. 3[M+Na]+；497. 3[M+K] +
[0705]
[0706] 将邻二氯苯（53 4 1^，0.47臟〇1，1069)，接着是10%的卩(1/(：(56.011^，53.3 4111〇1， 1.169)加入到包(38.〇11^，46.4 4111〇1，169)的1'册和]^0!1混合溶液（2:1，￥八，2611^)中。 将反应放置在氢气气氛下并在室温下搅拌2小时。将反应混合物过滤并浓缩，然后经硅胶 色谱法纯化，以得到目标化合物迎。
[0707] 化合物66的合成
[0708] C50H48BrClF2O5 M = 882. 27g. moF1
[0709] 12F NMR(CDCL, 282. 5MHz):主要端基异构体：_97· 8 (dd, Jl = 246Hz, J2 = 30Hz, C￡F) ;-102. 6 (d, J = 246Hz, CFE)。
[0710] 质谱（ESI+) :4881. 2(M+H)+；898. 3(M+H 20)+.
[0711]
[0712] 在惰性气氛下，于-40 °C 将 SOBr2 (85 μ L，I. lOmmol，15eq)加入到迎(60mg， 0.07mm〇l，leq)的干燥二氯甲烷（0. 73mL)溶液中。搅拌混合物，同时温度在5小时内逐渐 升至〇°C。然后加入吡啶（89 μ L，I. lOmmol，15eq)并将溶液在0°C下搅拌额外的1小时。加 入IM HCl水溶液并使溶液达到室温。收集有机层并将水层用二氯甲烷萃取。然后，将合并 的有机层用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将混合物粗品经硅胶色谱法（Biotage SNAP 10g，环 己烷/乙酸乙酯100:0至92/8)纯化，以得到作为无色油状物的巡(15mg，23% )。收集的 馏分包含一个主要的异构体。
[0713] 化合物15的合成
[0714] C50H49ClF2O6 M = 803. 37g. moF1
[0715] iaF MflUCDCL, 282. 5MHz) :-100. 3 (d, T = 254Hz, IF, CFF) ；-113. 3 (td, Jl = 254Hz, J2 = 29Hz, IF, CFF) 〇
[0716] 质谱：(ESI+) :820. 00 (M+H20)
[07171
[0718] 在室温下，将 Bu3SnH(7 μ L，25. 5mmol，I. 5eq)加入到 66 (15mR，17. OmmoI)在干燥 甲苯（170 μ L)溶液中。然后将混合物在110°C下加热并搅拌3小时。然后加入额外的一份 Bu3SnH (7 μ L，25. 5mmol，I. 5eq)，并将混合物在110°C下搅拌额外的3小时。再次重复该步 骤，直至TLC上不再观察到变化。将混合物浓缩并经制备型TLC (环己烷/乙酸乙酯90:10， v/v)纯化，以得到l^(2mg，17%，β -端基异构体和4mg包含α -端基异构体）。
[0719] 化合物67的合成
[0720] C36H35F5O7S M = 706. 72g. moF1
[0721] iaF NMR (CDCU, 282. 5MHz) :-74. 0(d, J = 12Hz, CF3) ；-108. 2 (dq, Jl = 252Hz, J2 = 12Hz, C￡F) ;-119. 5(ddd, Jl = 253Hz, J2 = 31Hz, J3 = 18Hz, CFE) 〇
[0722] 质谱（ESI+) : 724. 3 (M+H20+) ；729. 2 (M+Na) +；745. 2 (M+K) +
[0723]
[0724] 在惰性气氛下，将三氟甲磺酸酐（9. 5mL，57. 4mmol，3eq)和吡啶（4. 6mL， 57.4_31，369)加入到迎(11.(^，19.1_31，]^)在干燥二氯甲烧（19〇1111^中的冷却溶液 (〇°C )中。使溶液温热至室温并搅拌过夜。然后将水（400mL)加入到冷却混合物（(TC ) 中，然后用二氯甲烷（2X150mL)萃取，用硫酸钠干燥，过滤和浓缩，以得到作为棕色固体的 SI粗品（13. 6g)。67无需进一步纯化即可参与下一个步骤。
