用于测量NK细胞活性的方法和试剂盒与流程

技术特征：

1.至少一种刺激细胞因子在制备用于测量天然杀伤(NK)细胞活性的试剂盒中的应用，其中所述刺激细胞因子被提供用于刺激全血样品中的NK细胞和由此人工地激活所述NK细胞以产生和分泌NK细胞分泌的细胞因子；其中分泌到所述全血样品中的所述NK细胞分泌的细胞因子的量被用于测量NK细胞活性；并且其中所述至少一种刺激细胞因子是选自由白介素2、白介素15和白介素18组成的组的至少一种纯化的/分离的刺激细胞因子。

2.根据权利要求1所述的应用，其中对所述NK细胞的刺激是通过以下方式进行：将所述全血样品与所述刺激细胞因子温育。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其中对所述NK细胞的刺激是通过将所述全血样品与至少白介素2温育来进行。

4.根据权利要求1或2所述的应用，其中对所述NK细胞的刺激是通过将所述全血样品与白介素2和白介素12温育来进行。

5.根据权利要求1或2所述的应用，其中对所述NK细胞的刺激是通过将所述全血样品与至少白介素15温育来进行。

6.根据权利要求1或2所述的应用，其中对所述NK细胞的刺激是通过将所述全血样品与白介素15和白介素12温育来进行。

7.根据权利要求1或2所述的应用，其中对所述NK细胞的刺激是通过将所述全血样品与白介素18和白介素12温育来进行。

8.根据权利要求1或2所述的应用，其中所述NK细胞分泌的细胞因子选自由以下组成的组：干扰素-γ(IFN-γ)，肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和巨噬细胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)。

9.根据权利要求1或2所述的应用，其中所述NK细胞分泌的细胞因子是干扰素-γ(IFN-γ)。

10.根据权利要求1或2所述的应用，其中所述NK细胞分泌的细胞因子是肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。

11.根据权利要求1或2所述的应用，其中巨噬细胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)被用作用于NK细胞的激活与正常人的NK细胞的激活比较的对照组。

12.根据权利要求1或2所述的应用，其中所述全血样品中的所述NK细胞分泌的细胞因子的量是通过免疫测定来测量。

13.根据权利要求12所述的应用，其中所述免疫测定是酶联免疫吸附测定(ELISA)。

14.根据权利要求1或2所述的应用，其中所述至少一种刺激细胞因子是与稳定性肽的融合蛋白的形式。

15.根据权利要求14所述的应用，其中所述稳定性肽是突触核蛋白家族的C端酸性尾部结构域肽。

16.根据权利要求15所述的应用，其中所述稳定性肽包括α-突触核蛋白的C端酸性尾部结构域的氨基酸残基103-115(SEQ ID NO:22)，氨基酸残基114-126(SEQ ID NO:23)，氨基酸残基119-140(SEQ ID NO:24)或氨基酸残基130-140(SEQ ID NO:25)，β-突触核蛋白的C端酸性尾部结构域的氨基酸残基85-134(SEQ ID NO:27)，γ-突触核蛋白的氨基酸残基1-127(SEQ ID NO:28)，或γ-突触核蛋白的C端酸性尾部结构域的氨基酸残基96-127(SEQ ID NO:29)。

17.根据权利要求1或2所述的应用，其中刺激所述全血样品中的NK细胞由此人工地激活所述NK细胞以产生和分泌NK细胞分泌的细胞因子是在包含载体蛋白的培养基中进行。

18.根据权利要求1或2所述的应用，其中所述至少一种刺激细胞因子是与稳定性肽的融合蛋白的形式，其中所述融合蛋白包含由SEQ ID NO:2、8或10的氨基酸序列组成的氨基酸序列。

19.根据权利要求1或2所述的应用，其中所述试剂盒用于检测癌症的发生或者复发，其中与正常个体中的水平相比，受试者中NK细胞分泌的细胞因子量的减少指示癌症的发生或复发。

20.根据权利要求1或2所述的应用，其中对NK细胞的刺激是通过以下方式进行：将所述全血样品和白介素2温育，或和作为与稳定性肽的融合蛋白的形式的白介素2温育。

21.根据权利要求1或2所述的应用，其中对NK细胞的刺激是通过以下方式进行：将所述全血样品和白介素15温育，或和作为与稳定性肽的融合蛋白的形式的白介素15温育。

22.一种用于测量天然杀伤(NK)细胞活性的试剂盒，所述试剂盒包括：

用于刺激全血样品中的NK细胞由此人工地激活所述NK细胞以产生和分泌NK细胞分泌的细胞因子的试剂，其中刺激NK细胞的试剂包含融合蛋白，所述融合蛋白用于激活全血中的NK细胞以促进NK细胞分泌的细胞因子的分泌，所述融合蛋白包含由SEQ ID NO:2、4、6、8或10的氨基酸序列组成的氨基酸序列；和

酶联免疫吸附测定(ELISA)平板，其包含固定于其上的至少一种抗体，所述抗体选自：抗干扰素-γ抗体、抗TNF-α抗体和抗MIP-1β抗体，所述抗体用于测量由激活的NK细胞分泌到全血样品中的NK细胞分泌的细胞因子。

23.根据权利要求22所述的试剂盒，其中所述NK细胞分泌的细胞因子是干扰素-γ(IFN-γ)。

24.根据权利要求22所述的试剂盒，其中所述NK细胞分泌的细胞因子是肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。

25.根据权利要求22所述的试剂盒，其中所述NK细胞分泌的细胞因子是巨噬细胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)。

26.根据权利要求22所述的试剂盒，所述试剂盒还包括用于比较受试者中所述NK细胞分泌的细胞因子的量和正常个体中的水平的使用说明。