NRF2化合物的制作方法

本发明涉及化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其药学上可接受的盐，特别是其葡甲胺盐，包含该化合物的药物组合物及其作为nrf2活化剂的用途。

背景技术：

nrf2(nf-e2相关因子2)为含特征性碱性-亮氨酸拉链基序的转录因子的帽和领(cap-n-collar，cnc)家族的一员。在基础条件下，nrf2水平受胞质肌动蛋白结合阻抑物keap1(kelch-样ech相关的蛋白1)的紧密控制，keap1结合nrf2并通过基于cul3的e3-泛素连接酶复合物靶向nrf2用于泛素化和蛋白酶体降解。在氧化应激的条件下，dj1(park7)被活化并且通过阻止nrf2与keap1相互作用来稳定nrf2蛋白。同样，keap1上反应性半胱氨酸的修饰可在keap1中导致构象变化，该变化改变nrf2结合并促进nrf2稳定。因此，细胞中nrf2的水平通常在正常条件下保持较低，但系统设计为通过增加nrf2水平并因此增加下游nrf2活性来快速响应环境应激。

在面临持续氧化应激时不适当低的nrf2活性表现出为慢性阻塞性肺病(copd)的潜在病理机制。yamada,k.等人bmcpulmonarymedicine,2016,16:27。这可能是nrf2活化剂与正性活化剂(例如dj1)的不适当缺少和负性调节剂(例如keap1和bach1)的过剩之间的平衡发生改变的结果。因此，copd患者肺中nrf2活性的恢复应当会使所述失衡修复并且缓和有害过程例如结构细胞(包括肺泡上皮细胞和内皮细胞)的凋亡和炎症。这些作用的结果是在copd肺中增强细胞保护作用、维持肺结构和实现结构修复，从而减慢疾病进展。因此，nrf2活化剂可治疗copd(boutten,a.，等人2011.trendsmol.med.17:363-371)和其他呼吸系统疾病，包括哮喘，急性肺损伤(ali)(cho，h.y.，和kleeberger，s.r.，2015，archtoxicol.89:1931-1957；zhao，h.等人，2017，amjphysiollungcleemolphysiol312:l155-l162，2016年11月18日首次出版；doi:10.1152/ajplung.00449.2016)，急性呼吸窘迫综合征(ards)和肺纤维化(cho，h.y.，和kleeberger，s.r.2010.toxicol.appl.pharmacol.244:43-56)。

nrf2活化剂的治疗潜力在来自copd患者的肺巨噬细胞中举例说明，其中nrf2途径似乎是适应不良的。与来自对照患者的类似细胞相比，这些细胞具有受损的细菌吞噬作用，并且该作用通过体外添加nrf2活化剂而得到逆转。因此，除了上面提到的作用，适当的nrf2活性的恢复也可通过降低肺感染来挽救copd恶化。

这一点通过nrf2活化剂莱菔硫烷(sulforaphane)得到证明，莱菔硫烷增加来自暴露于香烟烟雾的小鼠的copd巨噬细胞和肺泡巨噬细胞的具有胶原结构的巨噬细胞受体(marco)的表达，由此在这些细胞中提高体外和体内的细菌吞噬作用(铜绿假单胞菌(pseudomonasaeruginosa)、非典型流感嗜血杆菌(non-typablehaemophilusinfluenzae))和细菌清除率(harvey，c.j.，等人2011.sci.transl.med.3:78ra32)。

靶向肺中的nrf2的治疗潜能不限于copd。更准确地说，靶向nrf2途径可治疗其他呈现氧化应激组分的人类肺病和呼吸系统疾病，例如慢性哮喘和急性哮喘、继发于环境暴露(包括但不限于臭氧、柴油机废气和职业性暴露)的肺病、纤维化、急性肺感染(例如，病毒(noah，t.l.等人2014.plosone9(6):e98671)、细菌或真菌)、慢性肺感染、α1抗胰蛋白酶病、ali、ards和囊性纤维化(cf，chen，j.等人2008.plosone.2008；3(10):e3367)。

靶向所述nrf2途经的治疗也在肺和呼吸系统外具有多种潜在用途。nrf2活化剂可能对其有用的很多疾病是自身免疫疾病(银屑病、ibd、ms)，这表明nrf2活化剂可大体上用于自身免疫疾病。

在临床上，靶向nrf2途径的药物(甲基巴多索隆，bardoxolonemethyl)已在患有糖尿病性肾病/慢性肾病(ckd)的糖尿病病人中显示效力(aleksunes,l.m.，等人2010.j.pharmacol.exp.ther.335:2-12)，但在患有ckd的最严重阶段的患者中用该药物进行的iii期试验已被终止。此外，有证据猜想这样的治疗在败血症-诱导的急性肾损伤、其他急性肾损伤(aki)(shelton，l.m.，等人2013.kidneyinternational,jun19.doi：10.1038/ki.2013.248.)和在肾移植过程中观察到的肾病或肾机能障碍中会是有效的。

在心脏区域中，目前正在患有肺动脉高压的患者中对甲基巴多索隆进行研究，因此通过其他机制靶向nrf2的药物也可用在该疾病领域中。患病心肌中的氧化应激增加，导致活性氧簇(ros)积聚，从而损害心脏功能[circ(1987)76(2)；458-468]并增加对心律失常的易感性[jofmol&cellcardio(1991)23(8)；899-918]，其通过增加的坏死和凋亡的直接毒性作用进行[circres(2000)87(12)；1172-1179]。在压力超负荷(tac)的小鼠模型中，nrf2基因和蛋白质表达在心脏适应性肥大的早期阶段增加，但在与收缩功能障碍相关的适应不良心脏重塑的后期减少[arteriosclerthrombvascbiol(2009)29(11)；1843-51850；plosone(2012)7(9)；e44899]。此外，nrf2活化已被证明在压力超负荷(tac)的小鼠模型中可抑制心肌的氧化应激以及心脏细胞凋亡、纤维化、肥大和功能障碍[arteriosclerthrombvascbiol(2009)29(11)；jofmol&cellcardio(2014)72；305-315；和1843-1850；plosone(2012)7(9)；e44899]。nrf2活化也被证明在小鼠中可以预防心脏i/r损伤[circres(2009)105(4)；365-374；jofmol&cellcardio(2010)49(4)；576-586]并减少大鼠心脏i/r损伤后的心肌氧化损伤。因此，通过其他机制靶向nrf2的药物可用于多种心血管疾病，包括但不限于动脉粥样硬化、高血压和心力衰竭(oxidativemedicineandcelllongevityvolume2013(2013)，文章id104308，第10页)、急性冠状动脉综合征、心肌梗塞、心肌修复、心脏重塑、心律失常、射血分数保留的心力衰竭、射血分数降低的心力衰竭和糖尿病性心肌病。

活化nrf2途经的药物也可用于治疗严重的神经变性疾病包括帕金森病(pd)、阿尔茨海默病(ad)、肌萎缩侧索硬化(als)(brainres.2012mar29；1446:109-18.2011.12.064.epub，2012年1月12日)和多发性硬化(ms)。多个体内模型已证明，nrf2ko小鼠与它们相应的野生型相比对神经毒性损伤更敏感。在大脑缺血-再灌注模型中，用nrf2活化剂叔丁基氢醌(tbhq)治疗大鼠降低了大鼠中的皮质损伤，并且在nrf2野生型而非ko小鼠中，在给药tbhq后皮质谷胱甘肽水平增加(shih，a.y.,等人2005.j.neurosci.25:10321–10335)。tecfidera^tm(富马酸二甲酯)(其活化其他靶点，其中包括nrf2)已被美国批准用于治疗复发-缓解性多发性硬化(ms)。nrf2的活化也帮助治疗弗里德赖希氏共济失调病例，其中已报道对氧化应激的敏感性增加和nrf2活化受损(paupev.，等人，2009.plosone；4(1):e4253)。omaveloxolone(rta-408)也在用于弗里德赖希氏共济失调的临床试验中。

有临床前证据证明了nrf2途径在炎性肠病(ibd、克罗恩氏病和溃疡性结肠炎)和/或结肠癌模型中的特异性保护作用(khor,t.o.，等人，2008.cancerprev.res.(phila)1:187-191)。

在年龄超过50岁的人中，年龄相关的黄斑变性(amd)是失明的常见原因。吸烟是非新生血管型(干型)amd发展的主要危险因子，并且可能也是新生血管型(湿型)amd的主要危险因子。在体外和临床前物种中的发现支持这样的观点，即nrf2途径涉及在视网膜上皮细胞的抗氧化响应和眼损伤临床前模型的炎症的调节(schimel，等人，2011.am.j.pathol.178:2032-2043)。富克斯角膜内皮营养不良(fecd)(fuchsendothelialcornealdystrophy)为进行性致盲疾病，特征在于角膜内皮细胞凋亡。这是一种老年病并且增加的氧化应激与低水平的nrf2表达和/或功能相关(bitar,m.s.，等人2012.investophthalmol.vis.sci.,2012年8月24日，第53卷，第9期，5806-5813)。此外，nrf2活化剂可用于葡萄膜炎或其他炎性眼病。

非酒精性脂肪肝(nash)为肝脏中的脂肪沉积、炎症和损伤的疾病，其发生在很少饮酒或不饮酒的患者中。在临床前模型中，当用甲硫氨酸-和胆碱-不足的膳食激发时，在缺少nrf2的ko小鼠中，nash的发展被大大加速(chowdhrys.，等人2010.freerad.biol.&med.48：357-371)。在进食胆碱-不足的l-氨基酸-限定的膳食的大鼠中，给药nrf2活化剂奥替普拉和nk-252显著削弱组织性异常特别是肝纤维化的进展(shimozonor.等人2012,molecularpharmacology.84:62-70)。可顺应nrf2调节的其他肝病为毒素-诱导的肝病(例如，对乙酰氨基酚-诱导的肝病)、病毒性肝炎和肝硬化(oxidativemedicineandcellularlongevityvolume2013(2013)，文章id763257，第9页)。

近来的研究也已开始阐明ros在皮肤疾病例如银屑病中的作用。在银屑病患者中进行的研究显示了血清丙二醛和一氧化氮终产物的增加和红细胞-超氧化物歧化酶活性、过氧化氢酶活性和总抗氧化剂状态的降低，它们在每种情况下都与疾病的严重指数相关(dipalip.k.，等人indianjclinbiochem.2010年10月；25(4):388–392)。同样，nrf2活化剂可用于治疗皮炎/辐射的局部作用(m.等人2010.genes&devl.24:1045-1058)，以及用于由于辐射暴露导致的免疫抑制(kimj.h.等人，j.clin.invest.2014年2月3日；124(2):730-41)。

还有数据表明，nrf2活化剂在先兆子痫中可为有益的，所述先兆子痫为在2-5％妊娠人群中发生的疾病并且涉及高血压和蛋白尿(annalsofanatomy-anatomischeranzeigervolume196，issue5，2014年9月，第268–277页)。

哈-格二氏早老综合征(hutchinson-gilfordprogeriasyndrome，早衰)是一种罕见的，必定致命的过早衰老的疾病。该疾病是由早衰蛋白的组成型产生引起的，早衰蛋白是核结构蛋白核纤层蛋白a的突变形式，通过未知机制导致各种形态学、表观遗传学和基因组损伤以及体内间充质干细胞(msc)消耗。有发现将nrf2介导的抗氧化反应的抑制鉴定为早衰表型的关键因素(kubben，n.等人，2016,cell165，1361–1374)。

心肾综合征是心脏和肾脏之间复杂且双向的相互关系。柚皮素(ng)是一种天然存在的黄酮类化合物，具有多种生物学和药理学特性。ng增加了nrf2的表达。nrf2的抑制显著抑制ng诱导的angii处理的心脏成纤维细胞中gclc表达的增加(liu等，journalofsurgicalresearch，2016年6月15日(203)416-423)。

临床前数据已表明，具有nrf2活化活性的化合物在逆转高海拔-诱导的损害方面比不具有nrf2活性的化合物更好，使用的是急性高山病的动物和细胞模型(liskc等人，2013，freeradicbiolmed.2013年10月；63：264–273.)

