1-6烷基氨基、氨基、氨基-c1-6烷基、羟基-c1-6烷基、卤代-c1-6烷基、c1-6酰氧基-c1-6烷基、c1-6烷氧基羰基-c1-6烷基、芳基或杂芳基；r8—n—co—r7对于r5基团是顺式的；并且x是氧或nr12，其中r12是氢或c1-6烷基。对于上文阐述的马库什组中的任何，该组可包括或排除对于该组列出的种类中的任何。托那博沙可通过iupac名称n-[(3s,4s)-6-乙酰基-3-羟基-2,2-二甲基-3,4-二氢色烯-4-基]-3-氯-4-氟苯甲酰胺或(3s-顺式)-n-(6-乙酰基-3,4-二氢-3-羟基-2,2-(二甲基-d6)-2h-1-苯并吡喃-4-基)-3-氯-4-氟苯甲酰胺已知。在实施例中，式1的类似物是化合物卡拉博沙(n-[(3r,4s)-6-乙酰基-3-羟基-2,2-二甲基-3,4-二氢色烯-4-基]-4-氟苯甲酰胺)或反式-(+)-6-乙酰基-4-(s)-(4-氟苯甲酰氨基)-3,4-二氢-2,2-二甲基-2h-苯并[b]吡喃-3r-醇，半水合物。在某些实施例中，托那博沙和/或其类似物采取游离碱或药学上可接受的盐的形式。例如，药学上可接受的盐包括盐酸盐和衍生自酸的盐，所述酸包括但不限于1-羟基-2-萘甲酸、2,2-二氯乙酸、2-羟基乙磺酸、2-氧代戊二酸、4-乙酰氨基苯甲酸、4-氨基水杨酸、乙酸、己二酸、抗坏血酸(l)、天冬氨酸(l)、苯磺酸(苯磺酸盐)、苯甲酸、樟脑酸(+)、樟脑-10-磺酸(+)、癸酸(capricacid)(癸酸(decanoicacid))、己酸(caproicacid)(己酸(hexanoicacid))、辛酸(caprylicacid)(辛酸(octanoicacid))、碳酸、肉桂酸、柠檬酸、环己烷氨基磺酸、十二烷基硫酸、乙烷-1,2-二磺酸、乙磺酸、甲酸、富马酸、半乳糖二酸、龙胆酸、葡庚糖酸(d)、葡萄糖酸(d)、葡萄糖醛酸(d)、谷氨酸、戊二酸、甘油磷酸、乙醇酸、马尿酸、氢溴酸、盐酸、异丁酸、乳酸(dl)、乳糖酸、月桂酸、马来酸、苹果酸(-l)、丙二酸、扁桃酸(dl)、甲磺酸(甲磺酸盐)、萘-1,5-二磺酸、萘-2-磺酸、烟酸、硝酸、油酸、草酸、棕榈酸、双羟萘酸、磷酸、丙酸、焦谷氨酸(-l)、水杨酸、癸二酸、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸(+l)、硫氰酸、甲苯磺酸(p)和十一碳烯酸。在一个实施例中，盐是盐酸盐。在其他实施例中，可使用托那博沙和/或其类似物的一种或多种多晶型物、一种或多种异构体和/或一种或多种溶剂化物。肽5不同小有机分子据报道具有抑制间隙连接或半通道电流的活性。它们包括三芳基甲烷(tram)、奎宁、甲氟喹、灭酸酯、2-氨基苯氧基硼酸盐和衍生物、甘草次酸和衍生物、挥发性麻醉剂例如氟烷和乙烷、亲脂性化合物例如长链醇(例如庚醇和辛醇)、脂肪酸酰胺包括油酰胺、环糊精、顺铂、聚胺和四烷基铵离子。越来越多的研究还报道了使用对应于细胞外环e1和e2(其涉及e1(gap26肽)的保守qpg和shvr基序和e2(gap27肽)中的srptek基序)以及细胞质环(gap19肽)内的特定序列的肽，抑制间隙连接通道和半通道。最有效的这种拟肽是肽5(vdcflsrptekt)(seq.idno:168)。在一些实施例中，间隙连接通道调节剂是连接蛋白肽或拟肽，有时称为抗连接蛋白肽或拟肽，例如抗连接蛋白半通道阻断肽或拟肽，例如包含连接蛋白的细胞外结构域、跨膜区和连接蛋白羧基末端肽的经修饰的或未经修饰的肽或拟肽)。抗连接蛋白半通道阻断肽或拟肽可以是经修饰的或未经修饰的。抗连接蛋白半通道阻断肽或拟肽是化学制备、合成制备或以其他方式制造的。在一些实施例中，间隙连接通道调节剂是连接蛋白43肽或拟肽。在一些方面，治疗有效的经修饰的或未经修饰的肽或拟肽包含连接蛋白，例如连接蛋白43或连接蛋白45的细胞外或跨膜结构域的一部分。在一些方面，肽或拟肽包含连接蛋白cx26、cx30、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx50、cx57或者眼或血管中的任何其他连接蛋白的细胞外或跨膜结构域的一部分。在一些实施例中，本发明的间隙连接通道调节剂包括抗连接蛋白43肽或拟肽，例如本文所述的任何肽，包括包含连接蛋白的细胞外结构域的一部分的肽，以及包含可用于本发明方法中的连接蛋白的羧基末端部分的一部分的肽，其是治疗有效的，例如，有效治愈本文所述的神经性眼部病症中的任何。在一些方面，治疗有效的经修饰的或未经修饰的肽或拟肽包含连接蛋白，例如连接蛋白43或连接蛋白45，优选连接蛋白43的细胞外结构域的一部分。肽5是已确认的间隙连接通道阻滞剂，其可以剂量依赖性方式操作，其中较低剂量阻断间隙连接半通道开放，并且较高剂量解偶联细胞之间的间隙连接。参见例如o’carroll等人，2008。随着肽5的持续低剂量应用，也存在间隙连接偶联的逐渐丧失，视为肽干扰半通道对接(与在正常周转期间现有间隙连接的逐渐去除平行)。肽5已在许多体外、离体和体内(动物)研究中证明是有效的，尤其是当以阻断半通道而不解偶联间隙连接的剂量使用时(参见例如davidson等人，2012；danesh-meyer等人，2012；o’carroll等人，2013)。o’carroll等人，2008中的结果指示肽5在低或高浓度下阻断半通道，但在高浓度下直接解偶联间隙连接。肽5数据在此处显示用于与托那博沙比较。用于泛连接蛋白调节的化合物可以是式vi化合物：其中z1和z2独立地选自：(c1-c4)烷基、卤代(c1-c4)烷基、(c1-c4)烷氧基、卤代(c1-c4)、(c1-c4)环烷基、(c1-c4)烷基-s-、(c1-c4)烷基氨基、(c1-c4)环烷基氨基、二(c1-c4)烷基氨基和氨基(c1-c4)烷基；y选自：氢、卤素、氰基、羟基、(c1-c4)烷基、卤代(c1-c4)烷基、(c1-c4)烷氧基、卤代(c1-c4)烷氧基、氰基(c1-c4)烷基、氨基、(c1-c4)烷基氨基、二(c1-c4)烷基氨基、氨基(c1-c4)烷基、(c1-c4)烷基氨基(c1-c4)烷基、二[(c1-c4)烷基]氨基(c1-c4)烷基、三氟甲硫基、羟基(c1-c4)烷基、(c1-c4)烷氧基(c1-c4)烷基、—c(o)r1、—c(o)or1、—oc(o)r1、—c(o)—n(r1)2、—ch2—c(o)r1、—ch2—c(o)or1、—ch2—oc(o)r1、—ch2—c(o)—n(r1)2、s(o)2r1、s(o)2n(r1)2、(c3-c8)环烷基、(c3-c8)环烷基(c1-c4)烷基、so3h和so4h；r1选自：氢、nh2、nr2r3、oh、—ch2oh和—ch2ch2oh；r2和r3独立地选自：氢、(c1-c4)烷基、(c1-c4)烷氧基和(c1-c4)环烷基；和卤素是氯、溴、碘或氟。例如，式vi化合物可以是如下所示的丙磺舒：丙磺舒可通过iupac名称对-[二丙基氨磺酰基]苯甲酸已知，并且具有上文所示的结构。在某些实施例中，丙磺舒和/或其类似物是非离子的，并且采取游离碱、游离酸或药学上可接受的盐的形式。例如，药学上可接受的盐包括盐酸盐和衍生自酸的盐，所述酸包括但不限于氢溴酸、磷酸、乙酸、富马酸、马来酸、水杨酸、柠檬酸、草酸、乳酸、苹果酸、甲磺酸和对甲苯磺酸，其本身的盐。在一个实施例中，盐是盐酸盐。在其他实施例中，可使用丙磺舒和/或其类似物的一种或多种多晶型物、一种或多种异构体和/或一种或多种溶剂化物。panx1在一些方面，泛连接蛋白调节剂可包括或排除泛连接蛋白肽序列。泛连接蛋白肽序列可包含多肽panx1、panx2或panx3的8-40个连续氨基酸、细胞外结构域、细胞内结构域、羧基末端部分或氨基末端部分。在一些实施例中，泛连接蛋白调节剂可包含panx1、2或3的细胞外环的一部分。在一些实施例中，例如，泛连接蛋白调节剂可包含例如panx1模拟阻断肽10panx1(wrqaafvdsy)。在一些实施例中，其为寡核苷酸或多核苷酸的泛连接蛋白调节剂可与seqidno:283(panx1多核苷酸)(panx1多核苷酸refseqidnm_015368.3)、seqidno:284(panx2多核苷酸)(关于变体1的panx2多核苷酸refseqidnm_052839.3)、seqidno:285(关于panx2多核苷酸变体2的refseqidnm_001160300.1)、seqidno:286(关于panx2多核苷酸变体3的refseqidnr_027691.1)、或seqidno:287(panx3多核苷酸)(panx3多核苷酸refseqidnm_052959.2)的8至80个核苷酸部分具有至少约80％、85％、90％、95％、97％、98％或99％同源性。在一些方面，泛连接蛋白调节剂可包括或排除泛连接蛋白肽序列。泛连接蛋白肽序列可包含多肽seqidno:288(panx1肽)、seqidno:289(panx2肽)、或seqidno:290(panx3肽)或其变体的8-40个连续氨基酸、细胞外结构域、细胞内结构域、羧基末端部分或氨基末端部分。seqidno:288(panx1)maiaqlateyvfsdfllkeptepkfkglrlelavdkmvtciavglplllislafaqeisigtqiscfspssfswrqaafvdsycwaavqqknslqsesgnlplwlhkffpyilllfaillylpplfwrfaaaphicsdlkfimeeldkvynraikaaksardldmrdgacsvpgvtenlqslwevseshfkypiveqylktkknsnnliikyiscrlltliiillaciylgyyfslsslsdefvcsiksgilrndstvpdqfqckliavgifqllsvinlvvyvllapvvvytlfvpfrqktdvlkvyeilptfdvlhfksegyndlslynlfleenisevksykclkvlenikssgqgidpmllltnlgmikmdvvdgktpmsaemreeqgnqtaelqgmnidsetkanngeknarqrlldsscseqidno:289(panx2)mhhlleqsadmatallageklrelilpgaqddkagalaalllqlklelpfdrvvtigtvlvpillvtlvftknfaeepiycytphnftrdqalyargycwtelrdalpgvdaslwpslfehkflpyallafaaimyvpalgweflastrltselnfllqeidncyhraaegrapkiekqiqskgpgiterekreiienaekekspeqnlfekylerrgrsnflaklylarhvlilllsavpisylctyyatqkqneftcalgaspdgaagagpavrvscklpsvqlqriiagvdivllcvmnliilvnlihlfifrksnfifdklhkvgiktrrqwrrsqfcdinilamfcnenrdhikslnrldfitnesdlmydnvvrqllaalaqsnhdatptvrdsgvqtvdpsanpaepdgaaeppvvkrprkkmkwiptsnplpqpfkeplaimrvenskaekpkparrktatdtliaplldrsahhykggggdpgpgpapapapppapdkkharhfsldvhpyilgtkkakaeavpaalpasrsqeggflsqaedcglglapapikdaplpekeipypteparaglpsggpfhvrsppaapavapltpaslgkaepltilsrnathpllhintlyeareeedggprlpqdvgdliaipapqqiliatfdeprtvvstvefseqidno:290(panx3)mslahtaaeymlsdallpdrrgprlkglrlelpldrivkfvavgsplllmslafaqefssgspiscfspsnfsirqaayvdsscwdsllhhkqdgpgqdkmkslwphkalpysllalallmylpvllwqyaavpalssdllfiiseldksynrsirlvqhmlkirqkssdpyvfwnelekarkeryfefpllerylackqrshslvatyllrnsllliftsatylylghfhldvffqeefscsiktgllsdethvpnlitcrltslsifqivslssvaiytilvpviiynltrlcrwdkrllsvyemlpafdllsrkmlgcpindlnvillflraniselisfswlsvlcvlkdtttqkhnidtvvdfmtllaglepskpkhltnsacdehp编码泛连接蛋白的mrna的序列如下所示。seqidno:283(panx1mrna)seqidno:284(panx2mrna，转录变体1)seqidno:285(panx2mrna，转录变体2)seqidno:286(panx2mrna，转录变体3)seqidno:287(panx3mrna)连接蛋白和泛连接蛋白是脊椎动物中的半通道形成蛋白。在一个方面，本发明涉及通过将治疗有效量的至少一种连接蛋白调节剂施用于所述受试者的眼，用于治疗眼部和其他病症例如青光眼、dme、amd、dr、眼部纤维化、眼部缺氧、视网膜灌注损伤和/或神经性眼部病症的药物组合物、制造物品和方法。在一些方面，神经性眼部病症可以是例如视网膜神经节细胞的丧失和/或青光眼性视神经病变。在一些方面，施用治疗有效量的至少一种连接蛋白调节剂对于阻止、预防或治疗视网膜神经节细胞的丧失是有效的，进一步用于增加青光眼性视神经中的神经营养素的水平并减少玻璃体谷氨酸盐浓度。大多数青光眼的主要危险因素是眼内压升高，即高眼压。眼内压是由眼的睫状突产生液体房水以及其通过小梁网的引流的功能。房水从睫状突流入后房，由晶状体和睫状小带在后限定，以及由虹膜在前限定。它随后流过虹膜的瞳孔进入前房，由虹膜在后限定以及由角膜在前限定。从这里，小梁网将房水经由schlemm氏管引流到巩膜丛和一般的血液循环内。然而，在其他青光眼患者中，可能存在正常眼压性青光眼。在开角型/宽角型青光眼中，由于小梁网的退化和阻塞，通过小梁网的流量减少，所述小梁网的原始功能是吸收房水。房水吸收的丧失导致增加的阻力，并因此导致眼中压力的慢性、无痛累积。在闭角/窄角度中，因为虹膜末卷和根部朝着角膜的向前位移，虹膜角膜角度完全关闭，导致房水不能从后房流到前房，然后流出小梁网。房水的这种积累导致压力和疼痛的急剧增加。青光眼与高眼压的不一致关系已引起了对解剖结构、眼发育、神经压迫创伤、视神经血流量、兴奋性神经递质、营养因子、视网膜神经节细胞/轴突变性、神经胶质支持细胞、免疫系统、神经元丧失的老化机制和在巩膜边缘处的神经纤维切断的研究。如本文所述，在一些实施例中，本文特征的间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂可用于治疗或预防如本文公开的眼部病症，包括例如状况例如高眼压型青光眼和正常眼压型青光眼，以及用于本文特征的其他用途，治疗或预防dme或眼部纤维化，或用于治疗从其最早阶段到其后期阶段的amd。年龄相关性黄斑变性(armd或amd)是不可逆视力损伤的另一个主要原因，并且是发达国家60岁以上的人中的视力损伤的主要原因。amd最常见地影响黄斑，这是视网膜的一个区域，其有助于精细和详细的视力(但可能不局限于黄斑)。在美国，超过50岁的人口中的七分之一显示新生血管性amd和/或地图状萎缩，其中180万公民患有amd(并且预计到2020年将上升至300万)。friedman等人(2004)prevalenceofage-relatedmaculardegenerationintheunitedstates,archophthalmol122:564-572。然而，amd的发病率随年龄急剧增加，并且超过15％的大于80岁的白人妇女患有新生血管性amd和/或地图状萎缩。全球amd成本估计为每年$345b，其中直接卫生保健成本为$255b。amd作为无令人满意的治疗选项的疾病被世界卫生组织(worldhealthorganization)包括在2010年眼疾病优先列表中。amd的病因最可能是多因素的，涉及代谢、遗传和环境因素的复杂相互作用。amd的常规理解是它影响眼中的四个功能相关层：光感受器、rpe、布鲁赫膜和脉络膜毛细血管。shelley等人(2009)conedegenerationinagingandage-relatedmaculardegeneration,archophthalmol127:483-492。研究主要集中在rpe的变性，其导致对光感受器的不可逆损伤。nowak(2006)age-relatedmaculardegeneration(amd):pathogenesisandtherapy,pharmacolrep58:353-363。伴随这种变性，沉积物(玻璃疣)可在rpe和布鲁赫膜内积累。这些沉积物可与异常的血管向内生长相关，这依次又可导致渗漏、出血和最终在黄斑处的瘢痕形成。参见dejongpt(2006)age-relatedmaculardegeneration,nengljmed355:1474-1485；finger等人(1999)ophthalmicplaqueradiotherapyforage-relatedmaculardegenerationassociatedwithsubretinalneovascularization,amjophthalmol127:170-177。在一个方面，本发明涉及例如通过将治疗有效量的至少一种连接蛋白调节剂和/或至少一种泛连接蛋白调节剂施用于所述受试者的眼，用于治疗眼部病症例如青光眼、dme、amd、dr、眼部纤维化和/或眼部缺氧和/或视网膜灌注损伤，和/或神经性眼部病症眼内压相关神经病变的药物组合物、制造物品和方法。在一个方面，本发明涉及例如用于治疗青光眼的药物组合物和方法。本文的方法提供以足以降低眼内压的量治疗眼内压相关的视神经病变如青光眼。在一些方面，连接蛋白调节剂可用于治疗与眼内压升高相关的创伤。在一些方面，连接蛋白调节剂是连接蛋白43调节剂。在一些方面，本发明的组合物和方法可用于将眼内压降低至正常水平，例如21mmhg以下，例如降低至21、20或19mmhg以下，例如降低至约8至约21mmhg之间的水平。在一个方面，本文所述的组合物、制造物品和方法可用于治疗青光眼而无毒性副作用。在一些方面，青光眼可以是开角型青光眼或闭角型青光眼。在一些方面，将治疗有效量的至少一种泛连接蛋白调节剂和/或至少一种连接蛋白调节剂，例如连接蛋白43通道调节剂施用于有此需要的眼组织增加通过小梁网的流量。间隙连接调节剂、泛连接蛋白通道调节剂和半通道调节剂也是有用的。在一些方面，本发明的组合物可用作佐剂以改善小梁切除术成功率。眼的前部填充有房水，这是向眼前部部分中的结构提供营养的清澈流体。这种流体不断地由围绕眼晶状体的睫状体产生。房水流过瞳孔并通过小梁网通道流出眼，所述小梁网通道位于角膜附着到虹膜的连接处，这被称为眼的引流角。在本发明的一些方面，将一种或多种间隙连接或连接蛋白调节剂、或泛连接蛋白调节剂例如连接蛋白43调节剂施用于小梁网或睫状体处或附近。间隙连接调节剂、泛连接蛋白通道调节剂和半通道调节剂也是有用的。在本发明一个方面，特征还在于用于治疗受试者中的视网膜灌注损伤、视网膜缺血性疾病或眼部缺血性疾病的组合物、制造物品和方法，其包括施用治疗有效量的间隙连接和/或连接蛋白调节剂、和/或泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂，有效减少内部视网膜中的炎症。在一些方面，视网膜缺血性疾病是视网膜动脉阻塞或视网膜中央静脉阻塞。在一些方面，眼部缺血性疾病是例如前部缺血性视神经病变。在一些方面，连接蛋白调节剂是cx43、cx26、cx30、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx45、cx50、cx57或者眼或血管中的任何其他连接蛋白的调节剂。在一些方面，连接蛋白调节剂是cx43调节剂，例如cx43半通道调节剂。在一些方面，调节剂可包括或排除前述中的任何。本发明的特征还在于通过例如减少受试者中的脉络膜灌注损伤和/或脉络膜炎症或脉络膜过度灌注，用于治疗眼部病症例如青光眼、amd、眼部纤维化、和/或眼部缺氧、和/或视网膜灌注损伤、和/或神经性眼部病症眼内压相关神经病变的组合物、制造物品和方法，其包括将一定量的间隙连接和/或连接蛋白调节剂和/或泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂施用于受试者的脉络膜，有效减少脉络膜灌注损伤和/或脉络膜炎症，或内部视网膜中的脉络膜过度灌注和/或炎症。在本发明的一些方面，将治疗有效量的间隙连接和/或连接蛋白调节剂施用于受试者的脉络膜，有效减少脉络膜灌注损伤和/或脉络膜炎症或脉络膜过度灌注，也减少脉络膜毛细血管内皮细胞丧失和/或脉络膜毛细血管脱落。在一些方面，减少脉络膜灌注损伤和/或脉络膜炎症或脉络膜过度灌注还减少视网膜色素上皮变性和/或玻璃疣发展，或者以其他方式改善、停止、减慢和/或逆转黄斑变性或黄斑营养不良(其可以是干性黄斑变性或湿性黄斑变性)的进展。用于减少脉络膜灌注损伤和/或脉络膜炎症或脉络膜过度灌注的连接蛋白调节剂或泛连接蛋白调节剂也可与眼部治疗试剂一起施用。在一些实施例中，用于减少脉络膜灌注损伤和/或脉络膜炎症或脉络膜过度灌注的调节剂是cx43调节剂、半通道调节剂、泛连接蛋白调节剂或泛连接蛋白通道调节剂。在本发明方法的一些方面，可通过眼内注射或玻璃体内注射将间隙连接调节剂和/或连接蛋白调节剂、或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂施用于眼。间隙连接调节剂和/或连接蛋白调节剂、泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂可施用一次或超过一次。本文的特征在于施用调节剂的其他方法。在一些实施例中，本发明的连接蛋白调节剂包括连接蛋白寡核苷酸或多核苷酸，例如连接蛋白反义寡核苷酸或多核苷酸，或连接蛋白肽或拟肽，例如连接蛋白肽或拟肽。连接蛋白肽或拟肽包含例如本文所述的任何肽，包括包含连接蛋白的细胞外结构域的一部分的肽，和包含连接蛋白的羧基末端部分的一部分的肽或间隙连接关闭化合物，以及半通道关闭化合物，其可用于本发明的方法中，例如治愈本文所述的眼部病症中的任何。在一些实施例中，本发明的连接蛋白调节剂包括连接蛋白43寡核苷酸或多核苷酸，例如连接蛋白43反义寡核苷酸或多核苷酸，或抗连接蛋白43肽或拟肽，例如本文所述的任何肽，包括包含连接蛋白的细胞外结构域的一部分的肽，和包含连接蛋白的羧基末端部分的一部分的肽或间隙连接关闭化合物，以及半通道关闭化合物，其可用于本发明的方法中，例如治愈本文所述的神经性眼部病症中的任何。在一些实施例中，本发明的泛连接蛋白调节剂包括泛连接蛋白寡核苷酸或多核苷酸，例如泛连接蛋白反义寡核苷酸或多核苷酸，或抗泛连接蛋白肽或拟肽，其可用于本发明的方法中，例如治愈眼部病症中的任何，例如本文描述的青光眼、amd、眼部纤维化、dme、眼部缺氧和/或神经性眼部病症。在一些实施例中，“前体部分”指充当保护基团的种类，其掩蔽活性剂内的官能团，由此将活性剂转化为前药。活性剂可以是本文公开的任何调节剂或眼部治疗剂。通常，前体部分将经由键而附着至药物，所述键在体内通过酶促或非酶促方式切割，由此将前药转化成其活性形式。在一些实施例中，前体部分也可以是活性剂。在一些实施例中，前体部分可与间隙连接调节剂、连接蛋白调节剂或泛连接蛋白调节剂结合。在一些实施例中，前体部分可与本文公开的多核苷酸、肽或拟肽、小分子拮抗剂和/或眼部治疗中的任何结合。在一些实施例中，前体部分可与式i化合物结合。在一些实施例中，前药可以是式ii化合物。在一些实施例中，前体部分可以是本公开内容的任何拟肽或肽拮抗剂。在一些实施例中，前体部分是任选在其官能团上受保护的单个氨基酸。在一些实施例中，前体部分是靶向种类。在一些方面，前体部分是细胞膜上的流入或流出转运蛋白的底物，例如gaudana,r.等人theaapsjournal,12:3,348-360(2012)中所述的那些。前体部分可以是例如化学连接的生物素。前体部分可以是例如化学连接的d-丝氨酸。在一些实施例中，本发明的泛连接蛋白调节剂包括泛连接蛋白寡核苷酸或多核苷酸，例如泛连接蛋白反义寡核苷酸或多核苷酸，或抗泛连接蛋白肽或拟肽，其可用于本发明的方法中，例如治愈本文描述的眼部缺氧或神经性眼部病症中的任何。定义“小分子”在本文中定义为具有约600道尔顿以下的分子量，并且一般是有机化合物。小分子可以是前药的活性剂。如本文使用的，“治疗(treatment)”(及其语法变体，例如“治疗(treat)”或“治疗(treating)”)指尝试改变被治疗的个体、组织或细胞的自然进程的临床干预，并且可执行用于预防或在临床病理学过程期间执行。治疗的期望效应包括但不限于预防疾病、病症或状况的发生或复发，减轻体征或症状，缩小疾病的任何直接或间接病理学后果，减少疾病进展率，改善或缓解疾状况态，以及缓解或改善预后。在一些实施例中，本发明的化合物、方法和组合物可用于延迟疾病、病症或状况的发展，或减缓疾病、病症或状况的进展。该术语不一定暗示受试者被治疗直到完全恢复。相应地，“治疗”包括减少、减轻或改善特定疾病、病症或状况的症状或严重程度，或者预防或以其他方式减少发展特定疾病、病症或状况的风险。它还可包括维持或促进状况的完全或部分缓解状态。术语“治疗眼部病症”等等包括疾病和状况，可指预防、减缓、减少、降低、停止和/或逆转眼部病症、疾病或状况，例如神经元丧失和/或神经病变、血管渗漏和/或出血、新生血管形成、炎症和/或眼中的水肿。术语“预防”意指完全或部分预防，或改善或控制。如本文使用的，“有效量”指在必需的剂量和时间段内有效实现所需治疗或预防结果的量。例如且不限于，“有效量”可指能够治疗疾病、病症或状况的体征和/或症状的本文公开的化合物或组合物的量。如本文使用的，本发明的物质/分子、激动剂或拮抗剂的“治疗有效量”可根据因素而变，所述因素例如个体的疾病状态、年龄、性别和重量，以及物质/分子、激动剂或拮抗剂在个体中引起所需应答的能力。治疗有效量优选也是其中物质/分子、激动剂或拮抗剂的任何毒性或有害作用可被治疗有益效应超过的量。如本文使用的，“预防有效量”指在必需的剂量和时间段内有效实现所需预防结果的量。通常但不是必需的，因为在疾病、病症或状况之前或者在疾病、病症或状况的较早阶段在受试者中使用预防剂量，所以预防有效量将小于治疗有效量。术语“药物制剂”指以这样的形式的制剂，以便允许其中包含的活性成分的生物活性是有效的，并且其不包含对制剂将施用于其的受试者具有不可接受的毒性的另外组分。如本文使用的，“药学上可接受的载体”指药物制剂中除活性成分外的成分，其可安全地施用于受试者。药学上可接受的载体包括但不限于缓冲液、赋形剂、稳定剂或防腐剂。如本文使用的，术语“受试者”等等包括“个体”和“患者”(所有这些在本文中可互换使用)，指任何哺乳动物，包括人，家畜和农场动物，以及动物园动物、野生动物园动物、运动动物或宠物动物，例如犬、马、猫、绵羊、猪、牛等。本文优选的哺乳动物是人，包括成年人、儿童和老人。优选的运动动物是马和犬。优选的宠物动物是犬和猫。受试者可以是例如水生公园动物，例如海豚、鲸鱼、海豹或海象。在某些实施例中，受试者、个体或患者是人。本发明在本文中参考间隙连接通道调节剂的使用和/或泛连接蛋白调节剂的使用进行描述，所述间隙连接通道调节剂包括调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物或前药，所述泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂，例如10panx1或其任一种的类似物。应当了解间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物或前药，和/或泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂，例如10panx1或其任一种的类似物的一种或多种盐、多晶型物、溶剂化物和/或异构体也可用于本发明中。相应地，提及“托那博沙和/或其类似物”、“肽5和/或其类似物”、“丙磺舒和/或其类似物”或“10panx1或其任一种的类似物”应视为包括提及前述化合物的任何一种或多种盐、溶剂合物、多晶型物和/或异构体。本发明的方法、用途和组合物可包括使用式i化合物例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物及其一种或多种类似物，肽5及其一种或多种类似物，丙磺舒及其一种或多种类似物，或10panx1及其一种或多种类似物，或这些类似物中的一种或多种的组合的组合。相应地，本文提及“式i化合物例如托那博沙和/或类似物”、“肽5和/或其类似物”、“式vi化合物例如丙磺舒和/或其类似物”、或“10panx1或其任一种的类似物”应视为包括对这种组合的提及。如本文使用的，术语“半通道”是间隙连接的一部分(两个半通道或连接子跨越邻近细胞之间的细胞间隙连接以形成间隙连接)，并且包括多种连接蛋白，通常是连接蛋白的同源或异源六聚体，其形成孔用于两个邻近细胞的细胞质之间的间隙连接。半通道由连接一侧上的细胞提供，其中来自相对细胞的两个半通道通常集合以形成完整的细胞间间隙连接通道。然而，在一些细胞中和在一些情况下的细胞中，半通道本身作为细胞质和细胞外间隙之间的导管是有活性的，从而允许离子和小分子的转移。式i化合物例如托那博沙，和/或前述化合物中任何的类似物或前药可调节半通道，优选包含任何类型的连接蛋白的那些的功能和/或活性。相应地，除非上下文另有要求，否则提及“半通道”应视为广义地包括包含多种不同连接蛋白中的任何一种或多种的半通道。然而，例如，半通道可包含连接蛋白23、25、26、30、30.2、30.3、31、31.1、31.9、32、36、37、40、40.1、43、45、46、47、50、59和62中的一种或多种。在一个实施例中，半通道由上述连接蛋白之一组成。在一个实施例中，半通道包含连接蛋白26、30、32、36、37、40、45和47中的一种或多种。在一个实施例中，半通道由连接蛋白26、30、32、36、37、40、45或47之一组成。在一个特定实施例中，半通道包含连接蛋白30和连接蛋白43中的一种或多种。在一个特定实施例中，半通道由连接蛋白30或连接蛋白43之一组成。在一个特定实施例中，半通道由连接蛋白45或连接蛋白46或连接蛋白50之一组成。在一个实施例中，半通道包含排除连接蛋白26的一种或多种连接蛋白。如本文使用的，术语“间隙连接通道”包含跨越在邻近细胞之间的细胞间隙连接并且允许某些分子在那些细胞之间流动的两个半通道。半通道和间隙连接通道可存在于任何类型的细胞中。相应地，除非上下文另有要求，否则提及“半通道”或“间隙连接通道”应视为包括提及存在于任何细胞类型中的半通道或间隙连接通道。在本发明的一个实施例中，半通道或间隙连接通道存在于中枢神经系统外部的细胞中。在一个实施例中，半通道或间隙连接通道包含排除连接蛋白26的一种或多种连接蛋白，并且存在于中枢神经系统外部的细胞中。在本发明的一个实施例中，半通道或间隙连接通道存在于眼中的细胞中。在本发明的一个实施例中，半通道或间隙连接通道存在于眼前部即前段中的细胞中。在本发明的一个实施例中，半通道或间隙连接通道存在于眼后部即后段中的细胞中。在本发明的一个实施例中，半通道或间隙连接通道存在于葡萄膜中的细胞中。在本发明的一个实施例中，半通道或间隙连接通道存在于视神经中的细胞中。在本发明的一个实施例中，半通道或间隙连接通道存在于眼的微血管系统中的细胞中。在本发明的一个实施例中，半通道或间隙连接通道存在于脉络膜中的细胞中。在本发明的一个实施例中，半通道或间隙连接通道存在于脉络膜毛细血管中的细胞中。如本文使用的，“半通道和/或间隙连接通道的调节”是半通道和/或间隙连接通道的一种或多种功能和/或活性的调节。这些功能和活性可包括例如在邻近细胞上的半通道对接和打开以形成间隙连接通道。它们还可包括细胞之间的细胞间通讯，以及细胞之间的分子通过间隙连接通道的流动。这样的功能和活性可包括例如分子从细胞外间隙或环境通过半通道进入细胞的流动，和/或分子通过半通道从细胞的细胞内间隙或环境进入细胞外间隙或环境的流动。半通道和/或间隙连接通道的功能的调节可通过任何方式发生。然而，仅作为例子，调节可通过下述中的一种或多种发生：预防、阻断、抑制或减少通过半通道对接的间隙连接形成；诱导或促进半通道的关闭；预防、阻断、抑制或减少半通道开放；诱导或促进半通道之间的偶联丧失；触发、诱导或促进半通道和/或间隙连接的细胞内化。词语例如“阻断”、“抑制”、“预防”、“减少”和“拮抗”等等的使用不应视为暗示完全阻断、抑制、预防或拮抗，尽管这可能是优选的，并且应视为包括部分阻断、抑制、预防或拮抗，以至少降低半通道和/或间隙连接通道的功能或活性。类似地，“诱导”或“促进”不应视为暗示半通道和/或间隙连接(或半通道和/或间隙连接的组)的偶联的完全丧失或完全内化，并且应视为包括偶联的部分丧失或部分内化，以至少降低半通道和/或间隙连接通道的功能或活性。如本文使用的，术语“间隙连接通道调节剂”是一起或分开地预防、抑制和/或降低间隙连接半通道的功能或活性或者间隙连接通道的功能或活性的化合物，包括例如预防、抑制和/或减少半通道和/或间隙连接的表达、活性和/或形成，包括连接蛋白的表达、其运输和/或装配。功能或活性的预防、抑制和/或降低可以是直接或间接的(例如但不限于直接阻断通道，诱导构象变化或修饰连接蛋白磷酸化状态)。间隙连接通道阻滞剂可以是任何化学性质的。然而，例如，试剂可以是核酸(包括反义分子、rnai分子、吗啉和如本文所述的其他核酸)、肽、小分子、化学元素、激素、抗体、抗体片段或代谢产物。在某些实施例中，它是靶向间隙连接的一种或多种组分包括连接蛋白、半通道(也称为连接子)的化合物，以抑制或阻断其活性、表达、运输和/或装配。“抑制”或“阻断”不应视为暗示连接蛋白、半通道或间隙连接的活性、表达、运输和/或装配被完全抑制或阻断，尽管这可能是优选的，但应视为包括连接蛋白、半通道或间隙连接的活性、表达、运输和/或装配的任何减少。如本文使用的，术语“其中间隙连接半通道和/或间隙连接通道的调节可能是有益的病症”包括其中间隙连接通道和/或半通道功能或活性可牵涉疾病、病症或状况的发作、进展或持续的任何疾病、病症或状况。在一个实施例中，该疾病、病症或状况是其中牵涉包含连接蛋白23、25、26、30、30.2、30.3、31、31.1、31.9、32、36、37、40、40.1、43、45、46、47、50、59和62中的一种或多种的间隙连接通道和/或半通道的功能或活性的疾病、病症或状况。在一个实施例中，该疾病、病症或状况是其中牵涉由前述连接蛋白之一组成的间隙连接通道和/或半通道的功能或活性的疾病、病症或状况。在一个实施例中，该疾病、病症或状况是其中牵涉包含连接蛋白26、30、32、36、37、40、45和47中的一种或多种的间隙连接通道和/或半通道的功能或活性的疾病、病症或状况。在一个实施例中，该疾病、病症或状况是其中牵涉由连接蛋白26、30、32、36、37、40、45或47之一组成的间隙连接通道和/或半通道的功能或活性的疾病、病症或状况。在一个特定实施例中，该疾病、病症或状况是其中牵涉包含连接蛋白30和连接蛋白43中的一种或多种的间隙连接通道和/或半通道的功能或活性的疾病、病症或状况。在一个特定实施例中，该疾病、病症或状况是其中牵涉由连接蛋白30或连接蛋白43或连接蛋白45或连接蛋白46或连接蛋白50之一组成的间隙连接通道和/或半通道的功能或活性的疾病、病症或状况。在一个实施例中，该疾病、病症或状况是其中牵涉包含排除连接蛋白26的一种或多种连接蛋白的间隙连接通道和/或半通道的功能或活性的疾病、病症或状况。在一个实施例中，该疾病、病症或状况是其中牵涉存在于中枢神经系统外部的细胞中的间隙连接通道和/或半通道的功能或活性的疾病、病症或状况。在一个实施例中，该疾病、病症或状况是其中牵涉包含排除连接蛋白26的一种或多种连接蛋白，并且存在于中枢神经系统外部的细胞中的间隙连接通道和/或半通道的功能或活性的疾病、病症或状况。在本发明的一个实施例中，该疾病、病症或状况是其中要调节的半通道或间隙连接通道的功能或活性存在于眼中的细胞中的疾病、病症或状况。在本发明的一个实施例中，该疾病、病症或状况是其中要调节的半通道或间隙连接通道的功能或活性存在于眼前部即前段中的细胞中的疾病、病症或状况。在本发明的一个实施例中，该疾病、病症或状况是其中要调节的半通道或间隙连接通道的功能或活性存在于眼后部即后段中的细胞中的疾病、病症或状况。在本发明的一个实施例中，该疾病、病症或状况是其中要调节的半通道或间隙连接通道的功能或活性存在于葡萄膜中的细胞中的疾病、病症或状况。在本发明的一个实施例中，该疾病、病症或状况是其中要调节的半通道或间隙连接通道的功能或活性存在于视神经中的细胞中的疾病、病症或状况。在本发明的一个实施例中，该疾病、病症或状况是其中要调节的半通道或间隙连接通道的功能或活性存在于脉络膜中的细胞中的疾病、病症或状况。在本发明的一个实施例中，该疾病、病症或状况是其中要调节的半通道或间隙连接通道的功能或活性存在于脉络膜毛细血管中的细胞中的疾病、病症或状况。在本发明的一个实施例中，该疾病、病症或状况是其中要调节的半通道或间隙连接通道的功能或活性存在于眼的微血管系统中的细胞中的疾病、病症或状况。在一个实施例中，组合物可包括或排除前述的任何间隙连接通道和/或半通道调节剂。如本文使用的，术语“其中泛连接蛋白通道的调节可能是有益的病症”应视为包括其中泛连接蛋白或泛连接蛋白通道功能或活性可牵涉疾病、病症或状况的发作、进展或持续的任何病症。在一个实施例中，该疾病、病症或状况是其中泛连接蛋白通道的功能或活性包含泛连接蛋白的三种同种型中的一种或多种的疾病、病症或状况。在一个实施例中，该疾病、病症或状况是其中要调节的泛连接蛋白通道的功能或活性包含泛连接蛋白1的疾病、病症或状况。在一个实施例中，该疾病、病症或状况是其中要调节的泛连接蛋白通道的功能或活性在眼中或眼上(包括眼的表面、视网膜和与眼相关或包括眼的血管)的疾病、病症或状况。如本文使用的，“慢性伤口”、“未以预期速率愈合的伤口”和“开裂伤口”以及类似术语和短语具有如us2011/0300130中提供的含义，所述专利以引用的方式并入本文，并且包括本发明可应用于其的伤口类型的多个例子。然而，例如，这样的伤口可包括糖尿病性溃疡(包括例如糖尿病足溃疡)、静脉性溃疡、静脉淤滞性溃疡、压力性溃疡、褥疮性溃疡、血管炎性溃疡、动脉性溃疡、感染性溃疡、压力性溃疡、烧伤性溃疡、创伤性或创伤诱发性溃疡、炎性溃疡、与坏疽性脓皮病相关的溃疡、眼部溃疡包括持续性上皮缺损、混合性溃疡。如本文使用的，“纤维化”和“纤维化疾病、病症或状况”或类似术语和短语具有如us2011/0092449中提供的含义，所述专利以引用的方式并入本文，并且包括本发明可应用于其的纤维化疾病、病症或状况的多个例子。然而，例如，这样的纤维化，纤维化疾病、病症或状况可包括肝纤维化、心脏纤维化、肺纤维化(包括例如矽肺、石棉肺、特发性肺纤维化)、口腔纤维化(包括例如口腔粘膜下纤维化)、腹膜后纤维化、三角肌纤维化、心内膜心肌纤维化、肾纤维化(包括例如糖尿病肾病)、肾小球硬化、急性纤维化。在一个实施例中，肝纤维化已起于慢性肝损伤或与血色病、威尔逊氏病、酒精中毒、血吸虫病、病毒性肝炎、胆管阻塞、暴露于毒素和/或代谢性病症有关。在一个实施例中，心脏纤维化是心内膜纤维化或心内膜心肌纤维化。在一个实施例中，急性纤维化与偶发性损伤、感染和/或放射和/或化学疗法治疗相关。在一个实施例中，纤维化可发生在患有选自硬皮病、胰腺炎、炎性肠病、克罗恩氏病、结节性筋膜炎(nodularfacilitis)和/或嗜酸粒细胞性筋膜炎的疾病、病症或状况的受试者中。在一个实施例中，硬皮病可以是硬斑病、泛发性硬斑病或线性硬皮病。如本文使用的，“异常或过度瘢痕形成”等等具有如us2011/0130710中提供的含义，所述专利以引用的方式并入本文，并且包括本发明可应用于其的异常或过度瘢痕形成的多个例子。然而，例如，异常或过度瘢痕形成可包括存在于皮肤中或皮肤上的瘢痕、眼中或眼上的瘢痕、瘢痕疙瘩、增生性瘢痕、萎缩性瘢痕、广泛性瘢痕。如本文使用的，“血管病症”和类似术语或短语具有如ep2510939中提供的含义，所述专利以引用的方式并入本文，并且包括本发明可应用于其的血管病症的多个例子。然而，例如，血管病症可包括动脉粥样硬化、微血管病症、大血管病症、血栓形成、起因于创伤的血管损伤、血管损害、糖尿病视网膜病变、器官缺血、内皮细胞破裂、四肢的血管疾病。如本文使用的，“骨科疾病或病症”和类似短语具有如ep2238250中提供的含义，所述专利以引用的方式并入本文，并且包括本发明可应用于其的骨科疾病或病症的多个例子。然而，例如，骨科疾病或病症包括整体或部分特征在于关节内部和/或关节周围的异常组织形成的骨科疾病或病症，与改变或异常的关节活动性或关节体系结构相关的骨科疾病或病症，所述骨科疾病或病症可与各种损伤和状况相关或者由各种损伤和状况引起，所述各种损伤和状况例如代谢性病症，缺血，创伤，对关节、关节囊、骨、软骨、腱、韧带或肌肉的损伤，骨折，半脱位，脱位，挤压伤，长期不活动(例如关节固定在模或夹板中)和/或瘫痪。本领域技术人员将容易理解如本文使用的短语“骨科手术或程序”和类似短语。然而，例如，它应视为包括ep2242844中概述的任何手术或程序。“改善”从这样的程序的恢复也应当广泛地理解，并且可包括例如减少疼痛且改善活动性和/或恢复时间。如本文使用的，“骨科手术后关节挛缩”和类似短语具有如ep2242844中提供的含义，所述专利以引用的方式并入本文。如本文使用的，“粘连”和类似短语具有如ep2252690中提供的含义，所述专利以引用的方式并入本文。然而，例如，它可包括在任何组织包括上皮、结缔组织、肌肉和组织中形成的手术粘连和粘连。如本文使用的，“组织损伤”、“与眼科程序相关的组织损伤”以及类似短语和术语具有如us2012/0093768中提供的含义，所述专利以引用的方式并入本文，并且包括本发明可应用于其的组织损伤的多个例子。然而，例如，组织损伤可包括增强组织修复过程和/或改善组织损害。如本文使用的，“炎性病症”、“炎性疾病”和类似短语具有如wo2013/148736中提供的含义，所述专利以引用的方式并入本文，并且包括本发明可应用于其的病症的多个例子。在一个实施例中，半通道和泛连接蛋白调节剂单独或一起用于抑制一种或多种炎性体的活化。在一个实施例中，包括半通道的调节剂和泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂单独或一起用于抑制通过炎性体的炎性级联活化。在一个实施例中，调节剂包括间隙连接、半通道和泛连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节剂单独或一起用于治疗受试者的疾病、病症或状况，其特征至少部分在于一种或多种炎症体的活化和/或通过炎性体的炎性级联活化。在一个实施例中，间隙连接、半通道、泛连接蛋白通道、连接蛋白和泛连接蛋白调节剂单独或一起用于调节nlrp3炎症体的活性。炎性体是包含半胱天冬酶1、pycard、nalp和任选的半胱天冬酶5(也称为半胱天冬酶11或ich-3)的多蛋白复合物。炎性体的确切组成取决于启动炎性体装配的活化剂。例如，dsrna将触发一种炎性体组合物，而石棉将装配不同的变体。炎症体促进炎症细胞因子白细胞介素1β(il-1β)和白细胞介素18(il-18)的成熟。炎症体负责炎症过程的活化，并且已显示诱导细胞焦亡，这是不同于细胞凋亡的程序性细胞死亡过程。nlrp3炎症体阻断抑制vegf-a诱导的年龄相关性黄斑变性。如本文以其不同形式使用的，术语间隙连接通道、半通道、泛连接蛋白或泛连接蛋白通道或连接蛋白功能或活性的“调节试剂”、“调节剂”和“调节”指连接蛋白或连接蛋白半通道或连接蛋白间隙连接或泛连接蛋白或泛连接蛋白通道的表达、作用或活性的整体或部分抑制，并且整体或部分可作为抗连接蛋白试剂，包括间隙连接调节试剂，以及充当抗泛连接蛋白试剂，包括泛连接蛋白通道调节试剂。在一些方面，间隙连接和/或连接蛋白调节剂可以是存在于血管中的连接蛋白的调节剂，例如连接蛋白43调节剂和/或连接蛋白45调节剂。因此，如本文使用的，术语“连接蛋白调节剂”一般指连接蛋白调节剂，但也具体指连接蛋白43调节剂和连接蛋白45调节剂(以及cx43和cx45半通道调节剂)，以及其他血管连接蛋白和半通道的调节剂，除非另有规定。在一些方面，连接蛋白调节剂是连接蛋白43调节剂，例如阻断半通道开放的连接蛋白43半通道调节剂。在一些方面，间隙连接调节剂还包括在眼中发现的其他连接蛋白，例如cx26、cx30、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx50和cx57，以及它们的半通道和间隙连接的调节剂。在一些方面，泛连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节剂可以是泛连接蛋白1的调节剂，特别是泛连接蛋白1通道开放的调节剂。在一些方面，调节剂可包括或排除前述中的任何。