本发明涉及生物与新医药
技术领域：
，特别是涉及一种克拉霉素中间体4″-O-(三甲基硅)红霉素A9-O-(1-乙氧基-1-甲基乙基)肟的合成方法。
背景技术：
：目前克拉霉素合成方法是以红霉素盐(红霉素硫氰酸盐)为原料，经过肟化反应、醚化反应、硅烷化反应、甲基化反应、还原脱保护五步化学反应完成，其中克拉霉素醚化反应、硅烷化反应是采用一锅法合成的，具体为：红霉素经过肟化反应得到红霉素肟，减压蒸馏除去溶剂，然后用CH2Cl2将红霉素肟溶解，冰水浴降温至5℃～30℃，依次加原料0.5-2.5(mol)的醚化试剂2-乙氧基丙烯与原料0.5-3.5(mol)的醚化催化剂盐酸吡啶，反应1min～30min，TLC监控反应进程；待反应结束后，直接向反应液中加原料1.0-2.0(mol)的硅烷化试剂六甲基二硅氮烷与0.01-0.1倍(m/m)的硅烷化催化剂，TLC监控反应进程，反应0.5h～1.5h结束，反应液后处理得克拉霉素硅烷化物[2′，4″-O-双(三甲基硅)红霉素A9-O-(1-乙氧基-1-甲基乙基)肟]粗品；之后将克拉霉素硅烷化物[2′，4″-O-双(三甲基硅)红霉素A9-O-(1-乙氧基-1-甲基乙基)肟]粗品进行甲基化反应、还原脱保护得到克拉霉素。由于在酸性条件下，2′-位硅烷化与4″-的硅烷化是竞争性反应，然而，现有技术中硅烷化反应的时候硅烷化试剂六甲基二硅氮烷的加量有偏过，并且受到化学反应的限度影响，2′,4″-两个位硅烷化反应不能完全彻底，反应结束后总有少量未完全反应的2′-位硅烷化物与4″-位硅烷化物残留物，并且含量很低，导致提纯难度大，不能有效的与阿奇霉素分离。4″-O-(三甲基硅)红霉素A9-O-(1-乙氧基-1-甲基乙基)肟是阿奇霉素产品中的一个重要的杂质，影响阿奇霉素的质量。因此，阿奇霉素产品中4″-O-(三甲基硅)红霉素A9-O-(1-乙氧基-1-甲基乙基)肟含量的控制的前提是要能准确的检测出来，这就需要有纯的对照品作为参照物。为了解决这个问题，我们合成出来了含量高、易提纯的4″-O-(三甲基硅)红霉素A9-O-(1-乙氧基-1-甲基乙基)肟。技术实现要素：本发明的目的就在于克拉霉素中间体4″-O-(三甲基硅)红霉素A9-O-(1-乙氧基-1-甲基乙基)肟的合成方法。研究表明：在酸性条件下，以六甲基二硅氮烷为硅烷化试剂时，克拉霉素硅烷化反应，在2′-OH位与4″-OH位是分步进行的，主要是由于：六甲基二硅氮烷在酸性条件下分解出三甲基硅正离子，并且3′-叔胺基酸性条件下带正电，具有排斥作用，因而三甲基硅正离子在2′-OH位不易硅烷化反应，导致4″-OH位硅烷化反应要比2′-OH位容易。因此，控制硅烷化催化剂和硅烷化试剂加量及反应时间等条件，就可以选择性的合成克拉霉素中间体[4″-O-(三甲基硅)红霉素A9-O-(1-乙氧基-1-甲基乙基)肟]。基于上述理由，本发明采用下述技术方案：一种4″-O-(三甲基硅)红霉素A9-O-(1-乙氧基-1-甲基乙基)肟的合成方法，其特征在于其工艺包括以红霉素肟为原料依次进行的醚化反应和硅烷化反应，其中所述硅烷化反应过程为：直接向醚化反应所得的红霉素肟醚化保护物反应液中加入六甲基二硅氮烷和硅烷化催化剂咪唑，在温度5℃～60℃条件下反应3min～60min，反应彻底后加水终止反应，上述六甲基二硅氮烷用量为红霉素肟摩尔量的0.3～0.6，硅烷化催化剂咪唑用量为红霉素肟质量的0.01～0.2倍，水的用量为红霉素肟质量的0.1～2.0倍。