[0725] 2.牛物活件
[0726] a)关于对葡萄糖排泄的易化作用（facilitatoryeffect)的试骑〇
[0727] 使用雌性⑶1小鼠（CDM或Charles River)作为实验动物。将测试化合物以Img/ HiL的浓度溶解在载体（5 %的N-甲基吡咯烷酮，20 %的PEG 400, 75 %的20mM Na4P2O7缓冲 液，v/v/v)中。在测定小鼠体重并对其随机分组之后，以lmg/kg、3mg/kg和10mg/kg的剂 量口服施用供试品。对于对照，只口服施用载体（5%的N-甲基吡咯烷酮，20%的PEG 400， 75 %的20mM Na4P2O7缓冲液，v/v/v)。采用用于小鼠的胃管和ImL注射器来进行口服施用。 一组中的最小计数为3,但是对于一些组而言能够达到12。手动进行尿液的采集：通过温 和地按摩腹部，以便通过校准的移液管来采集尿液（3 μ L)。在1、2、4、6、8和随后的16、18、 20、22、24、26和28小时采集尿液。使用WAKO葡萄糖试剂盒按照如下方式测定尿糖浓度： 将3 μ L的尿液置于96孔微板中用于光谱测定的读出。将尿液等分试样用350 μ L的WAKO 工作溶液稀释。对于可能超出WAKO葡萄糖试剂盒量程的葡萄糖浓度而言，将最终溶液的等 分试样（35 yL)置于另一块96孔微板中并用315 yL的WAKO工作溶液进一步稀释（IOX)。 然后，使用BioTek SynergyMX平板荧光计/吸光光度计在505nm处读取96孔板的吸光度 并计算葡萄糖浓度。使用Excel 2007来计算对照和供试品在不同时间点的葡萄糖浓度的 平均值并使用GraphPad Prism 5绘制。
[0728] 图1和2中显示出采用丛和迎所获得的结果。因此，看起来是边(3mg/kg)触发 了持久性糖尿（高达26小时，图2)。
[0729] b)通讨研究对葡萄糖棑泄的易化作用来比较枏据本发_的化合物与现有抟术中 的化合物之一的作用的持续时间的试骀
[0730] 试验已经如a)所述地进行。
[0731] ?当葡萄糖片段的环内氧原子被CF2片段代替时，已经比较了根据本发明的化合物 和达格列净（Dapagliflozin)来突出强调化合物的作用的持续时间的改善，即更长的糖 尿持续时间。
[0732]
[0733] 该试验已经在3mg/kg的剂量下进行。
[0734] 图5中显示出获得的结果。因此，与达格列净相比，看起来是l^(3mg/kg)触发了 糖尿，其持续了超过24小时。
[0735] ?当携带CH-OH片段而非环内氧的葡萄糖模拟物被携带代替CH-OH片段的0&的 葡萄糖模拟物代替时，已经比较了根据本发明的化合物边和W02009/1076550中的化合物 9来突出强调化合物的作用的持续时间的改善。
[0736]
[0737] 该试验已经在3mg/kg的剂量下进行。
[0738] 图6中显示出获得的结果。因此，当WO 2009/1076550的化合物9在相同的时期 内没有检测到情况时，看起来是l^(3mg/kg)触发了更长的持久性糖尿（高达24小时）。
[0739] c)关于在葡萄糖负荷后减Φ血糖波动的易化作用的试骀。
[0740] 使用禁食18小时的雌性⑶1小鼠（CDM或Charles River)作为实验动物。将测 试化合物以lmg/mL的浓度溶解在载体（5 %的N-甲基吡咯烷酮，20 %的PEG400, 75 %的 20mM似4?207缓冲液，v/v/v)中。在测定小鼠体重并对其随机分组之后，以lmg/kg、3mg/kg 和10mg/kg的剂量口服施用供试品。对于对照，只口服施用载体（5%的N-甲基吡咯烷酮， 20%的PEG 400, 75%的20mM Na4P2Ogl冲液，v/v/v)。该口服施用后15分钟，将去离子水 中的20%葡萄糖溶液口服施用于所有小鼠。采用用于小鼠的胃管和ImL注射器来进行口 服施用。一组中的最小计数为3,但是对于一些组而言能够达到5。通过隐静脉进行血液的 采集。在葡萄糖负荷后的5、10、30、45、60和120分钟采集血样。一项试验在于在葡萄糖 负荷之前18小时施用供试品，即口服供试品之后18小时进行葡萄糖负荷。使用Johnson and Johnson's One.Touch? Ultra Blood Glucose Monitoring System测定血糖浓度。使 用Excel 2007来计算对照和供试品在不同时间点的葡萄糖浓度的平均值并使用GraphPad Prism 5 绘制。
