新的(氰基-二甲基-甲基)-异噁唑及(氰基-二甲基-甲基)-[1,3,4]噻二唑的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及新的（氯基-二甲基-甲基）-异嗯挫和（氯基-二甲基-甲 基）-[1，3, 4]嚷二挫及其作为大麻素受体2激动剂（CB2受体激动剂）的用途、含有其的药 物组合物及使用运些化合物作为药剂治疗CB2受体介导的病症或病况的方法。
【背景技术】
[0002] W02008014199及W02008039645论述了CB2受体及其中所掲示CB2受体激动 剂化合物的治疗用途。最近出现其他支持证据，其中已在多个物种中展示了CB2在背 根神经节神经元中的表达（Anand等人，2008Pain138:667-680)。已显示CB2的神经 元表现在病理性疼痛病况下发生变化，此表明CB2神经元信号传导的关键作用。CB2对 上癒行为（Xi等人，化t.化u;roscience2012, 14, 1160-1166!Morales及Bonci等人， NatureMed. 2012, 18, 504-505 ；Araci!-Fernandez等人，Neuropsychopharmacology 2012, 37, 1749-1763)及其中不适应性冲动起作用的其他病况（化varrete等人， Br.J.I^armacol. 2012, 165, 260-273)的效应的最新报导已表明中屯、定位CB2的作用。 人们认为，利用激动剂高度选择性活化CB2受体可提供利用有益效应同时避免使用双 重CB1/CB2大麻素受体激动剂所见的不利效应的途径（例如参见Expert化inionon InvestigationalDrugs2005, 14, 695-703)。因此，业内期望提供具有最小化CBl活性的 CB2激动剂。
[0003]W02010036630、W02010147792及W02010077836掲示结构最接近本发明化合物的 CB2受体激动剂。
【发明内容】
[0004] 本发明提供新的（氯基-二甲基-甲基）-异嗯挫及（氯基-二甲基-甲 基）-[1，3,4]嚷二挫，即
[0005]
[0006] 或其可药用盐。
[0007] 本发明化合物为CB2受体激动剂。所掲示化合物不仅为CB2受体的强效活化剂 (分析1)，且也显示
[000引1)无或较低的CBl受体活化（分析2)，及
[0009] 2)无或较低的MDCK流出（分析3)。
[0010] 因此，本发明提供显示具有作为CB2受体激动剂的效能、针对CBl受体的高选择性 及低MDCK流出的组合的化合物。
[0011] 证实了W02010036630、W02010147792 及W02010077836 中所例示的结构最接近的 化合物不具有运种期望特性的平衡特征。因此，本发明化合物不太可能引起CBl介导的体 内副作用，且展示与最接近的现有技术化合物相比的体内流出，同时预期其在多种体内模 型中有效。因此，预期其具有较高耐受性且因此可能更适于人类应用。
【具体实施方式】
[0012] 一般定义
[0013] 根据本掲示内容及上下文，应给予本文未明确定义的术语熟习此项技术者将给予 其的含义。
[0014] 立体化学/溶剂合物/水合物
[0015] 除非明确指明，否则在说明书通篇及随附申请专利范围中，给定化学式或名称应 涵盖其互变异构体及所有立体、光学及几何异构体（例如镜像异构体、非镜像异构体、E/Z 异构体等）及外消旋物，W及不同比例的单独镜像异构体的混合物、非镜像异构体的混合 物或其中存在运些异构体及镜像异构体的前述形式中任一者的混合物，W及其盐（包含可 药用盐）及其溶剂合物（例如水合物，包含游离化合物的溶剂合物或化合物的盐的溶剂合 物）。