所述醚化反应过程为：先将红霉素肟用其质量的2～10倍CH2Cl2溶解，搅拌状态下计入其质量0.1～0.3倍的醚化催化剂盐酸吡啶，待反应液溶清后加入红霉素肟摩尔量0.5～3.5倍的2-乙氧基丙烯，控制温度5℃～30℃，反应约1min-～60min，即可。将硅烷化反应后的反应液分相，所得有机相用无水硫酸钠干燥、过滤、减压蒸馏即得目标化合物4″-O-(三甲基硅)红霉素A9-O-(1-乙氧基-1-甲基乙基)肟粗品。所述反应液分相处理1-4次，每次分相后将水相用CH2Cl2萃取，合并有机相后再次进行分相处理。所得目标化合物4″-O-(三甲基硅)红霉素A9-O-(1-乙氧基-1-甲基乙基)肟粗品CH2Cl2-CH3OH混合溶剂重结晶，得到纯度90.2％以上的纯品。所述重结晶是指，将目标化合物4″-O-(三甲基硅)红霉素A9-O-(1-乙氧基-1-甲基乙基)肟粗品先用热二氯甲烷溶解，冷却至室温，再向其中滴加甲醇，有较多固体析出后过滤。本发明采用对硅烷化试剂、硅烷化催化剂加量及反应时间等条件的准确控制，定向的、高选择性的合成出了克拉霉素中间体4″-O-(三甲基硅)红霉素A9-O-(1-乙氧基-1-甲基乙基)肟。合成得到的克拉霉素中间体4″-O-(三甲基硅)红霉素A9-O-(1-乙氧基-1-甲基乙基)肟具有纯度高、产率高等优势，得到的化合物4″-O-(三甲基硅)红霉素A9-O-(1-乙氧基-1-甲基乙基)肟纯品可以作为克拉霉素杂质检测的对照品。本发明方法反应试剂毒性低且环境友好，反应过程较简便、易操作、反应条件温和、易控制并且产率高，产物分离纯化简单且纯化的纯度高。说明书附图图1为本发明技术路线图。具体实施方式下面用实例予以说明本发明，应该理解的是，实例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。本发明的范围与核心内容依据权利要求书加以确定。实施例1醚化反应：称取10.0g(0.0133mol)红霉素肟加入到500mL反应瓶中，用50mL的CH2Cl2溶解，搅拌下加2.32g(0.0200mol)的醚化催化剂盐酸吡啶，待反应液溶清(溶解澄清至透明)后加入2.09g(0.0243mol)的2-乙氧基丙烯，控制温度15℃，反应3min，TLC跟踪反应过程，反应结束后不经任何处理，所得红霉素肟醚化保护物(EMWM)反应液备用。硅烷化反应：直接向上步得到的反应液(EMWM)中加1.08g(0.0067mol)的六甲基二硅氮烷与0.35g(0.0051mol)的硅烷化催化剂咪唑，控制温度20℃，反应约45min，TLC跟踪反应过程，反应彻底后加5mL水终止反应(此反应对水非常敏感，水是此反应的抑制剂)。后处理：将上述硅烷化反应液分相，其中水相继续用20mL×2的CH2Cl2萃取，合并两次有机相；在合并后有机相中加15mL水并用30％的NaOH溶液调节pH至11并分相，其中水相继续用20mL×2的CH2Cl2萃取，合并两次有机相；再将合并后的有机相用15mL水洗并分相，水相用20mL×2的CH2Cl2萃取后，合并有机相；所得有机相用5mL饱和食盐水洗一次，静置分相，所得有机相用10.0g的无水硫酸钠干燥并过滤，滤液减压蒸馏除去溶剂，得9.01g目标化合物4″-O-(三甲基硅)红霉素A9-O-(1-乙氧基-1-甲基乙基)肟粗品，产率74.4％，纯度71.15％。重结晶：将上述粗品用CH2Cl2-CH3OH混合溶剂重结晶(将产物用热二氯甲烷的溶解，冷却至室温，再向其中滴加甲醇，有较多固体析出后过滤)后可获得纯度90.8％纯度的产物，重结晶收率95.2％。