本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种基因组dna提取方法。
技术背景
dna提取是基因克隆研究的第一步，现有的方法主要是ctab方法，其他的方法还有物理方式如玻璃珠法、超声波法、研磨法、冻融法。化学方式如异硫氰酸胍法、碱裂解法。生物方式：酶法。根据核酸分离纯化方式的不同有；硅质材料、阴离子交换树脂等。这些方法种类繁多，提取质量各有千秋，还不能完全满足使用需求。
技术实现要素：
发名目的：针对现有技术中存在的不足，本发明的目的是提供一种基因组dna提取方法，具有高效，快速质量高等优点。
技术方案：为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
一种基因组dna提取方法，包括以下步骤：
1）取新鲜材料剪碎，加液氮速冻，快速研磨，获得低温粉料；
2）将低温粉料转移到1.5ml离心管中，加20%sds20ml，蛋白酶k（2mg/ml）20ml，混匀；
3）55℃水浴2-3h；
4）加等体积饱和酚至上述样品处理液中，温和、充分混匀4min；
5）离心5500g12min，取上层水相到另一1.5ml离心管中；
6）加等体积饱和酚，混匀，离心5300g12min，取上层水相到另一管中；
7）加等体积酚/氯仿，轻轻混匀，离心5500g12min，取上层水相到另一管中；如水相仍不澄清，可重复此步骤数次；
8）加等体积氯仿，轻轻混匀，离心5500g12min，取上层水相到另一管中；
9）加1/10体积的3m醋酸钠（ph5.2）和2.5倍体积的无水乙醇，轻轻倒置混匀；
10）待絮状物出现后，离心5500g6min，弃上清液；
11）沉淀用75%乙醇洗涤，离心5500g2min，弃上清液；
12）室温下挥发乙醇，待沉淀将近透明后加50-100mlte溶解过夜；
13）取1uldna溶解液检测dna质量；
14）dna质量符合要求后，将dna溶解分装到1.5ml离心管冷冻保藏。；
所述的te：10mmtris-hcl，1mmedta。
所述的tbs：25mmtris-hcl，200mmnacl，5mmkcl。
所述裂解缓冲液：250mmsds，使用前加入蛋白酶k至100mg/ml。
有益效果：与现有技术相比，本发明热的dna提取方法，在edta以及sds等试剂存在下用蛋白酶k消化细胞，随后用酚抽提，可以从新鲜组织、培养细胞或低温保存的组织细胞中快速高效的获得dna，dna质量高，经酶切后不仅可用于southern分析，还可用于pcr的模板、文库构建等后续研究，具有很好的实用性。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步说明。
以下实施例所使用的主要试剂如下：
te：10mmtris-hcl（ph7.8），1mmedta（ph8.0）。
tbs：25mmtris-hcl（ph7.4），200mmnacl，5mmkcl。
裂解缓冲液：250mmsds，使用前加入蛋白酶k至100mg/ml。
20%sds、2mg/ml蛋白酶k、tris饱和酚（ph8.0）、酚/氯仿（酚∶氯仿=1∶1）、氯仿、无水乙醇、75%乙醇。
实施例1
一种基因组dna提取方法，包括以下步骤：
1）取新鲜材料剪碎，加液氮速冻，快速研磨，获得低温粉料。
2）将低温粉料转移到1.5ml离心管中，加20%sds20ml，蛋白酶k（2mg/ml）20ml，混匀。
3）55℃水浴2-3h。
4）加等体积饱和酚至上述样品处理液中，温和、充分混匀4min；
5）离心5500g12min，取上层水相到另一1.5ml离心管中。
6）加等体积饱和酚，混匀，离心5300g12min，取上层水相到另一管中。
7）加等体积酚/氯仿，轻轻混匀，离心5500g12min，取上层水相到另一管中。如水相仍不澄清，可重复此步骤数次。
8）加等体积氯仿，轻轻混匀，离心5500g12min，取上层水相到另一管中。
9）加1/10体积的3m醋酸钠（ph5.2）和2.5倍体积的无水乙醇，轻轻倒置混匀。
10）待絮状物出现后，离心5500g6min，弃上清液。
11）沉淀用75%乙醇洗涤，离心5500g2min，弃上清液。
12）室温下挥发乙醇，待沉淀将近透明后加50-100mlte溶解过夜。
13）取1uldna溶解液检测dna质量；
14）dna质量符合要求后，将dna溶解分装到1.5ml离心管冷冻保藏。
本发明热的dna提取方法，在edta以及sds等试剂存在下用蛋白酶k消化细胞，随后用酚抽提，可以从新鲜组织、培养细胞或低温保存的组织细胞中快速高效的获得dna，dna质量高，经酶切后不仅可用于southern分析，还可用于pcr的模板、文库构建等后续研究，具有很好的实用性。