快速检测大肠杆菌和沙门氏菌的试剂盒的制作方法

本实用新型属于食品快速检测设施和设备的研发和设计技术领域，具体公开了一种快速检测大肠杆菌和沙门氏菌的试剂盒。

背景技术：

食源性致病菌的大肠杆菌和沙门氏菌，对人类生命健康造成的极大的威胁。据调查，主要传播媒介为果蔬和即食食品、奶制品、肉制品、水产品等。因此，为避免此类食品中毒事件发生，应在食品保藏与流通过程中加强对其进行实时监控，快速而准确的检测大肠杆菌和沙门氏菌的消长情况。目前，我国检测大肠杆菌和沙门氏菌主要以传统检测方法为主，但该法耗时较长，工作量大，且不能实现快速检测。因此，开发一种操作简单、灵敏性高、特异性强且检测成本低廉的商品级的试剂盒迫在眉睫。

技术实现要素：

本实用新型的目的：设计一款试剂盒，这个试剂盒操作简单，价格低廉，能快速针对大肠杆菌和沙门氏菌进行检测，并且能尽可能的做到粗定量或半定量的检测。

本实用新型的技术方案：快速检测大肠杆菌和沙门氏菌的试剂盒，包括盒盖和盒体，盒盖为透明材质制成，在盒盖外表面设有具有色度差的条形标准色板，以及与标准色板对应的菌液浓度刻度表；盒体内设有对照区，对照区内设有由疏水材质制成的对照底板及在对照底板上设有由亲水材质制成的圆形对照片；在盒体内还设有可卡接容纳吸管的卡接区；在盒体内还设有一个可以来回推拉开合的反应柜，在反应柜内设有底板，底板是由疏水材质制成的反应底板及亲水材质制成的显色板组成，显色板是由圆形加样片及对应设置在其左右两边的圆形底物反应片组成，底物反应片与加样片之间通过泳道片连接；所述对照片、加样片及底物反应片直径均为0.6cm或0.7cm；所述泳道片长度为0.6cm，宽度为0.1cm或0.2cm；所述底物反应片分别添加了不同底物显色物质。

进一步，在盒盖内还预设信息标示框；吸管的吸液量为50uL或60uL；所述的底物显色物质为5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷X-gal和β-萘酚辛酸酯β-NAPHTHYL CAPRYLATE，具体液量为5uL或7.5uL。在相邻相连的底板和对照底板之间均分别设有撕扯线。

有益效果：本试剂盒根据酶底物显色原理，将富集一定时间大肠杆菌、沙门氏菌液混匀滴加到包埋特异性底物的底物反应片内发生显色反应（β-萘酚辛酸酯β-NAPHTHYL CAPRYLATE，用来测沙门氏菌，显紫色；5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷X-gal，用来测大肠杆菌显蓝色），通过扫描仪拍照，结合ImageJ进行灰度值测量，可实现对大肠杆菌和沙门氏菌的半定量或粗定量的快速检测。

附图说明

附图1为本实用新型的主视结构示意图；图2为相连底板示意图；图3为相连对照底板示意图。

具体实施方式

实施例1、快速检测大肠杆菌和沙门氏菌的试剂盒，如图1、图2及图3所示，包括盒盖1和盒体2，所述盒盖1为透明材质制成，在盒盖1外表面设有具有色度差的条形标准色板10，以及与标准色板10对应的菌液浓度刻度表11；所述盒体2内设有对照区22，对照区22内设有由疏水材质制成的对照底板3及在对照底板3上设有由亲水材质制成的圆形对照片30；在盒体2内还设有可卡接容纳吸管的卡接区21；在盒体2内还设有一个可以来回推拉开合的反应柜20，在反应柜20内设有底板4，底板4是由疏水材质制成的反应底板40及亲水材质制成的显色板组成，显色板是由圆形加样片42及对应设置在其左右两边的圆形底物反应片41组成，底物反应片41与加样片42之间通过泳道片43连接；所述对照片30、加样片42及底物反应片41直径均为0.6cm或0.7cm；所述泳道片43长度为0.6cm，宽度为0.1cm或0.2cm；所述底物反应片41分别添加了不同的底物显色物质。

进一步设计，在盒盖1内还预设信息标示框12。

进一步设计，吸管7的吸液量为50uL或60uL。

进一步设计，所述的底物显色物质为5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷X-gal和β-萘酚辛酸酯β-NAPHTHYL CAPRYLATE，具体液量为5uL或7.5uL。

进一步设计，在相邻相连的底板4和对照底板3之间均分别设有撕扯线44。

实践中，将颜色反应—灰度值—菌液浓度关系用excel2007进行数据处理，并建立回归方程，可以建立大肠杆菌回归方程y1=15.503x - 0.5863，R²=0.959，沙门氏菌回归方程y2=17.173x+12.199，R²=0.9334。这样，建立了菌液浓度-灰度值的回归方程，将直观但有时肉眼难以辨别的颜色深浅转化成了的灰度值，可以建立标准色板和与标准色板对应的菌液浓度刻度表。

操作时， 将菌液（待检测的大肠杆菌和沙门氏菌混合液）用吸管吸好滴入加样片上，菌液通过泳道片流向底物反应片上与底物反应显现出颜色，然后，可以盖上盒盖，拉动反应柜，因为盒盖是透明的，所以可以拉着反应柜，直接进行肉眼观察，比对标准色板上的颜色，读取出最接近的菌液浓度值就可以快速定性甚至半定量的检测结果。