在一些实施例中，“眼部病症”包括或排除青光眼包括高眼压型青光眼和正常眼压型青光眼，临床性地图状萎缩；amd包括干性amd和渗出性amd、异常或损伤，慢性黄斑缺血，眼纤维化，特发性息肉样脉络膜血管病变(ipc)；糖尿病性黄斑病变，糖尿病视网膜病变；高血压性视网膜病变，炎性cnv；中心性浆液性脉络膜视网膜病变(csr)；黄斑毛细血管扩张；模式营养不良；视网膜下/prd下新生血管形成；感觉神经性视网膜的浆液性脱离；rpe脱离；出血(视网膜下色素上皮、视网膜下、视网膜内或视网膜前，包括进入玻璃体内的突破性出血)；视网膜前、视网膜内、视网膜下或色素上皮下瘢痕/神经胶质组织或纤维蛋白样沉积物；视网膜纤维化，视网膜血管瘤性增生和视网膜脉络膜血管吻合；脉络膜新生血管形成(cnv)；囊性黄斑病变；视网膜增厚；非渗出性amd；和视网膜瘢痕形成，葡萄膜炎包括后葡萄膜炎，巩膜炎，巩膜外层炎病毒性视网膜炎(包括巨细胞病毒(cmv)视网膜炎)，早产儿视网膜病变，视网膜缺氧，弥漫性脉络膜硬化，脉络膜毛细血管硬化，干眼，眼部和角膜持续性上皮缺损，糖尿病性黄斑水肿(dme)，神经性眼部病症，创伤诱导的眼内压降低，上皮基底膜营养不良和/或其他眼部病症，包括本文其他地方注明的那些。如本文使用的，“眼部神经病变”或“神经性眼部病症”是将受益于治疗眼部神经元丧失的试剂的任何眼部病症、疾病或状况，例如停止或减少rgc的丧失或者其他眼神经元或结构的损害或丧失，或者恢复丧失的rgc或其他眼结构或神经元。还包括的是与神经性、缺血性、灌注损伤、眼中的炎性或微血管病理结合的病症，其可起因于脉络膜或视网膜灌注损伤、高眼压、脉络膜或内部视网膜或眼的其他内部组织的炎症、或者视网膜静脉或动脉阻塞。在一些实施例中，脉络膜或视网膜灌注损伤可导致眼部缺氧。还包括的是特征在于眼血管或神经元中存在的连接蛋白的表达升高的任何眼部疾病、病症和状况。还包括的是特征在于不希望的泛连接蛋白活性的眼部疾病、病症和状况。还包括的是特征在于不希望的zo-1蛋白或zo-1蛋白活性，或者将受益于减少的zo-1蛋白或zo-1蛋白活性的疾病、病症和状况。还包括的是特征在于不希望的较低rac1或rac1活性或者将受益于rac1或rac1活性增加的疾病、病症和状况。还包括的是特征在于不希望的减少的rhoagtp酶或rhoagtp酶活性或者将受益于rhoagtp酶或rhoagtp酶活性减少的疾病、病症和状况。“青光眼性眼神经病变”指与青光眼相关的任何“眼部神经病变”，例如，对视网膜神经节细胞(rpg)的神经性损害以及与青光眼相关的青光眼性视神经病变。在一些实施例中，青光眼性视神经病变可与眼内压升高或者脉络膜或视网膜灌注损伤相关或不相关。在一些实施例中，治疗新生血管性青光眼的方法包括通过向有需要的受试者施用调节剂，包括间隙连接调节剂、泛连接蛋白调节剂、泛连接蛋白通道调节剂和/或连接蛋白调节剂的治疗。术语“眼内压相关的神经病变”指与高眼压，即眼内压升高相关的青光眼性视神经病变。术语“眼部缺氧”指起因于缺氧的任何眼状况或病症，包括脉络膜或视网膜灌注损伤、高血压或对眼的血流和/或氧流的中断，包括例如眼中的缺血和/或血管渗漏和/或血管破裂。起因于眼部缺氧的状况包括例如青光眼、青光眼性视神经病变、眼内压相关的神经病变、眼部神经病变、临床性地图状萎缩、dme、脉络膜毛细血管脱落和/或脉络膜中的毛细血管破裂或本文及下文所述的其他状况。临床性地图状萎缩(ga)ga的呈现通常是隐伏的，并且在常规眼底检查期间经常被检测到。当ga是双侧的并且涉及两只眼的中央凹时，患者可能抱怨中心视力的恶化。通常的呈现模式是最初对于最小印刷体尺寸的阅读困难，并且随后对于较大的印刷体和/或单词的阅读困难。ga诊断的确认通过使用用于立体生物显微镜检查的高清晰度眼底镜片的临床检查。这将揭示具有清楚界定和缺口边缘的特征性一个或多个苍白区域。当ga的面积大于500微米时，在苍白区域内清楚可见大的脉络膜血管。通常在与ga斑块邻近的视网膜中可见玻璃疣和局灶性色素沉着过度的区域。在ga的评估中，几种成像模式可能是有用的，特别是眼底自发荧光。眼底自体荧光连同谱域oct使得更容易诊断ga，因为这些成像模式可揭示在生物显微镜检查上可能不是临床可见的ga区域。地图状萎缩是干性amd的晚期(后期)形式。此处，萎缩指视网膜最深的细胞的变性。通常定义为任何清晰划界的圆形或椭圆形色素沉着不足区域，或视网膜色素上皮(rpe)的明显不存在，其中脉络膜血管比周围区域更可见。导致ga的最常见的事件顺序是大玻璃疣向色素沉着过度的进展，随后为玻璃疣消退、色素沉着不足和最终的rpe细胞死亡，伴随视网膜和下面的脉络膜毛细血管的萎缩区域的发展，有时之前出现折射沉积物。在一些实施例中，调节剂例如间隙连接和/或连接蛋白调节剂、或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂预防脉络膜血管的炎症，维持视网膜色素上皮细胞层，和/或预防视网膜和下面的脉络膜毛细血管区域中的萎缩。渗出性年龄相关性黄斑变性(amd)渗出性amd发作的最常见症状是中心视觉模糊和失真。大多数患者抱怨直线看起来弯曲或波浪状。当第一只眼受影响时，有时患者未注意到视觉症状。当渗出性amd发生在第二只眼中时，患者突然变得不能阅读、开车并且看到细节，例如面部表情和特征。许多患有amd的患者描述在夜间注意到视野中的中心黑色斑块的这种症状在他们适应几分钟内消失。这种症状也可存在于不一定发展渗出性amd的amd患者中。黄斑的检查通常揭示渗出性黄斑病灶连同早期amd的其他特征，例如玻璃疣和色素不规则性。一旦渗出性amd已接着发生，有时这些后面的特征是不可见的。然而，如果没有晚期疾病，另一眼经常显示出这些早期临床体征中的一些或全部，并且它们的存在有助于支持新生血管病灶是由于amd的诊断。在裂隙灯生物显微镜检查后，应注意下述体征的存在或不存在：(1)视网膜下或rpe下新生血管形成，其作为灰绿色病灶可见(偶尔地，病灶将具有暗色边缘，这被认为是由于在膜边缘处的rpe增殖)；感觉神经性视网膜的浆液性脱离；(3)rpe脱离；(4)出血-视网膜下色素上皮、视网膜下、视网膜内或视网膜前(也可能发生进入玻璃体内的突破性出血)；(5)与上述任何相关并且与其他视网膜血管疾病无关的黄斑区域内的硬性渗出物(脂质)；(6)视网膜前、视网膜内、视网膜下或色素上皮下瘢痕/神经胶质组织或纤维蛋白样沉积物；(7)视网膜血管瘤性增生和视网膜脉络膜血管吻合。这种病症可用调节剂，例如如本文所述的间隙连接和/或连接蛋白调节剂、或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂进行治疗。特发性息肉样脉络膜血管病变(ipc)这是新生血管性amd的非典型形式，其中具有陡壁出血性色素上皮脱离的高度渗出性病灶可见最通常邻近视盘，但可发生在黄斑内的任何地方且甚至黄斑外部。高速荧光素或吲哚菁绿血管造影通常揭示在血管造影的后期阶段渗漏的脉络膜血管(分支血管网络)的强荧光扩张复合物。这些扩张的复合物看起来像息肉或葡萄，并且因此命名。它最初在中年黑人人口中描述，并且在女性中更常见。ipc视为amd谱的一部分，并且已描述了与高血压和缺血性心脏病的强相关。使用共焦高速成像装置允许更频繁地诊断ipc，并且在亚洲人口中的老年人中，ipc占血清血液样黄斑病变的超过三分之一，并且占白种人中可见的8-13％。这种病症也可用如本文所述的调节剂，例如间隙连接和/或连接蛋白调节剂、或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂进行治疗。眼部纤维化由血管渗漏、出血和伴随纤维化引起的眼中高度有序的组织体系结构的破坏可导致视轴的机械破坏和/或生物功能障碍。眼部纤维化还可包括例如晶状体、黄斑或视网膜的纤维化，并且可包括例如进行性视网膜下纤维化和黄斑前纤维化(pmf)。当纤维化瘢痕组织的薄片在黄斑之上形成时，响应于损害或损伤，发生黄斑纤维化。黄斑的损伤可由于眼创伤、视网膜撕裂或脱离、玻璃体的收缩或全身性疾病例如糖尿病或高血压而发生。黄斑纤维化也可称为黄斑皱褶、视网膜外膜或透明纸样黄斑病变。视网膜下纤维化可能与慢性玻璃体炎症相关，导致纤维化视网膜下病灶，其进行性扩大且聚结，并且可能与囊样黄斑水肿相关。pmf影响在视网膜的前侧上的黄斑，而黄斑变性影响视网膜的下侧。pmf的主要症状是在一只眼中视觉失真的逐渐发展，其可在数周至数月内发展。这种病症可用如本文所述的调节剂，例如间隙连接和/或连接蛋白调节剂、或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂进行治疗。葡萄膜炎葡萄膜炎是眼的中间层葡萄膜的炎症。葡萄膜由眼的中间着色血管结构组成，并且包括虹膜、脉络膜和睫状体。脉络膜夹在视网膜和白眼球(巩膜)之间，并且提供对视网膜深层的血流。葡萄膜炎可包括称为虹膜炎(前葡萄膜炎)的虹膜炎症。这种病症也可用如本文所述的调节剂，例如间隙连接和/或连接蛋白调节剂、或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂进行治疗。糖尿病性黄斑病变这是老年人最常见的渗出性中枢性黄斑病变。糖尿病患者经常在黄斑水肿的情况下频繁显示出视网膜微动脉瘤、出血和渗出物。在黄斑拱形(maculararcade)外部的更广泛的血管体征连同静脉怒张或串珠的存在应当提醒临床医生诊断糖尿病性黄斑病变。当与具有涉及中心凹的cnv的眼相比较时，视觉功能在具有糖尿病性黄斑病变的眼中较不显著地减少。接近黄斑的血管将流体或蛋白质渗漏到黄斑上。需要荧光素血管造影术来证实脉络膜新生血管形成和rpe下病理学的不存在。有时渗出性amd和糖尿病性黄斑病变可共存，因为两者均为常见状况。这种病症可用如本文所述的调节剂，例如间隙连接和/或连接蛋白调节剂、或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂进行治疗，如与脉络膜新生血管形成相关的高度近视可进行的。高度近视可与脉络膜新生血管形成相关。这些新生血管复合物被认为由于在变薄的布鲁赫膜中的微小裂纹的发展而发生，从而允许脉络膜血管进入视网膜下间隙。糖尿病性黄斑水肿糖尿病性黄斑水肿是由于来自黄斑内血管的流体渗漏在糖尿病受试者中的视网膜肿胀。黄斑是视网膜的中心部分，是富含视锥的小区域，视锥是检测颜色并且日间视觉依赖于其的专门神经末梢。随着黄斑水肿发展，模糊发生在中心视野的中部或仅一侧。由于糖尿病性黄斑水肿的视力丧失可在几个月的时间内进展，并且使得无法清晰地聚焦。黄斑水肿在糖尿病中常见。糖尿病患者发展黄斑水肿的终身风险约为10％。该状况与糖尿病视网膜病变(视网膜疾病)的程度密切相关。高血压(高的血压)和流体滞留也增加了毛细血管内的流体静压力，其将流体从血管内驱动到视网膜内。在糖尿病中流体滞留的常见原因是肾疾病，伴随尿中的蛋白质丧失(蛋白尿)。糖尿病性黄斑水肿分成局灶性和弥漫性类型。这是一个重要的区别，因为两个类型在治疗上不同。局灶性黄斑水肿由血管异常的病灶，主要是微动脉瘤引起，其倾向于渗漏流体，而弥漫性黄斑水肿由视网膜中扩张的视网膜毛细血管引起。这种病症也可用如本文所述的调节剂，例如间隙连接和/或连接蛋白调节剂、或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂进行治疗。糖尿病视网膜病变糖尿病视网膜病变最终可导致失明。它是全身性疾病的眼部表现，并且影响患有糖尿病至少10年的所有患者中的高达80％。在糖尿病视网膜病变中，高血糖诱导周细胞死亡和基底膜增厚，导致血管壁的受损。这种损害改变血液-视网膜屏障，以使视网膜血管可渗透。例如在眼中的小血管尤其易受弱血糖控制影响。糖尿病中的异常连接蛋白表达与几种组织包括皮肤、肾、膀胱、神经束膜、晶状体和心脏76中的并发症相关。在视网膜中，已知高血糖诱导细胞凋亡，导致血管脱落和周细胞丧失，这是背景型糖尿病视网膜病变的标志。近期证据显示减少的cxn43表达启动细胞凋亡和血管稳态的分解(bobbiemw,roys,trudeauk,mungersj,simonam,roys,investophthalmolvissci.；51(7):3758-63,2010)。然而，上述描述主要涉及在非增生性糖尿病视网膜病变的初始阶段期间疾病的潜在背景，并且大多数患者未注意到他们的视力中的任何变化，虽然当受损血管将流体和脂质渗漏到黄斑上时，一些人将发展黄斑水肿。随着疾病进展，糖尿病视网膜病变进入血管增殖阶段。由于视网膜中的低氧水平，新血管是脆弱的，并且沿着视网膜生长并进入玻璃体液内。这些血管可出血，遮蔽视觉且破坏视网膜。纤维血管增生可引起视网膜脱离，并且血管也可生长到眼前房的角度内，引起新生血管性青光眼。糖尿病视网膜病变具有慢性、亚临床炎症的显著特征(zhangw,liuh,rojasm,caldwellrw,caldwellrb,immunotherapy,3(5):609-28,2011。这种病症可用如本文所述的调节剂，例如间隙连接和/或连接蛋白调节剂、或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂进行治疗。在一些实施例中，调节剂还可治疗糖尿病视网膜病变的该炎症期。炎性cnv许多脉络膜炎性白点综合征(例如假定的眼组织胞浆菌病、点状内层脉络膜病变、多灶性内层脉络膜病变)可与炎性脉络膜新生血管形成相关。在一些实施例中，如本文所述的调节剂预防脉络膜的炎症，由此预防炎性cnv。中心性浆液性脉络膜视网膜病变(csr)它的特征在于在感觉神经性视网膜下中的浆液集合，而无任何新生血管形成的证据。慢性csr有时可能与amd混淆，再次，病史、症状和视网膜成像的组合通常有助于区分两者。cnv和ipcv可作为慢性csr的并发症发生。它的特征在于在视网膜下的流体渗漏，所述流体渗漏具有在中央黄斑下积累的倾向。这允许脉络膜流体渗漏到视网膜下间隙内。流体的累积由于视网膜色素上皮中的小断裂而发生。在一些实施例中，本文所述的调节剂预防或以其他方式改善脉络膜的炎症，和/或预防或改善脉络膜毛细血管脱落。脉络膜的保留可预防脉络膜流体渗入视网膜下间隙内。黄斑毛细血管扩张特发性黄斑毛细血管扩张症(mactel)有时也称为旁中心凹或近中心凹毛细血管扩张，可能难以与namd特别是amd的rap形式区分。已描述了两种类型的毛细血管扩张：1型mactel在中年人中发生；该状况通常是单侧的，并且显示出渗出性特征，因为血管是渗漏的，并且伴随囊性黄斑病变和周围渗出物发生视网膜内流体积累。2型mactel在老年人中发生，并且通常是双侧的，具有暂时在中央凹并延伸到整个旁中心凹区域的结晶沉积物、色素沉着(pigmentarycharge)和直角小静脉的证据。虽然在荧光素血管造影术上可检测到渗漏，但不存在增加的视网膜增厚的证据。囊性间隙使用oct在视网膜内是明显的，并且这些间隙被认为反映视网膜组织的丧失。偶尔，视网膜下新生血管形成发展并起于视网膜循环。当存在关于黄斑中心中心凹周围的微小血管的问题时，黄斑毛细血管扩张发展。存在两种类型的黄斑毛细血管扩张，并且各自不同地影响血管。2型黄斑毛细血管扩张：黄斑毛细血管扩张的最常见形式是2型黄斑毛细血管扩张，其中中央凹周围的微小血管渗漏，变得扩张(变宽)或两者。在一些情况下，新血管在视网膜下形成，并且它们也可破裂或渗漏。来自渗漏血管的流体促使黄斑肿胀或增厚，这种状况称为黄斑水肿，影响您的中心视力。另外，瘢痕组织有时可在黄斑和中央凹上形成，引起细节视力的丧失。2型影响两只眼，但不一定具有相同的严重性。1型黄斑毛细血管扩张症：在1型黄斑毛细血管扩张中，血管变得扩张，形成微小动脉瘤，引起肿胀且损害黄斑细胞。该疾病几乎总是在一只眼中发生，这使其与2型区分开。这些病症也可用如本文所述的调节剂，例如间隙连接和/或连接蛋白调节剂、或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂进行治疗。模式营养不良(pd)pd影响黄斑并且可被误认为非渗出性amd。最常见的pd类型是成人卵黄状黄斑营养不良(avmd)和较不常见的蝴蝶形模式营养不良。pd是具有遗传基础的状况；虽然家族史经常不存在。pd通常与比amd更好的视力结果相关，除非由于脉络膜新生血管形成或萎缩性变化而复杂化。区分avmd特别是与amd区分可能是困难的。症状可以是类似的，特别是如果cnv或萎缩使pd复杂化，但通常avmd在无症状个体在常规的眼底镜检查中鉴定。尤其是当与光学相干断层扫描结合时，眼底自发荧光成像有助于区分pd与amd。荧光素血管造影术可显示在avmd中典型的‘日晕信号(coronasign)’，并且在蝴蝶形pd中看到的分支线与分布在沉积物区域中的强荧光相关，其在血管造影阶段自始至终不显示渗漏。偶尔，卵黄状病灶的荧光素血管造影染色可被误认为cnv的主动性渗漏。这种病症可用如本文所述的调节剂，例如间隙连接和/或连接蛋白调节剂、或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂进行治疗。视网膜下/prd下新生血管形成视网膜下新生血管形成是由脉络膜中的新血管形成组成的病理过程。在amd的湿性形式中，异常血管在黄斑下生长并且渗漏流体和血液。称为视网膜下新生血管形成的异常血管也可提升视网膜。这种病症可用如本文所述的调节剂，例如间隙连接和/或连接蛋白调节剂、或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂进行治疗。感觉神经性视网膜的浆液性脱离当视网膜下液在感觉神经性视网膜和视网膜色素上皮之间积累时，发生视网膜脱离。该过程可以三种方式发生。一种机制涉及在视网膜中的断裂，允许玻璃体直接进入视网膜下间隙。这被称为孔源性视网膜脱离。第二种机制涉及视网膜或玻璃体表面上的增生性膜。这些膜可拉动感觉神经性视网膜，引起感觉神经性视网膜和视网膜色素上皮之间的物理分离。这称为牵拉性视网膜脱离。视网膜脱离的第三种机制是由于视网膜下液的积累，所述视网膜下液的积累是由于炎症介质或来自大块病灶的流体渗出。这种机制被称为浆液性或渗出性视网膜脱离。浆液性脱离由许多炎性或渗出性视网膜疾病过程例如结节病或脉络膜肿瘤引起。在一些方面，本文所述的调节剂用于控制下面的脉络膜毛细血管中的炎症，控制视网膜下液的累积，和/或预防视网膜下液的积累，其可导致例如感觉神经性视网膜的浆液性脱离。rpe脱离rpe脱离是非特异性解剖学改变，其可起因于任何数量的脉络膜病症，所述脉络膜病症破坏rpe的基底膜与布鲁赫膜的内部胶原层之间的正常连接。这种破坏允许来自下面的脉络膜毛细血管的浆液进入rpe下间隙内。年龄相关性黄斑变性、脉络膜新生血管膜、高度近视、血管样条纹、遗传性脉络膜变性、pohs和脉络膜肿瘤都鉴定为rpe脱离发展中的沉淀情况。这种病症可用如本文所述的调节剂，例如间隙连接和/或连接蛋白调节剂、或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂进行治疗。出血-视网膜下色素上皮、视网膜下、视网膜内或视网膜前，包括进入玻璃体内的突破性出血视网膜出血是眼的病症，其中出血发生在眼后壁上的保留组织(retensitivetissue)内。视网膜出血可由高血压、视网膜静脉阻塞(视网膜静脉的闭塞)或糖尿病(其促使形成易于损害的小的易碎血管)引起。视网膜出血，特别是与慢性疾病无关的轻度出血，通常无需治疗而再吸收。激光手术是治疗选项，其使用激光束来密封视网膜中的受损血管。这种病症可用如本文所述的调节剂，例如间隙连接和/或连接蛋白调节剂、或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂进行治疗。视网膜前、视网膜内、视网膜下或色素上皮下瘢痕/神经胶质组织或纤维蛋白样沉积物在一些方面，连接蛋白调节剂可预防瘢痕形成、炎症和纤维蛋白形成的产生。因此，连接蛋白调节剂可预防视网膜前、视网膜内、视网膜下或色素上皮下瘢痕/神经胶质组织或纤维蛋白样沉积物。这种病症可用如本文所述的调节剂，例如间隙连接和/或连接蛋白调节剂、或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂进行治疗。视网膜血管瘤性增生和视网膜脉络膜血管吻合视网膜脉络膜血管吻合代表视网膜和脉络膜循环之间的通讯，并且在患有新生血管性年龄相关性黄斑变性(amd)的患者亚组中得到描述。视网膜血管瘤性增生通过在具有盘状瘢痕的眼中的视网膜和脉络膜循环之间的血管吻合的存在得到证明。这种病症可用如本文所述的调节剂，例如间隙连接和/或连接蛋白调节剂、或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂进行治疗。脉络膜新生血管形成(cnv)脉络膜新生血管形成(cnv)是在眼的脉络膜层中的新血管产生。这是退行性黄斑病变湿性amd(年龄相关性黄斑变性)的常见体征。cnv可在具有布鲁赫膜缺陷的个体中快速发生，所述布鲁赫膜是脉络膜的最内层。它也与过量的血管内皮生长因子(vegf)相关。如在湿性amd中，cnv也可频繁地伴随罕见的遗传病弹性假黄瘤发生，并且罕见地伴随更常见的视盘玻璃疣发生。cnv还与极端近视或恶性近视性变性相关，其中脉络膜新生血管形成主要在被称为漆样裂纹的在视网膜(特别是)黄斑组织内的裂纹的存在下发生。这种病症可用如本文所述的调节剂，例如间隙连接和/或连接蛋白调节剂、或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂进行治疗。囊性黄斑病变囊性黄斑病变是黄斑中或黄斑周围的囊肿，并且可用如本文所述的调节剂，例如间隙连接和/或连接蛋白调节剂、或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂进行治疗。视网膜增厚黄斑增厚(水肿)是负责中心视力的视网膜部分的肿胀或增厚。在一些方面，本文描述的调节剂可控制脉络膜毛细血管破裂，由此预防视网膜的增厚。因此，调节剂可治疗视网膜增厚。视网膜增厚可用如本文所述的调节剂，例如间隙连接和/或连接蛋白调节剂、或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂进行治疗。非渗出性amd非渗透性amd(“干性amd”)起因于视网膜色素上皮(rpe)的逐渐破坏、玻璃疣沉积物的积累和上覆光感受器的功能丧失。在一些方面，如上所述，如本文所述的单独或连同泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂一起的调节剂，例如间隙连接或连接蛋白调节剂，可治疗非渗出性amd。视网膜瘢痕形成视网膜瘢痕形成是视网膜上、视网膜中或视网膜下的瘢痕组织的发展，视网膜是眼后部的重要结构。轻度瘢痕形成可能不是严重的医学问题，但大瘢痕可引起视力失真和最终的视力丧失。护理提供者可评估患有视网膜瘢痕形成的患者以确定程度并提供关于治疗选项的建议。用于这种状况的治疗可以是侵入性的，并且医生不想推荐可能导致弊大于利的程序。出于多种原因，患者可发展视网膜瘢痕形成，所述原因包括非常严重的近视、眼组织胞浆菌病综合征和湿性年龄相关性黄斑变性。它从对视网膜的刺激开始，所述刺激引起炎症并导致组织中的变化。如果这种情况重复发生，它可能开始对患者造成严重问题。它可能使视网膜表面起皱纹或可引起视网膜肿胀。有时，视网膜瘢痕形成引起视网膜脱离。在一些方面，调节剂，例如间隙连接和/或连接蛋白调节剂和/或泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂可控制或抑制视网膜瘢痕形成和视网膜炎症，其控制组织变化，由此预防或改善视网膜瘢痕形成。眼部缺氧眼部缺氧，包括视网膜缺氧，是许多威胁视力的病症的潜在致盲机制，所述病症包括一些类型的青光眼、视网膜中央动脉阻塞、缺血性视网膜中央静脉血栓形成、糖尿病性眼疾病的并发症(例如dme)、amd和眼纤维化。缺氧牵涉在这样的条件下发生的视网膜神经节细胞(rgc)的丧失。rgc死亡通过细胞凋亡或坏死而发生。缺氧-缺血诱导缺氧诱导因子-1α及其靶基因如血管内皮生长因子(vegf)和一氧化氮合酶(nos)的表达。vegf的产生增加导致血液视网膜屏障的破坏，导致视网膜水肿。nos的表达增强导致增加的一氧化氮产生，其可能对细胞有毒性，导致它们的死亡。在缺氧-缺血条件下过量的谷氨酸盐释放通过活化离子型和代谢型谷氨酸受体对rgc造成兴奋性毒性损害。谷氨酸受体的激活被认为通过生物化学效应的级联例如神经元nos活化起始视网膜中的损害，并且细胞内ca2+的增加是rgc丧失的主要促成因素。在眼后段中，糖尿病相关的视网膜缺氧可导致纤维化和牵引性视网膜脱离，这是晚期糖尿病视网膜病变(dr)的并发症。在视网膜下，类似的纤维化可在与新生血管性年龄相关性黄斑变性(amd)相关的视网膜下出血之后发生。调节剂例如连接蛋白调节剂例如连接蛋白43调节剂的治疗有效量是有效减缓、停止或逆转眼神经病变或治疗本文所述的眼部病症中的任何的任何量。间隙连接和/或连接蛋白多核苷酸或寡核苷酸可选自例如经修饰的或未经修饰的连接蛋白多核苷酸或寡核苷酸，例如经修饰的或未经修饰的连接蛋白43反义多核苷酸或寡核苷酸。在一些实施例中，经修饰的连接蛋白反义多核苷酸、或寡核苷酸或多核苷酸包含经修饰的和未经修饰的核苷酸的混合物。在一些方面，本文方法中使用的连接蛋白43反义化合物是包含天然存在的核碱基和未经修饰的核苷间键的反义寡核苷酸。在一些方面，间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂是抑制和/或阻断间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白，或抑制和/或阻断间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白的上游激动剂的拮抗剂。在一些方面，间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白拮抗剂包括例如结合并抑制间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白的拮抗剂，抑制间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白表达的化合物，和/或包含间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白抑制剂或者编码阻断或抑制间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白的蛋白质或反义多核苷酸的病毒载体。在一些方面，抑制间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白和/或间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白的上游激动剂的种类可以是抗体或抗体片段、纳米抗体、肽或拟肽、受体片段、重组融合蛋白、适体、小分子或单链可变片段(scfv)。本文的方法提供以足以降低眼内压的量治疗眼内压相关的视神经病变如青光眼。在一些方面，泛连接蛋白调节剂和连接蛋白调节剂可用于治疗与眼内压升高相关的创伤。在一些方面，本发明的组合物、制造物品和方法可用于将眼内压降低至正常水平，例如21mmhg以下，例如21、20或19mmhg以下。在一些方面，例如，本发明的连接蛋白调节剂和泛连接蛋白调节剂和方法可用于将眼内压降低至例如约8至约21mmhg之间、约10至约22mmhg之间、约10和21mmhg之间、或约12至约21mmhg之间。在一些方面，本发明的组合物和方法也可用于治疗青光眼性视神经病变，即使在不存在高眼内压的情况下。在一些实施例中，连接蛋白调节剂是例如连接蛋白43调节剂或连接蛋白45调节剂，优选连接蛋白43调节剂。在一些方面，连接蛋白调节剂是cx26、cx30、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx50、cx57或者眼或血管中的任何其他连接蛋白的调节剂。在一些方面，连接蛋白调节剂可包括或排除前述中的任何。本发明的特征在于包含至少一个未经修饰的核苷酸的连接蛋白或泛连接蛋白反义寡核苷酸或多核苷酸。在一个方面，连接蛋白反义寡核苷酸或多核苷酸可包含至少一个经修饰的核苷酸，和/或具有至少一个经修饰的核苷间键和/或至少一个经修饰的糖部分。经修饰的核苷间键可以是例如硫代磷酸酯键。在一些方面，例如，连接蛋白43多核苷酸可包括包含构象应变核苷酸的至少一个核苷酸，例如锁定核酸(lna)或桥接核酸(bna)。锁定核苷酸可选自下述类型之一，例如：2′-o—ch2-4′(氧基-lna)、2′-ch2—ch2-4′(亚甲基-lna)、2′—nh—ch2-4′(氨基-lna)、2′—n(ch3)—ch2-4′(甲基氨基-lna)、2′-s—ch2-4′(硫代-lna)和2′-se—ch2-4′(硒基-lna)。在一些方面，经修饰的核苷酸可以是锁定核酸或解锁核酸。在一些实施例中，连接蛋白反义寡核苷酸或多核苷酸是例如连接蛋白43反义寡核苷酸或多核苷酸或者连接蛋白45反义寡核苷酸或多核苷酸，优选连接蛋白43反义寡核苷酸或多核苷酸。在一些实施例中，连接蛋白反义寡核苷酸或多核苷酸是例如cx26、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx50、cx57或者眼或血管中的任何其他连接蛋白的调节剂。本文的特征还在于示例性的经修饰的或未经修饰的连接蛋白43反义化合物，其包含选自seqidno:1-16的核苷酸序列或从选自seqidno:1-16的核苷酸序列修饰，和/或可包括或排除在本公开内容的方法、组合物、试剂盒和制造物品中。本发明的多核苷酸包括具有小于80个核苷酸的长度，例如12-18至约50-80个核苷酸，优选约30个核苷酸或更少，例如12至约30个核苷酸，且更优选约15至约30个核苷酸的合成多核苷酸。在一个例子中，多核苷酸具有30个核苷酸。在一些方面，本发明的方法的特征在于使用包含选自seqidno:1-17的核苷酸序列的长度高达40个核苷酸，例如长度15至40个核苷酸，或包含seqidno:17的约8至40个核苷酸的连接蛋白43反义化合物。表1.示例性连接蛋白43反义寡核苷酸的列表表1列出了示例性连接蛋白43多核苷酸调节剂的多核苷酸序列。当提供序列如seqidno:1-16时，它们代表经修饰的和未经修饰的寡核苷酸或多核苷酸两者。在一些实施例中，可修饰核苷酸之间的键，以及核苷酸的糖部分的结构。在一些实施例中，任何两个核苷酸之间的核苷间键可以是标准的磷酸二酯键。在一些实施例中，任何两个核苷酸之间的核苷间键可以是硫代磷酸酯键。例如，seqidno:1可以是下述选择的结构之一：gstsasasttgcggcaagaagaattgtttcstsgstsc，其中“s”表示两个核苷酸之间的硫代磷酸酯键。作为另一个非限制性例子，seqidno:1可以是(g)(t)(a)(a)ttgcggcaagaagaattgtttc(t)(g)(t)(c)，其中括号内的核苷酸具有经修饰的糖部分，如下文描述的。示例性序列显示于表2中，其可用于治疗特征在于不希望的zo-1蛋白或zo-1蛋白活性，或者将受益于zo-1蛋白或zo-1蛋白活性减少的眼部疾病、病症和状况。表2.示例性zo-1asodn的列表。表2列出了zo-1asodn(反义寡脱氧核糖核苷酸)、shrna(小发夹rna分子)和sirna(小干扰rna分子)的多核苷酸序列。zo-1最初在紧密连接处被鉴定，其在细胞内形成网络。该结构仅存在于在细胞-细胞接触区处的两个细胞之间的交叉处。zo-1是220-kda膜蛋白，其与跨膜蛋白闭合蛋白和闭锁蛋白共定位。随后，zo-1在粘附连接处得到证明并鉴定，所述粘附连接将细胞结合在一起，并且由此维持细胞和组织极性。这些连接还锚定细胞骨架，允许在质膜处形成大复合物。选择用于合成靶向zo-1的反义多核苷酸的一个序列5’-ctgctttctgttgagaggct-3’(seqidno:325)对应于来自muszo1登录号d14340i中的碱基对3154–3169的区段。在一些方面，连接蛋白43反义化合物靶向编码具有选自seqidno:17的核碱基序列的连接蛋白的核酸分子的至少约8个核碱基。多核苷酸和寡核苷酸，例如连接蛋白43反义化合物，可具有seqidno:17的约8至约20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、55、60、65、70、75或约80个核苷酸或与其互补的序列，和/或反义多核苷酸或寡核苷酸可含有任何两个所述长度之间的任何长度范围。本发明的多核苷酸包括具有小于80个核苷酸的长度，例如12-18至约50-80个核苷酸，优选约30个核苷酸或更少，例如12至约30个核苷酸，且更优选约15至约30个核苷酸的合成多核苷酸。在一个例子中，多核苷酸具有30个核苷酸。在一些方面，本发明的方法的特征在于使用包含选自seqidno:1-17的核苷酸序列的长度高达40个核苷酸，例如长度15至40个核苷酸的连接蛋白43反义化合物。在一些方面，本发明的方法的特征在于使用包含选自seqidno:4-17的核苷酸序列的长度高达40个核苷酸，例如长度15至40个核苷酸的连接蛋白43反义化合物。人cx43,α1(seqidno:17)locusnm_0001653088bpmrna线性pri26-oct-2004definition智人间隙连接蛋白，α1，43kda(连接蛋白43)(gja1),mrna。在一些实施例中，糖部分可以是修饰的糖部分。在一些实施例中，经修饰的糖部分可以是其为构象应变的糖的糖部分。在一些实施例中，构象应变的糖可以是锁定核苷酸(锁定核酸或lna)。在一些实施例中，锁定核苷酸可选自下述类型之一：2′-o—ch2-4′(氧基-lna)、2′-ch2—ch2-4′(亚甲基-lna)、2′—nh—ch2-4′(氨基-lna)、2′—n(ch3)—ch2-4′(甲基氨基-lna)、2′-s—ch2-4′(硫代-lna)和2′-se—ch2-4′(硒基-lna)。在一些实施例中，构象应变的糖可以是桥接核酸(bna)。如式iii中所示，构象应变的糖可以是锁定核酸。在一些方面，核苷化合物的糖部分可以是呋喃核糖。相应地，特别合适的取代基x是氧。然而，其他不同的可替代糖部分也是合适的，并且一般考虑经修饰的糖和碳环部分也视为适用于本文。相应地，x还可包括除氧外的原子或基团，并且尤其考虑的可替代基团x包括其中糖是硫糖的s、ch2、c＝o、c＝ch2或其中糖是碳环化合物的共价键、以及其中糖是氨基糖的nr(其中r选自氢、烷基、烯基、炔基、芳基和酰基)。基团y和z也可改变。在一些方面，取代基y和z可选自：o、s、ch2、nr、c＝o、c＝ch2或共价键，其中r选自氢、烷基、烯基、炔基、芳基和酰基。在一些实施例中，q可选自无、o、s、nhr或ch2，其中r选自氢、烷基、烯基、炔基、芳基和酰基。在一些实施例中，b可以是选自下述类型的碱基之一的碱基：取代和未被取代的脱氮嘌呤、氮杂嘌呤、脱氮嘧啶、嘌呤、嘧啶和氮杂嘧啶。如本文使用的，术语“取代的”指一个或多个官能团的添加，其中特别考虑的官能团包括亲核基团(例如：-nh2、-oh、-sh和-nc)和亲电子基团(例如：c(o)or和c(x)oh)、极性基团、非极性基团(例如：芳基、烷基、烯基或炔基)、离子基团(例如：-nh3+)和卤素(-f、-cl、-i、-br)及其所有化学上合理的组合。在一些方面，b选自下述之一：腺苷、胸腺嘧啶、尿嘧啶、鸟嘌呤和胞嘧啶。基团r1、r2和r3可选自无、-h、-oh、-och3、烷基且尤其选自甲基、-o-酰基、-n3、-cn和卤素。此外，当考虑的核苷类似物包括磷酸酯、膦酸酯基或硫代磷酸酯基时，考虑尤其合适的r1和/或r2基团包括单磷酸酯、二磷酸酯、三磷酸酯、单膦酸酯、二膦酸酯、三膦酸酯、硫代磷酸酯、具有糖oh基的氨基酸酯，或者单磷酸酯、二磷酸酯、三磷酸酯、单膦酸酯、二膦酸酯、三膦酸酯或硫代磷酸酯的前药。如式iv所示，锁定核酸的结构还可包含作为氧(“o”)的z，y是ch2，q是无，且r3是无。基团b、r1和r2可选自如上所述的基团。对于上文阐述的马库什组中的任何，在一些实施例中，每个组可包括或排除对于该组列出的种类中的任何。如式v中所示，构象应变核苷酸的结构可以是桥接核酸(bna)。基团x、y、z、r1、r2、r3和b可选自如上所述的基团。在一些实施例中，连接蛋白43调节剂可包含肽。肽序列可包含例如下述序列中的一个或多个：srptekt“mod3”，(seqidno:173)，“肽1”adcflsrptekt(seqidno:291)，“肽2”vacflsrptekt(seqidno:292)，“肽11”vdcflsrptakt(seqidno:293)，“肽12”vdcflsrpteat(seqidno:294)，“肽5”vdcflsrptekt(seqidno:168)，“mod1”cflsrptekt(seqidno:171)，“mod2”lsrptekt(seqidno:172)。在一些实施例中，羧基末端可以是经修饰的。在一些方面，羧基末端修饰可包含正烷基链，其可任选进一步连接至氢或其他部分。在一些实施例中，连接蛋白43肽可包括或排除上文列出或本文公开的肽中的任何。在本发明的一些方面，连接蛋白43反义寡核苷酸或多核苷酸与具有选自seqidno:1至64的序列的多核苷酸具有至少约80％、85％、90％、95％、97％、98％或99％同源性。本文的特征还在于包含seq.id.no:217的8至约80个核苷酸的经修饰的或未经修饰的连接蛋白45反义多核苷酸，以及包含seq.id.no:279的8至约80个核苷酸的经修饰的和未经修饰的泛连接蛋白反义多核苷酸。本发明的多核苷酸包括具有小于80个核苷酸的长度，例如12-18至约50-80个核苷酸，优选约30个核苷酸或更少，例如12至约30个核苷酸，且更优选约15至约30个核苷酸的合成多核苷酸。在一个例子中，多核苷酸具有30个核苷酸。在一些方面，本发明的方法的特征在于使用长度高达40个核苷酸，例如长度15至40个核苷酸，例如包含seqidno:217的约8至约40个或约15至约40个核苷酸的连接蛋白45反义化合物。在一些方面，本发明的方法的特征在于使用长度高达40个核苷酸，例如长度15至40个核苷酸，例如包含seqidno:283-287的约8至约40个或约15至约40个核苷酸的泛连接蛋白反义化合物。在一些实施例中，可通过用一个或多个尿苷核苷酸残基置换seqidno:217或seqidno:283-287中的一个或多个胸腺嘧啶核苷酸来修饰连接蛋白45或泛连接蛋白反义化合物。人cx45,α7(seqidno:217)locusnm_0054971191bpmrna线性pri23-dec-2003definition智人间隙连接蛋白，α7，45kda(连接蛋白45)(gja7),mrna。在本发明的一些方面，连接蛋白43反义寡核苷酸或多核苷酸与具有选自seqidno:1至17的序列的多核苷酸具有至少约80％、85％、90％、95％、97％、98％或99％同源性。其为寡核苷酸或多核苷酸的连接蛋白或泛连接蛋白调节剂可与其分别序列的8至80个氨基酸部分具有至少约80％、85％、90％、95％、97％、98％或99％同源性。例如，其为寡核苷酸或多核苷酸的连接蛋白45调节剂可与seqidno:217的8至80个核苷酸部分具有至少约80％、85％、90％、95％、97％、98％或99％同源性，而其为寡核苷酸或多核苷酸的泛连接蛋白调节剂可与seqidno:283(panx1多核苷酸)(panx1多核苷酸refseqidnm_015368.3)、seqidno:284(panx2多核苷酸)(关于变体1的panx2多核苷酸refseqidnm_052839.3)、seqidno:285(关于panx2多核苷酸变体2的refseqidnm_001160300.1)、seqidno:286(关于panx2多核苷酸变体3的refseqidnr_027691.1)、或seqidno:287(panx3多核苷酸)(panx3多核苷酸refseqidnm_052959.2)的8至80个核苷酸部分具有至少约80％、85％、90％、95％、97％、98％或99％同源性。在一些方面，泛连接蛋白调节剂可包括或排除泛连接蛋白肽序列。泛连接蛋白肽序列可包含多肽seqidno:288(panx1肽)、seqidno:289(panx2肽)、或seqidno:290(panx3肽)的8-40个连续氨基酸、细胞外结构域、细胞内结构域、羧基末端部分或氨基末端部分。在其他实施例中，连接蛋白调节剂是连接蛋白肽或拟肽，有时称为抗连接蛋白肽或拟肽，例如抗连接蛋白半通道阻断肽或拟肽，例如包含连接蛋白的细胞外结构域、跨膜区和连接蛋白羧基末端肽的经修饰的或未经修饰的肽或拟肽)。抗连接蛋白半通道阻断肽或拟肽可以是经修饰的或未经修饰的。抗连接蛋白半通道阻断肽或拟肽可以是化学制备、合成制备或以其他方式制造的。在一些实施例中，连接蛋白调节剂是连接蛋白43肽或拟肽。在一些方面，治疗有效的经修饰的或未经修饰的肽或拟肽包含连接蛋白，例如连接蛋白43或连接蛋白45的细胞外或跨膜结构域的一部分。在一些方面，肽或拟肽包含连接蛋白cx26、cx30、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx50、cx57或者眼或血管中的任何其他连接蛋白的细胞外或跨膜结构域的一部分。在其他实施例中，调节剂是泛连接蛋白肽或拟肽，有时称为抗泛连接蛋白肽或拟肽，例如，经修饰的或未经修饰的肽或拟肽。在其他实施例中，调节剂是泛连接蛋白肽或拟肽，有时称为抗泛连接蛋白泛连接蛋白或拟肽，例如，经修饰的或未经修饰的肽或拟肽。在一些方面，连接蛋白调节剂可包括或排除前述中的任何。在一些实施例中，本发明的连接蛋白调节剂包括抗连接蛋白43肽或拟肽，例如本文所述的任何肽，包括包含连接蛋白的细胞外结构域的一部分的肽，以及包含可用于本发明方法中的连接蛋白的羧基末端部分的一部分的肽，其是治疗有效的，例如，有效治愈本文所述的神经性眼部病症中的任何。在一些方面，治疗有效的经修饰的或未经修饰的肽或拟肽包含连接蛋白，例如连接蛋白43或连接蛋白45，优选连接蛋白43的细胞外结构域的一部分。连接蛋白43的蛋白质序列显示于下文。连接蛋白43(seqidno.:19)表3显示了连接蛋白43和连接蛋白45的细胞外环。在一些实施例中，治疗有效的经修饰的或未经修饰的肽或拟肽包含连接蛋白，例如连接蛋白43或连接蛋白45，优选连接蛋白43的e2细胞外结构域的一部分。在一些实施例中，治疗有效的经修饰的或未经修饰的肽或拟肽包含连接蛋白，例如连接蛋白43或连接蛋白45，优选连接蛋白43的c末端结构域的一部分。如果肽或拟肽调节剂包含连接蛋白的细胞内结构域的一部分，则在一些实施例中，肽可与细胞内化转运蛋白缀合，并且在一些情况下可阻断闭锁小带蛋白(zo-1)与连接蛋白43的结合。表3.连接蛋白43和连接蛋白45的细胞外环不同连接蛋白同种型的e2结构域的序列显示具有与表4中以粗体显示的肽seqidno:35和肽seqidno:36同源的氨基酸。注意，肽seqidno:36的最后4个氨基酸是第四个膜结构域的部分。表4提供了用于开发本文所述的肽抑制剂的连接蛋白家族成员的细胞外结构域。在某些非限制性实施例中，表4中提供的肽及其片段用作肽抑制剂。在其他非限制性实施例中，包含该表中的肽的约8至约15个、或约11至约13个氨基酸邻接氨基酸的肽是本发明的肽抑制剂。在其他实施例中，对肽或其片段进行保守氨基酸改变。表4.细胞外结构域已知抑制可调节连接蛋白活性的连接蛋白间结合的其他肽序列是连接蛋白43(氨基酸119-144)l2肽的细胞质环和连接蛋白43的l2肽的亚部分。在一些实施例中，这些肽可包括或排除例如gap19的九个氨基酸的序列，kqieikkfk(seqidno:299)；天然gap19序列，dgvnvemhlkqieikkfkygieehgk(seqidno:300)；如通过shibayama(shibayama,j.等人，biophys.j.91,405404063,2006)报道的gap19的his144→glul2衍生物，dgvnvemhlkqieikkfkygieeqgk(seqidno:301)；tat-gap19序列，ygrkkrrqrrrkqieikkfk(seqidno:302)；sh3结合结构域，cssptaplspmsppgyk(seqidno:303)或其亚部分ptaplspmspp(seqidno:304)；ct9或ct10肽的c末端序列，具有或不具有增加细胞穿透的tat前导序列，rprddei(seqidno:305)，srprddlei(seqidno:307)，ygrkkrrqrrrsrprddei(seqidno:306)，或ygrkkrrqrrrrprddei(seqidno:308)。可包括或排除在本文公开的组合物、方法、试剂盒或制造物品中的其他拟肽序列是由dhein(dhein,s.,naunyn-schmiedeberg’sarch.pharm.,350:174-184,1994)报道的那些；aap10肽，h2n-gly-ala-gly-4hyp-protyr-conh2(seqidno:309)和zp123肽(rotigapeptide)，ac-d-tyr-pro-d-4hyp-gly-d-ala-gly-nh2(seqidno:310)，(dhein,s.等人cellcommun.adhes.10,371-378,2013)。