本发明属于核苷化合物合成领域，更具体地，本发明涉及一种alpha-尿嘧啶核苷的制备方法。
背景技术：
：近年，随着基因组创药的发展，反义寡核苷酸药物被急速开发。alpha-尿嘧啶核苷是合成alpha-构型的反义寡核苷酸的最基础原料。alpha-尿嘧啶核苷除可作为药物开发工具外，还可用于科学研究，特别是功能基因组学研究。但是现有文献报道其在合成关键步骤尚存在难以工业化的局限，无法避免beta-异构体的产生。工业上要想去除此异构体一般要借助制备型色谱或是反复结晶。然而通过制备型色谱制备，无法满足工业化要求，而多次结晶，必然收率降低，也无法满足工业要求。迄今为止还没有适合工业化制备alpha-尿嘧啶核苷的方法。即使是实验室规模的收率也较低，难以规模放量。目前公开报道的主要合成路线有：其中r为h，甲基。但是，该方法中使用的糖的构型明确必须为beta-构型，现市场上难以供应，可获得的皆为alpha/beta异构体的混合物；其次，文献中确认在此反应条件下会有beta-异构体产生，为10～50％，无法避免beta-异构体的产生以及总收率较低，对工业化来说是一大阻力。在医药品的用途中，为了极力抑制由含有的杂质生成的副生成物，有必要使用非常高纯度的寡核苷。因此，本领域迫切需要提供一种有效且无需特别设备，适合大规模工业化生产，可得到高纯度alpha-尿嘧啶核苷的制备方法。技术实现要素：本发明的目的在于提供一种alpha-尿嘧啶核苷的制备方法。在本发明的第一方面，提供了一种结构如式c所示的化合物的制备方法，所述方法包括步骤：使硅烷化保护的尿嘧啶与结构如式b所示的双酯化核糖进行缩合反应，得到结构如式c所示的化合物；其中，r为强吸电子基团；更佳地，所述r选自硝基，氰基，氟基，氯基或其中二者的组合。在另一优选例中，所述r位于苯甲酰基的邻位和/或对位。在另一优选例中，所述硅烷化保护的尿嘧啶是将碱基悬浮于混合溶剂中后加入硅烷化试剂升温至50±2℃而得；所述的混合溶剂是乙腈与二氯乙烷的混合液；所述乙腈与二氯乙烷的体积比为1:3-5。在另一优选例中，所述硅烷化试剂为n,o-双(三甲基硅烷基)乙酰胺或1,1,1,3,3,3,-六甲基二硅烷；所述碱基和硅烷化试剂的摩尔比为1∶2.0-3.0；更佳为1∶2.4-2.8；最佳为1∶2.5。在另一优选例中，所述缩合反应以磺酸为催化剂；所述磺酸为三氟甲磺酸。在另一优选例中，所述缩合反应温度为80-85℃。在本发明的第二方面，本发明提供了一种结构如式a所示的化合物的制备方法，所述方法包括步骤：将如上所述的本发明提供的方法制备得到的结构如式c所示的化合物进行碱解后，进行酸处理得到结构如式a所示的化合物；在另一优选例中，所述的碱解是将结构如式c所示的化合物与浓氨水溶液反应，得到结构如式d所示的化合物；在另一优选例中，所述方法还包括步骤：采用脱保护方法(为常规的方法)将丙酮叉保护基脱除。在另一优选例中，所述方法还包括步骤：将包含结构如式c所示的化合物的产物进行结晶纯化，获得纯化的结构如式c所示的化合物。在另一优选例中，所述方法还包括步骤：将包含结构如式a所示的化合物进行重结晶，获得纯化的结构如式a所示的化合物。在另一优选例中，所述的重结晶采用乙腈重结晶。据此，本发明提供了一种有效且无需特别设备，适合大规模工业化生产，可得到高纯度alpha-尿嘧啶核苷的制备方法。本发明的其它方面由于本文的公开内容，对本领域的技术人员而言是显而易见的。具体实施方式发明人经过广泛的研究和试验，首次发现使用苯环对位为强吸电子基团取代的苯甲酰氯对2,3-丙酮叉-d-核糖进行双酯化，以此修饰糖作为糖基来源，通过一种磺酸作为核苷缩合催化剂，与硅烷化保护的尿嘧啶核苷进行缩合，可以避免副产物beta-异构体的产生。本发明的方法可以简便、经济地大量合成alpha-尿嘧啶核苷，获得非常高纯度的目标化合物。