一种仿病毒结构高分子囊泡及其制备方法与应用_2

文档序号:9919449阅读:来源:国知局
囊泡;所述干燥条件为于35?65°C干燥2?6h,所述搅拌时间为10?72h,搅拌转速都为100?750r/min。
[0035]步骤(I)中所述不同的两亲性嵌段共聚物与有机溶剂的质量比为1:(5?50);或两亲性嵌段共聚物和水溶性聚合物的总质量与有机溶剂的质量比为1: (5?50)。
[0036]步骤(I)中所述有机溶剂为四氢呋喃(THF)、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、N,N-二甲基乙酰胺(DMAC)、二氯甲烧(DCM)、氯仿(CHCl 3)、醋酸甲酯(methyl acetate)、甲基氰(Acetonitrile)、乙醇(Ethanol)、甲基异丁酮(MIBK)、六氟异丙醇(HFIP)、丙酮(Acetone)或石油醚(Petroleum ether)中的一种以上。
[0037]步骤(2)中所述高分子溶液与水或PBS缓冲溶液质量比为I: (2?6)。
[0038]步骤(2)中所述负载物与不同的两亲性嵌段共聚物的质量比为(0.1?20)mg:1g;或所述负载物与两亲性嵌段共聚物和水溶性聚合物的总质量比(0.1?20)mg:lg。
[0039]负载物可以可以在配制高分子溶液中加入也可以在高分子溶液去除有机溶剂后加入。
[0040]步骤(2)中所述的溶液互加顺序可以是将高分子溶液加入到水或PBS缓冲溶液中,也可是将水或PBS缓冲溶液加入到高分子溶液中。
[0041]所述仿病毒结构高分子囊泡在高效纳米载体中的应用,优选地在负载蛋白、生长因子给细胞中的应用;
[0042]所述仿病毒结构高分子囊泡在药物控释中的应用,优选地在负载药物、抗体、基因片段用于细胞靶向药物释放和基因领域中的应用;
[0043]上述仿病毒结构高分子囊泡在细胞成像领域中的应用,优选地在负载荧光分子在肿瘤细胞和组织影像领域中的应用。
[0044]所述仿病毒结构高分子囊泡用于高效纳米载体、药物控释、细胞成像以及纳米反应器的领域。
[0045]与现有技术相比,本发明具有如下优点及有益效果:
[0046](I)本发明通过改变嵌段共聚物的分子结构(不同嵌段比和种类)、嵌段共聚物与嵌段共聚物的质量组分比或嵌段共聚物与水溶性聚合物的质量组分比来调控高分子囊泡中的疏水链段与亲水链段嵌段比值,进而控制所形成高分子囊泡的结构,可以实现从微观到宏观调控、仿病毒核衣壳及表面刺突结构和特定功能性的设计;
[0047](2)本发明的制备过程工艺简单可行,生产效率高、重复性好,适合于仿病毒结构高分子囊泡制备方法的推广;
[0048](3)本发明的仿病毒结构高分子囊泡可用于高效纳米载体、药物控释、细胞成像以及纳米反应器相关领域。
【附图说明】
[0049]图1为本发明的仿病毒结构高分子囊泡的示意图;I为高分子囊泡,2为刺突,3为衣壳膜结构(包括疏水链段构成的中间层和亲水链段构成内外层);
[0050]图2为实施例1制备的仿病毒结构高分子囊泡的扫描电镜照片,放大倍数为8000倍;
[0051]图3为实施例2制备的仿病毒结构高分子囊泡的扫描电镜照片,放大倍数为10000倍;
[0052]图4为实施例5制备的仿病毒结构高分子囊泡的扫描电镜照片;放大倍数为50000倍;
[0053]图5为实施例7制备的仿病毒结构高分子囊泡的扫描电镜照片;放大倍数为80000倍;
[0054]图6为实施例7制备的负载有FITC和DOX的仿病毒结构高分子囊泡被细胞吞噬后3小时的共聚焦显微镜照片(630倍);其中(I)为FITC的共聚焦显微镜照片,(2)为DOX的共聚焦显微镜照片,(3)为细胞核染色的激光共聚焦显微镜照片,(4)为(I)?(3)这三者的合并图。
【具体实施方式】
[0055]以下结合实施例对本发明作进一步详细的描述,但实施例并不对本发明做任何形式的限定。
[0056]实施例1
[0057](I)取PEG(PEG-5000,即分子量为5000Da的PEG)、丙交酯(PEG与丙交酯的摩尔比为1:0.3)和辛酸亚锡(辛酸亚锡用量为PEG-5000质量的0.1% )—起加入到甲苯中,氮气氛下120 0C恒温搅拌18h(转速为350r/min),然后过量冷乙醚中沉析,抽滤,55°C真空干燥4h,得PEG5QQ()-b-PLA2()(X)嵌段共聚物;
[0058](2)改变PEG和丙交酯的加入量即PEG-5000与丙交酯的摩尔比为1:3,得PEG5QQ()-b-PLA45000嵌段共聚物;
[0059](3)称取 0.05g 嵌段共聚物 PEG5_-b-PLA2Q()()和 0.05g 嵌段共聚物 PEG5_-b_PLA45ooo加入到Ig的DCM中,机械搅拌6min(搅拌的转速为750r/min),得到高分子溶液(嵌段共聚物的用量为有机溶剂的1wt % );
