专利名称：核苷氨基磷酸酯的制作方法
技术领域：
本文公开核苷氨基磷酸酯和其用作治疗病毒疾病的剂的用途。这些化合物是RNA依赖性RNA病毒复制的抑制剂，并可用作HCVNS5B聚合酶的抑制剂、用作HCV复制的抑制剂和用于治疗哺乳动物中的丙型肝炎感染。背景
丙型肝炎病毒(HCV)感染是导致慢性肝病(如肝硬化和肝细胞癌)的主要健康问题，有大量的受感染个体，估计占世界人口的2-15%。根据美国疾病控制中心，单美国估计就有450万受感染人口。根据世界卫生组织，全世界有超过2亿受感染人口，并且每年有至少300-400万人被感染。一旦被感染，约20%的人可清除病毒，但其余的人在其余生中将携带HCV。10-20%的慢性受感染个体最终发展为肝破坏性肝硬化或癌症。通过污染的血液和血液制品、污染的针或性行为以及从受感染的母亲或携带者母亲垂直地到其后代，胃肠外地传播该病毒性疾病。HCV感染的现有治疗局限于单用重组干扰素α或联合使用核苷类似物利巴韦林的免疫治疗，取得有限的临床益处。此外，尚未建立用于HCV的疫苗。因此，急切需要一种可有效对抗慢性HCV感染的改善的治疗剂。HCV病毒体是有包膜的正链RNA病毒，其具有约9600个碱基的单寡核糖核苷酸基因组序列，所述单寡核糖核苷酸基因组序列编码约3，010个氨基酸的多蛋白。HCV基因的蛋白产物由结构蛋白C、El和Ε2,以及非结构蛋白NS2、NS3、NS4A和NS4B、和NS5A和NS5B组成。认为非结构(NS)蛋白提供病毒复制的催化机制。NS3蛋白酶释放NS5B (即来自多蛋白链的RNA依赖性的RNA聚合酶)。HCV NS5B聚合酶是从单链病毒RNA合成双链RNA所必需的，所述单链病毒RNA在HCV的复制循环中作为模板。因此，认为NS5B聚合酶是HCV 复制复合体中的必要组分(K. Ishi 等人，Heptology, 1999，29:1227-1235;V Lohmann等，Virology, 1998，249:108-118)。HCV NS5B聚合酶的抑制会阻止双链HCV RNA的形成，因而构成发展HCV-特异性的抗病毒疗法的具有吸引力的方法。HCV属于具有许多共性的很大的病毒家族。黄病毒科(Flaviviridae)病毒病毒的黄病毒科家族包括至少三个不同的属痕病毒属(pestiviruses),它可导致牛和猪的疾病；黄病毒属(flavivruses)，它是导致诸如登革热和黄热病等疾病的主要原因；和丙型肝炎病毒属(Hepaciviruses)，其唯一成员是HCV。基于血清学相关性的分组，黄病毒属包括超过68个成员(Calisher等人，J. Gen. Virol, 1993,70,37-43)。临床症状各不相同，包括发热、脑炎和出血热(Fields Virology,编辑Fields, B. N.，Knipe, D.Μ.,和 Howley, P. Μ·，Lippincott-Raven Publishers,Philadelphia, PA, 1996,第 31章，931-959)。全球关心的与人类疾病相关的黄病毒属包括登革出血热病毒(DengueHemorrhagic Fever viruses) (DHF)、黄热病病毒、休克综合征(shock syndrome)和日本脑炎病毒(Halstead, S. B. , Rev. Infect. Dis. , 1984, 6, 251-264;Halstead, S. B. , Science, 239:476-481, 1988;Monath, T. P. , New Eng. J. Med, 1988,319,641-643)。痕病毒属包括牛病毒性腹 写病毒(BVDV)、典型性猪痕病毒(classicalswine fever virus) (CSFV,也称为猪霍乱病毒)和绵羊边界病病毒(border diseasevirus) (BDV) (Moennig, V 等 Α Adv. Vir. Res. 1992, 41, 53-98) 家畜(牛、猪和绵羊)的瘟病毒感染造成世界范围内巨大的经济损失。BVDV导致牛的粘膜病，且对于家畜产业具有显著的经济重要性(Meyers, G.和Thiel, H. J. , Advances in VirusResearch, 1996，47, 53-118; Moennig V 等人，Adv. Vir. Res. 1992，41，53-98)。尚未像动物瘟病毒那样充分表征人的瘟病毒。然而，血清学研究显示，人类中有相当多的瘟病毒暴露。瘟病毒属和丙型肝炎病毒属是黄病毒科家族内密切相关的病毒属。该家族内其它密切相关的病毒包括GB病毒A、GB病毒A-样病原体、GB病毒-B和GB病毒-C (也称为G型肝炎病毒，HGV)。丙型肝炎病毒属(丙型肝炎病毒；HCV)由许多感染人体的密切相关但基因型不同的病毒组成。至少有6种HCV基因型和超过50种亚型。由于瘟病毒和丙型肝炎病毒之间的相似性，加上丙型肝炎病毒在细胞培养中很难有效生长，所以，在HCV病毒研究中经常使用牛病毒性腹泻病毒(BVDV)作为代用品。