032] 图8中显示该HH-F3分液，于HCC细胞株中，可向下调控AURKA及FLJ10540,以及活化 肝脏星状细胞;包含图8 (A)图显示Huh7、Mahlavu、及PLC5细胞是以HH-F3分液，于25、50、或 75μg/ml的浓度，处理3小时。藉由使用抗FLJ10540及抗AURKA抗体以进行免疫墨点法分析， AURKA及FLJ10540两者的表现是以浓度依存方式被向下调控；以及图8(B)图显示HSC-T6细 胞是以HH-F3分液，于5、15、或50μg/ml的浓度处理3小时，Fljl0540的表现是以浓度依存方 式被向下调控。
[0033] 图9中显示分液HH-F3于HCC细胞株造成细胞凋亡的效果；其中Huh7及Mahlavu细胞 是以5、25、及50μg/ml HH-F3处理48小时；图9上图及图9下图显示经过HH-F3分液处理24及 48小时（图9上图）及48小时（图9下图），该细胞溶解物遂进行免疫墨点法分析抗切割的硫胱 氨酸蛋白酶_3(anti_cleaved caspase-3)及切割的PARP(cleaved PARP)(图9上图）以及抗 FAS、抗Bcl-2、及抗Bcl-xL(图9下图），结果显示抗切割的硫胱氨酸蛋白酶-3、切割的PARP及 FAS的表现程度提高了，而Bcl-2及Bcl-xL则是下降，此显示细胞已进行细胞凋亡。
[0034]图10中显示该分液HH-F3于降低粒线体的膜电位，以及于HCC细胞株中增加 R0S的 生成;包含图10(A)图及图10(B)图是以JC-1粒线体膜电位分析法来分析Huh7及Mahlavu细 胞的粒线体膜电位（Α Ψ)，结果显示经过分液HH-F3,以5、10、15、25、及5(^8/1111浓度处理48 小时后(n = 2)，该等细胞的Δ Ψ降低了（RFU= Δ Ψ);图10(C)图及图10(D)图是以氢化乙啡 啶(hydroethidine，HE)染色法测量细胞内的超氧化物(02-)的程度，结果显示经过分液HH-F3，以5、10、15、25、及50μg/ml浓度处理48小时后，相较于对照组的HCC细胞(Huh7及Mahlavu 细胞以DMS0处理），经过分液HH-F3处理后的细胞内的超氧化物(02-)的程度下降了；以及图 10(E)图及图10(F)图是以DCFH测量细胞内过氧化物的程度，结果显示经过分液HH-F3，以5、 10、15、25、及5(^ 8/!111浓度处理48小时后，相较于对照组的!1〇：细胞(!111117及1&111 &￥11细胞以 DMS0处理），细胞内过氧化物程度增加了，且发现经过分液HH-F3处理后的Huh7及Mahlavu细 胞，其细胞内的过氧化物及超氧化物的生成，是随着剂量相关性方式增加。
[0035] 图11显示该分液HH-F3于Huh7细胞中抑制AKT-Ser473磷酸化及活化PTEN蛋白表现 的效果;经过分液HH-F3于25、50、或75μg/ml浓度处理48小时后，以抗FLJ10540、抗AURKA、抗 AKT-Ser473、及抗PTEN抗体进行免疫墨点分析;结果显示AURKA、FLJ10540、AKT-Ser473的表 现是向下调节的(减少的）；然而PTEN则是随着浓度相关性方式向上调节的(增加的）。
