一种新的杂萜化合物及其制备方法和医药用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物技术领域，具体设及从独活的干燥根中分离得到的一种具有治疗 膜腺癌作用的祗类化合物及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 独活为伞形科植物重齿毛当归AngelicapubescensMaxim,f.biserrataShanet 化an的干燥根。春初苗刚发芽或秋末茎叶枯萎时采挖，除去须根及泥沙，烘至半干，堆置 2~3天，发软后再烘至全干。性微溫，味辛、苦，归肾、膀脫经。有桂风除湿、通搏止痛、解表 之功效，临床上主要用于治疗风寒湿搏、腰膝疼痛、风寒挟湿表证、少阴伏风头痛等证。始载 于《神农本草经》，列为上品，言其"味苦，平。主风寒所击，金疮止痛，奔豚，痛疫，女子痛瘤。 服轻身耐老"。主产于湖北、四川、陕西、浙江等地，又称川独活、资丘独活、己东独活、恩施独 活、肉独活、浙独活、绩独活、香独活等，W根条粗壮，油润，质软，香气浓者为佳。
[0003] 目前从各种不同品种独活中已分离出香豆素、祗类、挥发油、有机酸和糖类等多种 化学成分。香豆素是独活重要的活性成分。香豆素（Coumarin)是具有苯拼a-化喃酬结 构的一类化合物。可看作是顺式邻径基桂皮酸脱水而形成的内酷，绝大多数在C,位有径基 或控基，具有芳香气味。
[0004] 现代研究证实，独活具有镇静催眠、镇痛、抑制血小板聚集、抗氧化、抗衰老、抗肿 瘤、抗血管生成等药理作用。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种从独活的干燥根中分离得到的一种具有治疗膜腺癌作 用的祗类化合物及其制备方法。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得W实现的：
[0007] 具有下述结构式的化合物（I)，
[0008]
[0009] 所述的化合物（I)的制备方法，包含W下操作步骤：(a)将独活的干燥根粉碎， 用75~85%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油酸、乙酸乙醋和水饱 和的正下醇萃取，分别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；化）步骤（a) 中乙酸乙醋萃取物用大孔树脂除杂，先用15%乙醇洗脱8个柱体积，再用75%乙醇洗脱10 个柱体积，收集75 %乙醇洗脱液，减压浓缩得75 %乙醇洗脱物浸膏；（C)步骤化）中75% 乙醇洗脱浸膏用正相硅胶分离，依次用体积比为85:1、45:1、20:1、10:1和1:1的二氯甲 烧-甲醇梯度洗脱得到5个组分；（d)步骤（C)中组分3用正相硅胶进一步分离，依次用体 积比为25:1、20:1和10:1的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤（d)中组分 2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为75%的甲醇水溶液等度洗脱， 收集8~10个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（I)。
[0010] 进一步地，步骤（a)中，用80%乙醇热回流提取，合并提取液。
[0011] 进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。
[0012] 一种药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物（I)和药学上可接受的 载体。
[0013] 所述的化合物（I)在制备治疗膜腺癌的药物中的应用。
[0014] 所述的药物组合物在制备治疗膜腺癌的药物中的应用。
[0015] 本发明化合物用作药物时，可W直接使用，或者W药物组合物的形式使用。
[0016] 该药物组合物含有治疗有效量的本发明化合物（I)，其余为药物学上可接受的、 对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0017] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料W及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物W单位体重服用量的形式使用。本发明药物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
【附图说明】 阳〇1引图1为化合物（I)结构式；
[0019] 图2为化合物（I)理论ECD值与实验ECD值比较。
【具体实施方式】
[0020] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不W此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可W对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0021] 实施例1 :化合物（I)分离制备及结构确证
[0022] 试剂来源：乙醇、石油酸、乙酸乙醋、正下醇、二氯甲烧为分析纯，购自上海凌峰化 学试剂有限公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。
