一种猪肺炎支原体培养基及其制备方法与流程

文档序号:12778782阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种猪肺炎支原体培养基,由基础培养基包括20×Hank′s 25~35ml、酵母提取物1~5g、乳蛋白水解物0.5~3g、牛心提取物5~12g、去离子水770~870ml,辅助培养基包括5%精氨酸溶液1~5ml、5%半胱氨酸溶液1~5ml、5%辅酶Ι1~5ml、10万U/ml青霉素5~10ml和灭活的健康猪血清80~200ml组成。

2.根据权利要求1所述的一种猪肺炎支原体培养基,其特征在于它能培养猪肺炎支原体兔化弱毒株,并且培养的CCU滴度可以达到109~1010,所需猪血清浓度不超过10%。

3.根据权利要求1所述的一种高效猪肺炎支原体培养基,其特征在于20×Hank′s液包括20×Hank′s1和20×Hank′s2,其中:

20×Hank′s1:NaCl 12~16g、MgSO4.7H2O 0.1g~0.5g、KCl 0.4~1.0g、MgCl2.6H2O 0.1~0.5g、CaCl2 0.2~0.5g、去离子水100ml;

20×Hank′s2:Na2HPO4.12H2O 0.1~0.4g、KH2PO4 0.1~0.35g、葡萄糖1~5g、1%酚红溶液2~4ml、去离子水96~98ml。

4.权利要求1所述的一种猪肺炎支原体培养基的制备方法,其特征在于制备步骤如下:

(1)基础培养基的配制:按配比量取20×Hank′s 1 25~35ml、20×Hank′s 2 25~35ml,称取酵母提取物1~5g、乳蛋白水解物0.5~3g、牛心提取物5~12g、去离子水770~870ml,搅拌均匀,10M NaOH调pH至7.2~7.4,115℃高压灭菌20min;

(2)辅助培养基的配制:按配比量取过滤除菌的5%精氨酸溶液1~5ml、5%半胱氨酸溶液1~5ml、5%辅酶Ι1~5ml、10万U/ml青霉素5~10ml、56℃灭活的猪血清80~200ml。

5.权利要求1和4所述的一种猪肺炎支原体培养基,其特征在于它还包括高效猪肺炎支原体固体培养基,配制方法是在上述基础培养中加入0.8~1.5%琼脂糖。

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