本发明的方法无需特别设备，适合于大规模工业化生产。本发明主要涉及的化合物有：如本文所用，“室温”是指10-30℃，优选为22-28℃。本发明中，所述的alpha-尿嘧啶核苷的结构如下式a：首先，本发明提供了一种用于制备2’,3’-o-异丙基-5’-o-苯甲酰基(r)-alpha-尿嘧啶核苷的中间体化合物的方法，该中间体化合物具有如下式c所示的结构式：所述的式c化合物通过如下合成路线制备获得：第一步，将d-核糖悬浮于丙酮中，在催化剂存在下获得结构如式e所示的化合物；第二步，将结构如式e所示的化合物与结构如式f所示的有取代基r的苯甲酰氯混合得到结构如式b所示的化合物；第三步，使结构如式b所示的化合物和硅烷化保护的尿嘧啶在催化剂存在下进行缩合反应，得到尿嘧啶核苷中间体1(即结构如式c所示的化合物)。上述第一步中使用的催化剂为对甲苯磺酸。在本发明的一种实施方式中，上述第一步是将d-核糖悬浮于丙酮中，加入催化剂对甲苯磺酸，2,2-二甲氧基丙烷，制得结构如式e所示的化合物。在本发明的一种实施方式中，上述第二步是将结构如式e所示的化合物溶于二氯甲烷中，加入三乙胺，然后滴加入结构如式f所示的有取代基r的苯甲酰氯，制得结构如式b所示的化合物。上述第二步中使用的结构如式f所示的化合物中的取代基r为强吸电子基团，位于苯甲酰基的邻位和/或对位；当有两个强吸电子基团时，可以是相同的，也可以是两个不同的强吸电子基团。在本发明的一种较佳实施方式中，所述r选自硝基、氰基、氟基、氯基或其中二者的组合。上述第三步缩合反应中使用的催化剂为磺酸，在本发明的一种实施方式中使用了三氟甲磺酸。上述第三步缩合反应的温度为80-85℃。在本发明的一种实施方式中，上述第三步中使用的硅烷化保护的尿嘧啶可通过下述步骤获得：(i)将碱基尿嘧啶悬浮于混合溶剂中，得到混合物1；所述的混合溶剂是乙腈与二氯乙烷的混合液；(ii)将混合物1与硅烷化试剂混合，加热反应至澄清，得到硅烷化保护的尿嘧啶。在本发明的一种实施方式中，上述第(i)步使用的混合溶剂中乙腈与二氯乙烷的体积比为1:3-5。在本发明的一种实施方式中，上述第(ii)步中使用的硅烷化试剂包括n,o-双(三甲基硅烷基)乙酰胺(n,o-bis(trimethylsiyl)acetamide，bsa)、1,1,1,3,3,3,-六甲基二硅烷(1,1,1,3,3,3-hexamethyldisilazane，hmds)；碱基尿嘧啶和硅烷化试剂的摩尔比为1∶2.0-3.0，较佳的为1∶2.4-2.8，最佳的为1∶2.5。在本发明的一种实施方式中，上述第(ii)步的加热反应温度为50±2℃。本发明还提供一种式a化合物的制备方法，所述方法是用碱处理经过上述步骤得到结构如式c所示的化合物后，将得到的修饰的alpha-尿嘧啶核苷中间体2(即结构如式d所示的化合物)再用酸在水中处理，脱除2’,3’-羟基的丙酮叉保护基得到结构如式a所示的化合物。上述制备式a化合物的方法可以使用本领域常规方式进行碱处理以使结构如式c所示的化合物脱去有取代基r的苯甲酰氯，例如但不限于，将结构如式c所示的化合物与浓氨水混合后在室温下反应。上述制备式a化合物的方法可以使用本领域常规的酸进行脱除2’,3’-羟基的丙酮叉保护基，例如但不限于，使用盐酸。在本发明的一种实施方式中，可以将尿嘧啶核苷中间体2在乙酸乙酯溶液中结晶，得到高纯度的嘧啶核苷中间体2后再用酸在水中处理。在本发明的一种实施方式中，将得到的结构如式a所示的化合物经重结晶纯化，例如但不限于，使用乙腈。本发明的方法，使用特定基团修饰结构的糖在特定催化剂作用下生成单一构型的产物，避免了现有技术中会产生alpha和beta异构体的情况的发生，极大地解决了生产中的问题。