[002引审恪方法：（a)独活的干燥根（IOkg)粉碎，用80%乙醇热回流提取烛LX3次）， 合并提取液，浓缩至无醇味（3L)，依次用石油酸0LX3次）、乙酸乙醋0LX3次）和水饱 和的正下醇0LX3次）萃取，分别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物（398g)和正下醇 萃取物；化）步骤（a)中乙酸乙醋萃取物用AB-8型大孔树脂除杂，先用15%乙醇洗脱8个 柱体积，再用75 %乙醇洗脱10个柱体积，收集75 %乙醇洗脱液，减压浓缩得75 %乙醇洗脱 物浸膏（163g) ; (C)步骤化）中75 %乙醇洗脱浸膏用200-300目正相硅胶分离，依次用体 积比为85:1 (10个柱体积）、45:U9个柱体积）、20:1(8个柱体积）、10:1(8个柱体积）和 1:1巧个柱体积）的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到5个组分；(d)步骤（C)中组分3 (49g) 用200-300目正相硅胶进一步分离，依次用体积比为25:1 (8个柱体积）、20:1 (10个柱体 积）和10:1巧个柱体积）的二氯甲烧-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤（d)中组分 2 (31g)用十八烷基硅烷键合的反相硅胶ODS-C18分离，用体积百分浓度为75%的甲醇水溶 液等度洗脱，收集8~10个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（I)(44mg)。
[0024] 结构确证：HR-ESIMS显示[M+Na]+为m/z361. 1304,结合核磁特征可得分子式 为(：1品2〇7,不饱和度为7。核磁共振氨谱数据Sh(卵m，DMS0-de，600MHz) :H-2(6. 34,S)， H-5 (3. 82,d，J= 15. 0)，H-5 (3. 15,d，J= 15. 0)，H-7 (5. 19,d，J=6.6)，H-8(4. 64,br， t，J= 9.6)，H-9 (2. 36,d，J= 12. 4)，H-9 (I. 39,d，J= 12. 4)，H-Il(4. 01，s)，H-15 (I.66， s)，37,s)，1-0H(12. 00,s)，4-0H巧.57,s)，8-0H巧.71，s)，IO-OH巧.08,s)， 11-OH化.16,s) ,3-0(? 化 87,s);核磁共振碳谱数据 5C(ppm,DMSO-de，125MHz) :158. 4 (C， 1-C)，98. 2 (CH，2-C)，152. 5 (C，3-C)，137.6(C，4-C)，30. 3 (細2, 5-C)，135.I(C，6-C)， 129. 8(CH，7-C)，65. 7(CH，8-C)，46. 1(邸2,9-〇,61. 5(C，10-C)，62. 6(CH，11-C)，198. 7(C， 12-C)，114. 2(C，13-C)，121. 9(C，14-C)，21.I佩，15-C)，17.I佩，16-C)，56. 0(細3， 3-OCH3);碳原子标记参见图I。红外光谱表明该化合物含有径基基团（3438cmI);此外该化 合物在374和289nm有紫外吸收，说明含有多共辆结构。IDNMR谱和服QC谱显示有17个 碳信号，分别为=个甲基（包括一个甲氧基），两个亚甲基，四个次甲基（两个締控碳和两 个含氧碳）W及八个季碳（分别为一个酬幾基，=个含氧締控碳，=个締控碳和一个含氧季 碳）。另外，一个締控质子信号5册.34(1扎3，护2)，化及六个締碳信号50158.4((：，1-〇， 98. 2 (CH，2-C)，152. 5 (C，3-C)，137.6(C，4-C)，114. 2 (C，13-C)和 121. 9 (C，14-C)，表明该化 合物含有一个五取代的苯环结构。HMBC谱中，径基质子（5H12. 00,s，l-〇H)与C-1，C-2， C-13W及5C198. 7 (C，12-C)的相关性表明幾基碳（C-。）与苯环的C-13位相连，该化合物 在374和289nm的紫外吸收也验证了运一结论。HMBC谱中，径基质子5H9. 57(lH，s，4-0H) 与5(：152.5((：，3-〇，137.6((：，4-〇和121.9((：，14-〇;甲氧基质子5册.87(3,3-0邸3)与 C-3 ;W及H-2与C-3的相关性表明甲氧基和径基分别位于C-3和C-4位上。剩余的10个 碳原子（去除苯环和甲氧基的屯个碳）形成了一个十元环单祗结构。C-8位低场的化学位 移（5C65. 7)，W及氨原子信号[5H4. 64,1H，br，t，J= 9.細Z，H-8)]，表明C-8位连有一个 径基。HMBC谱中H-8与C-6( 5C135. 1)，C-7 ( 5C129.8)，C-9 ( 5C46. 1)和C-IO(SC61. 5) 的相关性验证了上述结论。综合氨谱、碳谱、HMBC谱和ROESY谱，W及文献关于相关类型核 磁数据，可基本确定该化合物如图1所示，立体构型进一步通过ECD试验确定，理论值与实 验值基本一致（图2)。 阳0巧]实施例2:化合物（I)药理作用试验 [00%] -、材料和仪器
[0027] 人膜腺癌MiaPaCa-2细胞由天津医科大学附属肿瘤医院肿瘤研究所