吡喃葡萄糖苷，其也称为529 (以前称为RC529)。该529佐剂配制为水性形式或 稳定乳剂。
[0078] 另外其他佐剂包括矿物油和水乳剂、铝盐（明矾）例如氢氧化铝、磷酸铝等，爱菲 金（Amphigen)，阿夫立定，L121/角藍稀，D-丙交醋-聚丙交醋/糖苷，复合多元醇，胞壁 酰二肽，被杀死的博德特氏菌（Bordetella)，皂苷例如以引用方式在此并入的美国专利号 5, 057, 540 中所述的Stimulon?QS-21 (Antigenics，Framingham，MA.)，以及由其生成的颗 粒例如ISC0MS(免疫刺激复合物），结核分枝杆菌（Mycobacteriumtuberculosis)，细菌 脂多糖，合成多核苷酸例如含有CpG基序的寡核苷酸（以引用方式在此并入的美国专利号 6, 207, 646)，百日咳毒素（PT)或大肠杆菌不耐热毒素（LT)，特别是LT-K63、LT-R72、PT-K9/ G129;参见例如以引用方式并入本文的国际专利公开号W0 93/13302和W0 92/19265。
[0079] 还可用作佐剂的是霍乱毒素及其突变体，包括在公开的国际专利申请号TO 00/18434中所述的那些（其中在氨基酸位置29处的谷氨酸替换为除天冬氨酸外的另一种 氨基酸，优选组氨酸）。类似的CT毒素或突变体在公开的国际专利申请号W0 02/098368中 描述（其中在氨基酸位置16处的异亮氨酸替换为另一种氨基酸，单独或与在氨基酸位置68 处的丝氨酸替换为另一种氨基酸组合；和/或其中在氨基酸位置72处的缬氨酸替换为另一 种氨基酸）。其他CT毒素在公开的国际专利申请号W0 02/098369中描述（其中在氨基酸 位置25处的精氨酸替换为另一种氨基酸；和/或氨基酸在氨基酸位置49处插入；和/或两 个氨基酸在氨基酸位置35和36处插入）。
[0080] 本发明的免疫原性组合物还可包括表面活性物质。合适的表面活性物质包括但 不限于醌类似物，十六胺，十八胺，十八烷基氨基酸酯，溶血卵磷脂，二甲基双十八烷基溴化 铵、甲氧基十六烷基甘油和复合多元醇；聚胺例如吡喃，硫酸葡聚糖，聚1C，卡波普；肽例如 胞壁酰肽和二肽，二甲基甘氨酸，促吞噬肽；油乳剂；和矿物凝胶，例如磷酸铝等等，以及免 疫刺激复合物（ISC0MS)。
[0081] 本发明的免疫原性组合物还可包括抗生素。此类抗生素包括但不限于来自下述 类别的抗生素：氨基糖苷类、碳青霉烯类、头孢霉素类、糖肽类、大环内酯类、青霉素类、多 肽类、喹诺酮类、磺胺类和四环素类。在一个实施例中，本发明考虑了包含约1 y g/ml至约 60 y g/ml抗生素的免疫原性组合物。在另一个实施例中，免疫原性组合物包含约5 y g/ml 至约55 y g/ml抗生素、或约10 y，g/ml至约50 y g/ml抗生素、或约15 y g/ml至约45 y g/ ml抗生素、或约20 y g/ml至约40 y g/ml抗生素、或约25 y g/ml至约35 y g/ml抗生素。在 另外一个实施例中，免疫原性组合物包含小于约30 y g/ml抗生素。
[0082] 其他添加剂也可包括在本发明的免疫原性组合物中，包括防腐剂、稳定成分等 等。合适的示例性防腐剂包括三氯叔丁醇、山梨酸钾、山梨酸、二氧化硫、没食子酸丙酯、 对羟基苯甲酸酯、乙基香兰素、甘油、苯酚和对氯苯酚。可使用的合适的稳定成分包括例 如酪蛋白氨基酸、蔗糖、明胶、酚红、N-Z胺、二磷酸单钾、乳糖、乳清蛋白水解物和奶粉。免 疫原性组合物还可掺入脂质体内用作免疫原性组合物，并且还可含有适合于组合物的所 选施用模式的其他添加剂。该组合物可包括其他药学可接受的赋形剂用于开发粉末、液 体或悬浮液剂型。参见例如其教导以引用方式在此并入的Remington:TheScienceand PracticeofPharmacy，第2卷，第19版（1995)，例如第95章Aerosols;和国际专利公开号 W099/45966。
