专利名称：：一种叶下珠口服制剂的质量控制方法
技术领域：
：本发明属于中药制剂质量控制领域，具体涉及一种叶下珠口服制剂的质量控制方法。技术背景叶下珠为大戟科叶下珠属植物叶下珠/5^//对/"""anhL.的干燥全草。本品资源丰富，分布十分广泛，长江以南省份较多。本品性凉、微苦，具有平肝清热、利水解毒之功效。主要用于治疗传染性肝炎、肠炎、痢疾、肾炎水肿、小儿疳积等。研究表明，叶下珠含有黄酮、木脂素、萜类、鞣质、生物碱等多种化合物。申请人通过反复的试验摸索，确定叶下珠中的总多酚类化合物为其有效成分，同时确立了能够测定总多酚含量质量控制方法。对叶下珠总多酚的含量测定，按屮国药典2000版一部附录XB鞣质含量测定法进行了试验。此方法为重量法测定含量，利用鞣质与皮粉吸附的性质来测定样品中鞣质的含量，是一种经典的方法。实验过程具有可控性，唯实验过程较长，涉及到样品恒重、蒸干样品溶液，花费时间较长，不符合简洁、迅速的质量控制原则。故在用重量法测定鞣质含量的试验基础上，申请人进一步寻找测定鞣质的更简洁的方法，通过反复试验验证最后采用以下改良普鲁士兰方法(即紫外分光光度法测总多酚的含量)，同时对此方法进行了系统的方法学研究，结果表明该方法具有很好的稳定性和重复性，其结果与重量法比较发现，具有很好的一致性，且操作方法简便，时间短，适于药品生产过程中进行质量控制。紫外分光光度法测总多酚含量，其原理是酚羟基具有还原性，能将Fe(CN)63_还原成Fe(CN)64—,还原产物Fe(CN)64—接着与Fe"反应生成Fe[Fe(CN)6]3(普鲁士蓝)，便于用紫外分光光度法进行含量测定，本发明的活性成分含有酚羟基结构。同时运用高效液相色谱法，测定主要有效成分鞣云实精单一成分的含量。
发明内容本发明目的在于提供一种专属性强、测定准确、快速的叶下珠口服制剂质量控制方法。本发明为叶下珠口服制剂质量控制方法步骤如下(1)叶下珠总多酚的含量测定a.对照品溶液的配制精密称取鞣云实精对照品1020mg，加入甲醇l5ml，溶解完全，加水稀释至100ml，摇匀，过滤；精密量取续滤液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。b.供试品溶液的制备取本品，研碎，混匀，精密称定适量，加入甲醇l~5ml，超声5min，加水稀释至100ml，摇匀，过滤；精密量取续滤液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。c.测定法分别精密量取空白溶液、对照品溶液、供试品溶液各lml，置10ml具塞试管中，加入去离子水2ml，混匀；然后加入0.016M的K3Fe(CN)6溶液lml，随后加入0.02M的FeCl3的0.1M的盐酸溶液lml(与前者加入时间间隔控制在lmin)，混匀；反应15min，加入稳定剂5ml，混匀后测溶液在700nm处的吸光度值(水溶液做空白)，计算含量，即得。(注稳定剂的配制方法30ml的去离子水、10ml的85X的磷酸、10ml的l^的阿拉伯胶溶液混和均匀，在冰箱里放置一周备用；空白溶液的配制方法量取甲醇0.2ml，加稀释至100ml，作为空白溶液)d.本品每最小单位制剂含总多酚以鞣云实精((:281124017)计不得少于画mg。(2)高效液相色谱法测定叶下珠鞣云实精含量a.色谱条件与系统适用性试验填充剂十八垸基硅烷键和硅胶流动相甲醇一0.5%醋酸溶液(10-20:80-90)检测波长268nm理论塔板数按鞣云实精计不低于2000.b.对照品溶液的配制精密称取鞣云实精对照品10-50mg，置100ml量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，即得每1ml含鞣云实精100-500^的溶液。c.供试品溶液的配制取供试品，研碎，混匀，取细粉末适量(相当于提取物100mg),精密称定，置100ml量瓶中，加入甲醇10ml，超声5min，用流动相稀释至刻度，用0.45pm滤膜滤过，即得。d.测定法分别精密吸取上述溶液5-20ul，注入高效液相色谱仪，测定。e.本品每最小单位制剂含叶下珠以鞣云实精(C28H240n)计不得少于20mg。本发明的具体操作步骤如下(l)叶下珠总多酚的含量测定a.对照品溶液的配制精密称取鞣云实精对照品20mg，加入甲醇2ml;溶解完全，加水稀释至100ml，摇匀，过滤；精密量取续滤液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。