本发明提供一种降低地榆多糖中蛋白含量的方法。
背景技术：
地榆是蔷薇科地榆属多年生草本植物，其根中含有丰富的鞣质、黄酮与花青素、多糖等活性物质，有凉血止血、解毒敛疮之功效，用于便血、痔血、水火烫伤等症，在近些年的科学研究、中医药等领域有着重要的地位。地榆多糖是一种新型的α-葡萄糖苷酶抑制剂，可起到降血糖血脂、增加机体免疫力等生理功效，但从地榆中所提取出的地榆多糖蛋白含量高，使得多糖纯度降低，限制了地榆多糖的深入研究及开发利用，而常规的植物多糖除蛋白方法，如sevag法、三氯乙酸法等，蛋白去除率一般都低于80％，即使超过80％的多糖损失率也较高，该损失率通常都在30％以上，且存在操作繁琐，费时长，部分方法存在有害溶剂残留等缺点。因此，如何提高地榆多糖中蛋白的去除率、并在无有害溶剂残留的条件下较多的保留多糖是本领域要攻克的技术难题，其对地榆多糖的推广应用尤为重要，是推进其产业化进程的关键性问题。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种降低地榆多糖中蛋白含量的方法，使用该方法能提高地榆多糖中蛋白的去除率、并较多的保留多糖，且无有害溶剂残留。
本发明的技术方案是：一种降低地榆多糖中蛋白含量的方法，其特征在于具有以下步骤：
1)制备壳聚寡糖水溶液：取0.5～2克的壳聚寡糖加入100毫升的蒸馏水中，搅拌均匀，溶胀12-16小时，制得壳聚寡糖水溶液待用；
2)制备地榆多糖水溶液：取1.8-3.5克的地榆多糖加入100毫升的蒸馏水中，搅拌均匀，制得地榆多糖水溶液待用；
3)制备混合液：在连续搅拌下，取15～25毫升的壳聚寡糖水溶液缓慢地加入到地榆多糖水溶液中，获得混合液；
4)制备分离液：将混合液在25～35℃的环境中静置1.5～2.5小时进行絮凝，再用离心机以7500～8500转/分钟转速分离5～8分钟，滤除絮凝物后，得到分离液；
5)制备成品：用冷冻干燥机将分离液制成冻干粉，获得的冻干粉即为低蛋白的地榆多糖。
本发明的优点是：壳聚寡糖可吸附地榆多糖水溶液中的蛋白，与其絮凝沉淀而达到除去地榆多糖中蛋白的目的，本申请中的壳聚寡糖用量少，其对人体无害，通过离心分离出絮凝物，属于物理方法除蛋白，无有害溶剂存留，经试验室数据测得，采用本方法蛋白去除率为89％以上，且多糖损失率不超过22％，能有效提高地榆多糖中的蛋白去除率，并较多的保留多糖；本方法操作简单、方便、高效、易实现，适合工业化生产，纯化后的低蛋白的地榆多糖可直接应用于食品、保健品、药品等领域。
具体实施方式
实施例一：一种降低地榆多糖中蛋白含量的方法，该方法的步骤是，取2克的壳聚寡糖加入100毫升的蒸馏水中，搅拌均匀，溶胀16小时，制得壳聚寡糖水溶液待用；取3.5克的地榆多糖冻干粉加入100毫升的蒸馏水中，搅拌均匀，制得地榆多糖水溶液待用；在连续搅拌下，取25毫升的壳聚寡糖水溶液缓慢地加入到地榆多糖水溶液中，获得混合液；将混合液在35℃的环境中静置2.5小时进行絮凝，再用离心机以8500转/分钟转速分离5分钟，滤除絮凝物后，得到分离液；使用冷冻干燥机对分离液进行冷冻干燥处理，在20Pa压力、冷阱温度-50℃条件下，冷冻干燥26小时，将分离液制成冻干粉，获得的冻干粉即为低蛋白的地榆多糖，经检测其蛋白去除率为94.27％，多糖损失率为21.94％。