瘟病毒和丙型肝炎病毒的遗传组构非常相似。这些正链RNA病毒具有单个大的开放阅读框(ORF)，其编码病毒复制所需的所有病毒蛋白。这些蛋白表达为多蛋白，所述多蛋白被细胞和病毒编码的蛋白酶在翻译同时加工和在翻译后加工，产生成熟的病毒蛋白。负责病毒基因组RNA复制的病毒蛋白位于接近羧基末端之内。2/3的ORF被称为非结构(NS)蛋白。瘟病毒和丙型肝炎病毒的ORF的非结构蛋白部分的基因组构和多蛋白加工非常相似。对于瘟病毒和丙型肝炎病毒二者，按照从非结构蛋白编码区的氨基末端到ORF的羧基末端的先后次序，成熟的非结构(NS)蛋白由？7、吧2、吧3、吧44、吧48、吧5么和吧58组成。瘟病毒和丙型肝炎病毒的NS蛋白共有这样的序列结构域，所述序列结构域是特定蛋白功能的特征。例如，两组内病毒的NS3蛋白都具有丝氨酸蛋白酶和解旋酶特有的氨基酸序列基序(Gorbalenya 等人,Nature, 1988, 333, 22; Bazan 和 Fletterick Virology, I989，171，637-639; Gorbalenya 等，Nucleic Acid Res.，1989，17，3889-3897)。类似地，瘟病毒和丙型肝炎病毒的NS5B蛋白都具有RNA-指导的RNA聚合酶特有的基序(Koonin，E. V和 Dolja, V. V.，Crir. Rev. Biochem. Molec. Biol. 1993，28，375-430)。瘟病毒和丙型肝炎病毒的NS蛋白在病毒生命周期中的实际作用和功能是直接类似的。在两种情况下，NS3丝氨酸蛋白酶负责ORF中在其位置下游的多蛋白前体的所有蛋白水解加工(Wiskerchen 和 Collett, Virology, 1991, 184, 341-350;Bartenschlager 等人，J Virol. 1993, 67, 3835-3844;Eckart 等人，Biochem. Biophys.Res. Comm. 1993，192，399-406;Grakoui 等人，J. Virol. 1993，67，2832-2843;Grakoui等人，Proc.Natl. Acad Sci.USA 1993，90，10583-10587;Hijikata 等人，J.Virol. 1993，67，4665-4675;Tome 等人，J. Virol, 1993，67，4017-4026)。在两种情况下，NS4A蛋白起NS3丝氨酸蛋白酶的辅因子的作用(Bartenschlager等人，JVirol. 1994，68，5045-5055;Failla 等人，J. Virol. 1994，68，3753-3760;Xu 等人，J.Virol.，1997，71:53 12-5322)。两种病毒的NS3蛋白还都起解旋酶的作用(Kim等人，Biochem。Biophys. Res. Comm.，1995，215，160-166;Jin 和 Peterson, Arch. Biochem.Biophys.，1995，323，47-53;Warrener 和 Collett, J. Virol. 1995，69，1720-1726)。最后，瘟病毒和丙型肝炎病毒的NS5B蛋白都具有预测的RNA-指导的RNA聚合酶活性(Behrens等人，EMB0, 1996，15，12-22;Lechmann 等人，J. Virol.，1997，71，8416-8428;Yuan 等A, Biochem. Biophys. Res. Comm. 1997, 232, 231-235;Hagedorn, PCT WO 97/12033;Zhong等人，J. Virol.，1998，72，9365-9369)。目前，受到丙型肝炎病毒感染的个体具有有限的治疗选 择。目前批准的治疗选择是，单独使用重组干扰素-α或联合使用干扰素-α与核苷类似物利巴韦林的免疫疗法。该疗法的临床有效性有限，且仅50%的受治疗的患者对治疗有响应。因此，非常需要更有效的和新颖的疗法来解决未得到满足的由HCV感染引起的医学需要。现己鉴定了可用于药物开发作为抗-HCV治疗剂的直接作用性抗病毒药的许多潜在分子革巴标，这些革巴标包括(但不限于)NS2-NS3自体蛋白酶(autoprotease)、N3蛋白酶、N3解旋酶和NS5B聚合酶。RNA-依赖性的RNA聚合酶是单链正义RNA基因组复制所绝对必需的，并且该酶已经引起了医药化学家的极大兴趣。HCV NS5B的抑制剂作为HCV感染的潜在治疗剂已经综述在Tan，S. -L.等人，Nature Rev. Drug Discov. , 2002, I, 867-881 ;ffalker, M. P.等人，Exp.Opin.Investigational Drugs,2003, 12, 1269-1280;Ni, Z-J.等人，Current Opinion inDrug Discovery and Development, 2004, 7, 446-459;Beaulieu, P.L.