核苷氨基磷酸酯类前药的多晶型及其制备方法与流程

本发明涉及医药
技术领域：
。更具体的，本发明涉及一种核苷氨基磷酸酯类前药的多晶型及其制备方法。本发明还涉及包含核苷氨基磷酸酯类前药的多晶型和至少一种药学可接受载体的药物组合物及其所述药物组合物的用途。
背景技术：
：nuc-1031是吉西他滨前药，由nucanabiomed公司开发，目前处于临床iii期，用于治疗晚期实体瘤，胰腺癌，乳腺癌等癌症。nuc-1031的cas为840506-29-8，具有如下式所示的结构：，化合物i是nuc-1031手性p为s差向异构体，其cas为1562406-27-2，具有如下结构：。wo2014076490a1公开了以下制备nuc-1031的方法，，将3’-boc保护的吉西他滨（100mg）与2mol当量的苯基（苄基-l丙氨酸）氯代磷酸酯（150mg）反应，并以0.5mol当量的三（乙酰丙酮）铁（iii）（56mg）作为催化剂，1.5mol当量的dipea(55μl)作为碱，10mlthf作为反应溶剂，氮气保护下，室温反应24小时，收率45%，其中异构体rp:sp=3:1。题目为applicationofprotidetechnologytogemcitabine:asuccessfulapproachtoovercomethekeycancerresistancemechanismsleadstoanewagent(nuc-1031)inclinicaldevelopment（journalofmedicinalchemistry，volume57，issue4，pages1531-1542）的文献报道了下式化合物5f以二氯甲烷为溶剂，在tfa存在下脱去羟基保护，最后通过硅胶柱纯化制备nuc-1031的方法，收率70%，其中异构体的含量分别为48%，52%。目前关于化合物i的晶型研究比较少，仅wo2016055769公开了nuc1031手性p的两种非对映异构体的分离方法以及s-差向异构体的一种晶型。本发明人通过大量研究工作发现，化合物i与nuc-1031相比，对bxpc-3、miapaca-2和ovcar-3肿瘤细胞均表现出相对较强的细胞毒性作用，ic50值约在0.01nm~0.05nm之间；其在体外对肿瘤细胞增殖活性抑制作用约为nuc-1031手性p为r构型的化合物的10倍；药代动力学评价结果显示，化合物i在瘤组织活性代谢产物dfdctp浓度显著高于nuc-1031手性p为r构型的化合物。因而在制备有效治疗剂量的剂型存在很大困难，并且工业扩大生产成本非常高。并且，研究发现nuc-1031极具亲脂性，因而难溶于水（溶解性计算值＜0.1mg/ml），并且其离子部分估算出来的pkas的ph范围不适合胃肠道外给药，而研究发现s-差向异构体（化合物i）在多种极性有机溶剂和水的混合溶液中溶解性好，适合制备制剂。研究开发出具有稳定晶型的化合物i，以满足制剂需求和临床需求，具有非常重要的意义。技术实现要素：为解决上述问题，本发明提供了一种式i所示化合物的晶型b。本发明第二方面提供了晶型b在制备治疗和/或预防癌症的药物中的用途。本发明第三方面提供了药物组合物，其包本发明所述的晶型b以及至少一种可药用的赋形剂。本发明第四方面提供了一种式i所示化合物的晶型b的制备方法。首先，本发明提供了一种结构如式i所示化合物的晶型b，其特征在于，所述晶型b的x-射线粉末衍射（xrpd）图上至少在下述2θ角有峰：6.9±0.2、12.2±0.2、18.8±0.2、20.4±0.2和21.2±0.2，。优选，所述晶型b的x-射线粉末衍射（xrpd）图上至少在下述2θ角有峰：5.3±0.2、6.9±0.2、12.2±0.2、13.0±0.2、13.8±0.2、18.8±0.2、20.4±0.2和21.2±0.2。更进一步的优选，所述晶型b，其具有的x-射线粉末衍射（xrpd）图基本如图1、图2或图3所示。本发明另一方面还提供了具有晶型b的化合物i在制备治疗和/或预防癌症的药物中的用途。所述的癌症包括但不限于胰腺癌、晚期实体瘤、卵巢肿瘤、非小细胞肺癌、乳腺癌、膀胱癌、宫颈癌、间皮瘤、食管癌、胃癌、大肠癌、肝癌、胆管癌、鼻咽癌、睾丸癌、淋巴瘤或头颈部癌。本发明另一方面还提供了一种药物组合物，其包含本发明所述的晶型b以及可药用的载体。所述的药物组合物可以通过口服或胃肠道外给药，包括静脉给药、皮下给药、腹膜内给药、肌肉注射、吸入给药、直肠给药及局部给药（如口腔或舌下给药）。其中，用于口服给药的药物组合物包括片剂、胶囊、颗粒剂或混悬剂；用于口服的片剂包括本发明提供的组合物作为活性成分，还可包含一种或多种可药用的赋形剂，例如稀释剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂，甜味剂、矫味剂、色素及防腐剂。当玉米淀粉和海藻酸作为崩解剂时，合适的惰性稀释剂包括碳酸钠、碳酸钙、磷酸钠、磷酸钙和乳糖。粘合剂包括淀粉和明胶，任选的，润滑剂为硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。