本发明提供的方法有效且无需特别设备，适合大规模工业化生产，可得到高纯度alpha-尿嘧啶核苷的制备方法，可满足市场的需求。本发明提到的上述特征，或实施例提到的特征可以任意组合。本案说明书所揭示的所有特征可与任何组合物形式并用，说明书中所揭示的各个特征，可以任何可提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特别说明，所揭示的特征仅为均等或相似特征的一般性例子。本发明的主要优点在于：1、发明人筛选较多条件后，发现可以利用苯环邻位或对位含有强吸电子基团的苯甲酰基修饰d-核糖的1-位羟基成酯后，再在特定的催化剂作用下，可以优势合成alpha-构型的核苷，较大地提高了转化率以及降低了产物纯化难度，便于规模化生产。2、而文献报道的合成方法，都需要特定构型的糖作为糖基来源，来完成化合物的制备。而这种特定构型的糖获取困难，价格昂贵，难以满足市场需求并且整个路线的总收率较低。3、本发明制备过程中无需特殊或危险性试剂，对设备，人员素质等无高等级要求。4、本发明过程简单，便捷，可通过简单的五步反应即可制的目标化合物。5、本发明提供的纯化方法简便，无需特殊设备，成本低廉。6、本发明提供的纯化方法效果显著，目标化合物的含量可以达到99.9％以上。下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，实施例中的定义各试剂的量的百分比(％)是质量体积比(w/v)。本发明下述实施例中的hplc(高效液相色谱)条件：反应监控：柱：ymc-aqc185μm4.6*250mm流速：0.8ml/min波长：260nm流动相：a液：teaa缓冲液(0.1摩尔/升的乙酸水溶液用三乙胺调至ph＝7.0)b液：色谱级乙腈分析过程中a液，b液在线脱气，氦气流速50ml/min。梯度：时间(min)a％b％010004100082080162080201000301000终产品检验hplc条件：柱：ymc-aqc185μm4.6*250mm流速：0.8ml/min波长：260nm流动相：a—甲醇b—10mmol/l醋酸铵溶液。分析过程中a液，b液在线脱气，氦气流速50ml/min。梯度：时间(min)a％b％0010062080162080200100300100实施例一alpha-尿嘧啶核苷的制备(方法一，r＝no2，位于苯甲酰基对位)1.2,6-o-二-对硝基苯甲酰基-3,4-o-丙酮叉-d-核糖的制备：氩气保护下，将100gd-核糖投入到干燥的1l三口反应瓶中，加入500ml丙酮搅拌悬浮；向体系中一次性加入2.53g对甲苯磺酸(一水)，搅拌30min；加冰浴将体系降温至0±3℃，向反应液中滴加2,2-二甲氧基丙烷75.6g，控制温度0±3℃；将反应液回温至15±3℃搅拌反应，反应2h后tlc板显示基本无原料，视为反应结束；然后加入4.8gnahco3搅拌半小时后抽滤，滤液于40±5℃下减压浓缩干，即得im-1粗品，无需纯化，直接用于下一步。向浓缩物中加入800ml二氯甲烷溶解浓缩物，搅拌下加入，201.8g三乙胺，缓慢加入309g对硝基苯甲酰氯。室温搅拌反应1.5小时后，取样tlc板分析，im-1不明显，视为反应结束；反应完毕后，向反应液中加入800ml饱和食盐水，搅拌后分液；有机相再加入800ml饱和食盐水，搅拌后分液；收集水相，加入200ml二氯甲烷反萃一次；合并所有有机相，加入100g无水硫酸钠干燥1小时后过滤。滤液于40±5℃下减压浓缩干，为黄色油状物，即可的图示化合物b粗品，无需纯化。化合物b为含有alpha，beta两种构型的混合物。2.2’3’-o-丙酮叉-alpha-尿嘧啶核苷的制备：向1l反应瓶中，加入44.2guracil，100ml乙腈，400ml二氯乙烷和200gbsa，然后体系于50±2℃下反应2小时。