等人,CurrentOpinion in Investigational Drugs, 2004, 5, 838-850;ffu, J.等人，Current DrugTargets-Infectious Disorders,2003，3，207-219;Griffith, R. C.等人，AnnualReports in Medicinal Chemistry, 2004, 39,223-237;Carrol,S.等人，InfectiousDisorders-Drug Targets, 2006, 6，17-29。出现抗性HCV毒株的可能性和鉴别具有广基因型覆盖度的药剂的需求支持了继续努力鉴别新颖的且更有效的作为HCV NS5B抑制剂的核苷的需要。NS5B聚合酶的核苷抑制剂可以用作造成链终止的非天然底物，或用作与核苷酸竞争结合聚合酶的竞争性抑制剂。为起到链终止剂的作用，核苷类似物必须被细胞摄取，并在体内转化成三磷酸酯，以竞争聚合酶核苷酸结合位点。这种向三磷酸酯的转化通常由细胞激酶介导，所述细胞激酶对潜在的核苷聚合酶抑制剂提出了额外的结构要求。不幸的是，这将作为HCV复制抑制剂的核苷的直接评价局限至能原位磷酸化的基于细胞的测定法。在有些情况下，核苷的生物活性受到将它转化成有活性的三磷酸酯形式所需的一种或多种激酶中的差底物特性的阻碍。核苷激酶形成单磷酸酯，通常被视作三磷酸化事件的限速步骤。为了回避核苷向有活性的三磷酸酯类似物代谢中的起始磷酸化步骤的需求，已经报道了稳定的磷酸酯前药的制备。已经显示，核苷氨基磷酸酯前药是有活性的核苷三磷酸酯的前体，且当施用至病毒感染的完整细胞时会抑制病毒复制(McGuigan，C等人，J.Med. Chem.，1996，39，1748-1753; Valette, G.等人，J. Med. Chem.，1996，39，1981-1990; Balzarini, J.等人，Proc. National Acad Sci USA, 1996, 93, 7295-7299; Siddiqui, A. Q.等人,J. Med Chem. , 1999, 42, 4122-4128; Eisenberg, E. J.等人，Nucleosides, Nucleotidesand Nucleic Acids, 2001, 20, 1091-1098; Lee, ff. A.等人，Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 2005, 49, 1898);US2006/0241064;和 WO 2007/095269。核苷作为可行治疗剂的实用性的另一个限制是，它们有时较差的物理化学的和药代动力学的性质。这些较差的性质可以限制药剂的肠吸收，并限制向靶组织或细胞中的摄取。为了改良它们的性质，已经采用了核苷的前药。已证明核苷氨基磷酸酯的制剂改善了核苷的系统吸收，并且此外，这些“前核苷酸(pronucleotide)”的氨基磷酸酯部分被中性亲脂基团掩蔽以获得合适的分配系数以优化被细胞的摄取和至细胞的转运，相对于单独母体核苷的施用，这极大地增强了核苷单磷酸酯类似物的胞内浓度。酶介导的磷酸酯部分的水解产生核苷单磷酸酯，其中不需要限速的初始磷酸化。为此目的，对应于W02008/121634和US 2010/0016251的美国专利申请12/053,015公开了大量氨基磷酸酯核苷前药，其中许多在HCV测定法中显示活性。测试了 US 2010/0016251中公开的几种化合物作为潜在的临床候选物以用于FDA批准。发明概述本文公开由式4表示的化合物和由式Sp-4和Rp-4表示的其相应的基于磷的非对 映体。
权利要求
1.结晶(S)-2-(((S)-(((2R，3R，4R，5R)-5-(2，4-二氧代-3，4- 二氢嘧啶-I (2H)-基)-4-氟代-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯。
2.结晶(S)-2-(((S)-(((2R，3R，4R，5R)-5-(2，4-二氧代-3，4- 二氢嘧啶-I (2H) -基)-4-氟代-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氣基)丙酸异丙酷，具有(1)约以下的XRPD 2 Θ -反射(。)5. 2,7. 5,9. 6,16. 7,18. 3、和 22. 2 ； (2)约以下的XRPD 2Θ-反射(。):5· 0、7· 3、9· 4、和 18. I ；(3)约以下的XRPD 2 Θ -反射(。)4. 9,6. 9,9. 8,19. 8,20. 6,24. 7、和 26. I ； (4)约以下的XRPD 2 Θ -反射(。):6· 9,9. 8,19. 7,20. 6、和 24. 6 ；(5)约以下的XRPD 2 Θ -反射(。)5. 0,6. 8,19. 9,20. 6,20. 9、和 24. 9 ；(6)约以下的XRPD 2 Θ -反射(。):5· 2,6. 6,7. 1,15. 7,19. I、和 25. O ;或(7)约以下的XRPD 2 Θ -反射(。):6· 1,8. 2,10. 4,12. 7,17. 2,17. 7,18. 0,18. 8、19. 4,19. 8,20. 1,20. 8,21. 8、和 23. 3。；