b.供试品溶液的制备取供试品，研碎，混匀，精密称定适量，加入甲醇2ml;超声5min，加水稀释至100ml，摇匀，过滤；精密量取续滤液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。c.测定法分别精密量取对照品溶液、供试品溶液各lml，置10ml具塞试管中，加入去离子水2ml，混匀；然后加入0.016M的K3Fe(CN)6溶液lml，随后加入0.02M的FeCl3的0.1M的盐酸溶液lml(与前者加入时间间隔控制在lmin)，混匀；反应15min,加入稳定剂5ml，混匀后测溶液在700nm处的吸光度值(水溶液做空白)，计算含量，即得。d.本品每最小单位制剂含总多酚按鞣云实精(C28H24017)计不得少于100mg。(2)高效液相色谱法测定叶下珠鞣云实精含量a.色谱条件所述的流动相配比为20:80的甲醇一0.5%醋酸溶液。b.对照品溶液的配制精密称取鞣云实精对照品10mg，置100ml量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，即得每lml含鞣云实精IOO昭的溶液。c.供试品溶液的配制取供试品，研碎，混匀，取细粉末适量(相当于提取物100mg)，精密称定，置100ml量瓶中，加入甲醇10ml，超声5min，用流动相稀释至刻度，用0.45pm滤膜滤过，即得。d.测定法分别精密吸取上述溶液20iU，注入高效液相色谱仪，测定。e.本品每最小单位制剂含叶下珠以鞣云实精(<:281124017)计不得少于20mg。为表明本发明的进步性，我们试验比较了重量法与紫外法对总多酚提取物测得的结果。比较如下表:方法123重量法56.67%55,34%57.12%紫外分光光度去55.3%54.6%55.6%重量法是利用皮粉对总多酚(鞣质)类的吸附作用，减重法测得的有效成分的数据；而紫外分光光度法利用总多酚的还原性的颜色反应定量测得的总多酚的含量。通过比较这两种方法的结果，本发明跟药典的测定方法的结果具有很好的一致性。通过对紫外分光光度法的方法学考察，发现本发明测定叶下珠总多酚的含量更准确、快速、重现性良好。l.叶下珠总多酚含量测定方法学考察如下-l.l线性曲线、回归方程、相关系数及线性范围精密称取鞣云实精12.12mg，加甲醇2ml，溶解完全，配制系列线性浓度，分别精密量取线性溶液lml，置10ml具塞试管中，加入去离子水2ml，混匀；然后加入0.016M的K3Fe(CN)6溶液lml，随后加入0.02M的FeCl3的0.1M的盐酸溶液lml(与前者加入时间间隔控制在lmin)，混匀；反应15min，加入稳定剂5ml，混匀后测溶液在700nm处的吸光度值。如图1所示以峰面积(A)为横坐标，总多酚含量(M)为纵坐标，得回归方程^1=0.0242八+0.0018，R值为0.9993，表明含量在12ug-60iig，呈良好的线性关系。结果见表l。表1叶下珠总多酚线性结果编号稀释倍数浓度(Ug/ml)吸收度线性方程相关系数线性范围空白20000M-0細20.999312yg-601100012.120.2674A+細8280015.150.3760360020.200.5013440030.300.7502520060.601.45761.2.精密度试验取同一批次的供试品溶液，按照紫外测定方法反应，在700nm处测定吸收度，连续测定6次，试验表明其精密度RSD=0.08%，符合规定。结果见表2。表2精密度试验编号_^_^_^_^_§_6吸收度0.52430.52410.52380.52340,52430.5245平均吸收度0.52441一—RSD%0.08%1.3.稳定性试验将精密度试验的供试品溶液，按照紫外测定方法反应，放置5、10、15、30、45min，分别测定吸光度值，结果见表3。表3稳定性试验<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>1.4.重复性试验取同一批次的供试品，研细，平行称取6份，照本发明方法操作，在700nm处测定吸光度A，并计算各份供试品叶下珠总多酚的含量，结果见表4。表4重复性试验编号123456"~"总多酚含量—54.4%55.5%15.5%56.1%55.2%55.0%平均含量55.28%RSD%1.0%1.5.