将192.6g化合物b溶于200ml干燥的乙腈:二氯乙烷＝1:4的混合液后倒入反应瓶。将5.9g三氟甲磺酸缓慢倒入反应液中，体系然后将体系升温至83±2℃下反应10小时后降温至室温。向体系中缓慢加入1000ml水，搅拌后分液，有机相再用1000ml水搅拌后分液后再用5％nahco3水溶液1000ml洗涤两次；收集所有水相，加入1l二氯甲烷反萃一遍；收集所有有机相，加入50g无水硫酸钠干燥1小时后过滤。滤液于40±5℃下减压浓缩干，得黄色泡状液体，粗品c不必纯化，直接用于下一步反应中。将此粗品直接用450ml甲醇溶解，搅拌下加入450ml浓氨水，然后体系于25±2℃下反应。当hplc分析原料＜1％时，停止反应。然后将反应体系于50±5℃下减压浓缩至不滴，用无水乙醇1000ml浓缩带水至剩余物呈泡沫状。然后加入1000ml乙酸乙酯于75±5℃下溶解浓缩剩余物。然后体系于10±5℃下搅拌结晶10小时以上，抽滤，滤饼用少量乙酸乙酯淋洗，得到白色固体化合物d，取样hplc分析纯度为99.5％。将固体于45℃下鼓风干燥24小时后得108.5g产品，取样1h-nmr。1h-nmr(dmso-d6)δ(ppm):11.34(s,1h,nh),7.50(d,1h,6-h，j＝8.4hz),6.11(d,1h,1’-h,j＝4.4hz),5.62(dd,1h,5-h),5.15(t,1h,5’-oh,j＝4.8hz),4.84～4.77(m,2h,2’-h,3’-h,),4.33～4.32(m,1h,4’-h),3.57～3.55(m,2h,5’-h),1.36(s,3h,ch3),1.27(s,3h,ch3)。3.alpha-尿嘧啶核苷的制备：将98g化合物d用500ml0.1n盐酸溶解后于20-25℃下搅拌反应；反应24h后取样hplc监控，原料剩余0.21％，产物a99.74％，几乎没有其它副反应产生。反应完毕后，用浓氨水将体系ph调节至7-8，然后于50±5℃减压浓缩至不滴；体系于50±5℃减压浓缩至不滴后，加入500ml无水乙腈于70±5℃溶解剩余物，滤去不溶性杂质，滤液于0±5℃搅拌结晶12小时后，过滤，得到白色固体化合物a，取样hplc分析纯度为99.92％。将固体于45℃下鼓风干燥24小时后得71.8g产品，取样1h-nmr。1h-nmr(dmso-d6)δ(ppm):11.22(s,1h,nh),7.60(d,1h,6-h,j＝8.0hz),6.00(d,1h,1’-h,j＝4.8hz),5.57(d,1h,5-h,j＝8.0hz),5.47(brs,1h,2’-oh),5.10(brs,1h,3’-oh),4.82(brs,1h,5’-oh),4.16(s,1h,2’-h),4.05～3.99(m,2h,3’-h,4’-h),3.60～3.41(m,2h,5’-h)。实施例二alpha-尿嘧啶核苷的制备(r＝cn，位于苯甲酰基对位)1.2,6-o-二-对氰基苯甲酰基-3,4-o-丙酮叉-d-核糖的制备：im-1的制备如前文所述，投料100gd-核糖进行反应制备，即可得im-1粗品。将此粗品用800ml二氯甲烷溶解，搅拌下加入，201.8g三乙胺，缓慢加入275.7g对氰基苯甲酰氯。室温搅拌反应2.5小时后，取样tlc板分析，im-1不明显，视为反应结束；反应完毕后，如前文所述，进行萃取后浓缩干，即得图示化合物b粗品，无需纯化，同样图示化合物b为含有alpha，beta两种构型的混合物。2.2’3’-o-丙酮叉-alpha-尿嘧啶核苷的制备：向1l反应瓶中，加入50guracil，100ml乙腈，400ml二氯乙烷和212gbsa，然后体系于50±2℃下反应2小时。