专利名称：半定量精子浓度快速自检试剂盒及其制备和使用方法
技术领域：
本发明涉及种体外诊断类医疗器械，具体是一种适用于男性精子浓度的半定量快速自 检试剂盒。
背景技术：
生育专家报道，世界上大约15%的夫妇在一年内(无避孕措施)不能怀孕，这些病例中 的40%是由于男性因素引起。还有男性科专家报道，男性不育的发病率大约为6—12%。上 述报道，说明男件不育的人群是相当大的个人群。
目前诊断男性不育的主要方法是精液的显微镜下诊断，即精子形态学检测，这也是男性 不育诊断的金标准。但是这个方法存在许多缺点，比如由于中国人的传统观念，不好意思 去医院诊治男性不育方面的疾病，因而延误了治疗。即使去了医院，由于取精子的条件有限， 受到环境、方法、时间的限制，不易取得样品。去医院看病比较繁琐，必须经过挂号、开处 方等一系列的程序。
发明内容
本发明的目的是为了克服现有技术的缺点，提供一种可以在家里即可操作、快速、使用 方便、价格便宜的半定量精子浓度快速自检试剂盒。
木发明的第二个目的是提供一种半定量精子浓度快速自检试剂盒的制备和使用方法。 为达到上述目的，本发明包括精液收集盒、细胞染色液、生理盐水和试验板，所述的精 液收集盒由塑料收集盒和精液液化剂组成，所述的试验板包括外壳、基板，外壳和基板是长 方形的PVC塑料制成，外壳中央有一个试验孔，所述基板上有吸水纸、过滤膜和标准色标，
吸水纸和过滤膜位丁基板上方，外壳的试验孔下方；吸水纸位于过滤膜下方；标准色标位于 外壳上试验孔周围，标准色标的颜色为500万、1000万、2000万、3000万、4000万、6000 万、8000万、10000万个/毫升浓度精子样品加入细胞染色液试验结果的颜色。所述的过滤膜 为亲水玻璃纤维膜，孔径范围l-30微米，大小尺寸为IO毫米XIO毫米；所述的吸水纸为木 质纤维素纸，其大小尺寸和过滤膜一致。所述的精液液化剂可以是酶制剂如菠萝蛋白酶，链 霉蛋白酶或糜蛋白酶，非酶制剂如二硫苏糖醇，使用浓度均为1-5 mg/ml。所述的细胞染色液 可以是酸性，碱性和中性染料细胞染色液，例如亚甲兰，孔雀绿，伊红等，使用浓度均为 0.01-1.0%。所述的生理盐水也可以是纯净水和含有低浓度醋酸等酸性物质的脱色液。 一种半定量精子浓度快速自检试剂盒的制备方法，包括如下步骤
制备细胞染色剂溶液把细胞染色剂加入磷酸缓冲液充分溶解，过滤后置室温保存； 制备标准色标用经过显微计数确认的500万、1000万、2000万、3000万、4000万、 6000万、8000万、10000万个/毫升浓度的精子样本为标准样本，加入已制备好的染色剂溶液， 根据实验结果的颜色，应用现代印刷技术制备出标准色标，置于外壳上试验孔周围；将过滤膜和吸水纸依次置于基板上方，试验孔下方。，
本发明的优点能够快速准确地检测出精子的浓度，从而诊断出男性是否能够生育后代， 比以往传统的诊断方法节省很多时间，使用简单，在药店购买、家庭使用即可，不用去医院 就诊，使使用者没有羞涩感，使夫妻可以提前知道自己的潜在的生育问题，使用本试剂盒还 可以对男子绝育手术后效果进行检测，也可用于精子库对精子质量进行筛选。
下面结合附图对本发明做进一步详细的说明。
图1是本发明试验板的结构示意图。
图2是本发明试验板的部分结构示意图。
图中l.基板2.外壳3.试验孔4.过滤膜5.吸水纸 6.标准色标
具体实施例方式
由图可知，本发明的试验板包括基板1和外壳2，外壳2中央有一个试验孔3，基板l上 有过滤膜4、吸水纸5和标准色标6，过滤膜4和吸水纸5位于基板1上方，试验孔3下方； 吸水纸5位于过滤膜4下方；标准色标6位于外壳2上试验孔3周围。
标准色标的颜色为2000万个/毫升浓度精子样品加入细胞染色液试验结果的颜色。 一种制备精子浓度快速检测试剂盒的方法，以亚甲兰细胞染色剂为例 制备浓度为0.1%亚甲兰溶液精密称取105'C干燥至恒重的生物染色剂亚甲兰100 mg， 置1000ml量瓶中，加入磷酸盐缓冲液至刻度，摇匀，过滤，过滤后置室温保存；
制备标准色标用经过显微计数确认的500万、1000万、2000万、3000万、4000万、 6000万、8000万、10000万个/毫升浓度的精子样本为标准样本，加入已制备好的亚甲兰溶液， 根据实验结果的颜色，制备出标准色标，应用现代印刷技术制备出标准色标，置于外壳上试 验孔周围；
将过滤膜和吸水纸依次置于基板上方，试验孔下方。 精子浓度快速检测试剂盒的使用方法如下
1、 收集精液样本于精液收集盒内；
2、 精液液化，让精液在精液收集盒中液化， 一般时间为15到30分钟，测定在精液收集 后12小时内完成；