加样回收率试验取同一批供试品，称取相当于10mg的鞣云实精的供试品，作为加样溶液。然后分别称取相当于测量浓度高中低剂量的鞣云实精对照品6mg、10mg、"4mg，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，分别加入10ml对照品溶液和10ml加样溶液，加水稀释至100ml容量瓶刻度，照本发明步骤测700nm处的吸收度，结果见表5。表5加样回收率试验加入样品中加入对照实测测得加入平均回收编号含对照量mg品量mg总量mg量mg回收率率低l10.136,2416.105.9795.70%99.22%低210.216.3416.276.0695.60%低310.196.1816.356.1699.60%RSD:2.31%中l11.0110.1721.2410.23100.60%中210.2310.2520.5210.29100.40%中310.1410.3420.4010.2699.20%高l10.2914.0824.4114.12100.30%高210,3114.2624.7714.46101.40%低低低中中中高高高3__10.18__14.3724.5814.40100.20%__通过对高效液相色谱法的方法学考察，发现本发明测定叶下珠有效成分中鞣云实精的含量更简便易行、方法重现性良好、专属性更强，减少总多酚其它成分的干扰，从而把此方法作为叶下珠口服制剂的一种质量监控指标。2.高效液相色谱法测定叶下珠鞣云实精含量方法学考察如下2丄线性曲线、回归方程、相关系数及线性范围精密称取鞣云实精对照品52.42mg，用流动相制成一系列线性溶液。分别精密吸取各对照品溶液20iU注入液相色谱仪，记录色谱图。以峰面积y对浓度x做回归曲线，得回归方程为y-31.634x-386.95,R=0.9999如图2所示。试验表明在21ng/ml500ug/ml浓度范围内，峰面积与浓度线性关系良好。表6叶下珠鞣云实精线性试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>2.2.精密度试验精密吸取照本发明步骤操作的供试品溶液，照本发明色谱条件连续进样6次，记录色谱图，计算6次峰面积的RSD为0.98X，结果见表7。试验结果表明本发明方法精密度良好。表7精密度试验<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>2.3稳定性试验精密量取照本发明步骤操作的供试品溶液，室温放置，分别在0、1、2、3、6、12h进样，记录色谱图，比较各色谱图目标峰面积，计算峰面积的RSD为0.41。Z，结果见表8。试验结果表明本供试品溶液在12小时内稳定。表8稳定性试验<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>2.4重复性试验取同一批次的供试品，研细，平行称取6份，照本发明方法操作，记录色谱图，计算供试品鞣云实精的含量，结果见表9。表9重复性试验<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>2.5加样回收率试验取同一批供试品，称取相当于5mg的鞣云实精的供试品，置100ml量瓶中，然后精密称取鞣云实精对照品3mg、5mg、7mg，置已称好提取物的量瓶中，用甲醇10ml溶解，并用流动相稀释至刻度，混匀，用0.45u的滤膜过滤后作为供试品溶液。取鞣云实精对照品10mg，精密称定，用甲醇溶解并用流定相定容到100ml，摇匀，作为对照品溶液(每毫升含鞣云实精O.lmg)。分别精密吸取20ul进样，记录色谱图，计算加样回收率。结果见表IO表10加样回收率试验加入样品中编号含对照量mg12312312^__5.025.115.045.215.135.175.195.095.05加入对照品量mg3.123.243.525.495.365.767.347,267.67实测对照量mg8.108.238.5210.6510.4610.9112.5612.2812.37测得加入量mg3.083.123.485.445.335.747.377.197.32回收率98.80%96.300/098.90%99.00%99.50%99.60%100.40%99.10%95.43%平均回收率98.56%RSD二l.64%图1是本发明紫外分光光度法测定叶下珠总多酚线性图谱图2是本发明高效液相色谱法测定叶下珠鞣云实精线性图谱具体实施例下面以实施例方式对本发明作进一步说明，给出本发明的实施细节，但不是旨在限定本发明的保护范围。