将200g化合物b溶于200ml干燥的乙腈:二氯乙烷＝1:4的混合液后倒入反应瓶。将6.7g三氟甲磺酸缓慢倒入反应液中，然后将体系升温至83±2℃下反应15小时后hplc检测反应完毕，降温至室温后按方法一中所述，进行后处理后得粗品c。将此粗品直接用500ml甲醇溶解，搅拌下加入500ml浓氨水，然后体系于25±2℃下反应。当hplc分析原料＜1％时，停止反应。然后如方法一中所述进行后处理后，得88.5g产品d，hplc纯度99.3％。3.alpha-尿嘧啶核苷的制备：如方法一中所述，将88g化合物d用500ml0.1n盐酸溶解后于20-25℃下搅拌反应；反应24h后取样hplc监控，原料剩余0.14％，产物a99.74％。反应完毕后，如方法一所述进行后处理，得到白色固体化合物a，取样hplc分析纯度为99.9％。将固体于45℃下鼓风干燥24小时后得65.8g产品。实施例三alpha-尿嘧啶核苷的制备(r＝f，位于苯甲酰基对位)1.2,6-o-二-对氟基苯甲酰基-3,4-o-丙酮叉-d-核糖的制备：im-1的制备如前文所述，投料100gd-核糖进行反应制备，即可得im-1粗品。将此粗品用800ml二氯甲烷溶解，搅拌下加入，201.8g三乙胺，缓慢加入264g对氟基苯甲酰氯。室温搅拌反应1.5小时后，取样tlc板分析，im-1不明显，视为反应结束；反应完毕后，如前文所述，进行萃取后浓缩干，即得图示化合物b粗品，无需纯化，同样图示化合物b为含有alpha，beta两种构型的混合物。2.2’3’-o-丙酮叉-alpha-尿嘧啶核苷的制备：向1l反应瓶中，加入50guracil，100ml乙腈，400ml二氯乙烷和212gbsa，然后体系于50±2℃下反应2小时。将193.7g化合物b溶于200ml干燥的乙腈:二氯乙烷＝1:4的混合液后倒入反应瓶。将6.7g三氟甲磺酸缓慢倒入反应液中，然后将体系升温至83±2℃下反应10小时后hplc监控反应完全，降温至室温。如方法一所述进行反应后处理后得粗品c。将此粗品直接用500ml甲醇溶解，搅拌下加入500ml浓氨水，然后体系于25±2℃下反应。反应8小时后hplc分析原料＜1％，停止反应。然后如方法一所述将反应液进行后处理，结晶后得到白色固体化合物d，取样hplc分析纯度为99.5％。将固体于45℃下鼓风干燥24小时后得81.5g产品。4.alpha-尿嘧啶核苷的制备：如方法一中所述方法，投料80g化合物d进行反应，后处理后得到白色固体化合物a，取样hplc分析纯度为99.9％。将固体于45℃下鼓风干燥24小时后得56.8g产品。实施例四alpha-尿嘧啶核苷的制备(r＝cl，位于苯甲酰基对位)1.2,6-o-二-对氯基苯甲酰基-3,4-o-丙酮叉-d-核糖的制备：im-1的制备如前文所述，投料100gd-核糖进行反应制备，即可得im-1粗品。将此粗品用800ml二氯甲烷溶解，搅拌下加入，201.8g三乙胺，缓慢加入264g对氯苯甲酰氯。室温搅拌反应1.5小时后，取样tlc板分析，im-1不明显，视为反应结束；反应完毕后，如前文所述，进行萃取后浓缩干，即得图示化合物b粗品，无需纯化，同样图示化合物b为含有alpha，beta两种构型的混合物。2.2’3’-o-丙酮叉-alpha-尿嘧啶核苷的制备：向1l反应瓶中，加入50guracil，100ml乙腈，400ml二氯乙烷和212gbsa，然后体系于50±2℃下反应2小时。将208g化合物b溶于200ml干燥的乙腈:二氯乙烷＝1:4的混合液后倒入反应瓶。将6.7g三氟甲磺酸缓慢倒入反应液中，然后将体系升温至83±2℃下反应10小时后hplc监控反应完全，降温至室温。如方法一所述进行反应后处理后得粗品c。将此粗品直接用500ml甲醇溶解，搅拌下加入500ml浓氨水，然后体系于25±2℃下反应。