一种Alda-1口服自微乳制剂及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种Alda-1口服自微乳制剂及其制备方法，由以下重量份的组分制成，0.1-2份的Alda-1、15-45份的油相、35-55份的表面活性剂、35-55份的助表面活性剂。制备方法为先将所述重量份的油相，表面活性剂和助表面活性剂搅拌，混合均匀，形成空白自微乳，再向上述空白自微乳中加入所述重量份的Alda-1后，搅拌，混合均匀，即得Alda-1口服自微乳制剂。本发明采用自微乳纳米技术显著提高了Alda-1的溶解度和口服生物利用度，且制备方法简单，成本低。同时，避免了DMSO等有机溶剂的使用，便于进一步促进Alda-1向临床应用转化，增加其长期应用的安全性。
【专利说明】—种Alda-1 口服自微乳制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种自微乳，特别涉及一种Alda-1 口服自微乳制剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002]乙醒脱氢酶2 (aldehyde dehydrogenase2, ALDH2)是一种重要的具有细胞保护作用的酶，能够将各种外源性和内源性醛类物质，如乙醛、4-壬烯醛(4-hydroxy-2-nonenal, 4-HNE)氧化为相应的酸,减少醒类物质导致的细胞损伤。研究发现在心脏缺血-再灌注过程中，ALDH2活性与心肌梗死面积高度负相关(r2 = 0.95)，提示ALDH2具有重要的心肌保护作用。另外，ALDH2对神经退行性病变、酒精性肝损伤、肿瘤等均具有保护作用。 [0003]然而，ALDH2基因存在一种重要的突变位点Glu504Lys，导致酶活性的显著降低；体外研究发现，突变后酶活性仅为正常野生型的6%。ALDH2基因Glu504Lys突变主要存在于东亚黄种人中(突变携带者约30%-50%)，而在白种人中罕见。因此，提高ALDH2活性，尤其是突变携带者的ALDH2活性，具有重要的临床意义。基于提高ALDH2活性的药物研发具有重要的临床应用前景。
[0004]斯坦福大学Mochly-Rosen教授通过高通量方法从60000多种化合物中筛选出一种小分子化合物质 Alda-1 (化学名:N_ (1，3-Benzodioxo 1-5-yImethyI) _2，6-dichlorobenzamide,分子式=C15H11C2NO3,结构式见图1)，显著提高ALDH2酶活性，为相关药物研发提供新思路和方向。由于Alda-1在水中溶解性极差，因此，目前实验研究中常使用二甲基亚砜(DMSO)等有机溶剂溶解Alda-1，通过静脉途径给药。此种给药系统存在缺点有:(I)有机溶剂DMSO等通常具有一定的毒性，长期应用存在安全隐患；(2)静脉给药操作复杂，不利于治疗肿瘤、神经系统退行性病变等需长期用药的慢性疾病。因此，Alda-1药物自身的缺陷限制其进一步向临床应用转化，目前国内外尚未有自微乳制剂用于Alda-1的报道。
【发明内容】
[0005]本发明的目的是为克服上述现有技术的不足，提供一种Alda-1 口服自微乳制剂及其制备方法，本发明将Alda-1制成自微乳制剂以提高Alda-1在水中的溶解性，减少有机试剂的加入，提高其生物安全性，并且自微乳制剂实现Alda-1 口服途径给药，以期提高患者的顺从性，有利于促进Alda-1向临床应用转化。
[0006]为实现上述目的，本发明采用下述技术方案:
[0007]一种Alda-1 口服自微乳制剂，由以下重量份的组分制成，0.1-2份的Alda-1、15-45份的油相、35-55份的表面活性剂、35-55份的助表面活性剂。
[0008]优选，上述Alda-1 口服自微乳制剂，由以下重量份的组分制成，1份的Alda-UlO份的油相、54份的表面活性剂、35份的助表面活性剂。
[0009]所述油相为蓖麻油、油酸乙酯、肉豆蘧酸异丙酯或丙二醇单辛酸酯(CapryO190)中的一种或一种以上的混合物。[0010]所述表面活性剂为聚氧乙烯蓖麻油(Cremophor EL)、吐温80或乳化剂OP中的一种或一种以上的混合物。
