具有抗肝炎活性的2H‑苯并[b][1,4]噁嗪并吡唑化合物的制备方法与流程

本发明属于药物化学技术领域，主要涉及一种具有抗肝炎活性的2h-苯并[b][1,4]噁嗪并吡唑化合物的制备方法。

背景技术：

杂环化合物是有机化合物中最庞大的一类，约占65％以上，而且在自然界分布也十分广泛，其化学结构千变万化，各自有着特殊的性质和重要用途。苯并噁嗪类物质(benzoxazinoid,bx)是一类广泛存在于乔本科植物中的次生代谢物，具有广谱抗病抗虫活性。这些化合物以丁布为代表，是研究昆虫和植物相互关系的重要化合物。基于苯并噁嗪化合物的重要作用，近年来人们对这类化合物进行了广泛的研究，合成了不少具有生物活性的化合物。吡唑拥有多种生理作用，包括止痛、抗发炎、退烧、抗心律失常、镇静、松弛肌肉、精神兴奋、抗痉挛、一元胺氧化酶抑制剂，抗糖尿病和抗菌。吡唑可作为某些医药、农药的中间体，在医药、农药的研究开发中占有十分重要的地位。吡唑类化合物因其作用谱广、药效强烈等特点而受到越来越多的关注。在医药应用上吡唑类化合物对许多的疾病具有疗效；在农药应用上，吡唑类化合物具有杀虫、杀菌和除草活性，并且表现出高效、低毒和结构多样性。因此，吡唑类药物具有广阔的研究和开发前景。吡唑也可作为某些光敏材料单体的侧链，具有广泛的应用。结合两种结构的优势，我们设计合成出一系列新的2h-苯并[b][1,4]噁嗪并吡唑化合物，并对其进行了抗肝炎活性测试。

技术实现要素：

本发明解决的技术问题是提供了一种合成方法简单，分子结构新颖，具有抗肝炎活性的2h-苯并[b][1,4]噁嗪并吡唑化合物及其制备方法。

本发明为解决上述技术问题采用如下技术方案，一种新型的具有抗肝炎活性的2h-苯并[b][1,4]噁嗪并吡唑化合物的制备方法，其特征在于具体步骤为：

a、邻氨基苯甲醚与一氧化碳，在醋酸钯作为催化剂，碳酸钠作为碱性物质，甲苯作为溶剂，反应得到1,4-苯并噁嗪酮。

b、1,4-苯并噁嗪酮在劳森试剂作用下，甲苯作为溶剂，反应得到1,4-苯并噁嗪硫酮。

c、1,4-苯并噁嗪硫酮在乙二胺作用下经过烯醇式转变得到化合物2h-苯并[b][1,4]噁嗪硫醇。

d、2h-苯并[b][1,4]噁嗪硫醇与溴代丙醛在三乙胺作用下得到

e、与水合肼发生取代反应得到化合物

f、在氧气条件下发生自身成环，得到化合物

g、与一氧化碳，在醋酸钯作为催化剂，碳酸钠作为碱性物质，甲苯作为溶剂，反应得到

进一步限定，步骤a的具体过程为：在高压釜中，把邻氨基苯甲醚、一定量的醋酸钯和一定量的碳酸钠加入甲苯中，用氮气置换反应釜中的气体后，在真空条件下通入一氧化碳使反应釜中的压力达到0.2mpa；缓慢升高温度至50℃，反应4h后tlc监控原料反应完全，过滤反应液，在真空条件下蒸除溶剂，剩余物加入二氯甲烷中，再用纯净水洗涤三次，有机相经无水硫酸钠干燥后，蒸除溶剂得到1,4-苯并噁嗪酮。

进一步限定，步骤b的具体过程为：在反应瓶中加入1,4-苯并噁嗪酮、劳森试剂和甲苯，加热回流10h，把反应液加入冰水中冷却，用二氯甲烷萃取三次，合并有机相，减压蒸馏出二氯甲烷，得到1,4-苯并噁嗪硫酮。

进一步限定，步骤c的具体过程为：在反应瓶中，把1,4-苯并噁嗪硫酮加入丙酮中，再加入一定量的二乙胺，加入回流一点时间后，tlc监控原料反应完全，蒸除溶剂得到化合物2h-苯并[b][1,4]噁嗪硫醇。