反应9小时后hplc分析原料＜1％，停止反应。然后如方法一所述将反应液进行后处理，结晶后得到白色固体化合物d，取样hplc分析纯度为99.6％。将固体于45℃下鼓风干燥24小时后得71.5g产品。3.alpha-尿嘧啶核苷的制备：如方法一中所述方法，投料70g化合物d进行反应，后处理后得到白色固体化合物a，取样hplc分析纯度为99.9％。将固体于45℃下鼓风干燥24小时后得51.8g产品。实施例五alpha-尿嘧啶核苷的制备(方法四，r＝no2，位于苯甲酰基的邻位和对位)1.2,6-o-二-邻，对-二硝基苯甲酰基-3,4-o-丙酮叉-d-核糖的制备：im-1的制备如前文所述，投料100gd-核糖进行反应制备，即可得im-1粗品。将此粗品用800ml二氯甲烷溶解，搅拌下加入，201.8g三乙胺，缓慢加入360.7g2,4-二硝基苯甲酰氯。室温搅拌反应1.5小时后，取样tlc板分析，im-1不明显，视为反应结束；反应完毕后，如前文所述，进行萃取后浓缩干，即得图示化合物b粗品，无需纯化，同样图示化合物b为含有alpha，beta两种构型的混合物。2.2’3’-o-丙酮叉-alpha-尿嘧啶核苷的制备：向1l反应瓶中，加入50guracil，100ml乙腈，400ml二氯乙烷和212gbsa，然后体系于50±2℃下反应2小时。将258g化合物b溶于200ml干燥的乙腈:二氯乙烷＝1:4的混合液后倒入反应瓶。将6.7g三氟甲磺酸缓慢倒入反应液中，然后将体系升温至83±2℃下反应10小时后hplc监控反应完全，降温至室温。如方法一所述进行反应后处理后得粗品c。将此粗品直接用500ml甲醇溶解，搅拌下加入500ml浓氨水，然后体系于25±2℃下反应。反应9小时后hplc分析原料＜1％，停止反应。然后如方法一所述将反应液进行后处理，结晶后得到白色固体化合物d，取样hplc分析纯度为99.1％。将固体于45℃下鼓风干燥24小时后得79.5g产品。3.alpha-尿嘧啶核苷的制备：如方法一中所述方法，投料70g化合物d进行反应，后处理后得到白色固体化合物a，取样hplc分析纯度为99.8％。将固体于45℃下鼓风干燥24小时后得54.6g产品。实施例六alpha-尿嘧啶核苷的制备(r＝cn，位于苯甲酰基的邻位和对位)1.2,6-o-二-邻,对-二氰基苯甲酰基-3,4-o-丙酮叉-d-核糖的制备：im-1的制备如前文所述，投料100gd-核糖进行反应制备，即可得im-1粗品。将此粗品用800ml二氯甲烷溶解，搅拌下加入，201.8g三乙胺，缓慢加入317.4g对2,4-二氰基苯甲酰氯。室温搅拌反应1.5小时后，取样tlc板分析，im-1不明显，视为反应结束；反应完毕后，如前文所述，进行萃取后浓缩干，即得图示化合物b粗品，无需纯化，同样图示化合物b为含有alpha，beta两种构型的混合物。2.2’3’-o-丙酮叉-alpha-尿嘧啶核苷的制备：向1l反应瓶中，加入50guracil，100ml乙腈，400ml二氯乙烷和212gbsa，然后体系于50±2℃下反应2小时。将222g化合物b溶于200ml干燥的乙腈:二氯乙烷＝1:4的混合液后倒入反应瓶。将6.7g三氟甲磺酸缓慢倒入反应液中，然后将体系升温至83±2℃下反应10小时后hplc监控反应完全，降温至室温。如方法一所述进行反应后处理后得粗品c。将此粗品直接用500ml甲醇溶解，搅拌下加入500ml浓氨水，然后体系于25±2℃下反应。反应9小时后hplc分析原料＜1％，停止反应。然后如方法一所述将反应液进行后处理，结晶后得到白色固体化合物d，取样hplc分析纯度为99.1％。将固体于45℃下鼓风干燥24小时后得91.5g产品。