1.一种用于恶臭假单胞菌NBRC 14164的基因敲除方法，其特征是步骤如下：
1)基因敲除质粒构建；
2)E.coli S17-1感受态细胞的制备；
3)基因敲除质粒转化E.coli S17-1感受态细胞；
4)接合转化法导入质粒至P.putida NBRC 14164中。
2.如权利要求1所述的方法，其特征是所述的步骤1)是：查找拟敲除基因序列，利用软件Primer Premier 5设计基因敲除引物与敲除后验证引物，两对引物扩增产物相差300-400bp，敲除引物扩增产物经酶切连接质粒即构建成功。
3.如权利要求1所述的方法，其特征是所述的步骤2)是：用于接合转化的辅助菌株E.coli按照热激转化法制备感受态细胞，用Mg2+溶液、Ca2+溶液的洗涤，全程无菌操作。
4.如权利要求1所述的方法，其特征是所述的步骤3)是：用热激转化法将基因敲除质粒转化进入E.coli感受态细胞。
5.如权利要求1所述的方法，其特征是所述的步骤4)是：接合转化利用两次同源重组将基因敲除，第一次同源重组质粒从E.coli进入P.putida中并整合到染色体上，第二次同源重组质粒与敲除引物扩增的基因从染色体上脱离，即基因敲除成功。
6.如权利要求5所述的方法，其特征是：第一次同源重组条件为恶臭假单胞菌与含有重组自杀载体质粒的大肠杆菌于30℃，200rpm培养12h，再静置12h。
7.如权利要求5所述的方法，其特征是：第二次同源重组条件为筛选后的第一次同源重组成功的单菌落接种到无抗性LB液体培养基中，30℃，200rpm培养24h。