[0036]图12中显示本发明的GP萃取物及分液HH-F3于降低硬化病变肝中羟脯胺酸的含量 及肿瘤负荷的功效;其中将试验动物分为四组;如同材料及方法所述，其中一组是仅给予自 来水(正常组)或给予DEN溶液（另一组）；图12(A)图显示于硬化病变的动物中，其胆汁流速 减低了，其可被纪录以测量肝功能(*P〈〇. 05; AN0VA);图12(B)图显示于硬化病变的动物中， 其脾脏的大小变大了；其中测量脾脏的重量及体重(body weights，BWs)，并以脾脏重量/BW 表示;相较正常组，该DEN组的脾脏重量/BW比例明显较高;此显示脾肥大是因硬化病变相关 的门脉高血压所导致(P〈〇 . 05，AN0VA);然而仅高剂量组的脾脏重量/BW比例是明显低于该 等DEN组别者(P〈0.05，AN0VA);图12(C)图显示于硬变肝中的胶原蛋白含量增加；其中肝硬 化病变是藉由肝的羟脯胺酸含量测量，且当将高剂量组、HH-F3组及对照组相比较时，可观 察到羟脯胺酸含量明显降低；图12(D)图显示由DNE诱导的α-SMA的表现程度。于DEN处理过 程中，每一组肝样本的福尔马林/石蜡切片以抗α-SMA抗体进行染色，再以数字相机系统于 10倍视野下观察最深的染色区域来判别a_SMA( + )区域所占的百分比（*P〈0.05;**P〈0.005， AN0VA);图12(E)图显示由DEN所诱导的氧化压力。NBT(氯化硝基四氮唑蓝 (Nitrotetrazolium blue chloride))为一种染剂，当接触到超氧化物时，该染剂会被还原 成不可溶的蓝色甲瓒(formazan)衍生物，且该蓝色沈淀物可做为一组织学上的指针，并藉 由光学显微镜可判别出组织中超氧化物的存在，即可判别NBT( + )聚集的密度;如同材料及 方法所述，于10倍视野下观察最深的染色区域以判别；图12(F)图显示肿瘤负荷的测量，其 中该些肝脏是取自牺牲的动物，并将该等肝脏切成5-mm切片，并计数及测量所有直径大于 3mm的可视肿瘤结节的数量及大小。肿瘤负荷是以所有肿瘤结节的体积总和表示（**P〈 0.005，*#P〈0.001相较于DEN组）；以及图12(G)图显示化学诱导的HCC及硬化病变的外观 图，其中经过添加 DEN于饮用水中，并以口服投与9周的老鼠，导致于其硬变肝脏中出现许多 的肝肿瘤，以及可观察到于该些动物的表面有肉芽的形成，以及不均质边界的多个肝肿瘤 的形成。
[0037] 图13中显示红景天(Rhodiola rosea)萃取物于抑制HCC细胞株的细胞存活性，及 向下调节AURKA蛋白表现的功效。
【具体实施方式】
[0038] 除非有其他的定义，本文所使用的技术性及科学性术语的意义，与该领域具有通 常技艺者一般理解的意义相同。
[0039] 除非上下文中另有清楚指出，否则本文所用的单数形"一（a)"、"一（an)"及"该 (the)"包含复数形式。因此，举例而言，当指出为"一样本(a sample)"，对于该领域具有通 常技艺者可知为包含复数的样本及其同等物。
[0040] 本发明提供从植物中以DMS0萃取的新颖萃取物(简称为GP萃取物），该植物选自由 缟瓣属(Graptopetalum sp·)、红景天属（Rhodiola sp.)或石莲花属（Echeveria sp.)所组 成的群组。本发明中不可预期地发现了该GP萃取物具有抗癌活性。
[0041] 根据本发明，该萃取物可藉由二甲基亚砜(DMS0)以现有技艺中常用方法或标准方 法萃取植物以制得。在本发明一实例中，将该植物的叶子磨碎并冻干为粉末，再与DMS0进行 剧烈震荡(vortex)，较佳为30%DMS0。于以DMS0萃取前，可使用甲醇(MeOH)进一步萃取。 [00 42]于本文所用的术语"缟瓣属（Gr ap t 〇 p e t a 1 um ) "，是指任何属于缟瓣属 (Graptopetalum)的植物或其一或多部分。多于一种（species)的缟瓣属(Graptopetalum) 的组合、或其部分亦可被考虑。该缟瓣属（6以卩1：0?6丨3111111)较佳为石莲（6以？1：0?6丨3111111 Paraguayense)〇
[0043]于本文所用的术语"红景天属(Rhodiola)"，是指任何属于红景天属(Rhodiola)的 植物、或部分或其部分。多于一种（species)的红景天属(Rhodiola)的组合、或其部分亦可 被考虑。该红景天属(Rhodiola)较佳为红景天(Rhodiola rosea)。