3.alpha-尿嘧啶核苷的制备：如方法一中所述方法，投料90g化合物d进行反应，后处理后得到白色固体化合物a，取样hplc分析纯度为99.8％。将固体于45℃下鼓风干燥24小时后得59.1g产品。实施例七alpha-尿嘧啶核苷的制备(r＝f，位于苯甲酰基的邻位和对位)1.2,6-o-二-邻，对-二氟基苯甲酰基-3,4-o-丙酮叉-d-核糖的制备：im-1的制备如前文所述，投料100gd-核糖进行反应制备，即可得im-1粗品。将此粗品用800ml二氯甲烷溶解，搅拌下加入，201.8g三乙胺，缓慢加入299g2,4-二氟苯甲酰氯。室温搅拌反应1.5小时后，取样tlc板分析，im-1不明显，视为反应结束；反应完毕后，如前文所述，进行萃取后浓缩干，即得图示化合物b粗品，无需纯化，同样图示化合物b为含有alpha，beta两种构型的混合物。2.2’3’-o-丙酮叉-alpha-尿嘧啶核苷的制备：向1l反应瓶中，加入50guracil，100ml乙腈，400ml二氯乙烷和212gbsa，然后体系于50±2℃下反应2小时。将209.8g化合物b溶于200ml干燥的乙腈:二氯乙烷＝1:4的混合液后倒入反应瓶。将6.7g三氟甲磺酸缓慢倒入反应液中，然后将体系升温至83±2℃下反应10小时后hplc监控反应完全，降温至室温。如方法一所述进行反应后处理后得粗品c。将此粗品直接用500ml甲醇溶解，搅拌下加入500ml浓氨水，然后体系于25±2℃下反应。反应9小时后hplc分析原料＜1％，停止反应。然后如方法一所述将反应液进行后处理，结晶后得到白色固体化合物d，取样hplc分析纯度为98.5％。将固体于45℃下鼓风干燥24小时后得94.5g产品。3.alpha-尿嘧啶核苷的制备：如方法一中所述方法，投料90g化合物d进行反应，后处理后得到白色固体化合物a，取样hplc分析纯度为99.9％。将固体于45℃下鼓风干燥24小时后得62.3g产品。实施例八alpha-尿嘧啶核苷的制备(r＝cl，位于苯甲酰基的邻位和对位)1.2,6-o-二-邻,对-二氯苯甲酰基-3,4-o-丙酮叉-d-核糖的制备：im-1的制备如前文所述，投料100gd-核糖进行反应制备，即可得im-1粗品。将此粗品用800ml二氯甲烷溶解，搅拌下加入，201.8g三乙胺，缓慢加入349g2,4-二氯苯甲酰氯。室温搅拌反应1.5小时后，取样tlc板分析，im-1不明显，视为反应结束；反应完毕后，如前文所述，进行萃取后浓缩干，即得图示化合物b粗品，无需纯化，同样图示化合物b为含有alpha，beta两种构型的混合物。2.2’3’-o-丙酮叉-alpha-尿嘧啶核苷的制备：向1l反应瓶中，加入50guracil，100ml乙腈，400ml二氯乙烷和212gbsa，然后体系于50±2℃下反应2小时。将236g化合物b溶于200ml干燥的乙腈:二氯乙烷＝1:4的混合液后倒入反应瓶。将6.7g三氟甲磺酸缓慢倒入反应液中，然后将体系升温至83±2℃下反应10小时后hplc监控反应完全，降温至室温。如方法一所述进行反应后处理后得粗品c。将此粗品直接用500ml甲醇溶解，搅拌下加入500ml浓氨水，然后体系于25±2℃下反应。反应9小时后hplc分析原料＜1％，停止反应。然后如方法一所述将反应液进行后处理，结晶后得到白色固体化合物d，取样hplc分析纯度为98.5％。将固体于45℃下鼓风干燥24小时后得99.5g产品。3.alpha-尿嘧啶核苷的制备：如方法一中所述方法，投料90g化合物d进行反应，后处理后得到白色固体化合物a，取样hplc分析纯度为99.9％。将固体于45℃下鼓风干燥24小时后得65.4g产品。