[0016]盐
[0017]短语"可药用"在本文中用于指在合理医学判断范畴内适于与人类及动物的组织 接触使用且无过度毒性、刺激性、过敏反应或其他问题或并发症且与合理益处/风险比相 当的那些化合物、材料、组合物和/或剂型。
[0018]如本文所使用，"可药用盐"为指所掲示化合物的衍生物，其中通过制备其酸式或 碱式盐来修饰母体化合物。可药用盐的实例包含（但不限于）碱性残基（例如胺）的无机 酸盐或有机酸盐；酸性残基（例如簇酸）的碱性盐或有机盐；及诸如此类。例如，运些盐包 含来自W下各项的盐：氨、k精胺酸、甜菜碱、苯乙节胺、节星盐化enzathine)、氨氧化巧、 胆碱、丹醇（deanol)、二乙醇胺化2' -亚氨基双（乙醇））、二乙胺、2-(二乙基氨基）-乙 醇、2-氨基乙醇、乙二胺、N-乙基-葡萄糖胺、哈胺Oiy化油amine)、IH-咪挫、赖氨酸、氨氧 化儀、4-(2-?基乙基）-吗嘟、赃嗦、氨氧化钟、1-(2-?基乙基）-化咯烧、氨氧化钢、S乙 醇胺（2, 2'，2"-氮川S(乙醇））、氨下S醇、氨氧化锋、乙酸、2. 2-二氯-乙酸、己二酸、 海藻酸、抗坏血酸、k天冬胺酸、苯横酸、苯甲酸、2, 5-二径基苯甲酸、4-乙酷氨基-苯甲 酸、（+)-精脑酸、（+)-精脑-10-横酸、碳酸、肉桂酸、巧樣酸、环拉酸、癸酸、十二烷基硫酸、 乙烧-1，2-二横酸、乙烧横酸、2-径基-乙烧横酸、乙二胺四乙酸、甲酸、富马酸、半乳糖二 酸、龙胆酸、D-葡庚糖酸、D-葡萄糖酸、D-葡糖醒酸、谷氨酸、戊二酸、2-氧代-戊二酸、甘 油憐酸、甘胺酸、乙醇酸、己酸、马尿酸、氨漠酸、盐酸、异下酸、Dk乳酸、乳糖酸、月桂酸、赖 氨酸、马来酸、（-)A-苹果酸、丙二酸、Dk苦杏仁酸、甲烧横酸、半乳糖二酸、糞-1，5-二横 酸、糞-2-横酸、1-径基-2-糞酸、烟酸、硝酸、辛酸、油酸、乳清酸、草酸、栋桐酸、扑酸（双 径糞酸）、憐酸、丙酸、（-)寸-焦谷氨酸、水杨酸、4-氨基-水杨酸、癸二酸、硬脂酸、班巧 酸、硫酸、较酸、（+)A-酒石酸、硫氯酸、对甲苯横酸及十一締酸。其他可药用盐可利用来自 如侣、巧、裡、儀、钟、钢、锋及诸如此类等金属的阳离子来形成。（也参见化armaceutical salts,Berge,S.M.等人，J.F*ha;rm.Sci. , 1977, 66, 1-19)。
[0019] 本发明的可药用盐可通过习用化学方法自含有碱性或酸性部分的母体化合物合 成。通常，运些盐可通过在水或有机稀释剂（如酸、乙酸乙醋、乙醇、异丙醇或乙腊及其混合 物）中使运些化合物的游离酸或碱形式与足量的适宜碱或酸反应来制备。
[0020] 例如可用于纯化或分离本发明化合物的除上文所提及的那些之外的酸的盐（例 如=氣乙酸盐）也构成本发明的一部分。
[0021] 生物学分析
[0022] 通过W下方法来测定化合物的生物活性。
[002引A.CB2效能的活体外测试：CB2cAMP(分析1)
[0024]将表达人类CB2R的C册细胞巧uroscreen)W10, 000个细胞/孔的密度平铺于 384孔板中且在37°C下培育过夜。移除培养基后，用稀释于含有ImMIBMX、0. 25%BSA及IOiiM福斯科林（Forskolin)的刺激缓冲液中的测试化合物处理细胞。在37°C下将分析物 培育30分钟。使细胞溶解，且遵循制造商的方案使用DiscoverX-XScAMP套组来量测cAMP 浓度。在此环境下，激动剂将减少福斯科林诱导的CAMP产生，同时反向激动剂将进一步增 加福斯科林诱导的cAMP产生。如下计算激动剂的EC50。将与1yMCP55940抑制的cAMP量 相比的福斯科林所产生cAMP的最大量定义为100 %。每一测试化合物的EC50值经测定为抑 制50%的福斯科林刺激的CAMP合成时的浓度。使用四参数逻辑斯蒂模型（four-parameter logisticmodel, 4. 0 的模型 205)来分析数据。