[0044]于本文所用的术语"石莲花属(Echeveria)"，是指任何属于石莲花属(Echeveria) 的植物、或部分或其部分。多于一种（species)的石莲花属(Echeveria)的组合、或其部分亦 可被考虑。该石莲花属(Echeveria)较佳为石莲(Echeveria peacockii)。
[0045] 本发明的一较佳具体实施例中，该植物为石莲(Graptopetalum paraguayense)或 红景天（Rhodiola rosea)。
[0046] 于本文所用的术语"萃取物"，是指藉由将物质与溶剂浸泡或混合以萃取而得的溶 液。于本发明中，该萃取物为DMS0萃取物。
[0047] 本发明亦提供从植物中取得的含有丰富抗癌成分的分液，该植物是选自由缟瓣属 (Graptopetalum sp·)、红景天属（Rhodiola sp.)及石莲花属（Echeveria sp.)所组成的群 组;该分液是藉由二甲基亚砜(DMS0)萃取该植物，并藉由色层分析以分离取得的分液，称为 HH-F3。于本发明的一实例中，该植物为石莲（Graptopetalum paraguayense)或红景天 (Rhodiola rosea)。该分液是藉由DMS0萃取该植物，并藉由色层分析以分离取得分液，称为 HH-F3。于本发明一实例中，色层分析是使用Sephadex LH-20管柱。发现该分液具有细胞毒 杀效果，以及于癌细胞中，特别是HCC细胞株，如Huh7及HepG2细胞中，具有向下调控AURKA、 AURKB及FLJ10540表现的效果。于分液HH-F3的机转研究方面，发现分液HH-F3可诱发HCC进 行细胞凋亡。因此，该分液HH-F3为一种具潜力的治疗剂，可用以预防或治疗癌症，尤其是肝 癌，如HCC。
[0048] 根据本发明的一实例，藉由将分液HH-F3进行透析获得的一种次分液（sub-fraction)，称为HH-F3a。接着，从HH-F3a分液中分离活性化合物，其与已知的原花色素 (口1'〇3111:11〇〇7311丨(1;[11)化合物不同。该所得的化合物为富含3,4,5-三羟基苯甲基部份的原花 色素。该化合物具有下式I的结构式，
[0049]
1234 式 I 2 其中R中有一者为Η或原花青素(prucyanidin，PC)单元;而其他的R为0H或原飞燕 草素(prodelphindine，Ρ?)单元;η为从21至38的数字;且PC单元:PD单元〈1:20。该原花青素 (PC)单元的结构为 3
[0052]
4 以及该原飞燕草素(PD)单元的结构为
[0054]
[0055] 因此，本发明提供式I化合物，其被证明具有抗癌活性。于本发明的一实例中，该具 有式I的化合物可从缟瓣属(Graptopetalum sp·)、红景天属（Rhodiola sp.)或石莲花属 (Echeveria sp.)植物中以DMS0萃取得到DMS0萃取物。透过西方墨渍法分析AURKA的向下调 控表现情形以筛选DMS0萃取物，并透过透析及进一步纯化得到称为"HH-F3"的次分液。
[0056] 本发明提供一种医药组合物，其包含治疗有效量的本发明的萃取物、分液或式I化 合物，及医药上可接受的载剂。
[0057] 于本文所用的术语"治疗有效量"，是指药剂的量足以达成所欲的治疗目的。例如， 治疗HCC的石莲花有效量为足以杀死HCC细胞的剂量。给予药剂的治疗有效量可能会随着不 同因子而有所不同，诸如药剂的本质、投与方式、动物的大小及种类、及投与目的皆会对治 疗有效量有所影响。每一个体案例的治疗有效量可以藉由熟谙技艺的技能者，根据本发明 所揭露者及现有技艺所