任选的，所述片剂还可以使用单硬脂酸甘油酯或甘油二硬脂酸酯进行包衣，以延缓在胃中的吸收。用于口服给药的胶囊剂包括硬胶囊和软胶囊，其中硬胶囊包含本发明提供的组合物作为有效活性成分和一种固体稀释剂；软胶囊包含本发明提供的药物组合物作为有效活性成分，与水或油（如花生油、液体石蜡或橄榄油）。用于直肠给药的剂型栓剂，其中栓剂的基质可以是可可粉油或水杨酸盐。用于阴道给药的制剂形式为子宫托、棉球、霜、凝胶、糊剂、泡沫剂、或喷雾剂，所述制剂包括含活性成分的组合物和本领域已知的常规的载体。用于静脉注射、腹膜内给药、皮下给药和肌注给药的剂型时，本发明提供的组合物通常为无菌溶液或无菌悬浮液，并具有合适的ph值和渗透压。该类制剂的制备，可按照本领域公知的常规方法制备获得。本发明第四方面提供了一种式i所示化合物的晶型b的制备方法，所述的方法包括步骤：将式i所示化合物采用有机溶剂进行结晶，所述有机溶剂选自乙酸乙酯、乙酸异丙酯、乙酸丙酯、乙酸异丁酯，及其混合溶液。优选，所述有机溶剂选自乙酸乙酯。上述方法中，进一步优选，将式i所示化合物加入到乙酸乙酯中，打浆2~5小时，过滤，收集滤饼，任选的，将该步骤重复一至多次。以上方法中，进一步优选，式i所示化合物与乙酸乙酯的用量比为1:2~10，优选1:5~10。本发明提供的晶型b的化合物i，基本上纯净的晶体形式。优选的该晶体形式的特点在于不含有或基本上不含有水。本发明提供了一种化合物i的全新的晶型，即晶型b，本发明所提供的的晶型b稳定性好，适合用于制备各种制剂，并且提供的晶型b的制备方法简单，采用的溶剂均为常规溶剂，不需要特殊设备，工业化生产成本小。附图说明图1显示了实施例1制备的式i化合物晶型b的xrpd（x-射线粉末衍射）图谱；其中衍射峰数据如下：pos.[°2th.]d-spacing[å]rel.int.[%]pos.[°2th.]d-spacing[å]rel.int.[%]5.33055716.578914.7018.814784.7165640.076.95326512.71304100.0020.359674.3620242.849.1789079.6348512.6121.212654.1885147.2710.429278.4823834.6721.760674.0842522.4512.247497.2268941.8422.927033.8790510.5512.983176.8189937.6423.652373.761719.7113.805266.4147234.1924.518873.630714.6115.807565.6064132.8125.676053.4696310.2516.422745.397769.8627.353883.260513.8516.918455.2407112.2834.88182.572171.9717.400555.0965811.48　　　图2显示了实施例2制备的式i化合物晶型b的xrpd（x-射线粉末衍射）图谱；其中衍射峰数据如下：pos.[°2th.]d-spacing[å]rel.int.[%]pos.[°2th.]d-spacing[å]rel.int.[%]5.26135716.7967916.4418.821694.7148551.796.9101912.79219100.0020.34444.3652652.719.2519519.5589513.9321.258984.1794961.4810.391788.5128936.3221.737774.088530.8912.210137.2489244.3022.928213.8788516.6712.993546.8135842.0224.537623.6279622.3013.843726.3969936.9125.70563.4657114.7615.811595.6049936.3727.348193.261175.6316.877175.2534316.65　　　图3显示了实施例3制备的式i化合物晶型b的xrpd（x-射线粉末衍射）图谱；其中衍射峰数据如下：pos.[°2th.]d-spacing[å]rel.int.[%]pos.[°2th.]d-spacing[å]rel.int.[%]5.27786516.7442917.8018.831474.7124252.816.93326812.74966100.0020.378954.3579454.759.233159.5783712.0221.178494.1951972.6110.403868.5030334.7221.786294.0795130.5612.234817.2343643.0922.964663.8727816.8512.95346.834639.0924.511933.6317121.0613.774346.4290539.0825.636113.4749513.8815.826115.5998834.7327.389143.256395.0216.913535.2422216.57　　　具体实施例以下结合实施例对本发明的内容做进一步的阐释和说明，应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则所有的百分数、比率、比例、或份数按重量计。