[0741] 图3和4中显示出采用边所获得的结果。
[0742] 因此，看起来是丛在葡萄糖负荷之后于正常小鼠体内以剂量依赖性方式降低了 血糖水平（图3)。此外，在葡萄糖负荷之前18小时口服施用的丛(3mg/kg)在血糖负荷之 后仍然减少了血糖波动（图4)。
[0743] d)评价和比较枏据本发_的化合物26与现有抟术的化合物（舍格列净-A)对抗 糖苷酶的稳定性的试骑。
[0744] 已经采用根据本发明的化合物选和用作控制β_糖苷酶有效性的参照化合物的 化合物A来进行酶稳定性试验。也已经评价了舍格列净-A稳定性，以便比较通过葡萄糖片 段的环内氧原子被CF 2片段代替而获得的代谢稳定性的改善。
[0745]
[0746] 所有的化合物均已经用糖苷酶处理。在用糖苷酶孵育后，通过HPLC分析 已经评价了化合物M和舍格列净-A的稳定性。
[0747] 使用Gilson HPLC系统，其配备有手动进样系统（V = 20 μ L)、设定在230nm波长 处的二极管阵列检测器（DAD172)和 150mmX4.6mm，5 μπι HICHROM Kromasil 100-5C18 反 相柱。使用如下的线性HPLC二元梯度：溶剂A是水且溶剂B是乙腈。在20 μ L样品进样之 后，溶剂B保持在20 %共3分钟，在17分钟内从20 %增加到90 %，保持在90 %共4分钟； 最后，溶剂B在5. 5分钟内降回至20 %并保持在20 %共3. 5分钟。
[0748] 该方法已经改编自 J. Agric. Food Chem. 2005, 53, 4918-4924。
[0749] 将100 μ L的4. 5. 104mol. Γ1下的化合物M的乙腈溶液加入到包含800 μ L的磷 酸盐缓冲液（73173Fluka，pH 7)的溶液中并在37°C下保持4小时，所述溶液中存在来自于 Almonds的β -糖苷酶（10U，100 μ L的5. 6mg. ml/1下的磷酸盐缓冲液溶液，（G4511sigma 18. 7U/mg)) 〇
[0750] 按照相同的方法，在|3-糖苷酶的存在下，已经处理了100 4 1^的4.5.1041]1〇1.171下 的舍格列净-A乙腈溶液。
[0751] 平行地，将100 μ L的4. 5. 104mol. Γ1下的对硝基苯基-β -葡萄糖苷（化合物A) 的磷酸盐缓冲液（73173Fluka，pH 7)溶液加入到包含700 μ L的磷酸盐缓冲液和100 μ L的 乙腈的溶液中并在37°C下保持4小时，所述溶液中存在来自于Almonds的β -糖苷酶（10U， 100 μ L的5. 6mg. ml/1下的磷酸盐缓冲液溶液，（G4511sigma 18. 7U/mg))。在β -糖苷酶存 在的过程中，观察到黄色染色，这突出强调了化合物A的分解。
[0752] 人们已知如一些出版物（Discov. Med. 2011，（58) : 255-263 ;Nature Reviews Drug Discovery 2010, 9, 551-559)中提及的舍格列净A经历了通过β-糖苷酶的裂解。
[0753] 已经进行了化合物红（图7)、化合物选（图8)和舍格列净-A (图10)的HPLC，以 便在实验中监视化合物21(糖苷配基部分）的形成，这意味着原料的降解。
[0754]
[0755] 已经进行了化合物迷在糖苷酶的存在下的HPLC(图9)并突出强调了由于没 有观察到化合物红的形成，所以没有发生降解。
[0756] 已经进行了舍格列净-A在β-糖苷酶的存在下的HPLC(图11)并突出强调了由 于观察到化合物红的形成，所以发生了降解。