还有数据表明nrf2活化剂可能对镰状细胞病(scd)有益，scd是由β-珠蛋白基因中的点突变引起的遗传性疾病，导致异常成形的红细胞的产生。镰状细胞容易发生溶血，并由此将游离血红素释放到血浆中，引起氧化应激和炎症，进而导致多个器官受损(keleku-lukwete，n.等人，2015，pnas，第112卷，第39期，12169-12174；belcher，j.d.等人，antioxidants&redoxsignaling，2016，doi：10.1089/ars.2015.6571；owusu-anash，a.等人，front.med.2015，9(1)：46-56)。

nrf2活化剂已公开于2015年6月25日公开的wo2015/092713和2016年6月15日提交的共同在审的专利申请pct/ib2016/053544；2016年6月15日提交的pct/ib2016/053545；2016年12月6日提交的pct/us2016/057387；和2016年6月15日提交的pct/cn2016/085806。

特别是，β-立体中心的立体异构体混合物，其包含50％本发明的化合物((r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸)，在pct/cn2016/085806中作为实施例79(3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸)公开。s-β-立体中心异构体为(s)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，在pct/cn2016/085806中作为实施例258公开。

应理解本发明的化合物为调节nrf2浓度的keap1复合物的抑制剂/拮抗剂。抑制keap1蛋白导致nrf2的活化/激动。现已发现本发明化合物特别可用于活化nrf2。

技术实现要素：

在一方面，本发明提供化合物，其为(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其药学上可接受的盐。

在第二方面，本发明提供化合物，其为(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其葡甲胺盐。

在另一方面，本发明提供化合物，其为(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸的(-)-1-脱氧-1-(甲基氨基)-d-葡萄糖醇盐。应理解其为(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸的葡甲胺盐。

在另一方面，本发明提供化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸或其药学上可接受的盐作为nrf2活化剂的用途。应理解本发明提供化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其葡甲胺盐，作为nrf2活化剂的用途。

在另一方面，本发明提供药物组合物，其包含(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的赋形剂。具体地，本发明涉及用于治疗nrf2-调节的疾病或障碍(包括本文公开的呼吸和非呼吸障碍)的药物组合物，其中所述组合物包含化合物，其为(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的赋形剂。应理解本发明的药物组合物包含(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其葡甲胺盐，和药学上可接受的赋形剂。

在另一方面，本发明提供治疗呼吸和非呼吸障碍的方法，所述障碍包括copd、哮喘、ali、ards、纤维化、慢性哮喘、急性哮喘、继发于环境暴露的肺病、急性肺感染、慢性肺感染、α1抗胰蛋白酶疾病、囊性纤维化、自身免疫性疾病、糖尿病肾病、慢性肾病、脓毒病-诱导的急性肾损伤、急性肾损伤(aki)、肾移植中发生的肾病或肾功能障碍、肺动脉高压、高血压、心力衰竭、急性冠状动脉综合征、心肌梗塞、心肌修复、心脏重塑、心律失常、射血分数保留的心力衰竭、射血分数降低的心力衰竭、糖尿病性心肌病、动脉粥样硬化、帕金森病(pd)、阿尔茨海默病(ad)、弗里德赖希氏共济失调(fa)、肌萎缩侧索硬化(als)、多发性硬化(ms)、炎性肠病、结肠癌、新生血管性(干型)amd和新生血管性(湿型)amd、眼损伤、富克斯角膜内皮营养不良(fecd)、葡萄膜炎或其它炎性眼病症、非酒精性脂肪性肝炎(nash)、毒素-诱导的肝疾病(例如，对乙酰氨基酚-诱导的肝病)、病毒性肝炎、肝硬化、牛皮癣、皮炎/辐射的局部作用、由于辐射暴露引起的免疫抑制、先兆子痫、高海拔疾病、镰状细胞疾病(scd)、早衰症和心肾综合征(crs)，其包括向需要的患者，特别是人，给药治疗有效量的化合物，其为(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其药学上可接受的盐。应理解本发明提供治疗本文公开的呼吸和非呼吸障碍的方法，其包括向需要的患者，特别是人，给药治疗有效量的化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其葡甲胺盐。

在另一方面，本发明提供化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸或其药学上可接受的盐用于治疗本文公开的呼吸和非呼吸障碍的用途。应理解本发明提供化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其葡甲胺盐，用于治疗本文公开的呼吸和非呼吸障碍的用途。

在另一方面，本发明涉及化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸或其药学上可接受的盐在制备用于治疗本文公开的呼吸和非呼吸障碍的药物中的用途。应理解本发明提供化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其葡甲胺盐，在制备用于治疗本文公开的呼吸和非呼吸障碍的药物中的用途。

在另一方面，本发明涉及化合物，其为(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸或其药学上可接受的盐，其用于治疗本文公开的呼吸和非呼吸障碍。应理解本发明提供化合物，其为(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其葡甲胺盐，其用于治疗本文公开的呼吸和非呼吸障碍。

在另一方面，本发明提供治疗高血压、心力衰竭、急性冠状动脉综合征、心肌梗塞、心肌修复、心脏重塑、心律失常、射血分数保留的心力衰竭、射血分数降低的心力衰竭、糖尿病性心肌病、scd、早衰症和crs的方法，其包括向需要的患者，特别是人给药治疗有效量的化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其药学上可接受的盐。应理解本发明提供治疗本文所述的疾病的方法，其包括向需要的患者，特别是人给药治疗有效量的化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其葡甲胺盐。

在另一方面，本发明提供化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其药学上可接受的盐，用于治疗高血压、心力衰竭、急性冠状动脉综合征、心肌梗塞、心肌修复、心脏重塑、心律失常、射血分数保留的心力衰竭、射血分数降低的心力衰竭、糖尿病性心肌病、scd、早衰症和crs的用途。应理解本发明提供化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其葡甲胺盐用于治疗本文所述的疾病的用途。

在另一方面，本发明涉及化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其药学上可接受的盐，在制备用于治疗高血压、心力衰竭、急性冠状动脉综合征、心肌梗塞、心肌修复、心脏重塑、心律失常、射血分数保留的心力衰竭、射血分数降低的心力衰竭、糖尿病性心肌病、scd、早衰症和crs的药物中的用途。应理解本发明提供化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其葡甲胺盐，在制备用于治疗本文所述的疾病的药物中的用途。

在另一方面，本发明涉及化合物，其为(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其药学上可接受的盐，其用于医学治疗。应理解本发明提供化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其葡甲胺盐，其用于医学治疗。

在另一方面，本发明涉及化合物，其为(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其药学上可接受的盐，其用于治疗高血压、心力衰竭、急性冠状动脉综合征、心肌梗塞、心肌修复、心脏重塑、心律失常、射血分数保留的心力衰竭、射血分数降低的心力衰竭、糖尿病性心肌病。应理解本发明涉及化合物，其为(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其葡甲胺盐，其用于治疗本文所述的疾病。

在另一方面，本发明涉及治疗心力衰竭的方法，其包括向需要的患者，特别是人给药治疗有效量的化合物，其为(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其药学上可接受的盐。应理解本发明涉及治疗心力衰竭的方法，其包括给药向需要的患者，特别是人给药治疗有效量的化合物，其为(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其葡甲胺盐。

在另一方面，本发明涉及化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其药学上可接受的盐用于治疗心力衰竭的用途。应理解本发明涉及化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其葡甲胺盐，用于治疗心力衰竭的用途。

在另一方面，本发明涉及化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其药学上可接受的盐在制备用于治疗心力衰竭的药物中的用途。应理解本发明涉及化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其葡甲胺盐，在制备用于治疗心力衰竭的药物中的用途。

在另一方面，本发明涉及化合物，其为(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其药学上可接受的盐，其用于治疗心力衰竭。应理解本发明涉及化合物，其为(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其葡甲胺盐，其用于治疗心力衰竭。

在一个实施方案中，本发明涉及化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其药学上可接受的盐，特别是，其葡甲胺盐，作为活性治疗物质的用途。更具体地，本发明提供化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其药学上可接受的盐，特别是，其葡甲胺盐，用于治疗呼吸和非呼吸障碍，具体地，本文所述的疾病或障碍的用途。因此，本发明提供化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其药学上可接受的盐，特别是，其葡甲胺盐，作为活性治疗物质治疗患有呼吸和非呼吸障碍，具体地，本文所述的疾病或障碍的有需要的人的用途。具体地，本发明提供化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其药学上可接受的盐，特别是，其葡甲胺盐，作为活性治疗物质治疗心力衰竭的用途。

此外，本发明提供化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其药学上可接受的盐，特别是，其葡甲胺盐，用于治疗高血压、心力衰竭、急性冠状动脉综合征、心肌梗塞、心肌修复、心脏重塑、心律失常、射血分数保留的心力衰竭、射血分数降低的心力衰竭、糖尿病性心肌病的用途。因此，本发明提供化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其药学上可接受的盐，特别是，其葡甲胺盐，作为活性治疗物质治疗患有以下疾病的有需要的患者，特别是人的用途：高血压、心力衰竭、急性冠状动脉综合征、心肌梗塞、心肌修复、心脏重塑、心律失常、射血分数保留的心力衰竭、射血分数降低的心力衰竭、糖尿病性心肌病。具体地，本发明提供化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其药学上可接受的盐，特别是，其葡甲胺盐，作为活性治疗物质治疗心力衰竭的用途。

在一方面，本发明提供化合物，其为(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其药学上可接受的盐、溶剂合物或水合物。

本发明的其它方面和优点在其实施方案的以下发明详述中进一步描述。

发明详述

附图简述:

图1为实施例2化合物的晶形的x-射线粉末衍射(xrpd)图，该化合物为(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸的(-)-1-脱氧-1-(甲基氨基)-d-葡萄糖醇盐。

在一个实施方案中，本发明涉及化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸(“本发明的化合物”)，或其药学上可接受的盐，特别是，其葡甲胺盐。

本发明的化合物，(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸(使用iupac命名规范命名)，通过以下化学式描述:

本领域技术人员应理解，上述化合物，(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，具有r-β立体中心。

应理解本文提及的化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸或其盐包括作为游离形式的化合物，或作为其盐，例如作为其药学上可接受的盐。因此，在一个实施方案中，本发明涉及化合物，其为(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸。在另一实施方案中，本发明涉及化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸的盐。在另一实施方案中，本发明涉及化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸的药学上可接受的盐。在另一实施方案中，本发明涉及化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸或其盐。在另一实施方案中，本发明涉及化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸或其药学上可接受的盐。化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸的特别优选的盐为其葡甲胺盐。在另一实施方案中，本发明的化合物为(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸的(-)-1-脱氧-1-(甲基氨基)-d-葡萄糖醇盐(本发明的化合物的葡甲胺盐)的晶形，其特征在于图1的xprd图。在另一实施方案中，本发明的具体化合物为(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸的(-)-1-脱氧-1-(甲基氨基)-d-葡萄糖醇盐的晶形，其特征在于表2中的衍射数据。

该化合物，(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其药学上可接受的盐，特别是，其葡甲胺盐，基于其调节nrf2途径并由此引发响应的能力，具有潜在的有益效果。因此，该化合物可用于治疗本文所述的疾病和障碍。特别是，有证据证明化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸，或其药学上可接受的盐，特别是，其葡甲胺盐，在狗中具有增强的口服生物利用度(当相比于s-β-立体中心异构体)，从而在哺乳动物(包括人)中，使其成为治疗心力衰竭以及本文公开的其他疾病和病症的潜在成功药物，特别是对于口服给药途径。

化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸的单独的立体异构体，包含一个或多个不对称中心且可通过本领域技术人员已知的方法拆分。例如，这样的拆分可通过如下方式进行：(1)形成非对映异构体盐、复合物或其它衍生物；(2)选择性地与立体异构体特异性试剂反应，例如酶性氧化反应或还原反应；或(3)在手性环境中通过气相-液相或液相色谱法，例如，在手性负载物例如结合手性配体的硅胶上或在手性溶剂的存在下。本领域技术人员理解的是，当通过上述分离操作之一将所需的立体异构体转变成另一种化学实体时，还需要释放所需形式的另一步骤。可选择地，具体的立体异构体可通过使用光学活性的试剂、底物、催化剂或溶剂的不对称合成或通过不对称转化将一种对映异构体转变成其它对映异构体来合成。

本申请使用的“药学上可接受的”是指那些化合物(包括盐)、物质、组合物和剂型，它们在合理的医学判断范围内适用于与人类和动物的组织接触，无过度的毒性、刺激或其它问题或并发症，与合理的利益/风险比相称。

本领域技术人员将理解可制备化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸的药学上可接受的盐。这些药学上可接受的盐可在所述化合物的最终分离和纯化过程中原位制备或分别用适当的碱或酸单独处理其游离酸或游离碱形式的经纯化的化合物来制备。