进一步限定，步骤d的具体过程为：在反应瓶中，把2h-苯并[b][1,4]噁嗪硫醇加入到dmf中，再加入一定量的三乙胺和溴代丙醛，升温至110℃反应1h，tlc监控原料反应完全，把反应液倒入冰水中，有大量固体析出，抽滤反应液，滤饼为纯品化合物

进一步限定，步骤e的具体过程为：在反应瓶中，把加入到dmso中，再加入一定量的水合肼，加热至60℃，tlc监控原料反应完全，把反应液倒入水中，有大量固体析出，抽滤反应液，滤饼为纯品化合物

进一步限定，步骤f的具体过程为：在反应瓶中，把加入到dmso中，在o2氛围下加热至100℃，反应3h后经tlc监控，原料反应完全，把反应液倒入水中，有大量固体析出，抽滤反应液，滤饼为纯品化合物

进一步限定，步骤a的具体过程为：在高压釜中，把一定量的醋酸钯和一定量的碳酸钠加入甲苯中，用氮气置换反应釜中的气体后，在真空条件下通入一氧化碳使反应釜中的压力达到0.2mpa；缓慢升高温度至50℃，反应4h后tlc监控原料反应完全，过滤反应液，在真空条件下蒸除溶剂，剩余物加入二氯甲烷中，再用纯净水洗涤三次，有机相经无水硫酸钠干燥后，蒸除溶剂得到

本发明所述的具有抗肝炎活性的2h-苯并[b][1,4]噁嗪并吡唑化合物的制备方法中的合成路线为：

本发明合成了一种具有抗肝炎活性的2h-苯并[b][1,4]噁嗪并吡唑化合物，发现该化合物对急、慢性肝损伤有显著的预防或治疗作用。

具体实施方式

以下通过实施例对本发明的上述内容做进一步详细说明，但不应该将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本发明上述内容实现的技术均属于本发明的范围。

实施例1

在高压釜中，把邻氨基苯甲醚12.3g(0.1mol)、醋酸钯2.5g和碳酸钠20g加入甲苯100ml中，用氮气置换反应釜中的气体后，在真空条件下通入一氧化碳使反应釜中的压力达到0.2mpa；缓慢升高温度至50℃，反应4h后tlc监控原料反应完全，过滤反应液，在真空条件下蒸除溶剂，剩余物加入二氯甲烷100ml中，再用纯净水50ml洗涤三次，有机相经无水硫酸钠50g干燥后，蒸除溶剂得到1,4-苯并噁嗪酮14g

实施例2

在反应瓶中加入1,4-苯并噁嗪酮15g(0.1mol)、劳森试剂30g和甲苯200ml，加热回流10h，把反应液加入冰水200ml中，用二氯甲烷100ml萃取三次，合并有机相，减压蒸馏出二氯甲烷，得到1,4-苯并噁嗪硫酮16g

实施例3

在反应瓶中，把1,4-苯并噁嗪硫酮16.5g加入丙酮200ml中，再加入二乙胺50ml，加热回流一段时间后，tlc监控原料反应完全，蒸除溶剂得到化合物2h-苯并[b][1,4]噁嗪硫醇16g

实施例4

在反应瓶中，把2h-苯并[b][1,4]噁嗪硫醇16g加入到dmf100ml中，再加入三乙胺30ml和溴代丙醛12g(0.1mol)，升温至110℃反应1h，tlc监控原料反应完全，把反应液倒入冰水中，有大量固体析出，抽滤反应液，滤饼为纯品化合物

实施例5

在反应瓶中，把28g(0.1mol)加入到dmso50ml中，再加入水合肼50ml，加热至60℃，tlc监控原料反应完全，把反应液倒入水中，有大量固体析出，抽滤反应液，滤饼为纯品化合物

实施例6

在反应瓶中，把28g(0.1mol)加入到dmso50ml中，在o2氛围下加热至100℃，反应3h后经tlc监控，原料反应完全，把反应液倒入水中，有大量固体析出，抽滤反应液，滤饼为纯品化合物27g；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:7.28-7.27(m,1h),7.16(t,j＝4hz,1h),6.99-6.97(m,2h),3.34-3.32(m,2h),2.46-2.42(m,2h),2.01-2.00(m,2h)；ms-esi(m/z):281.1[m+h⁺]。