[00幼 B.CBl效能的活体外测试：CBlcAMP(分析。
[0026] 将表达人类CBlR的C册细胞巧uroscreen)W10, 000个细胞/孔的密度平铺于 384孔板中且在37°C下培育过夜。移除培养基后，用稀释于含有ImMIBMX、0. 25%BSA及 10yM福斯科林的刺激缓冲液中的测试化合物处理细胞。在37°C下将分析物培育30分钟。 使细胞溶解，且遵循制造商的方案使用Discove巧-XScAMP套组来量测cAMP浓度。在此环 境下，激动剂将减少福斯科林诱导的CAMP产生，同时反向激动剂将进一步增加福斯科林诱 导的cAMP产生。如下计算激动剂的EC50。将与1iiMCP55940抑制的cAMP量相比的福斯 科林所产生cAMP的最大量定义为100%。每一测试化合物的EC50值经测定为抑制50%的 福斯科林刺激的CAMP合成时的浓度。使用四参数逻辑斯蒂模型狂Lfit4.0的模型205) 来分析数据。
[0027]C.在转染有人类MDRl基因的马-达二氏犬（Madin-Darbycanine)肾细胞中流出 物的评价（MDCK分析）（分析3)
[0028] 在顶端至基底（AB)及基底至顶端度A)运输方向上量测化合物穿过MDCK-MDR1细 胞单层的表观渗透系数（P巧（pH7. 4,37°C)。AB渗透性（PEAB)表示药物自血液至脑中的 吸收，且BA渗透性（PEBA)表示药物经由被动渗透W及主动运输机制二者自脑流出返回至 血液中，运些主动运输机制是由在MDCK-MDR1细胞上表达的流出及摄取运输体、主要由过 表达的人类MDRlP-甜调介。运些化合物通过比较AB渗透性与具有已知活体外渗透性及 人类中的口服吸收的参考化合物的AB渗透性来指派渗透/吸收类别。在两个运输方向上 相同或相似的渗透性指示被动渗透，矢量渗透率指向其他主动运输机制。PEAB高于PEBA指 示设及由MDRlP-甜调介的主动流出。主动运输为浓度依赖性可饱和的。
[0029] 将MDCK-MDR1细胞（1-2XIOeS个细胞/lcm2面积）接种于过滤器插入物（Costar transwell聚碳酸醋或阳T过滤器，0. 4ym孔径）上且培养值MEM) 7天。随后，通过将细胞与 SmM下酸钢于完全培养基中一起培养2天来强化MDRl表达。将化合物溶解于适宜溶剂（如 0180、1-2〇1111储备溶液）中。用町？-4缓冲液（1 28.131111化(：1、5.3611111((：1、111111拆〇4、1. 81111 CaCl2、4. 17mMNa肥〇3、1. 19mMNa2HP〇4X7H2〇、0. 41mMNaH2P〇4XH2〇、15mM肥阳S、20mM葡萄 糖、0. 25%BSA，pH7. 4)稀释储备溶液，W制备运输溶液（0. 1-300yM化合物，最终DMS0< =0. 5% )。将运输溶液（TL)分别施加至顶端或基底外侧供体侧来量测A-B或B-A渗透率 (3个过滤器重复）。接受侧含有与供体侧相同的缓冲液。在实验开始及结束时自供体且也 在长达2小时内W不同时间间隔自接受侧收集样品，W通过HPLC-MS/MS或闪烁计数量测浓 度。用新鲜接受溶液更换经抽样接受体积。
[0030] 生物学数据
[0031]表I:如在分析1、2及3中获得的本发明化合物相对于结构最接近的现有技术化 合物的生物学数据.