实施例l(l)叶下珠总多酚的含量测定a.对照品溶液的配制精密称取鞣云实精对照品10.02mg，加入甲醇lml，溶解完全，加水稀释至100ml，摇匀，过滤；精密量取续滤液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。b.供试品溶液的制备取装量差异下的供试品，研碎，混匀，精密称定适量，加入甲醇lml，超声5min，加水稀释至100ml，摇匀，过滤；精密量取续滤液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。低低低中中中高高高c.测定法分别精密量取对照品浴液、供试品溶液各lml，置10ml具塞试管中，加入去离子水2ml，混匀；然后加入0.016M的K3Fe(CN)6溶液lml，随后加入0.02M的FeCl3的0.1M的盐酸溶液lml(与前者加入时间间隔控制在lmin)，混匀；反应15min，加入稳定剂5ml，混匀后测溶液在700nm处的吸光度值(水溶液做空白)，计算含量，即得。d.本品每最小单位制剂含总多酚以鞣云实精(C28H24017)计不得少于綱mg。(2)高效液相色谱法测定叶下珠鞣云实精含量a.色谱条件与系统适用性试验十八垸基硅垸键和硅胶为填充剂，甲醇-0.5%醋酸溶液(10:90)为流动相，检测波长为268nm，理论塔板数按鞣云实精计不低于2000。b.对照品溶液的配制精密称取鞣云实精对照品10.01mg，置100ml量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，即得每lml含鞣云实精IOO吗的溶液。c.供试品溶液的配制取本品，研碎，混匀，取细粉末适量(相当于提取物100mg)，精密称定，置100ml量瓶中，加入甲醇10ml，超声5min，用流动相稀释至刻度，用0.45pm滤膜滤过，即得。d.测定法分别精密吸取上述溶液20ul，注入高效液相色谱仪，测定。e.本品每最小单位制剂含叶下珠以鞣云实精(<:281124017)计不得少于20mg。实施例2(l)叶下珠总多酚的含量测定a.对照品溶液的配制精密称取鞣云实精对照品12.12mg，加入甲醇2ml，溶解完全，加水稀释至100ml，摇匀，过滤；精密量取续滤液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。b.供试品溶液的制备取装量差异下的本品，研碎，混匀，精密称定适量，加入甲醇2ml，超声5min，加水稀释至100ml,摇匀，过滤；精密量取续滤液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。c.测定法分别精密量取对照品溶液、供试品溶液各lml,置10ml具塞试管中，加入去离子水2ml，混匀；然后加入0.016M的K3Fe(CN)6溶液lml，随后加入0.02M的FeCl3的0.1M的盐酸溶液lml(与前者加入时间间隔控制在lmin)，混匀；反应15min，加入稳定剂5ml，混匀后测溶液在700nm处的吸光度值(水溶液做空白)，计算含量，即得。d.本品每最小单位制剂含总多酚以鞣云实精((:281124017)计不得少于謂mg。(2)高效液相色谱法测定叶下珠鞣云实精含量a.色谱条件与系统适用性试验十八烷基硅烷键和硅胶为填充剂，甲醇-0.5%醋酸溶液(15:85)为流动相，检测波长为268nm，理论塔板数按鞣云实精计不低于2000。b.对照品溶液的配制精密称取鞣云实精对照品20.13mg，置100ml量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，即得每lml含鞣云实精IOO吗的溶液。c.供试品溶液的配制取本品，研碎，混匀，取细粉末适量(相当于提取物100mg)，精密称定，置100ml量瓶中，加入甲醇10ml，超声5min，用流动相稀释至刻度，用0.45ixm滤膜滤过，即得。d.测定法分别精密吸取上述溶液10ul，注入高效液相色谱仪，测定。e.