一种聚集诱导发光纳米荧光探针及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种荧光探针的制备方法，尤其是具有聚集诱导发光特性的羟基磷灰 石/壳聚糖纳米荧光探针的制备方法。
【背景技术】
[0002] 探针是一种能和某特异靶分子相互作用，实现对靶分子进行检测的分子，并要求 相互作用后对被探测对象不产生或仅产生可忽略的干扰。荧光探针就是以荧光物质作为指 示剂，并在一定波长光的激发下使指示剂产生荧光，通过检测所产生的荧光实现对被检测 物质的定性或者定量分析。在过去二十年中，荧光探针用于检测活细胞或者动物的生物学 过程引起了化学家和生物学家的广泛关注，已经发展了多种荧光生物探针，如：小分子荧光 探、无机纳米粒子针和荧光聚合物等。传统的小分子荧光探针具有聚集诱导淬灭（AC?现 象，即在稀溶液中荧光较强而聚集态时荧光减弱甚至没有荧光，这极大地限制了其应用和 发展。采用无机量子点（QDs)可避免ACQ现象，但必须对其进行表面亲水改性，以降低毒 性。另一改善传统小分子荧光探针ACQ效应的方法是将其标记在大分子链上，形成荧光聚 合物。大分子链的链段可以阻隔荧光团，减轻荧光团的聚集，但如果标记的量较大，或者浓 度较高，荧光团具有疏水的芳香核，仍然趋向聚集。
[0003] 对于荧光探针技术所面临的ACQ效应和细胞毒性两大问题，聚集诱导发光（AIE) 荧光分子的发现无疑提供了极佳的解决思路。AIE效应使得荧光探针易于使用，并且AIE体 系对细胞没有毒性，不会影响细胞生理学和细胞增殖。将AIE分子标记在大分子链上可有 效提高生物相容性及避免染料泄露。用来固定染料的大分子应该具有良好的生物相容性和 较高反应活性和亲水性。壳聚糖作为一种富含氨基的天然多糖，自然成为上佳之选。而羟 基磷灰石以其优异的生物相容性(与自然骨组成类似）和独特的针状结晶结构在生物成像、 药物控释等方面有着良好的应用前景。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的是提供一种灵敏度高，光稳定性好，高浓度时无淬灭，荧光光谱不漂 移的聚集诱导发光纳米荧光探针的制备方法。
[0005] 本发明的聚集诱导发光纳米荧光探针，在羟基磷灰石纳米粒子表面包覆具有聚集 诱导发光特性的壳聚糖荧光分子，壳聚糖荧光分子的结构式如式（1)所示， 式（1)
【主权项】
1. 一种聚集诱导发光纳米巧光探针，其特征是在哲基磯灰石纳米粒子表面包覆具有聚 集诱导发光特性的壳聚糖巧光分子，壳聚糖巧光分子的结构式如式（1)所示，
式（1) 式中；m、x、y分别为重复单元数。
2. 制备权利要求1所述的聚集诱导发光纳米巧光探针的方法，其特征在于步骤如下： 1) 将无水氯化巧、磯酸二氨钢和水合巧樣酸=钢按物质的量的比5:5:1混合，加入= 蒸水，磁力揽拌下滴加冰醋酸溶解，冰醋酸的用量为混合液体积的2%，制成浓度为5mg/mL 哲基磯灰石前驱体溶液； 2) 将步骤1)制得的哲基磯灰石前驱体溶液用=蒸水稀释至11113/111以揽拌下用碱溶液 调节抑=10,继续揽拌过夜，制得哲基磯灰石纳米粒子溶液； 3) 将标记率为0.1mol% - 20mol%的ME巧光标记壳聚糖溶于体积浓度为2%醋酸水 溶液中，配制浓度为0. 1-5mg/mL的AIE巧光标记壳聚糖醋酸溶液； 4) 将步骤2)制得的哲基磯灰石纳米粒子溶液离屯、弃去上清液，再用=蒸水清洗、离 屯、，将沉淀加入到步骤3)制得的AIE巧光标记壳聚糖醋酸溶液中，揽拌至少1h，离屯、弃去 上清液，加S蒸水使哲基磯灰石纳米粒子浓度为1mg/mU揽拌，得到聚集诱导发光纳米巧 光探针。
【专利摘要】本发明公开的聚集诱导发光纳米荧光探针在羟基磷灰石纳米粒子表面包覆具有聚集诱导发光特性的壳聚糖荧光分子，壳聚糖荧光分子的结构式如式（1）所示。采用化学共沉析法制备。该聚集诱导发光纳米荧光探针尺寸在110nm左右，分散稳定，表面带正电，且具有聚集诱导发光特性，与传统荧光探针相比，具有灵敏度高，光稳定性好，高浓度时无淬灭，荧光光谱不漂移等优点，有望应用于生物成像、荧光示踪检测等领域。式（1）。
【IPC分类】C09K11-71, C09K11-02, C09K11-06
【公开号】CN104845607
【申请号】CN201510123300
【发明人】王征科, 贾婧玮, 刘亚蓝, 胡巧玲, 唐本忠
【申请人】浙江大学
【公开日】2015年8月19日
【申请日】2015年3月20日