本发明所用到的化合物61501a可以按照申请号为201510586447.6的专利公开的方法制备获得，或者，按照“journalofmedicinalchemistry(2014),57,(4),1531-1542”公开的方法制备获得。本发明中xrpd测试使用panalytical(帕纳科)公司的xpert-3型x射线衍射仪。将约10毫克样品均匀平铺在单晶硅样品盘上，用以下描述的参数进行xrpd测试。。实施例1化合物i的晶型b的制备方法向30l釜中加入2.36kg化合物61501a，加入3.10kg二氯甲烷（dcm）；控制温度-5（±5℃），搅拌下加入7.20kgtfa，保温反应24小时；tlc监控反应进程；待反应完全后，加入4kgdcm，加入10kgh2o，搅拌20分钟，静置分层，收集dcm相，水相弃去；将dcm相转移入30l釜中，加入10kgh2o，搅拌20分钟，静置分层，收集二氯甲烷相，水相弃去；重复上述操作4次；收率约90%。将收集的dcm相，转移入30l釜加入，加入饱和碳酸氢钠溶液5l，搅拌20分钟，静置分层，水层弃去；重复上述操作一次；收集dcm相，转移入30l釜中，加入5l饱和碳酸氢钠溶液，搅拌约2小时，然后过滤，滤饼转移入30l釜中，加入10kgh2o，打浆2小时；过滤，重复上述操作2次；将滤饼转移入30l釜中，加入9kg乙酸乙酯，打浆3小时，过滤；重复上述操作1次；收集滤饼，将滤饼转移入真空干燥箱，控制水浴温度25（±5℃），每4小时翻料一次，干燥24小时。其xrpd图如附图1所示。实施例2化合物i的晶型b的制备方法向30l釜中加入2.36kg化合物61501a，加入3.10kg二氯甲烷（dcm）；控制温度-5（±5℃），搅拌下加入7.20kgtfa，保温反应24小时；tlc监控反应进程；待反应完全后，加入4kgdcm，加入10kgh2o，搅拌20分钟，静置分层，收集dcm相，水相弃去；将dcm相转移入30l釜中，加入10kgh2o，搅拌20分钟，静置分层，收集二氯甲烷相，水相弃去；重复上述操作2次；收率约95%。将收集的dcm相，转移入30l釜加入，加入饱和碳酸氢钠溶液5l，搅拌20分钟，静置分层，水层弃去；收集dcm相，转移入30l釜中，加入5l饱和碳酸氢钠溶液，搅拌约2小时，然后过滤，滤饼转移入30l釜中，加入10kgh2o，打浆2小时；过滤，将滤饼转移入30l釜中，加入4.7kg乙酸乙酯，打浆3小时，过滤；收集滤饼，将滤饼转移入真空干燥箱，控制水浴温度25（±5℃），每4小时翻料一次，干燥24小时。其xrpd图如附图2所示。实施例3化合物i的晶型b的制备方法向30l釜中加入2.36kg化合物61501a，加入3.10kg二氯甲烷（dcm）；控制温度-5（±5℃），搅拌下加入7.20kgtfa，保温反应24小时；tlc监控反应进程；待反应完全后，加入4kgdcm，加入10kgh2o，搅拌20分钟，静置分层，收集dcm相，水相弃去；将dcm相转移入30l釜中，加入10kgh2o，搅拌20分钟，静置分层，收集二氯甲烷相，水相弃去；重复上述操作4次；收率约92%。将收集的dcm相，转移入30l釜加入，加入饱和碳酸氢钠溶液5l，搅拌20分钟，静置分层，水层弃去；重复上述操作一次；收集dcm相，转移入30l釜中，加入5l饱和碳酸氢钠溶液，搅拌约2小时，然后过滤，滤饼转移入30l釜中，加入10kgh2o，打浆2小时；过滤，重复上述操作2次；将滤饼转移入30l釜中，加入18kg乙酸乙酯，打浆5小时，过滤；重复上述操作1次，收集滤饼，将滤饼转移入真空干燥箱，控制水浴温度25（±5℃），每4小时翻料一次，干燥24小时。其xrpd图如附图3所示。实施例4化合物i的晶型b的制备方法向30l釜中加入2.36kg化合物61501a，加入3.10kg二氯甲烷（dcm）；控制温度-5（±5℃），搅拌下加入7.20kgtfa，保温反应24小时；tlc监控反应进程；待反应完全后，加入4kgdcm，加入10kgh2o，搅拌20分钟，静置分层，收集dcm相，水相弃去；将dcm相转移入30l釜中，加入10kgh2o，搅拌20分钟，静置分层，收集二氯甲烷相，水相弃去；重复上述操作4次；收率约90%。将收集的dcm相，转移入30l釜加入，加入饱和碳酸氢钠溶液5l，搅拌20分钟，静置分层，水层弃去；重复上述操作一次；收集dcm相，转移入30l釜中，加入5l饱和碳酸氢钠溶液，搅拌约2小时，然后过滤，滤饼转移入30l釜中，加入10kgh2o，打浆2小时；过滤，重复上述操作2次；将滤饼转移入30l釜中，加入13kg乙酸丙酯，打浆2小时，过滤；重复上述操作1次，收集滤饼，将滤饼转移入真空干燥箱，控制水浴温度25（±5℃），每4小时翻料一次，干燥24小时。其xrpd图如附图1所示。当前第1页12