专利名称：高存活性的活菌制剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种活菌制剂及其制备方法，特别是一种两歧双歧杆菌和嗜酸乳杆菌复合的活菌胶囊及其制备方法。
目前，人们经常使用活菌制剂进行医疗保健，活菌制剂在生产加工和运输保存过程中会出现菌体死亡的现象，导致活菌存活率不高，活菌制剂保存期短。中国专利CN123865A中公开了一种双歧三联活菌制剂及其制备方法，该专利采用活菌冻干粉制成胶囊、颗粒剂或片剂；中国专利CN1113515A中公开了一种双歧杆菌微胶囊及其制造方法，该专利采用活菌与液体囊材经过充分混合形成微胶囊。
本发明的目的在于提供一种高存活性的活菌制剂及其制备方法，活菌存活率高，能够在常温下长期保存。
本发明提供一种高存活性的活菌制剂的制备方法，包括如下步骤①将嗜酸乳杆菌和两歧双歧杆菌分别进行液体深层高密度培养，得到发酵液，每毫升嗜酸乳杆菌发酵液含有活菌数大于4×108个，每毫升两歧双歧杆菌发酵液含有活菌数大于5×108个；②两种发酵液混合经过离心处理后收集菌泥，加入保护剂制成冻干粉；③将冻干粉混加微胶囊囊材经过空气悬浮处理制成微胶囊；④将微胶囊粉状颗粒在填充氮气的条件下灌装成胶囊；⑤将胶囊在填充氮气的条件下进行双铝包装。
上述保护剂包括重量按照混合菌泥重量百分比计为20％--30％的脱脂奶粉，重量为10％--20％的乳糖，重量为0.01％--1.0％的维生素C钠，重量为10％--30％的淀粉，重量为0.5％--2％的无机盐。
上述的微胶囊囊材包括重量按照混合菌泥重量百分比计为10％--15％的果胶，重量为10％--15％的明胶，重量为20％--30％的油脂。
一种用上述方法获得的高存活性的活菌制剂，每克制剂含有嗜酸乳杆菌数大于2×1011个，两歧双歧杆菌数大于2×1011个。
嗜酸乳杆菌发酵液pH值为4.8-5.5，两歧双歧杆菌发酵液pH值为5.5-6.2。
本发明由于对活菌体采用冻干粉、微胶囊、充氮气灌装胶囊、充氮气双铝包装四重保护措施，使得菌体存活率得到显著提高，制剂保存期可以在常温下达到两年。
下面结合下述非限定性实施例对本发明做进一步描述。
实施例1.在两个发酵罐中分别配制MRS培养基，在121℃--132℃灭菌10--15分钟，分别接种10％的两歧双歧杆菌和嗜酸乳杆菌，通入灭菌空气，40℃培养12小时后每毫升嗜酸乳杆菌发酵液含有活菌数大于4×108个，每毫升两歧双歧杆菌发酵液含有活菌数大于5×108个；嗜酸乳杆菌发酵液pH值为4.8，两歧双歧杆菌发酵液pH值为5.5，在离心机上以12000转/分钟的转速提取混合菌泥2kg，离心时物料降温直至20--25℃。
将500g奶粉、300g乳糖、10g维生素c钠、600g淀粉和20g氯化钠混配成保护剂配以适量无菌水，加入菌泥低速搅拌和乳化，连续运转不超过2分钟，乳化出锅的物料在-40℃以下抽真空冷却制成冻干粉，置于无菌密实袋内充氮气保存。
将250g果胶、250g明胶和500g牛油熔化后冷却至45℃，加入冻干粉，喷入无菌空气，使物料呈现适当沸腾状态，温度控制在30-32℃，操作环境湿度小于50％，使得两菌冻干粉被包衣形成微胶囊颗粒。
将净重210毫克的微胶囊颗粒在通入1公斤压力的氮气的条件下填充入胶囊中，填充后的胶囊重量标准为272毫克。
在充填氮气的条件下将胶囊包入双铝包装中。
实施例2采用实施例1所述的制备方法，其保护剂配方为400g奶粉、200g乳糖、0.5g维生素c钠、300g淀粉和10g氯化钠；其微胶囊包衣的配方为200g果胶、200g明胶和400g牛油。
实施例3采用实施例1所述的制备方法，其保护剂配方为600g奶粉、400g乳糖、20g维生素c钠、600g淀粉和35g氯化钠；其微胶囊包衣的配方为300g果胶、300g明胶和600g牛油。
权利要求
1.一种高存活性的活菌制剂的制备方法，包括如下步骤①将嗜酸乳杆菌和两歧双歧杆菌分别进行液体深层高密度培养，得到发酵液，每毫升嗜酸乳杆菌发酵液含有活菌数大于4×108个，每毫升两歧双歧杆菌发酵液含有活菌数大于5×108个；②两种发酵液混合经过离心处理后收集菌泥，加入保护剂制成冻干粉；③将冻干粉混加微胶囊囊材经过空气悬浮处理制成微胶囊；④将微胶囊粉状颗粒在填充氮气的条件下灌装成胶囊；⑤将胶囊在填充氮气的条件下进行双铝包装。
2.根据权利要求1所述的高存活性的活菌制剂的制备方法，其特征在于上述保护剂包括重量按照混合菌泥重量百分比计为20％--30％的脱脂奶粉，重量为10％--20％的乳糖，重量为0.01％--1.0％的维生素C钠，重量为10％--30％的淀粉，重量为0.5％--2％的无机盐。
3.根据权利要求1所述的高存活性的活菌制剂的制备方法，其特征在于上述的微胶囊囊材包括重量按照混合菌泥重量百分比计为10％--15％的果胶，重量为10％--15％的明胶，重量为20％--30％的油脂。
4.一种用权利要求1所述的方法制备的高存活性的活菌制剂，每克制剂含有嗜酸乳杆菌数大于2×1011个，两歧双歧杆菌数大于2×1011个。
5.根据权利要求4所述的高存活性的活菌制剂，其特征在于嗜酸乳杆菌发酵液pH值为4.8-5.5，两歧双歧杆菌发酵液pH值为5.5-6.2。
全文摘要
本发明提供一种高存活性的活菌制剂及其制备方法,将嗜酸乳杆菌和两歧双歧杆菌活菌体采用冻干粉、微胶囊、充氮气灌装胶囊、充氮气双铝包装四重保护措施,制成活菌制剂,每克制剂含有嗜酸乳杆菌数大于2×10
文档编号B01J13/02GK1373207SQ0110906
公开日2002年10月9日 申请日期2001年2月28日 优先权日2001年2月28日
发明者宋锦安 申请人:上海双金生物科技有限公司