3.如权利要求2 所述的结晶(S) -2- (((S) - (((2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2，4- 二氧代-3，4- 二氢嘧啶-I (2H)-基)-4-氟代-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯，具有(1)约以下的XRPD 2 Θ -反射(。)5. 2,7. 5,9. 6,16. 7,18. 3、和 22. 2 ； (2)约以下的XRPD 2Θ-反射(。):5· 0、7· 3、9· 4、和 18. I ;或(7)约以下的 XRPD 2 Θ -反射(。):6· 1,8. 2,10. 4,12. 7,17. 2,17. 7,18. 0,18. 8、19. 4,19. 8,20. 1,20. 8,21. 8、和 23. 3。；
4.如权利要求2 所述的结晶(S) -2-((⑶-(((2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2，4- 二氧代-3，4- 二氢嘧啶-I (2H)-基)-4-氟代-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯，具有(1)约以下的XRPD 2 Θ -反射(。)5. 2,7. 5,9. 6,16. 7,18. 3、和 22. 2 ； (2)约以下的XRPD 2Θ-反射(。):5· 0、7· 3、9· 4、和 18. I ;或(7)约以下的 XRPD 2 Θ -反射(。):6· 1,8. 2,10. 4,12. 7,17. 2,17. 7,18. 0,18. 8、19.4,19. 8,20. 1,20. 8,21. 8、和 23. 3。；
5.如权利要求2 所述的结晶(S) -2- (((S) - (((2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2，4- 二氧代-3，4- 二氢嘧啶-I (2H)-基)-4-氟代-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯，具有约以下的XRPD 2 0-反射(° ):5.2、7.5、9.6、16.7、18.3、和22. 2。
6.如权利要求2 所述的结晶(S) -2- (((S) - (((2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2，4- 二氧代-3，4- 二氢嘧啶-I (2H)-基)-4-氟代-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯，具有约以下的XRPD 2 0-反射(° ) :5.0、7.3、9.4、和18. I。
7.如权利要求2 所述的结晶(S) -2- (((S) - (((2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2，4- 二氧代-3，4- 二氢嘧啶-I (2H)-基)-4-氟代-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯，具有约以下的XRPD 2 0-反射(° ) :6· 1、8·2、10·4、12·7、17·2、·17.7,18. 0,18. 8,19. 4,19. 8,20. 1,20. 8,21. 8、和 23. 3。
8.一种组合物，包含权利要求I所述的结晶(S)-2-(((S)-(((2R，3R，4R，5R)-5-(2，4-二氧代_3，4- 二氢嘧啶-I (2H)-基)-4-氟代-3-羟基-4-甲基四氢呋喃_2_基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯。
9.一种药物组合物，包含权利要求I所述的结晶(S) -2-((⑶-(((2R, 3R, 4R, 5R) -5-(2，4- 二氧代-3，4- 二氢嘧啶-I (2H)-基)-4-氟代-3-羟基-4-甲基四氢呋喃_2_基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯和药学上可接受的介质。