3、 加样，用小塑料吸管收集l滴精液加入试验孔中，要让试验孔内过滤膜充分浸湿1分 钟并让吸水纸吸千膜上的水份；
4、 加2滴生理盐水到试验孔，让试验孔内过滤膜充分浸湿1分钟并让吸水纸吸干膜上的 水份；
5、 加2滴亚甲兰溶液到试验孔，让试验孔内过滤膜充分浸湿1分钟并让吸水纸吸干膜上 的水份；
6、 加2滴生理盐水到试验孔，让试验孔内过滤膜充分浸湿i分钟，等吸水纸吸干膜上的 水份后开始读取结果。要在4分钟内读取结果，超过4分钟后读取结果可能不准确；7、 观察试验孔的颜色变化，并与标准色标上的颜色对比，确定最接近的颜色，判读结果。
8、 第二次试验
每两次试验必须间隔一周以上。
权利要求
1、一种半定量精子浓度快速自检试剂盒，其特征在于包括精液收集盒、细胞染色液、生理盐水和试验板，所述的精液收集盒由塑料收集盒和精液液化剂组成，所述的试验板包括外壳、基板，外壳和基板是长方形的PVC塑料制成，外壳中央有一个试验孔，所述基板上有吸水纸、过滤膜和标准色标，吸水纸和过滤膜位于基板上方，外壳的试验孔下方；吸水纸位于过滤膜下方；标准色标位于外壳上试验孔周围，标准色标的颜色为500万、1000万、2000万、3000万、4000万、6000万、8000万、10000万个/毫升浓度精子样品加入细胞染色液试验结果的颜色。
2、 根据权利要求l所述的一种半定量精了-浓度快速自检试剂盒，其特征在干所述的过滤膜 为亲水玻璃纤维膜，孔径范围l-30微米，大小尺寸为IO毫米XIO毫米；所述的吸水纸为木质纤维素纸，其大小尺寸和过滤膜一致。
3、 根据权利要求l所述的一种半定量精子浓度快速自检试剂盒，其特征在于所述的精液液 化剂可以是酶制剂如菠萝蛋白酶，链霉蛋白酶或糜蛋白酶，非酶制剂如二硫苏糖醇，使用浓度均为1-5 mg/ml。
4、 根据权利要求l所述的一种半定量精子浓度快速自检试剂盒，其特征在于所述的细胞染 色液可以是酸性，碱性和中性染料细胞染色液，例如亚甲兰，孔雀绿，伊红等，使用浓度 均为0.01-1.0%。
5、 种制备权利要求1-4任一项所述的半定量精子浓度快速自检试剂盒的方法，其中包括如 下步骤制备细胞染色剂溶液把细胞染色剂加入磷酸缓冲液充分溶解，过滤后置室温保存； 制备标准色标用经过显微计数确认的500万、1000万、2000万、3000万、4000万、 6000万、8000万、10000万个/毫升浓度的精子样本为标准样本，加入己制备好的染色剂溶液， 根据实验结果的颜色，应用现代印刷技术制备出标准色标，置于外壳上试验孔周围； 将过滤膜和吸水纸依次置于基板上方，试验孔下方。
6、 一种使用权利要求N4任一项所述的半定量精子浓度快速自检试剂盒的方法其中包括如 下歩骤收集精液样本于精液收集盒内；精液液化，让精液在精液收集盒中液化， 一般时间为15到30分钟，测定在精液收集后 12小时内完成；加样，用小塑料吸管收集l滴精液加入试验孔中，要让试验孔内过滤膜充分浸湿1分钟 并让吸水纸吸干膜上的水份；加2滴生理盐水到试验孔，让试验孔内过滤膜充分浸湿1分钟并让吸水纸吸干膜上的水份；加细胞染色剂，加2滴细胞染色剂到试验孔，让试验孔内过滤膜充分浸湿1分钟并让吸 水纸吸干膜上的水份；加2滴生理盐水到试验孔，让试验孔内过滤膜充分浸湿1分钟，等吸水纸吸千膜上的水 份后开始读取结果，要在4分钟内读取结果，超过4分钟后读取结果可能不准确；观察试验孔的颜色变化，并与标准色标上的颜色对比，确定最接近的颜色，判读结果。 第二次试验每两次试验必须间隔一周以上。 7、根据权利要求1或6所述的半定量精子浓度快速自检试剂盒及其使用方法，其特征在于 所述的生理盐水也可以是纯净水和含有低浓度醋酸等酸性物质的脱色液。
全文摘要
本发明公开了一种半定量精子浓度快速自检试剂盒及其制备和使用方法，包括精液收集盒、细胞染色液、生理盐水和试验板，精液收集盒由塑料收集盒和精液液化剂组成，试验板包括外壳、基板，外壳中央有试验孔和对照孔两个小孔，基板上有吸水纸、过滤膜和标准色标，标准色标的颜色为500万、1000万、2000万、3000万、4000万、6000万、8000万、10000万个/毫升浓度精子样品加入细胞染色液试验结果的颜色。本发明的优点能够快速准确地检测出精子的浓度，从而诊断出男性是否能够生育后代，比以往传统的诊断方法节省很多时间，使用简单，在药店购买、家庭使用即可，使使用者没有羞涩感。
文档编号G01N33/52GK101644706SQ20091008142
公开日2010年2月10日 申请日期2009年4月3日 优先权日2009年4月3日
发明者刘淑红, 周明非, 望 朱, 娅 李, 毅 王, 赵永岐, 赵秀丽, 邢玉斌, 华 魏 申请人:北京望升伟业科技发展有限公司