本发明涉及一种纳米材料细胞毒性的检测方法,特别是涉及一种用基因表达量来检测纳米材料细胞毒性的方法。
背景技术:
纳米材料的细胞毒性常用的检测方法是,观测纳米材料对生物个体各组织器官、细胞形态、细胞活性氧水平等的影响,以上检测并未涉及到基因水平。
技术实现要素:
为解决背景技术中所存在的问题,本发明提供一种用基因表达量来检测纳米材料细胞毒性的方法,通过检测纳米材料对Hela细胞actin、Rab5、COX4、NF-kb基因表达量的影响来衡量纳米材料的细胞毒性。
本发明的技术方案是,一种用基因表达量来检测纳米材料细胞毒性的方法,其特征在于:包括如下步骤
1)将Hela细胞接种于不同的培养皿中12小时后向不同的培养皿中加入不同浓度的纳米二氧化钛继续培养48小时;
2)用RNA提取试剂盒提取各组Hela细胞的RNA,再用反转录试剂盒对所提取的RNA进行反转录,即得到QPCR的模板;
3)设计各目的基因actin、Rab5、COX4、NF-kb的引物;
4)用QPCR试剂盒在荧光定量PCR仪上检测各目的基因的表达量。
本发明的有益效果是:从基因水平检测纳米材料的细胞毒性,检测更加灵敏。
附图说明
图1是Hela细胞各目的基因在纳米二氧化钛胁迫下的相对表达量的统计图。
具体实施方式
上以下结合附图与具体实施例来进一步说明本发明。
本发明提供了一种用基因表达量来检测纳米材料细胞毒性的方法,其特征在于:包括如下步骤
1)将Hela细胞接种于不同的培养皿中12小时后向不同的培养皿中加入不同浓度的纳米二氧化钛继续培养48小时;
2)用RNA提取试剂盒提取各组Hela细胞的RNA,再用反转录试剂盒对所提取的RNA进行反转录,即得到QPCR的模板;
3)设计各目的基因actin、Rab5、COX4、NF-kb的引物;
4)用QPCR试剂盒在荧光定量PCR仪上检测各目的基因的表达量。
当纳米材料的细胞毒性越强时,各目的基因的相对表达量越高。