10.一种在有相应需要的受试者中治疗丙型肝炎病毒感染的方法，所述方法包含 向受试者施用有效量的权利要求I所述的结晶(S) -2- (((S) - (((2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2，4- 二氧代_3，4- 二氢嘧啶-I (2H) -基)-4-氟代-3-羟基-4-甲基四氢呋喃_2_基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯。
11.一种化合物，由以下结构式表示
12.如权利要求11所述的化合物，其中LG’是甲苯磺酸酯、樟脑磺酸酯、苯并[d]噻唑化物-2 (3H)-硫酮、芳族醚、或被至少一个吸电子基团取代的芳族醚。
13.如权利要求11所述的化合物，其中LG’是2，4-二硝基苯氧化物、4-硝基苯氧化物、2-硝基苯氧化物、2-氯代-4-硝基苯氧化物、2，4- 二氯苯氧化物、或五氟苯氧化物。
14.(S)-2-(((S)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯。
15.结晶(S)-2-(((S)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯。
16.—种制备如权利要求11所述的化合物的方法，所述方法包含使所述化合物从组合物中结晶，所述组合物包含 a)第一组合物； b)第二离去基团前体； c)非亲核性碱；和 d)液体组合物； 其中所述第一组合物包含所述化合物和其相应的P基非对映体。
17.如权利要求16所述的方法，其中所述化合物的摩尔量和其P基非对映体的摩尔量是相同的或不同的。
18.如权利要求17所述的方法，其中所述化合物的摩尔量大于其相应的P基非对映体的摩尔量。
19.如权利要求16所述的方法，其中所述第二离去基团前体是2，4-二硝基苯酚、4-硝基苯酚、2-硝基苯酚、2-氯代-4-硝基苯酚、2，4- 二氯苯酚、或五氟苯酚。
20.如权利要求19所述的方法，其中LG’是五氟苯氧化物。
21.如权利要求20所述的方法，其中所述第二离去基团前体是五氟苯酚。
22.如权利要求20所述的方法，其中五氟苯酚的量相对于所述化合物和其P基非对映体的摩尔量在约O. 01摩尔当量至约10摩尔当量范围内。
23.如权利要求21所述的方法，其中五氟苯酚的量相对于所述化合物和其P基非对映体的摩尔量在约O. I摩尔当量至约I摩尔当量范围内。
24.如权利要求16所述的方法，其中所述结晶发生在约-10°C至约+40° C范围内的温度下。
25.如权利要求16所述的方法 ，其中所述结晶发生在约室温下。
26.如权利要求16所述的方法，其中所述非亲核性碱选自碳酸钾、碳酸铯、二异丙胺、二异丙基乙胺、三乙胺、奎宁环、萘-1，8-二胺、2，2，6，6-四甲基哌啶、1，8-二氮杂双环十一 _7-稀、4_ _■甲基氣基_批淀、批淀、2，6- _. -C1-6-烧基_批P定、2，4, 6- 二 -C1-6-烧基-吡啶、和其混合物。
27.如权利要求16所述的方法，其中所述非亲核性碱是三乙胺。
28.如权利要求16所述的方法，其中所述非亲核性碱以相对于所述化合物和其P基非对映体的总摩尔量约O. 01摩尔当量至约10摩尔当量范围内的量存在。
29.如权利要求16所述的方法，其中所述非亲核性碱以相对于所述化合物和其P基非对映体的总摩尔量约O. I摩尔当量至约I摩尔当量范围内的量存在。
30.如权利要求16所述的方法，其中所述化合物的溶解度低于其相应的P基非对映体在所述液体组合物中的溶解度。
31.如权利要求16所述的方法，其中所述液体组合物包含溶剂和反溶剂中的至少一种。
32.如权利要求16所述的方法，其中所述液体组合物包含以下的至少一种K1至C8醇、C2至C8醚、C3至C7酮、C3至C7酯、C1至C2氯碳化合物、C2至C7腈、C5至C12饱和烃、和C6至C12芳香烃。
33.如权利要求16所述的方法，其中所述液体组合物包含C2至C8醚、C3至C7酯、C5至C12饱和烃、和C6至C12芳香烃中的至少一种。
34.如权利要求16所述的方法，其中所述液体组合物包含C2至C8醚、C3至C7酯、和C5至C12饱和烃中的至少一种。
35.如权利要求34所述的方法，其中所述液体组合物包含乙酸乙酯、叔丁基甲醚、和己烷中的至少一种。
36.如权利要求34所述的方法，其中所述液体组合物包含乙酸乙酯和己烷。
37.如权利要求34所述的方法，其中所述液体组合物包含叔丁基甲醚和己烷。
38.如权利要求16所述的方法，其中对于每克所述第一组合物，液体组合物的量在约ImL至约IOmL范围内。
39.如权利要求16所述的方法，所述方法还包含添加结晶化合物至所述组合物中。
40.如权利要求16所述的方法，所述方法还包含添加约O.I至约Iwt. %结晶化合物至所述第一组合物。
41.如权利要求16所述的方法，所述方法还包含 a)使PhOP(O) (LG)2 和 iPr-Ala-NH2 · HCl 在第一碱存在下反应以获得(PhO)P(O) (LG)(NHAla-iPr)； b)使(PhO)P(O)(LG) (NHAla-iPr)与第一离去基团前体(LG’ H)在第二碱存在下反应以获得包含所述化合物和其P基非对映体的组合物； 其中LG和LG’彼此独立地是离去基团；其中所述第一离去基团前体和所述第二离去基团前体是相同的或不同的；和 其中所述第一碱和所述第二碱是相同的或不同的。