实施例2醚化反应：称取12.0g(0.0160mol)红霉素肟加入到500mL反应瓶中，用60mL的CH2Cl2溶解，搅拌下加2.76g(0.0239mol)的醚化催化剂盐酸吡啶，待反应液溶清(溶解澄清至透明)后加入2.50g(0.0290mol)的2-乙氧基丙烯，控制温度15℃，反应2min，TLC跟踪反应过程，反应结束后不经任何处理，所得红霉素肟醚化保护物(EMWM)反应液备用。硅烷化反应：直接向上步得到的反应液(EMWM)中加1.27g(0.0079mol)的六甲基二硅氮烷与0.42g(0.0062mol)的硅烷化催化剂咪唑，控制温度20℃，反应约50min，TLC跟踪反应过程，反应彻底后加6mL水终止反应。后处理：将上述硅烷化反应液进行分相，其中水相继续用24mL×2的CH2Cl2萃取，合并两次有机相；在合并后的有机相中加18mL水并用30％的NaOH溶液调节pH至10并分相，其中水相继续用24mL×2的CH2Cl2萃取，合并两次有机相；再讲合并后有机相用18mL水洗，水相用24mL×2的CH2Cl2萃取，合并有机相；合并后有机相用6mL饱和食盐水洗一次，静置分相；所得有机相用12.0g的无水硫酸钠干燥并过滤，滤液减压蒸馏除去溶剂，得10.9g目标化合物4″-O-(三甲基硅)红霉素A9-O-(1-乙氧基-1-甲基乙基)肟粗品，产率75.0％，纯度71.54％。重结晶：将此粗品用CH2Cl2-CH3OH混合溶剂重结晶(将产物用热二氯甲烷的溶解，冷却至室温，再向其中滴加甲醇，有较多固体析出后过滤)后可获得纯度90.3％的产物，重结晶收率96.4％。实施例3醚化反应：称取15.0g(0.0200mol)红霉素肟加入500mL反应瓶中，用80mL的CH2Cl2溶解，搅拌下加3.45g(0.0299mol)的醚化催化剂盐酸吡啶，待反应液溶清(溶解澄清至透明)后加入3.15g(0.0366mol)的2-乙氧基丙烯，控制温度15℃，反应5min，TLC跟踪反应过程，反应结束后不经任何处理，所得红霉素肟醚化保护物(EMWM)反应液备用。硅烷化反应：直接向上步得到的反应液(EMWM)中加1.61g(0.0100mol)的六甲基二硅氮烷与0.52g(0.0076mol)的硅烷化催化剂咪唑，控制温度20℃，反应约60min，TLC跟踪反应过程，反应彻底后加8mL水终止反应。后处理：将上述硅烷化反应分相，其中水相继续用30mL×2的CH2Cl2萃取，合并两次有机相；合并后有机相加25mL水并用30％的NaOH溶液调节pH至12并分相，水相继续用30mL×2的CH2Cl2萃取，合并有机相；合并后有机相用25mL水洗，并且水相用30mL×2的CH2Cl2萃取，合并有机相；合并后有机相用8mL饱和食盐水洗一次，静置分相；所得有机相用15.0g的无水硫酸钠干燥并过滤，滤液减压蒸馏除去溶剂，得13.6g目标化合物4″-O-(三甲基硅)红霉素A9-O-(1-乙氧基-1-甲基乙基)肟粗品，产率74.9％，纯度71.55％。重结晶：将此粗品用CH2Cl2-CH3OH混合溶剂重结晶(将产物用热二氯甲烷的溶解，冷却至室温，再向其中滴加甲醇，有较多固体析出后过滤)后可获得纯度91.2％的产物，重结晶收率95.4％。