[0757] 为了评价降解的百分比，已经对化合物进行了校准，其给出以下结果：
[0758]
[0759] 数据已经被绘制(面积％相^比于浓^ )并且^得的线性回归的特征在于以下方程 y = 53629χ 和 R2= 0· 994。
[0760] 在图11中，舍格列净-A在β-糖苷酶的存在下的HPLC谱突出强调了伴随着化合 物豇的形成，发生了降解（面积％= 416)。
[0761] 前述方程使我们能够确定化合物豇的浓度为7. 76. l(T3g/L，其相当于 3. 6. 10 8mol 〇
[0762] 这等于采用β-糖苷酶在37°C下孵育4小时后，80%的舍格列净-A发生了降解， 然而在相同的条件下，化合物迷不发生降解。
【主权项】
1.具有下列式（I)的化合物：或其药学上可接受的盐、互变异构体、立体异构体或任何比例的立体异构体的混合物， 其中： -代表选自下列的基团：-R代表CH2OH基团， -1^和1?2代表011基团， -R3代表0H基团， -当代表基团⑴时，R4代表氢原子，且当代 表基团（2)时，R4代表氢原子或0H或OR21基团，和 -X。X2、X3、X4、X5、X6、X7、父8和X9彼此独立地代表氢原子、卤素原子、OH、（C「C6)-烷基、 0R24、NR25R26或SR24基团， 其中： -R21和R24彼此独立地代表（C「Q-烷基、芳基、芳基-((：「(；)-烷基或沁-(：6)-烷 基-芳基基团，和 -R25和R26彼此独立地代表氢原子或（C「C6)-烷基或芳基-(C「C6)-烷基基团。2. 根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述立体异构体的混合物是对映异构 体的混合物。3. 根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述立体异构体的混合物是外消旋混 合物。4. 根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，它对应于下列式（la)、（lb)或（Ic):其中R、&、R2、R3、1?4和如权利要求1中所定义。5. 根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，它对应于下列式（1-2)、（I-2a)或 (I-2b)：或其药学上可接受的盐、互变异构体、立体异构体或任何比例的立体异构体的混合物， 其中R、&、R2、R3、XpX2、X3、X4、X5、X6、X7、父8和X9如权利要求1中所定义。6. 根据权利要求5所述的化合物，其特征在于，XnX2、X3、X4、X5、X6、X7、\和X9彼此独 立地选自氢原子、卤素原子、OH、（Q-C；)-烷基和OR24基团。7. 根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，它对应于下列式（1-4)、（I-4a)或 (I-4b)：或其药学上可接受的盐、互变异构体、立体异构体或任何比例的立体异构体的混合物， 其中R、&、R2、R3、R4、XpX2、X3、X4、X5、X6、X7、父8和X9如权利要求1中所定义。8. 根据权利要求7所述的化合物，其特征在于，XnX2、X3、X4、X5、X6、X7、\和X9彼此独 立地选自氢原子、卤素原子、OH、（Q-C；)-烷基和OR24基团。9. 根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，当代表基 团⑴时，R4=H且当代表基团⑵时，R4=H或0H。10. 根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，它选自下列化合物：o11. 下式的化合物：12. 根据权利要求1至11任一项所述的化合物在制备用作钠依赖性葡萄糖共转运蛋白 的抑制剂的药物中的用途。13. 根据权利要求12的用途，其特征在于，所述钠依赖性葡萄糖共转运蛋白选自 SGLT1、SGLT2 和SGLT3。