rotigapeptide由肽的d形式构成，用于超过肽的天然l形式的增强的功效。抗泛连接蛋白试剂的例子是抗泛连接蛋白多核苷酸，包括下文描述的抗泛连接蛋白反义寡脱氧核苷酸(“odn”)。抗泛连接蛋白多核苷酸的例子包括抗泛连接蛋白寡脱氧核苷酸，包括反义(包括经修饰的和未经修饰的主链反义)、rnai、以及mirna和sirna。合适的抗泛连接蛋白肽包括结合例如泛连接蛋白细胞外结构域或泛连接蛋白细胞内结构域的肽。合适的抗泛连接蛋白试剂包括例如针对panx1的反义odn、肽和拟肽。包括的肽或拟肽是抗泛连接蛋白肽或拟肽，例如，泛连接蛋白复合物阻断肽(例如，抗泛连接蛋白抗体和抗体结合片段)或拟肽(例如，针对泛连接蛋白的一个或多个细胞外或细胞内区域的拟肽)。拟肽可与一种或多种其他试剂例如触角足(antennapedia)复合，以便促进膜转运用于结合到细胞内泛连接蛋白区域和结构域。术语“肽”、“拟肽”和“模拟物”包括合成的或遗传工程化的化学化合物，其可具有它们模拟其的蛋白质区域基本上相同的结构和功能特征。在连接蛋白的情况下，这些可模拟例如涉及连接子-连接子对接和细胞-细胞通道形成的相对连接蛋白的细胞外环，和/或半通道连接蛋白的细胞外环。如本文使用的，术语“肽类似物”指具有与模板肽类似的性质的化合物，并且可以是非肽药物。包括肽和基于肽的化合物的“拟肽”(也称为肽模拟物)也包括这样的非基于肽的化合物，例如肽类似物。在结构上类似于治疗有用的肽的拟肽可用于产生等价或增强的治疗或预防效应。在一些方面，肽和拟肽可以是经修饰的或未经修饰的。一般地，拟肽是范例多肽(即，具有生物学或药理学功能或活性的多肽)的结构或功能性模拟物(例如，相同或相似)，但也可具有一个或多个肽键任选替换为选自例如-ch2nh-、-ch2s-、-ch2-ch2-、-ch＝ch-(顺式和反式)、-coch2-、-ch(oh)ch2-和-ch2so-的键。模拟物可完全由天然氨基酸、合成化学化合物、氨基酸的非天然类似物组成，或者是部分天然肽氨基酸和部分非天然氨基酸类似物的嵌合分子。模拟物还可包含任何量的天然氨基酸保守置换，只要这样的置换基本上不改变模拟活性。在连接蛋白的情况下，这些可模拟例如涉及连接子-连接子对接和细胞-细胞通道形成的相对连接蛋白的细胞外环。例如，模拟组合物可用作间隙连接调节试剂，如果它能够下调连接子的生物学作用或活性，例如预防连接子对接以形成间隙连接介导的细胞-细胞通讯，或预防连接子的开放以使细胞质暴露于细胞外环境。拟肽包括本文所述的那些，以及如可以是本领域已知的那些，无论是现在已知的还是后来开发的。肽和拟肽连接蛋白调节剂也可进行修饰，以增加稳定性、改善生物利用度和/或增加细胞膜通透性。在本发明的一些方面，连接蛋白调节剂是肽或拟肽。在本公开内容的某些实施例中可包括或排除的示例性连接蛋白43(cx43)或cx26、cx30、cx30.3、cx31、cx31.1、cx32、cx36、cx37、cx40.1、cx43、cx46、cx46.6或cx40肽调节剂在下表64中提供(e2和t2指肽在例如第二细胞外结构域或第二跨膜结构域中的位置)。表64在一些实施例中，连接蛋白43调节剂可包括例如包含例如seqidno:173(srptekt)的肽或拟肽。肽或拟肽还可包含例如seqidno:168(vdcflsrptekt)。肽可含有一个或多个经修饰的氨基酸、氨基酸类似物，或可以其他方式进行修饰，以改善生物利用度或增加穿过细胞膜的穿透。例如，可修饰seqidno:168以获得seqidno:300-306。在一些方面，包含例如seqidno:173(srptekt)或seqidno:168(vdcflsrptekt)的肽或拟肽包含7至40个氨基酸或氨基酸类似物，并且不包含c末端肽。在一些实施例中，肽也可用作前体部分。在一些方面，连接蛋白45调节剂可以是包含连接蛋白45蛋白的一部分的肽或拟肽，其拮抗或抑制或阻断连接蛋白-连接蛋白相互作用。连接蛋白45肽和拟肽调节剂的示例性肽序列在表63中提供。表63.连接蛋白45调节剂肽或拟肽的序列在一些实施例中，连接蛋白45调节剂可包含例如肽或拟肽，其包含连接蛋白45的e2或c末端结构域的一部分，例如包含seqidno:280(srptekt)。肽或拟肽还可包含例如seqidno:279(dcfisrptekt)。在一些实施例中，肽可仅为长度3个氨基酸，包括srl、pch、lcp、chp、iyy、skf、qpc、vcy、apl、hvr或更长。在一些方面，连接蛋白40调节剂可以是包含连接蛋白40蛋白的一部分的肽或拟肽，其拮抗或抑制连接蛋白-连接蛋白相互作用。肽化学修饰在某些实施例中，本发明的连接蛋白43调节剂肽可在氨基或羧基末端处连接到细胞内化转运蛋白。与本发明的连接蛋白43调节剂肽连接的细胞内化转运蛋白可以是本领域已知或新近发现的任何内化序列或其保守变体。细胞内化转运蛋白和序列的非限制性例子包括触角足序列、tat、hiv-tat、穿膜肽、antp-3a(antp突变体)、buforinii、transportan、map(模型两亲肽)、k-fgf、ku70、朊病毒、pvec、pep-1、synb1、pep-7、hn-1、bgsc(双胍鎓-亚精胺-胆固醇和bgtc(双胍鎓-tren-胆固醇)。示例性细胞内化肽的序列在下表65中提供。表65seqidno.标识符序列seqidno:201antprqpkiwfpnrrkpwkkseqidno:202hiv-tatgrkkrrqrppqseqidno:203transportangwtlnsagyllgkinkalaalakkilseqidno:204buforiniitrssraglqfpvgrvhrllrkseqidno:205tatrkkrrqrrrseqidno:206穿膜肽rqikiwfqnrrmkwkkseqidno:207mapklalklalkalkaalklaseqidno:208k-fgfaavallpavllallapseqidno:209ku70vpmlkpmlkeseqidno:210朊病毒manlgywllalfvtmwtdvglckkrpkpseqidno:211pveclliilrrrirkqahahskseqidno:212pep-1ketwwetwwtewsqpkkkrrvseqidno:213synb1rggrlsysrrrfststgrseqidno:214pep-7sdlwemmmvslacqyseqidno:215hn-1tsplnihngqklseqidno:314plslrvirvwfqnkrckdkkseqidno:315mgb肽p-βgalflgflgaagstmgawsqpkkkrkvseqidno:316mgb肽p-αgalflaflaaalslmglwsqpkkkrrv表65列出了示例性细胞内化转运蛋白的序列。在一些实施例中，连接蛋白、泛连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂肽与转运肽融合，以增加对靶细胞的渗透。在一些实施例中，转运肽可以是用于细胞穿透的病毒包被的一部分。在一些实施例中，转运肽可在羧基或氨基末端处与连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂肽融合。转运肽可选自下述肽之一：antp、hiv-tat、transportan、buforinii、tat、穿膜肽、map、k-fgf、ku70、朊病毒、pvec、pep-1、synb1、pep-7、rgd或hn-1。在一些实施例中，连接蛋白、泛连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂肽可包括或排除前述中的任何。在本发明的一个实施例中，连接蛋白43调节剂肽的氨基酸序列可选自本文所列的任何肽seqid或其保守变体。在本发明的一个进一步实施例中，连接蛋白43调节剂肽可包含seqidno:140-200的氨基酸序列。在本发明的另一个实施例中，连接蛋白43调节剂肽还包含细胞内化转运蛋白。在一个进一步实施例中，连接蛋白43调节剂肽可在氨基末端处连接到细胞内化转运蛋白。当本文提及特定蛋白质时，考虑衍生物、变体和片段。蛋白质衍生物和变体是本领域技术人员众所周知的，并且可涉及氨基酸序列修饰。例如，氨基酸序列修饰可落入三个类别中的一个或多个：插入、置换或缺失变体。插入包括氨基和/或羧基末端融合以及单个或多个氨基酸残基的序列内插入。插入可以是比氨基或羧基末端融合的那些更小的插入，例如，大约一至四个残基。缺失的特征在于从蛋白质序列中去除一个或多个氨基酸残基。置换、缺失、插入或其任何组合可组合以获得最终构建体。置换变体是其中至少一个残基已被去除并且不同残基插入其位置中的变体。这样的置换称为保守置换。用生物学和/或化学相似的另一个氨基酸残基替换一个氨基酸残基被本领域技术人员称为保守置换。保守置换可将一个疏水性残基替换为另一个疏水性残基，或将一个极性残基替换为另一个极性残基。每个明确公开的序列的保守置换变体包括在本文提供的肽内。保守置换通常对所得到的多肽的生物活性具有很少的影响或没有影响。保守置换可以是肽中的氨基酸置换，其基本上不影响肽的生物学功能。肽可包括一个或多个氨基酸置换、2-10个保守置换、2-5个保守置换或4-9个保守置换。化学结构修饰在某些实施例中，肽或拟肽的化学结构可进行合成修饰，以便增加肽的转染摄取。例如，在一些实施例中，肽或拟肽可通过经由接头部分将肽与疏水化合物缀合进行修饰。疏水化合物可以是例如一个或多个正烷基，其可以是例如c6-c14烷基。在一些实施例中，肽可在n末端与一个或两个十二烷基(c12)缀合，如以引用的方式并入本文的chen,ys等人，j.pharm.sci.,102:2322-2331(2013)中所述。在一个实施例中，肽序列cflsrptekt或vdcflsrptekt可与两个十二烷基缀合，以产生可调节连接蛋白43的经修饰的肽，“c12-c12-cxn43mp”(seqidno:326)。所得到的结构显示于图80中。图80.c12-c12-cxn43mp(seqidno:326)的结构。r1和r2可以是氢或烷基。在一些方面，r1＝r2＝正十二烷基链。抗连接蛋白调节剂药物在一些实施例中，间隙连接调节剂可以是小分子，即抗连接蛋白调节剂药物。在一些方面，抗连接蛋白调节剂药物可具有如本文所述的式i中的结构。泛连接蛋白、泛连接蛋白通道调节剂和其他间隙连接调节剂在本发明的方法中还有用的是调节剂，其包括泛连接蛋白和泛连接蛋白通道调节剂和间隙连接调节剂或连接蛋白调节剂药物，其可用于本文所述的组合物、试剂盒和方法的任何中，代替或加上连接蛋白调节剂或泛连接蛋白调节剂。用于本文特征的任何用途的本发明的调节剂还可包含间隙连接调节剂，其可抑制或阻断cx26、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx50、cx57或者眼或血管中的任何其他连接蛋白。用于本文特征的任何用途的本发明的药物组合物还可包含可抑制或阻断例如泛连接蛋白通道的泛连接蛋白调节剂。间隙连接调节剂包括连接蛋白调节剂和间隙连接药物。相应地，连接蛋白调节剂不一定是间隙连接药物调节剂，并且并非所有间隙连接药物调节剂都是连接蛋白调节剂。托那博沙、卡拉博沙和式i化合物是连接蛋白调节剂。间隙连接药物可以是例如真菌毒素、甘草次酸和甘草次酸衍生物、佛波酯、ddt、三苯甲烷、三苯乙烷、长链醇、麻醉剂、脂肪酸酰胺、灭酸酯、奎宁和奎宁衍生物、2-apb和2-apb衍生物、聚胺、环糊精和上文未讨论的肽。在一些实施例中，间隙连接药物可选自下述之一：卡马西平，辛醇，双酚a，庚醇，4-(2-丁基-6,7-二氯-2-环戊基-茚-1-酮-5-基)氧代丁酸(dcpib)，卡拉博沙，染料木黄酮，反式白藜芦醇，甘珀酸，hmg-coa还原酶抑制剂洛伐他汀，罗替加肽，美托洛尔，福司柯林，芹菜素，橘皮素，氟烷，赭曲霉毒素a真菌毒素，棒曲霉素真菌毒素，冈田酸，18-α-和18-β-甘草次酸，17-β-雌二醇甲酯，睾酮甲酯，12-o-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯(tpa)，佛波酯，1,1,1-三氯-2,2-二(对氯苯基)乙烷，三苯甲烷，三(4-氯苯基)甲醇，(2-氯苯基)(二苯基)甲烷，三苯基氯甲烷，四苯基硼酸钠，三苯氧胺，克罗米芬，恩氟烷，油酰胺，花生四烯酸乙醇胺，芳基氨基苯甲酸酯例如甲氯芬那酸和氟芬那酸，尼氟酸，5-硝基-2-(3-苯基丙基氨基)苯甲酸(nppb)，奎宁，奎尼丁，甲氟喹，pq1(甲氟喹的伯氨喹衍生物)，2-氨基苯氧基硼酸酯(2-apb)，亚精胺，精胺，含有6、7或8个吡喃葡萄糖(glycopyranose)单元的环糊精、gap26肽(val-cys-tyr-asp-lys-ser-phe-pro-ile-ser-his-val-arg)和gap27肽(ser-arg-pro-thr-glu-lys-thr-ile-phe-ile-ile)。靶向适合于破坏泛连接蛋白表达的区域的任何反义分子或shrna可用于实践本发明。在一些方面，本发明的特征在于针对泛连接蛋白的rna干扰(rnai)。如许多其他基因表达的情况，泛连接蛋白表达可通过使用rnai在体内或体外击倒。可用于rnai的一类代表性分子是短发夹rna(shrna)。一种这样的抗泛连接蛋白shrna分子可使用称为psuper-ncad的载体如下构建。靶向针对人泛连接蛋白的反义和短发夹rna也包括靶向特定序列的那些。靶向适合于破坏泛连接蛋白表达(例如panx1或panx2或panx3的表达)的区域的任何反义分子或shrna可用于实践本发明。在一些方面，本发明的特征在于针对panx1或panx2或panx3的rna干扰(rnai)。如许多其他基因表达的情况，可通过使用rnai在体内或体外击倒panx1或panx2或panx3表达。可用于rnai的一类代表性分子是短发夹rna(shrna)。panx1的抑制剂可包括丙磺舒、甲氟喹和甘珀酸、或抗肽。化学递送修饰本发明的调节剂，包括间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白和泛连接蛋白通道调节剂，也可配制成微粒(微球，mp)或纳米颗粒(纳米球，np)制剂或两者。颗粒眼部药物递送系统包括纳米颗粒(1至1,000nm)和微粒(1至1,000μm)，其进一步分类为纳米球和微球以及纳米胶囊和微胶囊。在纳米胶囊和微胶囊中，药物颗粒或液滴被截留在聚合物膜中。颗粒系统具有通过注射的眼内递送的优点，并且它们的尺寸和聚合物组成显著影响它们在体内的生物学行为。微球可比纳米球在玻璃体中保留更长的时间段，因此，微粒在玻璃体内注射后像储库起作用。纳米颗粒迅速扩散并且在前段和后段的眼部组织和细胞中内化。本发明还提供了用于以组合制剂形式共施用的药物组合物，例如作为两种或更多种调节剂的混合物，例如可以是经修饰的或未经修饰的间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂，例如一种或多种间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂多核苷酸以及一种或多种间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节肽或拟肽。术语“组合制剂”包括“部分试剂盒(kitofparts)”或“制造物品”的意义是如上定义的组合配偶体可独立地给药或通过使用具有不同量的组合配偶体(a)和(b)的不同固定组合，即同时、分开或序贯给药，所述组合配偶体无论是药物形式还是敷料/基质形式或两者。然后，试剂盒的各部分可例如同时或按时间顺序交错施用，所述交错施用即在不同的时间点并且对于部分试剂盒的任何部分具有相等或不同的时间间隔。在一个实施例中，施用组合制剂，其中将两种或更多种分开的调节剂组合物施用于受试者，其中第一组合物包含治疗有效量的调节剂，例如间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂，例如抗连接蛋白43多核苷酸、肽或拟肽或半通道关闭化合物，并且第二组合物包含治疗有效量的第二调节剂，例如间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂或眼部治疗试剂，例如抗连接蛋白43多核苷酸、肽或拟肽、半通道关闭化合物和/或眼部治疗试剂。在另一个实施例中，施用包含一种或多种抗连接蛋白多核苷酸、肽或拟肽、半通道关闭化合物和/或眼部治疗试剂的第三组合物。提供药物组合物用于单次、组合、同时、分开、序贯或持续施用。在一个实施例中，包含一种或多种间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂多核苷酸的组合物以一个或多个所需剂量施用一次或多次。在另一个实施例中，包含一种或多种间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂的组合物与一种或多种肽或拟肽间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂大约同时施用。当两种组合物在不同时间施用时，它们可在例如30分钟、1小时、1天、1周或1个月部分、或任何两个所述时间段之间的任何时间间隔内施用。在一个实施例中，例如，包含一种或多种抗连接蛋白多核苷酸的组合物与一种或多种抗连接蛋白肽或拟肽大约同时施用。在一个实施例中，在一种或多种间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂肽的至少约三十分钟内施用包含一种或多种间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂多核苷酸的组合物。在一个实施例中，在一种或多种间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂肽或拟肽的至少约一小时内施用包含一种或多种间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂多核苷酸的组合物。在一个实施例中，在一种或多种间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂肽或拟肽的至少约十二小时内施用包含一种或多种间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂多核苷酸的组合物。在一个实施例中，在一种或多种间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂肽或拟肽的至少约二十四小时内施用包含一种或多种间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂多核苷酸的组合物。在另一个实施例中，在彼此的约一小时内，在彼此的约一天内，或在彼此的约一周内施用抗连接蛋白多核苷酸和间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂肽或拟肽。其他实施例包括施用一种或多种间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂多核苷酸和/或一种或多种抗连接蛋白肽或拟肽(例如，可用于伤口愈合的包含连接蛋白细胞外和/或连接蛋白羧基末端肽的抗连接蛋白肽或拟肽)，以及可用于伤口愈合的一种或多种间隙连接关闭化合物，可用于伤口愈合的一种或多种半通道关闭化合物，和/或可用于伤口愈合的一种或多种连接蛋白羧基末端多肽。调节剂剂量可qd，bid，tid，qid或以每周剂量例如qiw、biwqw施用。它们还可prn和临睡时施用。剂型和制剂和施用除非另有明确说明，否则关于施用的所有描述均适用于本发明的调节剂，包括间隙连接调节剂、泛连接蛋白通道调节剂、连接蛋白调节剂和泛连接蛋白调节剂。本发明的调节剂，包括半通道、间隙连接和/或泛连接蛋白调节剂，可如本文所述进行给药、施用或配制。本发明的调节剂，包括半通道、间隙连接和/或泛连接蛋白调节剂，可施用于患有眼部神经病变的需要治疗的受试者。因此，根据本发明，提供了可通过其调节泛连接蛋白和/或连接蛋白(例如连接蛋白43或连接蛋白45)和/或可以瞬时和位点特异性方式下调细胞-细胞通讯的制剂。调节剂，包括间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白和泛连接蛋白通道调节剂可以基本上分离的形式存在于制剂中。应理解产品可与不干扰产品预期用途的载体或稀释剂混合，并且仍视为基本上分离的。本发明的产品也可以是基本上纯化的形式，在这种情况下，其一般包含约80％、85％或90％，例如至少约88％、至少约90、95或98％，或至少约99％的多核苷酸，例如(或其他连接蛋白调节剂，例如连接蛋白43调节剂)或制剂的干质量。在一个实施例中，间隙连接、连接蛋白和/或调节剂是经修饰的或未经修饰的连接蛋白43或45反义多核苷酸或寡核苷酸、经修饰的或未经修饰的连接蛋白肽或抗连接蛋白43或45拟肽。在一些实施例中，连接蛋白调节剂可阻断或减少半通道开放。在一些实施例中，施用经修饰的或未经修饰的连接蛋白肽或拟肽，以阻断半通道或间隙连接功能和/或发挥减少连接蛋白表达或者半通道或间隙连接形成的调节效应，例如通过下调连接蛋白的表达。在一些实施例中，在施用经修饰的或未经修饰的抗连接蛋白多核苷酸或寡核苷酸之前施用经修饰的或未经修饰的连接蛋白肽或拟肽，以在通过多核苷酸或寡核苷酸下调连接蛋白表达之前阻断半通道或间隙连接功能。在一些实施例中，连接蛋白调节剂是连接蛋白43调节剂。本发明的药物制剂还可包含适合于将调节剂(包括间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白和泛连接蛋白通道调节剂)递送至眼的一种或多种药学上可接受的赋形剂。在一些方面，将泛连接蛋白调节剂或连接蛋白调节剂(例如连接蛋白43调节剂或连接蛋白45调节剂，优选连接蛋白43调节剂)施用于受试者的眼将治疗有效量的连接蛋白调节剂或泛连接蛋白调节剂提供给眼或眼的特定区室。在一些情况下，可通过局部、角膜、玻璃体内、结膜下或眼周施用来施用间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂。在一些方面，施用还可以是腹膜内施用或肠胃外施用，条件是治疗有效剂量接触眼。在本发明方法的一些方面，间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂可通过注射，例如通过眼内注射、玻璃体内注射或通过眼周途径，包括结膜下、眼球后、眼球周和后部球筋囊下注射而施用于眼。在一些方面，间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂可提供给小梁网或者直接注射到小梁网内或小梁网附近。在一些方面，结膜下施用可提供持续递送，同时使剂量频率降到最低。在一些实施例中，结膜下施用可增加亲水性药物的生物利用度，因为它们不必穿透结膜上皮。在一些实施例中，微针、针、离子电渗装置或植入物可用于施用连接蛋白调节剂或泛连接蛋白调节剂。植入物可以是例如可溶性盘材料，例如在s.pflugfelder等人，acsnano,9(2)，第1749–1758页(2015)中描述的那种。调节剂，例如本发明的间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂也可施用在小梁网或睫状体处或者小梁网或睫状体附近，使得间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂分别接触小梁网和/或睫状体。调节剂，例如间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节剂可施用一次或超过一次。连接蛋白调节剂可以是例如连接蛋白43调节剂或连接蛋白45调节剂，优选是连接蛋白43调节剂。在一些实施例中，微针可用于将本发明的组合物中的任何递送至脉络膜。例如，在一些实施例中，将调节剂例如连接蛋白43调节剂施用于受试者，例如受试者的眼，从而将治疗有效量的调节剂提供给眼或眼的特定区室。在一些情况下，调节剂例如连接蛋白43或泛连接蛋白1或泛连接蛋白1通道调节剂可通过局部、角膜、玻璃体内、结膜下或眼周施用进行施用。在一些方面，施用也可以是腹膜内施用。在一些实施例中，微针、针、离子电渗装置或植入物可用于施用调节剂，例如连接蛋白43调节剂。调节剂例如本发明的连接蛋白43调节剂也可施用于小梁网或睫状体。在一些方面，调节剂例如本发明的连接蛋白43调节剂可经由心室内、和/或鞘内、和/或硬膜外、和/或硬膜下和/或硬膜外途径施用。调节剂，例如间隙连接通道调节剂，例如肽5，和/或其类似物或前药，式i化合物，例如托那博沙，以及前述化合物中任何的类似物或前药，和/或泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂，例如式vi化合物，例如丙磺舒及其类似物或前药，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂，例如10panx1，或其类似物或前药可单独或与一种或多种另外的成分组合施用，并且可配制成包括一种或多种药学上可接受的赋形剂、稀释剂和/或载体的药物组合物。“药学上可接受的稀释剂、载体和/或赋形剂”预期包括可用于制备药物组合物的物质，可与式i化合物例如托那博沙和前述化合物中任何的类似物共施用，同时允许其实现其预期功能，并且一般是安全无毒的，并且在生物学或其他方面都不是不期望的。药学上可接受的稀释剂、载体和/或赋形剂包括适合于兽医用途以及人类药物用途的那些。鉴于式i化合物例如托那博沙，以及前述化合物中任何的类似物的性质，合适的载体和/或赋形剂将是本领域普通技术人员容易理解的。然而，例如稀释剂、载体和/或赋形剂包括溶液、溶剂、分散介质、延迟剂、聚合物和脂质试剂、乳液等等。作为进一步的例子，合适的液体载体，尤其是用于可注射溶液的液体载体包括水、盐水溶液、葡萄糖水溶液等等，其中等渗溶液优选用于静脉内、脊柱内和脑池内施用，并且载体例如脂质体也尤其适合于试剂的施用。组合物可采用任何标准的已知剂型的形式，包括片剂、丸剂、胶囊、半固体、粉末、持续释放制剂、溶液、悬浮液、酏剂、气溶胶、注射液体、凝胶、乳膏、经皮递送装置(例如经皮贴剂)、插入物例如眼插入物或任何其他合适的组合物。本发明相关领域的普通技术人员将容易了解关于要治疗的状况的性质和要使用的活性剂的最合适剂型，而无需任何过度实验。应当了解间隙连接通道调节剂，例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙，和前述化合物中任何的类似物，和/或泛连接蛋白调节剂，例如丙磺舒及其类似物，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其类似物中的一种或多种可配制成单一组合物。在某些实施例中，优选的剂型包括可注射溶液和口服制剂。考虑到剂型和施用模式，本发明的组合物可含有任何适当水平的调节剂，例如间隙连接通道调节剂，例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙，和前述化合物中任何的类似物，和/或泛连接蛋白调节剂，例如丙磺舒及其类似物，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂，例如10panx1或其类似物。然而，例如，取决于施用方法，本发明中使用的组合物可含有按重量计大约0.1％至大约99％，优选按重量计大约1％至大约60％的式i化合物，例如托那博沙，以及前述化合物中任何的类似物。除标准稀释剂、载体和/或赋形剂之外，根据本发明的组合物可与一种或多种另外的组成成分一起配制，或以这种方式配制，以便增强间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙，和前述化合物中任何的类似物，和/或泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒及其类似物，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其类似物的活性或生物利用度，帮助保护其完整性或者增加半衰期或贮存期限，允许在施用受试者后缓慢释放，或例如提供其他期望的益处。例如，缓慢释放媒介物包括大分子单体、聚(乙二醇)、透明质酸、聚(乙烯基吡咯烷酮)或水凝胶。作为进一步的例子，组合物还可包括防腐剂、增溶剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂、甜味剂、着色剂、调味剂、涂层剂、缓冲剂等等。本发明涉及领域的技术人员将容易地鉴定对于特定用途可能期望的进一步添加剂。式i化合物例如托那博沙，和前述化合物中任何的类似物，可通过持续释放系统施用。持续释放组合物的合适例子包括以成形制品形式的半透性聚合物基质，所述制品例如薄膜或微胶囊。持续释放基质包括聚丙交酯(美国专利3,773,919；ep58,481)、l-谷氨酸和γ-乙基-l-谷氨酸的共聚物、聚(甲基丙烯酸2-羟乙酯)、乙烯乙酸乙烯酯或聚-d-(-)-3-羟基丁酸(ep133,988)。持续释放组合物还包括脂质体截留的化合物。含有式i化合物例如托那博沙和前述化合物中任何的类似物的脂质体可通过已知的方法制备，包括例如描述于下述文献中的那些方法：de3,218,121；ep52,322；ep36,676；ep88,046；ep143,949；ep142,641；日本专利申请83-118008；美国专利号4,485,045和4,544,545；和ep102,324。通常，脂质体是小(200或约200至800埃)单层型，其中脂质含量大于约30摩尔百分比胆固醇，所选择的比例被调整用于最有效的治疗。也可使用例如使用pgla纳米颗粒或微粒的缓慢释放递送或原位离子活化胶凝系统。另外，考虑根据本发明的药物组合物可与另外的活性成分或试剂一起配制，所述另外的活性成分或试剂在特定情况下对受试者可具有治疗或其他益处。本发明涉及领域的普通技术人员将容易了解关于本文本发明的描述和要治疗病症的性质的合适的另外活性成分。可根据标准技术配制组合物，例如可在这种标准参考文献如例如gennaroar:remington:thescienceandpracticeofpharmacy，第20版，lippincott,williams&wilkins,2000中找到的。然而，作为进一步的例子，可使用us2013/0281524或us5948811中提供的信息。在某些实施例中，本发明提供了包含(a)式i化合物例如托那博沙，和前述化合物中任何的类似物和(b)一种或多种另外的活性剂的组合产品，其中组分(a)和(b)适于同时或序贯施用。在本发明的一个特定实施例中，根据本发明的组合产品以这样的方式使用，使得在另一种组分仍对被治疗的受试者具有作用时施用至少一种组分。间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙，和前述化合物中任何的类似物，和/或泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒及其类似物，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其类似物和一种或多种另外的活性剂可以适合的形式配制，用于直接施用于受试者(例如作为试剂或药物组合物)。可替代地，组合产品可包含在一个或多个分开容器中的一种或多种药物载体组合物；所述试剂在施用前与一种或多种药物载体组合物混合。式i化合物例如托那博沙，以及前述化合物中任何的类似物和一种或多种另外的活性剂可包含在相同或者一个或多个不同的容器中，并且分开施用或以任何组合混合在一起且同时施用。组合产品还可包含如对于特定应用可为必需的在进一步的分开容器中的另外试剂和组合物。适合于贮存和/或施用药物组合物的任何容器可用于本发明的组合产品中。合适的容器将是本领域技术人员了解的。例如，这种容器包括小瓶和注射器。容器可适当地灭菌且气密密封。这种组合产品可根据本文提供的方法和原理以及本领域已知的那些制备。还提供了在如本文所述的方法中使用的组合产品。本发明的药物组合物包括例如眼部递送形式和制剂。这样的递送形式和制剂包括用于治疗如本文公开的受试者的那些。本发明的药物制剂还可包含一种或多种药学上可接受的赋形剂。用于眼部施用的药学上可接受的赋形剂可以是眼科可接受的赋形剂。在一些方面，制剂可提供连接蛋白调节剂和/或眼部治疗试剂对眼的选择段或区室的持续递送。在一些方面，制剂可提供高眼部药物生物利用度，是安全和无毒的，和/或具有很小的全身副作用或在施用部位处的并发症。用于本发明方法中的示例性多核苷酸制剂具有易于局部递送，易于施用和“无副作用”特征。在一些实施例中，本发明的药物制剂可包含本文描述的调节剂中的任何，例如间隙连接和/或连接蛋白调节剂或泛连接蛋白调节剂，例如经修饰的或未经修饰的连接蛋白43反义寡核苷酸或多核苷酸，或者经修饰的或未经修饰的连接蛋白43肽或拟肽。在一些实施例中，包括在制剂中的连接蛋白43反义寡核苷酸可以是未经修饰的连接蛋白43反义寡脱氧核苷酸或经修饰的连接蛋白43反义寡脱氧核苷酸。在一些方面，药物组合物可包括或排除前述中的任何。在一些方面，将调节剂，例如连接蛋白调节剂、泛连接蛋白调节剂和/或间隙连接调节剂(例如连接蛋白43调节剂或cx45、cx26、cx30、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx45、cx50、cx57或眼中的任何其他连接蛋白)施用于受试者的眼将治疗有效量的连接蛋白调节剂或泛连接蛋白调节剂提供给眼或眼的特定区室。连接蛋白调节剂可优选是连接蛋白43调节剂。在一些情况下，可通过局部、玻璃体内、结膜下或眼周施用来施用泛连接蛋白调节剂或连接蛋白调节剂。在一些方面，施用还可以是腹膜内施用或肠胃外施用，条件是治疗有效剂量接触眼。在本发明方法的一些方面，连接蛋白调节剂或泛连接蛋白调节剂可通过注射，例如通过眼内注射、玻璃体内注射或通过眼周途径，包括结膜下、眼球后、眼球周和后部球筋囊下注射而施用于眼。在一些方面，连接蛋白调节剂可直接注射到小梁网内或小梁网附近。在一些方面，结膜下施用可提供持续递送，同时使剂量频率降到最低。在一些实施例中，结膜下施用可增加亲水性药物的生物利用度，因为它们不必穿透结膜上皮。在一些实施例中，微针、针或植入物可用于施用连接蛋白调节剂。本发明的连接蛋白调节剂也可施用于睫状体。连接蛋白调节剂可施用一次或超过一次。连接蛋白调节剂可以是例如本文所述的连接蛋白调节剂中的任何。在一些方面，连接蛋白或泛连接蛋白调节剂可包括或排除前述中的任何。本发明的连接蛋白和泛连接蛋白通道调节剂也可施用于小梁网或睫状体。本发明的连接蛋白和泛连接蛋白通道调节剂也可施用于小梁网或睫状体。在一些方面，间隙连接、连接蛋白、半通道和/或泛连接蛋白调节剂例如连接蛋白43调节剂和泛连接蛋白1调节剂可配制为对眼中的施用部位提供受控和/或区室化释放。在本发明的一些方面，制剂可以是立即释放、或延长释放或持续释放剂型。在一些方面，剂型可包含与延长和/或持续释放剂型组合的立即释放剂型。在一些方面，可通过将经修饰的或未经修饰的连接蛋白或泛连接蛋白反义寡核苷酸或多核苷酸连同以立即释放形式的经修饰的或未经修饰的肽或拟肽一起组合，来获得连接蛋白或泛连接蛋白调节剂的立即和持续和/或延长释放两者。在本发明的一些方面，连接蛋白调节剂是例如本公开内容的连接蛋白43调节剂或其他连接蛋白调节剂。在本发明的一些方面，剂型可以是眼部植入物，例如可生物降解或不可生物降解的植入物。在本发明的一些方面，例如通过调整颗粒的大小或涂层，可配制钙粘蛋白(caderin)调节剂或间隙连接和/或连接蛋白调节剂例如连接蛋白43调节剂，用于调节剂的区室化释放。例如，在一些方面，可施用钙粘蛋白调节剂或连接蛋白调节剂例如连接蛋白43调节剂的颗粒制剂，用于本发明的方法中。在一些方面，包含颗粒的眼部药物递送系统可包含具有小于1,000nm，例如1-1000nm的平均直径的纳米颗粒和/或具有1至1,000μm的平均直径的微粒。纳米颗粒或微粒可以是例如纳米球或微球，或封装的纳米胶囊和微胶囊，其中连接蛋白调节剂被封装在聚合物涂层中。颗粒制剂还可包含脂质体。在一些方面，连接蛋白调节剂可包括或排除连接蛋白45、cx26、cx30、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx50或cx57或者眼或血管中的任何其他连接蛋白的调节剂。在一些方面，间隙连接和/或连接蛋白调节剂或泛连接蛋白调节剂可配制用于在外周施用(例如静脉内或腹膜内施用)后靶向递送至脉络膜和/或视网膜。在一些方面，连接蛋白调节剂可以是例如本公开内容的连接蛋白43调节剂或其他连接蛋白调节剂。在一些方面，用于靶向递送至脉络膜和/或视网膜的制剂可包括施用间隙连接和/或连接蛋白调节剂或泛连接蛋白调节剂注入颗粒，其在颗粒的表面上呈现眼部靶向部分。本发明包括用于调节间隙连接通道和/或半通道的功能和用于治疗不同病症的方法。应当了解这样的方法可适当地在体内、离体和/或体外执行。在某些实施例中，该方法可执行用于实验和/或非治疗目的。在某些实施例中，此类方法可包括将间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙和前述化合物中任何的类似物，和/或泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒及其类似物，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其类似物在体外或离体施用于一种或多种细胞或者包含一种或多种细胞的样品的步骤。在其他实施例中，此类方法可包括将间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙和前述化合物中任何的类似物，和/或泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒及其类似物，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其类似物施用于受试者的步骤。本发明的方法包括施用单独或者与可能需要的一种或多种其他试剂(包括例如活性剂)或疗法组合的调节剂，例如间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙和前述化合物中任何的类似物，和/或泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒及其类似物，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其类似物。将调节剂例如间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙和前述化合物中任何的类似物，和/或泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒及其类似物，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其类似物施用于受试者可通过能够将试剂递送至受试者体内的靶位点的任何方式发生。例如，间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙和前述化合物中任何的类似物，和/或泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒及其类似物，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其类似物可通过下述途径之一施用：口服、局部、全身(例如静脉内、动脉内、腹膜内、经皮、鼻内或通过栓剂)、肠胃外(例如肌内、皮下、或静脉内或动脉内注射)、通过植入和通过经由这种装置如渗透泵、经皮贴剂等输注。技术人员可鉴定其他适当的施用途径。示例性施用途径也在binghe,w.和b.wang(2005).drugdelivery:principlesandapplications,binghewang,terunasiahaan,richardsoltero,hoboken,n.j.wiley-interscience,c2005中概述。在一个实施例中，全身施用间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙和前述化合物中任何的类似物，和/或泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒及其类似物，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其类似物。在另一个实施例中，口服施用间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙和前述化合物中任何的类似物，和/或泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒及其类似物，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其类似物。在另一个实施例中，局部施用间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙和前述化合物中任何的类似物，和/或泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒及其类似物，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其类似物。在另一个实施例中，例如通过静脉内、动脉内或腹膜内施用全身施用式i化合物例如托那博沙，和前述化合物中任何的类似物，使得最终循环浓度为大约0.001至大约150微摩尔，或更高至高达200、300、400、500、600、700、800、900或1000微摩尔。最终的循环浓度可以是0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10.0、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、100、110、120、130、140或150微摩尔浓度，或两个所述数目中任何之间的任何浓度，或如上所述的更高浓度和在所述范围内的任何浓度。如本文提及的，本发明还包括其中一种或多种另外的活性剂也施用于受试者的组合疗法。考虑到该试剂的性质和本文之前讨论的原理，本领域技术人员将了解一种或多种活性剂的期望剂量。调节剂，例如间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙和前述化合物中任何的类似物，和/或泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒及其类似物，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其类似物可单独或者与用于治疗特定病症的一种或多种另外的试剂或组合物组合用于本发明中。共施用可允许一种或多种症状的改善缓解或改善，疾病的长度或程度的减少，疾病进展的延迟或减缓，疾状况态的改善、缓和或稳定，部分或完全缓解，延长的存活和/或其他有益的治疗结果。这样的治疗可同时或以任何次序序贯施用，在施用之间具有一定时间段。本领域技术人员将容易了解同时或序贯施用试剂或疗法的方法和施用之间可能的时间段。疗法可通过相同或不同的途径施用。在某些实施例中，根据本发明的治疗可涉及将一种或多种其他试剂施用于受试者。例如，可施用用于促进受试者的一般健康或者减少治疗的一种或多种副作用的一种或多种试剂。本领域技术人员将容易了解例如关于要治疗的疾病可能有益于施用的不同试剂。在其中最初与间隙连接通道调节剂共施用泛连接蛋白调节剂的一些实施例中，可停止或递减泛连接蛋白调节剂的施用，而间隙连接通道调节剂的施用继续。在一些实施例中，可在缺血性损伤后立即或之后不久施用泛连接蛋白调节剂，而可在缺血后施用间隙连接通道调节剂。调节剂，例如间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙和前述化合物中任何的类似物，和/或泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒及其类似物，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其类似物和任选的一种或多种其他活性剂的施用可在病症发展期间的任何时间，或者在病症或病症的一种或多种症状发展之前或之后发生。