实施例二：一种降低地榆多糖中蛋白含量的方法，该方法的步骤是，取1.5克的壳聚寡糖加入100毫升的蒸馏水中，搅拌均匀，溶胀14小时，制得壳聚寡糖水溶液待用；取2.7克的地榆多糖冻干粉加入100毫升的蒸馏水中，搅拌均匀，制得地榆多糖水溶液待用；在连续搅拌下，取20毫升的壳聚寡糖水溶液缓慢地加入到地榆多糖水溶液中，获得混合液；将混合液在30℃的环境中静置2小时进行絮凝，再用离心机以8000转/分钟转速分离7分钟，滤除絮凝物后，得到分离液；使用冷冻干燥机对分离液进行冷冻干燥处理，在20Pa压力、冷阱温度-50℃条件下，冷冻干燥24小时，将分离液制成冻干粉，获得的冻干粉即为低蛋白的地榆多糖，经检测其蛋白去除率为92.61％，多糖损失率为16.45％。
实施例三：一种降低地榆多糖中蛋白含量的方法，该方法的步骤是，取0.5克的壳聚寡糖加入100毫升的蒸馏水中，搅拌均匀，溶胀12小时，制得壳聚寡糖水溶液待用；取1.8克的地榆多糖冻干粉加入100毫升的蒸馏水中，搅拌均匀，制得地榆多糖水溶液待用；在连续搅拌下，取15毫升的壳聚寡糖水溶液缓慢地加入到地榆多糖水溶液中，获得混合液；将混合液在25℃的环境中静置1.5小时进行絮凝，再用离心机以7500转/分钟转速分离8分钟，滤除絮凝物后，得到分离液；使用冷冻干燥机对分离液进行冷冻干燥处理，在20Pa压力、冷阱温度-50℃条件下，冷冻干燥25小时，将分离液制成冻干粉，获得的冻干粉即为低蛋白的地榆多糖，经检测蛋白去除率为89.77％，多糖损失率为14.13％。
以下为降低地榆多糖中蛋白含量的三种常规方法，用于与本申请方法的检测结果进行对比：
1、sevag法：取3.5克的地榆多糖冻干粉加入100毫升的蒸馏水中，搅拌均匀，制得地榆多糖水溶液，加入多糖溶液体积20毫升的氯仿和4毫升的正丁醇，在20℃环境中、以200rad/min速度于摇床中振摇20分钟，振摇后的溶液倒于分液漏斗中静置10分钟，除去有机相层和中间的变性蛋白层，剩余上清液重复6次上述步骤，得降蛋白后的地榆多糖液，经检测其蛋白去除率为76.31％，多糖损失率为29.75％。
2、三氯乙酸法：取2.7克的地榆多糖冻干粉加入100毫升的蒸馏水中，搅拌均匀，制得地榆多糖水溶液，用10％三氯乙酸将地榆多糖水溶液ph值调至3，在20℃环境中、以200rad/min速度用摇床振摇30分钟，然后放于4℃冰箱12小时后取出，用离心机以8000转/分钟转速分离7分钟，弃去沉淀，得降蛋白后的地榆多糖液，经检测其蛋白去除率为56.79％，多糖损失率为14.56％。
3、盐酸法：取1.8克的地榆多糖冻干粉加入100毫升的蒸馏水中，搅拌均匀，制得地榆多糖水溶液，用2moL/L盐酸调节其ph值至3，在20℃环境中、以200rad/min速度用摇床振摇30分钟，然后放于4℃冰箱中12小时后取出，用离心机以8000转/分钟转速分离7分钟，弃去沉淀，得降蛋白后的地榆多糖液，经检测其蛋白去除率为81.62％，多糖损失率为31.49％。
实验数据证明，本申请的一种降低地榆多糖中蛋白含量的方法能有效提高地榆多糖中的蛋白去除率，并较多的保留了多糖。