本发明的化合物包含酸性官能团，因此，能够用合适的碱处理而形成药学上可接受的碱加成盐。代表性药学上可接受的碱加成盐包括，但不限于，铝、2-氨基-2-(羟基甲基)-1,3-丙二醇(tris、缓血酸胺)、精氨酸、苯乙苄胺(n-苄基苯乙基胺)、苄星青霉素(n,n’-二苄基乙二胺)、双(2-羟基乙基)胺、铋、钙、氯普鲁卡因、胆碱、克立咪唑(1-对氯苄基-2-吡咯烷-1’-基甲基苯并咪唑)、环己基胺、二苄基乙二胺、二乙基胺、二乙基三胺、二甲基胺、二甲基乙醇胺、多巴胺、乙醇胺、乙二胺、l-组氨酸、铁、异喹啉、勒皮啶、锂、赖氨酸、镁、葡甲胺(n-甲基葡糖胺)、哌嗪、哌啶、钾、普鲁卡因、奎宁、喹啉、钠、锶、叔丁基胺和锌。

本发明的化合物还包含碱性官能团，因此，能够用合适的酸处理而形成药学上可接受的酸加成盐。代表性药学上可接受的酸加成盐包括，但不限于，4-乙酰氨基苯甲酸盐、乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐(benzenesulfonate，besylate)、苯甲酸盐、硫酸氢盐、酒石酸氢盐、丁酸盐、乙二胺四乙酸钙、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐(camphorsulfonate，camsylate)、癸酸盐(十碳酸盐)、己酸盐(caproate，hexanoate)、辛酸盐(caprylate，octanoate)、肉桂酸盐、柠檬酸盐、环己氨基磺酸盐、二葡糖酸盐、2,5-二羟基苯甲酸盐、二琥珀酸盐、十二烷基硫酸盐(dodecylsulfate，estolate)、乙二胺四乙酸盐(edetate，ethylenediaminetetraacetate)、月桂基硫酸盐(estolate，laurylsulfate)、乙烷-1,2-二磺酸盐(乙二磺酸盐)、乙磺酸盐(ethanesulfonate，esylate)、甲酸盐、富马酸盐、半乳糖酸盐(粘酸盐)、龙胆酸盐(2,5-二羟基苯甲酸盐)、葡庚糖酸盐(glucoheptonate，gluceptate)、葡萄糖酸盐、葡萄糖醛酸盐、谷氨酸盐、戊二酸盐、甘油磷酸盐、乙醇酸盐、己基间苯二甲酸盐、马尿酸盐、哈胺(hydrabamine)(n,n'-二(去氢枞基)-乙二胺)、氢溴酸盐、盐酸盐、氢碘酸盐、羟基萘甲酸盐、异丁酸盐、乳酸盐、乳糖醛酸盐、月桂酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐(methanesulfonate，mesylate)、甲基硫酸盐、粘酸盐、萘-1,5-二磺酸盐(萘二磺酸盐)、萘-2-磺酸盐(萘磺酸盐)、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、对氨基苯磺酸盐、对氨基水杨酸盐、双羟萘酸盐(pamoate，embonate)、泛酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、苯乙酸盐、苯乙基巴比妥酸盐、磷酸盐、聚半乳糖醛酸盐、丙酸盐、对甲苯磺酸盐(p-toluenesulfonate，tosylate)、焦谷氨酸盐、丙酮酸盐、水杨酸盐、癸二酸盐、硬脂酸盐、碱式醋酸盐、琥珀酸盐、氨基磺酸盐、硫酸盐、丹宁酸盐、酒石酸盐、8-氯茶碱盐(teoclate，8-chlorotheophyllinate)、硫氰酸盐、三乙基碘化物、十一酸盐、十一碳烯酸盐和戊酸盐。

药学上可接受的盐尤其包括berge，j.pharm.sci.，1977，66，1-19中所述的那些，或phstahl和cgwermuth，编辑，handbookofpharmaceuticalsalts；properties,selectionanduse,secondeditionstahl/wermuth:wiley-vch/vhca,2011(参见http://www.wiley.com/wileycda/wileytitle/productcd-3906390519.html)中所列的那些。

化合物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸可以固体或液体形式存在。在固态时，其可以结晶或非结晶形式存在或以它们的混合物形式存在。本领域技术人员理解的是，药学上可接受的溶剂合物可由结晶化合物形成，其中溶剂分子在结晶过程中结合在晶格中。溶剂合物可包括非水溶剂例如但不限于乙醇、异丙醇、dmso、乙酸、乙醇胺或乙酸乙酯，或者它们可包括水作为溶剂，所述溶剂结合在晶格中。当水为结合在晶格中的溶剂时，这样的溶剂合物通常被称作"水合物"。水合物包括化学计量的水合物以及含有可变量水的组合物。

技术人员还理解的是，本发明的化合物以结晶形式存在，且可以多晶型形式(即，以不同结晶结构出现的能力)存在。这些不同的结晶形式通常被称作"多晶型物"。本发明包括所有这样的多晶型物。多晶型物具有相同的化学组成，但是在结晶固态的堆积、几何排列和其他描述性性质方面不同。因此，多晶型物可具有不同的物理性质例如形状、密度、硬度、变形性、稳定性和溶出性质。多晶型物通常具有不同的熔点、ir光谱和x-射线粉末衍射图谱，这些可用于鉴别。技术人员理解的是，不同的多晶型物可例如通过改变或调整制备所述化合物中使用的反应条件或试剂结晶/重结晶该化合物中使用的条件来生产。例如，温度、压力或溶剂的变化可导致多晶型物。此外，一种多晶型物在某些条件下可自发地转变成另一种多晶型物。

本领域技术人员熟知和理解，获得粉末x射线衍射(xrpd)图案所涉及的装置、湿度、温度、粉末晶体的取向以及其他参数可能导致衍射图案中线条的外观、强度和位置的一些变化。与本文提供的图“基本上一致”的粉末x射线衍射图是本领域技术人员认为的表示具有与提供该图的xrpd图谱的化合物相同的晶型的化合物的xrpd图。例如，xrpd图谱可以与图1的图案相同，或者更可能的是它可能稍微不同。这样的xrpd图案可能不一定显示本文所呈现的衍射图案的每条线，和/或可能表现出所述线的外观、强度或位移的微小变化，这是由于获得数据所涉及的条件的差异所导致的。通过比较它们的xrpd图谱，本领域技术人员能够确定结晶化合物的样品是否具有与本文公开的形式相同的形式或不同的形式。例如，本领域技术人员可将(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸的(-)-1-脱氧-1-(甲基氨基)-d-葡萄糖醇盐的晶形样品的xrpd图谱覆盖图1的xrpd图谱，并且使用本领域的专业和知识，容易地确定样品的xrpd图案是否基本上与图1的xrpd图案一致。如果xrpd图案基本上与图1一致，则样品形式可以容易地和精确地鉴定为具有与本文所述的(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸的(-)-1-脱氧-1-(甲基氨基)-d-葡萄糖醇盐的晶形相同的形式。类似地，本领域技术人员能够确定从xrpd图案获得的给定衍射角(以°2θ表示)是否位于与所述值大约相同的位置。

本发明还包括同位素标记的化合物，其与式(i)及其附属式中所示的化合物相同，差别在于一个或多个原子被具有与天然通常发现的原子量或原子数不同的原子替换。可掺入本发明化合物及其药学上可接受的盐中的同位素的实例包括氢的同位素、碳的同位素、氮的同位素、氧的同位素、磷的同位素、硫的同位素、氟的同位素、碘的同位素和氯的同位素，例如²h、³h、¹¹c、¹³c、¹⁴c、¹⁵n、¹⁷o、¹⁸o、³¹p、³²p、³⁵s、¹⁸f、³⁶cl、¹²³i和¹²⁵i。

含有上述同位素和/或其它原子的其它同位素的本发明化合物及其药学上可接受的盐在本发明的范围内。本发明的同位素标记的化合物，例如其中掺入放射性同位素例如³h，¹⁴c的那些化合物用在药物和/或底物组织分布测定中。氚代的即³h和碳-14即¹⁴c同位素由于其易制备和易检测性是特别优选的。¹¹c和¹⁸f同位素在pet(正电子发射断层成像)中是特别有用的，¹²⁵i同位素在spect(单光子发射计算机断层成像)中是特别有用的，它们全部都用在脑成像中。此外，用较重的同位素例如氘即²h取代可获得一些治疗优势，这是由于较高的代谢稳定性例如体内半衰期增加或剂量需求减小，因此在一些情况下是优选的。同位素标记的本发明的式(i)化合物及其后续化合物通常可通过实施下面方案和/或实施例中描述的操作来制备，其中用容易获得的同位素标记的试剂代替非同位素标记的试剂。

化合物制备

本领域技术人员会理解的是，如果本申请描述的取代基与本申请描述的合成方法不相容，所述取代基可用对反应条件稳定的适当的保护基保护。可在反应顺序反应的适当点除去所述保护基，得到所需的中间体或目标化合物。适当的保护基和使用所述适当的保护基保护不同取代基和将其脱保护的方法是本领域技术人员熟知的；适当的保护基的实例可在t.greeneandp.wuts，protectinggroupsinchemicalsynthesis(3rded.)，johnwiley&sons，ny(1999)中找到。在一些实例中，可具体选择在所使用的反应条件下是反应性的取代基。在这些情况下，所述反应条件将所选择的取代基转化成另一个取代基，该另一个取代基用作中间体化合物或者为目标化合物中的一个期望的取代基。

本发明化合物及其药学上可接受的衍生物和盐的合成可如下面方案1–4中所示来完成。缩写如实施例部分中所定义。起始原料是商购的或使用本领域技术人员已知的方法从商购的起始原料来制备。

方案1

条件：a)nan3；b)h2，pd/c；c)mgso4，nabh4；d)kotbu，boc2o；e)hcl

方案2

条件：a)bh3-dms；b)nah，pmb-cl

方案3

条件：a)menh2，etoh；b)nbs；c)fe，hcl；d)t-buono，hf-bf3；e)t-bu-丙烯酸酯，pd(oac)2，p(o-tol)3；f)tfa；g)pivcl，licl；h)mg，cubr-dms；i)mgbr，etoh；j)ddq；k)socl2；l)lioh

方案4

生物活性

如上所述，本发明化合物是nrf2活化剂，且可用于治疗表现出氧化应激成分如呼吸和非呼吸系统障碍的人类疾病，包括copd、哮喘、ali、ards、纤维化、慢性哮喘、急性哮喘、继发于环境暴露的肺病、急性肺感染、慢性肺感染、α1抗胰蛋白酶疾病、囊性纤维化、自身免疫性疾病、糖尿病肾病、慢性肾病、脓毒病-诱导的急性肾损伤、aki、肾移植中发生的肾病或肾功能障碍、肺动脉高压、高血压、心力衰竭、急性冠状动脉综合征、心肌梗塞、心肌修复、心脏重塑、心律失常、射血分数保留的心力衰竭、射血分数降低的心力衰竭、糖尿病性心肌病、动脉粥样硬化、pd、ad、fa、als、ms、炎性肠病、结肠癌、新生血管性(干型)amd和新生血管性(湿型)amd、眼损伤、fecd、葡萄膜炎或其它炎性眼病症、nash、毒素-诱导的肝疾病(例如、对乙酰氨基酚-诱导的肝病)、病毒性肝炎、肝硬化、牛皮癣、皮炎/辐射的局部作用、由于辐射暴露引起的免疫抑制、先兆子痫、高海拔疾病、scd、早衰症和crs。