在一个实施例中，间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙和前述化合物中任何的类似物，和/或泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒及其类似物，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其类似物在每天的基础上施用延长的时期，以帮助症状的持续管理。在另一个实施例中，间隙连接通道调节剂例如肽5和/或其类似物，式i化合物例如托那博沙和前述化合物中任何的类似物，和/或泛连接蛋白调节剂例如丙磺舒及其类似物，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂例如10panx1或其类似物在每天的基础上施用延长的时期或终生，以预防或延迟病症的发展。优选地，本发明的调节剂，例如间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂与药学上可接受的载体或稀释剂组合，以产生药物组合物。术语“药学上可接受的载体”指任何药物载体，其本身不诱导对接受该组合物的个体有害的抗体产生，并且可施用而无异常毒性。用于眼部施用的“药学上可接受的载体”是眼科可接受的载体。也可存在药学上可接受的盐，例如矿物质盐，例如盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、硫酸盐等等；以及有机酸的盐，例如柠檬酸盐、乙酸盐、丙酸盐、丙二酸盐、苯甲酸盐等等。合适的载体和稀释剂包括缓冲水溶液、盐水、右旋糖、甘油、等渗盐水溶液例如磷酸盐缓冲盐水、等渗水等等及其组合。在一些实施例中，载体可包括丙二醇、二甲基异山梨醇酯和水，并且甚至更特别地，磷酸盐缓冲盐水、等渗水、去离子水、单官能醇和对称醇。在一些实施例中，药学上可接受的载体或稀释剂可以是或含有热固性泊洛沙姆(其可以是液体或凝胶，取决于温度)、羧基纤维素(例如羧甲基纤维素)、胶原(例如i型胶原)、胶原材料包括原胶原、透明质烷或衍生透明质酸、和/或油(例如鸸鹋油)。合适的载体可以是大的缓慢代谢的大分子，例如蛋白质、多糖、聚乳酸、聚乙醇酸、聚合氨基酸和氨基酸共聚物。本发明的药物组合物不含在作为唯一媒介物的无菌水中的连接蛋白调节剂。在一些实施例中，制剂将包含包括在制剂中的泛连接蛋白或连接蛋白调节剂，例如连接蛋白43调节剂，例如43反义寡核苷酸，在一些实施例中可以是未经修饰的或经修饰的连接蛋白43反义寡脱氧核苷酸。在一个方面，可逆热固性凝胶在低温例如2-8℃下可以是液体，并且其在高于大约15℃的温度下经历可逆的液体到凝胶转变。因此，在一些实施例中，载体在大约15℃以下的温度下可以是液体，但在大约15℃以上的温度例如室温下或在体温下可形成凝胶。在一些情况下，凝胶是非离子聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物凝胶。在一些实施例中，凝胶是普朗尼克凝胶。普朗尼克凝胶可以是例如泊洛沙姆407，有时也称为普朗尼克f-127(basf)。在一些实施例中，本发明的制剂可包含约15至约30％(w/v)凝胶。在一些实施例中，本发明的制剂可包含约20至约25％(w/v)凝胶。在一些实施例中，本发明的制剂可包含约22.6％(w/v)泊洛沙姆407凝胶。其他合适的制剂包括基于普朗尼克凝胶的制剂、羟甲基纤维素制剂、羟乙基纤维素制剂、基于羧甲基纤维素(cmc)的制剂和基于羟丙基甲基纤维素(hpmc)的制剂。组合物可配制用于任何所需的递送形式，包括局部、滴注、肠胃外、肌内、皮下或经皮施用。其他有用的制剂包括缓慢释放或延迟释放制剂。另外，需要时，也可存在物质例如润湿剂或乳化剂、稳定剂或ph缓冲试剂或防腐剂。在一些实施例中，本发明的药物组合物将包含合适的眼科可接受的缓冲液，例如乙酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液、硼酸盐缓冲液及其混合物。在一些实施例中，可用于本发明的缓冲液包括硼酸，硼酸钠，磷酸钠，包括单、二和三碱磷酸盐，例如磷酸二氢钠一水合物和磷酸氢二钠七水合物，及其混合物。在一些实施例中，防腐剂可以是稳定的二氧化氯、阳离子聚合物或季铵化合物。在一些实施例中，药物组合物还可包含润湿剂、营养素、增粘剂、抗氧化剂等等，例如乙二胺四乙酸二钠、碱金属六偏磷酸盐、柠檬酸、柠檬酸钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、n-乙酰半胱氨酸、丁基化羟基苯甲醚、丁基化羟基甲苯、聚乙烯醇、泊洛沙姆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素、羟乙基甲基纤维素及其混合物及其混合物。在一些实施例中，本发明的药物制剂不包括防腐剂。当调节剂例如间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂是核酸，例如多核苷酸时，通过几种已知的转染技术(例如包括使用转染剂的那些)来增强通过哺乳动物细胞的核酸摄取。这样的技术可与某些抗连接蛋白试剂包括多核苷酸一起使用。所施用的制剂可含有这种转染剂。这些试剂的例子包括阳离子试剂(例如磷酸钙和deae-右旋糖苷)和lipofectant(例如lipofectamtm和transfectamtm)和表面活性剂。当间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂包含多核苷酸时，方便地，制剂还包括辅助细胞穿透的试剂，或制剂可含有任何合适的填充剂，例如表面活性剂，信号传导分子例如antenna肽，或适合于施用于眼的任何其他试剂。在本发明的一个实施例中，局部施用本发明的调节剂例如间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂。间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂的局部制剂可包括软膏、凝胶(其可以是例如热固性凝胶)、滴剂、喷雾剂、液体和粉末、或持续或非持续释放剂型。在一些实施例中，调节剂例如间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂，例如连接蛋白43调节剂，可作为包含一种或多种颗粒的药物组合物施用。在一些方面，药物组合物可以是例如立即释放制剂或控制释放制剂，例如延迟释放颗粒。在一些方面，调节剂例如泛连接蛋白或连接蛋白调节剂，例如连接蛋白43和泛连接蛋白1调节剂，间隙连接调节剂等，可在颗粒制剂配制成用于选择性递送到要治疗的生理区域的一种或多种颗粒。在一些实施例中，颗粒可以是例如纳米颗粒、纳米球、纳米胶囊、脂质体、聚合物胶束或树枝状聚合物。在一些实施例中，颗粒可以是微粒。纳米颗粒或微粒可包含可生物降解的聚合物。在一些方面，调节剂例如泛连接蛋白或连接蛋白调节剂，例如连接蛋白43和泛连接蛋白1调节剂，间隙连接调节剂等，被配制成向施用部位提供区室化释放。在本发明的一些方面，例如通过调整颗粒的大小或涂层，调节剂可配制用于调节剂的区室化释放。例如，在一些方面，可施用连接蛋白43调节剂或泛连接蛋白1调节剂或半通道调节剂或间隙连接调节剂的颗粒制剂以用于本发明的方法中。在一些方面，包含颗粒的眼部药物递送系统可包含例如通过扫描电子显微镜检查测定的小于1,000nm的平均直径的纳米颗粒或1至1,000μm的微粒。纳米颗粒或微粒可以是例如纳米球或微球，或者封装的纳米胶囊和微胶囊，其中连接蛋白调节剂封装在聚合物或脂质涂层中。可采用其他方法来测量粒度，包括但不限于光散射、ζ电位分析、库尔特计数(电感带法)和光学显微镜检查。纳米颗粒或微粒可包含装载有间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂(例如连接蛋白43调节剂)的聚(乳酸共乙醇酸)(“plga”)。调节剂可装载到颗粒体积内、颗粒外表面上或两者。在一些实施例中，可生物降解的颗粒可以是选自下述颗粒类型之一的颗粒：聚丙交酯(pla)纳米颗粒、聚-dl-乳酸(pdlla)微球或纳米球、聚(乳酸)纳米颗粒或微粒、壳聚糖修饰的聚(d,l-丙交酯共乙交酯)纳米球和微球(cs-plgans)、壳聚糖-海藻酸盐包被的纳米颗粒或微粒、固体脂质纳米颗粒或微粒(sln)、硅纳米颗粒或微粒、聚乳酸共乙醇酸(plga)纳米颗粒或微粒、聚乳酸共乙醇酸(plga)纳米颗粒或微粒、ph敏感的eudragitp-4135f纳米颗粒或微粒、由聚合物聚-ppadt(1,4-亚苯基丙酮二亚甲基酮缩硫醇)制备的酮缩硫醇纳米颗粒或微粒(tkn)、脂多糖(lps)、海藻酸盐纳米颗粒或微粒、磷脂纳米颗粒或微粒、和封装在聚(ε-己内酯)(pcl)微球和纳米球中的b型明胶。在一些实施例中，颗粒是聚乳酸共乙醇酸(plga)纳米颗粒或微粒。连接蛋白43调节剂还可截留在例如通过凝聚技术或通过界面聚合制备的微胶囊或纳米胶囊(例如分别为羟甲基纤维素或明胶微胶囊和聚(甲基丙烯酸甲酯)微胶囊)、胶体药物递送系统(例如聚合物胶束、脂质体和聚乙二醇化脂质体、白蛋白微球、微乳液、纳米颗粒和纳米胶囊)、或粗乳液中。这些技术公开于remington'spharmaceuticalsciences(1980)第16版，osol,a.编辑中，并且以引用的方式并入本文。在一些方面，用于靶向递送至脉络膜和/或视网膜的制剂可包括施用调节剂，例如间隙连接和/或连接蛋白调节剂，或在颗粒表面上呈现靶向部分的泛连接蛋白调节剂注入的颗粒。在一些方面，表面上的靶向部分可通过edac偶联(n-(3-二甲基氨基丙基)-n’-乙基碳二亚胺盐酸盐)转铁蛋白共价连接。在一些方面，表面上的靶向部分可以是共价连接的rgd肽(具有肽序列grgdspk，seqidno:322)。颗粒可以是纳米颗粒或微粒。在一些方面，纳米颗粒可为直径约200nm至450nm。在一些方面，颗粒可包含如上所述的聚合物。在一些方面，颗粒可包含聚-(丙交酯共乙交酯)。在一些实施例中，当颗粒经由乳液制备合成时，间隙连接和/或连接蛋白调节剂可被注入颗粒内。在一些实施例中，在颗粒已通过扩散合成为颗粒后，间隙连接和/或连接蛋白或泛连接蛋白调节剂可如在singh,s.r.等人，genetherapy,16:645-659(2009)并且以引用的方式并入本文)中所述注入颗粒内。在一些实施例中，颗粒可包含用于靶向递送至脉络膜和/或视网膜用于靶向递送的肽和用作细胞内化转运蛋白的肽。颗粒可以是如本文所述的微粒或纳米颗粒。用于靶向递送至脉络膜和/或视网膜的肽可以是如本文所述的与颗粒共价连接的rgd肽。用作细胞内化转运蛋白的肽可存在于颗粒的外表面处或在颗粒内如与间隙连接和/或连接蛋白调节剂融合。融合可经由共价键、一个或多个氢键、静电相互作用或范德华相互作用。用作细胞内化转运蛋白的肽可以是本公开内容的表65中列出的任何肽。在一些实施例中，配制用于在外周施用后靶向递送至脉络膜和/或视网膜的调节剂例如间隙连接和/或连接蛋白调节剂、泛连接蛋白调节剂或泛连接蛋白通道调节剂，可通过静脉内或腹膜内注射进行施用。在一些方面，连接蛋白调节剂可以是例如连接蛋白43调节剂。在一些方面，配制用于在外周施用后靶向递送至脉络膜和/或视网膜的间隙连接和/或连接蛋白调节剂或泛连接蛋白调节剂，可通过眼周递送至眼进行施用。在一些方面，用于眼周递送的制剂可以是以注入间隙连接和/或连接蛋白调节剂或泛连接蛋白调节剂制剂的滴眼剂或凝胶或隐形眼镜的形式。在一些实施例中，调节剂例如间隙连接和/或连接蛋白调节剂、泛连接蛋白调节剂或泛连接蛋白调节剂可通过与脉络膜或视网膜靶向试剂形成复合物来配制用于靶向递送。复合物可通过共价键、一个或多个氢键、静电相互作用或范德华相互作用形成。在一些方面，本发明的调节剂例如间隙连接、连接蛋白或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂可直接结合靶向脉络膜和/或视网膜或充当细胞内化转运蛋白的化合物。将调节剂例如连接蛋白调节剂，例如连接蛋白43调节剂施用于受试者的眼意指将调节剂施用于受试者，以将治疗有效量的连接蛋白43调节剂提供给眼或眼的特定区室。在一些情况下，连接蛋白调节剂，例如连接蛋白43调节剂，可通过局部、角膜、玻璃体内、结膜下或眼周施用进行施用。在一些方面，施用也可以是腹膜内施用。在一些实施例中，微针、针或植入物可用于施用连接蛋白43调节剂。本发明的连接蛋白43调节剂也可施用于睫状体。在一些方面，本发明的连接蛋白43调节剂可经由心室内、和/或鞘内、和/或硬膜外、和/或硬膜下和/或硬膜外途径施用。在一些方面，本发明的调节剂例如间隙连接、连接蛋白43、泛连接蛋白1和泛连接蛋白通道调节剂被配制用于眼部施用。在一些方面，调节剂例如连接蛋白43和其他调节剂可被配制为在施用后提供控制释放和/或区室化释放。在一些方面，制剂可以是立即释放、或延长释放或持续释放剂型。在一些方面，剂型可包含与延长和/或持续释放剂型组合的立即释放剂型。在一些方面，可通过将经修饰的或未经修饰的连接蛋白43反义寡核苷酸或多核苷酸连同以立即释放形式的经修饰的或未经修饰的肽或拟肽组合，来获得立即释放和持续和/或延长释放的调节剂例如连接蛋白43调节剂两者。在一些方面，剂型可以是可植入的。在一些实施例中，组合物与眼的流体是等渗的，并且可具有至少约200mosmol/kg，优选在约200至约350或约400mosmol/kg的渗透压浓度(osmolality)。组合物可包含例如氯化钠、氯化钾、氯化钙和/或氯化镁。在一些实施例中，本发明的调节剂中的任何，例如间隙连接通道、泛连接蛋白通道、泛连接蛋白或连接蛋白调节剂，例如连接蛋白43和泛连接蛋白1通道调节剂，被配制为向施用部位提供区室化释放。在本发明的一些方面，例如通过调整颗粒的大小或涂层，泛连接蛋白或连接蛋白调节剂可配制用于调节剂的区室化释放。例如，在一些方面，调节剂例如泛连接蛋白调节剂或连接蛋白调节剂，例如连接蛋白43调节剂的颗粒制剂，可用于本发明的方法中施用。在一些方面，包含颗粒的眼部药物递送系统可包含具有小于1,000nm，例如1-1000nm的平均直径的纳米颗粒，和/或具有1至1,000μm的平均直径的微粒。纳米颗粒或微粒可以是例如纳米球或微球，或封装的纳米胶囊和微胶囊，其中调节剂例如连接蛋白调节剂封装在聚合物和/或脂质涂层中。在一些实施例中，配制的调节剂是连接蛋白43或连接蛋白45调节剂，优选连接蛋白43调节剂。在本文所述的任何制剂、剂量或递送方法的其他实施例中，调节剂是泛连接蛋白通道调节剂，优选泛连接蛋白1通道调节剂。在本文所述的任何制剂、剂量或递送方法的另外其他实施例中，调节剂是间隙连接或半通道通道调节剂，并且在一些实施例中，优选连接蛋白43或连接蛋白43间隙连接通道或半通道调节剂。颗粒制剂可例如通过注射眼内、或玻璃体内、结膜下或眼周施用。可选择颗粒的大小和聚合物组成，以控制调节剂例如连接蛋白43调节剂从颗粒的释放，例如调节剂的释放时机和位置。例如，在本发明的一些方面，调节剂，例如被配制为聚乳酸(pla)微球的连接蛋白43半通道或泛连接蛋白1通道调节剂可保留在它们施用于其的眼区室中超过1、2、3、4、5、6或7天，或超过一周，超过10天，超过2、3、4、5或6周，或更久。在一些方面，通过注射或微针玻璃体内递送的调节剂微粒可提供调节剂的持续释放。在其他方面，较小的颗粒例如包含调节剂的纳米颗粒可从眼的一个区室快速扩散到另一个区室，任何可容易地内化在眼部组织以及眼的前段和后段的细胞中。在本发明的一些方面，包含连接蛋白43或其他调节剂的聚丙交酯纳米颗粒的玻璃体内递送可提供跨越视网膜的递送，其中在视网膜色素上皮细胞中优先定位1、2、3、4、5、6或7天，或超过一周，超过10天，超过2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15或超过16周。在一些方面，连接蛋白43或其他调节剂的纳米球和微球眼部药物递送制剂可例如通过保护免于降解而增强细胞穿透，改善生物利用度，和/或提供持续递送。在一些实施例中，包含更大的纳米颗粒(大于150、200、300、400、500、600、700、800、900nm)或微粒的制剂，例如具有在150nm和9微米之间、或在1和9微米之间，例如1、2、3、4、5、6、7、8微米，或任何两个所述平均直径之间的任何范围的平均直径的颗粒可适合于由于较慢释放和/或从该尺寸的颗粒扩散的区室化眼部施用。本公开内容的泛连接蛋白或连接蛋白调节剂(例如连接蛋白43调节剂)中的任何的颗粒制剂也可包含脂质体。在一些方面，脂质体可具有在50nm至几微米之间的直径。在一些方面，脂质体可注射或者局部或结膜下施用于眼的段或区室，并且在一些实施例中，可提供从相对惰性剂型的缓慢药物释放。脂质体制剂也可具有较少的副作用，因为仅有限量的连接蛋白43试剂或其他眼部治疗化合物与眼部组织直接接触。进入前段内的角膜渗透的增加可通过向药物制剂中添加渗透性增强剂来实现。细胞渗透剂也可用于增强连接蛋白43调节剂对rgc神经元或眼中的其他细胞的递送。制剂还可含有例如表面活性剂、胆汁酸、螯合剂和/或防腐剂。在一些实施例中，用于玻璃体内施用的制剂可不含防腐剂。如本文使用的，“基质”包括例如基质，例如聚合物基质、可生物降解或不可生物降解的基质、以及可用于制备用于递送连接蛋白调节剂和/或眼部神经性治疗试剂的植入物或所应用结构的其他载体。眼部植入物在一些实施例中，本发明的剂型可以是眼部植入物。在一些实施例中，植入物可例如玻璃体内、脉络膜上、巩膜内或结膜下植入。眼部植入物将持续水平的调节剂，例如连接蛋白和/或泛连接蛋白调节剂，递送到所需的眼部位点，并绕过血脑屏障。植入物可例如结膜下植入到巩膜外或巩膜内间隙内，与巩膜接触，进入玻璃体腔内。在一些实施例中，与本发明的连接蛋白调节剂一起使用的巩膜内施用可用于递送至眼的后段，具有比结膜下或眼球周施用更低的调节剂的全身吸收。植入物也可玻璃体内放置，这允许递送到眼的后段。在一些实施例中，植入物可通过巩膜切开术部位玻璃体内插入例如在平坦部上。结膜下植入物可通过结膜中的小切口插入并放置成与巩膜接触。也可使用在巩膜总厚度的一半处植入巩膜小袋中的巩膜内装置，并且可用于递送至眼后部，具有比结膜下或眼球周注射更少的药物的全身吸收。眼部植入物的玻璃体内放置还允许将药物直接递送到后段的靶组织。植入物可例如通过巩膜切开术部位插入玻璃体内，或用涂药器注射。植入部位通常在平坦部之上，其在视网膜插入的前面和晶状体的后面，以使对那些结构的损害降到最低。在其中剂型是植入物的一些实施例中，植入物在一些实施例中可包括包含连接蛋白43调节剂和可生物降解和生物相容性共聚物的至少一种共聚物涂层，以及包含可生物降解聚酯和连接蛋白43调节剂的至少一种涂层。在一些实施例中，剂型可具有包含可生物降解聚酯和连接蛋白43调节剂的内涂层，以及包含连接蛋白43调节剂和可生物降解和生物相容性共聚物的外涂层。剂型核或植入物可包含与可生物降解的聚合物共混的结缔组织。在一些实施例中，结缔组织可包含下述结缔组织中的一种或多种：胶原、弹性蛋白和软骨素-4-硫酸酯。在一些实施例中，结缔组织可以约50-99％胶原(w/w)的量存在。在一些实施例中，可生物降解的聚合物可包含可生物降解的聚酯聚合物。在一些实施例中，聚酯聚合物可包含下述选择的可生物降解的聚酯聚合物中的一种或多种：聚(l-丙交酯)、聚(乙交酯)、聚(dl-丙交酯)、聚(二氧杂环己酮)、聚(dl-丙交酯共l-丙交酯)、聚(dl-丙交酯共乙交酯)、聚(乙交酯共三亚甲基碳酸酯)和聚(己内酯)(“聚己内酯”)。在一些实施例中，聚酯聚合物可包含聚己内酯(pcl)。在一些实施例中，聚己内酯的量可以约1-50％聚己内酯(w/w)的量存在。在一些实施例中，聚己内酯的分子量可为10,000da至3,000,000da。在一些实施例中，胶原和包含植入物的聚合物可电纺成纤维以产生植入物或核，或支架片，由其可获得所需的植入物形式。可替代地，通过控制在沉积期间的纤维取向，可制造具有所需形状的三维植入物。也可使用三维打印来获得用于本发明的可植入剂型的核。可替代地，支架底物可从天然源提取，并且在加工后将本身重构成合适的基质(例如从海洋生物包括但不限于水母，或者从哺乳动物源包括但限于牛、马、羊源提取的胶原材料)。在一些实施例中，植入物可用包含调节剂，例如连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂，例如连接蛋白43或半通道调节剂的混合物涂布。该混合物还可包含使调节剂例如泛连接蛋白或连接蛋白通道调节剂暂时结合至植入物的聚合物，例如(“结合聚合物”或“洗脱聚合物”)。这样的聚合物可包括但不限于下述选择的聚合物的下述均聚物或共聚物中的一种或多种：聚(乳酸共乙醇酸(plga)、聚(l-丙交酯)、聚(乙交酯)、聚(dl-丙交酯)、聚(二氧杂环己酮)、聚(dl-丙交酯共l-丙交酯)、聚(dl-丙交酯共乙交酯)、聚(乙交酯共三亚甲基碳酸酯)和聚己内酯(pcl)。多个涂层可施加到植入物以实现连接蛋白43调节剂的所需洗脱曲线。在一些实施例中，每个涂层可通过将核或可植入形式浸入溶解的结合聚合物和调节剂的溶液中来施加，所述调节剂例如连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂，例如连接蛋白43半通道或间隙连接调节剂。然后可取出核或可植入形式并冷冻干燥(冻干)以去除溶剂；可替代地，核或可植入形式可被取出，并且通过将核或可植入形式置于真空室中而经历快速蒸发。包含第一结合聚合物层的核或可植入形式可随后浸入另一种溶液内，所述另一种溶液包含与先前浸没中使用的那种相同或另一种连接蛋白或泛连接蛋白调节剂，例如调节剂，例如连接蛋白43和/或泛连接蛋白1通道调节剂，并且还包含与在先前浸没中使用的相同的结合聚合物，或不同的结合聚合物。浸没和冻干的步骤可重复高达二十次，以在核或可植入形式上产生一层或多层涂层和/或一个或多个涂层。本领域的从业者将了解使抗连接蛋白试剂暂时结合至核或可植入形式的聚合物可包含适合于在植入物中的药物洗脱的任何聚合物。这种聚合物显示出下述性质：无毒(与它们的有益效应成比例)，直接代谢或其水解产物代谢，并且可容易灭菌。这种适用材料的综述在以引用的方式并入本文的j.c.middleton,a.j.tipton,biomaterials,21(2000),2335-2346中发现。用于控制释放或缓慢释放的不可生物降解或可生物降解的聚合物装置也可用于本发明的方法中。不可生物降解的植入物可提供所需调节剂的稳定的控制释放。可生物降解的植入物可制造成所需形状，可在诊所或门诊病人程序中注射，并且不需要取出。不可生物降解的(储库)植入物储库植入物通常由被非反应性物质例如硅、乙烯乙酸乙烯酯(eva)或聚乙烯醇(pva)包围的丸状药物核制成；这些植入物是不可生物降解的并且可递送连续量的药物数月至数年。在一些实施例中，本发明的调节剂可配制为适合于递送单独或与其他眼部神经性治疗试剂组合的连接蛋白调节剂的可植入的不可生物降解的储库剂型持续时间段，例如超过1个月，或超过2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、30或超过36个月。在一些实施例中，储库剂型可包含由包含硅的非反应性涂层如聚二甲基硅氧烷(pdms)、乙烯乙酸乙烯酯(eva)或聚乙烯醇(pva)包围的核，所述核包含单独或与如本文所述的其他眼部神经性治疗试剂组合的如本文所述的一种或多种调节剂。可生物降解的基质植入物本发明的剂型还可包含共聚物植入物，其可用于递送负载剂量的调节剂，例如连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节剂，以及在持续高达6个月或更久的持续时间段内递减剂量的调节剂。共聚物植入物可由生物降解为水和二氧化碳的共聚物聚乳酸(pla)和/或聚乳酸-乙醇酸(plga)制成。调节剂从植入物释放的速率和程度可通过改变丙交酯(更慢释放)和乙交酯(更快释放)的相对浓度，改变聚合物重量比，添加另外的聚合物涂层来降低。与不可生物降解的植入物不同，可生物降解的植入物不需要取出，并且取决于聚合物pla/plga比率，提供在剂量和治疗中从几周的短持续时间到数月至一年或更久的更持续释放的灵活性。在一些方面，可根据受试者的疾病进展个性化可生物降解的剂型。在一些方面，可生物降解的基质植入物可以是例如可溶性盘材料，例如在s.pflugfelder等人，acsnano,9(2)，第1749–1758页(2015)中描述的那种。微针在一些实施例中，本发明的调节剂化合物和制剂可经由微针施用。微针是单独的针或微米尺寸针的阵列，如kim,y.等人，invest.ophthalmol.vis.sci.november13,2014第55卷no.117376-7386中所述。在一些实施例中，微针可为长度500至750微米，并且可用本文所述的制剂涂布。微针阵列可用于施用本发明的制剂。固体微针的轴可用本发明的制剂涂布，所述本发明的制剂随后在插入后溶解到眼的区域内。在一些实施例中，将调节剂例如连接蛋白43和/或泛连接蛋白1通道调节剂施用于受试者，将治疗有效量的连接蛋白43调节剂提供给眼或眼的特定区室。在一些情况下，调节剂可通过局部、玻璃体内、结膜下或眼周球筋膜下施用进行施用。在一些方面，施用也可以是腹膜内或其他形式的全身施用。在一些实施例中，微针、微针阵列、针或植入物可用于施用调节剂。在一些实施例中，微针可用于将如本文所述的调节剂，例如连接蛋白43调节剂、泛连接蛋白通道调节剂、间隙连接调节剂和/或泛连接蛋白调节剂施用于眼或特定区室或结构，例如脉络膜、脉络膜上腔或视网膜、或巩膜。例如，中空微针可插入巩膜、脉络膜上腔内，并且调节剂可施用和/或输注到眼的该位置或区室内。在一些实施例中，可通过将调节剂施用于脉络膜上腔来执行对脉络膜的施用，注入的药物从脉络膜上腔沿周向在脉络膜上腔内朝向脉络膜、视网膜、黄斑、视神经以及眼背部中的其他结构和区室流动。在一些实施例中，微针可通过巩膜插入脉络膜上腔内，而不穿透脉络膜。在一些实施例中，微针可在输注后缩回。在一些实施例中，微针的穿透可被控制到眼的组织、基质和/或区室内的所需深度。在一些实施例中，微针也可用本发明的调节剂或其他眼部药物试剂包被。在一些方面，通过微针施用的调节剂和/或眼部药物制剂的体积可为约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、105、110、115、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165、170、175、180、185、190、195、200、205、210、215、220、225、230、235、240、245、250、255、260、265、270、275、280、295或300μl，或任何两个所述数目之间的任何体积范围或任何两个所述数目之间的任何体积。本发明的任何合适的制剂可通过微针注射进行施用，包括例如纳米颗粒或微粒制剂或可通过微针注射的其他制剂。在一些方面，微针包括基底，一个或多个微针通常在垂直于基底的方向上从其延伸。微针可以是实心的或中空的。中空微针可包括例如穿过微针中心的单个直孔，或多个孔。在一些实施例中，中空微针可包括沿着穿过微针的复杂路径的孔，来自孔的多个入口点和出口点，以及形成从微针的基底到轴中的出口点和/或微针的尖端的一个或多个连续路径的相交孔或孔网络。参见例如美国专利号7,918,814、8,197,435、8,636,713和8,808,225。在一些实施例中，微针可为长度50至2000微米，宽度(直径)50至500微米，并且可用本文所述的制剂涂布。微针可包括轴和尖端。轴和尖端可接触。微针的尖端可以是直的或锥形的。锥形微针尖端可以是点或钝端。在一些实施例中，也可使用钻孔微针。参见，例如，美国公开20050137525。其他微针在例如美国专利公开号2006/0086689、2006/0084942、2005/0209565、2002/0082543，美国专利号6,334,856、6,611,707和6,743,211中描述。微针和/或眼部植入物可包含一种或多种合适的生物相容性材料，包括金属、玻璃、半导体材料、陶瓷或聚合物，例如药物级不锈钢、金、钛、镍、铁、金、锡、铬、铜及其合金。用于微针和/或眼部植入物中的聚合物可以是可生物降解的或不可生物降解的。合适的生物相容性可生物降解的聚合物的例子包括聚(乳酸共乙醇酸)(plga)、聚(l-丙交酯)、聚(乙交酯)、聚(dl-丙交酯)、聚(二氧杂环己酮)、聚(dl-丙交酯共l-丙交酯)、聚(dl-丙交酯共乙交酯)、聚(乙交酯共三亚甲基碳酸酯)和聚己内酯(pcl)、聚酐、聚原酸酯、聚醚酯、聚酯酰胺、聚(丁酸)、聚(戊酸)、聚丙烯酰胺、聚丙烯酸酯、聚氨基甲酸酯及其共聚物和共混物和交联变体。微针可包括用于施用本发明制剂的一个或多个轴。轴可以是多孔的或无孔的。轴可以是中空的或实心的。微针还可包括由与轴不同的材料构成的尖端。微针的尖端可具有与微针的轴不同的硬度(通过硬度法(durometry)测量)。微针的尖端或轴或两者可以是可生物降解的或不可生物降解的。不可生物降解的微针尖端或轴可由金属、玻璃、半导体材料、陶瓷或聚合物组成。合适的金属的例子包括药物级不锈钢、钛、金、银、镍、铁、金、锡、铬、铜及其合金。代表性的不可生物降解的聚合物包括不同热塑性塑料或在fda批准的医疗装置的制造中已知的其他聚合物结构材料。例子包括尼龙、聚酯、聚碳酸酯、聚丙烯酸酯、乙烯乙酸乙烯酯和其他酰基取代的乙酸纤维素的聚合物、不可降解的聚氨基甲酸酯、聚苯乙烯、聚氯乙烯、聚氟乙烯、聚(乙烯基咪唑)、氯磺酸酯聚烯烃、聚环氧乙烷、其共混物和共聚物和交联变体。可生物降解的微针尖端或轴可配制为在本文所述的制剂施用后溶解，使得可存在于施用部位处的任何残余微针材料可溶解于受试者的体内。例如，微针可由这样的材料组成，所述材料配制为在注射期间的固体材料(任选地，根据温度)，并且在注射之后(并且任选地，暴露于受试者的温度)部分或完全降解。这种微针可任选由水溶性聚合物、水溶性无机材料或冰组成。与不可生物降解的微针相比较，可生物降解的微针可提供增加的安全水平，使得它们是基本上无害的，即使无意折断到眼部组织内。微针可插入眼的任何区室或结构内，以施用本文所述的调节剂化合物和制剂。微针可插入脉络膜、视网膜、巩膜、脉络膜上腔、布鲁赫膜、视网膜色素上皮、视网膜下腔、黄斑、视盘、视神经、睫状体、小梁网、房水或玻璃体液中的一种或多种内，用于施用本文所述的制剂。例如，微针可垂直地插入巩膜内，在短穿透距离内到达脉络膜上腔。将本文所述的制剂递送到脉络膜上区域内允许在大组织区域上递送制剂，并且与单一的套管针施用相比较，提供了在单次施用中难以靶向组织的靶向。在一个实施例中，施用可局限于眼的一种特定结构或区室。微针施用定位于其的眼的特定结构或区室可以是下述之一：脉络膜、视网膜、巩膜、脉络膜上腔、布鲁赫膜、视网膜色素上皮、视网膜下腔、黄斑、视神经盘、视神经、睫状体、小梁网、房水或玻璃体液。不希望受任何理论束缚，认为在进入脉络膜上腔后，所施用的制剂沿周向从插入位点朝向眼后段中的视网膜脉络膜组织和视神经流动，以及朝向葡萄膜和睫状体向前流动。此外，所施用的制剂的一部分可保留在接近微针插入位点的巩膜中，充当所施用制剂的另外储库，其随后可扩散到脉络膜上腔和其他邻近组织内。如本文定义的，“脉络膜上腔”，也称为脉络膜上或脉络膜上部(suprachoroidia)，描述了设置在巩膜和脉络膜之间的眼区域中的潜在间隙。使用微针施用本文所述的制剂可提供调节剂例如连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂在眼的靶区域或结构内的延长持续时间。与经由将制剂局部施用于眼部组织施用制剂相比较，微针递送方法提供了所施用制剂的更长持续时间。用微针将本发明的调节剂和/或眼部药物试剂施用到眼的组织或区室可包括将微针插入眼部组织内并将药物制剂沉积到眼部组织内。在一些实施例中，将至少一个微针插入眼的组织内而不穿透组织基质。在一个实施例中，施用方法还可包括在插入步骤之后和在药物制剂沉积之前和/或药物制剂沉积期间部分缩回中空微针，在一些实施例中，其可形成用于输注调节剂和/或眼部药物试剂的间隙。在一些实施例中，调节剂是例如连接蛋白调节剂、间隙连接调节剂或者泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂。经由微针的施用可通过控制输注压力来控制。输注压力将伴随地确定被递送的药物量。在一些实施例中，输注压力可为至少125kpa、至少150kpa、至少175kpa、至少200kpa、至少250kpa或至少300kpa。通过微针的输注压力可通过扩散、毛细管作用、机械泵、电渗、电泳、对流或其他驱动力生成。输注压力可任选通过测量背压来监测，以便调节连续压力。输注压力可任选由微控制器、传感器、机械力反馈回路、致动器、阀或泵来控制。连接蛋白或泛连接蛋白调节剂与rho激酶抑制剂或其他试剂的组合开角型青光眼的特征在于对来自眼的流体(房水)引流异常高的阻力。需要正常阻力以提供足以维持眼的形状用于光学完整性的眼内压。阻力由小梁网提供，小梁网是由具有密集的肌动球蛋白细胞骨架网络的特定细胞、胶原束和细胞外基质组成的复杂多层组织。在青光眼的眼中，房水产生的速率保持恒定，而流出阻力增加负责眼内压升高。rho激酶充当rho的关键下游介质，并且遍在表达。rho激酶是调节许多底物功能的丝氨酸/苏氨酸激酶，所述底物包括细胞骨架蛋白例如内支蛋白(adducing)、膜突蛋白(moesin)、钠离子-质子离子交换剂1(nhe1)、lim激酶和波形蛋白、收缩蛋白例如肌球蛋白轻链磷酸酶结合亚基(mypt-i)、cpi-17、肌球蛋白轻链和钙调节蛋白、微管相关蛋白例如tau和map-2、神经元生长锥相关蛋白例如crmp-2和转录因子例如血清反应因子(loirand等人，circ.res.98:322-334(2006))。rho激酶也是由rhoa诱导的细胞转化所必需的。rho激酶是多重信号传导途径的中介，调节各种细胞现象包括细胞骨架重排、肌动蛋白应力纤维形成、增殖、趋化性、胞质分裂、细胞因子和趋化因子分泌、内皮或上皮细胞连接完整性、细胞凋亡、转录活化和平滑肌肉收缩。由于这些细胞作用，rho激酶调节生理过程，例如血管收缩、支气管收缩、组织重塑、炎症、水肿、血小板聚集和增生性病症。rho激酶作用于小梁网以维持iop。相应地，抑制rho激酶将增加通过小梁网的流体流出，因此经由不同于降低iop的连接蛋白和/或泛连接蛋白或半通道和/或泛连接蛋白通道调节的机制来减少iop。在一些实施例中，rho激酶抑制剂用于治疗正常眼压性青光眼。已显示rho激酶的抑制剂通过增加通过小梁网的房水引流来降低哺乳动物中的iop(tian和kaufman,archophthalmol.122:1171-1178,2004)。本发明人了解rho激酶抑制剂与调节剂例如连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂的共施用将对降低受试者中的iop的两种独立机制起作用，由此导致比任何单一治疗更有效的治疗。用于与调节剂例如连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂共施用的另外试剂可包括以其他方式降低iop的其他治疗，包括但不限于：拉坦前列素、抗vegf化合物、噻吗洛尔、溴莫尼定、酒石酸溴莫尼定、瑞灵(异丙基乌诺前列酮眼用溶液，0.15％)、多佐胺、roclatan和ar-13533(aeriepharmaceuticals,bedminster,nj)。通过作用于除连接蛋白或泛连接蛋白通道调节外的机制，用于治疗眼部病症的多重治疗的共施用可导致协同效应，例如(1)减少总剂量、(2)降低总体副作用、(3)降低总治疗频率、和(4)增加患者依从性和因此治疗的功效。在一些方面，用于本发明中的vegf调节剂是抑制和/或阻断vegf或抑制和/或阻断vegf上游激动剂的拮抗剂。在一些方面，vegf拮抗剂包括例如结合并抑制vegf的拮抗剂，抑制vegf表达的化合物，和/或包含阻断或抑制vegf的vegf抑制剂或编码蛋白质或反义多核苷酸的病毒载体。在一些方面，抑制vegf和/或vegf上游激动剂的种类是例如抗体或抗体片段、纳米抗体、肽或拟肽、受体片段、重组融合蛋白、适体、小分子或单链可变片段(scfv)。在一些方面，vegf拮抗剂抗体是例如lucentistm(雷珠单抗)和/或avastintm(贝伐珠单抗)。在一些方面，vegf拮抗剂可以是针对vegf的抗体，例如lucentistm(雷珠单抗)或avastintm(贝伐珠单抗)。在一些方面，结合并因此抑制vegf的对vegf种类的上游激动剂反义的vegf拮抗剂可以是rtp801抑制剂或redd1阻滞剂。在一些方面，rtp801抑制剂或redd1阻滞剂可以是pf-655(通过quarkpharmaceuticals和pfizer)，也称为redd14np或rtp801i)。在一些方面，redd1阻滞剂可具有mrna序列5’-agcugcaucagguuggcac-3’(seqidno:323)。在本发明的一些方面，vegf拮抗剂是例如肽或拟肽，例如哌加他尼钠(macugentm)和agn-150998。macugentm是经修饰的rna序列，((2’-脱氧-2’-氟)c-gm-gm-a-a-(2’-脱氧-2’-氟)u-(2’-脱氧-2’-氟)c-am-gm-(2’-脱氧-2’-氟)u-gm-am-am-(2’-脱氧-2’-氟)u-gm-(2’-脱氧-2’-氟)c-(2’-脱氧-2’-氟)u-(2’-脱氧-2’-氟)u-am-(2’-脱氧-2’-氟)u-am-(2’-脱氧-2’-氟)c-am-(2’-脱氧-2’-氟)u-(2’-脱氧-2’-氟)c-(2’-脱氧-2’-氟)c-gm-(3’→3’)-dt)，具有α,α’-[4,12-二氧代-6-[[[5-(磷酰氧基(phosphoonoxy))戊基]氨基]羰基]-3,13-二氧杂-5,11-二氮杂-1,15-十五烷二基]双[ω-甲氧基聚(氧基-1,2-乙二基)]的5'酯，钠盐(seqidno:324)。agn-150998/mp0112是抗vegfdarpin，是结合vegf的小蛋白。在本发明的一些方面，vegf拮抗剂是例如重组融合蛋白，例如，阿柏西普(eyeleatm)或康柏西普。阿柏西普是由与人igg1的fc部分融合的人vegf受体1和2细胞外结构域的一部分组成的重组融合蛋白。康柏西普是由vegfr1的第二ig结构域以及vegfr2的第三和第四ig结构域与人igg1的恒定区(fc)组成的重组融合蛋白。在一些方面，scfvvegf拮抗剂是例如esba1008。esba1008是靶向vegfa的人源化单克隆单链fv(scfv)抗体片段。在一些方面，病毒载体vegf拮抗剂可以是aav-sflt01(也称为“ava-101”)。aav2-sflt01是携带与vegf结合的分泌型嵌合蛋白—sflt01的基因构建体的腺相关病毒载体。sflt01是由与人免疫球蛋白g1重链fc片段连接的flt-1的结构域2组成的vegf结合蛋白(sflt01)，其与腺相关病毒(aav)组合，以产生aav2-sflt01。在本发明的一些方面，vegf拮抗剂是小分子，例如瓦他拉尼、西地尼布、al39324、帕唑帕尼、tg100572或tg100801。瓦他拉尼(n-(4-氯苯基)-4-(吡啶-4-基甲基)酞嗪-1-胺)也称为ptk787、ptk/zk或cgp79787。西地尼布也称为azd2171、recentintm、zd2171或cas编号288383-20-0，也称为4-[(4-氟-2-甲基-1h-吲哚-5-基)氧基]-6-甲氧基-7-[3-(1-吡咯烷基)丙氧基]-喹唑啉。al39324也称为linifanib，cas编号796967-16-3、1145655-58-8(作为hcl盐)或796967-17-4(作为三氟乙酸盐)，也称为1-[4-(3-氨基-1h-吲唑-4-基)苯基]-3-(2-氟-5-甲基苯基)脲。帕唑帕尼也称为votrienttm、armalatm或patormatm，也称为5-[[4-[(2,3-二甲基-2h-吲唑-6-基)甲基氨基]-2-嘧啶基]氨基]-2-甲基苯磺酰胺一盐酸盐。tg100801是tg100572的前药形式，并且也称为4-氯-3-(5-甲基-3-((4-(2-(吡咯烷-1-基)乙氧基)苯基)-氨基)苯并[e][1,2,4]三嗪-7-基)对4-氯-3-[5-甲基-3-[[4-[2-(1-吡咯烷基)乙氧基]苯基]氨基]-1,2,4-苯并三嗪-7-基]苯酚1-苯甲酸酯。在一些方面，用于本发明的方法中的mtor抑制剂是例如大环内酯或小分子。在一些实施例中，大环内酯mtor抑制剂是例如坦罗莫司、西罗莫司或依维莫司。坦罗莫司也称为toriseltm或cci-779，也称为(1r,2r,4s)-4-{(2r)-2-[(3s,6r,7e,9r,10r,12r,14s,15e,17e,19e,21s,23s,26r,27r,34as)-9,27-二羟基-10,21-二甲氧基-6,8,12,14,20,26-六甲基-1,5,11,28,29-五氧代-1,4,5,6,9,10,11,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,28,29,31,32,33,34,34a-二十四氢-3h-23,27-环氧吡啶并[2,1-c][1,4]氧杂氮杂环三十一烷-3-基]丙基}-2-甲氧基环己基3-羟基-2-(羟甲基)-2-甲基丙酸酯。西罗莫司也称为雷帕霉素、rapamunetm、ay-22989、perceivatm、wy-090217或(3s,6r,7e,9r,10r,12r,14s,15e,17e,19e,21s,23s,26r,27r,34as)-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-十六氢-9,27-二羟基-3-[(1r)-2-[(1s,3r,4r)-4-羟基-3-甲氧基环己基]-1-甲基乙基]-10,21-二甲氧基-6,8,12,14,20,26-六甲基-23,27-环氧-3h-吡啶并[2,1-c][1,4]-氧杂氮杂环三十一烷-1,5,11,28,29(4h,6h,31h)-戊酮。依维莫司也称为afinitortm、certicantm、votubiatm或zortresstm，也称为二羟基-12-[(2r)-1-[(1s,3r,4r)-4-(2-羟基乙氧基)-3-甲氧基环己基]丙烷-2-基]-19,30-二甲氧基-15,17,21,23,29,35-六甲基-11,36-二氧杂-4-氮杂三环[30.3.1.0三十六烷-16,24,26,28-四烯-2,3,10,14,20-戊酮。本发明的特征还在于小分子mtor抑制剂，例如palomid529、xl388或dactolisib。palomid529也称为3-(4-甲氧基苄氧基)-8-(1-羟乙基)-2-甲氧基-6h-苯并[c]色烯-6-酮。xl388也称为[7-(6-氨基-3-吡啶基)-2,3-二氢-1,4-苯并氧氮杂卓-4(5h)-基][3-氟-2-甲基-4-(甲磺酰基)苯基]-甲酮。dactolisib也称为bez235或nvp-bez235，也称为2-甲基-2-(4-(3-甲基-2-氧代-8-(喹啉-3-基)-2,3-二氢咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基)苯基)丙腈。在一些方面，用于本发明的方法中的pdgf调节剂包括例如fovistatm(也称为e-10030)，这是抗血小板衍生生长因子(抗pdgf-b)适体。在一些方面，用于本发明的方法中的pedf调节剂包括例如adgvpedf.11d(genvec)。adgvpedf.11d是含有pedf基因的腺病毒载体。adgvpedf.11d使用腺病毒载体将pedf基因递送至靶细胞，导致pedf在所治疗的眼中的局部产生。色素上皮衍生因子(pedf)是新血管生长的有效抑制剂。pedf也称为丝氨酸蛋白酶抑制剂f1。在一些方面，用于本发明的方法中的s1p生产阻滞剂包括例如松昔珠单抗，也称为lt1009、asonep、sphingomabtm或isoneptm。isoneptm是结合鞘氨醇1-磷酸(s1p)的人源化单克隆抗体。在一些方面，用于与本发明的调节剂例如间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节剂中的一种或多种组合使用的眼部治疗试剂是例如角鲨胺。角鲨胺也称为evizontm或(1s,2s,5s,7r,9r,10r,11s,14r,15r)-n-{3-[(4-氨基丁基)氨基]丙基}-9-羟基-2,15-二甲基-14-[(2r,5r)-6-甲基-5-(磺酰氧基)庚-2-基]四环[8.7.0.0^{2,7}.0^{11,15}]十七烷-5-铵。在一些方面，用于本发明的方法中的微管蛋白结合剂包括例如考布他汀、考布他汀a-4磷酸盐、考布他汀衍生物或oc-10x。考布他汀也称为2-甲氧基-5-[(z)-2-(3,4,5-三甲氧基-苯基)-乙烯基]-苯酚。oc-10x(ocucure,roanoke,va)是低分子量喹唑啉酮。微管蛋白结合剂还可以是基于β-内酰胺的考布他汀衍生物，如在o'boyle,n.等人journalofmedicinalchemistry53(24):8569–8584,2010.doi:10.1021/jm101115u.pmid21080725中所述，并以引用的方式并入本文。