实施例7

在高压釜中，把28g、醋酸钯2.8g和碳酸钠20g加入甲苯100ml中，用氮气置换反应釜中的气体后，在真空条件下通入一氧化碳使反应釜中的压力达到0.2mpa；缓慢升高温度至50℃，反应4h后tlc监控原料反应完全，过滤反应液，在真空条件下蒸除溶剂，剩余物加入二氯甲烷中，再用纯净水洗涤三次，有机相经无水硫酸钠干燥后，蒸除溶剂得到20g；¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:7.28-7.27(m,2h),7.16(t,j＝4hz,1h),7.01-7.00(m,1h),2.24(d,j＝4hz,2h),2.22(d,j＝4hz,2h),2.01(s,1h)；ms-esi(m/z):228.3[m+h⁺]。

实施例8

药效学研究

为了评价和比较硫普罗宁及的药效学，采用四氯化碳、d-氨基半乳糖(dag)引起急、慢性肝损伤模型，以血清中转氨酶got、gpt，总蛋白t-p、白蛋白alb、白球比例a/g以及组织中羟脯氨酸、唾液酸、肝胶原含量的变化作为肝功能变化、肝组织纤维化的评价指标，并结合病理组织学检查，对二者的药效学进行评价。药物设计一系列同等剂量进行比较观察，以注射途径进行给药，观察在预防性给药和慢性治疗性给药方式下二者的作用情况，结果显示：

对急性肝损伤模型的作用：

(1)对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的作用：经注射给药后，37.5-150mg/kg能明显抑制ccl4引起的急性肝损伤所致的血清got和gpt的升高(p<0.05、p<0.01)，表明对ccl4引起的急性肝损伤有显著的保护作用。同样试验条件下，硫普罗宁150mg/kg对ccl4引起的急性肝损伤同样具有显著的保护作用。

(2)对d-氨基半乳糖(dag)致小鼠急性肝损伤的作用

预防作用：经预防性注射给药后，高剂量150mg/kg能明显抑制dag引起的急性肝损伤所致的血清got和gpt的升高(p<0.05、p<0.01)，表明能抑制dag引起的急性肝损伤，有显著的保护作用。同样试验条件下，硫普罗宁75-150mg/kg对dag引起的急性肝损伤同样具有显著的保护作用。

治疗作用：治疗32h后，37.5-150mg/kg能明显抑制dag引起的肝损伤所致的血清gpt的升高(p<0.05、p<0.01)，表明短期治疗后，对损伤的肝功能有部分的恢复作用。同样试验条件下，硫普罗宁75-150mg/kg对dag引起的肝损伤，短期治疗后，对损伤的肝功能同样具有部分的恢复作用。

治疗7d后，37.5-150mg/kg能明显抑制dag引起的肝损伤所致的血清gpt、got的升高(p<0.05、p<0.01)，表明长期治疗后，对损伤的肝功能有较好的恢复作用。同样试验条件下，硫普罗宁37.5-150mg/kg对dag引起的肝损伤，长期治疗后，对损伤的肝功能同样具有较好的恢复作用。

对慢性肝损伤模型的作用：

连续注射给药1个月后，50-100mg/kg剂量使升高的转氨酶alt、ast显著降低(p<0.05、p<0.01)，100mg/kg剂量使降低的alb显著升高(p<0.01)，显著升高a/g倒转的比例(p<0.01)；25-100mg/kg剂量显著降低升高的唾液酸含量(p<0.01)，100mg/kg剂量显著降低升高的羟脯氨酸含量(p<0.01)。表明对四氯化碳致慢性肝损伤有显著的治疗作用。同样试验条件下，硫普罗宁100mg/kg对四氯化碳致慢性肝损伤同样有显著的治疗作用。

结论：注射给药对于四氯化碳、d-氨基半乳糖引起的急、慢性肝损伤有显著的预防或治疗作用，作用的剂量和强度与硫普罗宁相当或近似。

以上实施例描述了本发明的基本原理、主要特征及优点，本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明原理的范围下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进均落入本发明保护的范围内。