此外，本发明的化合物，或其药学上可接受的盐，特别是，其葡甲胺盐，可用于治疗高血压、心力衰竭、急性冠状动脉综合征、心肌梗塞、心肌修复、心脏重塑、心律失常。

本发明化合物或其药学上可接受的盐，特别是其葡甲胺盐的生物活性可以使用用于测定候选化合物作为nrf2活化剂的活性的任何合适的测试以及组织和体内模型来测定。

通过以下试验证明了本发明化合物或其药学上可接受的盐，特别是其葡甲胺盐的生物活性。

beas-2bnqo1mtt测试

nad(p)h：苯醌氧化还原酶1(nqo1)也被称作dt心肌黄酶，其为含同型二聚fad的酶，该酶催化醌的强制性nad(p)h-依赖性两电子还原并且保护细胞免受由一电子还原生成的自由基和活性氧簇的毒性和瘤形成作用。nqo1的转录受到nrf2的精细调节，因此nqo1活性是nrf2活化的良好标志物。在第一天，将冷冻的beas-2b细胞(atcc)在水浴中解冻、计数并且以250,000个细胞/ml的浓度重新悬浮。将50微升的细胞接种在384孔黑色透明底的板中。将板在37℃，5％co2培养过夜。第二天，将板离心并向细胞中加入50nl化合物或对照物。然后将板在37℃，5％co2培养48h。第四天，将介质从所述板抽走并通过以下方式制备粗制的细胞裂解物：添加13μl1xcellsignalingtechnologies溶胞缓冲液，其中每10ml溶胞缓冲液加入1片完全、迷你、无edta蛋白酶抑制剂片(roche)。溶胞后，将板在室温培养20分钟。取出2微升裂解液用于celltiterglo测定(promega)中并且制备mtt混合物(mttcocktail)(prochaska等人1998)，用于测量nqo1活性。向每个孔中加入50微升的mtt混合物，将板离心并在envision读板器(perkinelmer)上使用吸光度570nm标签分析30分钟。产物形成是动态测量的并且nqo1特异性活性诱导的ec50是通过将吸收的变化(δod/min)相对于化合物浓度的对数作图然后进行3-参数拟合计算的。

nrf2-keap1fp测试

用于nrf2-keap1相互作用的一个模型是通过nrf2上的neh2结构域中的两个结合位点。这两个位点被称作dlg结合基序(闩锁结构域(latchdomain)，μm级亲和性)和etge结合基序(铰链结构域，nm级亲和力)。所述keap1蛋白由n-末端区域(ntr)、宽复合物(broadcomplex)、tramtrack和bricka’brac结构域(btb)、插入区(interveningregion，ivr)、双甘氨酸重复结构域(dgr或kelch)和c-末端区域构成。nrf2的neh2结构域的dlg和etge基序以不同亲和力与keap1的kelch结构域结合。在keap1kelch荧光偏振(fp)测定中，使用tamra-标记的16聚肽(affaqlqldeetgefl)，该肽含有nrf2的etge基序和keap1的kelch结构域(321-609)。该测定确定了化合物是否干扰keap1(361-609)与tamra-标记的肽之间的结合。tamra-标记的nrf2肽与keap1(321-609)的结合导致高fp信号。如果化合物干扰所述肽与所述蛋白之间的结合，这会造成测定信号降低。因此，测定信号与结合抑制成反比。

fp测试

将100nl于dmso中的100x化合物剂量响应曲线(连续3-倍稀释液)用echo液体操作系统(labcyte)加入到384-孔低体积黑色测定板(greiner，#784076)中，其中dmso在第6和第18列中。最高浓度的化合物位于第1和13列中。将keap1(321-609)在1x测定缓冲液(50mmtris，ph8.0，100mmnacl，5mmmgcl2，1mmdtt，2mmchaps和0.005％bsa)中稀释至40nm(2x)并且用配备有金属尖分配器的multidropcombi(thermoelectroncorporation)添加5ul至化合物板的所有孔中，第18列除外。第18列仅接受5ul测定缓冲液。随即，将5μl16nm(2x)的tamra标记的肽(affaqlqldeetgefl，21^stcenturybiochemicals)加至所述板的所有孔中。将所述板以500rpm旋转1min，在室温培养1小时并在配备激发(530/25nm)和发射(580/10nm)滤光片的analystgt(moleculardevices)上读数，所述滤光片针对tamra探针设计。在analyst中还使用了561nm分色镜。keap1(321-609)和tamra标记的肽的最终测定浓度分别为20nm和8nm。荧光测量结果(以mp表示)用在数据的转化中。化合物活性是基于抑制百分比计算的，相对于测定中的对照进行标准化(对照1同时含有tamra肽和keap1(321-609)(0％响应)，对照2只含有tamra肽(100％响应))。使用软件包abasexe(surrey，unitedkingdom)对数据分析进行加工。％抑制值是通过以下方程计算的：

100-(100*((化合物响应-平均对照2)/(平均对照1-平均对照2)))。为了计算pic50，abasexe使用四参数方程。

nrf2-keap1tr-fret测试

在nrf2-keap1tr-fret(时间分辨荧光共振能量转移)测定中，使用全长nrf2蛋白和全长keap1蛋白(keap1以二聚体存在)。该测定检测化合物替代flaghis标记的keap1与生物素化的、avi标记的nrf2蛋白的结合的能力。生物素-nrf2与抗生蛋白链菌素-铕(检测混合物的组分)结合，并且keap1-flaghis被抗flagapc(别藻蓝蛋白)抗体(也是检测混合物的组分)识别。如果在两种蛋白质之间发生结合，则将存在从615nm处的eu+3(供体)到665nm处的apc(受体)的能量转移。潜在的keap1抑制剂将通过干扰keap1与nrf2的结合而引起tr-fret信号的减少。

使用echo液体处理系统(labcyte)将在dmso中的100纳升的100x化合物剂量响应曲线(连续3倍稀释)冲压到384孔低容量黑色测定板(greiner，#784076)中，dmso在第6列和第18列。化合物的最高浓度位于第1列和第13列。所有的试剂在测定缓冲液(50mmtris，ph8.0,5mmmgcl2，100mmnacl，0.005％bsa，1mmdtt和2mmchaps)中稀释。在测定当天将bsa、dtt和chaps加入到测定缓冲液中。使用装配有金属头分配器的multidropcombi(thermoelectroncorporation)，除了第18栏中的孔外，将5ul25nmkeap1-flaghis蛋白添加到化合物板的所有孔中。第18栏中的孔取而代之的是接收5ul测定缓冲液。将平板以500rpm离心1分钟，盖上平板盖，并在37℃培养2.25小时。然后将平板从培养箱中取出并使其冷却至室温15分钟。然后将5微升50nm生物素-nrf2蛋白质加入到板的所有孔中，并将该板以500rpm离心1分钟，然后在4℃下培养1.25小时。然后使平板升温至室温保持15分钟，随后添加10ul检测混合物(1nm抗生蛋白链菌素eu+w1024和5μg/ml与surelightapc抗体缀合的小鼠抗dykddddkigg；均来自columbiabiosciences)到所有的孔。将平板以500rpm离心1分钟，在室温培养1小时，并使用320nm激发滤光片和615nm和665nm发射滤光片在envision读板仪上读数。基于两种发射(665nm/615nm)的比率计算化合物响应(％抑制)和效能(pic50)，然后将转化的数据相对于测定中的对照归一化(对照1＝在nrf2和keap1蛋白存在下1％dmso，对照2＝在不存在蛋白质的情况下1％dmso)。使用软件包abasexe(surrey，unitedkingdom)处理数据分析。通过以下方程从比率(转化的)数据计算％抑制值：

100-(100*(化合物响应-平均对照2)/(平均对照1-平均对照2))。

对于pic50的计算，abasexe使用4参数方程。

狗pk研究

所有研究均在gsk的研究动物护理和使用委员会(institutionalanimalcareandusecommittee)审查后并按照gsk关于实验动物护理、福利和处理的政策(gskpolicyonthecare,welfareandtreatmentoflaboratoryanimals)进行。在用于研究之前，对动物进行包括身体检查和全血细胞计数的研究前健康检查。在研究当天将导管暂时置于头静脉或隐静脉中用于样品采集。在给药前将动物禁食过夜；收集4小时血样后提供食物。使用非交叉设计进行静脉内和口服溶液药代动力学研究；使用总共四只雄性比格犬，每种给药途径两只。

静脉内施用的剂量制备为在20％cavitron^tm和5％dmso中最多五种测试化合物的盒。在施用之前，通过0.22微米的聚四氟乙烯(ptfe)过滤器过滤静脉内剂量制剂。口服溶液给药的剂量制备为在6％cavitrontm和5％dmso中最多5种化合物的盒，并在给药前通过0.22微米vwrptfe过滤器过滤。

每只动物接受标称剂量1mg/kg/化合物(4ml/kg剂量体积)，作为60分钟静脉内输注或作为口服强饲法。从头静脉或隐静脉收集血样(各约0.25ml)。在给药之前和在开始静脉内输注后15、30、45、60(在输注终止之前)、62、65、75、90、120、180、240、360，480，600和1440分钟的目标时间收集来自接受静脉内剂量的动物的血液样品。对于接受口服剂量的动物，在给药前和在口服强饲后5、15、30、45、60、90、120、180、240、360、480、600和1440分钟的目标时间收集血液样品。通过离心从血液中分离血浆，将30μl等分试样转移至非肝素化管中，在固体二氧化碳上快速冷冻并储存在约-80℃直至通过液相色谱/串联质谱(lc/ms/ms)分析测试化合物的浓度。

使用phoenixwinnonlin版本6.1.0的非隔室方法计算药代动力学参数。使用每只动物的实际血液采样时间和实际剂量计算所有参数。使用视觉上评估为在末端消除斜率的线性部分上的至少三个对数转化浓度的未加权线性回归分析来确定外推的曲线下面积(auc0-inf)。使用来自两只静脉内给药动物的平均静脉内剂量和auc0-inf值以非交叉方式计算口服溶液生物利用度。

上面进行和描述的测定结果总结在下表1中。

表1

在两种物种(啮齿动物和非啮齿动物)中证明口服生物利用度(>30％)是用于选择进一步开发化合物的关键标准，因为它提供了对人类口服生物利用度的信心。生物利用度通常分为两类(buckets)，小于或大于30％。生物利用度<30％代表评估作为药物的活力的重大风险，表明其不会在人体中具有生物利用度。

本领域技术人员将理解，口服生物利用度>100％的值不是“真实的”，而是反映了测定的变异性。因此，表1中的一些值报告超过100％的事实反映了测定的测量误差和不同动物之间的固有pk变异性。因此，应当理解，大鼠生物利用度的～2倍差异被认为是在测定的误差内并且难以区分。然而，狗口服生物利用度的差异为～5倍(本发明化合物在狗中显示出52％的口服生物利用度，而s-异构体显示为11％)是明显且意想不到的差异结果，特别是考虑到结构的相似性和类似的大鼠生物利用度。

使用方法

本发明的化合物，或其药学上可接受的盐，特别是，葡甲胺盐，可用于治疗呼吸和非呼吸障碍，包括copd、哮喘、ali、ards、纤维化、慢性哮喘、急性哮喘、继发于环境暴露的肺病、急性肺感染、慢性肺感染、α1抗胰蛋白酶疾病、囊性纤维化、自身免疫性疾病、糖尿病肾病、慢性肾病、脓毒病-诱导的急性肾损伤、aki、肾移植中发生的肾病或肾功能障碍、肺动脉高压、高血压、心力衰竭、急性冠状动脉综合征、心肌梗塞、心肌修复、心脏重塑、心律失常、射血分数保留的心力衰竭、射血分数降低的心力衰竭、糖尿病性心肌病、动脉粥样硬化、pd、ad、fa、als、ms、炎性肠病、结肠癌、新生血管性(干型)amd和新生血管性(湿型)amd、眼损伤、fecd、葡萄膜炎或其它炎性眼病症、nash、毒素-诱导的肝疾病(例如、对乙酰氨基酚-诱导的肝病)、病毒性肝炎、肝硬化、牛皮癣、皮炎/辐射的局部作用、由于辐射暴露引起的免疫抑制、先兆子痫、高海拔疾病、scd、早衰症和crs。所述疾病通过向需要的患者，特别是人，给药本发明的化合物，或其药学上可接受的盐，特别是葡甲胺盐而治疗。因此，在另一方面本发明涉及治疗这些疾病的方法。

在一个实施方案中，本发明的化合物，或其药学上可接受的盐，特别是，葡甲胺盐，可用于治疗呼吸障碍，包括copd、哮喘，包括慢性哮喘和急性哮喘。

在一个实施方案中，本发明的化合物，或其药学上可接受的盐，特别是葡甲胺盐，可用于治疗高血压、心力衰竭、急性冠状动脉综合征、心肌梗塞、心肌修复、心脏重塑、心律失常、射血分数保留的心力衰竭、射血分数降低的心力衰竭和糖尿病性心肌病。