[0083] 本发明的免疫原性组合物可包括其他抗原。抗原可采取灭活的完整或部分微 生物制剂的形式，或者通过重组技术或化学合成获得的抗原分子的形式。适合于依照 本发明使用的其他抗原包括但不限于源自致病菌的抗原，所述致病菌例如睡眠嗜血杆 菌（Haemophilussomnus)、副猪嗜血杆菌（Haemophilusparasuis)、支气管博德特氏菌 (Bordetellabronchiseptica)、炭疽芽抱杆菌（Bacillusanthracis)、胸膜肺炎放线杆 菌(Actinobacilluspleuropneumonie)、多杀性巴氏杆菌(Pasteurellamultocida)、 溶血性曼氏杆菌（Mannhemiahaemolytica)、牛支原体（Mycoplasmabovis)、牛分枝杆 菌（Mycobacteriumbovis)、畐lj结核分枝杆菌（Mycobacteriumparatuberculosis)、梭 菌属物种（Clostridialspp.)、乳房链球菌（Streptococcusuberis)、金黄色葡萄球菌 (Staphylococcusaureus)、红斑丹毒丝菌（Erysipelothrixrhusopathiae)、衣原体属物 种（Chlamydiaspp.)、布鲁氏菌属物种（Brucellaspp.)、弧菌属物种（Vibriospp.)、肠炎 沙门氏菌血清变型（Salmonellaentericaserovars)和钩端螺旋体属物种（Leptospira spp.)。抗原还可源自致病性真菌例如假丝酵母属（Candida)，原生动物例如小隐孢子虫 (Cryptosporidiumparvum)、犬新抱子虫（Neosporacanium)、刚地弓形虫（Toxoplasma gondii)、艾美球虫属物种（Eimeriaspp.)、巴贝斯虫属物种（Babesiaspp.)、贾第虫属物 种（Giardiaspp.)，或懦虫例如奥斯特线虫属（Ostertagia)、古柏线虫属（Cooperia)、血 矛线虫属（Haemonchus)和片吸虫属（Fasciola)。另外的抗原可包括致病性病毒例如牛冠 状病毒、牛疱瘆病毒、牛副流感病毒、牛呼吸道合胞病毒、牛白血病病毒、牛瘟病毒、口蹄疫 病毒和狂犬病病毒。
[0084] 在其他实施例中，免疫原性组合物可包含如上所述的本发明的纯化的氨基酸序 列，包括但不限于SEQIDN0:4、6、8、10、12、14、16-20。
[0085] 施用形式、剂量、涂径
[0086] 本发明的免疫原性组合物可施用于动物，以诱导针对C型流感病毒的有效免疫应 答。因此，本发明提供了通过给动物施用治疗有效量的本文描述的本发明免疫原性组合物， 刺激针对C型流感病毒的有效免疫应答的方法。
[0087] 取决于施用途径，本发明的免疫原性组合物可以多种形式制备。例如，免疫原性组 合物可以适合于可注射用途的无菌水性溶液或分散体的形式制备，或使用冷冻干燥技术以 冻干形式制备。冻干的免疫原性组合物通常维持在约4°C下，并且可在含或不含佐剂的稳定 溶液例如盐水或ffiPES中重构。免疫原性组合物还可以悬浮液或乳剂的形式制备。
[0088] 这些免疫原性组合物可含有适合于经由任何方便的施用途径施用的添加剂。本发 明的免疫原性组合物可制备用于施用于受试者，其形式为例如液体、粉末、气溶胶、片剂、胶 囊、肠溶衣片或胶囊、或栓剂。因此，免疫原性组合物还可包括但不限于悬浮液、溶液、在油 性或水性媒介物中的乳剂、糊剂和可植入的持续释放或生物可降解的制剂。在用于肠胃外 施用的制剂的一个实施例中，活性成分以干燥（即粉末或颗粒）形式提供用于在重构组合 物的肠胃外施用前由合适媒介物（例如无菌无热原水）重构。其他可用的可肠胃外施用的 制剂包括包含以微晶形式、在脂质体制剂中或作为生物可降解聚合物系统的组分的活性成 分的制剂。用于持续释放或植入的组合物可包含药学可接受的聚合物或疏水性材料，例如 乳剂、离子交换树脂、难溶性聚合物或难溶性盐。