14. 根据权利要求1至11任一项所述的化合物在制备旨在用于治疗或预防糖尿病、与 糖尿病有关的并发症、高血糖症、高胰岛素血症、肥胖症、高甘油三酯血症、X综合征和动脉 硬化的药物中的用途。15. 根据权利要求14所述的用途，其特征在于，所述糖尿病是II型糖尿病且所述与糖 尿病有关的并发症选自下肢关节炎、心肌梗塞、肾功能不全、神经病变和失明。16. -种药物组合物，其包含至少一种根据权利要求1至11任一项所述的化合物和至 少一种药学上可接受的载体。17. -种用于制备其中R4=H的根据权利要求1所述的化合物的方法，其包括下列式 (II)的化合物的氟化：其中如权利要求1中所定义， -R代表氢原子或氟原子或CH3、CH2F、CH2OH、CH2OSiRaRbR。、CH2ORn、CH2OCORn、CH20C02Rn、CH2OCONR12R13、CH2OP(0) (OR14) 2或CH20S03R14基团， -札和R2彼此独立地代表氟原子或0H、OSiRdReRf、OR15、0C0R15、0C02R15或0C0NR16R17基 团， -馬代表氢原子或氟原子或 〇H、0SiRgRhRi、OR18、0C0R18、0C02R18、0C0NR19R2°、NR19R2°或NR19C0R18基团， 或者R和&与携带它们的碳原子一起形成具有下式的环状缩醛：和/或汛和R2)和/或取和R3)与携带它们的碳原子一起形成具有下式的环状缩 醛：-Rn、Rl5和R18彼此独立地代表（Ci-Q)-烷基、（C2-C6)-烯基、（C2-C6)-炔基、（C3-C7)-环 烷基、5至7元环杂环烷基、芳基、芳基-(&-(；)-烷基或沁-(：6)-烷基-芳基基团，该基团 可能被一个或多个选自卤素原子、〇H、C00H和CH0基团的基团取代， -R12、R13、R16、R17、R19和R2(1彼此独立地代表氢原子或（C「C6)-烷基或芳基-(CrC6)-烷 基基团， -R14代表氢原子或（Ci-Q)-烷基基团，和 _1^至R嘴此独立地代表（C「C6)-烷基、芳基或芳基-(CrQ)-烷基基团， 接着进行脱保护步骤，当适当时以获得其中R4=H的根据权利要求1所述的化合物。18. -种用于制备其中代表基团⑵且R4#H的根据权 利要求1所述的化合物的方法，其包括下列式（VIII)的化合物与下列式（XI)的化合物的 偶联其中如上所定义且Ai代表-Li或-Mg-Hal，Hal是卤素原 子，其中： -R代表氢原子或氟原子或CH3、CH2F、CH2OH、CH2OSiRaRbR。、CH2ORn、CH2OCORn、CH20C02Rn、CH2OCONR12R13、CH2OP(0) (OR14) 2或CH20S03R14基团， -札和R2彼此独立地代表氟原子或0H、OSiRdReRf、OR15、0C0R15、0C02R15或0C0NR16R17基 团， -馬代表氢原子或氟原子或 〇H、0SiRgRhRi、OR18、0C0R18、0C02R18、0C0NR19R2°、NR19R2°或NR19C0R18基团， 或者R和&与携带它们的碳原子一起形成具有下式的环状缩醛：和/或汛和R2)和/或取和R3)与携带它们的碳原子一起形成具有下式的环状缩 醛：-Rn、Rl5和R18彼此独立地代表（Ci-Q)-烷基、（C2-C6)-烯基、（C2-C6)-炔基、（C3-C7)-环 烷基、5至7元环杂环烷基、芳基、芳基-(&-(；)-烷基或沁-(：6)-烷基-芳基基团，该基团 可能被一个或多个选自卤素原子、〇H、C00H和CH0基团的基团取代， -R12、R13、R16、R17、R19和R2(1彼此独立地代表氢原子或（C「C6)-烷基或芳基-(CrC6)-烷 基基团， -R14代表氢原子或（Ci-Q)-烷基基团，和 _1^至R嘴此独立地代表（C「C6)-烷基、芳基或芳基-(CrQ)-烷基基团， 以得到其中R、札、馬和R3如上所定义且R4= 0H的根据 权利要求1所述的式（I)的化合物， 任选地，接着进行0H官能团的取代以得到其中R、&、R2 和1?3如上所定义且1?4=卤素、(^1^_1^1、(《 21、00?21、00)21?21或00爾221? 