本品每最小单位制剂含叶下珠以鞣云实精((:281124017)计不得少于20mg。实施例3(l)叶下珠总多酚的含量测a.对照品溶液的配制精密称取鞣云实精对照品20.01mg，加入甲醇5ml，溶解完全，加水稀释至100ml,摇匀，过滤；精密量取续滤液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。b.供试品溶液的制备取装量差异下的本品，研碎，混匀，精密称定适量，加入甲醇5ml，超声5min，加水稀释至100ml,摇匀，过滤；精密量取续滤液10ml,置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。c.测定法分别精密量取对照品溶液、供试品溶液各lml，置10ml具塞试管中，加入去离子水2ml，混匀；然后加入0.016M的K3Fe(CN)6溶液lml，随后加入0.02M的FeCl3的0.1M的盐酸溶液lml(与前者加入时间间隔控制在lmin)，混匀；反应15min，加入稳定剂5ml，混匀后测溶液在700nm处的吸光度值(水溶液做空白)，计算含量，即得。d.本品每最小单位制剂含总多酚以鞣云实精(C28H240n)计不得少于lOOmg。(2)高效液相色谱法测定叶下珠鞣云实精含量a.色谱条件与系统适用性试验十八垸基硅垸键和硅胶为填充剂，甲醇-0.5%醋酸溶液(20:80)为流动相，检测波长为268nm，理论塔板数按鞣云实精计不低于2000。b.对照品溶液的配制精密称取鞣云实精对照品30.13mg，置100ml量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，即得每lml含鞣云实精IOO昭的溶液。c.供试品溶液的配制取本品，研碎，混匀，取细粉末适量(相当于提取物100mg)，精密称定，置100ml量瓶中，加入甲醇10ml，超声5min，用流动相稀释至刻度，用0.45pm滤膜滤过，即得。d.测定法分别精密吸取上述溶液5U1,注入高效液相色谱仪，测定。e.本品每最小单位制剂含叶下珠以鞣云实精(<:281124017)计不得少于20mg。实施例3(l)叶下珠总多酚的含量测定a.对照品溶液的配制精密称取鞣云实精对照品15.11mg，加入甲醇2ml，溶解完全，加水稀释至100ml，摇匀，过滤；精密量取续滤液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。b.供试品溶液的制备取装量差异下的本品，研碎，混匀，精密称定适量，加入甲醇2ml，超声5min，加水稀释至100ml，摇匀，过滤；精密量取续滤液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。c.测定法分别精密量取对照品溶液、供试品溶液各lml，置10ml具塞试管中，加入去离子水2ml，混匀；然后加入0.016M的K3Fe(CN)6溶液lml，随后加入0.02M的FeCl3的0.1M的盐酸溶液lml(与前者加入时间间隔控制在lmin)，混匀；反应15min，加入稳定剂5ml，混匀后测溶液在700nm处的吸光度值(水溶液做空白)，计算含量，即得。d.本品每最小单位制剂含总多酚以鞣云实精(C28H24017)计不得少于lOOmg。(2)高效液相色谱法测定叶下珠鞣云实精含量a.色谱条件与系统适用性试验十八垸基硅垸键和硅胶为填充剂，甲醇-0.5%醋酸溶液(20:80)为流动相，检测波长为268nm，理论塔板数按鞣云实精计不低于2000。b.对照品溶液的配制精密称取鞣云实精对照品10.52mg，置100ml量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，即得每lml含鞣云实精IOO吗的溶液。c.供试品溶液的配制取本品，研碎，混匀，取细粉末适量(相当于提取物100mg)，精密称定，置100ml量瓶中，加入甲醇10ml，超声5min，用流动相稀释至刻度，用0.45^m滤膜滤过，即得。d.测定法分别精密吸取上述溶液20ul，注入高效液相色谱仪，测定。e.本品每最小单位制剂含叶下珠以鞣云实精(C28H240n)计不得少于20mg。权利要求1.一种叶下珠口服制剂质量控制方法，其特征在于质量控制方法步骤如下(1)叶下珠总多酚的含量测定a.