本发明的治疗方法包括给予患者，特别是需要其的人，治疗有效量的本发明化合物或其药学上可接受的盐，特别是葡甲胺盐。治疗“有效量”意指当给予需要这种治疗的患者时足以实现如本文所定义的治疗的化合物的量。因此，例如，治疗有效量的本发明化合物或其药学上可接受的盐是一定量的本发明药剂，当给予患者，例如需要其的人时，足以调节和/或活化nrf2，从而减少、缓解或预防由该nrf2活性介导的疾病状况。对应于这样的量的给定化合物的量将根据诸如特定化合物的效力(pic50)、功效(ec50)和生物半衰期、疾病状况及其严重性、需要治疗的患者的特性(例如，年龄、身高和体重)等因素而变化，但是仍然可以由本领域技术人员常规确定。同样地，化合物的治疗持续时间和给药时间段(给药之间的时间段和给药的时间，例如，在用餐之前/随餐/之后)将根据需要治疗的哺乳动物的特性(例如，体重)、特定化合物及其性质(例如，药代动力学性质)、疾病或病症及其严重性和所使用的具体组合物和方法而变化，但仍可由本领域技术人员确定。

应理解本发明的化合物或其药学上可接受的盐以"安全且有效量"给药，其是指在合理的医学判断范围内所述化合物的量足以治疗所述患者的病症，但又是足够低的从而避免严重的副反应(具有合理的利益/风险比)。安全且有效量的化合物会随所选择的具体化合物(例如，考虑所述化合物的潜能、效力和半衰期)；所选择的给药途径；所治疗的病症；所治疗的病症的严重性；所治疗患者的年龄、体型、体重和生理状况；所治疗的患者的药物史；所述治疗的持续时间；同时进行的疗法的性质；所期望的治疗效果；和类似因素而变化，但是仍然可由技术人员常规确定。

本申请使用的"治疗"在涉及病症时是指：(1)改善或预防所述病症或所述病症的一种或多种生物表现，(2)干扰(a)导致或造成所述病症的生物级联反应中的一个或多个点，或(b)所述病症的一个或多个生物表现，(3)减轻与所述病症相关的一个或多个症状或作用，或(4)减慢所述病症或所述病症的一个或多个生物表现的进展。

因此，应理解本发明治疗方法，包括预防本文公开的任何疾病或病症。

本领域技术人员理解的是，"预防"不是一个绝对术语。在药物上，"预防"被理解为预防性给药药物以基本减小病症或其生物表现的可能性或严重性或用于延迟所述病症或其生物表现的的发生。

如本文所述，"患者"是指人或其它动物。

本发明化合物或其药学上可接受的盐可通过任何适当的给药途径给药，包括全身给药和局部给药。全身给药包括口服给药、肠胃外给药、透皮给药、直肠给药和通过吸入给药。肠胃外给药是指非经肠、非透皮或非通过吸入给药的途径并且通常通过注射或输注给药。肠胃外给药包括静脉内给药、肌内给药和皮下注射或输注。吸入是指给药到患者的肺中，不论是通过嘴吸入还是通过鼻道吸入。局部给药包括施用到皮肤以及眼内给药、耳给药、阴道内给药和鼻内给药。

本发明化合物或其药学上可接受的盐可被给药一次或根据其中在给定时间段内以不同时间间隔给药多次剂量的给药方案给药。例如，每日可给药一次、两次、三次或四次剂量。可以一直给药剂量直到实现所期望的治疗效果或不定期给药以维持所期望的治疗效果。用于本发明化合物或其药学上可接受的盐的适当给药方案依赖于所述化合物或其药学上可接受的盐的药代动力学性质，例如吸收、分布和半衰期，这可由技术人员来确定。此外，针对本发明化合物或其药学上可接受的盐的合适的给药方案(包括该方案的给药持续时间)依赖于所治疗的病症、所治疗的病症的严重程度、所治疗的患者的年龄和生理状况、所治疗患者的药物史、同时进行的治疗的性质、所期望的治疗效果和在技术人员的知识和专业知识范围内的类似因素。技术人员还理解的是，合适的给药方案可能需要鉴于个体患者对该给药方案的响应而进行调整，或者由于个体患者需求的改变随时间进行调整。

常见的每日剂量可根据所选择的具体给药途径而变化。用于口服给药的常见剂量范围为每日每人1mg至1,000mg。优选的剂量为每日一次1-500mg，更优选为每日每人1-100mg。静脉内(iv)剂量范围为0.1-1,000mg/日，优选为0.1-500mg/日和更优选为0.1-100mg/日。吸入的每日剂量范围为10μg-10mg/日，优选为10μg-2mg/日和更优选为50μg-500μg/日。

此外，本发明化合物或其药学上可接受的盐可作为前药给药。本申请使用的本发明化合物的"前药"是所述化合物的官能性衍生物，其在给药至患者后，最终在体内释放本发明的化合物。给药前药形式的本发明化合物可使技术人员能够做到以下中的一个或多个方面:(a)改变所述化合物在体内开始发挥作用的时间；(b)改变该所述化合物在体内作用的持续时间；(c)改变所述化合物在体内的转运或分布；(d)改变所述化合物在体内的溶解度；和(e)克服副反应或所述化合物遇到的其他困难。用于制备前药的常见的官能性衍生物包括在体内化学或酶性断裂的化合物的修饰。这样的修饰是本领域技术人员公知的，包括制备磷酸酯、酰胺、醚、酯、硫酯、碳酸酯和氨基甲酸酯。

组合物

在给药患者前，本发明化合物或其药学上可接受的盐通常但不是必须地会被配制成药物组合物。因此，在本发明的另一个方面，其涉及药物组合物，该组合物包含本发明化合物和一种或多种药学上可接受的赋形剂。

可制备本发明的药物组合物并以散装形式包装，其中可从中取出安全且有效量的本发明化合物，然后以粉末或糖浆的形式给予于所述患者。可选择地，可制备本发明的药物组合物并包装成单位剂量形式，其中每个物理学上离散的单元含有安全且有效量的本发明化合物。当以单位剂量形式制备时，本发明的药物组合物通常含有1mg至1000mg。

本发明的药物组合物通常仅含有本发明的化合物，或其药学上可接受的盐。此外，本发明的药物组合物可任选进一步含有一种或多个额外的药学活性化合物。

本申请使用的"药学上可接受的赋形剂"是指药学可接受的物质、组合物或媒介物，它们涉及赋予所述药物组合物形式或一致性。当混合时，每种赋形剂必须与所述药物组合物的其他成分相容，由此避免相互作用，该相互作用会大大降低本发明化合物当给药患者时的效力，并且该相互作用会得到非药学上可接受的药物组合物。此外，每种赋形剂当然必须具有足够高的纯度以使其为药学上可接受的。

本发明化合物和药学上可接受的赋形剂(一种或多种)通常被配制成适于通过所期望的给药途径给药于所述患者的剂型。例如，剂型包括适于以下情况的那些：(1)口服给药，例如片剂、胶囊、小胶囊、丸剂、糖锭剂、粉末、糖浆、酏剂、混悬剂、溶液剂、乳剂、药囊(sachet)和扁囊剂(2)肠胃外给药，例如无菌溶液剂、混悬剂和用于重构的粉末剂；(3)透皮给药，例如透皮贴剂；(4)直肠给药，例如栓剂；(5)吸入，例如干粉、气雾剂、混悬剂和溶液剂；和(6)局部给药，例如乳膏剂、软膏剂、洗剂、溶液剂、糊剂、喷雾剂、泡沫剂和凝胶剂。

合适的药学上可接受的赋形剂会根据所选择的具体剂型而变化。此外，合适的药学上可接受的赋形剂可针对它们在组合物中所发挥的具体功能进行选择。例如，一些药学上可接受的赋形剂被选择是由于它们具有促进均一剂型的产生的能力。一些药学上可接受的赋形剂被选择是由于它们具有促进稳定剂型的产生的能力。一些药学上可接受的赋形剂被选择是由于它们具有促进本发明化合物在给药于所述患者后从身体的一个器官或部位携带或运送到身体的另一个器官或部位的能力。一些药学上可接受的赋形剂被选择是由于它们具有增强患者顺应性的能力。

合适的药学上可接受的赋形剂包括以下类型的赋形剂：抑菌剂、溶质、推进剂、增稠剂、稀释剂、填料、粘合剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、造粒剂、包衣剂、润湿剂、溶剂、共溶剂、助悬剂、乳化剂、增甜剂、矫味剂、掩味剂、着色剂、抗结块剂、保湿剂、螯合剂、增塑剂、增粘剂、抗氧化剂、防腐剂、稳定剂、表面活性剂和缓冲剂。技术人员理解的是，一些药学上可接受的赋形剂可根据该赋形剂在制剂中存在多少和何种其他成分存在于该制剂中而发挥不止一种功能并且可发挥替代功能。

技术人员掌握本领域的知识和技能，从而能使他们选择用在本发明中的适当量的合适的药学上可接受的赋形剂。此外，有许多描述药学上可接受的赋形剂的资料是技术人员可获得的并且可用于选择合适的药学上可接受的赋形剂。实例包括remington'spharmaceuticalsciences(mackpublishingcompany)，thehandbookofpharmaceuticaladditives(gowerpublishinglimited)和thehandbookofpharmaceuticalexcipients(theamericanpharmaceuticalassociationandthepharmaceuticalpress)。

本发明的药物组合物使用本领域技术人员已知的技术和方法制备。本领域常用的方法中的一些描述在remington'spharmaceuticalsciences(mackpublishingcompany)中。

在一个方面中，本发明涉及固体口服剂型例如片剂或胶囊，其包含安全且有效量的本发明化合物和稀释剂或填料。合适的稀释剂和填料包括乳糖、蔗糖、右旋糖、甘露醇、山梨糖醇、淀粉(例如，玉米淀粉、马铃薯淀粉和预胶化淀粉)、纤维素及其衍生物(例如，微晶纤维素)、硫酸钙和二碱性磷酸钙。所述口服固体剂型可进一步包含粘合剂。合适的粘合剂包括淀粉(例如，玉米淀粉、马铃薯淀粉和预胶化淀粉)、明胶、阿拉伯胶、海藻酸钠、海藻酸、西黄蓍胶、瓜尔胶、聚维酮和纤维素及其衍生物(例如，微晶纤维素)。所述口服固体剂型可进一步包含崩解剂。合适的崩解剂包括交聚维酮、淀粉羟乙酸钠、交联羧甲纤维素、海藻酸和羧基甲基纤维素钠。所述口服固体剂型可进一步包含润滑剂。合适的润滑剂包括硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸钙和滑石。

在另一个方面，本发明涉及适于肠胃外给药于患者包括皮下给药、肌内给药、静脉内给药或皮内给药的剂型。适于肠胃外给药的药物制剂包括水性和非水性无菌注射溶液，其可含有抗-氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和使所述制剂与预期接受者的血液等渗的溶质；和水性和非水性无菌悬浮液，其可包含助悬剂和增稠剂。所述制剂可存在于单剂量或多剂量容器中，例如密封的安瓿瓶和小瓶中并且可贮存在冷冻干燥(冻干)条件下，仅需要在即将使用前添加无菌液体载体例如注射用水。可由无菌粉末、颗粒和片剂制备临时注射溶液和悬浮液。

在另一个方面，本发明涉及适于通过吸入给药于患者的剂型。例如，本发明化合物可以干粉、气雾剂、悬浮液或溶液的形式吸入到肺中。

用于通过吸入递送至肺的干粉组合物通常包含微细粉碎粉末形式的本发明化合物和一种或多种微细粉碎粉末形式的药学上可接受的赋形剂。特别适于用在干粉中的药学上可接受的赋形剂是本领域技术人员公知的并且包括乳糖、淀粉、甘露醇和单糖、二糖和多糖。

