本发明涉及大肠杆菌的检测技术领域，尤其指一种大肠杆菌的快速检测方法。
背景技术：
大肠杆菌是与我们日常生活关系非常密切的一类细菌，学名称作“大肠埃希菌”，属于肠道杆菌大类中的一种。它是寄生在人体大肠和小肠里对人体无害的一种单细胞生物，结构简单，繁殖迅速，培养容易，它是生物学上重要的实验材料。在婴儿刚出生的几小时内，大肠杆菌就经过吞咽在肠道内定居了。正常情况下，大多数大肠杆菌是非常安分守己的，他们不但不会给我们的身体健康带来任何危害，反而还能竞争性抵御致病菌的进攻，同时还能帮助合成维生素k2，与人体是互利共生的关系。只有在机体免疫力降低、肠道长期缺乏刺激等特殊情况下，这些平日里的良民才会兴风作浪，移居到肠道以外的地方，例如胆囊、尿道、膀胱、阑尾等地，造成相应部位的感染或全身播散性感染。因此，大部分大肠杆菌通常被看作机会致病菌。
准确及时的检测手段是预防和控制病原微生物传播的关键。目前大肠杆菌的检测多采用传统的微生物培养的方法，主要包括前增菌、选择性增菌、平板分离、生化试验和鉴定等步骤，涉及的实验较多、操作较烦琐、检测周期较长(一般需要4～7d)、准备和收尾工作繁重，已无法满足现阶段食品中致病菌快速检测的现实需要。
技术实现要素：
为了解决上述技术问题，本发明提供一种大肠杆菌的快速检测方法。
一种大肠杆菌的快速检测方法，包括以下步骤：
1.培养基配制
1）增菌培养基配制：称取26.5g增菌培养基，加入预热42±1℃去离子水1l，充分溶解，备用；
2）选择性培养基配制：称取7.5g选择培养基，加入预热42±1℃去离子水100ml，充分溶解，备用；
2.无菌操作取25g(ml)样品到均质袋中，并向其中加入225ml预热后的增菌培养基，放入均质器中均质2min；42℃静止或者振荡培养6h，根据需要也可以延长至24h；取0.1ml上述增菌液，加入含1ml选择性培养基的5ml玻璃管内，42±1℃继续培养18-24h；
3.将培养物混合均匀，取1ml到试管中沸水（100℃）加热10min，冷却至室温，用滴管滴加3-4滴至胶体金检测卡的样品孔，反应5-10min，判读结果，超过30min显色无效。
进一步的，所述增菌培养基包括以下原料（按重量份数计）：葡萄糖80份、七水合硫酸镁0.5-1.5份、硫酸铵3-5份、硝酸钠3-5份、酵母粉20-25份、棉籽蛋白5-15份，蛋白胨5-14份，磷酸二氢钾0.2-3份，磷酸氢二钾0.5-5份。。
进一步的，所述选择培养基包括以下原料（按重量份数计）：乳糖10～26份，琼脂15～20份，牛胆盐1～7份，氯化钠2～7份，亚碲酸钾2.5～7.5份,山梨醇10～20份，肌醇4～7份，蛋白胨15～25份，羧甲基纤维素钠0.01～0.9份，磷酸氢二钾2.5～7.5份。
本发明的有益效果是：本发明提供了一种快速灵敏的检测样品中的大肠杆菌的方法，为大肠杆菌的快速定性检测提供了一种便捷有效地途径。缩短大肠杆菌检测时间，加快检测进程，缩短检测人员的劳动时间，降低劳动强度，节省水电及储存清洁等成本，提高检测效率，降低检测成本，便于现场检测，提高准确度。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明：
实施例一
一种大肠杆菌的快速检测方法，包括以下步骤：
1.培养基配制
1）增菌培养基配制：称取26.5g增菌培养基，加入预热42℃去离子水1l，充分溶解，备用；
2）选择性培养基配制：称取7.5g选择培养基，加入预热42℃去离子水100ml，充分溶解，备用；
2.无菌操作取25g(ml)样品到均质袋中，并向其中加入225ml预热后的增菌培养基，放入均质器中均质2min；42℃静止或者振荡培养6h，根据需要也可以延长至24h；取0.1ml上述增菌液，加入含1ml选择性培养基的5ml玻璃管内，42℃继续培养21h；