在一些方面，用于本发明的方法中的整联蛋白抑制剂包括例如alg-1001、伏洛昔单抗或jnj-26076713。alg-1001(allegroophthalmics)是小肽。伏洛昔单抗也称为m200或opthotectm，是结合并抑制α5β1整联蛋白的功能活性的嵌合单克隆抗体。jnj-26076713是含四氢喹啉的αvβ3/αvβ5整联蛋白拮抗剂，并且也称为3-喹啉丙酸，1,2,3,4-四氢-β-((1-(1-氧代-3-(1,5,6,7-四氢-1,8-萘啶-2-基)丙基)-4-哌啶基)甲基)-(βs,3s)-。用于与本发明的调节剂例如间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂中的一种或多种组合使用的眼部治疗试剂还包括例如补体调节剂和其他治疗试剂，其可用于例如治疗地图状萎缩、干性amd、非渗出性amd和/或玻璃疣发展。与一种或多种调节剂例如间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂组合的用作眼部治疗试剂的补体调节剂是例如补体抑素、tp10、依库珠单抗、arc1905、jpe-1375、pmx53、拉姆帕力珠单抗或rhcfhp。补体抑素也称为al-78898a或pot-4，是具有序列–[icvvqdwghhrct]-的环肽。tp10(avantimmunotherapeutics)是重组蛋白，并且是可溶性补体受体一(scr1)的抑制剂。依库珠单抗也称为soliristm或solaristm，是人源化单克隆抗体。arc1905也称为zimuratm，是靶向补体因子c5的聚乙二醇化的稳定适体。jpe-1375是靶向c5ar(补体因子c5a的受体)的小分子拟肽拮抗剂。pmx53是环状六肽，具有序列ace-phe-[orn-pro-dcha-trp-arg]。拉姆帕力珠单抗也称为抗因子d或fcfd4514s，是抑制补体因子d的单克隆抗体。rhcfhp是以其保护性的全长因子h的重组融合蛋白形式，以校正异常因子h活性。在一些方面，用于与本发明的调节剂例如间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂中的一种或多种组合使用的眼部治疗试剂包括tnf-α抑制剂、c-raf激酶抑制剂、nsaid或nachr抑制剂。在一些实施例中，tnf-α抑制剂可以是阿达木单抗或英夫利昔单抗。在一些实施例中，c-raf激酶抑制剂可以是ico-007。在一些实施例中，nsaid可以是溴芬酸。在一些实施例中，nachr抑制剂可以是美加明。用于与本发明的调节剂例如间隙连接、连接蛋白和/或泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂中的一种或多种组合使用的眼部治疗试剂也可包括药物试剂，例如维替泊芬(例如chlorintm、维速达尔、他拉泊芬钠(例如aptocinetm、laserphyrintm、litxtm)、异丙基乌诺前列酮(例如ocusevatm、resculatm)、干扰素β(例如ferontm)、氟轻松(例如envisiontdtm、retiserttm)、地塞米松(例如osurdextm、ozurdextm、posurdextm、surodextm)、卡那津单抗(例如ilaristm)、溴芬酸(bromdaytm)、双星明(例如bronactm、bronucktm、xibromtm、yelloxtm)、溴莫尼定(例如alphagantm、bromoxidinetm、enidintm)、乙酸阿奈可地(例如retaanetm、edextm、prostavasintm、rigidurtm、vasoprosttm、viridaltm)、vegf-trap-eyetm、奥克纤溶酶(例如iluvientm、medidurtm、medidurfatm)、nt-501、kh-902、福他布林氨丁三醇(例如zybrestattm)、al-8309、阿加尼生(例如norvesstm)、伏洛昔单抗(例如opthotectm)、曲安西龙(例如iconbioscience)、trc-105、布利沙福(例如tg-0054)、tb-403(例如r-7334)、sb-623、s-646240、(例如pf-4523655)、rg-7417(例如fcfd-4514s)、pg-11047(例如cgc-11047)、帕利泊芬(例如stakeltm)、ot-551、ontecizumab、nox-a12、hcns-sc、neu-2000、nafb001、ma09-hrpe、lfg-316、ico-007(例如isis-13650)、hl-conl、gsk-933776a、gs-6624(例如ab-0024)、epitalon、dalantercept、mp-0112、cnto-2476、cere-120、ccx-168、溴莫尼定-dds、贝伐西尼钠(例如cand5)、柏替木单抗、acu-4429、a6(例如paralittm)、tt-30、sflt-01基因治疗、retinostattm、prs-050(例如angiocaltm)、pf-4382923、mc-1101、gw-824575、dzl3(例如trc-093)、d93、atl-1103、xv-615、psivida、vegf/rgel、var-10200、val-566-620-multi、tki、tk-001、stp-601、干性amd干细胞治疗(例如eyecyte)、opregen、smt-d004、sar-397769、rtu-007、rst-001、rgnx-004、rfe-007-cai、mc-2002、枸杞抗血管生成蛋白聚糖、ixsvegf、整联蛋白抑制剂、gw-771806、gbs-007、eos-013、ec-400、干性amd治疗(例如neuronsystems)、cgen-25017、cere-140、ap-202、ac-301、4-ipp、锌-单半胱氨酸复合物(例如adeona)、普马司他、新伐司他、美加明、cerecrib、ba-285、atx-s10、ag-13958、维替泊芬/αvb3缀合物、vegf/rgel、vegf-皂草素、vegf-r2拮抗剂(例如allostera)、vegf抑制剂(例如santen)、vegf拮抗剂(例如ark)、vangioluxtm、三苯甲烷(例如alimera)、tg-100-801、tg-100-572、ta-106、t2-trprs、su-0879、shef-1、罗他泊芬(例如photrextm、purlytintm、snet2)、视网膜-npy、pj-34、pi3k缀合物(例如semafore)、photopoint、pan-90806、opt-21、opk-hvb-010、opk-hvb-004、ophthalmologicals(例如cellnetworx)、ocuxan、ntc-200、nt-502、nova-21012、neurosolvetm、神经保护(例如bdsi)、medi-548、mct-355、mceyetm、lentivuetm、lyn-002、lx-213、lutetiumtexaphyrin(例如antrintm)、lg-339抑制剂(例如lexicon)、kdr激酶抑制剂(例如merck)、isv-616、indus-815c、icam-1适体(例如eyetech)、gtx-822、gs-102、颗粒酶b/vegftm、基因治疗(例如eyegate)、gcs-loo类似物程序、fov-rd-27、成纤维细胞生长因子(例如ramot)、panzemsrtm、etx-6991、etx-6201、eg-3306、dz-13、双硫仑(例如ora-102)、双氯芬酸(例如ophthalmopharma)、acu-02、clt-010、clt-009、clt-008、clt-007、clt-006、clt-005、clt-004、clt-003(例如chirovistm)、clt-001、cethrintm(例如ba-210)、塞来考昔、cd91拮抗剂(例如ophthalmophar)、cb-42、bnc-4、bestrophin、巴马司他、ba-1049、avt-2、avt-1、atu012、apel程序(例如apex-2)、抗vegf(例如gryphon)、amdzfp(例如toolgen)、am-1101、aln-veg01、ak-1003、agn-211745、acu-xsp-001(例如excellairtm)、acu-htr-028、acu-hhy-011、act-md(例如newneural)、abca4调节剂(例如activepass)、a36(例如angstrom)、267268(例如sb-267268)、131-ttm-601、凡德他尼(例如caprelsatm、zactimatm、zictifatm)、苹果酸舒尼替尼(例如sutenetm、sutenttm)、索拉非尼(例如nexavartm)、阿昔替尼(例如inlytatm)、tivozanib、xl-647、raf-265、哌啶他尼(例如angiocepttm)、mgd-265、依库克单抗、foretinib、enmd-2076、bms-690514、瑞格非尼、雷莫芦单抗、普利肽新(例如aplidintm)、orantinib、尼达尼布(例如vargateftm)、莫特塞尼、米哚妥林、利夫伐尼、替拉替尼、乐伐替尼、艾帕莫泰、多韦替尼、西地尼布(例如recentintm)、ji-101、卡博替尼、布立韦尼、阿帕替尼、angiozymetm、x-82、ssr-106462、乐巴替尼、pf-337210、imc-3c5、cyc116、al-3818、vegfr2抑制剂(例如abscience)、vegf/rgel(例如claytonbiotechnologies)、tlk-60596、tlk-60404、r84抗体(例如peregrine)、mg-516、flt4激酶抑制剂(例如sareum)、flt-4激酶抑制剂、sareum、dcc-2618、ch-330331、xl-999、xl-820、瓦他拉尼、su-14813、司马沙尼、krn-633、cep-7055、cep-5214、zk-cdk、zk-261991、ym-359445、ym-231146、vegfr2激酶抑制剂(例如takeda)、vegfr-2激酶抑制剂(例如hanmi)、vegfr-2拮抗剂(例如affymax)、vegf/rgel(例如targa)、vegf-tk抑制剂(例如astrazeneca)、白藜芦醇、酪氨酸激酶抑制剂(例如abbott)、酪氨酸激酶抑制剂(例如abbott)、tie-2激酶抑制剂(例如gsk)、su-0879、sp-5.2、索拉非尼珠(例如nexavartm珠)、sar-131675、ro-4383596、r-1530、pharmaprojects编号6059、osi-930、osi-817、osi-632、med-a300、l-000021649、km-2550、激酶抑制剂(例如methylgene)、激酶抑制剂(例如amgen)、ki-8751、kdr激酶抑制剂(例如celltech)、kdr激酶抑制剂(例如merck)、kdr激酶抑制剂(例如amgen)、kdr抑制剂(例如abbott)、kdr抑制剂(例如lgls)、jnj-17029259和imc-1c11。在一些实施例中，调节剂例如连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂和眼部治疗试剂可共配制用于共施用。在一些方面，调节剂例如连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂和眼部治疗试剂的制剂可以是丸剂、溶液、凝胶、预填充注射器、片剂、滴眼剂、或作为基于颗粒的制剂的部分。在一些方面，通过不同机制起作用以降低iop的化合物可以是rhopressa。在一些实施例中，通过不同机制起作用以降低iop的化合物可以是roclatan。在一些方面，通过不同机制起作用以降低iop的化合物可以是腺苷模拟物。在一些实施例中，腺苷模拟物可以是trabodenoson(n-环戊基腺苷5'-硝酸酯)。在一些实施例中，提供的是调节和/或抑制细胞或培养基中的rho激酶和连接蛋白或泛连接蛋白通道活性的作用的方法。细胞可在体内机体内，或在体内活体内或体外。培养基可包括测定培养基。该方法可包括将有效量的rho激酶抑制剂和调节剂例如连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂施加于培养基，或使细胞与有效量的rho激酶抑制剂和调节剂例如连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂接触。在一些实施例中，rho激酶抑制剂可以是delong等人的氨基异喹啉基酰胺或氨基苯甲酰胺基酰胺(美国专利号8,716,310，并以引用的方式并入本文)，bosanac等人的2h-异喹啉-1-酮和3h-异喹啉-4-酮衍生物(美国专利8,809,326)，delong的6-氨基异喹啉衍生物(美国专利公开2013/0137721)，delong的β和γ-氨基异喹啉酰胺化合物和取代的苯甲酰胺化合物(美国专利公开2014/0249201)，kopczynski的共价连接到前列腺素或前列腺素类似物的异喹啉化合物(美国专利公开2014/0275161和美国专利公开2014/0275160)，delong的异喹啉化合物(美国专利号8,034,943)，delong的异喹啉化合物(美国专利号7671205、7470787、8455513、8450344、8357699、8455647和8455514)，rhopressa，roclatan或richards的化合物和制剂(pct申请号pct/us2009/047108)。在一些实施例中，提供的是治疗疾病、病症或状况的方法。该方法可包括给受试者施用rho激酶和调节剂，例如连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节剂。该方法可包括向受试者施用组合物，所述组合物包含rho激酶抑制剂化合物和调节剂例如连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节剂，和药学上可接受的载体。疾病、病症或状况可包括与rho激酶活性相关的眼部疾病或状况或者受rho激酶影响的眼部疾病或状况。例如，该疾病可选自青光眼、湿性amd、干性amd(炎症)和dme。rho激酶抑制剂与本发明的调节剂例如连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节剂的组合也可用于降低眼内压。因此，这些制剂可用于治疗青光眼，例如高眼压型青光眼或正常眼压型青光眼。rho激酶抑制剂和调节剂，例如连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节剂可配制为用于分开施用的不同种类，或作为用于共同施用的混合物。对于rho激酶抑制剂的分开施用，用于治疗眼部疾病的施用途径可以是局部、腹膜内、玻璃体内或全身的。对于rho激酶抑制剂和调节剂的共同施用，用于治疗眼部疾病的施用途径可以是局部、腹膜内、玻璃体内或全身的。在一些实施例中，对于分开或共同施用，rho激酶抑制剂或其衍生物的制剂可配制成用于通过途径例如静脉内、皮下、肌内和关节内施用的肠胃外递送。这些制剂是液体或冻干物。液体或冻干制剂可包含1-50％的rho激酶抑制剂或其衍生物，如本文所述的调节剂的剂量范围，以及选自增溶剂、稳定剂、缓冲剂、张力调节剂、膨胀剂、粘度增强剂/降粘剂、表面活性剂、螯合剂和佐剂的剩余成分。这些成分是本领域普通技术人员众所周知的。冻干制剂需要在施用前重构。液体制剂任选用药学上可接受的稀释剂例如5％右旋糖注射液，usp或0.9％氯化钠注射液，usp稀释。这些制剂优选通过输注施用，尽管推注施用也是可能的。对于rho激酶抑制剂和调节剂例如连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂的分开施用(共施用)，施用可以是序贯或同时的。对于序贯施用，rho激酶抑制剂和连接蛋白或泛连接蛋白调节剂可在彼此的一小时内、彼此的一天内、彼此的一周内或彼此的一个月内施用。对于同时施用(共施用)，rho激酶抑制剂和调节剂可作为混合物一起施用，或作为包含rho激酶抑制剂和调节剂例如连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂两者的制剂一起施用。在一些方面，本发明提供了调节rho激酶活性和连接蛋白或泛连接蛋白通道活性的方法，该方法包括使细胞与以有效调节rho激酶活性的量的rho激酶抑制剂接触，并且使细胞与例如以有效调节连接蛋白和/或泛连接蛋白通道活性的量的连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节剂接触。在一些方面，本发明提供了降低眼内压的方法，该方法包括使细胞与以有效降低眼内压的量的rho激酶抑制剂和如本文所述的调节剂例如连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂接触。对于分开或共同施用，用于全身施用的rho激酶抑制剂的剂量范围为约0.001至约100mg/kg体重，优选约0.01至约10mg/kg体重，最优选约0.05至约5mg/kg体重/天。rho激酶抑制剂剂量可以是0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10.0、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100mg/kg体重，或任何两个所述剂量之间的任何范围或任何两个所述数目之间的任何剂量。对于分开或共同施用，调节剂例如连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂的剂量范围为约1.0ng/kg体重至约10mg/kg体重，或约1μg/kg体重至约5mg/kg体重，或约50μg/kg体重至约1mg/kg体重。调节剂例如连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节剂剂量可以是1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10.0、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100ng/kg体重，1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10.0、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100ug/kg体重，1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10.0、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100mg/kg体重，或者1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10.0、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25g/kg体重。对于分开或共同施用，可制备制剂以提供快速或缓慢释放；立即、延迟、定时或持续释放；或其组合。制剂可采取液体、溶液、悬浮液、乳液、酏剂、糖浆剂、冲剂、滴剂(包括但不限于滴眼剂)、片剂、颗粒剂、粉末、锭剂、软锭剂、胶囊、凝胶、软膏、乳膏、洗剂、油、泡沫、喷雾、薄雾或气溶胶的形式。作为另外的实施例，药物制剂可包含在隐形眼镜内、由隐形眼镜递送或附着至隐形眼镜，所述隐形眼镜放置在眼上。连接蛋白或泛连接蛋白调节剂与rho激酶抑制剂或其他试剂的组合的制造物品/试剂盒在本发明的另一个实施例中，提供的是含有可用于治疗上述疾病和病症的材料的制造物品或“试剂盒”。试剂盒包括包含rho激酶抑制剂和调节剂例如连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节剂的容器。试剂盒还可包括在容器上或与容器相关的标签或包装说明书。术语“包装说明书”用于指照例包括在治疗产品的商业包装中的说明书，其含有关于使用这种治疗产品的适应症、用法、剂量、施用、禁忌症和/或警告的信息。合适的容器包括例如瓶、小瓶、注射器、泡罩包装等。容器可由各种材料例如玻璃或塑料形成。容器可容纳rho激酶抑制剂和调节剂，例如连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节剂，或其有效治疗状况的制剂，并且可具有无菌入口(例如，容器可以是具有可被皮下注射针刺穿的塞子的静脉内溶液袋或小瓶)。组合物中的至少一种活性剂是调节剂，例如连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节剂。标签或包装说明书指示该组合物用于治疗选择的状况，例如高眼压型青光眼或正常眼压型青光眼、dme、眼部纤维化、湿性amd或干性amd、或上述眼部病症中的任何。标签或包装说明书也可指示该组合物可用于治疗其他病症。可替代地或另外，制造物品还可包括第二容器，其包含药学上可接受的缓冲液，例如抑菌性注射用水(bwfi)、磷酸盐缓冲盐水、林格氏溶液和右旋糖溶液。它还可包括从商业和用户角度期望的其他材料，包括其他缓冲液、稀释剂、过滤器、针和注射器。试剂盒还可包括施用调节剂例如连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节剂，以及可能存在的rho激酶抑制剂或其他试剂的指导，所述其他试剂作用于与如本文所述的降低iop的连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节不同的机制。例如，如果试剂盒包括包含连接蛋白或泛连接蛋白调节剂的第一组合物和第二药物制剂，则试剂盒还可包括将第一药物组合物和第二药物组合物同时、序贯或分开施用于有此需要的患者的指导。在某些其他实施例中，其中试剂盒可包含调节剂例如连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节剂，以及rho激酶抑制剂或其他试剂，所述其他试剂作用于与例如如本文所述的降低iop的连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节不同的机制，试剂盒可包括用于包含分开的组合物的容器，例如分开的瓶或分开的箔包，然而，分开的组合物也可包含在单一的未分开的容器中。通常，试剂盒包括施用分开的组分的指导。当分开的组分优选以不同的剂型(例如，眼部和肠胃外)施用、以不同的剂量间隔施用时，或当处方医师需要组合的各个组分的滴定时，试剂盒形式是特别有利的。本发明包括包含包装材料的制造物品，所述包装材料包含含有调节剂例如连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节剂和rho激酶抑制剂或其他试剂的一种或多种剂型，所述其他试剂作用于与如本文所述的降低iop的连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节不同的机制，其中所述包装材料具有指示剂型可用于患有或怀疑患有或倾向于本文描述或提及的任何疾病、病症和/或状况的受试者的标签。这样的剂型包括例如用于肠胃外和眼部递送形式和制剂的片剂、胶囊、溶液和悬浮液。在一些方面，试剂盒可包含在与调节剂例如连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节剂不同的区室中区室化的rho激酶抑制剂，用于分开施用。区室可以是分开的小瓶、分开的注射器、分开的隐形眼镜、分开的溶液、或用如上所述的试剂注入的分开的颗粒。在一些方面，rho激酶抑制剂可被区室化用于递送到眼的前部，而连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节剂例如可被区室化用于递送到眼的后段(视网膜、脉络膜、rpe、布鲁赫膜)。在一些方面，连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节剂例如可以如本文所述的纳米颗粒或微粒的形式区室化，用于持续递送至眼的后部，而rho激酶抑制剂可被区室化用于以注入rho激酶抑制剂的滴眼剂或隐形眼镜的形式立即或持续递送到眼的前部。在一个方面，试剂盒还可包括第三容器，其包含药学上可接受的缓冲液，例如抑菌性注射用水(bwfi)、磷酸盐缓冲盐水、林格氏溶液和右旋糖溶液。它还可包括从商业和用户角度期望的其他材料，包括其他缓冲液、稀释剂、过滤器、针和注射器。在一些方面，试剂盒的第一和第二(和任选的第三)组合物可组合施用、可同时施用、可分开施用、可序贯施用、或可以持续方式施用。离子电渗本发明的连接蛋白调节剂制剂还可通过离子电渗来施用，所述离子电渗是其中通过施加小电流来增强药物渗透的非侵入性程序。调节剂例如连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节剂用携带与药物相同电荷的电极施加，并且具有相反电荷的接地电极放置在身体上的其他地方以完成电路。调节剂帮助传导电流通过组织。经巩膜离子电渗可用于向视网膜和脉络膜递送治疗水平的生物活性多核苷酸和肽。剂量、量和浓度如应了解的，所施用的调节剂例如间隙连接通道调节剂，例如肽5和/或其类似物，式i化合物，例如托那博沙和前述化合物中任何的类似物，和/或泛连接蛋白调节剂，例如丙磺舒及其类似物，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂，例如10panx1或其类似物的剂量、施用时期和一般的施用方案在受试者之间可不同，取决于这样的变量例如它要递送至其的靶位点，要治疗的受试者的任何症状的严重性，待治疗的病症的类型，单位剂量的大小，所选择的施用模式，以及受试者的年龄、性别和/或一般健康，以及本领域普通技术人员已知的其他因素。从细胞培养测定和动物研究获得的数据可用于制定用于人中的剂量范围。取决于所采用的剂型和所利用的施用途径，调节剂剂量可在该范围内变化。对于在本发明的方法中使用的任何试剂，治疗有效剂量可最初由细胞培养测定估计。可在细胞培养物或动物模型中制定剂量，以达到包括如在细胞培养物中测定的ic50(即达到症状的半最大抑制的测试化合物浓度)的细胞浓度范围。这样的信息可用于更准确地确定在人中的有用剂量。确切的制剂、施用途径和剂量可由各个医生考虑到患者的状况来选择。(参见例如fingl等人，1975,in:thepharmacologicalbasisoftherapeutics，第1章，第1页)。剂量可从施用量的浓度、测试的动物模型的预期质量(对于成年wistar大鼠200–300g/大鼠)测定，以从施用的浓度(微摩尔)或施用的量(mg)测定以mg/kg为单位的剂量。在本文中描述且请求保护了可用于治疗眼部病症例如青光眼、眼部缺氧、视网膜灌注损伤、amd、dme、眼纤维化和/或眼部神经病变或本文所述的任何其他眼部病症的有效剂量的例子。在一些方面，有效治疗眼部病症，例如高眼压、青光眼、amd、dme、眼部纤维化、青光眼性眼部神经病变、rgc丧失、脉络膜灌注损伤、脉络膜炎症、脉络膜过度灌注和/或脉络膜毛细血管脱落，治疗有效量的调节剂例如连接蛋白调节剂和/或泛连接蛋白通道调节剂，例如连接蛋白43或连接蛋白43半通道调节剂为浓度约0.001至约1.0微克/ml、或约0.001至约0.01mg/ml、或约0.1mg/ml至约100mg/ml或更多、或任何两个所述剂量之间的任何范围或任何两个所述数目之间的任何剂量。剂量可以是0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10.0、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100mg/ml、或任何两个所述剂量之间的任何范围或任何两个所述数目之间的任何剂量。在一些实施例中，治疗有效量的调节剂例如连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节试剂蛋白质调节试剂以范围为约0.5至约50mg/ml的浓度存在。在一些实施例中，调节试剂以范围为约0.3至约30mg/ml的浓度存在。在一些实施例中，调节试剂以范围为约0.1或1.0至约10mg/ml的浓度存在。在一些实施例中，调节试剂以范围为约0.1或1.0至约0.3或3.0mg/ml的浓度存在。在一些实施例中，调节试剂以约3.0mg/ml的浓度存在。在这些方面的任一个中，调节试剂可以是连接蛋白反义寡核苷酸。当调节试剂是经修饰的反义寡核苷酸，例如主链修饰的寡核苷酸或化学修饰的寡核苷酸用于增加半衰期时，上述剂量浓度可相同，或者可基于例如效力和特异性而适当减少或增加。在这些方面的任一个中，载体(媒介物)可以是药学上可接受的载体。在一些方面，调节剂例如连接蛋白调节剂和/或泛连接蛋白通道调节剂可以约0.001至约100mg/kg、约0.001至约0.01mg/kg、约0.01至约0.1mg/kg、0.1至约1mg/kg、约1至约10mg/kg、或约10至约100mg/kg，或任何两个所述剂量之间的任何范围或任何两个所述剂量之间的任何剂量的治疗有效剂量施用。在一些方面，剂量可以是0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10.0、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100mg/ml、或任何两个所述剂量之间的任何范围或任何两个所述数目之间的任何剂量。虽然如上文例示的用于本发明的治疗有效浓度、量或剂量各自可用于经修饰的或未经修饰的核酸调节剂、经修饰的或未经修饰的肽或拟肽调节剂、或小分子调节剂，但在本发明的一些方面，对于上述治疗有效浓度、量或剂量各自，肽或拟肽连接蛋白调节剂或泛连接蛋白调节剂的剂量可以是所述浓度、量或剂量中任何的1/10至1/100之间、或1/100至1/1000之间。另外，在一些方面，经修饰的调节剂，例如连接蛋白调节剂、泛连接蛋白调节剂或泛连接蛋白通道调节剂的治疗有效浓度、量或剂量可在所述浓度、量或剂量的1/10至1/100之间、或1/100至1/1000之间、或任何两个所述剂量之间的任何范围或任何两个所述数目之间的任何剂量。应当了解施用可包括单个日剂量、多个离散的分开剂量的施用、或连续施用，如可能是适当的。例如，单位剂量可每天施用一次或超过一次，例如每天1、2、3、4、5或6次，以达到所需的日总剂量。例如，间隙连接通道调节剂，例如肽5和/或其类似物，式i化合物，例如托那博沙和前述化合物中任何的类似物，和/或泛连接蛋白调节剂，例如丙磺舒及其类似物，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂，例如10panx1或其类似物的单位剂量可在单个日剂量或多个离散剂量中施用或者连续施用，以实现大约0.1至10mg、10至100mg、100至1000mg、1000至2000mg、或2000mg至5000mg、0.1至大约2000mg、大约0.1至大约1000mg、大约1至大约500mg、大约1至大约200mg、大约1至大约100mg、大约1至大约50mg、或大约1至大约25mg，或任何两个所述剂量之间的任何范围或任何两个所述剂量之间的任何剂量的日剂量。作为进一步的例子，调节剂例如间隙连接通道调节剂，例如肽5、托那博沙和/或其任一种的类似物，和/或泛连接蛋白调节剂，例如丙磺舒及其类似物，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂，例如10panx1或其类似物的单位剂量可每天施用一次或超过一次(例如1、2、3、4、5或6次，通常为每天1至4次)，使得日总剂量(对于70kg成人)在大约1至大约1000mg的范围内，例如大约1至大约500mg、或500mg至1000mg、1000至2000mg、或2000mg至5000mg，或任何两个所述剂量之间的任何范围或任何两个所述剂量之间的任何剂量。例如，间隙连接通道调节剂，例如肽5和/或其类似物，式i化合物，例如托那博沙和前述化合物中任何的类似物，和/或泛连接蛋白调节剂，例如丙磺舒和其类似物，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂，例如10panx1或其类似物可以大约0.01至大约15mg/kg/天的剂量范围施用于受试者，例如大约0.1至大约6mg/kg/天，例如大约1至大约6mg/kg/天，例如6mg/kg/天至100mg/kg/天，或任何两个所述剂量之间的任何范围或任何两个所述剂量之间的任何剂量。在一个实施例中，托那博沙可以大约2mg至大约40mg的剂量每天口服施用一次。在一个实施例中，式i化合物例如托那博沙和前述化合物中任何的类似物的剂量在作用部位处为大约0.001微摩尔至0.1微摩尔、0.1微摩尔至高达大约200微摩尔，或在循环内更高以在作用部位处达到这些浓度。例如，剂量可以是(但不限于)约0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10.0、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、310、320、330、340、350、360、370、380、390、400、410、420、430、440、450、460、470、480、490或500微摩尔的最终循环浓度，或任何两个所述浓度之间的任何范围或任何两个所述数目之间的任何浓度。预期阻断半通道但不解偶联间隙连接的剂量的进一步例子在以引用的方式并入本文的o’carroll等人，2008中描述。在一些实施例中，托那博沙可以较低剂量使用，例如0.001至20微摩尔。低剂量可以是0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10.0、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20微摩尔。惊讶地确定，例如较低剂量的托那博沙可用于抑制在再灌注期间cx43半通道介导的atp释放。在本发明的方法和用途中单独或与泛连接蛋白调节剂组合使用这种较低剂量的托那博沙也有利于降低托那博沙的副作用。在其他方面，托那博沙关于瞬时对抗损伤后cx43的上升以及因此gj半通道的从头形成的时间依赖性作用可用于例如在损伤后连接蛋白43通道的受控瞬时调节，同时使‘空间缓冲’效应的完全去除降到最低，以预防毒性代谢产物的积累，并且在损伤后同步特别是在中枢神经系统中的组织。在一个实施例中，调节剂例如间隙连接通道调节剂，例如肽5和/或其类似物，和/或泛连接蛋白通道调节剂，例如丙磺舒及其类似物，和/或泛连接蛋白1的合成模拟肽阻滞剂，例如10panx1或其类似物的剂量在作用部位处为大约0.001微摩尔至高达大约200微摩尔、或200至2000或5000微摩尔，或在循环中更高以在作用部位处达到这些浓度。例如，剂量可以是(但不限于)约1、5、10、20、50、100、200、250、500、1000、2000、3000、4000或5000微摩尔的最终循环浓度，或任何两个所述剂量之间的任何范围或任何两个所述剂量之间的任何剂量。在o'carroll等人，2008中讨论了有效阻断半通道但不解偶联间隙连接的肽5的剂量。在一些实施例中，托那博沙可以较低剂量使用，例如1至20微摩尔、1至50微摩尔、20至30、30至40或40至50微摩尔。低剂量可以是0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10.0、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20微摩尔。惊讶地确定，例如较低剂量的托那博沙抑制在缺血再灌注期间cx43半通道介导的atp释放。惊讶地确定，某些剂量的托那博沙抑制半通道形成，由此治疗缺血后的再灌注。在一些实施例中，合适治疗有效剂量的调节剂例如连接蛋白调节剂或泛连接蛋白调节剂或其通道调节剂，可以是至少约1.0mg/ml的调节剂例如连接蛋白调节剂或泛连接蛋白或通道调节剂。在一些实施例中，调节剂例如连接蛋白调节剂和/或泛连接蛋白调节剂及其通道的治疗有效剂量可以是约0.001mg/ml至0.01mg/ml、约0.01mg/ml至约0.1mg/ml、或约0.1mg/ml至约100mg/ml。在一些实施例中，连接蛋白调节剂或泛连接蛋白调节剂的合适治疗有效剂量可以是约1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0、11.0、12.0、13.0、14.0、15.0、16.0、17.0、18.0、19.0、20.0、21.0、22.0、23.0、24.0、25.0、26.0、27.0、28.0、29.0、30.0、31.0、32.0、33.0、34.0、35.0、36.0、37.0、38.0、39.0、40.0、41.0、42.0、43.0、44.0、45.0、46.0、47.0、48.0、49.0、50.0、52.5、55.0、57.5、60.0、62.5、65.0、67.5、70.0、72.5、75.0、77.5、80.0、82.5、85.0、87.5、90.0、92.5、95.0、97.5或约100.0ug/ml，或任何两个所述剂量之间的任何范围或子范围，或落入约0.1至约100ug/ml的范围内的任何剂量。在一些实施例中，抗连接蛋白试剂的合适治疗有效剂量可以是约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0、11.0、12.0、13.0、14.0、15.0、16.0、17.0、18.0、19.0、20.0、21.0、22.0、23.0、24.0、25.0、26.0、27.0、28.0、29.0、30.0、31.0、32.0、33.0、34.0、35.0、36.0、37.0、38.0、39.0、40.0、41.0、42.0、43.0、44.0、45.0、46.0、47.0、48.0、49.0、50.0、52.5、55.0、57.5、60.0、62.5、65.0、67.5、70.0、72.5、75.0、77.5、80.0、82.5、85.0、87.5、90.0、92.5、95.0、97.5或约100.0mg/ml，或任何两个所述剂量之间的任何范围或子范围，或落入约0.1至约100mg/ml的范围内的任何剂量。在一些实施例中，调节剂例如连接蛋白调节剂和/或泛连接蛋白通道调节剂以范围为约0.5至约50mg/ml的浓度存在。在其他实施例中，调节剂例如连接蛋白调节剂和/或泛连接蛋白通道调节剂以范围为约0.3至约30mg/ml的浓度存在。在其他实施例中，调节剂以范围为约0.1或1.0至约10mg/ml的浓度存在。在其他实施例中，调节剂以范围为约0.1或1.0至约0.3或3.0mg/ml的浓度存在。在其他实施例中，调节剂例如连接蛋白调节剂或泛连接蛋白调节剂，例如连接蛋白43调节试剂，和/或连接蛋白45调节试剂以约3.0mg/ml的浓度存在。在这些方面的任一个中，调节剂例如连接蛋白调节试剂可以是连接蛋白43或连接蛋白45调节试剂，例如连接蛋白43或连接蛋白45反义寡核苷酸，优选连接蛋白43调节试剂，例如连接蛋白43反义寡核苷酸。当调节剂是经修饰的连接蛋白或泛连接蛋白反义寡核苷酸时，上述剂量浓度可增加例如约2至约10倍。当调节剂是经修饰的或未经修饰的肽或拟肽时，剂量可减少10、100或1000倍。在某些实施例中，连接蛋白或泛连接蛋白调节剂，例如连接蛋白43调节剂可在治疗部位处和/或与治疗部位邻近以约0.001微摩尔(μm)或0.05μm至约200μm，或高达300μm或高达1000μm或高达2000μm或高达3200μm或更高，例如高达约10mm、20mm或30mm的最终浓度，以及这些剂量数目内的任何剂量和剂量范围施用。在一个实施例中，连接蛋白调节剂(抗连接蛋白试剂)组合物以大于约1000μm施加。优选地，反义多核苷酸组合物以约1000μm至约10mm的最终浓度施加，更优选地，抗连接蛋白试剂组合物以约3mm至约10mm的最终浓度施加，并且更优选地，抗连接蛋白试剂组合物以约1-3mm至约5-10mm的最终浓度施加。连接蛋白调节剂浓度可以是0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10.0、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100微摩尔；或者0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10.0、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100毫摩尔，或任何两个所述剂量之间的任何范围或任何两个所述数目之间的任何剂量。另外，调节剂例如连接蛋白和泛连接蛋白通道调节剂，例如连接蛋白43调节剂可以约1μm至约20μm的最终浓度存在于制剂中，并且可替代地，连接蛋白43调节剂以约5μm至约20μm的最终浓度、或以约10至约15μm的最终浓度存在。在某些其他实施例中，调节剂以约10μm的最终浓度存在。在另外一个实施例中，调节剂以约1-15μm的最终浓度存在。在其他实施例中，调节剂以约20μm、30μm、40μm、50μm、60μm、70μm、80μm、90μm、100μm、10-200μm、200-300μm、300-400μm、400-500μm、500-600μm、600-700μm、700-800μm、800-900μm、900-1000或1000-1500μm、或1500μm–2000μm、2000μm-3000μm、3000μm-4000μm、4000μm-5000μm、5000μm-6000μm、6000μm-7000μm、7000μm-8000μm、8000μm-9000μm、9000μm–10,000μm、10,000μm–11,000μm、11,000μm–12,000μm、12,000μm–13,000μm、13,000μm–14,000μm、14,000μm–15,000μm、15,000μm–20,000μm、20,000μm–30,000μm、30,000μm–50,000μm或更大，或任何两个所述剂量之间的任何范围或子范围，或落入约20μm至约50,000μm的范围内的任何剂量存在。另外其他剂量水平在本文所述的每种调节剂约1纳克(ng)/kg和约1mg/kg体重/天之间。在某些实施例中，每种主题化合物的剂量一般在约1ng至约1微克/kg体重、约1ng至约0.1微克/kg体重、约1ng至约10ng/kg体重、约10ng至约0.1微克/kg体重、约0.1微克至约1微克/kg体重、约20ng至约100ng/kg体重、约0.001mg至约0.01mg/kg体重、约0.01mg至约0.1mg/kg体重、或约0.1mg至约1mg/kg体重的范围内。在某些实施例中，每种主题化合物的剂量一般在约0.001mg至约0.01mg/kg体重、约0.01mg至约0.1mg/kg体重、约0.1mg至约1mg/kg体重的范围内。如果使用超过一种调节剂例如连接蛋白和/或泛连接蛋白通道调节剂，则每种调节剂的剂量无需在与另一种调节剂相同的范围内。例如，一种连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂的剂量可在约0.01mg至约10mg/kg体重之间，并且另一种连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂的剂量可在约0.1mg至约1mg/kg体重、0.1至约10、0.1至约20、0.1至约30、0.1至约40、或约0.1至约50mg/kg体重之间。剂量也可以是约0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10.0、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100mg/kg体重，或任何两个所述剂量之间的任何范围或子范围，或落入约0.001至约100mg/kg体重的范围内的任何剂量。在一个实施例中，与所述试剂单独施用时的有效剂量相比较，一种或多种调节剂例如连接蛋白、半通道、泛连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂多核苷酸，或者一种或多种连接蛋白或泛连接蛋白调节剂肽或拟肽的组合使用降低了任何这样的试剂的有效剂量。在某些实施例中，当组合使用时，试剂的有效剂量为单独使用时的试剂的约1/15至约1/2、约1/10至约1/3、约1/8至约1/6、约1/5、约1/4、约1/3或约1/2剂量。