[0089] 本发明的免疫原性组合物包括治疗有效量的C型流感病毒。纯化的病毒可直接用 于免疫原性组合物中，或还可进行减毒或灭活。通常，免疫原性组合物含有约1X102至约 1X1012病毒颗粒，或约1X10 3至约1X10 11病毒颗粒，或约1X10 4至约1X10 1(1病毒颗粒， 或约1X105至约1X10 9病毒颗粒，或约1X10 6至约1X10 8病毒颗粒。在免疫原性组合物 中有效提供保护效应的病毒精确量可由技术人员确定。
[0090] 免疫原性组合物一般包含体积为约0. 5ml至约5ml的兽医学可接受的载体。在另 一个实施例中，载体的体积为约lml至约4ml，或约2ml至约3ml。在另一个实施例中，载体 的体积为约lml，或约2ml，或约5ml。适用于免疫原性组合物中的兽医学可接受的载体可为 本文描述的这些载体中的任一种。
[0091] 此类载体包括但不限于水、盐、缓冲盐水、磷酸盐缓冲液、醇性/水性溶液、乳剂或 悬浮液。其他常规采用的稀释剂、佐剂和赋形剂可依照常规技术加入。此类载体可包括乙 醇、多元醇及其合适混合物、植物油和可注射有机酯。还可采用缓冲剂和pH调节剂。缓冲 剂包括但不限于由有机酸或碱制备的盐。代表性缓冲剂包括但不限于有机酸盐，例如柠檬 酸的盐，例如柠檬酸盐、抗坏血酸、葡糖酸、组氨酸-Hel、碳酸、酒石酸、琥珀酸、乙酸、邻苯二 甲酸、Tris、盐酸三甲胺或磷酸盐缓冲液。肠胃外载体可包括氯化钠溶液、林格氏右旋糖、右 旋糖、海藻糖、蔗糖、乳酸林格氏或不挥发性油。静脉内载体可包括流体和营养补充剂、电解 质补充剂例如基于林格氏右旋糖的电解质补充剂等等。防腐剂及其他添加剂例如抗微生物 剂、抗氧化剂、螯合剂（例如EDTA)、惰性气体等等也可在药物载体中提供。本发明不受限于 载体的选择。由上述组分制备具有适当PH、等渗性、稳定性及其他常规特征的这些药学可接 受的组合物在本领域技术内。参见例如，课本例如Remington:TheScienceandPractice ofPharmacy，第 20 版，LippincottWilliams&Wilkins，2000 年出版；和TheHandbookof PharmaceuticalExcipients,4.sup.thedit.，R.C.Rowe等人编辑，APhAPublications， 2003〇
[0092] 本领域技术人员可容易地确定病毒在施用前是否需要减毒或灭活。在本发明的另 一个实施例中，C型流感病毒可直接施用于动物而无需另外减毒。治疗有效的病毒量可取 决于使用的特定病毒、动物状况和/或感染程度而改变，并且可由技术人员确定。
[0093] 依照本发明的方法，单一剂量可施用于动物，或可替代地，可发生两次或更多次接 种，间隔为约二至约十周。可能需要加强方案，并且可调整剂量方案，以提供最佳免疫接种。 本领域技术人员可容易地确定最佳施用方案。
[0094] 免疫原性组合物可直接施用到血流、肌内或内脏内。合适的肠胃外施用方式包括 静脉内、动脉内、腹膜内、鞘内、心室内、尿道内、胸骨内、颅内、肌内和皮下。合适的肠胃外施 用装置包括针（包括显微操作针）注射器、无针注射器和输注技术。
[0095] 肠胃外制剂通常为水性溶液，所述水性溶液可含有赋形剂例如盐、碳水化合物和 缓冲剂（优选至pH约3至约9、或约4至约8、或约5至约7. 5、或约6至约7. 5、或约7至 约7. 5)，但对于一些应用，它们可更适当地配制为无菌非水性溶液，或与合适的媒介物例如 无菌无热原水结合使用的干燥形式。在无菌条件下例如通过冻干制备肠胃外制剂可使用本 领域技术人员众所周知的标准制药技术容易地完成。
[0096] 用于制备肠胃外溶液的化合物的可溶性可通过使用技术人员已知的适当配制技 术得到增加，例如掺入可溶性增强试剂包括缓冲剂、盐、表面活性剂、脂质体、环糊精等等。 [0097] 肠胃外施用的制剂可配制为立即和/或改进释放。改进释放制剂包括延迟、持续、 脉冲、控制、靶向和程控释放。因此，本发明的化合物可配制为固体、半固体或触变性液体用 于作为植入储库施用，从而提供活性化合物的改进释放。此类制剂的例子包括药物涂覆的 支架和聚dl-乳酸共乙醇酸（PLGA)微球体。
[0098] 本发明的免疫原性组合物还可局部施用于皮肤或粘膜，即真皮或经皮施用。用于 该目的的典型制剂包括凝胶、水凝胶、洗剂、溶液、乳膏、软膏、撒