3.将培养物混合均匀，取1ml到试管中沸水（100℃）加热10min，冷却至室温，用滴管滴加3-4滴至胶体金检测卡的样品孔，反应5-10min，判读结果，超过30min显色无效。
其中，所述增菌培养基包括以下原料（按重量份数计）：葡萄糖80份、七水合硫酸镁0.5份、硫酸铵3份、硝酸钠3份、酵母粉20份、棉籽蛋白5份，蛋白胨5份，磷酸二氢钾0.2份，磷酸氢二钾0.5份。。
其中，所述选择培养基包括以下原料（按重量份数计）：乳糖10份，琼脂15份，牛胆盐1份，氯化钠2份，亚碲酸钾2.5份,山梨醇10份，肌醇4份，蛋白胨15份，羧甲基纤维素钠0.01份，磷酸氢二钾2.5份。
实施例二
一种大肠杆菌的快速检测方法，包括以下步骤：
1.培养基配制
1）增菌培养基配制：称取26.5g增菌培养基，加入预热43℃去离子水1l，充分溶解，备用；
2）选择性培养基配制：称取7.5g选择培养基，加入预热43℃去离子水100ml，充分溶解，备用；
2.无菌操作取25g(ml)样品到均质袋中，并向其中加入225ml预热后的增菌培养基，放入均质器中均质2min；42℃静止或者振荡培养6h，根据需要也可以延长至24h；取0.1ml上述增菌液，加入含1ml选择性培养基的5ml玻璃管内，43℃继续培养18-24h；
3.将培养物混合均匀，取1ml到试管中沸水（100℃）加热10min，冷却至室温，用滴管滴加3-4滴至胶体金检测卡的样品孔，反应5-10min，判读结果，超过30min显色无效。
其中，所述增菌培养基包括以下原料（按重量份数计）：葡萄糖80份、七水合硫酸镁1.5份、硫酸铵5份、硝酸钠5份、酵母粉25份、棉籽蛋白15份，蛋白胨14份，磷酸二氢钾3份，磷酸氢二钾5份。。
其中，所述选择培养基包括以下原料（按重量份数计）：乳糖26份，琼脂20份，牛胆盐7份，氯化钠7份，亚碲酸钾7.5份,山梨醇20份，肌醇7份，蛋白胨25份，羧甲基纤维素钠0.9份，磷酸氢二钾7.5份。
实施例三
一种大肠杆菌的快速检测方法，包括以下步骤：
1.培养基配制
1）增菌培养基配制：称取26.5g增菌培养基，加入预热41℃去离子水1l，充分溶解，备用；
2）选择性培养基配制：称取7.5g选择培养基，加入预热41℃去离子水100ml，充分溶解，备用；
2.无菌操作取25g(ml)样品到均质袋中，并向其中加入225ml预热后的增菌培养基，放入均质器中均质2min；42℃静止或者振荡培养6h，根据需要也可以延长至24h；取0.1ml上述增菌液，加入含1ml选择性培养基的5ml玻璃管内，41℃继续培养18-24h；
3.将培养物混合均匀，取1ml到试管中沸水（100℃）加热10min，冷却至室温，用滴管滴加3-4滴至胶体金检测卡的样品孔，反应5-10min，判读结果，超过30min显色无效。
其中，所述增菌培养基包括以下原料（按重量份数计）：葡萄糖80份、七水合硫酸镁1份、硫酸铵4份、硝酸钠4份、酵母粉22份、棉籽蛋白10份，蛋白胨9份，磷酸二氢钾2份，磷酸氢二钾3份。。
其中，所述选择培养基包括以下原料（按重量份数计）：乳糖18份，琼脂18份，牛胆盐3份，氯化钠3份，亚碲酸钾5份,山梨醇15份，肌醇6份，蛋白胨17份，羧甲基纤维素钠0.5份，磷酸氢二钾5份。
最后需要说明的是，具体实施方式是对本发明的进一步说明而非限制，对本领域普通技术人员来说，可以在不脱离本发明实质内容的情况下做进一步变换，而所有这些变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。