对照品溶液的配制精密称取鞣云实精对照品10～20mg，加入甲醇1～5ml，溶解完全，加水稀释至100ml，摇匀，过滤；精密量取续滤液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。b.供试品溶液的制备取本品，研碎，混匀，精密称定适量，加入甲醇1～5ml，超声5min，加水稀释至100ml，摇匀，过滤；精密量取续滤液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。c.测定法分别精密量取对照品溶液、供试品溶液各1ml，置10ml具塞试管中，加入去离子水2ml，混匀；然后加入0.016M的K3Fe(CN)6溶液1ml，随后加入0.02M的FeCl3的0.1M的盐酸溶液1ml(与前者加入时间间隔控制在1min)，混匀；反应15min，加入稳定剂5ml，混匀后测溶液在700nm处的吸光度值(水溶液做空白)，计算含量，即得。d.本品每最小单位制剂含总多酚以鞣云实精(C28H24O17)计不得少于100mg。(2)高效液相色谱法测定叶下珠鞣云实精含量a.色谱条件与系统适用性试验填充剂十八烷基硅烷键合硅胶流动相甲醇-0.5％醋酸溶液(10-20∶80-90)检测波长268nm理论板数按鞣云实精计应不低于2000。b.对照品溶液的配制精密称取鞣云实精对照品10～20mg，置100ml量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，即得每1ml含鞣云实精100～200μg的溶液c.供试品溶液的配制取本品，研碎，混匀，取细粉末适量(相当于提取物100mg)，精密称定，置100ml量瓶中，加入甲醇10ml，超声5min，用流动相稀释至刻度，用0.45μm滤膜滤过，即得。d.测定法分别精密吸取上述溶液5～20μl，注入高效液相色谱仪，测定叶下珠鞣云实精的含量。e.本品每最小单位制剂含叶下珠以鞣云实精(C28H24O17)计不得少于20mg。2、如权利要求l所述一种叶下珠口服制剂质量控制方法，其特征在于-(1)叶下珠总多酚的含量测定a.对照品溶液的配制精密称取鞣云实精对照品20mg，加入甲醇2ml，溶解完全，加水稀释至100ml，摇匀，过滤；精密量取续滤液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。b.供试品溶液的制备取本品，研碎，混匀，精密称定适量，加入甲醇2ml，超声5min，加水稀释至100ml，摇匀，过滤；精密量取续滤液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。c.测定法分别精密量取对照品溶液、供试品溶液各lml，置10ml具塞试管中，加入去离子水2ml，混匀；然后加入0.016M的K3Fe(CN)^溶液lml，随后加入0.02M的FeCl3的0.1M的盐酸溶液lml(与前者加入时间间隔控制在lmin)，混匀；反应15min，加入稳定剂5ml，混匀后测溶液在700nm处的吸光度值(水溶液做空白)，计算含量，即得。d.本品每最小单位制剂含总多酚按鞣云实精(C28H24017)计不得少于100mg。(2)用高效液相色谱法叶下珠鞣云实精含量a.色谱条件所述的流动相配比为20:80的甲醇一0.5%醋酸溶液。b.对照品溶液的配制精密称取鞣云实精对照品10mg，置100ml量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，即得每lml含鞣云实精100pg的溶液。c.供试品溶液的配制取本品，研碎，混匀，取细粉末适量(相当于提取物100mg)，精密称定，置100ml量瓶中，加入甲醇10ml，超声5min,用流动相稀释至刻度，用0.45pm滤膜滤过，即得。d.测定法分别精密吸取上述溶液20P1，注入高效液相色谱仪，测定。e.本品每最小单位制剂含叶下珠以鞣云实精(C28H24017)计不得少于20mg。全文摘要本发明涉及一种叶下珠口服制剂的质量控制方法。本发明主要包括紫外分光光度法测定叶下珠总多酚的含量和高效液相色谱法测定叶下珠鞣云实精的含量。本发明具有操作简便，专属性强，测定准确等特点。文档编号G01N30/00GK101278966SQ200810112680公开日2008年10月8日申请日期2008年5月26日优先权日2008年5月26日发明者张树祥,龚玉萍申请人:北京星昊医药股份有限公司