[0011]所述助表面活性剂为二乙二醇单乙基醚(Transcutol HP)、甘油或聚乙二醇400中的一种或一种以上的混合物。
[0012]上述Alda-1 口服自微乳制剂的制备方法如下:1)将所述重量份的油相，表面活性剂和助表面活性剂搅拌，混合均匀，形成空白自微乳；2)向上述空白自微乳中加入所述重量份的Alda-1后，搅拌，混合均匀，即得Alda-1 口服自微乳制剂。
[0013]所述步骤I)中的搅拌为磁力搅拌2-8min (优选3min)。
[0014]所述步骤2)中的搅拌为磁力搅拌2-8min (优选3min)。
[0015]本发明的有益效果是，自微乳给药系统(self-microemulsifying drug deliverysystem, SMEDDS)是由油、表面活性剂和助表面活性剂或少量水组成的均一透明溶液，可作为疏水性、难吸收或易水解药物的载体。通过将药物包裹在油滴中，口服后遇体液在胃肠蠕动下自发分散形成0/W型微乳。该系统可通过提高药物的溶解度，降低表面张力，形成易通过胃、肠壁的水化层，增加对肠道上皮细胞的穿透性等优势显著提高药物生物利用度。
[0016]Alda-1 在水中的溶解度比较低，因此将其制成自微乳制剂，由油相、表面活性剂和助表面活性剂组成，当三者以适当比例混合后，在水中能够自微乳化形成0/W型微乳，进而增大Alda-1的溶解度。
[0017]本发明首次将Alda-1制备成液体制剂的形式用以实验口服使用。
[0018]本发明采用自微乳纳米技术可显著提高Alda-1的溶解度和口服生物利用度，且制备方法简单，成本低。同时，避免了 DMSO等有机溶剂的使用，便于进一步促进Alda-1向临床应用转化，增加其长期应用的安全性。
【专利附图】
【附图说明】
[0019]图1 是 C15H11C2NO3 的结构式；
[0020]图2是Alda-1自微乳制剂的透射电镜照片；
[0021]图3是大鼠给予不同处理后肝脏ALDH2活性的比较；
[0022]图4大鼠给予不同处理后心肌ALDH2活性的比较。
【具体实施方式】
[0023]下面结合实施例以及附图对本发明进行进一步的说明。
[0024]实施例1
[0025]一种 Alda-1 口服自微乳制剂的制备，称取 Cremophor EL0.555g, TranscutolHP0.345g, Capryol900.1g,在室温下，磁力搅拌5min,形成空白自微乳，加入Alda-10.008g,磁力搅拌6min使之溶解,得到Alda-1自微乳制剂。
[0026]实施例2
[0027]一种Alda-1 口服自微乳制剂的制备,称取Capryol900.175g,吐温800.6g,聚乙二醇4000.225g,在室温下,磁力搅拌3min,形成空白自微乳,加入Alda-10.008g,磁力搅拌IOmin使之溶解,得到Alda-1自微乳制剂。
[0028]实施例3[0029]一种Alda-1 口服自微乳制剂的制备，称取蓖麻油0.15g，乳化剂ΟΡΟ.35g，甘油
0.35g,在室温下,磁力搅拌8min空白自微乳,加入Alda-10.0OOlg,磁力搅拌2min使之溶解，得到Alda-1自微乳制剂。
[0030]实施例4
[0031]—种Alda-1 口服自微乳制剂的制备，称取油酸乙酯0.45g,聚氧乙烯蓖麻油0.55g, 二乙二醇单乙基醚0.55g,在室温下，磁力搅拌5min,形成空白自微乳，加入Alda-10.002g,磁力搅拌IOmin使之溶解,得到Alda-1自微乳制剂。
[0032]实施例5
[0033]—种Alda-1 口服自微乳制剂的制备，称取肉豆蘧酸异丙酯0.1g,乳化剂0P0.54g, 0.35g聚乙二醇400，在室温下，磁力搅拌6min,形成空白自微乳，加入Alda-10.0Olg,磁力搅拌6min使之溶解,得到Alda-1自微乳制剂。
[0034]1.Alda-1自微乳粒径的实验测定:
[0035]取实施例1所获自微乳制剂0.5g，用水稀释50倍，用贝克曼粒径测定仪测自微乳的粒径大小及其分布，结果发现粒径在20-100nm范围内。