在另一个优选实施例中，与所述试剂单独施用时的频率相比较，一种或多种抗连接蛋白多核苷酸和一种或多种抗连接蛋白肽或拟肽、或与任一或两者组合的其他抗连接蛋白试剂的组合使用降低了施用所述试剂的频率。因此，这些组合允许使用比先前实现所需治疗目标所需的更低和/或更少剂量的每种试剂。在一个实施例中，连接蛋白或泛连接蛋白调节剂肽或拟肽的剂量可是本文阐述的任何所述剂量的10、100或1000倍低。方便地，调节剂以足以下调其相应蛋白质的表达的量施用。连接蛋白调节剂，例如连接蛋白43或45调节剂以足够的量施用，以在施用后下调连接蛋白43的表达或调节间隙连接形成或连接子开放至少约0.5至1小时、至少约1-2小时、至少约2-4小时、至少约4-6小时、至少约6-8小时、至少约8-10小时、至少约12小时或至少约24小时。连接蛋白或泛连接蛋白通道调节剂例如连接蛋白43或45调节剂的剂量可在单次或分开应用中施用。剂量可施用一次，或应用可重复。通常，应用将根据需要每周，每两周或每3周，每月或每2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23或每24个月或更久重复，以预防、减慢或治疗眼部神经病变或本文所述的任何眼部病症。该剂量可在神经元丧失增加或减少的情况下重复、和/或增加或减少。剂量也可间隔每12小时至7天或更久应用。例如，剂量可间隔12小时，或1、2、3、4、5、6或7天，或在这些时间中的任何两个之间或12小时至7天之间的任何时间间隔应用。连接蛋白43调节剂可施用高达四、六、八、十、十二、十四、十六、十八、二十、二十二、二十四或二十六周。对于一些适应症，例如某些眼部用途，可采用高达每小时的更频繁的给药。试剂盒、药物和制造物品任选地，一种或多种调节剂，例如连接蛋白或泛连接蛋白调节剂多核苷酸和/或一种或多种连接蛋白或泛连接蛋白调节剂肽或拟肽和/或其他抗连接蛋白试剂，例如间隙连接或半通道磷酸化试剂或连接蛋白羧基末端多肽，或小分子调节剂，单独或与调节试剂中的任何或其他抗性伤口愈合剂组合，也可用于药物的制备中或试剂盒中。合适的抗连接蛋白调节试剂、多核苷酸或肽可以是抗连接蛋白43、30或26调节试剂、多核苷酸或肽。在一些方面，这些连接蛋白调节剂中的任一种是cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx45、cx50、cx57或者眼或血管中的任何其他连接蛋白的调节剂。在一个方面，本发明提供了包含所述一种或多种组合物或制剂的制造物品或试剂盒。例如，试剂盒可包括药物制剂，其包含有效量的一种或多种连接蛋白或泛连接蛋白调节剂多核苷酸和/或一种或多种连接蛋白或泛连接蛋白调节剂肽或拟肽和/或其他抗连接蛋白试剂，例如间隙连接或半通道磷酸化试剂或连接蛋白羧基末端多肽，单独或与连接蛋白或泛连接蛋白调节剂中的任何或其他眼部治疗试剂组合。在一些实施例中，试剂盒可包括药物制剂，其包含有效量的一种或多种抗连接蛋白43多核苷酸和/或一种或多种抗连接蛋白43肽或拟肽和/或其他抗连接蛋白试剂，例如间隙结合或半通道磷酸化试剂或连接蛋白羧基末端多肽，单独或与抗连接蛋白43调节剂中的任何或其他眼部治疗试剂组合。在一些方面，任何试剂盒可包含cx26、cx30、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx45、cx50、cx57或者眼或血管中任何其他连接蛋白的调节剂。试剂盒可包含在分开的容器或分隔的容器中的一种或多种药物组合物，连同包装和使用说明书。试剂盒还可包含药学上可接受的载体。在一些实施例中，试剂盒还可包括用于施用药物组合物的部件，例如注射器、针、微针、可负载植入物或离子电渗装置。如本文所述的连接蛋白或泛连接蛋白调节剂和眼部治疗配偶体可独立地给药或通过使用具有不同量的组合配偶体(a)和(b)的不同固定组合，即同时、分开或序贯给药，所述组合配偶体无论是药物形式还是敷料/基质形式或两者。然后，试剂盒的各部分可例如同时或按时间顺序交错施用，所述交错施用即在不同的时间点并且对于部分试剂盒的任何部分具有相等或不同的时间间隔。还提供了制造物品，其包括含有如本文所述的本发明的化合物、组合物或制剂的容器和用于治疗受试者的说明书。例如，在另一个方面，本发明包括包含容器连同使用说明书包括用于治疗受试者的用途的制造物品，所述容器含有治疗有效量的一种或多种连接蛋白或泛连接蛋白调节剂多核苷酸和/或一种或多种连接蛋白或泛连接蛋白调节剂肽或拟肽和/或其他抗连接蛋白试剂，例如间隙连接或半通道磷酸化试剂或连接蛋白羧基末端多肽，单独或与抗连接蛋白调节试剂中的任何或其他抗性伤口愈合剂组合。合适的抗连接蛋白调节试剂、多核苷酸或肽可以是连接蛋白43或45调节试剂、多核苷酸或肽。在一些方面，制造物品可包含基质，其包含一种或多种连接蛋白或泛连接蛋白调节剂肽或拟肽或者其他眼部治疗试剂或抗连接蛋白试剂，例如间隙连接或半通道磷酸化试剂或连接蛋白羧基末端肽，单独或与抗连接蛋白43调节试剂中的任何或其他抗性伤口愈合剂组合。合适的连接蛋白或泛连接蛋白调节试剂、多核苷酸或肽可以是抗连接蛋白43或45调节试剂、多核苷酸或肽。连接蛋白调节剂本文所述的连接蛋白调节剂，例如连接蛋白43或连接蛋白45调节剂，通过例如阻断或抑制分子进入和离开细胞的转运来调节细胞通讯(例如细胞与细胞)。连接蛋白调节剂影响分子在细胞质和周质或细胞外间隙之间的传递。这种调节剂一般靶向半通道(也称为连接子)，其可独立涉及细胞质和细胞外间隙或组织之间的小分子交换。因此，本文提供的化合物可直接或间接减少细胞之间(经由间隙连接)或细胞与细胞外间隙或组织(经由半通道)之间的偶联，并且分子从细胞转运到细胞外间隙内的调节在本发明的某些化合物和实施例的范围内。在一些方面，连接蛋白调节剂是cx26、cx30、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx43、cx45、cx50、cx57或者眼或血管中的任何其他连接蛋白的调节剂。能够引起分子(例如转运)通过眼部血管中的间隙连接或连接蛋白半通道的经过的所需抑制的任何调节剂均可用于本发明的实施例中。在特定的实施例中，还提供了调节分子通过间隙连接或连接蛋白半通道的经过的任何连接蛋白试剂(例如，调节、阻断或减少分子从细胞的细胞质到细胞外间隙或相邻细胞质的经过的那些)。这种抗连接蛋白试剂可调节分子通过间隙连接或连接蛋白半通道的经过，伴随或不伴随间隙连接解偶联(阻断分子通过间隙连接的转运)。这样的化合物包括例如结合蛋白、多肽和其他有机化合物，其可例如全部或部分地阻断间隙连接或半通道的功能或活性。在一些实施例中，抗连接蛋白调节剂可以是抗连接蛋白43调节剂或抗连接蛋白45调节剂。在一些方面，连接蛋白调节剂是cx26、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx50、cx57或者眼或血管中的任何其他连接蛋白的调节剂。某些连接蛋白调节剂例如连接蛋白43或连接蛋白45调节剂提供连接蛋白表达的下调(例如通过mrna转录或翻译的下调)或者以其他方式降低或抑制连接蛋白、连接蛋白半通道或间隙连接的活性。在下调的情况下，这将具有在连接蛋白表达下调的位点处，减少通过间隙连接的直接细胞-细胞通讯的效应，或细胞质通过半通道暴露于细胞外间隙的效应。在某些实施例中，抗连接蛋白试剂预防、降低或改变半通道或间隙连接的活性或功能。如本文使用的，通过抗连接蛋白试剂调节间隙连接活性或功能可包括间隙连接的关闭、半通道的关闭和/或分子或离子通过间隙连接和/或半通道的经过。泛连接蛋白或连接蛋白调节剂包括抗连接蛋白或抗泛连接蛋白多核苷酸，例如反义多核苷酸或寡核苷酸，例如连接蛋白43寡脱氧核苷酸和其他多核苷酸(例如具有sirna或核酶功能的多核苷酸)，以及结合连接蛋白和泛连接蛋白的抗体及其结合片段，以及泛连接蛋白或连接蛋白肽和多肽，包括调节半通道或间隙连接活性或功能的连接蛋白的拟肽和肽类似物，以及其他间隙连接阻滞剂和间隙连接蛋白磷酸化试剂。连接蛋白肽和多肽可例如结合连接蛋白以抑制其功能，或可通过模拟连接蛋白的区域来抑制或破坏其与其他间隙连接蛋白的结合来抑制连接蛋白功能。泛连接蛋白肽和多肽可例如抑制或破坏泛连接蛋白通道。在其他实施例中，连接蛋白调节剂是抗连接蛋白43肽或拟肽，例如抗连接蛋白43半通道阻断肽或拟肽，例如包含连接蛋白细胞外结构域、跨膜区和连接蛋白羧基末端肽的经修饰的或未经修饰的肽或拟肽)。抗连接蛋白半通道阻断肽或拟肽可以是经修饰的或未经修饰的。抗连接蛋白半通道阻断肽或拟肽是化学制备的、合成制备的或以其他方式制造的。在一些实施例中，本发明的连接蛋白调节剂包括抗连接蛋白肽或拟肽，例如连接蛋白43肽或拟肽，例如本文所述的任何肽，包括包含连接蛋白的细胞外结构域的一部分的肽以及包含可用于本发明的方法中的连接蛋白的羧基末端部分的一部分的肽，其是治疗有效的，例如有效治愈本文所述的任何神经性眼部病症。在一些方面，治疗有效的经修饰的或未经修饰的肽或拟肽包含连接蛋白例如连接蛋白43的细胞外或跨膜结构域的一部分。合成抗体和结合片段以及肽和多肽，包括拟肽和肽类似物的方法也可使用合适的方法执行。参见例如lihuyang等人，proc.natl.acad.sci.u.s.a.,1；95(18):10836-10841(sept11998)；harlow和lane(1988)“antibodies:alaboratorymanuel”coldspringharborpublications,newyork；harlow和lane(1999)“usingantibodies”alaboratorymanuel,coldspringharborpublications,newyork。连接蛋白多核苷酸和寡核苷酸在本发明的一些方面，连接蛋白调节剂是肽或拟肽。连接蛋白调节剂可包含例如连接蛋白43或连接蛋白45肽或拟肽，优选连接蛋白43肽或拟肽。在一些方面，连接蛋白肽或拟肽可以是cx26、cx30、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx50、cx57肽或拟肽。在一些方面，连接蛋白调节剂可包括或排除前述中的任何。在一些实施例中，连接蛋白43调节剂可包含例如seqidno:173(srptekt)、seqidno:168(vdcflsrptekt)或通过接头在n末端处缀合到两个十二烷基的seqidno:168。肽可含有一个或多个经修饰的氨基酸、氨基酸类似物，或可以其他方式进行修饰，例如缀合或结合至细胞内化转运蛋白。在另一个非限制性但优选的实施例中，抗连接蛋白化合物包括包含对应于连接蛋白的跨膜区的一部分的氨基酸序列的肽，所述连接蛋白例如连接蛋白43或连接蛋白45或cx26、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx50、cx57或者眼或血管中的任何其他连接蛋白。在特定的非限制性实施例中，抗连接蛋白化合物是具有氨基酸序列的肽，其包含具有包含连接蛋白(例如连接蛋白43或45蛋白质序列)的约3至约30个邻接氨基酸，连接蛋白(例如连接蛋白43或45蛋白质序列)的约5至约20个邻接氨基酸的氨基酸序列的肽，具有包含连接蛋白(例如连接蛋白43或45蛋白质序列)的约8至约15个邻接氨基酸的氨基酸序列的肽，或具有包含连接蛋白43或45蛋白质序列的约11、12或13个邻接氨基酸的氨基酸序列的肽。其他非限制性实施例包括抗连接蛋白化合物，其是具有包含连接蛋白43或45蛋白质序列的至少约5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、25或30个邻接氨基酸的氨基酸序列的肽。在一些方面，连接蛋白调节剂(抗连接蛋白化合物)可包括或排除前述中的任何。在其他抗连接蛋白化合物中，模拟肽基于连接蛋白43的细胞外结构域，其对应于在连接蛋白43蛋白质序列的位置37-76和178-208处的氨基酸。因此，本文所述的某些肽具有对应于在连接蛋白43蛋白质序列的位置37-76和178-208处的区域的氨基酸序列。肽无需具有与连接蛋白43蛋白质序列的那些部分相同的氨基酸序列，并且可进行保守氨基酸改变，使得肽在本文描述和本领域另外已知的测定中保留结合活性或功能活性。在其他实施例中，模拟肽基于除细胞外结构域外的在连接蛋白内的肽靶区域(例如不对应于位置37-76和178-208的连接蛋白43蛋白质序列的部分)。在一些实施例中，连接蛋白45调节剂可包含例如肽。肽可含有一个或多个经修饰的氨基酸、氨基酸类似物，或可以其他方式进行修饰，例如缀合或结合至细胞内化转运蛋白或生物利用度试剂。在非限制性但优选的实施例中，连接蛋白调节剂包括包含对应于连接蛋白45的跨膜区的一部分或连接蛋白45的c末端区的氨基酸序列的肽。在特定的非限制性实施例，例如抗连接蛋白化合物是具有包含已知连接蛋白45序列的约3至约30个邻接氨基酸的氨基酸序列的肽，具有包含已知连接蛋白45序列的约5至约20个邻接氨基酸的氨基酸序列的肽，具有包含已知连接蛋白45序列的约8至约15个邻接氨基酸的氨基酸序列的肽，或具有包含已知连接蛋白45序列的约11、12或13个邻接氨基酸的氨基酸序列的肽。其他非限制性实施例包括抗连接蛋白化合物，其是具有包含已知连接蛋白45序列的至少约3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、25或30个邻接氨基酸的氨基酸序列的肽。在本文提供的某些抗连接蛋白化合物中，模拟肽基于连接蛋白45的细胞外结构域，其对应于在已知连接蛋白45序列的位置46-75和199-228处的氨基酸。因此，本文所述的某些肽具有对应于在已知连接蛋白45序列的位置46-75和199-228处的区域的氨基酸序列。肽无需具有与已知连接蛋白45序列的那些部分相同的氨基酸序列，并且可进行保守氨基酸改变，使得肽在本文描述和本领域另外已知的测定中保留结合活性或功能活性。在其他实施例中，模拟肽基于除细胞外结构域外的在连接蛋白内的肽靶区域(例如不对应于位置46-75和199-228的已知连接蛋白45序列的部分)。公开了不同连接蛋白质序列的wo2006/134494以引用的方式并入。在一些方面，连接蛋白调节剂可包括或排除前述中的任何。在一些方面，用于本发明的任何治疗方法中的抗连接蛋白调节剂是连接蛋白调节剂，例如连接蛋白45或连接蛋白43调节剂。在一些实施例中，连接蛋白调节剂是连接蛋白43寡核苷酸或多核苷酸，其可以是例如连接蛋白43反义寡核苷酸或多核苷酸。本发明的寡核苷酸和多核苷酸是化学制备的、合成制备的或以其他方式制造的。在一个实施例中，连接蛋白调节剂是连接蛋白反义寡脱氧核苷酸，无论是化学修饰的还是未经修饰的。本发明的特征在于选自例如经修饰的或未经修饰的连接蛋白43多核苷酸或寡核苷酸的连接蛋白43调节剂。在一些方面，本发明涉及连接蛋白反义化合物，例如经修饰的或未经修饰的连接蛋白43反义寡核苷酸和经修饰的或未经修饰的连接蛋白43反义多核苷酸，或者包含经修饰的和未经修饰的核苷酸的混合物的寡核苷酸或多核苷酸。在一些方面，在本文方法中使用的连接蛋白43反义化合物是包含天然存在的核碱基和未经修饰的核苷间键的反义寡核苷酸。通常，多核苷酸是单链的，但可以是双链的。本文的特征还在于包含选自seqidno:1-16的核碱基序列的经修饰的或未经修饰的连接蛋白43反义化合物。本发明的多核苷酸包括具有小于80个核苷酸，例如12-18至约50-80个核苷酸，优选约30个核苷酸或更少，例如12至约30个核苷酸，且更优选约15至约30个核苷酸的长度的合成多核苷酸。在一个例子中，多核苷酸具有30个核苷酸。在一些方面，本发明的方法的特征在于长度高达40个核苷酸，例如长度15至40个核苷酸的连接蛋白43反义化合物的使用，包含选自seqidno:1-16的核苷酸序列，或包含seqidno:17的约8至40个核苷酸。在本发明的一些方面，连接蛋白43反义寡核苷酸或多核苷酸与具有选自seqidno:1至16的序列或seqidno:17的一部分的多核苷酸具有至少约80％、85％、90％、95％、97％、98％或99％的同源性。连接蛋白调节剂，包括在某些实施例中提供和使用的那些，可包含选自例如反义寡核苷酸、反义多核苷酸、脱氧核酶、吗啉代寡核苷酸、rnai分子、sirna分子、pna分子、dna酶和5'末端突变的u1小核rna、以及前述的类似物的一种或多种多核苷酸。这些和其他化合物可单独或与一种或多种模拟物或其他结合肽组合使用。本发明的特征在于包含至少一个未经修饰的核苷酸的连接蛋白反义寡核苷酸或多核苷酸。在一个方面，连接蛋白反义寡核苷酸或多核苷酸可包含至少一个经修饰的核苷酸，和/或具有至少一个经修饰的核苷间键和/或至少一个经修饰的糖部分。经修饰的核苷间键可以是例如硫代磷酸酯键。在一些方面，例如，连接蛋白多核苷酸可包括包含构象应变核苷酸的至少一个核苷酸，例如锁定核酸(lna)或桥接核酸(bna)。锁定核苷酸可选自下述类型之一，例如：2′-o—ch2-4′(氧基-lna)、2′-ch2—ch2-4′(亚甲基-lna)、2′—nh—ch2-4′(氨基-lna)、2′—n(ch3)—ch2-4′(甲基氨基-lna)、2′-s—ch2-4′(硫代-lna)和2′-se—ch2-4′(硒基-lna)。在一些方面，经修饰的核苷酸可以是锁定核酸或解锁核酸。在一些方面，连接蛋白反义寡核苷酸或多核苷酸是连接蛋白43反义寡核苷酸或多核苷酸。可执行反义多核苷酸和其他抗连接蛋白多核苷酸如rnai、sirna和核酶多核苷酸以及具有经修饰的和混合主链的多核苷酸的合成。参见例如steinc.a.和kriega.m.(编辑)，appliedantisenseoligonucleotidetechnology,1998(wiley-liss)。反义多核苷酸可抑制连接蛋白例如连接蛋白43或连接蛋白45的转录和/或翻译。反义多核苷酸一般与连接蛋白mrna例如连接蛋白43反义。这样的多核苷酸可能能够与连接蛋白mrna杂交，并且因此可通过干扰连接蛋白mrna代谢的一个或多个方面来抑制连接蛋白的表达，所述方面包括转录、mrna加工、从核的mrna转运、翻译或mrna降解。反义多核苷酸通常与连接蛋白mrna杂交，以形成可引起mrna的翻译和/或去稳定化的直接抑制的双链体。这种双链体可能易受通过核酸酶的降解影响。优选地，多核苷酸是来自连接蛋白43基因或mrna的转录和/或翻译的特异性抑制剂，并且不抑制来自其他基因或mrna的转录和/或翻译。还可执行人基因组序列数据库中的多核苷酸序列关于特异性的筛选。产物可(i)对于编码序列的5'、和/或(ii)编码序列、和/或(iii)对于编码序列的3'结合连接蛋白43基因或mrna。反义多核苷酸可与连接蛋白mrna的部分例如连接蛋白43mrna杂交。通常，反义多核苷酸与连接蛋白mrna的核糖体结合区或编码区杂交。多核苷酸可与连接蛋白mrna的区域互补。例如，多核苷酸可以是连接蛋白mrna的部分的确切互补体。然而，不需要绝对互补性，并且具有足够互补性以在生理条件下形成具有大于约20℃、30℃或40℃的解链温度的双链体的多核苷酸特别适用于本发明。因此，多核苷酸通常是与mrna互补的序列的同系物。多核苷酸可以是在中等至高严格性条件下(例如0.03m氯化钠和0.03m柠檬酸钠，在约50℃至约60℃下)与连接蛋白mrna杂交的多核苷酸。对于本发明的某些实施例，本发明的多核苷酸包括具有小于80个核苷酸，例如12-18或15-18至约50-80个核苷酸，优选约30个核苷酸或更少，例如12至约30个核苷酸，且更优选约15至约20、或约15至约30个核苷酸的长度的合成多核苷酸。在一个例子中，多核苷酸具有30个核苷酸。在一些方面，本发明的方法的特征在于长度高达40个核苷酸，例如长度15至40个核苷酸的连接蛋白43反义化合物的使用，包含选自seqidno:1-16的核苷酸序列，或包含seqidno:17的约8至40个核苷酸。可替代地，反义多核苷酸可以是组合物的一部分，所述组合物可包含针对超过一种连接蛋白的多核苷酸。优选地，多核苷酸所针对的连接蛋白是连接蛋白43。针对不同连接蛋白的合适的示例性多核苷酸(和odn)在表1中阐述。用于本发明中的多核苷酸可适当地是未经修饰的磷酸二酯寡聚体，或可以是经修饰的。这种寡脱氧核苷酸的长度可变。已发现30聚体多核苷酸是合适的，尽管具有15-30个核苷酸或更少核苷酸的多核苷酸也是合适的。本发明的许多方面关于寡脱氧核苷酸进行描述。然而，应理解在这些方面可使用其他合适的多核苷酸(例如rna多核苷酸)。反义多核苷酸可以是化学修饰的。这可增强它们对核酸酶的抗性并且可增强它们进入细胞的能力。例如，可使用硫代磷酸酯寡核苷酸。其他脱氧核苷酸类似物包括甲基膦酸酯、氨基磷酸酯、二硫代磷酸酯、n3’p5’-氨基磷酸酯和寡核糖核苷酸硫代磷酸酯及其2’-o-烷基类似物和2’-o-甲基核糖核苷酸甲基膦酸酯。可替代地，可使用混合的主链寡核苷酸(“mbo”)。mbo含有硫代磷酸寡脱氧核苷酸的区段和适当放置的经修饰的寡脱氧核苷酸或寡核糖核苷酸的区段。mbo具有硫代磷酸酯键的区段和其他经修饰的寡核苷酸例如甲基膦酸酯的其他区段，所述甲基膦酸酯是非离子的并且对核酸酶或2’-o-烷基寡核糖核苷酸非常耐受。制备经修饰的主链和混合的主链寡核苷酸的方法是本领域已知的。本发明的特征在于包含至少一个未经修饰的核苷酸的连接蛋白43反义寡核苷酸或多核苷酸。在一个方面，连接蛋白43反义寡核苷酸或多核苷酸可包含至少一个经修饰的核苷酸，和/或具有至少一个经修饰的核苷间键和/或至少一个经修饰的糖部分。经修饰的核苷间键可以是例如硫代磷酸酯键。在一些方面，例如，连接蛋白43多核苷酸可包括包含构象应变核苷酸的至少一个核苷酸，例如锁定核酸(lna)或桥接核酸(bna)。锁定核苷酸可选自下述类型之一，例如：2′-o—ch2-4′(氧基-lna)、2′-ch2—ch2-4′(亚甲基-lna)、2′—nh—ch2-4′(氨基-lna)、2′—n(ch3)—ch2-4′(甲基氨基-lna)、2′-s—ch2-4′(硫代-lna)和2′-se—ch2-4′(硒基-lna)。在一些方面，经修饰的核苷酸可以是锁定核酸或解锁核酸。在本发明的一些方面，连接蛋白43反义寡核苷酸或多核苷酸与具有选自seqidno:1至64的序列的多核苷酸具有至少约80％、85％、90％、95％、97％、98％或99％的同源性。其他连接蛋白43调节剂连接蛋白调节剂，例如连接蛋白43或45调节剂，包括肽、拟肽、抗体、抗体片段等等，也是间隙连接和半通道的合适调节剂。示例性的间隙连接调节剂可包括但不限于多肽(例如抗体、其结合片段和合成构建体)，以及其他间隙连接阻滞剂和间隙连接蛋白磷酸化试剂。在一些方面，连接蛋白调节剂是cx26、cx30、cx31.1、cx36、cx37、cx40、cx43、cx50、cx57或者眼或血管中的任何其他连接蛋白的调节剂。连接蛋白调节剂例如连接蛋白43或45调节剂包括例如单克隆抗体、多克隆抗体、抗体片段(包括例如fab、f(ab’)2和fv片段；单链抗体；单链fv；以及单链结合分子，例如包含例如结合结构域、铰链、ch2和ch3结构域的那些，重组抗体，和能够结合抗原决定簇(即，分子的一部分，一般被称为表位)的抗体片段，所述抗原决定簇与特定抗体或其他结合分子接触。这些结合蛋白包括抗体、抗体片段等等可以是嵌合的或人源化的或以其他方式制备成在它们要施用于其的受试者中是较少免疫原性的，并且可合成、重组产生或在表达文库中产生。设想了本领域已知的或以后发现的任何结合分子，例如本文引用的和/或本领域更详细描述的那些。例如，结合蛋白不仅包括抗体等等，还包括与靶(例如连接蛋白、半通道或相关分子)结合的配体、受体、拟肽或其他结合片段或分子(例如通过噬菌体展示产生的)。结合分子一般具有所需特异性，包括但不限于结合特异性和所需的亲和力。亲和力例如可以是大于或等于约104m-1、大于或等于约106m-1、大于或等于约107m-1、大于或等于约108m-1的ka。甚至大于约108m-1的亲和力，例如等于或大于约109m-1、约1010m-1、约1011m-1和约1012m-1的亲和力是合适的。根据本发明的结合蛋白的亲和力可使用常规技术容易地确定，所述常规技术例如由scatchard等人，(1949)ann.n.y.acad.sci.51:660描述的那些。用于关闭间隙连接的示例性化合物(例如磷酸化连接蛋白43酪氨酸和/或丝氨酸残基)已在美国专利号7,153,822和美国专利号7,250,397中得到报道。示例性的肽和拟肽在green等人，wo2006134494中报道。还参见wo2006069181和wo2003032964。用于关闭间隙连接的其他试剂的例子包括抗连接蛋白试剂，例如抗连接蛋白多核苷酸(例如连接蛋白抑制剂，例如α-1连接蛋白寡脱氧核苷酸)、抗连接蛋白肽(例如抗体和抗体结合片段)和拟肽(例如α-1抗连接蛋白肽或拟肽)、间隙连接关闭或阻断化合物、半通道关闭或阻断化合物、以及连接蛋白羧基末端多肽，例如结合zo-1或zo-1结合位点的多肽，抗zo-1多核苷酸。通过使用从亲水性图获得的数据，已提出连接蛋白含有四个跨膜区和两个短的细胞外环。连接蛋白的第一胞外区和第二胞外区的定位的进一步特征在于用于拆分间隙连接上的相应表位的免疫定位的抗肽抗体的报道产生。goodenoughd.a.jcellbiol107:1817-1824(1988)；meyerr.a.,jcellbiol119:179-189(1992)。由两个邻近细胞贡献的半通道的细胞外结构域彼此“对接”，以形成完全的间隙连接通道。干扰这些细胞外结构域的相互作用的试剂可损害细胞与细胞的通讯。已报道了间隙连接和半通道的肽抑制剂。参见例如berthoud,v.m.等人，amj.physiol.lungcellmol.physiol.279:l619–l622(2000)；evans,w.h.和boitano,s.biochem.soc.trans.29:606–612，以及devriesea.s.等人kidneyint.61:177–185(2001)。对应于连接蛋白的细胞外环内的序列的短肽被说成抑制细胞间通讯。boitanos.和evansw.amjphysiollungcellmolphysiol279:l623-l630(2000)。还报道了使用肽作为由在配对的爪蟾卵母细胞中表达的连接蛋白(cx)32产生的细胞-细胞通道形成的抑制剂。dahlg等人，biophysj67:1816-1822(1994)。berthoud,v.m.和seul,k.h.，概括了这些结果中的一些。amj.,physiol.lungcellmol.physiol.279:l619–l622(2000)。抗连接蛋白试剂包括具有包含连接蛋白例如连接蛋白43(seq.id.no:19)的约5至20个邻接氨基酸的氨基酸序列的肽，具有包含连接蛋白43的约8至15个邻接氨基酸的氨基酸序列的肽，或具有包含连接蛋白43的约11至13个邻接氨基酸的氨基酸序列的肽。其他抗连接蛋白试剂包括具有包含连接蛋白43的至少约5、至少约6、至少约7、至少约8、至少约9、至少约10、至少约11、至少约12、至少约13、至少约14、至少约15、至少约20、至少约25或至少约30个邻接氨基酸的氨基酸序列的肽。其他抗连接蛋白43调节剂包含连接蛋白43的细胞外结构域，例如包含srptekt或vdcflsrptekt的肽或拟肽。其他抗连接蛋白43调节剂包含连接蛋白43的c末端区，参见wo2006/069181，或其修饰形式。在一个方面，本发明涉及通过向所述受试者的眼施用治疗有效量的至少一种连接蛋白或泛连接蛋白调节剂来治疗神经性眼部病症的药物组合物、制造物品和方法。在一些方面，神经性眼部病症可以是例如视网膜神经节细胞的丧失和/或青光眼性视神经病变。在一些方面，施用治疗有效量的至少一种连接蛋白调节剂对于阻止、预防或治疗视网膜神经节细胞的丧失是有效的，其进一步用于增加青光眼性视神经中神经营养素的水平并降低玻璃体谷氨酸盐浓度。在某个另一个方面，间隙连接修饰试剂可包括例如式i或式ii的化合物。在某个另一个方面，间隙连接修饰试剂可包括例如脂肪族醇；辛醇；庚醇；麻醉剂(例如氟烷)，安氟醚，氟烷，异丙酚和硫喷妥钠；花生四烯酸乙醇胺；芳基氨基苯甲酸酯(ffa：氟芬那酸和亲脂性的类似衍生物)；甘珀酸；查耳酮：(2’,5’-二羟基查耳酮)；chf(氯羟基呋喃酮)；cmcf(3-氯-4-(氯甲基)-5-羟基-2(5h)-呋喃酮)；地塞米松；多柔比星(和其他蒽醌衍生物)；类二十烷酸血栓素a(2)(txa(2))模拟物；no(一氧化氮)；脂肪酸(例如花生四烯酸、油酸和脂肪氧合酶代谢产物；灭酸酯(氟灭酸(ffa)、尼氟灭酸(nfa)和甲氯芬那酸(mfa))；染料木黄酮；甘草次酸(ga):18a-甘草次酸和18-β-甘草次酸及其衍生物；林丹；溶血磷脂酸；甲氟喹；甲萘醌；2-甲基-1,4-萘醌，维生素k(3)；萘酚平；冈田酸；油酰胺；油酸；通过细胞内酸化门控的ph；例如酸化剂；多不饱和脂肪酸；脂肪酸gjic抑制剂(例如油酸和花生四烯酸)；奎尼丁；奎宁；全反式维甲酸；和他莫昔芬。多核苷酸同系物本文讨论了同源性和同系物(例如，多核苷酸可以是泛连接蛋白mrna中序列的互补体的同系物)。这样的多核苷酸通常例如在(同源序列的)至少约15、至少约20、至少约25、至少约30、至少约40、至少约50或至少约100个邻接核苷酸的区域上，与相关序列具有至少约70％的同源性，优选至少约80％、至少约90％、至少约95％、至少约97％或至少约99％的同源性。同源性或序列同一性可基于本领域中的任何方法来计算。例如，uwgcgpackage提供了可用于计算同源性的bestfit程序(devereux等人(1984)nucleicacidsresearch12，第387-395页)。pileup和blast算法也可用于计算序列同一性或比对序列，例如如altschul,s.f.(1993),jmolevol36:290-300；altschul等人(1990),jmolbiol215:403-10中所述。用于执行blast分析的软件可通过美国国家生物技术信息中心(nationalcenterforbiotechnologyinformation)(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)公开获得。blast算法执行两个序列之间的相似性的统计分析；参见例如，karlin和altschul(1993)proc.natl.acad.sci.usa90:5873-5787。同源序列通常与相关序列相差至少约(或不超过约)2、5、10、15、20或更多个核苷酸差异(其可以是取代、缺失或插入)。这些差异可在上述关于计算序列同一性或同源性的任何区域上测量。同源序列通常以显著高于背景的水平与原始序列选择性杂交。选择性杂交通常使用中等至高严格性条件(例如0.03m氯化钠和0.03m柠檬酸钠，在约50℃至约60℃下)实现。然而，这样的杂交可在本领域已知的任何合适条件下进行(参见sambrook等人(1989),molecularcloning:alaboratorymanual)。例如，如果需要高严格性，则合适的条件包括在60℃下的0.2xssc。如果需要较低的严格性，则合适的条件包括在60℃下的2xssc。肽和多肽抗泛连接蛋白试剂泛连接蛋白结合蛋白，包括肽、拟肽、抗体、抗原结合抗体片段等等，也是粘附连接的合适调节剂。结合蛋白包括例如单克隆抗体、多克隆抗体、抗体片段(包括例如fab、f(ab’)2和fv片段；单链抗体；单链fv；以及单链结合分子，例如包含例如结合结构域、铰链、ch2和ch3结构域的那些，重组抗体，和能够结合抗原决定簇(即，分子的一部分，一般被称为表位)的抗体片段，所述抗原决定簇与特定抗体或其他结合分子接触。这些结合蛋白包括抗体、抗结合抗体片段等等可以是嵌合的或人源化的或以其他方式制备成在它们要施用于其的受试者中是较少免疫原性的，并且可合成、重组产生或在表达文库中产生。设想了本领域已知的或以后发现的任何结合分子，例如本文引用的和/或本领域更详细描述的那些。例如，结合蛋白不仅包括抗体等等，还包括与靶(例如泛连接蛋白)结合的配体、受体、拟肽或其他结合片段或分子(例如通过噬菌体展示产生的)。结合分子一般具有所需特异性，包括但不限于结合特异性和所需的亲和力。亲和力例如可以是大于或等于约104m-1、大于或等于约106m-1、大于或等于约107m-1、大于或等于约108m-1的ka。甚至大于约108m-1的亲和力，例如等于或大于约109m-1、约1010m-1、约1011m-1和约1012m-1的亲和力是合适的。根据本发明的结合蛋白的亲和力可使用常规技术容易地确定，所述常规技术例如由scatchard等人，(1949)ann.n.y.acad.sci.51:660描述的那些。抗泛连接蛋白试剂包括包含氨基酸序列的肽，所述氨基酸序列对应于来自泛连接蛋白(例如泛连接蛋白1、泛连接蛋白2、泛连接蛋白3等)的泛连接蛋白结构域基序。其他实施例涉及其是具有氨基酸序列的肽的抗连接蛋白试剂，所述氨基酸序列包含由泛连接蛋白基因(例如如下述实例1中所示的泛连接蛋白1基因)编码的至少约5、至少约6、至少约7、至少约8、至少约9、至少约10、至少约11、至少约12、至少约13、至少约14、至少约15、至少约20、至少约25或至少约30个邻接氨基酸。在本文提供的某些抗连接蛋白试剂中，泛连接蛋白1的细胞外结构域可用于开发特定肽序列。肽无需具有与天然存在的泛连接蛋白的那些部分相同的氨基酸序列，并且可进行保守氨基酸改变，使得肽保留结合活性或功能活性。可替代地，肽可靶向细胞外结构域的其他区域。抗泛连接蛋白肽可包含对应于具有保守氨基酸置换的泛连接蛋白细胞外结构域的一部分的序列，使得肽是功能活性的抗泛连接蛋白试剂。示例性保守氨基酸置换包括例如用另一个非极性氨基酸置换非极性氨基酸、用另一个芳香族氨基酸置换芳香族氨基酸、用另一个脂肪族氨基酸置换脂肪族氨基酸、具有另一个极性氨基酸置换极性氨基酸、用另一个酸性氨基酸置换酸性氨基酸、用另一个碱性氨基酸置换碱性氨基酸、以及用另一个可电离氨基酸置换可电离氨基酸。制造和稳定性本发明的多核苷酸可使用用于合成寡核苷酸的固相化学来制造。在一个方面，本发明的制剂将包含本发明的多核苷酸的盐，例如本发明的多核苷酸的钠盐。在一个实施例中，制剂可包含例如具有seq.id.no:1-16中的任何一个或seqidno:17的一部分的多核苷酸的钠盐。在一些实施例中，具有seq.id.no:1-16中的任何一个的多核苷酸可以是具有seq.id.no:1-16中的任何一个或seqidno:17的一部分的经修饰的寡脱氧核苷酸。在一些实施例中，本发明的制剂是基本上纯的。基本上纯的意指制剂包含小于约10％、5％或1％，且优选小于约0.1％的任何核苷酸或非核苷酸杂质。在一些实施例中，总杂质包括连接蛋白43调节试剂的代谢产物将不超过15％。在一些实施例中，总杂质包括连接蛋白43调节试剂的代谢产物将不超过12％。在一些实施例中，总杂质包括连接蛋白43调节试剂的代谢产物将不超过11％。在其他实施例中，总杂质包括连接蛋白43调节试剂的代谢产物将不超过10％。在一些实施例中，本发明制剂的纯度可使用选自阴离子交换hplc(aex-hplc)或质谱法的方法进行测量。质谱法可包括lc/ms或lc/ms/ms。在一些实施例中，测定可包括aex-hplc和lc/ms两者。包含本发明的连接蛋白43调节试剂的无菌组合物通过将抗连接蛋白调节试剂溶解于制剂媒介物中使用无菌加工来制备。在一个实施例中，制剂也可通过过滤进行灭菌。在本发明制剂的制造中使用的赋形剂广泛用于药物产品中并释放到药典标准。实例不同小有机分子据报道具有抑制间隙连接或半通道电流的活性。它们包括三芳基甲烷(tram)、奎宁、甲氟喹、灭酸酯、2-氨基苯氧基硼酸盐和衍生物、甘草次酸和衍生物、挥发性麻醉剂例如氟烷和乙烷、亲脂性化合物例如长链醇(例如庚醇和辛醇)、脂肪酸酰胺包括油酰胺、环糊精、顺铂、聚胺和四烷基铵离子。越来越多的研究还报道了使用对应于细胞外环e1和e2(其涉及e1的保守qpg和shvr基序(gap26肽)和e2中的srptek基序(gap27肽))以及细胞质环(gap19肽)内的特定序列的肽，抑制间隙连接通道和半通道。最有效的这种拟肽是肽5(vdcflsrptekt)。肽5是已确认的间隙连接通道阻滞剂，其可以剂量依赖性方式操作，其中较低剂量阻断间隙连接半通道开放，并且较高剂量解偶联细胞之间的间隙连接。参见例如o’carroll等人，2008。随着肽5的持续低剂量应用，也存在间隙连接偶联的逐渐丧失，视为肽干扰半通道对接(与在正常周转期间现有间隙连接的逐渐去除平行)。肽5已在许多体外、离体和体内(动物)研究中证明是有效的，尤其是当以阻断半通道而不解偶联间隙连接的剂量使用时(参见例如davidson等人，2012；danesh-meyer等人，2012；o’carroll等人，2013)。o’carroll等人，2008中的结果指示肽5在低或高浓度下阻断半通道，但在高浓度下直接解偶联间隙连接。肽5数据在此处显示用于与托那博沙比较。实例1：hcmvec和arpe-19细胞研究的方法和材料在使用人脑微血管内皮细胞(hcmvec)的下述实例2、4、5、8和10中，通过使细胞在胶原涂布的(30μg/ml)t25或t75烧瓶中生长来制备细胞，所述细胞维持在补充有10％fcs、1μg/ml氢化可的松、3ng/mlhfgf、1ng/mlhegf、10μg/ml肝素、1x青霉素链霉素新霉素(lifetechnologies)和camp(100μl100％camp至100ml培养基)的培养基m199中。将细胞维持在37℃与95％o2和5％co2下。在使用人视网膜上皮(arpe-19)细胞的下述实例3、6和7中，使细胞在补充有10％胎牛血清(fcs)、100单位/ml青霉素、100μg/ml链霉素和0.25μg/mlantimycotic(invitrogen)的dmem/f:12(invitrogen)中生长。关于在这些研究中使用的化学品，将托那博沙(medchemexpress,usa)以100mm的原液浓度溶解于二甲基亚砜(dmso)中。将氯化铵(nh4cl,sigma)以100mm的原液浓度溶解于dh20中。以纯度>95％合成连接蛋白43模拟肽(肽5，序列vdcflsrptekt(seq.idno:168))(auspep，澳大利亚)和肽8(cdeqsafrcntqq(seq.idno:330))，并且以10mm的浓度溶解于dh20中。丙磺舒(c13h19no4s,sigma)以50mg/ml的浓度溶解于1mnaoh中。所有动物模型程序均遵从动物在眼科和视觉研究中的应用的arvo声明(arvostatementofuseofanimalsinophthalmicandvisionresearch)进行，并且由universityofauckland的动物伦理委员会(animalethicscommittee)批准。从universityofauckland的vernonjensonunit获得重量在240-260g之间的十七只成年雄性wistar大鼠，并且以12小时光/暗周期饲养，并且随意接受食物和水。实例2：刮痕负载测定在本实例中，使人脑微血管内皮细胞(hcmvec)在胶原涂布的(1μg/ml)t25烧瓶中生长，所述细胞维持在补充有10％fbs、1μg/ml氢化可的松、3ng/mlhfgf、1ng/mlhegf、10μg/ml肝素和camp(100μl100％camp至100ml培养基)的培养基m199中，在37℃下具有5％co2的加湿大气中。在实验前一天，使这些细胞胰蛋白酶化，并以4x105个细胞/孔的密度铺平板在胶原涂布的12孔板中的相同培养基中。对于处理，在刮痕染料加载之前，在肽5、对照间隙连接通道阻滞剂(甘珀酸)或托那博沙的存在下，将细胞培养各自的时间间隔。阻滞剂也存在于各自的刮痕负载溶液中。对于刮痕负载，将hcmvec细胞用磷酸盐缓冲盐水(pbs)(不含二价阳离子)洗涤三次。将pbs+0.05％荧光黄的溶液加入细胞中。然后使细胞接受使用10号碳钢手术刀片对单层的刮痕，并且在37℃与5％co2下在黑暗中温育5分钟。细胞用pbs洗涤四次，并且随后加入1mlpbs用于荧光显微镜检查。然后使活细胞在nikonte2000e荧光显微镜上成像，同时维持在具有5％co2加热至37℃的室中。使用488nm激发和gfp滤波器块，在10x放大率下获得三个图像对，其中相位对比图像各自显现总细胞，并且荧光图像显现荧光黄。通过计数荧光黄色阳性细胞的数目并作为相对于对照组的阳性细胞的百分比呈现来确定间隙连接通讯。使用prismv5.02软件将数据绘图为平均值+平均值的标准误。显著性通过斯氏双尾、不成对的t检验来确定。*＝p<0.05，**＝p<0.001，***＝p<0.001。图1中的结果(使用肽5作为例子)显示通过与刮痕邻近的细胞吸收的染料扩散到附近细胞。在刮痕之前立即添加的以100μm浓度的肽5对染料通过间隙连接的细胞-细胞转移几乎没有作用。较高的500μm浓度的肽5导致染料转移中的显著减少。随着更长的2小时温育，染料转移对于以两种浓度的肽5减少。这指示肽5可以剂量依赖性方式使用，考虑到它可在更高浓度立即阻断间隙连接，并且对于持续处理，低剂量应用导致间隙连接偶联的减少的发现，后者视为肽干扰半通道对接(与在正常周转期间现有间隙连接的逐渐去除平行)。图3右侧的图表比较了肽5阻滞剂(高剂量)与非特异性间隙连接通道阻滞剂甘珀酸的功效。图3显示了在50μm浓度下托那博沙的可比较刮痕负载染料转移。立即添加的托那博沙在1分钟内具有统计学显著的间隙连接解偶联效应，但阻断以时间依赖性方式增加，指示托那博沙也以与肽5相似的方式起作用。不希望受任何特定理论的束缚，本发明人认为这可能是与在正常周转期间现有间隙连接的逐渐去除平行的干扰半通道对接或触发半通道的内化的结果，间隙连接的内化(参见图4)。实例3：用肽5和托那博沙处理的arpe-19视网膜上皮细胞的免疫组织化学将细胞以0.05x106/孔接种在8孔无菌玻璃显微镜室载玻片(falcon,corninglifesciences)中，并且将单层标记用于在～90-100％汇合时的连接蛋白表达。下述步骤在室温下进行。将细胞在具有0.1mmcacl2的pbs中的4％多聚甲醛(p6148,sigma-aldrich)中固定10分钟，并在具有0.1mmcacl2的pbs中洗涤三次。在具有0.1mmcacl2的pbs中的10％正常山羊血清中阻断1小时后，使细胞在具有0.1mmcacl2的pbs稀释的一抗溶液(兔抗cx43，sigmac6219)中温育过夜。然后将室载玻片用含有0.1mmcacl2的pbs洗涤三次共10分钟，并且在山羊抗兔alexa568缀合的二抗(invitrogen#a11036)中温育另外45分钟。用dapi对细胞计数标记5分钟，并且用含有0.1mmcacl2的pbs洗涤三次。去除室孔并且将细胞置于抗褪色培养基(citiflouraf-1)中。根据制备商的建议，使用指定的一抗和二抗的稀释比。图4显示了间隙连接蛋白连接蛋白43的dapi(核染色)和标记(左图)以及匹配的仅连接蛋白43标记(右图)。在未经处理的细胞中，间隙连接标记主要在细胞-细胞界面处(上图)。在显示了用肽5(500μm)处理一小时的细胞的下图中，细胞-细胞界面仍然是明显的，但大部分间隙连接已被内化并且标记是细胞质的。这指示一旦肽解偶联间隙连接，它就触发内化和连接降解。图3显示了使用未经处理的和托那博沙处理的细胞(50μm，6小时)的等价实验。托那博沙处理随着时间过去导致在细胞-细胞界面处的总间隙连接丧失。因此，实例2中的刮痕负载实验显示间隙连接的功能丧失，该实例3解释了这可如何发生，即通过细胞之间的间隙连接的丧失。实例4：间隙连接半通道的电生理学对连接蛋白缺陷的hela细胞、连接蛋白43转染的hela细胞和分离的人脑微血管内皮细胞(hcmvec)进行了全细胞电压钳研究。在每次实验前16-24小时，将hela细胞以0.045x106个细胞/ml接种在18mm大鼠胶原i涂布的盖玻片上。cx43iresegfphela细胞在补充有10％fcs和1μg/ml嘌呤霉素的dmem中在37℃、95％o2和5％co2下培养过夜。对照cx缺陷的细胞维持在补充有10％fcs的dmem中。将盖玻片转移到用含有下述(以mm表示)的经修饰的krebs-ringer溶液连续灌注的室：140nacl、5.4kcl、1mgcl2、10mmhepes和在室温下调整至7.4的ph。内部移液管溶液含有(以mm表示)：130kcl、10天冬氨酸钠、0.26cacl2、2egta、5四乙基铵-c1、1mgcl、3mgatp和以ph7.2的5hepes；并且保持在冰上。该溶液在contrerasje等人，cellcommunicationandadhesion(2003),10:245–249中描述。为了分辨在全细胞配置中的单一电流，选择具有低电容(<10pf)的细胞和具有(>5gohm)的密封电阻的高电阻移液管(6-10mohm)用于记录和分析。将hcmvec细胞置于含有下述(以mm表示)的细胞外人工脑脊髓液中：144nacl、3.3kcl、1.8cacl2、1.8mgcl2、10mm葡萄糖，在温度37℃下ph：7.385。细胞内移液管溶液含有(以mm表示)：130kcl、10天冬氨酸钠、0.26cacl2、2egta、5四乙基铵-c1、1mgcl2、3mgatp、以ph7.2的5hepes；并且保持在冰上以预防mgatp分解。移液管电阻为3.4mω，其中密封电阻＝1.3gω。