根据本发明使用的干粉组合物可以通过吸入装置进行给药。作为一个实例，这种装置可以包括例如明胶的胶囊和药筒，或者例如层压铝箔的泡罩。在不同实施方案中，每个胶囊、药筒或泡罩可以包含多剂量的根据本文教导的组合物。吸入装置的实例可以包括旨在用于单位剂量或多剂量递送组合物的那些，包括本文所述的所有装置。作为一个实例，在多剂量递送的情况下，制剂可以预先计量(例如，如参见gb2242134，美国专利号6,032,666，5,860,419，5,873,360，5,590,645，6,378,519和6,536,427或diskhaler，参见gb2178965，2129691和2169265，美国专利号4,778,054，4,811,731，5,035,237)或计量使用(例如turbuhaler，参见ep69715，或美国专利号6,321,747中所述的装置)。单元剂量设备的实例为rotahaler(参见gb2064336)。在一个实施方案中，吸入装置包括由具有许多凹槽的基片形成的细长板条(凹槽沿着其长度间隔)和将其密封的可以剥离的盖片，以限定许多容器，每个容器中都有可吸入的制剂，制剂中含有化合物，任选地含有本文教导的其它赋形剂和添加剂。可剥离的密封装置为工程化密封装置，并且在一个实施方案中，工程密封装置为气密封口。优选地，板条充分柔韧从而可以绕成卷形物。盖片和基片优选具有不彼此密封的前端部分，并且设计至少一个所述前端部分与卷绕装置相连接。也优选，在基质和盖片之间的工程化密封扩展到其全部宽度。可以优选盖片在从所述基片的头端以纵向方式从基片上剥离。

干粉组合物也可存在于一种吸入装置中，其允许分开地包含组合物的两种不同组分。因此，例如，这些组分可以同时被给药，但是被分别存储，例如，在分开的药物组合物中，例如如wo03/061743a1、wo2007/012871a1和/或wo2007/068896中所述。在一个实施方案中，允许单独容纳组分的吸入装置是具有两个可剥离泡罩条的吸入器装置，每个条包含沿其长度布置的泡罩袋中的预先计量剂量，例如每个泡罩条内的多个容器。所述装置具有内部分度机构，每次装置被致动时，其剥离打开每个带的口袋并定位泡罩，使得每个带的每个新暴露的剂量邻近与装置的嘴口连通的歧管。当患者在嘴口处吸气时，每个剂量同时从其相关的口袋中抽出，进入歧管并经由嘴口夹带进入患者的呼吸道。另一种允许分开容纳不同成分的装置是innovata的duohaler^tm。另外，除了同时递送之外，吸入装置的各种结构还提供了从装置顺序地或分开地递送药物组合物。

气雾剂可通过将本发明化合物悬浮或溶解在液化推进剂中形成。合适的推进剂包括卤代烃、烃或其它液化气。代表性推进剂包括:三氯氟甲烷(推进剂11)、二氯氟甲烷(推进剂12)、二氯四氟乙烷(推进剂114)、四氟乙烷(hfa-134a)、1,1-二氟乙烷(hfa-152a)、二氟甲烷(hfa-32)、五氟乙烷(hfa-12)、七氟丙烷(hfa-227a)、全氟丙烷、全氟丁烷、全氟戊烷、丁烷、异丁烷和戊烷。包含本发明化合物的气雾剂通常通过计量剂量的吸入器(mdi)给药于患者。所述装置是本领域技术人员已知的。

所述气雾剂可含有其它药学上可接受的、通常用于多剂量吸入器的赋形剂，例如表面活性剂、润滑剂、共溶剂和其他赋形剂以提高所述制剂的物理稳定性、提高阀性能、提高溶解度或改进口味。

包含本发明化合物的悬浮液和溶液也可通过雾化器给药于患者。用于雾化的溶剂或助悬剂可以是任意药学上可接受的液体例如水、盐水溶液、醇或二醇，例如，乙醇、异丙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇等或它们的混合物。盐水溶液使用的盐在给药后表现出很少或几乎不表现出药理活性。有机盐和无机盐都可用于该目的，无机盐为例如碱金属或铵的卤盐，例如，氯化钠、氯化钾，有机盐为例如有机酸的钾盐、钠盐和铵盐，所述有机酸例如，抗坏血酸、柠檬酸、乙酸、酒石酸等。

其他药学上可接受的赋形剂可被添加至所述悬浮液或溶液中。本发明的化合物可通过添加以下物质得到稳定：无机酸，例如，盐酸、硝酸、硫酸和/或磷酸；有机酸，例如，抗坏血酸、柠檬酸、乙酸和酒石酸等；络合剂例如edta或柠檬酸及其盐；或抗氧化剂例如维生素e或抗坏血酸。这些物质可单独使用或一起使用以稳定本发明化合物。可加入防腐剂例如苯扎氯铵或苯甲酸及其盐。可特别加入表面活性剂以提高悬浮液的物理稳定性。这些包括卵磷脂、二辛基磺基琥珀酸二钠、油酸和脱水山梨糖醇酯。

本发明的化合物或其药学上可接受的盐可用于与一种或多种其他药物组合，所述其他药物可用于预防或治疗例如过敏性疾病、炎性疾病、自身免疫疾病；抗原免疫疗法、抗组胺药、皮质类固醇(例如丙酸氟替卡松，糠酸氟替卡松，二丙酸倍氯米松，布地奈德，环索奈德，糠酸莫米松，曲安西龙，氟尼缩松)、nsaid、白三烯调节剂(例如孟鲁司特，扎鲁司特，普仑司特)、inos抑制剂、类胰蛋白酶抑制剂、ikk2抑制剂、p38抑制剂、syk抑制剂、蛋白酶抑制剂例如弹性蛋白酶抑制剂、整联蛋白拮抗剂(例如，β-2整联蛋白拮抗剂)、腺苷a2a激动剂、递质释放抑制剂例如色甘酸钠、5-脂氧合酶抑制剂(zyflo)、dp1拮抗剂、dp2拮抗剂、pi3kδ抑制剂、itk抑制剂、lp(溶血磷脂酸)抑制剂或flap(5-脂氧合酶活化蛋白)抑制剂(例如3-(3-(叔丁基硫基)-1-(4-(6-乙氧基吡啶-3-基)苄基)-5-((5-甲基吡啶-2-基)甲氧基)-1h-吲哚-2-基)-2,2-二甲基丙酸钠)、支气管扩张药(例如，毒蕈碱拮抗剂、β-2激动剂)、甲氨蝶呤和类似药物；单克隆抗体疗法例如抗-ige、抗-tnf、抗-il-5、抗-il-6、抗-il-12、抗-il-1和类似药物；细胞因子受体疗法例如依那西普和类似药物；抗原非特异性免疫疗法(例如，干扰素或其他细胞因子/趋化因子、趋化因子受体调节剂例如ccr3、ccr4或cxcr2拮抗剂、其他细胞因子/趋化因子激动剂或拮抗剂、tlr激动剂和类似药物)。

所述化合物也可用于与有助于移植的药物组合，包括环孢菌素、他克莫司、麦考酚酸莫酯、泼尼松、硫唑嘌呤、西罗莫司、达珠单抗、巴利昔单抗或okt3。

该化合物也可以用于与用于糖尿病的药物组合:二甲双胍(双胍类)、氯茴苯酸、磺酰脲类、dpp-4抑制剂、噻唑烷二酮类、α-葡糖苷酶抑制剂、胰淀素模拟物(amylinmimetics)、肠降血糖素模拟物和胰岛素。

所述化合物可用于与抗高血压的药物组合，例如利尿药、ace抑制剂、arbs、钙通道阻断剂和β阻断剂。

本发明一个实施方案包括组合(combination)，其包含一种或两种其他治疗剂。本领域技术人员清楚的是，在适当的情况下，所述其他治疗成分可以盐的形式(例如碱金属或胺盐)使用，或以酸加成盐的形式或前药的形式或酯的形式(例如低级烷基酯)使用，或以溶剂合物(例如水合物)的形式使用，从而使治疗成分的活性和/或稳定性和/或物理特性例如溶解度最优化。还清楚的是，在适当的情况下，所述治疗成分可以光学纯的形式使用。

可便利地提供上面提到的组合以用在药物制剂形式中，因此包含如上定义的组合和药学上可接受的稀释剂或载体的药物制剂代表了本发明的又一个方面。如本文所述，“载体”或“药物载体”是在药物递送过程中使用的任何底物，其用于改善药物施用的选择性、有效性和/或安全性。药物载体主要用于控制药物释放到体循环中。

所述组合的各个化合物可在单独或组合的药物制剂中依次给药或同时给药。在一个实施方案中，各个化合物在组合的药物制剂中同时给药。已知治疗剂的适当剂量是本领域技术人员容易理解的。

因此，本发明在另一个方面提供药物组合物，其包含本发明化合物或其药学上可接受的盐与另一种治疗活性剂的组合。

实施例

现在将参考以下的实施例来描述本发明，这些例子仅仅是说明性的，不应被解释为对本发明范围的限制。所有温度都以摄氏度为单位给出，所有溶剂都是最高可获得纯度并且所有反应视需要在无水条件下在氩气(ar)或氮气(n2)气氛中进行。

将analtechsilicagelgf和e.mercksilicagel60f-254薄层板用于薄层色谱法。快速色谱和重力色谱法都是在硅胶230-400，100-200&60-120上进行的。在该应用中用于纯化的系统购自isco，inc。纯化是使用预装的硅胶柱、uv波长在254nm的检测器和多种溶剂或溶剂组合进行的。

分析型hplc是使用具有2996pda检测器的agilent系统或watersalliancehplc、watersacquityuplc-ms或具有pda的agilentinfinity1290进行的，或在sunfirec18柱上，或在xselectcshc18柱上使用反相色谱法进行，使用ch3cn和水的梯度，具有0.1％甲酸改性剂(添加至各溶剂)，且碱性条件使用碱性改性剂，通常为5mm碳酸氢铵或10mm碳酸氢铵的水溶液，用氨溶液将ph调节至10。化合物通过lcms分析，其使用shimadzulc系统以uv214nm波长检测和h2o-ch3cn梯度洗脱(4-95％经1.9min.)，酸化至0.02％tfa。反相柱为2.1x20mmthermohypersilgoldc18(1.9u颗粒)，在50℃下。单四极ms检测器为以阳离子操作的sciex150ex或waterszq。或者，lc-ms是使用pesciexsinglequadrupole150exlc-ms，或waterszqsinglequadrupole，waters3100singlequadrupole，agilent6130sqd或agilent6120singlequadrupolelc-ms仪器确定的。使用反相柱例如thermohypersilgoldc18,lunac18,sunfirec18和/或zorbaxc18分析所述化合物，使用ch3cn和水的梯度进行洗脱，其中含有低百分比的酸改性剂例如0.02％或0.1％tfa。

分析型手性sfc是使用具有可变波长uv检测的thar/waterssfc系统运行的。在该纯化中使用多种手性sfc柱，例如chiralpakia、ib、ic、id、if、ay、ad、od、c2、as、oj、ccl4。所述化合物是使用超临界流体co2和共溶剂洗脱的，所述共溶剂为例如meoh、etoh、ipa和这些溶剂基于化合物选择性以不同比例的组合。可根据需要使用改性剂(0.1％至0.4％的tfa、nh4oh、dea、tea)。

为助滤剂，其由酸洗涤的硅藻土组成，并且是manvillecorp.，denver，colorado的注册商标。为基于官能化硅胶的吸收剂并且是biotageabcorp.，sweden的注册商标。

核磁共振光谱是使用brukeravance400或bruckerdpx400光谱仪或varianmr400光谱仪在400mhz记录的。chcl3-d为氘代氯仿、dmso-d6为六氘代二甲基亚砜和meod为四氘代甲醇、cd2cl2为氘代二氯甲烷。化学位移是在自内标四甲基甲硅烷(tms)的低场(downfield)以百万分率(δ)为单位报道的或校准为于nmr溶剂中的(例如，chcl3于cdcl3中)的残余质子信号。用于nmr数据的缩写如下所述:s＝单峰、d＝双重峰、t＝三重峰、q＝四重峰、m＝多重峰、dd＝双二重峰、dt＝双三重峰、app＝表观、br＝宽峰。j表示以赫兹为单位测量的nmr耦合常数。

用微波辐射加热反应混合物是在biotage微波反应器上进行的，通常采用高吸收配置。

装有基于官能团(酸、碱、金属螯合剂等)的聚合物的筒或柱可被用作化合物后处理的一部分。"胺"柱或筒被用于中和或碱化酸性反应混合物或产物。这些包括nh2氨基丙基spe-edspe柱(获自appliedseparations)和二乙基氨基spe柱(获自unitedchemicaltechnologies，inc.)。