[0036]2.Alda-1自微乳透射电镜的观察:
[0037]取实施例1所获自微乳样品0.5g，用水稀释100倍，将稀释后的自微乳滴加在铜网上，用质量分数为I %的磷钨酸染色15s，干燥后，置于透射电镜下观察，如图2所示，微乳在电镜下呈圆球状，无黏连，分散性良好。
[0038]3.Alda-1 口服自微乳显著提高肝脏ALDH2活性
[0039]大鼠给予Alda-1 口服自微乳连续灌胃3天，给药剂量16mg/kg/day，显著提高肝脏组织ALDH2的活性(与Conl、Con2相比，均为P〈0.05) ;Alda_l 口服自微乳给药组大鼠肝脏ALDH2活性提高的幅度与静脉注射溶解于DMSO的Alda-1，给药剂量8mg/kg/day相比，差异并无统计学意义。如图3所示，Conl，大鼠静脉注射DMS0，给药剂量lml/Kg/day ;Con2，大鼠口服空白自微乳，给药剂量2g/kg/day ;Alda_l，大鼠静脉注射溶解于DMSO的Alda_l，给药剂量8mg/kg/day ;ME-Alda_l,大鼠口服Alda-1自微乳制剂,给药剂量16mg/kg/day。
[0040]4.Alda-1 口服自微乳显著提高心脏ALDH2活性
[0041]如图4所示,大鼠给予Alda-1 口服自微乳连续灌胃3天,给药剂量16mg/kg/day,显著提高心脏组织ALDH2的活性(与Conl、Con2相比，均为P〈0.05) ;Alda_l 口服自微乳给药组大鼠心脏ALDH2活性提高的幅度与静脉注射溶解于DMSO的Alda-1，给药8mg/Kg/day相比，差异并无统计学意义。其中Conl，大鼠静脉注射DMS0，给药剂量lml/Kg/day ；Con2,大鼠口服空白自微乳，给药剂量2g/kg/day ;Alda_l，大鼠静脉注射溶解于DMSO的Alda-1，给药剂量8mg/kg/day ;ME-Alda_l,大鼠口服Alda-1自微乳制剂,给药剂量16mg/kg/day。
[0042] 上述虽然结合实施例对本发明的【具体实施方式】进行了描述，但并非对本发明保护范围的限制，所属领域技术人员应该明白，在本发明的技术方案的基础上，本领域技术人员不需要付出创造性劳动即可做出的各种修改或变形仍在本发明的保护范围以内。
【权利要求】
1.一种Alda-1 口服自微乳制剂，其特征在于，由以下重量份的组分制成，0.1-2份的Alda-1、15-45份的油相、35-55份的表面活性剂、35-55份的助表面活性剂，所述油相为蓖麻油、油酸乙酯、肉豆蘧酸异丙酯或丙二醇单辛酸酯中的一种或一种以上的混合物，所述表面活性剂为聚氧乙烯蓖麻油、吐温80或乳化剂OP中的一种或一种以上的混合物，所述助表面活性剂为二乙二醇单乙基醚、甘油或聚乙二醇400中的一种或一种以上的混合物。
2.如权利要求1所述的Alda-1口服自微乳制剂，其特征在于，由以下重量份的组分制成，1份的Alda-UlO份的油相、54份的表面活性剂、35份的助表面活性剂。
3.如权利要求1或2任意所述的Alda-1口服自微乳制剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤:1)将所述重量份的油相，表面活性剂和助表面活性剂搅拌，混合均匀，形成空白自微乳；2)向上述空白自微乳中加入所述重量份的Alda-1后，搅拌，混合均匀，即得Alda-1 口服自微乳制剂。
4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤I)中的搅拌为磁力搅拌2-8min。
5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中的搅拌为磁力搅拌2-8min。
6.如权利要求4或 5所述的制备方法,其特征在于，所述磁力搅拌3min。
【文档编号】A61K9/107GK103976952SQ201410251301
【公开日】2014年8月13日 申请日期:2014年6月6日 优先权日:2014年6月6日
【发明者】陈玉国, 王甲莉, 王海刚, 徐峰, 袁秋环, 刘宝山, 李明华 申请人:山东大学齐鲁医院