42.一种制备结晶(S)-2-(((S)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的方法，所述方法包含使(S)-2-(((S)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯从第二组合物中结晶，所述第二组合物包含 a)第一组合物； b)五氟苯酚； c)非亲核性碱；和 d)液体组合物； 其中所述第二组合物包含(S)-2-(((S)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯和(S)-2-(((R)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯。
43.如权利要求42所述的方法，其中所述(S)-2-(((S)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的摩尔量和(S)-2-(((R)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的摩尔量是相同的或不同的。
44.如权利要求42所述的方法，其中(S)-2-(((S)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的摩尔量大于(S)-2-(((R)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯。
45.如权利要求43所述的方法，其中五氟苯酚的量在相对于(S)-2-(((S)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯和(S) -2- (((R)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的摩尔量约O. Ol摩尔当量至约10摩尔当量的范围内。
46.如权利要求42所述的方法，其中所述结晶发生在约-10°C至约+40° C范围内的温度下。
47.如权利要求42所述的方法，其中所述结晶发生在约室温下。
48.如权利要求42所述的方法，其中所述非亲核性碱选自碳酸钾、碳酸铯、二异丙胺、二异丙基乙胺、三乙胺、奎宁环、萘-1，8-二胺、2，2，6，6-四甲基哌啶、1，8-二氮杂双环十一 _7_稀、4_ 二甲基氛基_批卩定、批卩定、2，6- 二 -C^6-烧基-批卩定、2，4, 6- 二 -CV6-烧基-吡啶、和其混合物。
49.如权利要求42所述的方法，其中所述非亲核性碱是三乙胺。
50.如权利要求42所述的方法，其中所述非亲核性碱以相对于(S)-2-(((S)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯和(S) -2- (((R)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的总摩尔量约O. I至约I摩尔当量范围内的量存在。
51.如权利要求42所述的方法，其中(S)-2-(((S)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的溶解度低于(S)-2-(((R)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯在所述液体组合物中的溶解度。
52.如权利要求42所述的方法，其中所述液体组合物包含溶剂和反溶剂中的至少一种。
53.如权利要求42所述的方法，其中所述液体组合物包含C1至C8醇、C2至C8醚、C3至C7酮、C3至C7酯、C1至C2氯碳化合物、C2至C7腈、C5至C12饱和烃、和C6至C12芳香烃中的至少一种。
54.如权利要求42所述的方法，其中所述液体组合物包含C2至C8醚、C3至C7酯、C5至C12饱和烃、和C6至C12芳香烃中的至少一种。
55.如权利要求42所述的方法，其中所述液体组合物包含C2至C8醚、C3至C7酯、和C5至C12饱和烃中的至少一种。
56.如权利要求55所述的方法，其中所述液体组合物包含乙酸乙酯、叔丁基甲醚、和己烷中的至少一种。
57.如权利要求55所述的方法，其中所述液体组合物包含乙酸乙酯和己烷。
58.如权利要求55所述的方法，其中所述液体组合物包含叔丁基甲醚和己烷。
59.如权利要求42所述的方法，其中对于每克所述第一组合物，液体组合物的量在约I至约IOmL范围内。
60.如权利要求42所述的方法，所述方法还包含添加结晶(S)-2-(((S)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯至所述第二组合物。
