技术领域本发明属于医药生物领域，本发明更具体涉及了一种具有抑制癌细胞生长活性的肽及其应用。
背景技术：
在癌症发生与治疗的过程中，化学治疗一直属于主体部分。现有的临床使用的化疗药物，如环磷酰胺、顺铂、阿糖胞苷、阿霉素和长春新碱等，它们主要是用来破坏细胞的周期的，RNA、DNA和蛋白质都是此类药物的靶向目标。近年来，As2O3在对于白血病的治疗上取得了很大的进展，但是，该药物和其他化疗药物，其本身都有自己的毒性，不管是一种化疗药物单独使用还是几种化疗药物结合运用在临床治疗上，其在对癌症有明显疗效，杀伤杀死癌细胞的同时，也会损害病人的正常细胞。化疗药物的副作用最普遍的就是对病人的骨髓产生极度抑制，造成病人的极大痛苦，甚至引起死亡。目前对于癌症的治疗主要有以下几种：手术治疗，对于良性肿瘤疗效较好，但是对于没有包膜包裹的癌症组织和扩散性肿瘤难以完全根除；放射性治疗，是利用某些肿瘤对射线敏感的特点选择性地杀死癌细胞，但是对于不敏感型以及易扩散型癌细胞疗效较差，而且在治疗过程中也会造成正常细胞的死亡；化学治疗，是将对细胞有毒、有害的药物经由循环系统带到全身，虽然对于扩散型癌细胞也有一定疗效，但是这种治疗方法对于全身的正常细胞也会造成极大伤害，使癌症病人在治疗癌症过程中承受巨大的生理和心理的折磨。因此开发出一种疗效好、应用范围广、副作用小的抗癌药物是癌症患者和医学工作者的共同心愿。尽管近几十年来化疗药物在治疗癌症方面取得了很大的进展，但当前化疗药物存在的问题仍然很多，如存在的毒性、特异性较低以及易产生耐药性，探讨新型疗法成为当前的研究热点。生物活性肽通常含有2～20个氨基酸残基，其活性随着组成它们的氨基酸不同以及氨基酸排列顺序不同而发生改变。肽具有多种生理功能，如抗氧化、抗增殖、抗微管蛋白和细胞毒性，肽的这些活性使得它们具有抗癌潜能，这将在癌症治疗中有所贡献。由于肽具有很强的穿透肿瘤组织的能力，因此不仅可以到达原发性肿瘤的靶点，还可以到达继发性肿瘤的靶点，这些分子主要通过破坏细胞膜的完整性从而迅速杀死靶细胞，所以一般不产生耐药性。
技术实现要素：
本发明目的是针对上述问题，提供一种具有抑制癌细胞生长活性的肽及其应用。本发明的目的在于提供了一种抑制癌细胞生长的肽，其包含氨基酸序列的肽NYKSRIANSDTNTSYNHI；作为一种优选方案，本发明提供的肽的序列为NYKSRIANSDTNTSYNHI。本发明还提供了编码该短肽的核苷酸序列。作为一种优选方案，编码上述肽的核苷酸序列包含aactataaaagccgcattgcgaacagcgataccaacaccagctataaccatatt。作为一种优选方案，编码上述肽的核苷酸序列为aactataaaagccgcattgcgaacagcgataccaacaccagctataaccatatt。本发明的肽可用于制备具有治疗实体肿瘤的药物。采用化学合成的方法合成本发明的肽，即本领域熟知的已经非常成熟的固相肽合成方法，可采用Boc方法也可以采用Fmoc方法。具体做法就是将被保护的氨基酸逐个偶联到惰性固相载体上去，然后利用强酸将肽链从载体上裂解下来，同时去除侧链保护。本发明的肽具有抑制癌细胞生长活性的作用，尤其对肺癌细胞或子宫颈癌细胞的生长具有抑制活性。具体实施方式实施例1本发明肽的合成：本发明采用采用化学合成的方法制备所述的肽，即本领域熟知的已经非常成熟的固相肽合成方法，既可以采用Boc方法也可以采用Fmoc方法。具体做法就是将被保护的氨基酸逐个偶联到惰性固相载体上去，然后利用强酸将肽链从载体上裂解下来，同时去除侧链保护。具体而言，使用Perkin-Elmer公司的ABI433A型多肽合成仪、选用Fmoc/HOBt/DCC0.10mmol模式，采用多肽固相合成法进行活性肽单体和酰胺化肽链的合成，合成中所用氨基酸用Fmoc保护，合成用树脂为HMP树脂。合成结束后用含0.6g结晶酚，0.4ml二巯基乙醇，0.5ml硫代苯甲醚，0.5ml去离子水，12mlTFA三氟乙酸的切割试剂将肽从树脂上切割下来。用反相高效液相色谱，在C18柱上进行肽的纯化。制备得到氨基酸序列为NYKSRIANSDTNTSYNHI的肽。实施例2抑制癌细胞的试验：本实施例的目的在于试验所述肽在一系列肿瘤细胞中的作用，实验将以生理盐水作为阴性对照。选用细胞系为A549(ATCC，U.S.A，目录号：CCL-185)，Hela，人成骨细胞瘤细胞系U-2OS(P53+，RB-；ATCC，U.S.A，目录号：HTB-96)，在24孔板培养皿中种入1×105肿细胞，培养液为10％FBSDMEM，第二天吸去液体，按照0.005mg/ml的量加入实施例1制备的肽或生理盐水，轻轻晃动液体3次，在37℃、5％CO2中孵育180分钟。加入含1％FBSDMEM培养基至1ml，将细胞放置于37℃、5％CO2中孵育3-10天，观察细胞状态。实验结果如下表1所示：表1肽抑制肿瘤细胞生长的实验结果组别3天抑制率(％)5天抑制率(％)10天抑制率(％)A549组334961Hela组375568U-2OS5912由上表可以看出本发明的肽对A549和Hela细胞更敏感。实施例3抑制小鼠体内肿瘤的实验：取对数生长期的HepG2细胞细胞株，在无菌条件下制备成1×107/ml细胞悬液，以0.1ml接种于裸鼠右侧腋窝皮下。用游标卡尺测量裸鼠移植瘤直径，待肿瘤生长至100-200mm3后将动物随机分组。使用测量瘤径的方法，动态观察被试多肽的抗肿瘤效果。肿瘤直径的测量次数为每1天测1次。给药方式均采用尾静脉注射。阴性对照组注射等量生理盐水，每天1次；恩度组3.0mg/kg，每天给药1次；实施例1中肽的高中低剂量组分别以10mg/kg、5mg/kg、1mg/kg为给药剂量，每天给药1次。试验结束后，小鼠处死，手术剥取瘤块称重。其结果见下表2所示：表2肽抑制小鼠体内肿瘤的实验结果(每组裸鼠数量n＝5)