缩写的表

实施例1：(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸

1(a)：(r)-1-叠氮基丁-2-醇

向装配回流冷凝器的圆底烧瓶添加(r)-2-乙基氧杂环丙烷(26.0g，361mmol)、叠氮化钠(28.1g，433mmol)和氯化铵(23.15g，433mmol)，然后添加乙醇(200ml)和水(200ml)的溶液。反应混合物在100℃加热24小时。将反应混合物冷却，乙醇在减压下去除且残余水层用乙醚(3x250ml)萃取。将有机萃取物合并，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤且溶剂在减压下蒸发，得到油状物。该油状物通过硅胶色谱法纯化(0-10％meoh/dcm)，得到(r)-1-叠氮基丁-2-醇(19.8g，172mmol，47.7％产率)。¹hnmr(chcl3-d)δ：3.64-3.76(m，1h)，3.35-3.46(m，1h)，3.20-3.34(m，1h)，2.19(s，1h)，1.47-1.60(m，2h)，0.90-1.06(m，3h)

1(b)：(r)-1-氨基丁-2-醇

向(r)-1-叠氮基丁-2-醇(19.80g，172mmol)在乙醇(250ml)中的溶液中添加10％钯/碳(1.830g，17.20mmol)且将悬浮液置于氢气氛保持72小时。在24和48hr时间点添加另外10％钯/碳(1.830g，17.20mmol)。反应混合物通过硅藻土过滤，然后在减压下蒸发，得到亮黄色油状物(r)-1-氨基丁-2-醇(13.5g，151mmol，88％产率)。¹hnmr(chcl3-d)δ：3.43(m，1h)，2.77(m，1h)，2.64(br.s.，3h)，2.52(m，1h)，1.36-1.48(m，2h)，0.87-0.96(m，3h)。

1(c)：(r)-1-(((3-氟吡啶-2-基)甲基)氨基)丁-2-醇

向(r)-1-氨基丁-2-醇(3.70g，41.5mmol)在甲醇(150ml)中的溶液中添加3-氟2-吡啶甲醛(4.67g，37.4mmol)，然后添加硫酸镁(4.50g，37.4mmol)且将反应混合物在0℃搅拌1小时。反应混合物通过硅藻土过滤且用甲醇(300ml)洗涤。将硼氢化钠(1.413g，37.4mmol)分两批添加至滤液且将反应混合物在室温搅拌30分钟。反应混合物用10％碳酸氢钠溶液淬灭且甲醇在减压下蒸发。剩余的水相用乙酸乙酯(3x125ml)萃取且合并的有机萃取物用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤且溶剂在减压下蒸发。粗残余物通过硅胶色谱法纯化(0-100％/3:1乙酸乙酯:乙醇/己烷)，得到黄色油状物(r)-1-(((3-氟吡啶-2-基)甲基)氨基)丁-2-醇(5.3g，24.06mmol，58.0％产率)。¹hnmr(chcl3-d)δ：8.36-8.45(m，1h)，7.37-7.45(m，1h)，7.22-7.32(m，1h)，4.10-4.16(m，2h)，3.68-3.77(m，1h)，2.89(m，1h)，2.64(m，1h)，1.43-1.55(m，2h)，0.90-1.02(m，3h)。lc-ms：m/z199.2(m+h)⁺。

1(d)：(r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-甲酸叔丁酯

向(r)-1-(((3-氟吡啶-2-基)甲基)氨基)丁-2-醇(5.20g，26.2mmol)在二甲基亚砜(100ml)中的溶液中添加叔丁醇钾(3.68g，32.8mmol)且将反应混合物在90℃搅拌45分钟。将反应混合物冷却至室温，得到深红色溶液。添加boc-酸酐(6.09ml，26.2mmol)且将反应混合物搅拌18小时。反应混合物用乙酸乙酯(500ml)稀释且有机相用水(4x200ml)、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤且溶剂在减压下蒸发。粗残余物通过硅胶色谱法纯化(0-50％乙酸乙酯/己烷)，得到橙色油状物(r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-甲酸叔丁酯(4.84g，17.39mmol，66.3％产率)。¹hnmr(dmso-d6)δ：8.17(m，1h)，7.36(m，1h)，7.24(m，1h)，4.49-4.76(m，2h)，3.93(br.s.，1h)，3.47-3.74(m，2h)，1.52-1.66(m，2h)，1.36(br.s.，4h)，1.25(s，5h)，0.96-1.07(m，3h)。lc-ms：m/z279.2(m+h)⁺。

1(e)：(r)-2-乙基-2,3,4,5-四氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯，盐酸盐

在室温向(r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-甲酸叔丁酯(4.84g，17.39mmol)在1,4-二噁烷(20ml)中的溶液中添加二噁烷(100ml，400mmol)中的4nhcl且将反应混合物在室温搅拌2小时。在减压下蒸发溶剂且与乙醚(3x)共沸，得到膏状固体(r)-2-乙基-2,3,4,5-四氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯，盐酸盐(3.55g，16.54mmol，95％产率)。¹hnmr(dmso-d6)δ：9.95-10.36(m，2h)，8.38(m，1h)，7.66(m，1h)，7.51(m，1h)，4.39-4.57(m，2h)，4.04-4.18(m，1h)，3.47-3.60(m，1h)，3.24-3.40(m，1h)，1.69(m，2h)，1.05(m，3h)。lc-ms：m/z179.2(m+h)⁺。

1(f)：(5-溴-2-甲基苯基)甲醇

将5-溴-2-甲基苯甲酸(100g，465mmol)在四氢呋喃(1.2l)中的搅拌溶液在冰浴中冷却至0℃。通过另外的漏斗经90分钟滴加2n硼烷-甲基硫醚络合物在thf(302ml，605mmol)中的溶液。反应混合物温热至室温且搅拌24小时。将反应混合物冷却至0℃，用甲醇(200ml)淬灭且搅拌1小时。溶剂在减压下去除且所得油状物在乙醚(1l)和1nhcl(1l)之间分配。分离各层且水层用乙醚(2x500ml)萃取。合并的有机萃取物用1nhcl(2x500ml)、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤且浓缩，得到软的黄色固体(5-溴-2-甲基苯基)甲醇(97g，482mmol，104％产率)。¹hnmr(chcl3-d)δ：7.54(s，1h)，7.33(d，j＝8.0hz，1h)，7.05(d，j＝8.3hz，1h)，4.66(s，2h)，2.28(s，3h)，1.99(br.s.，1h)。lc-ms：m/z183.0(m-oh)⁺。

1(g):4-溴-2-(((4-甲氧基苄基)氧基)甲基)-1-甲基苯

将在矿物油中的60％氢化钠(24.83g，621mmol)在四氢呋喃(800ml)中的搅拌悬浮液冷却至0℃。经90分钟滴加(5-溴-2-甲基苯基)甲醇(96g，477mmol)在四氢呋喃(100ml)中的溶液，然后搅拌15分钟。经10分钟滴加1-(氯甲基)-4-甲氧基苯(71.5ml，525mmol)。所得物质温热至室温且搅拌24小时。3小时后，将dmf(200ml)添加至反应混合物。24小时后，添加哌嗪(8.23g，95mmol)且将混合物搅拌1小时。将反应混合物冷却至0℃且用水(200ml)淬灭，然后用乙醚(1.5l)和水(1l)稀释且分离各层。水层用乙醚(500ml)萃取。合并的有机萃取物用水(2x500ml)、1nhcl(2x500ml)、盐水洗涤，用硫酸钠干燥且在减压下浓缩，得到黄色油状物。将油状物通过硅胶色谱法纯化(0-20％乙酸乙酯/己烷)，得到无色油状物4-溴-2-(((4-甲氧基苄基)氧基)甲基)-1-甲基苯(145g，451mmol，95％产率)。¹hnmr(dmso-d6)δ：7.49(m，1h)，7.38(m，1h)，7.24-7.33(m，2h)，7.14(m，1h)，6.88-6.97(m，2h)，4.48(m，4h)，3.70(s，3h)，2.20(s，3h)。lc-ms：m/z＝319.0(m+h)⁺。

1(h)：n,3-二甲基-2-硝基苯胺

将1-氟-3-甲基-2-硝基苯(50g，322mmol)溶于乙醇(250ml)且添加40％甲胺的水(98ml，1128mmol)溶液。将反应混合物加热至回流保持8hr，然后冷却回至室温。将反应混合物过滤，得到橙色固体n,3-二甲基-2-硝基苯胺(47.9g，288mmol，89％产率)。¹hnmr(dmso-d6)δ：7.29(t，j＝8.0hz，1h)，6.70(d，j＝8.5hz，1h)，6.55(d，j＝7.3hz，1h)，6.51(d，j＝4.3hz，1h)，2.78(d，j＝4.8hz，3h)，2.30(s，3h)。lc-ms：m/z167.2(m+h)⁺。

1(i)：4-溴-n,3-二甲基-2-硝基苯胺

将n,3-二甲基-2-硝基苯胺(47.9g，288mmol)溶于n,n-二甲基甲酰胺(250ml)。将混合物冷却至5℃。将溶于150mln,n-二甲基甲酰胺的n-溴代琥珀酰亚胺(51.3g，288mmol)通过加料漏斗滴加且在室温搅拌24小时。将反应混合物倒入水(1.5l)且过滤，得到橙色固体4-溴-n,3-二甲基-2-硝基苯胺(73.5g，300mmol，99％产率)。¹hnmr(dmso-d6)δ：7.56(d，j＝9.3hz，1h)，6.66(d，j＝9.3hz，1h)，6.26(d，j＝4.5hz，1h)，2.73(d，j＝4.8hz，3h)，2.25(s，3h)。lc-ms：m/z245.0(m+h)⁺。

1(j)：4-溴-n¹,3-二甲基苯-1,2-二胺

在0℃向4-溴-n,3-二甲基-2-硝基苯胺(78.4g，320mmol)在乙酸(500ml)和乙醇(500ml)中的溶液中添加铁粉(89g，1600mmol)，然后添加2nhcl(320ml，640mmol)。将混合物搅拌1hr，然后通过硅藻土过滤且将滤液浓缩以去除大部分乙醇。残余物用乙酸乙酯(800ml)和水(800ml)稀释且分离各层。有机萃取物用水(500ml)、10％碳酸氢钠溶液(500ml)、盐水洗涤且在减压下浓缩，得到红色油状物4-溴-n¹,3-二甲基苯-1,2-二胺(67g，311mmol，97％产率)。¹hnmr(dmso-d6)δ：6.75(d，j＝8.5hz，1h)，6.22(d，j＝8.5hz，1h)，4.48-4.90(m，2h)，2.69(s，3h)，2.17(s，3h)。lc-ms：m/z＝215.2(m+h)⁺。

1(k)：5-溴-1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑

将亚硝酸叔丁基酯(61.5ml，467mmol，90％技术级)和四氟硼酸(97ml，623mmol，48％水溶液)溶于50ml乙腈且冷却至0℃。然后，缓慢滴加溶于乙腈(200ml)和四氟硼酸(97ml，623mmol，48％水溶液)的溶液中的4-溴-n¹,3-二甲基苯-1,2-二胺(67g，311mmol)的溶液，使得内部温度不会升高至超过5℃。将反应混合物在5℃搅拌2hr，然后室温搅拌1小时。将反应混合物倒入氢氧化钠(100g，2500mmol)在水(4l)中的搅拌溶液中。添加氯化钠直到溶液达到饱和。所得固体通过过滤收集且用水(2x3l)洗涤，风干且通过硅胶柱色谱法纯化(25-100％乙酸乙酯/己烷)，得到亮黄色固体5-溴-1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑(61g，267mmol，86％产率)。¹hnmr(dmso-d6)δ：7.66(m，2h)，4.30(s，3h)，2.70(s，3h)。lc-ms：m/z＝226(m+h)⁺。

1(l)：(e)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)丙烯酸叔丁酯

将5-溴-1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑(100g，443mmol)和n,n-二甲基甲酰胺(1000ml)的溶液用氮气吹洗30分钟。添加三-邻甲苯基膦(27.0g，89mmol)、pd(oac)2(9.95g，44.3mmol)和碳酸钾(184g，1330mmol)和丙烯酸叔丁酯(130ml，886mmol)且将反应混合物在100℃在氮气氛加热24hr。将反应混合物冷却至室温，用水(1l)和乙酸乙酯(1l)稀释，分离各层。水层用乙酸乙酯(2x1l)萃取，然后合并的有机萃取物用水(2x)、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤且溶剂在减压下蒸发。将粗深色固体用乙醚研磨，过滤且真空干燥，得到浅棕色固体(e)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)丙烯酸叔丁酯(109.3g，89％产率)。¹hnmr(dmso-d6)δ：7.89-8.00(m，2h)，7.67(m，1h)，6.54(d，j＝15.8hz，1h)，4.29(s，3h)，2.79(s，3h)，1.51(s，9h)。lcms：m/z274.2[m+h]⁺。