61.如权利要求42所述的方法，所述方法还包含添加按所述第一组合物中(S)-2-(((S)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的总重量计约O. I至约Iwt. %的结晶(S)-2-(((S)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯。
62.根据权利要求42所述的方法获得的结晶(S)-2-(((S)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯。
63.一种制备(S)-2-(((S)_(((2R，3R，4R，5R)-5-(2,4-二氧代-3，4-二氢嘧啶-I (2H) -基)-4-氟代-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的方法，所述方法包含 使(S) -2- (((S)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯从第二组合物中结晶，所述第二组合物包含 a)第一组合物； b)五氟苯酚； c)非亲核性碱；和 d)液体组合物； 其中所述第一组合物包含(S)-2-(((S)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯和(S)-2-(((R)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯。
64.一种制备(S)-2-(((S)_(((2R，3R，4R，5R)-5-(2,4- 二氧代-3,4- 二氢嘧啶-I (2H)-基)-4-氟代-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的方法，所述方法包含 使(S)-2-(((S)-(全氟苯氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯与通过使卤化叔丁基镁与1_((2R，3R, 4R, 5R)-3-氟代-4-羟基_5_(羟基甲基)_3_甲基四氢呋喃_2_基)嘧啶-2，4(1H, 3H)- 二酮与卤化叔丁基镁反应获得的产物接触。
65.如权利要求64所述的方法，其中所述接触发生在具有约0°C至约40° C范围内的温度的介质中。
66.如权利要求64所述的方法，其中所述接触发生在具有约0°C至约30° C范围内的温度的介质中。
67.如权利要求64所述的方法，其中卤化叔丁基镁与l-((2R，3R，4R，5R)-3-氟代-4-羟基-5-(羟基甲基)-3-甲基四氢呋喃-2-基)嘧啶-2，4(1H，3H)- 二酮的摩尔比在约2至约2. 2范围内。
68.如权利要求64所述的方法，其中卤化叔丁基镁与l-((2R，3R，4R，5R)-3-氟代-4-羟基-5-(羟基甲基)-3-甲基四氢呋喃-2-基)嘧啶-2，4(1H，3H)- 二酮的摩尔比是约2. I ο
69.如权利要求64所述的方法，其中所述卤化叔丁基镁是氯化叔丁基镁。
70.一种制备大致纯的(S) -2-((⑶-(((2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2，4- 二氧代-3，4- 二氢嘧啶-I (2H)-基)-4-氟代-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的方法，所述方法包含 根据权利要求35所述的方法获得(S) -2-((⑶-(((2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2，4_ 二氧代-3，4- 二氢嘧啶-I (2H)-基)-4-氟代-3-羟基-4-甲基四氢呋喃_2_基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯，和 使所形成的(S)-2-(((S)_(((2R，3R，4R，5R)-5-(2,4-二氧代-3，4-二氢嘧啶-I (2H) -基)-4-氟代-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯结晶。
全文摘要
本文公开核苷氨基磷酸酯和其用作治疗病毒疾病的剂的用途。这些化合物是RNA依赖性RNA病毒复制的抑制剂，并可用作HCVNS5B聚合酶的抑制剂、用作HCV复制的抑制剂和用于治疗哺乳动物中的丙型肝炎感染。
文档编号C07H19/06GK102858790SQ201180017181
公开日2013年1月2日 申请日期2011年3月31日 优先权日2010年3月31日
发明者B·S·罗斯, M·J·索菲亚, G·R·帕姆拉帕蒂, S·拉查孔达, 张海仁, 千炳权, 王培源 申请人:吉利德制药有限责任公司