[0035]表I显示当在分析1、2及3中进行评价时，本发明化合物与W02010036630、 W02010147792及W02010077836中所掲示的最接近的现有技术化合物的相关生物特性的直 接比较。数据展示本发明化合物在CB2效能、CBI活性及MDCK流出方面具有更平衡的特征。 [003引治疗方法
[0037] 本发明设及可用于治疗和/或预防其中活化大麻素受体2具有治疗益处的疾病、 病症和/或病况的化合物，包含（但不限于）治疗和/或预防疼痛；发炎性疾病和/或相关 病况；及精神病学病症和/或相关病况。
[0038] 鉴于其药理学效应，运些物质适用于治疗选自W下的疾病或病况：
[0039] (1)急性疼痛，例如牙痛、手术期间及手术后疼痛、创伤性疼痛、肌肉疼痛、由烧伤、 晒伤、=叉神经痛引起的疼痛，由绞痛W及胃肠道或子宫的疫李引起的疼痛；扭伤；
[0040] 似内脏疼痛，例如慢性骨盆疼痛、妇科疼痛、月经前及月经期疼痛，由膜脏炎、消 化性溃瘍、间质性膀脫炎、肾绞痛、胆囊炎、前列腺炎、屯、绞痛引起的疼痛，由刺激性肠、非溃 瘍性消化不良及胃炎、前列腺炎引起的疼痛，非屯、脏性胸痛及由屯、肌缺血及屯、肌梗塞引起 的疼痛；
[0041] (3)神经性疼痛，例如下背疼痛、髓部疼痛、腿痛、非瘤疹性神经痛、瘤疹后神经痛、 糖尿病性神经病变、腰紙神经根病、神经损伤引起的疼痛、后天性免疫缺乏综合征（AID巧 相关的神经性疼痛、头部创伤、毒素及化学疗法引起的神经损伤、幻肢疼痛、多发性硬化症、 神经根撕脱伤、痛性创伤性单神经病变、痛性多神经病变、丘脑疼痛综合征、中风后疼痛、中 枢神经系统损伤、术后疼痛、腕隧道综合征、=叉神经痛、乳房切除后综合征、胸空切开后综 合征、残肢疼痛、重复性运动疼痛、神经性疼痛相关的感觉过敏及异常疼痛、酒精中毒及其 他药物引起的疼痛；
[0042] (4)发炎性/疼痛受体介导的疼痛，其与（例如）W下疾病有关：骨关节炎、类风 湿性关节炎、发炎性关节病、风湿热、腫銷炎、滑囊炎、肌腫炎、痛风与痛风性关节炎、创伤性 关节炎、阴唇痛症、肌肉及筋膜损坏及疾病、幼年型关节炎、脊椎炎、牛皮癖关节炎、肌炎、牙 科疾病、流感及其他病毒性感染（例如感冒）、全身性红斑狼疮或由烧伤引起的疼痛；
[0043] (5)与诸如W下癌症相关的肿瘤疼痛：淋己或骨髓性白血病、霍奇金氏病 OlodgkinSdisease)、非霍奇金氏淋己瘤、淋己肉芽肿病、淋己肉瘤、实体性肿瘤及广泛转 移；
[0044] (6)各种来源的头痛疾病，例如丛集性头痛、偏头痛（有或无先兆）及紧张性头 痛；
[0045] (7)交感维持性疼痛，如I型及II型复合性局部疼痛综合征；
[0046] (8)混合来源的疼痛病况，例如慢性背部疼痛，包含腰痛或纤维肌痛、坐骨神经痛、 子宫内膜异位症、肾结石；
[0047] (9)发炎性和/或水肿性皮肤及黏膜疾病，例如过敏及非过敏性皮炎、异位性皮 炎、牛皮癖、烧伤、晒伤、细菌性发炎、由化学或天然物质（植物、昆虫、昆虫叮咬）诱发的刺 激及发炎、搔痒；牙銀发炎、由烧伤引起的创伤后水肿、血管性水肿或眼色素层炎；
[0048] (10)发炎相关的血管