电压和灌注方案同时进行，其中连续灌注细胞。在托那博沙灌注之前、在托那博沙灌注期间和在洗出之后获取用于分析的记录。对于通道阻滞研究，在记录之前将50μm托那博沙洗涤三分钟，并且随后在获取洗出记录之前洗出三分钟。图5显示了在连接蛋白43转染的hela细胞(顶部迹线)和连接蛋白空hela细胞(底部迹线)中的记录。随着电压阶跃升高，在经转染的细胞中观察到增加的通道活性，其不存在于连接蛋白空细胞中。在经转染的细胞中的这种通道活性因此是connexin43半通道开放的结果。图6显示了来自已用非特异性通道阻滞剂甘珀酸和lacl3以及用肽5(100μm)处理的连接蛋白43转染的hela细胞的迹线。非特异性通道阻滞剂显示几乎完全的半通道阻断，其中剩余少量通道活性。肽5也显示显著的半通道阻断。图7显示了在添加托那博沙(50μm)之前、在与托那博沙温育期间和在三分钟洗出后，在hcmvec细胞中的等价实验。托那博沙几乎完全取消半通道活性，其中一定活性在洗出后恢复。这些结果指示托那博沙是非常有效的半通道阻滞剂，其可在所使用的浓度下超过肽5的功效，并且活性半通道是可恢复的。讨论本发明人已惊讶地确定所建立的连接蛋白43通道阻滞剂肽5和托那博沙显示出相似的作用模式。在高浓度下，肽5可阻断连接蛋白43半通道并且可解偶联连接蛋白43间隙连接。在较低剂量下，肽5阻断连接蛋白43半通道，但对间隙连接偶联不具有立即效应。随着肽5的持续低剂量应用，在细胞-细胞界面处也存在间隙连接的逐渐丧失，指示肽干扰半通道对接(与在正常周转期间现有间隙连接的逐渐去除平行)。本文的结果指示托那博沙主要是半通道阻滞剂，并且还能够阻断间隙连接通道，并且如同肽5，可用于减少间隙连接偶联，可能通过防止半通道对接在周转期间形成替换间隙连接通道，或通过触发来自质膜的内化。在这些实验中，托那博沙显示在一分钟内阻断连接蛋白半通道，并且在一分钟内提供细胞-细胞偶联的减少。托那博沙可通过特异性受体和p38途径减少中枢神经系统中的连接蛋白26表达。本发明人已惊讶地发现托那博沙可用于阻断许多细胞类型(hcmvec、hela、arpe)包括内皮细胞中的半通道。因此，本发明人已惊讶地发现托那博沙不是中枢神经系统特异性的。结果还指示托那博沙在阻断连接蛋白43半通道中具有显著的功效，并且它可用于解偶联连接蛋白43间隙连接。因此，它也不是连接蛋白同种型特异性的。结果支持本发明人的观察：托那博沙主要是连接蛋白半通道阻滞剂，但可以更高的剂量使用以解偶联间隙连接。它的半通道阻断功效和作用速度以及它可在三分钟内洗出以恢复通道活性的事实暗示它对半通道具有直接作用，与由此影响mrna或蛋白质表达的较慢途径相对。实例5：连接蛋白43半通道和泛连接蛋白通道在体外缺血损伤-再灌注期间释放atp使用体外缺血性损伤模型，使用以100μm浓度的连接蛋白半通道阻断模拟肽5(s.j.o'carroll等人，cellcommunication&adhesion15,27(2008年5月))和1mm丙磺舒(w.r.silverman等人，thejournalofbiologicalchemistry284,18143(2009年7月3日))，来区分cx43半通道和泛连接蛋白通道介导的atp释放。体外缺血损伤-再灌注atp测定使人脑微血管内皮细胞(hcmvec)胰蛋白酶化(trypleexpress,lifetechnologies)，并且在实验前一天，以0.025x106个细胞/孔的密度铺平板在胶原涂布的12孔板(1μg/cm2)中。使细胞在培养基中温育过夜。低氧、酸性、离子移位的林格氏损伤溶液用于触发半通道开放，所述林格氏损伤溶液模拟缺氧-缺血性脑中的间质间隙的离子浓度和酸-碱位移(a.bondarenko等人，glia34,143(2001年4月15日))。将损伤溶液(以mm表示)：38nacl、13nahco3、3na-葡糖酸盐、65k-葡糖酸盐、38nmdg-cl、1nah2po4、1.5mgcl2在n2气体(>99％纯度，20l/分钟)中鼓泡5分钟，并且使用5mhcl将ph调整至6.6。模拟生理条件的对照溶液含有(以mm表示)：124nacl、3kcl、26nahco3、26nahco3、1nah2po4、1.3cacl2、1.5mgcl2和10葡萄糖，并且使用5mhcl调整ph7.4(bondarenko,2001)。在损伤模型中，使hcmvec细胞在500μl对照溶液、或损伤溶液或溶解于损伤溶液中的托那博沙(0.1-50μm)+/-丙磺舒(1mm)中在37℃下在95％o2和5％co2中温育2小时。在2小时损伤后，立即将溶液置于冰上。在损伤和再灌注模型中，使hcmvec细胞在500μl正常溶液或损伤溶液中在37℃下在95％o2和5％co2中温育2小时。在2小时损伤后，弃去溶液，并且替换为500μl正常溶液、或溶解于正常溶液中的托那博沙(10μm)，并且在37℃下在95％o2和5％co2中温育2小时。然后也将这些溶液立即置于冰上。肽5(100μm)+/-丙磺舒(1mm)用作损伤和损伤-再灌注模型两者的对照。使用萤光素/萤光素酶生物发光反应(atpdeterminationkit,molecularprobes)确定样品中的atp浓度，并且使用发光板阅读器(victorx,perkinelmer#2030-0010)检测。在每个实验中从atp标准(500nm)生成标准曲线，以定量测试样品中的atp浓度。数据呈现为相对于损伤或损伤-再灌注对照的平均值±标准误。使用单因素方差分析和tukey多重比较检验来鉴定样品之间的统计上的显著差异。图8概括了在体外损伤模型中两小时后，从人脑微血管内皮细胞(hcmvec)的亚汇合培养物释放的总atp。当与损伤组(100±2.2％)相比较时，存在从无损伤对照释放的35±2.6％atp的基础水平，其可反映损伤前的正常细胞活性和/或死细胞。在无损伤和损伤对照之间观察到细胞外atp的显著差异(p<0.0001)(图10a)。与损伤(100±2.2％)相比较，肽5使atp显著降低至73.9±2.1％(p<0.0001)，并且丙磺舒也使atp显著降低至83.1±4.5％(p<0.001)(图10a)。有趣的是，肽5和丙磺舒的组合处理使atp降低至与100μm甘珀酸(cbx)可比较的水平，所述甘珀酸是阻断cx43半通道和泛连接蛋白通道两者的非特异性阻滞剂，在这两组之间未观察到显著差异(p＝0.28)。来自这些实验的数据证明连接蛋白半通道和泛连接蛋白通道两者在缺血条件下开放。通过托那博沙的cx43半通道抑制是浓度依赖性的，但仅在体外损伤期间不存在泛连接蛋白通道活性的情况下执行下述实验以证明cx43hc介导的来自受损hcmvec细胞的atp释放随着托那博沙的浓度增加而降低。利用图8a中的损伤模型，使用丙磺舒抑制panx通道来分离托那博沙对cx43hc介导的atp释放的作用。与损伤(100±1.2％)相比较，atp释放在与1mm丙磺舒组合的0.1μm(85.9±2.4％)、1μm(75.9±2.3％)、10μm(58.5±1.9％)和100μm(70.5±3.9％)托那博沙浓度下显著降低(图10b)。增加托那博沙的浓度(0.1μm至10μm)显著降低cx43hc介导的atp释放(图8b)。在10μm托那博沙下达到最大抑制，并且这比100μm的最高浓度明显大12.1±3.2％(p＝0.005)(图8b)。然而，cbx和在1mm丙磺舒中的10μm托那博沙之间存在14.9±4％的显著差异(p＝0.0059)(图10b)。当与丙磺舒组合时，托那博沙(0.1μm至100μm)与受伤相比较显著降低cx43hc介导的atp释放；然而，在不存在1mm丙磺舒的情况下，托那博沙不减少来自hcmvec细胞的atp释放(p>0.09)(图8c)。连接蛋白43半通道，而不是泛连接蛋白通道，在体外再灌注期间释放atp进一步表征在缺血后的再灌注期间(在hair溶液中两小时后返回到正常培养基)cx43半通道和泛连接蛋白通道的作用。观察到在无损伤-再灌注(无ir)和损伤-再灌注对照(ir)之间的atp释放的显著差异(p＝0.0006)(图11)。尽管肽5使atp释放显著降低至70.3±4.4％(p＝0.0196)，但与再灌注损伤相比较，丙磺舒不显著降低atp(99.3±4.4％，p>0.99)(图9)。与再灌注损伤相比较，肽5和丙磺舒的组合处理也显著降低atp(71.1±7.4％，p＝0.025)，但这与单独的肽5处理可比较(图11)。与仅损伤(图10b)形成对比，cbx与仅肽p5相比较使atp释放进一步显著降低至33.8±33.5％(p＝0.0127)(图9)。低浓度的托那博沙在体外再灌注期间抑制cx43半通道介导的atp释放缺血-再灌注测定证明在再灌注期间，丙磺舒对来自hcmvec细胞的atp释放没有显著作用(图9)。在10μm托那博沙下的低剂量单独足以抑制在体外从hcmvec细胞释放的atp，并且抑制水平与肽5可比较。在体外再灌注损伤期间，观察到在10μm托那博沙的存在下atp的显著减少(68.9±6.9％，p＝0.02)，这与100μm肽5可比较(图9)。实例6：高浓度的托那博沙引起cx43斑块在arpe-19细胞中的内化免疫细胞化学和cx43斑块的定量使arpe-19细胞生长直到在8孔玻璃室载玻片(bdfalcon)中汇合。使arpe-19细胞的汇合单层在5至500μm)托那博沙的最终浓度和/或10mmnh4cl(h.qin等人，thejournalofbiologicalchemistry278,30005(2003年8月3日))下在培养基中温育1或6小时。将细胞在室温下在以ph7.4的4％pfa(proscitech)中固定10分钟，用在pbs中的0.05％triton-x100渗透化，并且在10％正常山羊血清中温育以阻断非特异性标记。在每个固定、渗透化和阻断步骤之间，用含有0.1mmcacl2的pbs漂洗细胞三次。应用cx43多克隆兔抗体(c6219,sigma,1:2000)24小时，随后为山羊抗兔alexa568二抗(invitrogen,1:200)45分钟。将核用dapi(invitrogen)以10,000倍稀释度复染色5分钟，并且用citifluortm封固介质封固。使用在olympusfv1000直立共焦激光扫描显微镜和软件上的63x油浸镜头显现且捕获图像。图像采集和分析软件(版本5.3.0.1，moleculardevices)中的transfluor特征用于自动化和定量cx43斑块的总面积/图像。结果表示平均值±标准误，并且使用单因素anova和tukey多重比较检验进行统计检验。如上所述的免疫细胞化学用于显现天然人细胞系，视网膜色素上皮细胞(arpe-19)中的cx43gj斑块分布和大小，所述arpe-19据报道具有cx43的丰富表达(c.m.hutnik等人，investigativeophthalmology&visualscience49,800(2008年2月))。观察到细胞与细胞接触之间的cx43斑块，其在基础条件下以规则的瓦状图案标记(图13a)。cx43标记在核周区域也是可见的，其指示在高尔基体中的cx43的细胞内库(j.dassarma等人，journalofcellscience114,4013(2001年11月))。然而，在暴露于以100μm(52.8±5.6％，p＝0.0012)、200μm(63.2±5.6％，p＝0.0286)和500μm(63.2±5.6％，p＝0.0420)浓度的托那博沙1小时后，与正常对照相比较，观察到cx43斑块的显著减少(图13b)。cx43斑块的减少在细胞与细胞接触和细胞内池之间可见(图10a，顶部图像)。然而，与对照相比较，在5μm(p＝0.99)、10μm(p＝0.5777)或50μm(p＝0.1146)的较低浓度下，不存在cx43斑块的显著减少(图11b)。结果显示托那博沙引起cx43gj从质膜的内化。通过使arpe-19细胞在托那博沙(50至500μm)中暴露6小时的延长时期，证明cx43斑块的减少是时间依赖性的。与图10可比较，在托那博沙中的6小时处理也导致细胞与细胞接触和细胞内池之间的cx43标记减少(图12a)。此外，cx43斑块的总面积在100μm(66.5±5.4％，p<0.0001)、200μm(62.5±2.3％，p<0.0001)和500μm(60.2±13.6％，p<0.0001)下显著减少。托那博沙靶向内化的cx43斑块用于经由溶酶体途径降解与仅内化间隙连接的肽5形成对比，还证明托那博沙促进来自质膜的cx43斑块周转。参见图11。使用弱碱性溶酶体抑制剂氯化铵(nh4cl)，固定arpe-19细胞中的溶酶体降解途径(h.qin等人，thejournalofbiologicalchemistry278,30005(2003年8月3日))。在托那博沙和10mmnh4cl中的1小时处理后，cx43斑块从细胞与细胞接触去除，但保留在细胞质中，具有沿着紧靠质膜下方的胞内区表达的点状标记。另外，目前存在在核周围(在看起来是高尔基体中)可见的密集标记(图14a，底部图像)。在具有nh4cl的托那博沙中，与单独的100μm托那博沙相比较，存在显著更多的cx43标记(上升104.8％)(p<0.001)，并且与单独的200μm托那博沙相比较，存在上升65.4％(p＝0.0002)(图10c)。在托那博沙和10mmnh4cl中的6小时处理后，点状cx43标记分布在整个细胞中(图15a，底部图像)。与1小时时期形成对比，在托那博沙和nh4cl中处理后，在细胞与细胞接触之间不存在可见的cx43标记(图15a，底部图像)。然而，当与单独的托那博沙处理相比较时，nh4cl显著增加cx43标记的量(总面积)，在50μm中上升67.9％5(p＝0.0015)，在100μm上升80.3％(p＝0.0001)，并且在200μm托那博沙中上升87.9％(p＝0.0062)(图12c)。在温育1小时和6小时后，在未经处理的、dmso(媒介物对照)或仅nh4cl的对照之间，不存在cx43斑块的总面积/细胞的显著差异(图10b和12b)。实例7：托那博沙不影响cx43mrna转录或翻译托那博沙不影响cx43mrna转录或翻译，如公开的文献中所指出的。相反，观察到的托那博沙介导的cx43的下调由内化和降解途径的活化引起。实时逆转录pcr实时逆转录pcr用于测定cx43mrna的相对水平。将arpe-19细胞的汇合单层用托那博沙处理1小时。用(lifetechnologies)收获细胞，并且根据制备商的说明书，使用superscriptiiifirststrand试剂盒(invitrogen)分离总rna。使用nanodrop1000微量分光光度计(thermoscientific)对所有rna样品进行定量。根据制备商的说明书，使用iiifirst-strandsynthesissupermix(invitrogen)，合成来自样品的cdna。hcx43，genbank登录号m65188.1的引物序列得自harvardprimer库。人cx43的序列是正向5’-tggtaaggtgaaaatgcgagg-3’(seq.idno:331)和反向5’-gcactcaagctgaatccatagat-3’(seq.idno:332)。通过筛选常用的管家基因β-肌动蛋白[actb]、次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶1[hprt1]、肽基脯氨酰异构酶a[ppia]和甘油醛-3-磷酸脱氢酶[gapdh]，来确定用于cx43mrna的相对倍数差异的适当参考基因。我们选择β-肌动蛋白作为对照基因，因为它在处理组之间未显示表达的显著差异。所有pcr反应在rotorgene600(qiagen)上执行，使用50℃2分钟，然后95℃2分钟；9℃15秒和60℃重复40次；95℃15秒，60℃15秒，95℃15秒的循环程序，以便生成相对定量的阈值循环(ct)。使用2-δδct方法，cx43mrna表达的相对变化计算为针对β-肌动蛋白的倍数差异。结果表示平均值±标准误，并且使用单因素anova，随后为tukey多重比较检验，进行统计检验。为了测试图10和12中可见的托那博沙介导的cx43斑块减少由cx43mrna转录的下调引起的可能性，我们使用实时逆转录酶-pcr来比较用托那博沙的1小时处理后的相对差异cx43mrna。与未经处理的(p＝0.7572)和媒介物对照(p＝0.10245)相比较，用50μm托那博沙处理后，在arpe-19细胞中不存在cx43mrna的显著差异(图13)。实例8：托那博沙不影响hcmvec细胞活力用于细胞活力的mtt测定通过将5mg溶解在1mlpbs中产生5mg/ml的浓度来制备原液mtt。在96孔板中种植的细胞(以1x104个细胞/孔)的处理温育期后，去除培养基并替换为100μl的pbs。向每个孔中加入10μlmtt储备溶液，除了用作空白的那些之外，并且在37℃下温育4小时，此时从每个孔中吸出溶液。然后向每个孔中加入50μldmso(sigma)以溶解结晶产物。通过测量所产生的紫色晶体的吸光度来测定活力。这通过在平板阅读器中读取在595nm处的吸光度来测量；将数据针对作为内部标准的每个对照标准化。统计学使用单因素anova和tukey事后检验进行研究，其中*p<0.05。检查经过24小时托那博沙(0.2μm至200μm)对hcmvec细胞活力的作用。托那博沙(200μm)在24小时处理后未显著降低细胞活力(p＝0.378)，指示缺乏毒性。此外，响应于媒介物(0.2％dmso)或甘珀酸(200μm)，不存细胞活力的显著降低(p＝0.9029，p＝0.4719)(图14b)。实例9：托那博沙预防视网膜缺血-再灌注中的视网膜神经节细胞丧失体内视网膜缺血-再灌注模型和治疗通过腹膜内注射氯胺酮(60mg/kg)和盐酸美托咪啶(0.4mg/kg)麻醉动物，并且用盐酸奥布卡因(0.4％)麻醉角膜。先前已描述了视网膜缺血-再灌注的技术(d.sun等人，thejournalofcomparativeneurology505,114(2007年11月1日))。简言之，用通过硅酮管道连接的30号输注针将左前房插管到无菌0.9％盐水的储库。使用立体定位操纵臂执行插管以避免对角膜内皮、虹膜或晶状体的损伤。通过升高盐水储库，将插管眼的眼内压升高至120mmhg共60分钟。视网膜缺血-再灌注通过后段的苍白来证实。60分钟后，取出插管，并且通过眼底镜检查证实视网膜血管的再灌注。在缺血60分钟结束时应用三个实验臂。这些包括：无处理(n＝6)、10mg/kg托那博沙(n＝6)或1mg/kg托那博沙(n＝4)。通过在再灌注开始时的腹膜内递送，实现0.25ml在40％peg、60％环糊精溶液中稀释的10mg/ml或1mg/ml托那博沙溶液的全身递送。假定血液体积20ml和肽的全身摄取，预期0.319mm或0.0319mm的最终血液托那博沙浓度。在再灌注后7天时，用co2对动物实施安乐死。使一只未受伤的动物安乐死，以获得作为正常对照的未受伤视网膜。在安乐死之后，摘除眼并且去除角膜、晶状体和玻璃体液。将视网膜的背面切口以保持取向。将视网膜和巩膜在室温(rt)下在pbs中的4％pfa中固定60分钟。然后小心地从巩膜处取出视网膜，并且经由在-80℃下在pbs溶液中的0.5％triton-x100中温育15分钟渗透化。在用pbs彻底洗涤后，使自由浮动的视网膜在4℃下在pbs溶液中的2％马血清和2％triton-x100中的山羊抗brn3a一抗(sc-31984,santa-cruzbiotechnology,1:100)中温育过夜。在用pbs进一步洗涤视网膜后，在rt下应用驴抗山羊cy3二抗(705-165-147,jacksonimmunoresearch,1:500)溶液共2小时。使用citifluor封固介质将视网膜固定到superfrostplus载玻片上，并且成像。成像和定量每个视网膜的每个象限中的两个视野被成像，给出总共八个图像/视网膜。这种方法确保在不同的眼之间评估类似的位置，并且避免视网膜中存在的任何可能的区域偏差。视网膜神经节细胞(rgc)标记在10x放大率下成像。调整电压和偏移设置，以最佳地区分个别抗体标记并避免图像的过饱和。使用nihimagej软件中的自动斑点计数执行定量。对于rgc定量，首先用锐化滤波器过滤每个图像以描绘细胞边缘，然后使用阈值33转换为二值图像。在颗粒计数期间，排除了起因于明显不是起源rgc的噪声和假象的一个或两个像素的斑点。rgc密度计算为rgc数目/cm2。预防视网膜缺血-再灌注中的视网膜神经节细胞丧失低浓度的托那博沙针对视网膜细胞死亡是保护性的，如通过建立的视网膜缺血-再灌注的体内模型所显示的(h.v.danesh-meyer等人，brain135,506(2012年2月))。与正常对照(242558±15840个细胞/cm2)相比较，在无处理的缺血眼中(167111±14188个细胞/cm2，平均值±标准误)发现统计学上显著的(p<0.01)31％的rgc丧失(图15)。在用10mg/kg托那博沙处理的缺血眼中(158739±26370个细胞/cm2)发现统计学上显著的(p＝0.03)35％的rgc丧失。然而，与其他组相比较，用1mg/kg托那博沙处理的缺血眼具有减少的神经元丧失(18％，199927±26058个细胞/cm2)。虽然对于超过受损但未处理的眼的改善未达到统计差异，但这组和正常对照组之间的差异不再是统计上显著的(p＝0.17)。在所有对侧眼中未发现rgc的丧失。实例10：托那博沙可以浓度和时间依赖方式解偶联间隙连接执行使用细胞外荧光黄(ly)(仅通过偶联的gj转移的荧光染料)的体外刮痕负载测定，以测试托那博沙是否抑制gj通讯(m.h.el-fouly等人，experimentalcellresearch168,422(1987年2月))。对hcmvec细胞的汇合单层进行单次刮痕伤口，以使ly染料能够接近受伤区域边缘处的细胞的细胞质，并且允许染料通过gj转移到邻近细胞。如预期的，我们观察到媒介物对照中的ly转移(图16a)，其指示经由偶联gj的功能性细胞与细胞通讯(el-fouly，1987)。与对照相比较，甘珀酸(广谱间隙连接阻滞剂)使gj通讯显著降低至77.8±7.4％(p<0.0001)(图16b)。在托那博沙中，gj解偶联的程度随着时间过去增加(图16b)。与对照相比较，ly阳性细胞在2小时时显著减少至72.5±7.4％(p＝0.0132)，并且到6小时减少至62.8±7.4％(p＝0.0003)。在50μm托那博沙中，到24小时，ly阳性细胞与对照相比较最大限度减少至50.5±8.4％(p<0.0001)(图12b)。在100μm托那博沙的较高浓度下，ly阳性细胞进一步显著减少至46.7±7.8％(p<0.0001)。然而，当与对照相比较时，立即(p＝0.986)或测定前1小时(p＝0.054)的50μm托那博沙未显著降低gj偶联(图16b)。在较低的托那博沙浓度(0.1、1和10μm)下，与对照相比较，在2小时(p>0.7)和24小时(p>0.3)两者时，不存在ly阳性细胞的显著减少(图16c、d)。总之，这些结果指示托那博沙介导的解偶联gj是浓度依赖性的(≥50μm)，并且这种解偶联效应的程度取决于托那博沙处理的时间段(在更高的解偶联剂量下)。讨论这些实例显示了托那博沙的新型作用机制的发现，其涉及cx43半通道的直接和立即阻断，以及gj偶联的浓度和时间依赖性降低。短期暴露于某些较低浓度的托那博沙(10μm)在体外损伤和再灌注期间有效抑制cx43半通道介导的atp释放，并且这与在建立的体内视网膜缺血-再灌注模型中减少的rgc丧失一致。然而，暴露于较高浓度的托那博沙(<100μm)不仅解偶联gj，而且更持续的更长期的处理可引起经由溶酶体途径的cx43斑块的靶向内化和降解。已惊讶地发现托那博沙显示出连接蛋白半通道的浓度依赖性抑制。较低的10μm浓度是用于半通道抑制的更有效的托那博沙浓度，其超过本研究中使用的肽5的功效。此外，抑制对半通道介导的atp释放有选择性，因为需要组合的丙磺舒处理来观察托那博沙的抑制效应(图8b)。这些数据提示尽管托那博沙有效阻断半通道，但它及其类似物和式i的其他化合物不太可能抑制从缺血性损伤中的泛连接蛋白通道释放的atp。如果托那博沙有效抑制连接蛋白半通道和泛连接蛋白通道两者，则抑制水平将与组合的肽5和丙磺舒处理或cbx可比较(分别为55％相对于65％)。相反，与单独的损伤相比较，单独的托那博沙处理诱导atp的轻微增加，虽然不显著。还注意到在这些实验中，100μm托那博沙在降低atp方面不如10μm托那博沙有效。由于较高的托那博沙浓度与细胞毒性不相关(图14)，托那博沙可能在损伤期间具有双重作用，由此靶向半通道用于抑制，但可触发泛连接蛋白通道在脱靶效应中打开。这些数据指示与泛连接蛋白通道阻滞剂(例如丙磺舒)组合的托那博沙的适度剂量/浓度将有效作为缺血以及至少部分由缺血表征的疾病、状况和病症的治疗。本文还证明经处理的模型的体外缺血后(再灌注)条件在hair溶液中2小时后恢复到正常生理条件。体外模型使得发明人能够测试a)连接蛋白和泛连接蛋白通道不仅在缺血性损伤中而且在缺血后的贡献，b)托那博沙处理在缺血中和缺血后的作用。在缺血后期间，连接蛋白半通道负责几乎所有atp释放，如由100μm肽5和1mm丙磺舒显示的(图9)。重要的是，以10μm浓度的托那博沙显示与100μm肽5可比较的功效。这些数据提示较低浓度的托那博沙抑制连接蛋白半通道介导的缺血后atp释放。此外，还惊讶地发现连接蛋白半通道开放和泛连接蛋白通道两者通过介导atp释放而促成缺血性损伤(图8)，但在再灌注之后，泛连接蛋白通道可能关闭，并且单独的连接蛋白半通道看起来负责通过这两个通道类型的几乎所有atp释放(图9)。泛连接蛋白通道可以缺血依赖性机制(即nmdar)打开，但当这些刺激也消退时，可在再灌注后不久关闭。相比之下，cx43表达在4小时显示为峰值，其中肽5在视网膜缺血后4和24小时减少血管损伤(h.v.danesh-meyer等人，brain:ajournalofneurology135,506(2012年2月))。这通过在近足月胎儿绵羊中缺血前1小时和缺血期间递送的肽5具有最低限度治疗益处的报道支持(j.o.davidson等人，experimentalneurology248,301(2013年10月))，而缺血后的肽5显著改善了eeg活性和睡眠周期的恢复，并且显著减少癫痫发作。在先前的研究中，研究了视网膜缺血-再灌注损伤的模型，其中血脑屏障中的破裂和血管内皮的水肿指示炎症应答并引起rgc死亡(h.v.danesh-meyer(2012))。损伤的原因归于开放的cx43hc，给予靶向cx43hc而不是gj的cx43模拟肽5的剂量(s.j.o'carroll等人，cellcommunication&adhesion15,27(2008年5月))显著降低血管渗漏和rgc细胞死亡。本文的实例包括体内视网膜缺血-再灌注损伤模型，如danesh-meyer等人(2012)中进行的，并且显示托那博沙针对视网膜缺血-再灌注损伤后的rgc丧失是保护性的。这在32μm的低最终循环剂量下实现，与用于在体外抑制连接蛋白半通道介导的atp释放的10μm可比较。托那博沙在大多数2期临床试验中以20-80mg每天施用一次，用于偏头痛(a.w.hauge等人，thelancet.neurology8,718(2009年8月))和癫痫(a.a.parsons等人，britishjournalofpharmacology132,1549(2001年4月)，n.upton等人，britishjournalofpharmacology121,1679(1997年8月))。然而，这些临床结果是不确定的(hauge,2009)。相比之下，本文惊讶地证明通过在损伤期间和损伤之后，特别是在缺血之后或与泛连接蛋白通道阻滞剂组合，通过靶向半通道可实现治疗益处。临床失败可归于使用其中泛连接蛋白通道也受影响的托那博沙。cx43同种型特异性反义寡脱氧核苷酸(cx43asodn)瞬时下调显著提供了血管保护并且改善不愈性眼部伤口中的功能结果(ormonde等人，j.membr.biol.(2012)245(7):381-88)。在这种情况下，瞬时抵消cx43的上升并因此从头形成gj半通道是有益的，而不永久损害空间缓冲效应。本文已惊讶地发现，托那博沙的时间依赖性作用可用于受伤后的cx的受控瞬时调节，同时使‘空间缓冲’效应的完全去除降到最低。本公开内容还证明了托那博沙从质膜中去除cx43(图16)。本发明人已惊讶地发现cx43斑块的总表达的减少(图16)，这指示托那博沙可能改变cx43合成和降解之间的平衡。因此，通过托那博沙靶向的内化cx43通道经由溶酶体途径被降解。存在用于降解连接蛋白通道的两种主要途径，溶酶体和蛋白酶体途径。检查溶酶体途径的基本原理基于下述想法：质膜连接蛋白仅由溶酶体降解，而细胞质和核连接蛋白由蛋白酶体降解。在溶酶体抑制剂的存在下细胞质cx43的积累指示托那博沙靶向cx43用于降解。cx43的核周定位指示新蛋白在高尔基体中的积累，这进一步支持下述想法：虽然托那博沙增强细胞表面cx43通道的降解，但它对新蛋白的cx43转录或翻译没有作用。pcr数据还提示托那博沙不调节cx43mrna转录；相反，观察到的cx43的减少在通过内化和降解的蛋白质周转的水平下发生。总之，除了其他之外，本发明人已惊讶地发现了托那博沙的新型作用机制，其包括连接蛋白半通道的直接和立即阻断，以及在较高浓度下，cx43gj偶联的浓度和时间依赖性抑制。暴露于高浓度的托那博沙不仅解偶联gj，而且持续的长期处理引起cx43斑块经由溶酶体途径被靶向内化和降解。在本公开内容中，已证明连接蛋白半通道和泛连接蛋白通道两者均可在缺血性损伤期间介导atp释放，其中连接蛋白半通道是损伤后atp渗漏的主要贡献者。短期暴露于较低浓度的托那博沙有效抑制在损伤期间但尤其是在体外再灌注期间cx43半通道介导的atp释放，并且这与体内视网膜缺血-再灌注模型中减少的rgc丧失一致，托那博沙因此不是如先前假定的cns特异性的，不限于cx26调节，并且不影响cx43蛋白质合成，而是直接作用于连接蛋白半通道或通过连接内化。实例11：连接蛋白43反义化合物的未经修饰的和化学修饰的寡核苷酸结构的转染体外测定huvec细胞(c-003-5c，invitrogen，原代人内皮细胞)用于测试连接蛋白43反义化合物的化学修饰主链的转染。使用制备商推荐的方案，使细胞在无血清培养基中用转染4小时和12小时。反义浓度在缓冲液中为200nm。使用的反义化合物具有未经修饰的(o)或完全修饰的(pto)主链，其中经修饰的主链具有在核苷酸之间的所有硫代磷酸酯键。未经修饰的序列seq1-o将具有序列gtaattgcggcaagaagaattgtttctgt。经修饰的序列seq1-pto将具有下述序列：gstsasaststsgscsgsgscsasasgsasasgsasaststsgstststscstsgst，其中下标“s”指示两个核苷酸之间的硫代磷酸酯键。同样，seq4-o和seq4-2pto的未经修饰的和经修饰的序列分别是acccatgttgcctgggcacc和ascscscsastsgststsgscscstsgsgsgscsascsc。用于转染研究的所有序列用fam标记用于荧光标记。通过facs(荧光活化细胞分选)和共焦显微镜检查来分析经转染的细胞。结果：在所有寡核苷酸类型中观察到超过95％的转染效率。与未经修饰的寡核苷酸相比较，细胞积累更多的pto-寡核苷酸。反义寡核苷酸的大多数摄取在4小时内发生，如表40中概括的。表66转染后4小时转染％seq4-oseq4-ptoseq1-oseq1-pto总计9910099100m26495626m334444263m4148211表67转染后12小时转染％seq4-oseq4-ptoseq1-oseq1-pto总计999998100m25595615m341444049m4247235图17显示几种选择的反义寡核苷酸的转染摄取的facs数据。如图18和19中所示，经由共焦显微镜检查的活细胞图像显示了在huvec细胞中(转染后4小时)fam标记的seq1-o(未经修饰的)的摄取。图18显示了经由共焦显微镜检查的活细胞图像显示了在huvec细胞中(转染后4小时)fam标记的seq4-pto(经修饰的)的摄取。绿色代表寡核苷酸seq1-o(fam标记的)，蓝色代表被dapi染色的细胞核。如由图18可见的，标记的连接蛋白43调节剂紧密接近细胞核，并且偶尔在细胞核中，如图18中所示。观察到寡核苷酸(绿色)在细胞核(蓝色)中积累，如图18和19中所示。在图19中，绿色代表寡核苷酸seq1-o(fam标记的)，并且蓝色代表被dapi染色的细胞核。接下来，对于具有相同序列但在寡核苷酸主链上具有不同数目的pto修饰的寡核苷酸系列，通过qpcr测量连接蛋白43在huvec细胞中的击倒效率。测试的序列是seq1和seq4，其中在主链中具有零个、2个或所有硫代磷酸酯键。对于在主链中具有两个硫代磷酸酯键的序列，硫代磷酸酯键在序列每一侧末端处的最后一个核苷酸键之间。对于seq1-2pto和seq4-2pto，序列分别为gstaattgcggcaagaagaattgtttctgst和ascccatgttgcctgggcacsc。所有寡核苷酸溶液的浓度为200nm。图20显示了如通过qpcr(n＝3)测量的连接蛋白43的击倒效率。数据显示了3次重复的标准差。图21显示了如通过蛋白质印迹测量的连接蛋白43的击倒效率。数据显示了3次重复的标准差。结果显示完全pto主链通过qpcr和蛋白质印迹分析两者显示出最多的cxn43击倒。此外，用在两个末端上的一个pto键(2-pto)保护反义导致一定程度的cxn43击倒。未经修饰的(o)主链寡核苷酸导致比所有pto-主链寡核苷酸低得多的cxn43击倒效率水平。随着时间过去观察到经修饰的(pto)和未经修饰的序列，完全完整序列和错义序列两者的击倒效率。通过qpcr测量击倒效率，如图22中所示。数据显示了3次重复的标准差。图22a和b分别显示了在转染后4小时和8小时通过qpcr测量的经修饰的(pto)和未经修饰的序列的击倒效率。寡核苷酸浓度：(1)＝200nm；(3/4)＝150nm；(1/2)＝100nm；c：seq1；seq4：37501；cscr：seq1错义的；lp2scr：seq4错义的；橙色条：阴性对照。(每个结果n＝3)。结果显示在转染后4小时检测到较少的非特异性阴性对照效应，并且以150nm的寡核苷酸显示出与其相应的阴性对照的最大差异。图23显示了如通过蛋白质印迹测量的击倒效率。数据显示了3次重复的标准差。结果显示转染后4和8小时显示出非常小的击倒，在转染后12小时检测到较小的非特异性阴性对照效应，并且以150nm浓度的寡核苷酸显示出与其相应的阴性对照的最大差异。通过qpcr分析不同序列的连接蛋白43的击倒效率，以比较对于cxn43的有义链和其他反义链，如图24中所示。还通过蛋白质印迹(wb)分析序列的击倒效率，如图25中所示。结果指示所有反义寡核苷酸具有比阴性对照更高的连接蛋白43击倒效率。根据击倒效率结果，鉴定了也可击倒连接蛋白43的各种其他序列(全部在整个主链中具有全硫代磷酸酯键)。表68显示了与seq1相比较它们的相对击倒差异。表68.然后在另一个细胞类型中测试寡核苷酸序列的击倒效率：paoec(p304-05，cellapplicationsinc.)，作为原代细胞的猪主动脉内皮细胞。在实验前将细胞种植24小时以达到50-80％汇合。使用推荐的方案，在无血清培养基中，以200nm寡核苷酸浓度，通过转染细胞4小时。在8小时(用于qpcr分析)和12小时(用于蛋白质印迹分析)收获样品。图26显示了击倒结果。图26中的虚线指示平均阴性对照效应(～12％)。结果显示一般而言猪形式的反义寡核苷酸比相应的人形式表现更好。然后通过qpcr分析选择的寡核苷酸在huvec细胞中的剂量应答性能。测试的浓度为：1、5、10、25、50、100和200nm，如图27中所示。结果显示错义序列(对于连接蛋白43不是反义的)不具有任何剂量应答，而所选择的反义寡核苷酸序列(都具有硫代磷酸酯主链)的确显示出剂量应答。对于几个序列通过qpcr测量通过未经修饰的序列(主链中无硫代磷酸酯键)的cxn43击倒效率，如图28a和b中所示。结果指示在转染后4小时而不是8小时检测到击倒。反义连接蛋白43寡核苷酸显示出对于seq4和133704的剂量应答。对于所有浓度，seq1在4小时未显示出超过～10％的击倒效应。与媒介物对照相比较，阴性对照显示出较高的cxn43mrna水平。如图29中所示，在400nm和150nm两者下，使经修饰的(具有全硫代磷酸酯主链)序列的击倒效率与未经修饰的序列比较。结果指示在200nm下，用asn处理检测到不多的击倒(kd)，而在400nm下，对于一些asn序列检测到低水平的击倒。总之，未经修饰的寡核苷酸序列可在体外诱导击倒，但程度很小并且从实验到实验是可变的，如图30中所示。结果指示即使使用高得多剂量的未经修饰的寡核苷酸，经修饰的寡核苷酸主链(pto-asn)显示出比相应的未经修饰的寡核苷酸(o-asn)多得多的击倒效率。实例12.通过一系列筛选事件鉴定其他序列，以鉴定针对连接蛋白43的其他有效的反义寡核苷酸从ncbi数据库(美国国家生物技术信息中心)获得目的靶的dna序列。合成dna并插入pdonr221克隆载体内，用于使用大肠杆菌(ecoli)细胞的扩增。随后，从大肠杆菌细胞中提取含有靶dna的载体，并且使用限制性酶分离靶dna。靶dna用作体外转录的模板以生成相应的rna并用于执行rna酶h和dna酶测定。对于rna酶h测定，靶rna在一个末端处用32p进行标记，并且在rna酶h酶的存在下，用12核苷酸的随机寡核苷酸文库进行探测。随后，通过执行变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析部分消化的样品产物。与标准梯相比较，通过rna酶h切割生成的片段大小指示相应可接近区域与rna的标记末端的距离。由于凝胶的分辨极限，未确定位于rna的非翻译末端上的区域。对于dna酶定，通过寻找靶rna上的嘌呤(a、g)和嘧啶(c、t)对的酶靶来设计20个核苷酸的dna酶，以便探测特异性可接近位点。随后，通过执行非变性琼脂糖凝胶电泳和rna凝胶染色来分析样品。通过dna酶切割生成的片段大小证实了特异性可接近位点。由于凝胶的分辨率极限，未确定位于rna的非翻译末端上的位点。活性dna酶的靶结合臂的序列用于合成具有硫代磷酸酯(pto)主链的反义寡核苷酸，其然后通过蛋白质印迹筛选蛋白质的击倒，并且在细胞培养测定中通过qpcr筛选rna的击倒。使细胞在6孔培养板中生长24小时，并且在使用转染剂的反义寡核苷酸处理之前达到50-70％汇合。在转染后4和24小时之间收获细胞用于qpcr和蛋白质印迹分析。执行qpcr以确定反义寡核苷酸在靶rna击倒中的功效。简言之，在转染后从细胞中提取总rna。将分离的rna进行dna酶处理并且逆转录成cdna。cdna随后经历qpcr热循环。将从qpcr获得的ct值(荧光强度超过设定阈值所需的循环数)转换为rna的相对丰度。将靶的rna水平针对选择的参考基因标准化，并且在反义寡核苷酸相对于媒介物处理之间进行比较。还执行蛋白质印迹以确定反义寡核苷酸在靶蛋白击倒中的功效。简言之，在转染后从细胞中提取总蛋白，并且通过执行二喹啉甲酸(bca)测定来测定浓度。随后，装载等量的总蛋白用于凝胶电泳，并且印迹到硝酸纤维素膜上，其随后用针对靶蛋白的特异性抗体进行探测。密度测定法用于定量靶蛋白的条带强度。通过比较反义寡核苷酸相对于媒介物处理来定量击倒。在以引用的方式并入本文的申请序列号62/080,217、62/085,226、62/146,128和62/147,488的附录中阐述的表56显示了测试的所有asn和概括的测试结果。表67显示了其中发现rna酶活性的位点，并且表示具有可接近性的一般区域。这些通过dna酶步移通过那些区域进行精制。根据这设计和测试一系列asn。表68列出了随后在细胞上测试击倒活性的所有asn。表61列出了我们正在进一步开发和表征的当前前导asn序列。结果这些asn序列起因于围绕通过rna酶h测定鉴定的8个可接近区域设计的dna酶，如表57中所列出的。表57然后选择asn的子集用于进一步分析。基于在初步细胞筛选测定中显示较低的击倒水平，和/或如果通过与其他已知的人基因的序列比对检测到高交叉反应性，则从其中排除其他asn。表58.由于有希望的概况，在进一步分析中使用的asn子集列表反义寡核苷酸(asn)的相对rna击倒活性显示于图31中。从反义寡核苷酸的蛋白质印迹分析获得的相对蛋白质击倒活性显示于图32中。结果来自huvec细胞中的两个重复实验。(n＝2)黄色条(“47001scr2”)指示阴性对照寡核苷酸的活性。结果指示其他asn在调节cxn43活性方面是高度有效的。使用huvec细胞(人脐静脉内皮细胞；invitrogen)执行细胞筛选实验，在每个实验中具有两个生物学重复。“coda”的标识符是seq1，并且“lp2”是seq4。如表61中所示，从给出在qpcr和蛋白质印迹分析两者中检测到的前10％内的击倒百分比的那些中选择下述前列asn候选物。表61.关于在huvec中的cxn43击倒的当前顶部asn候选物图33显示了一些选择的asn在施用于细胞后4小时诱导cxn43rna击倒的剂量反应曲线。筛选结果来自huvec细胞中的一个实验。(n＝2个生物学重复)。灰色线(“47001scr2”)指示阴性对照寡核苷酸。asn浓度为：1、5、10、25、50、100和200nm。术语“％kd”是cxn43rna水平中的击倒百分比。指示符“coda”是在临床开发中的coda001人连接蛋白43asn；指示符“scr2”是不预期具有cxn43击倒活性的错义asn对照。实例13.连接蛋白43调节肽预防在缺血再灌注损伤后的血管渗漏的用途连接蛋白43(cxn43)调节肽用于控制由缺血灌注诱导的模型的眼压中的增加。所使用的肽序列为seq-pept5(seqidno:168)，剂量如下所述。使小鼠经历缺血灌注，然后经由腹膜内注射用伊文思蓝染料处理，以监测模型的基线。将在0.9％盐水溶液中的100mg/ml伊文思蓝引入小鼠内，使用1ml/100g体重剂量。注射腹膜内执行。在缺血-再灌注后测量染料渗漏的量，以及连接蛋白43斑点计数。图34显示了缺血后的伊文思蓝染料的染料灌注，以绘制缺血-再灌注后的连接蛋白43。图35显示了根据缺血-再灌注后的时间计算的(经由imagej，如本文描述的)染料渗漏面积或连接蛋白43斑点计数。结果显示了染料渗漏的基线性能。分析缺血-再灌注模型的处理，以确定用连接蛋白43调节剂处理的效应。图36显示了在用和不用cxn43调节试剂处理后对总染料渗漏的作用。本研究中使用的cxn43调节试剂是seqidno:168(“肽5”)。注射是腹膜内注射。1ml的2mmcxn43调节剂肽用作0.9％盐水溶液。最终的血液肽浓度为100um。还对于共同肽序列核上的一系列序列变化监测肽片段效率。如图37中所示，比较了特定核序列的变体延迟cxn43表达的能力(y轴)。结果指示该序列必须保留在羧基末端处的kt，以保持在延迟cxn43活性方面的活性。肽以100um的浓度施用。图37中的序列是：肽5＝seqidno:168，mod1＝seqidno:171，mod2＝seqidno:172，mod3＝seqidno:173，mod4＝seqidno:174，mod5＝seqidno:175，mod6＝seqidno:176。实例14：纳米颗粒(np)和微粒(mp)的制备和分析颗粒制备水-油-水(双重)乳液是通过其plga可用于封装以微米或纳米级形式的疏水和亲水药物的一种方法。简言之，将plga(聚(d,l-乳酸共乙醇酸)(plga50:50，mw13,600，固有粘度0.19dl/g，sigma-aldrich)溶解到用表面活性剂或稳定剂(水)乳化的有机相(油)内。将疏水形式的连接蛋白43调节剂直接加入到油相中，而亲水形式的连接蛋白43调节剂可在形成颗粒之前首先用聚合物溶液乳化。高强度超声破裂促进小聚合物液滴的形成。然后将所得到的乳液加入较大的水相中，并且搅拌几小时，这允许溶剂蒸发。收集硬化的纳米颗粒并通过离心洗涤。使用双重乳液溶剂蒸发法(y.-s.chen等人，drugdeliv.18(2011)493–50)执行含有cxn43调节剂的plganp和mp的制备和表征。简言之，对于np，使用探针超声波仪(hielscher，teltow，德国)以50w的振幅和0.6s的工作循环，使5mmcxn43mp(普通的或fitc-标记的)水溶液在含有30mg/mlplga的dcm(二氯甲烷，sigma-aldrich)中在冰浴上乳化1分钟，以形成初级w/o乳液。所得到的初级w/o乳液在3％w/vpva(聚乙烯醇(pva，mw130,000，水解度95–97％，sigma-aldrich)的水溶液中进一步乳化，以形成多重w/o/w乳液。随后将其倾入50ml的pva水溶液(0.1％w/v)内，以在蒸发过程期间稳定双重乳液，其中通过在4℃下以30,000rpm的超速离心(proteomelabtmxl-a/xl-i；70ti型转子，beckmancoulter，auckland，新西兰)回收得到的np。对于mp，将10mm的cxn43mp水溶液在含有100mg/mlplga的dcm中乳化。