1(m)：(e)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)丙烯酸

向(e)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)丙烯酸叔丁酯(107g，391mmol)在二氯甲烷(300ml)中的溶液中添加冷三氟乙酸(250ml)且将反应混合物在室温搅拌2小时。在减压下蒸发溶剂，然后与氯仿共沸。所得固体在乙醚中研磨，得到米色固体(e)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)丙烯酸(80g，368mmol，94％产率)。¹hnmr(dmso-d6)δ：7.90-8.02(m，2h)，7.69(m，1h)，6.55(d，j＝16.1hz，1h)，4.30(s，3h)，2.80(s，3h)lc-ms：m/z218.2[m+h]⁺。

1(n)：(s,e)-3-(3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)丙烯酰基)-4-苯基噁唑烷-2-酮

向(e)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)丙烯酸(82g，376mmol)在四氢呋喃(1.5l)中的悬浮液中添加三乙胺(131ml，939mmol)。将反应混合物冷却至-25℃且滴加新戊酰氯(46ml，376mmol)且在-25℃搅拌30分钟。一次性添加氯化锂(17.52g，413mmol)，然后添加(s)-4-苯基噁唑烷-2-酮(58.8g，361mmol)且将反应混合物温热至室温且搅拌1小时。将混合物冷却至-25℃且滴加新戊酰氯(12ml，98mmol)且再搅拌1小时。添加thf(300ml)，然后添加(s)-4-苯基噁唑烷-2-酮(10g，61mmol)和新戊酰氯(18ml，147mmol)且将混合物在10℃搅拌1hr，然后室温搅拌18小时。反应混合物用乙酸乙酯(1l)稀释且用5％nahso3(1l)洗涤。所得固体通过过滤收集且用水和乙醚洗涤，得到淡黄色固体(s,e)-3-(3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)丙烯酰基)-4-苯基噁唑烷-2-酮(104.39g，288mmol，77％产率)。¹hnmr(dmso-d6)δ：8.05(d，j＝15.8hz，1h)，7.71-7.88(m，3h)，7.30-7.45(m，5h)，5.61(m，1h)，4.83(m，1h)，4.30(s，3h)，4.24(m，1h)，2.78(s，3h)。lc-ms：m/z363.2[m+h]⁺。

1(o)：(s)-3-((r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((4-甲氧基苄基)氧基)甲基)-4-甲基苯基)丙酰基)-4-苯基噁唑烷-2-酮

将镁(4.87g，200mmol)和碘(0.141g，0.556mmol)的混合物加热至75℃保持5分钟。经15分钟分批添加4-溴-2-(((4-甲氧基苄基)氧基)甲基)-1-甲基苯(50.0g，156mmol)在thf(200ml)中的溶液且将混合物在回流搅拌1hr，然后冷却至室温，得到溶液a。单独地，将溴化亚铜(i)-二甲硫醚复合物(16.00g，78mmol)在四氢呋喃(150ml)中的混合物冷却至-40℃且用二甲硫醚(41.1ml，556mmol)处理。将反应混合物在-40℃搅拌25分钟。经1hr滴加冷却的溶液a保持温度在-35至-45℃。将反应混合物温热至-20℃，然后一次性添加(s,e)-3-(3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)丙烯酰基)-4-苯基噁唑烷-2-酮(20.15g，55.6mmol)。所得混合物在-20℃搅拌30分钟，然后温热至-10℃且搅拌30分钟。添加饱和氯化铵水溶液，然后添加乙酸乙酯(1.5l)且分离各层。有机萃取物用水(4x500ml)、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤且将溶剂蒸发，得到油状物，其通过硅胶色谱法纯化(0-100％乙酸乙酯/己烷)，得到白色泡沫(s)-3-((r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((4-甲氧基苄基)氧基)甲基)-4-甲基苯基)丙酰基)-4-苯基噁唑烷-2-酮(24.5g，40.5mmol，73％产率)。¹hnmr(dmso-d6)δ：7.56(m，1h)，7.41(d，m1h)，7.21-7.25(m，3h)，7.16-7.20(m，3h)，7.04-7.16(m，4h)，6.82-6.89(m，2h)，5.36(m，1h)，4.91(m，1h)，4.69(m，1h)，4.34-4.41(m，4h)，4.24(s，3h)，4.10(m，1h)，3.88(m，1h)，3.74(s，3h)，3.60(m，1h)，2.70(s，3h)，2.18(s，3h)。lc-ms：m/z605.2[m+h]⁺。

1(p)：(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((4-甲氧基苄基)氧基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸乙酯

向(s)-3-((r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((4-甲氧基苄基)氧基)甲基)-4-甲基苯基)丙酰基)-4-苯基噁唑烷-2-酮(2.140g，3.54mmol)在乙醇(30ml)中的溶液中添加溴化镁(1.629g，8.85mmol)且将反应混合物搅拌4小时。添加另外的溴化镁(0.81g，4.5mmol)且将混合物搅拌18小时。添加饱和氯化铵水溶液且收集所得白色沉淀且用乙醇洗涤，得到(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((4-甲氧基苄基)氧基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸乙酯(1.46g，2.99mmol，85％产率)。¹hnmr(dmso-d6)δ：7.56-7.62(m，1h)，7.48(m，1h)，7.12-7.22(m，4h)，7.05-7.11(m，1h)，6.83-6.90(m，2h)，4.84(m，1h)，4.39(m，4h)，4.24(s，3h)，3.87-3.97(m，2h)，3.75(s，3h)，3.08-3.23(m，2h)，2.75(s，3h)，2.18(s，3h)，1.01(m，3h).lc-ms：m/z＝488.2[m+h]⁺。

1(q)：(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(羟基甲基)-4-甲基苯基)丙酸乙酯

向(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((4-甲氧基苄基)氧基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸乙酯(53.6g，110mmol)在二氯甲烷(700ml)中的溶液中添加水(35ml)且将反应混合物冷却至0℃。添加ddq(37.4g，165mmol)且将反应混合物在0℃搅拌2hr。反应混合物用10％碳酸氢钠溶液(1l)和二氯甲烷(750ml)稀释，然后过滤。分离滤液且水层用二氯甲烷(3x750ml)萃取。合并的有机萃取物用水、盐水洗涤，用硫酸钠干燥且在减压下浓缩。残余物通过硅胶色谱法纯化(0-100％乙酸乙酯/己烷)，得到橙色油状物(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(羟基甲基)-4-甲基苯基)丙酸酯(38.1g，104mmol，94％)。¹hnmr(dmso-d6)δ：7.55-7.63(m，1h)，7.46-7.52(m，1h)，7.26(s，1h)，7.07-7.14(m，1h)，6.99-7.06(m，1h)，4.98(m，1h)，4.85(m，1h)，4.41(m，2h)，4.25(s，3h)，3.94(m，2h)，3.07-3.21(m，2h)，2.76(s，3h)，2.16(s，3h)，1.03(m，3h)。lc-ms：m/z＝368.2[m+h]⁺。

1(r)：(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸酯

向(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(羟基甲基)-4-甲基苯基)丙酸乙酯(10.10g，27.5mmol)在氯仿(100ml)中的溶液中添加亚硫酰氯(4.01ml，55.0mmol)且将反应混合物在室温搅拌1.5hr。在减压下蒸发溶剂，然后共沸(3x氯仿)。将残余物溶于乙腈(100ml)且添加(r)-2-乙基-2,3,4,5-四氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯盐酸盐(7.67g，35.7mmol)和dipea(14.36ml，82mmol)。将反应混合物加热至60℃保持18小时。将反应混合物冷却，用乙酸乙酯稀释，用水(2x)、盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤且溶剂在减压下蒸发。粗残余物通过硅胶色谱法纯化(0-100％乙酸乙酯/己烷)，得到白色泡沫(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸酯(13.76g，26.1mmol，95％产率)。¹hnmr(dmso-d6)δ：8.17(m，1h)，7.50-7.57(m，1h)，7.44-7.49(m，1h)，7.39(m，1h)，7.26(m，1h)，7.13(s，1h)，7.01-7.10(m，2h)，4.82(m，1h)，4.24(s，3h)，3.77-3.97(m，5h)，3.52(s，2h)，3.12(m，2h)，2.76-2.91(m，2h)，2.74(s，3h)，2.20(s，3h)，1.43-1.57(m，1h)，1.32(m，1h)，1.01(m，3h)，0.91(m，3h)。lc-ms：m/z＝528.4[m+h]⁺。

1(s)：(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸

向(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸乙酯(23.00g，43.6mmol)在甲醇(350ml)中的溶液中添加氢氧化锂(10.44g，436mmol)，然后添加水(350ml)且将反应混合物在75℃搅拌4hr，然后冷却至室温且溶剂在减压下去除。将残余物溶于水(500ml)且ph先后用6nhcl、1nhcl调节至ph5。所得沉淀通过过滤收集，用水洗涤且真空干燥，得到灰白色固体。该固体通过硅胶色谱法纯化(50-100％3:1etoac:etoh/己烷)，得到白色泡沫，将其真空干燥，得到膏状固体(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸(16.29g，32.5mmol，74.6％产率)。¹hnmr(dmso-d6)δ：12.14(s，1h)，8.17(m，1h)，7.50-7.56(m，1h)，7.44-7.49(m，1h)，7.40(m，1h)，7.27(m，1h)，7.00-7.15(m，3h)，4.80(m，1h)，4.23(s，3h)，3.77-3.98(m，3h)，3.52(s，2h)，2.93-3.11(m，2h)，2.69-2.92(m，5h)，2.20(s，3h)，1.48(m，1h)，1.29(m，1h)，0.90(t，j＝7.3hz，3h)。lc-ms：m/z500.3[m+h]⁺。

实施例2:(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸的(-)-1-脱氧-1-(甲基氨基)-d-葡萄糖醇盐

向溶于甲基异丁基酮(104ml)的(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸(10.37g，20.76mmol)的溶液中添加(2r,3r,4r,5s)-6-(甲基氨基)己烷-1,2,3,4,5-戊醇(4.05g，20.76mmol)在水(10.4ml)中的溶液。溶剂在减压下去除且残余物从乙醇(150ml)结晶，得到白色固体(r)-3-(1,4-二甲基-1h-苯并[d][1,2,3]三唑-5-基)-3-(3-(((r)-2-乙基-2,3-二氢吡啶并[2,3-f][1,4]氧氮杂环庚三烯-4(5h)-基)甲基)-4-甲基苯基)丙酸的(-)-1-脱氧-1-(甲基氨基)-d-葡萄糖醇盐(10.96g，15.62mmol，78％产率)。lc-ms：m/z500.3[m+h]⁺。¹hnmr(dmso-d6)δ：8.17(m，1h)，7.50(m，1h)，7.44(m，1h)，7.38(m，1h)，7.25(m，1h)，7.08(s，1h)，7.07-7.03(m，1h)，7.05-7.01(m，1h)，4.81(m，1h)，4.22(s，3h)，3.96-3.91(m，1h)，3.87-3.82(m，1h)，3.84-3.78(m，1h)，3.74-3.70(m，1h)，3.63(m，1h)，3.59(m，1h)，3.50(s，2h)，3.50-3.46(m，1h)，3.42-3.39(m，1h)，3.40-3.35(m，1h)，2.95-2.89(m，1h)，2.89-2.82(m，1h)，2.90-2.82(m，1h)，2.81-2.74(m，1h)，2.73(s，3h)，2.72-2.63(m，2h)，2.31(s，3h)，2.19(s，3h)，1.48(m，1h)，1.29(m，1h)，0.89(m，3h)。使用源自dmso中的cassnmr报告的值。应理解没有观测到oh/nh。

结晶:

x射线粉末衍射图(xrpd)在panalyticalx'pertpro衍射仪上采用ni过滤的cuka(45kv/40ma)辐射和0.02°2θ的步长和x'celeratortmrtms(realtimemulti-strip)检测器获得。附带光束侧的配置：固定发散狭缝(0.25°)，0.04rad索勒狭缝，防散射狭缝(0.25°)和10mm光束掩模。衍射光束侧的配置：固定发散狭缝(0.25°)和0.04rad索勒狭缝。将样品平放在零背景si晶片上。实施例2化合物的x射线粉末衍射(xrpd)图谱具有表2中的下列代表性峰：

表2