实施例4醚化反应：称取20.0g(0.0267mol)红霉素肟加入500mL反应瓶中，用100mL的CH2Cl2溶解，搅拌下加4.63g(0.0400mol)的醚化催化剂盐酸吡啶，待反应液溶清(溶解澄清至透明)后加入4.2g(0.0488mol)的2-乙氧基丙烯，控制温度15℃，反应2.5min，TLC跟踪反应过程，反应结束后不经任何处理，所得红霉素肟醚化保护物(EMWM)反应液备用。硅烷化反应：直接向上步得到的反应液(EMWM)中加2.16g(0.0134mol)的六甲基二硅氮烷与0.7g(0.0103mol)的硅烷化催化剂咪唑，控制温度20℃，反应约40min，TLC跟踪反应过程，反应彻底后加15mL水终止反应。后处理：将上述硅烷化反应分相，其中水相继续用40mL×2的CH2Cl2萃取，合并两次有机相；合并后有机相加35mL水并用30％的NaOH溶液调节pH至10.5并分相，水相用40mL×2的CH2Cl2萃取，合并有机相；合并后有机相用35mL水洗，并且水相用40mL×2的CH2Cl2萃取，合并有机相；合并后有机相用10mL饱和食盐水洗一次，静置分相；所得有机相用20.0g的无水硫酸钠干燥并过滤，滤液减压蒸馏除去溶剂，得17.9g目标化合物4″-O-(三甲基硅)红霉素A9-O-(1-乙氧基-1-甲基乙基)肟粗品，产率74.0％，纯度70.93％。重结晶：将此粗品用CH2Cl2-CH3OH混合溶剂重结晶(将产物用热二氯甲烷的溶解，冷却至室温，再向其中滴加甲醇，有较多固体析出后过滤)后可获得纯度90.7％以上纯度的产物，重结晶收率95.8％。对照例醚化反应：称取20.0g(0.0267mol)红霉肟加入500mL反应瓶中，用100mL的CH2Cl2溶解，搅拌下加4.63g(0.0400mol)的醚化催化剂盐酸吡啶，待反应液溶清(溶解澄清至透明)后加入4.2g(0.0488mol)的2-乙氧基丙烯，控制温度15℃，反应2.5min，TLC跟踪反应过程，反应结束后不经任何处理，所得红霉素肟醚化保护物(EMWM)反应液备用。硅烷化反应：直接向上步得到的反应液(EMWM)中加4.3g(0.0266mol)的六甲基二硅氮烷与0.7g(0.0103mol)的硅烷化催化剂咪唑，控制温度30℃，反应约40min，TLC跟踪反应过程，反应彻底后加15mL水终止反应。后处理：反应液分相，水相用40mL×2的CH2Cl2萃取，合并有机相；有机相加35mL水并用30％的NaOH溶液调节pH至10.5并分相，水相用40mL×2的CH2Cl2萃取，合并有机相；有机相用35mL水洗，并且水相用40mL×2的CH2Cl2萃取，合并有机相；有机相用10mL饱和食盐水洗一次，静置分相；有机相用20.0g的无水硫酸钠干燥并过滤，滤液减压蒸馏除去溶剂，得18.9g目标化合物4″-O-(三甲基硅)红霉素A9-O-(1-乙氧基-1-甲基乙基)肟粗品，产率72.0％，纯度80.93％。重结晶：将此粗品用CH2Cl2-CH3OH混合溶剂重结晶后可获得纯度87.2％以上纯度的产物，重结晶收率95.8％。表Ⅰ：4″-O-(三甲基硅)红霉素A9-O-(1-乙氧基-1-甲基乙基)肟粗品统计表Ⅱ：4″-O-(三甲基硅)红霉素A9-O-(1-乙氧基-1-甲基乙基)肟纯品统计2′-硅烷化物含量％2′-,4″-双硅烷化物含量％4″-硅烷化物含量％实施例12.221.2190.8实施例21.881.1190.3实施例32.020.9791.2实施例42.111.0290.7对照例3.2180.514.15当前第1页1 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