23的根据权利要求 1所述的式（I)的化合物， 且接着进行脱保护步骤，当适当时以获得其中R、&、馬和R3如权利要求1中所定义，为基团⑵且R4=〇H、卤素、OSiRjRkR^OR'OCOR'OCC^R21或 0C0NR22R23的根据权利要求1所述的化合物。19. 一种用于制备其中R4=H的根据权利要求1所述的化合物的方法，其包括以下步 骤： (a4)其中R4= 0H的式⑴的化合物的溴代，以得到其中R4=Br的式⑴的化合物， 和 (b4)在前述步骤（a4)中获得的其中R4=Br的式⑴的化合物的还原，以得到其中R4 =H的式（I)的化合物。20. -种用于制备其中代表基团（1)的根据权利要求1 所述的化合物的方法，其包括下列式（XVI)的化合物与下列式（V)的化合物之间的偶联反 应：其中： 馬代表离去基团， -R代表氢原子或氟原子或CH3、CH2F、CH20H、CH20SiRaRbR。、CH20Rn、CH20C0Rn、CH20C02Rn、CH20C0NR12R13、CH20P (0) (OR14)2或CH 20S03R14基团， -札和R2彼此独立地代表氟原子或0H、OSiR dReRf、OR15、0C0R15、0C02R15或0C0NR 16R17基 团， -馬代表氢原子或氟原子或 〇H、0SiRgRhRi、OR18、0C0R18、0C02R18、0C0NR19R2°、NR19R2°或NR19C0R18基团， 或者R和&与携带它们的碳原子一起形成具有下式的环状缩醛：和/或汛和R2)和/或取和R3)与携带它们的碳原子一起形成具有下式的环状缩 醛：-Rn、Rl5和R18彼此独立地代表（Ci-Q)-烷基、（C2-C6)-烯基、（C2-C6)-炔基、（C3-C7)-环 烷基、5至7元环杂环烷基、芳基、芳基-(Q-C；)-烷基或（Q-C；)-烷基-芳基基团，该基团 可能被一个或多个选自卤素原子、〇H、COOH和CHO基团的基团取代， -R12、R13、R16、R17、R19和R2(1彼此独立地代表氢原子或（C「C6)-烷基或芳基-(CrC6)-烷 基基团， -R14代表氢原子或（Ci-Q)-烷基基团，和 _1^至R嘴此独立地代表（C「C6)-烷基、芳基或芳基-(CrQ)-烷基基团，接着进行脱保护步骤，当适当时以获得其中代表基团（1) 的根据权利要求1所述的化合物。
【专利摘要】本发明涉及芳基、杂芳基、O-芳基和O-杂芳基碳环糖家族。具体而言，本发明涉及下列式(I)的化合物，以及其制备方法，包含其的药学组合物，及其用途，特别是用作钠依赖性葡萄糖共转运蛋白如SGLT1、SGLT2和SGLT3的抑制剂，特别是用于治疗或预防糖尿病，并且更特别是II型糖尿病、与糖尿病有关的并发症如下肢关节炎、心肌梗塞、肾功能不全、神经病变或失明、高血糖症、高胰岛素血症、肥胖症、高甘油三酯血症、X综合征和动脉硬化，以及用作抗癌药物、抗感染药物、抗病毒药物、抗血栓形成药物和抗炎药物。
【IPC分类】C07C43/253, A61K31/381, A61K31/415, C07C43/247, A61K31/085, A61P35/00, A61P31/12, A61P19/02, A61P29/00, A61P3/04, C07C43/225, A61P3/06, A61P27/02, A61P31/00, C07C43/23, A61P3/10, A61P9/10, C07D333/16, A61P7/02, C07D231/20, A61K31/09, A61P3/00, A61P13/12
【公开号】CN104909997
【申请号】CN201510237445
【发明人】G·德利安古-戈德弗鲁瓦, L·洛佩斯
【申请人】Tf化学公司
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2012年5月29日
【公告号】CA2835755A1, CN103649033A, EP2714636A1, EP2714636B1, US20140105839, WO2012160218A1