实施例九alpha-尿嘧啶核苷的制备(r＝cl，位于苯甲酰基的邻位和r＝f，位于苯甲酰基的对位)1.2,6-o-二-(2-氯-4-氟苯甲酰基)-3,4-o-丙酮叉-d-核糖的制备：im-1的制备如前文所述，投料100gd-核糖进行反应制备，即可得im-1粗品。将此粗品用800ml二氯甲烷溶解，搅拌下加入，201.8g三乙胺，缓慢加入321g2-氯-4-氟苯甲酰氯。室温搅拌反应1.5小时后，取样tlc板分析，im-1不明显，视为反应结束；反应完毕后，如前文所述，进行萃取后浓缩干，即得图示化合物b粗品，无需纯化，同样图示化合物b为含有alpha，beta两种构型的混合物。2.2’3’-o-丙酮叉-alpha-尿嘧啶核苷的制备：向1l反应瓶中，加入50guracil，100ml乙腈，400ml二氯乙烷和212gbsa，然后体系于50±2℃下反应2小时。将222g化合物b溶于200ml干燥的乙腈:二氯乙烷＝1:4的混合液后倒入反应瓶。将6.7g三氟甲磺酸缓慢倒入反应液中，然后将体系升温至83±2℃下反应10小时后hplc监控反应完全，降温至室温。如方法一所述进行反应后处理后得粗品c。将此粗品直接用500ml甲醇溶解，搅拌下加入500ml浓氨水，然后体系于25±2℃下反应。反应9小时后hplc分析原料＜1％，停止反应。然后如方法一所述将反应液进行后处理，结晶后得到白色固体化合物d，取样hplc分析纯度为98.5％。将固体于45℃下鼓风干燥24小时后得109g产品。3.alpha-尿嘧啶核苷的制备：如方法一中所述方法，投料100g化合物d进行反应，后处理后得到白色固体化合物a，取样hplc分析纯度为99.9％。将固体于45℃下鼓风干燥24小时后得74.4g产品。实施例十alpha-尿嘧啶核苷的制备(r＝cl，位于苯甲酰基的邻位和r＝no2，位于苯甲酰基的对位)1.2,6-o-二-(2-氯-4-硝基苯甲酰基)-3,4-o-丙酮叉-d-核糖的制备：im-1的制备如前文所述，投料100gd-核糖进行反应制备，即可得im-1粗品。将此粗品用800ml二氯甲烷溶解，搅拌下加入，201.8g三乙胺，缓慢加入366g2-氯-4-硝基苯甲酰氯。室温搅拌反应1.5小时后，取样tlc板分析，im-1不明显，视为反应结束；反应完毕后，如前文所述，进行萃取后浓缩干，即得图示化合物b粗品，无需纯化，同样图示化合物b为含有alpha，beta两种构型的混合物。2.2’3’-o-丙酮叉-alpha-尿嘧啶核苷的制备：向1l反应瓶中，加入50guracil，100ml乙腈，400ml二氯乙烷和212gbsa，然后体系于50±2℃下反应2小时。将245.7g化合物b溶于200ml干燥的乙腈:二氯乙烷＝1:4的混合液后倒入反应瓶。将6.7g三氟甲磺酸缓慢倒入反应液中，然后将体系升温至83±2℃下反应10小时后hplc监控反应完全，降温至室温。如方法一所述进行反应后处理后得粗品c。将此粗品直接用500ml甲醇溶解，搅拌下加入500ml浓氨水，然后体系于25±2℃下反应。反应9小时后hplc分析原料＜1％，停止反应。然后如方法一所述将反应液进行后处理，结晶后得到白色固体化合物d，取样hplc分析纯度为98.9％。将固体于45℃下鼓风干燥24小时后得95g产品。3.alpha-尿嘧啶核苷的制备：如方法一中所述方法，投料90g化合物d进行反应，后处理后得到白色固体化合物a，取样hplc分析纯度为99.9％。将固体于45℃下鼓风干燥24小时后得68.4g产品a。以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并非用以限定本发明的实质技术内容范围，本发明的实质技术内容是广义地定义于申请的权利要求范围中，任何他人完成的技术实体或方法，若是与申请的权利要求范围所定义的完全相同，也或是一种等效的变更，均将被视为涵盖于该权利要求范围之中。当前第1页12