一种酶法转化L‑丙氨酸制备丙酮酸的方法与流程

文档序号:11145504阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种酶法转化L-丙氨酸制备丙酮酸的方法,其特征在于:

步骤1:向湿菌体溶液中加入丙烯酰胺单体和交联剂N,N-甲叉双丙烯酰胺,在加速剂四甲基乙二胺和催化剂过硫酸铵的作用下聚合交联成三维网状的固定化酶凝胶,进而制取固定化的L-氨基酸氧化酶;

步骤2:以L-丙氨酸作为反应底物,在上述固定化的L-氨基酸氧化酶的作用下氧化脱氨得到L-丙酮酸。

2.根据权利要求1所述的一种酶法转化L-丙氨酸制备丙酮酸的方法,其特征在于:所述湿菌体为含有L-氨基酸氧化酶的大肠杆菌体。

3.根据权利要求1所述的一种酶法转化L-丙氨酸制备丙酮酸的方法,其特征在于:所述湿菌体溶液为湿菌体硅油-水溶液。

4.根据权利要求3所述的一种酶法转化L-丙氨酸制备丙酮酸的方法,其特征在于:所述硅油-水溶液的浓度为80%。

5.根据权利要求3所述的一种酶法转化L-丙氨酸制备丙酮酸的方法,其特征在于:步骤1中,制取湿菌体溶液的方法为:将湿菌体均匀的分散在硅油-水溶液中,在超声波细胞破碎机进行低温破碎,过滤去除菌体残片,即得到湿菌体溶液。

6.根据权利要求5所述的一种酶法转化L-丙氨酸制备丙酮酸的方法,其特征在于:步骤1中,所述丙烯酰胺单体加入量为所述湿菌体溶液重量的200%-600%,所述交联剂N,N-甲叉双丙烯酰胺加入量为湿菌体溶液重量的2.5%-5%,所述加速剂四甲基乙二胺加入量为湿菌体溶液重量的5%-8%,所述催化剂过硫酸铵的加入量为湿菌体溶液重量的2%-5%。

7.根据权利要求1所述的一种酶法转化L-丙氨酸制备丙酮酸的方法,其特征在于:步骤1中,将三维网状的固定化酶凝胶搅拌均匀,用水洗涤凝胶,过滤后得固体,即为固定化的L-氨基酸氧化酶。

8.根据权利要求1所述的一种酶法转化L-丙氨酸制备丙酮酸的方法,其特征在于:所述步骤2,氧化脱氨时,控制反应温度、溶氧量、调节pH,所述控制反应温度为25℃-35℃,所述pH为6.0-7.5,所述溶氧量为410-450mg/L。

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