所形成的初级w/o乳液在pva溶液(5％w/v)中进一步乳化，并且随后在8000rpm下均质化5分钟(ikaworks,ultra-turraxt10,wilmington,usa)，然后将其倾入50ml的0.1％w/vpva溶液内，并且在室温下蒸发有机相。然后将np和mp冻干(virtis,spscientific,gardiner,ny,usa)24小时，并且使用扫描电子显微镜检查(sem)(philipsxl30sfeg，eindhoven，荷兰)研究颗粒形态，同时分别使用zetasizernano和mastersizer(malverninstruments,worcestershire,uk)测定粒度、ζ电位(zp)和多分散指数(pdi)。来自plganp和mp的截留效率和体外cxn43mp释放将2.5mg质量的fitc标记的cxn43mp负载的np和mp加入0.25mldmso中，以允许聚合物溶解。随后，加入0.5ml水，并且允许混合物在室温下静置15分钟，然后摇动30分钟，以促进fitc标记的cxn43mp提取到水相内。将样品在13,000rpm和4℃下离心5分钟，并且使用微板阅读器(spectramaxm2microplatereader,moleculardevices,siliconvalley,ca,usa)定量上清液中的cxn43mp浓度。对于体外释放研究，将15mgfitc-标记的cxn43mp负载的np和mp悬浮于0.7mlpbs中，并且经过释放实验的时期在100rpm和37℃下振荡。在预定的时间点取出体积0.6ml的上清液，并且替换为新鲜培养基以维持下沉条件。将样品以13,000rpm离心，并且如上所述使用荧光计就fitc标记的cxn43mp测定上清液。计算释放的cxn43mp的累积量，其中每个研究一式三份执行。cxn43半通道对接的体外阻断最初就cxn43蛋白的表达评估arpe-19细胞(p9-12，美国典型培养物保藏中心(atcc,manassas,va,usa)。在37℃与5％co2和95％相对湿度下将细胞常规地培养在含有10％fcs的dmem/f12(gibco,nz)中。在汇合时，用trypletmexpress收获细胞，并且以1x105个细胞/ml/孔的密度种植在盖玻片上。在贴壁48小时后，每个孔用pbs洗涤三次，随后加入1ml的fitc-cxn43mp溶液或fitc-cxn43mp负载的mp和np悬浮液，其通过将冷冻干燥的颗粒与细胞生长培养基混合而新鲜制备，其中最终cxn43mp浓度保持在5微摩尔(根据先前确认的截留效率)。在预定时间点(8和24小时)，去除悬浮液并且用pbs小心地洗涤细胞三次，以去除任何残余颗粒。将细胞用4％冷pfa在室温下固定20分钟，然后与兔抗cxn43抗体(c6219,sigmaaldrich,1:2000)一起在4℃下温育过夜。去除一抗后，使细胞与用alexa568标记的山羊抗兔二抗(a11011,invitrogen,1:500)一起温育2小时。用dapi(4',6-二脒基-2-苯基吲哚，在pbs中100nm)对核进行复染，然后使用citifluor封固介质(af1，proscitech，sydney，澳大利亚)将细胞固定载玻片上。体内视网膜缺血-再灌注大鼠模型所有程序均遵从动物在眼科和视觉研宄中的应用的arvo声明，并且由universityofauckland动物伦理委员会批准。体重200–300g的成年雄性wistar大鼠饲养在12小时光/暗周期下，并且随意接受食物和水。根据再灌注后的饲养时间段和施用的制剂将动物分组(表109)。表109.cxn43mp，连接蛋白43模拟肽；np，纳米颗粒；mp，微粒；gfap，神经胶质原纤维酸性蛋白；brn3a，脑特异性同源盒/pou结构域蛋白3a。用6:4比率的氯胺酮(100mg/ml；parnelllaboratories，auckland，新西兰)和domitor(盐酸美托咪定1mg/ml；novartisanimalhealth,sydney，澳大利亚)的肌内注射(0.1ml/100g体重)使大鼠麻醉。将局部麻醉剂(minims盐酸奥布卡因0.4％w/v；bausch&lomb,surrey,uk)应用于左眼，以在套管插入之前去除角膜反射，而将refreshtearplus滴眼剂(allergan,auckland，新西兰)施用于右眼(对照)以预防其干燥。通过在角膜缘前大约1mm处用30g针插入左眼的前房内将套管插入前房来实现视网膜缺血。将连接到硅酮管道的针附接到无菌0.9％盐水的升高输注管线，其中校准盐水袋的高度以产生120mmhg。将该状态维持1小时，随后去除套管，引起iop的正常化和视网膜的再灌注。如果任何眼部并发症例如晶状体损伤或过度出血由于操作而发生，则动物从研究中排除。cxn43mp制剂的玻璃体内注射在缺血再灌注后立即执行玻璃体内注射。将具有30g针的hamilton注射器(型号701ltsyr，hamiltoncompany,reno,nv,usa)以45°角插入在上部视网膜的角膜缘后面，以避免与晶状体囊接触并将内容物导入玻璃体腔内。每只大鼠接受2μl在0.9％盐水中稀释的580微摩尔cxn43mp。假定玻璃体体积50μl，预期20微摩尔的最终肽浓度。然后皮下注射在盐水中的体积为0.1ml/100g体重的antisedan(阿替美唑5mg/ml，pfizer，auckland，新西兰)(1:9)，以允许动物恢复。在视网膜横截面中的cxn43和gfap标记在再灌注28天后，用co2对大鼠实施安乐死，并且摘出眼(每组n＝3)。通过浸没在4％pfa中30分钟立即固定眼，随后为从10％到30％逐渐增加的蔗糖的过夜冷冻保护。然后将眼嵌入最佳切割温度(oct)化合物(proscitech，sydney，澳大利亚)中，并且用液氮快速冷冻。将20微米厚度的切片固定在载玻片上，并且还在20℃乙醇中固定10分钟，然后与阻断缓冲液(在pbs中的10％正常山羊血清(gibco,nz)和0.1％tritonx-100)一起在室温下温育1小时。在10％正常山羊血清和2％tritonx-100中的兔抗cxn43(c6219,sigmaaldrich,1:2000)和缀合至cy3的小鼠抗gfap(c9205,sigmaaldrich,1:1000)一抗在4℃下应用过夜。组织用pbs洗涤三次共15分钟。在固定切片之前，将在10％正常山羊血清中的山羊抗兔alexa488二抗(a11034,invitrogen,1:1000)在黑暗中在室温下应用2小时，以显现cxn43。视网膜全标本包埋中的rgc标记在再灌注28和90天后，用co2对大鼠实施安乐死，并且摘出眼(每组n＝6)。在沿着角膜巩膜边缘连接切割后小心去除眼的后段，并且将视网膜、巩膜和视神经在0.01mpbs中的4％pfa中固定1小时。插入小切口以标记上象限，并且在圆周周围进行四个径向切割，以区分上、下、颞和鼻的视网膜象限，并且允许平坦固定。然后轻轻分离视神经和巩膜，并且将游离的视网膜小心地压平在载玻片上。通过在4℃下应用在pbs中的2％马血清(gibco，auckland，新西兰)和2％tritonx-100中的山羊抗brn3a一抗(sc-31984,santa-cruzbiotechnology,1:100)过夜，来标记存活的rgc。将组织用pbs洗涤三次共15分钟，然后在2％马血清中的驴抗山羊cy3标记的二抗(705-165-147,jacksonimmunoresearch,1:500)在室温下在黑暗中应用2小时。在进一步用pbs洗涤后，将视网膜平坦固定并且在4℃下贮存直到成像。共焦显微镜检查和图像分析用共焦激光扫描显微镜(fv1000,olympus,tokyo，日本)对免疫标记进行成像。对于在视网膜横截面中的cxn43和gfap标记，每个样品获取8个图像，其中每个眼使用6个切片。对于在视网膜全标本包埋中的rgc标记，每个视网膜的两个视野/象限用每组使用的6个视网膜成像。这种方法确保在每只眼中评价类似的区域，并且避免任何可能的区域偏见。调整增益(电压)和偏移设置，以最好地区分个体标记并避免图像的过饱和。使用imagej中的自动化斑点计数执行定量。对于横截面中的cxn43定量，使用阈值45将每个图像转换为二值图像。小于三个像素的斑点视为噪声且不计数。对于全标本包埋中的rgc定量，使用阈值23将每个图像转换为二值图像。为了分离聚类，应用分水岭算法。少于20个像素的斑点视为噪声，并且从颗粒计数中排除。统计分析结果表示为具有标准差(sd)的平均值。方差分析(单因素anova)与tukey-kramer比较用于测试组之间的显著差异(p<0.05)。所有数据分析使用minitab#statisticalsoftware版本15(minitabinc.,statecollege,pa,usa)进行。plganp和mp的表征使用双重乳液和溶剂蒸发方法，获得具有窄尺寸分布的具有期望尺寸的cxn43mp负载的plganp和mp(图110)。图110显示了在制备后立即的冷冻干燥的np(a)和mp(b)的形态，以及在释放介质中三天后表面形态和孔隙率的变化(分别为d(np)和c(mp))。如证明的，np和mp两者均在制备后显示出球形结构和相对平滑且均匀的表面形态(图110a和b)。虽然观察到一些附聚物的形成，但不存在游离药物晶体，指示cxn43mp完全负载到plga基质内。在释放介质中三天后，mp显示出在颗粒表面上轻微的孔形成(图1c)，而np几乎完全被侵蚀，其中主要剩下颗粒胶囊(图1d)。粒度主要受plga浓度的影响。所使用的plga浓度越高，如由较大尺寸的mp可见的所获得的平均直径越高。这很可能是由于在更浓的溶液中较小聚合物聚集体聚结的更大可能性，因此导致更大的液滴。此外，由于有机相的粘度增加，在乳化过程期间所需的较高剪切力可能导致plga溶液在水相内的较差分散性。np的平均zp(ζ电位)为-31.3±0.94mv，并且因为cxn43mp在ph7.4下为中性，所以负电荷归于plga。zp是重要的物理化学特征，因为它影响颗粒稳定性和粘膜粘附两者。高度正或负的zp值引起颗粒之间的排斥，并且因此预防聚集，并且因此理论上趋于稳定颗粒悬浮液。眼玻璃体由大于98％的水组成，其中胶原和透明质烷分子包含两种主要固体组分。如果阴离子颗粒的尺寸足够小以避免立体截留，则阴离子颗粒可经由颗粒和带负电的玻璃质网之间的静电排斥而自由扩散通过玻璃体。牛玻璃体的网孔尺寸已显示在1和2μm之间(l.cheng等人，j.neurosci.22(2002)3977–3986)。因此，np将自由地通过玻璃体朝向视网膜扩散，而mp可能由于其较大的尺寸而被截留在网中。来自plganp和mp的截留效率和体外cxn43mp释放fitc-标记的cxn43mp负载的plganp和mp的截留效率(ee)在图110中列出。该方法的可重复性良好，如由负载量指示的，并且截留效率计算对在相同条件下制备的三个批次/组进行。对于两种颗粒获得高产率(≥90％)，与小得多的np(≥70％)相比较，cxn43mpee对于更大的mp(≥97％)更高，对于mps获得几乎完全的肽封装。用于mp的相对高浓度的plga通过降低在加工期间活性物质扩散到外部水相内而促成高ee。粒度测量分析在成像当天制备用于扫描电子显微镜检查(sem)的样品。将双面碳带条粘附到sem托(stub)上。将少量的冻干颗粒施加到带的表面，并且使带表面轻轻经历流动氮以去除松散的颗粒。然后将样品用金或金-钯溅射涂布30-120秒。然后将sem托置于sem中用于分析。用于显现颗粒的典型参数是5-15mm的工作距离、5-12kv的束强度和1-3微米的斑点大小。在100x放大率下观察微粒，并且在3,000x放大率下可区别纳米颗粒。每批收集至少三个图像，以便获得粒度和形态的代表性样品。使用imagej中的“测量”函数从sem图像直接获取测量。获取从视野随机选择的颗粒直径的最少150个测量值，以取得代表性尺寸分布。微粒和纳米颗粒的代表性图像显示于图38中。可采用其他方法来测量粒度，包括但不限于光散射、ζ电位分析、库尔特计数(电感带法)和光学显微镜检查。实例15.微粒和纳米颗粒用于连接蛋白调节剂的延长释放制剂的用途。经由与上述那种类似的方法，用化学修饰的c12-c12-seq-pept5连接蛋白43调节剂肽(seqidno:326)装载微粒和纳米颗粒。为了获得释放介质后的颗粒的代表性图像，将每种颗粒类型的等分试样加入1xpbs缓冲液中三天。经由与上述那种类似的方法收集颗粒，并且在释放后成像。图像显示在上图110中。在如此制备的颗粒(其尚未经受释放介质)的图38的底部给出了粒度分析(如通过上述方法测定的，使用多个sem图像的imagej粒度测量)。通过溶液在颗粒上的uv-vis监测来自颗粒的连接蛋白43调节剂的体外释放。将颗粒加入到释放介质、1xpbs缓冲液中，并且通过uv-vis监测缓冲溶液的等分试样，以测定释放的肽的量。结果显示于图39。体外释放结果指示颗粒制剂显示出连接蛋白43调节剂随着时间过去的持续释放。释放的调节剂的初始爆发可能是由于调节剂物理吸附到颗粒表面，而调节剂的持续释放可能是由于调节剂从颗粒的核扩散。粒度由此是重要的参数，与np相比较，mp显示出相对小的初始爆发，这是由于随着粒度增加表面积与体积比的减小。这导致可用于介质渗透到颗粒内并且侵蚀聚合物的表面积减少，并且因此减慢了cxn43mp的释放速率。实例16.化学修饰的肽和颗粒持续释放制剂治疗青光眼模型眼的用途。在用视网膜缺血再灌注对于青光眼建模的大鼠上测量化学修饰和颗粒制剂递送的效应。首先，创建视网膜缺血再灌注模型。将总共121只体重200至300g的成年雄性wistar大鼠用于研究。在左眼(120mmhg共60分钟)中建模视网膜缺血，而右眼作为对照，并且随后将连接蛋白43调节剂肽制剂作为1xpbs递送剂中的溶液立即玻璃体内注射。使用的连接蛋白43调节剂肽是seq-pept5，以其未经修饰的和化学修饰的(双十二烷基)形式两者。所使用的制剂是纳米颗粒或微粒的纯(仅在1xpbs递送介质中稀释)溶液。再灌注后，伊文思蓝染料在再灌注后4小时腹膜内注射，以使用共焦显微镜检查显现血管渗漏。在8小时和28天收集视网膜全标本包埋用于cxn43定量，以及在28天和90天用于神经节细胞(rgc)密度定量。如图40中所示的结果指示在用所测试的连接蛋白43调节剂中的任何处理的眼的视网膜中，缺血后4小时后的血管渗漏显著降低。结果还指示与未经修饰的肽(cxn43mp)(seq-pept5,seqidno:168)相比较，seq-pept5的化学修饰的(双十二烷基)形式(c12-c12cxn43mp)(seqidno:326)的血管渗漏的减少。对于用两种形式的连接蛋白43调节剂肽处理的模型测量斑点计数。如图41中所示，结果指示与未经修饰的肽相比较，斑点计数对于化学修饰的(c12-c12cxn43mp)连接蛋白43调节剂肽减少更多。缺血后仅8小时观察到最低斑点计数。在缺血后28天后，通过共焦显微镜检查观察组织的横截面，并且对于伊文思蓝染料染色的样品测量平均cxn43计数。如图42中所示，结果指示涉及用于递送的纳米颗粒的制剂导致比不含纳米颗粒的制剂或甚至具有微粒的制剂更低的cxn43表达。此外，在延长的持续时间内，与初始缺血时间点相比较，两种颗粒制剂均产生cxn43表达的降低。还对于用涉及纳米颗粒、微粒或纯的制剂，以及未经修饰的和化学修饰的肽处理的模型，监测视网膜神经节细胞计数。如图43中所示，结果显示与未经处理的眼(仅缺血)的小于70％相比较，化学修饰的肽处理导致在28天后超过93％的rgc存活。实例17.连接蛋白43在诊断有amd的人的视网膜中上调脉络膜灌注损伤和/或脉络膜炎症、或脉络膜过度灌注诱导脉络膜和布鲁赫膜中的血管渗漏，并且导致视网膜色素上皮中的内皮细胞丧失。脉络膜灌注损伤和/或脉络膜炎症、或脉络膜过度灌注和脉络膜毛细血管脱落起因于连接蛋白43上调，并且连接蛋白43上调可能是amd的促成因素。在amd器官供体视网膜的脉络膜中观察到与cxn43表达的变化相关的异常脉管系统，支持连接蛋白43上调在amd中的作用。这指示视网膜色素上皮变性和玻璃疣发展是amd的潜在下游后果，而不是amd的主要原因。脉络膜血流的改变和脉络膜灌注损伤和/或脉络膜炎症、或脉络膜过度灌注仅是amd的促成因素。血管渗漏和炎症与amd脉络膜变化相关，其然后随后与视网膜新生血管形成相关。如图44中所示，在患有amd的人供体的染色样品中观察到的连接蛋白43表达在脉络膜、视网膜色素上皮的多个区域以及与布鲁赫膜邻近的相关区域中上调。如图44小图a中观察到的，非amd供体具有局限于视网膜色素上皮的cxn43表达。在视网膜色素上皮中存在显著的cxn43标记，但这被颜料本身的自体荧光掩盖。如图44小图b中观察到的，在amd诊断的供体中，在血管外(在细胞外基质内)观察到广泛的cxn43标记。这种类型的标记与细胞外基质成纤维细胞和炎症细胞簇相关，这在更密集的结缔组织沉积的区域内是明显的。本发明人已作出令人惊讶的发展：调节视网膜中的cxn43是amd的潜在治疗。实例18.用与抗vegf化合物共施用的连接蛋白43调节剂治疗急性黄斑变性(amd)目前用于治疗amd的抗vegf试剂的过度使用导致绒毛膜毛细血管脱落，由此增加疾病的发病率。这得到了catt2研究的支持，所述catt2研究显示用阿瓦斯汀或lucentis长期治疗的患者中新的地图状萎缩的发生率增加(martindf,maguiremg,finesl,yinggs,jaffegj,grunwaldje等人ophthalmology；119(7):1388-98,2012)。使用较小的lucentis分子(其中可预期到脉络膜内的更大渗透)每月治疗(在两年内平均23次注射)的患者中的发生率大于阿瓦斯丁治疗的患者中(分别为29.4％相对于19.5％)。根据需要治疗的患者(分别为在两年内平均12或24次注射)具有较低水平的新的地图状萎缩(分别为16％和14％)。相应地，amd治疗渗透到脉络膜内导致脉络膜炎症和对营养视网膜的血管床的损害，从而循环回到不受控制的脉络膜炎症。本发明人已作出惊讶的发现：打破这种慢性循环对阻断疾病进展是至关重要的。抗vegf试剂的过度使用还可导致毛细血管床的退化，特别是如同在睫状体中发现的那种具有穿孔的毛细血管(ford,k.m.,invest.ophthalmol.vis.sci.53:7520-7527,2012)。已发现抗癌治疗中的vegf阻断损害局部治疗脑肿瘤的人中的肾脏毛细血管和甲状腺功能(同上)。目前的amd疗法(例如阿瓦斯汀和lucentis)主要用于治疗amd的症状，以减少新生血管形成。对于涉及rgc丧失的慢性疾病例如amd，本发明人已了解治疗的双重策略将优于单一疗法。首先，必须改善内部视网膜本身的脉络膜炎症进展和rgc丧失。其次，可直接靶向在邻近结构如下面的脉络膜组织中的脉络膜炎症。用抗vegf和连接蛋白43调节剂的组合的共施用治疗导致超过单一试剂疗法对患者的改善益处。共施用的益处是较不频繁的给药(导致增加的患者依从性和耐受性)和较少的副作用(例如新的地图状萎缩)。虽然在本文中使用lucentis，但在本发明的方法中可使用其他抗vegf化合物或眼部治疗，例如阿瓦斯丁、eylea(阿柏西普)、补体因子d(拉姆帕力珠单抗)、抗s1p(isonep、松昔珠单抗)和上述的那些amd治疗试剂。通过在连接蛋白43调节剂施用的同一天和在连接蛋白43调节剂施用之前，通过玻璃体内注射施用雷珠单抗(lucentis)来实现共施用治疗。将含有贝伐珠单抗的小瓶维持在4℃下，并且在使用前充分振荡至少一分钟。洗涤眼并以通常的无菌方式覆盖眼。给予局部麻醉并且放置窥器用于充分暴露。注射象限由治疗医师选择，并且注射部位测量在角膜缘后3.0至4.0mm处。28-或30号针用于施用以10mg/ml浓度的贝伐珠单抗制剂的50μl注射剂(0.5mg)。在注射后，在治疗医师的判断下执行穿刺，并且取出窥器。给药每月应用一次。接下来，经由玻璃体内或眼内注射或者通过本文所述的其他施用方法，来施用包含连接蛋白43调节剂的制剂。28-或30号针用于施用连接蛋白43调节剂制剂的50μl注射剂。连接蛋白43制剂是以10mg/ml的浓度溶解于递送介质中并递送0.5mg(50ul)的seq/pept5(“肽5”)(seqidno:168)。通过使用缓慢稳定的施用速率，以及通过在材料施用和套管撤回期间用反压装置(cpd)施加轻微的压力，在施用期间材料的回流可降到最低或得到预防。剂量每月应用一次(在lucentis施用的同一天)。剂量也可以是0.1ug/ml、0.5ug/ml、1ug/ml、5ug/ml、2.5ug/ml、10ug/ml、50ug/ml、100ug/ml、1mg/ml、2.5mg/ml、5mg/ml、10mg/ml、25mg/ml、50mg/ml、100mg/ml、250mg/ml或500mg/ml。递送介质也可以是1xpbs、柠檬酸盐、抗坏血酸盐或硼酸盐基缓冲液，其中具有0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％nacl浓度用于等渗。ph也可以是3、3.5、4、5、6、6.5、7、7.4或8。通过光学相干断层扫描和视敏度标准监测患者，以测定共施用治疗的效应。将用共施用处理治疗的患者群组与仅用lucentis治疗的患者组比较，其中用共施用治疗的患者群组显示出比仅用lucentis治疗的患者群组更大的视敏度。用共施用方案治疗的患者群组显示出脉络膜中的恢复，如通过光学相干断层扫描监测的。实例19：具有rho激酶抑制剂的连接蛋白或泛连接蛋白调节剂的制剂本发明提供了含有一种或多种试剂的制剂，所述试剂增强在水性介质中配制用于分开或共同施用的rho激酶抑制剂化合物和连接蛋白或泛连接蛋白调节剂的眼科性质，调整所述水性介质的ph，以增加眼部表面停留时间和增强在前房的房水中的生物利用度，并且减少全身暴露。本发明提供了rho激酶抑制剂化合物和连接蛋白或泛连接蛋白调节剂的水性制剂，所述水性制剂适合于治疗用途并且在正常使用的贮存条件下保持稳定延长时间段。该制剂可用于降低哺乳动物中的眼内压。对于局部施用，可将一至两滴这些制剂每天递送至眼的表面一至四次。本发明的眼用水性制剂可具有增加的在眼部表面上的停留时间和/或房水浓度，而不伴随全身浓度的增加。对于rho激酶抑制剂化合物和连接蛋白或泛连接蛋白调节剂的分开或共同施用，水性药物制剂可包含0.001-2％的rho激酶抑制剂化合物、1.0-50,000μm的连接蛋白或泛连接蛋白调节剂、适合于维持ph约6.3-7.8的1-100mm的缓冲液、0.01-2％的表面活性剂和张度剂以维持约200-360mosm/kg的张力；如本文使用的，“约”指±15％。ph为约6.3-7.5，并且优选ph为约6.3-7.3。组合物还可包含例如氯化钠、氯化钾、氯化钙和/或氯化镁。对于rho激酶抑制剂化合物和连接蛋白或泛连接蛋白调节剂的分开或共同施用，在水性制剂中的rho激酶抑制剂浓度一般为0.001-2％，优选0.01-0.5％，更优选0.01-0.4％，更优选0.03-0.2％，且更优选0.03-0.15或0.03-0.1％(w/v)。适合于维持ph在6.3和7.8之间的缓冲液包括柠檬酸盐、磷酸盐、马来酸盐或其组合。合适的缓冲液浓度为1-100mm，优选5-50mm，更优选5-25mm，且最优选10-20mm。对于rho激酶抑制剂化合物和连接蛋白调节剂的分开或共同施用，其中连接蛋白调节剂是连接蛋白43调节剂，连接蛋白43调节剂可以约8μm至约20μm的最终浓度存在于制剂中，并且可替代地，连接蛋白43调节剂以约10μm至约20μm的最终浓度或约10至约15μm的最终浓度存在。在某些其他实施例中，连接蛋白43调节剂以约10μm的最终浓度存在。在另外一个实施例中，连接蛋白43调节剂以约1-15μm的最终浓度存在。在其他实施例中，连接蛋白43调节剂以约20μm、30μm、40μm、50μm、60μm、70μm、80μm、90μm、100μm、10-200μm、200-300μm、300-400μm、400-500μm、500-600μm、600-700μm、700-800μm、800-900μm、900-1000或1000-1500μm、或1500μm–2000μm、2000μm-3000μm、3000μm-4000μm、4000μm-5000μm、5000μm-6000μm、6000μm-7000μm、7000μm-8000μm、8000μm-9000μm、9000μm–10,000μm、10,000μm–11,000μm、11,000μm–12,000μm、12,000μm–13,000μm、13,000μm–14,000μm、14,000μm–15,000μm、15,000μm–20,000μm、20,000μm–30,000μm、30,000μm–50,000μm或更大，或在任何两个所述剂量之间的任何范围或子范围，或落入约20μm至约50,000μm范围内的任何剂量存在。对于rho激酶抑制剂化合物和连接蛋白调节剂的分开或共同施用，其中连接蛋白调节剂是连接蛋白43调节剂，连接蛋白调节剂是上述肽或多核苷酸序列中的任何。在一些方面，连接蛋白调节剂可以是多核苷酸seqidno:1。在一些方面，rho激酶抑制剂化合物可以是氨基异喹啉基酰胺rhopressa。本文描述了在与rho激酶抑制剂的分开或共同共施用中的约1纳克(ng)/kg和约1mg/kg体重/天之间的每种连接蛋白或泛连接蛋白调节剂的另外其他剂量水平。在某些实施例中，每种主题化合物的剂量一般在约1ng至约1微克/kg体重、约1ng至约0.1微克/kg体重、约1ng至约10ng/kg体重、约10ng至约0.1微克/kg体重、约0.1微克至约1微克/kg体重、约20ng至约100ng/kg体重、约0.001mg至约0.01mg/kg体重、约0.01mg至约0.1mg/kg体重、或约0.1mg至约1mg/kg体重的范围内。在某些实施例中，每种主题化合物的剂量一般在约0.001mg至约0.01mg/kg体重、约0.01mg至约0.1mg/kg体重、约0.1mg至约1mg/kg体重的范围内。如果使用超过一种连接蛋白或泛连接蛋白调节剂，则每种抗连接蛋白试剂的剂量无需在与另一种相同的范围内。例如，一种连接蛋白或泛连接蛋白调节剂的剂量可以在约0.01mg至约10mg/kg体重之间，并且另一种连接蛋白或泛连接蛋白调节剂的剂量可在约0.1mg至约1mg/kg体重之间、0.1至约10、0.1至约20、0.1至约30、0.1至约40、或约0.1至约50mg/kg体重之间。剂量也可以是约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0、11.0、12.0、13.0、14.0、15.0、16.0、17.0、18.0、19.0、20.0、21.0、22.0、23.0、24.0、25.0、26.0、27.0、28.0、29.0、30.0、31.0、32.0、33.0、34.0、35.0、36.0、37.0、38.0、39.0、40.0、41.0、42.0、43.0、44.0、45.0、46.0、47.0、48.0、49.0、50.0、52.5、55.0、57.5、60.0、62.5、65.0、67.5、70.0、72.5、75.0、77.5、80.0、82.5、85.0、87.5、90.0、92.5、95.0、97.5或约100.0mg/kg体重，或任何两个所述剂量之间的任何范围或子范围，或落入约0.1至约100mg/kg体重的范围内的任何剂量。对于rho激酶抑制剂化合物和连接蛋白或泛连接蛋白调节剂的分开或共同施用，在一个实施例中，与当所述试剂单独施用时的有效剂量相比较，rho激酶抑制剂化合物和连接蛋白或泛连接蛋白调节剂的组合使用降低了任何这样的试剂的有效剂量。在某些实施例中，当组合使用时，试剂的有效剂量为单独使用时的试剂的约1/15至约1/2、约1/10至约1/3、约1/8至约1/6、约1/5、约1/4、约1/3或约1/2剂量。在另一个优选实施例中，与所述试剂单独施用时的频率相比较，rho激酶抑制剂化合物和连接蛋白或泛连接蛋白调节剂的组合使用降低了其中施用所述试剂的频率。因此，这些组合允许使用比先前实现所需治疗目标所需的更低和/或更少剂量的每种试剂。在一个实施例中，当作为分开或共同施用共施用时，rho激酶抑制剂化合物和连接蛋白或泛连接蛋白调节剂的剂量可是本文阐述的任何所述剂量的10、100或1000倍低。适合于本发明的表面活性剂(表面活性试剂)或增溶剂是可对于用于眼用制剂可接受的那些。表面活性剂可以是离子型或非离子型的。优选地，该表面活性剂是非离子型的。有用的表面活性剂包括但不限于聚山梨醇酯80、聚氧乙烯硬脂酸酯、泰洛沙泊、聚乙氧基化蓖麻油、泊洛沙姆、聚胺(polaxamine)、中链和长链脂肪酸和磷脂。制剂中的表面活性剂浓度为约0.01-3％，优选0.01-2％，更优选0.1-1％w/v。张度剂以实现220-360mosm/kg，优选250-340mosm/kg，最优选260-320之间的最终制剂张力的量存在。张度剂可以是离子型或非离子型的。非离子型张度剂包括包含1,2-二醇的化合物，例如甘油、甘露醇、赤藓糖醇；和糖例如右旋糖。也可使用也充当共溶剂的其他非离子型张度剂，例如聚乙二醇和丙二醇。非离子型张度剂可以0-20％，优选0-10％，更优选0-5％的量存在。非离子试剂可选自：甘油、甘露醇和右旋糖，量为2-6％。张度剂还可以是离子试剂，例如氯化钠、氯化钾、平衡盐溶液、磷酸钠或柠檬酸钠。离子型张度剂可以0.3-1.5％，优选0.6-0.9％的量存在。引入到制剂内的表面活性剂、张度剂、缓冲剂和任何其他成分优选在水中具有良好的溶解性，并且与制剂中的其他组分具有相容性。不同国家的卫生法规要求多剂量眼用制剂应包括防腐剂。在一个实施例中，苯扎氯铵用作安全防腐剂；苯扎氯铵可与螯合剂乙二胺四乙酸二钠(edta)一起使用，以增强其抗微生物活性。其他合适的防腐剂包括苯甲醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、硼酸盐、氯丁醇和苄索氯铵。通常，这种防腐剂以0.001-1％，优选0.001-0.25％，且最优选0.001-0.2％的水平采用。任选地，制剂可包括粘度增强剂以增加制剂在眼部表面上的停留时间。作为非限制性例子，羟丙基甲基纤维素可用作本发明的粘度增强剂。实例20：用连接蛋白43调节剂seqidno:1和rho激酶抑制剂的组合治疗青光眼的方法使用的连接蛋白43调节剂是多核苷酸seqidno:1。使用的rho激酶抑制剂是rhopressa。将连接蛋白43调节剂seqidno:1配制成如上所述的纳米颗粒递送制剂，浓度为在溶液中总共100μm的连接蛋白43调节剂。rho激酶抑制剂在水性制剂中的浓度为0.03-0.1％(w/v)，并且如上所述配制。用视网膜缺血再灌注使成年雄性wistar大鼠对于青光眼建模。视网膜缺血在左眼中建模(120mmhg共60分钟)，其中右眼作为对照，并且随后立即玻璃体内注射作为在1xpbs递送试剂中的溶液的连接蛋白43调节剂制剂(纯的，并且如上所述注入颗粒内)。在一小时内，然后经由施用滴眼剂(50ul)加入rho激酶抑制剂。在再灌注后，伊文思蓝染料在再灌注后4小时腹膜内注射，以使用共焦显微镜检查和光学相干断层扫描显现血管渗漏。在8小时和28天收集视网膜全标本包埋用于cxn43定量，以及在28和90天用于神经节细胞(rgc)密度定量。其他群组的大鼠仅用连接蛋白43调节剂处理，并且其他群组的大鼠仅用与组合共施用中使用的相同浓度的rho激酶抑制剂处理。结果将指示与对照相比较，对于用rho激酶抑制剂和连接蛋白43调节剂的组合处理的眼，在缺血后4小时后的血管渗漏在视网膜中显著降低。惊讶地显示连接蛋白43调节剂在rho激酶抑制剂的存在下起作用。结果还将显示与仅具有单一处理的任何眼相比较，对于用rho激酶抑制剂和连接蛋白43调节剂的组合处理的眼，血管渗漏的令人惊讶的减少。还测量所有群组模型的斑点计数。显示与任何单一处理相比较，斑点计数对于组合处理减少更多。在缺血后28天后，通过共焦显微镜检查和相干断层扫描观察组织的横截面。对于伊文思蓝染料染色的样品测量平均cxn43计数。结果显示组合制剂将导致比任何单一施用制剂更低的cxn43表达。监测模型的视网膜神经节细胞计数。结果惊讶地显示对于共施用处理超过任何单一施用处理和未经处理的眼(仅缺血)的更大的rgc存活。实例21：连接蛋白43在糖尿病人中的出血后被上调人视网膜样品得自人供体。图45和46显示了在出血附近拍摄的两个人糖尿病视网膜病变视网膜图像，对于cxn43(红色)和dapi(蓝色)进行标记，其中视杆和视锥显示在图45的底部处。在损伤后，cxn43水平由于损伤而升高至甚至大于如皮肤中的正常中的程度(因为糖尿病大鼠愈合更缓慢)。在糖尿病视网膜病变中，这导致具有高cxn43和血管渗漏的炎性区域。看起来存在rgc星形胶质细胞层的增厚、小血管的积聚以及与其和星形胶质细胞相关的高水平cxn43。糖尿病患者已减少cxn43和血管丧失，但在出血和新生血管形成的区域中则不是，因为看起来在炎症部位处存在较高的cxn43水平。发明人已惊讶地发现糖尿病视网膜病变中的cxn43调节是可行的药物靶。实例22.用颗粒制剂在体外阻断cxn43半通道对接在体外分析在纳米颗粒或微粒中配制的cxn43调节剂的阻断能力，以确定制剂调节cxn43活性的能力。如上所述制备微粒(mp)和纳米颗粒(np)制剂。来自阻断cxn43半通道的体外结果显示于图47中。暴露于cxn43mp溶液8小时后，arpe-19细胞中的cxn43标记减少(图47b)；然而，水平在24小时后恢复正常(图47c)。然而，与8小时评估相比较，用cxn43mp装载的np和mp处理的细胞在以后的时间点显示出减少的cxn43标记。在与np(图47d)和mp(图47f)温育8小时后，在cxn43标记中不存在差异，而在暴露24小时后，np(图47e)和mp(图47g)组两者均显示出减少的cxn43标记，证实延迟释放和因此cxn43mp的活性。与对照相比较，每组显示出相似的细胞密度，指示由于在所使用的浓度下的半通道阻断不发生细胞毒性。由天然氨基酸组成的微粒(mp)制剂在延长的细胞温育时可能降解，由此丧失其活性。天然cxn43mp在牛玻璃体中的半衰期为约2小时，预测cxn43mp在14小时后应完全降解，如果未受保护的话。这解释了为何cxn43半通道在与简单的cxn43mp溶液温育的最初几个小时内被阻断，而与对照(图47a)相比较，在24小时后在相同处理组中不存在cxn43标记水平的差异(图47c)。在溶液中的天然cxn43mp可能已在该时间点完全降解，并且现有的cxn43半通道已被新的cxn43半通道连续替换。相反，在24小时，对于cxn43mp装载的np和mp组两者，存在cxn43斑块表达的进行性减少(图47e和47)，尽管两组之间无明显差异。似乎两种颗粒均使cxn43mp免于降解，持续其释放并且因此延长其活性，尽管在8小时内未见到效应，这可能是由于在该时间点释放的cxn43mp不足。然而，24小时后可获得与增加的半通道阻断和减少的cxn43间隙连接斑块标记相关的较高浓度的cxn43mp。实例23.如通过在视网膜横截面中的gfap标记观察到的，用cxn43颗粒制剂处理cxn43上调如通过视网膜横截面中的gfap标记观察到的，上述微粒(mp)和纳米颗粒(np)制剂用于调节动物模型中的cxn43上调。在视网膜缺血后观察到与视网膜毛细血管相关的cxn43和gfap表达的质变(图48)。再灌注后二十八天，cxn43显著上调，并且主要与gfap共定位(图48b)。在缺血区域存在明显的星形胶质细胞增生，其中星形胶质细胞足突丧失了其正常的组构外观。cxn43mp装载的np的玻璃体内注射导致在28天时存在显著(p<0.01)降低的cxn43上调(图48d)。溶液中的天然cxn43mp和cxn43mp装载的mp在28天和90天时显示出类似的结果，其中cxn43表达连同星形胶质细胞延伸其足突并且增殖进入轴旁区域内而减少(图48c–f)。执行与星形胶质细胞增多相关的cxn43斑点计数(图48g)，并且揭示与未受损视网膜(8.9±1.3)相比较，在缺血-再灌注后28天时(80.7±7.9)，视网膜cxn43也显著高于正常水平(p<0.01)。用在溶液中的天然cxn43mp处理导致在28天时cxn43斑点计数显著降低至21.7±5.2(p<0.01)；但与对照相比较仍然显著增加(p<0.05)。然而，装载cxn43mp的np展示最大的效应，其中cxn43斑点计数在28天后降至10.4±7.5，与未受损的对照相比较无显著差异(p>0.05)，证实它们的保护性和持续释放性质。与未经处理的缺血眼(p<0.01)相比较，装载有cxn43mp的mp还能够限制在28天(15.4±3.2)和90天(19.9±1.4)后可见的cxn43表达，再次证实了在这个时间点稳定的cxn43mp的可用性。这些结果指示微粒(mp)和纳米颗粒(np)制剂可在哺乳动物的缺血诱导模型中以持续的方式调节cxn43上调。实例24.如通过视网膜全标本包埋中的rgc丧失观察到的，用cxn43颗粒制剂治疗cxn43上调如通过视网膜全标本包埋中的rgc丧失观察到的，上文所述的微粒(mp)和纳米颗粒(np)制剂用于调节cxn43上调。在未受损的视网膜平埋切片中的视网膜神经节细胞(rgc)的正常分布显示于图49a中，其中高细胞密度和清楚描绘轮廓的视网膜脉管系统是可见的。未经处理的缺血性视网膜中的rgc变性模式的例子显示于图49b中，其中在缺血-再灌注后第28天的rgd分布显著减少，伴随几乎完全丧失的血管轮廓和在许多区域中注意到的缺乏rgc的大斑块。这指示视网膜响应在增加的半通道介导的血管通透性后的缺血性损伤伴随神经变性。用在溶液中的天然cxn43mp(图49c)和np-cxn43mp(图49d)处理的眼显示出较少的rgc丧失的斑块。图49e和f示出了在用mp-cxn43mp处理的眼中，在28天和90天时的rgc分布，其中一些rgc丧失明显。rgc密度(数目/mm2)的概括在图49g中描述。在缺血-再灌注后，与未受损的对照(2283±139)相比较，在无处理的动物(1605±100)中在28天时rgc密度显著降低(p<0.01)，其中仅70％的细胞存活。np-cxn43mp组中的密度(1964±194)与溶液中的cxn43mp处理的密度相似，而mp-cxn43mp处理后的rgc计数(在28天时1670±148，并且在90天时1727±221)显示出rgc不足的趋势，但与未经处理的眼相比较未显示出显著变化。与未受损的对照相比较，在28天时缺血-再灌注损伤导致视网膜中rgc的显著丧失，其中与无处理相比较，在溶液中的cxn43mp(p<0.05)或np-cxn43mp(p<0.01)的玻璃体内注射显著降低rgc死亡，与减少的cxn43标记相关。尽管来自mp的较慢的cxn43mp释放也在缺血-再灌注后28天和90天时减少cxn43水平，但该治疗组未能援救rgc。这可归于在损伤后的即时急性期期间来自mp的初始cxn43mp释放不足。另外，由于它们与np相比较更大的尺寸，mp可能被截留在网络中，并且释放的cxn43mp因此必须扩散更大距离到视网膜，从而增加酶促降解的风险。结果因此指示rgc援救效应可能比连续缓慢释放更可归于cxn43mp的初始爆发，提示在缺血后cxn43半通道越早被阻断越好。虽然我们没有来自在90天时未接受处理的受伤动物的任何cxn43和rgc计数数据，但先前的研究已证明rgc的死亡随着时间过去显著增加，其中在56天后超过50％的丧失(s.s.l.chew等人，invest.ophthalmol.vis.sci.52(2011)3620–3629.)。因此，尽管颗粒处理在研究的时间点时的rgc存活方面与在溶液中的肽相比较未显示显著的优点，但持续的cxn43mp递送效应可能仍然有益于长期中的rgc层保存。实例26.用于制备纳米颗粒和微粒的可替代方法产生纳米颗粒和微粒的替代途径如下：将100mg聚(乳酸共乙醇酸)(plga)置于试管中，随后加入1ml二氯甲烷溶剂。接下来，将管密封并允许聚合物溶解过夜。向分开的管中，制备2ml在水中的0.3％w/wd-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯(维生素e-tpgs，sigma57668)乳化剂溶液。加入的聚合物的量决定粒度。对于疏水形式的连接蛋白43调节剂：将5μg连接蛋白43调节剂以干燥形式加入plga溶液中。使该管涡旋，直到通过目视检查溶液是均相的。对于亲水形式的连接蛋白43调节剂：将50ul水溶液(在1xpbs缓冲液中以10um浓度的连接蛋白43调节剂)加入plga溶液中。通过将管置于冰上30秒使溶液预冷，然后超声处理10秒以乳化溶液中的连接蛋白43调节剂，以获得均相的不透明溶液(vwr#97043-960)。将管放回冰上。对于两种形式的连接蛋白43调节剂，使用台式涡旋器(vwrscientific#58816-121)以高涡旋速度涡旋维生素e-tpgs管，同时逐滴加入1mlplga-调节剂溶液。涡旋持续15秒。将冰水置于超声波仪中。接下来，将乳液超声处理三次10秒爆发(对于700w超声波仪，40％振幅)。管在溶液中四处移动以便确保均匀的超声处理。每次超声处理执行5秒，以允许溶液冷却。接下来，经由玻璃移液管将1ml的0.3％维生素e-tpgs加入水中至乳液。接下来，将乳液逐滴转移到在360rpm下磁力搅拌的45ml0.3％w/v维生素e-tpgs内。将溶液搅拌3小时。接下来，将所得到的溶液转移到离心管内，并且在固定角转子离心机中以17,000xg离心15分钟。弃去上清液。接下来，加入15mldih2o并且使管涡旋以完全重悬浮颗粒。这些步骤重复四次。最后一次团块重悬浮的流体体积为4-5ml。加入重量比1:2的海藻糖:聚合物(然而，制备小等分试样的颗粒而无海藻糖用于sem成像)。然后将纳米颗粒转移到预称重的5ml离心管中，并且在-80℃下冷冻最少30分钟。然后将纳米颗粒冻干72小时共5ml体积，然后贮存在-80℃下。***本文描述和请求保护的本发明具有许多属性和实施例，包括但不限于在本详细公开内容中阐述或描述或引用的那些。它并不预期是包括所有的，并且本文描述和请求保护的本发明并不限于本详细公开内容中鉴定的特征或实施例或者并不由所述特征或实施例限制，其仅被包括用于举例说明性目的而不是限制性目的。本领域普通技术人员将容易地认识到，许多组分和参数可在一定程度上变化或修改或取代已知的等价物，而不背离本发明的范围。应当了解这样的修改和等价物在本文中被并入，如同个别阐述一样。本发明还包括个别或共同地在本说明书中提及或指示的所有步骤、特征、组合物和化合物，以及任何两个或更多个所述步骤或特征的任何和所有组合。本文提及或提到的所有专利、出版物、科学论文、网站以及其他文件和材料指示本发明所属领域技术人员的技术水平，并且每个此类提及的文件和材料在此以引用的方式并入，其程度与其已个别地整体以引用的方式并入或整体在本文中阐述相同。申请人保留将来自任何此类专利、出版物、科学论文、网站、可电子获得的信息、以及其他提及的材料或文件的任何和所有材料和信息在形体上并入本说明书内的权利。在本说明书中提及的任何申请、专利和出版物不是并且不应视为承认或以任何形式暗示它们构成有效的现有技术或形成世界上任何国家的公知常识的一部分。本文描述的具体方法和组合物是优选实施例的代表，并且是示例性的而不意欲作为对本发明范围的限制。考虑本说明书后，其他目的、方面和实施例将被本领域技术人员想到，并且包含在如由权利要求范围限定的本发明的精神内。对于本领域技术人员显而易见的是，无需背离本发明的范围和精神，可进行本文公开的本发明的不同取代和修改。本文举例说明性描述的本发明适当地可在不存在本文未具体公开为必需的任何一种或多种元件，或一种或多种限制的情况下进行实践。因此，例如，在本文的每种情况下，在本发明的实施例或例子中，术语“包含”、“基本上由……组成”和“由……组成”中的任何在说明书中都可替换为其他两个术语中的任一。另外，术语“包含”、“包括”、“含有”等应被广泛而且没有限制地理解。本文举例说明性描述的方法和过程可适当地以不同的步骤顺序进行实践，并且它们不必限制于本文或权利要求中指出的步骤顺序。同样如本文和附加权利要求中所使用的，除非上下文另有明确说明，否则单数形式“一个”、“一种”和“该/所述”包括复数指代。该专利决不能被解释为限制于本文具体公开的具体实例或实施例或方法。该专利决不能被解释为受由专利商标局的任何审查者或任何其他官员或雇员进行的任何陈述限制，除非此类陈述由申请人以回答的书面形式特别地而没有限定或保留地明确采用。此外，提供标题、标目等等以增强读者对本文件的理解，并且不应被解读为限制本发明的范围。本文涉及的本发明的方面、实施例或组分的任何例子均视为非限制性的。已采用的术语和表达作为描述性而非限制性的术语使用，并且在此类术语和表达的使用中不预期排除所示和所述特征的任何等价物或其部分，但应认识到在如请求保护的本发明范围内的不同修改是可能的。因此，应理解尽管本发明已通过优选实施例和任选特征具体公开，但本领域技术人员可采用公开的本文概念的修改和变化，并且此类修改和变化被视为在如由附加权利要求限定的本发明的范围内。本发明已在本文中得到广泛和一般地描述。属于一般公开内容的更窄的种类和亚一般分类中的每一种也形成本发明的部分。这包括本发明的一般描述，条件或负面限制是从种类中去除任何主题，不管删除的材料是否在本文中具体引用。其他实施例在下述权利要求内。另外，当本发明的特征或方面按照马库什组进行描述时，本领域技术人员将认识到本发明由此也按照马库什组的任何个别成员或成员亚组进行描述。当前第1页12