[0060](4)将高分子溶液加到6.6g的去离子水中,持续搅拌(搅拌的转速为150r/min)18h,即得仿病毒结构高分子囊泡。所述仿病毒结构高分子囊泡的扫描电镜照片如图2所示,从图中可见,囊泡上有刺突结构。
[0061 ] 实施例2
[0062](I)将PEG-5000溶解于甲苯中,加入辛酸亚锡(辛酸亚锡用量为PEG-5000质量的
0.1%),氩气保护下,缓慢加入己内酯单体(PEG-5000和己内酯摩尔比为1:1),110°C恒温搅拌48h(转速为300r/min),减压旋蒸除去甲苯,过量冷乙醚中沉析,抽滤,55°C真空干燥4h,得 PEG5QQ()-b-PCL5()(X)嵌段共聚物;
[0063](2)取PEG(PEG-5000)、丙交酯(PEG-5000与丙交酯的摩尔比为l:5)和辛酸亚锡(辛酸亚锡用量为PEG-5000质量的0.1 % )—起加入到甲苯中,氮气氛下120°C恒温搅拌18h(转速为350r/min),然后过量冷乙醚中沉析,抽滤,55°C真空干燥4h,得PEG5Q(x)-b-PLA95_嵌段共聚物;
[0064](3)称取 0.05g 嵌段共聚物 PEG5_-b-PCL5QQ()和 0.05g 嵌段共聚物 PEG5_-b-PLA95000加入到5g的DMAC中,机械搅拌10min(搅拌的转速为200r/min),得到高分子溶液(嵌段共聚物的用量为有机溶剂的2wt% );
[0065](4)将1.2 g的P B S缓冲液加入到嵌段高分子溶液中,持续搅拌(搅拌的转速为300r/min)72h,即得仿病毒结构高分子囊泡。所述仿病毒结构高分子囊泡的扫描电镜照片如图3所示,从图中可见囊泡上有刺突结构。
[0066]实施例3
[0067](I)将PEG-5000溶解于甲苯中,加入辛酸亚锡(辛酸亚锡用量为PEG-5000质量的
0.1%),氩气保护下,缓慢加入己内酯单体(PEG和己内酯摩尔比为1: 0.4),110 °C恒温搅拌48h(转速为300r/min),减压旋蒸除去甲苯,过量冷乙醚中沉析,抽滤,55°C真空干燥4h,得PEG5QQ()-b-PCL25(X)嵌段共聚物;
[0068](2)改变PEG和己内酯的加入量即PEG和己内酯摩尔比为1: 3,得PEG5QQ()-b-PCL45ooo嵌段共聚物;
[0069](3)称取 0.05g 嵌段共聚物 PEG5_-b-PCL25QQ 和 0.05g 嵌段共聚物 PEG5_-b_PCL45ooo加入到Ig的DCM/石油醚(质量比2: 3)中,机械搅拌20min(搅拌的转速为200r/min),得到高分子溶液(嵌段共聚物的用量为有机溶剂的10wt% );
[0070](4)将高分子溶液于35 °C真空干燥6h除去有机溶剂,加入6g水,持续搅拌(搅拌的转速为200r/min) 72h,即得仿病毒结构高分子囊泡。
[0071 ] 实施例4
[0072](l)取PEG(PEG-5000)、丙交酯(PEG-5000与丙交酯的摩尔比为l:l)和辛酸亚锡(辛酸亚锡用量为PEG-5000质量的0.1 % )—起加入到甲苯中,氮气氛下120°C恒温搅拌18h(转速为350r/min),然后过量冷乙醚中沉析,抽滤,55 °C真空干燥4h,得PEGMoo-b-PLAMoo嵌段共聚物;
[0073](2)同实施例2的步骤(2),得到PEG5Q(x)-b-PLA95(xx)嵌段共聚物;
[0074](3)称取0.2g嵌段共聚物PEG5_-b-PLA5QQ(^P0.1g嵌段共聚物PEG5_-b_PLA95_加入到1.5g的THF中,机械搅拌6min(搅拌的转速为100r/min),得到高分子溶液(嵌段共聚物的用量为有机溶剂的20wt% );
[0075](4)将高分子溶液于65°C真空干燥2h除去有机溶剂,加入5g水,持续搅拌(搅拌的转速为200r/min)12h,即得仿病毒结构高分子囊泡。
[0076]实施例5
[0077](I)同实施例2的步骤(I),得到PEG5_-b_PCL5_嵌段共聚物;
[0078](2)称取0.05g嵌段共聚物PEG5Q()()-b-PCL5()(x^P0.05g水溶性聚合物PEG2q_加入到2g的DMF中,机械搅拌10min(搅拌的转速为200r/min),得到高分子溶液(嵌段共聚物和水溶性聚合物的用量为有机溶剂的5wt% );
[0079](3)将10.2g的I3BS缓冲液加入到高分子溶液中,转移至透析袋,透析48h除去DMF,得到仿病毒结构高分子囊泡。所述仿病毒结构高分子囊泡的扫描电镜照片如图4所示,从图中可见囊泡上有刺突结构。
[0080]实施例6
[0081 ] (I)同实施例2的步骤(I),得到PEG5_-b_PCL5_嵌段共聚物;
[0082](2)称取0.05g嵌段共聚物PEG5(xx)-b-PCL5_和0.01g分子量为50000Da的聚多肽加入到3g的THF中,机械搅拌10min(搅拌
当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1