一种中药复方制剂中薯蓣皂苷的定量分析方法
【专利摘要】本发明公开了一种中药复方制剂中薯蓣皂苷的定量分析方法，包括如下步骤：(1)配制对照品溶液；(2)配制供试品溶液；(3)含量测定：分别取步骤(1)获得的对照品溶液和步骤(2)获得的供试品溶液在高效液相色谱检测条件为：C18键合硅胶为填充剂的色谱柱，以乙腈-水为流动相进行洗脱，检测器为蒸发光散射检测器进行高效液相色谱检测，获得对照品溶液和供试品溶液的高效液相色谱图,以外标法测定供试品中薯蓣皂苷的含量。本测定方法操作简便快速，准确度高、重复性好，可以提高产品的质控水平。
【专利说明】一种中药复方制剂中薯蓣皂苷的定量分析方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种中药复方制剂中薯蓣皂苷的定量分析方法。
【背景技术】
[0002] 由穿山龙和刺五加为药材的中药复方制剂主要药效成分包括薯蓣皂苷（薯蓣皂 苷元）、延龄草苷、甲基薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷、紫丁香苷（刺五加苷B)、刺五加苷E、异秦皮 啶、槲皮素、绿原酸、紫丁香树脂苷等，目前《中国药典》2010版穿山龙药材含量测定采用高 效液相色谱法以薯蓣皂苷为检测指标在203nm波长下测定其含量。薯蓣皂苷属于留体皂 苷，其紫外吸收属于末端吸收，由于由穿山龙和刺五加为药材的中药复方制剂的复杂性，在 紫外检测条件下色谱峰基线波动很大，溶剂峰对目标峰造成很大的干扰，采用二极管阵列 检测器（DAD)检测方法无法使目标峰与杂质峰达到基线分离。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种操作简便快速、准确度高、重复性 好的由穿山龙和刺五加为药材的中药复方制剂中薯蓣皂苷的定量分析方法。
[0004] 本发明的技术方案概述如下：
[0005] -种中药复方制剂中薯蓣皂苷的定量分析方法，包括如下步骤：
[0006] ⑴配制对照品溶液：取薯蓣皂苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每ImL含 250 y g的薯蓣皂苷对照品溶液；
[0007] ⑵配制供试品溶液：取中药复方制剂内含物，研细，过四号筛，取约〇.4g，精密称 定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，称定重量，在功率120W、频率40kHz的条件下超声 处理50-60min，放冷至室温，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即 得；
[0008] (3)含量测定：分别取步骤（1)获得的对照品溶液和步骤（2)获得的供试品溶液 在高效液相色谱检测条件为=C18键合硅胶为填充剂的色谱柱，以乙腈-水为流动相进行洗 脱，检测器为蒸发光散射检测器进行高效液相色谱检测，获得对照品溶液和供试品溶液的 高效液相色谱图，以外标法测定供试品中薯蓣皂苷的含量。
[0009] 所述制剂优选胶囊、片剂或颗粒剂。
[0010] 步骤⑵中超声时间为50min。
[0011] 步骤⑶中乙腈_水的体积比为70:30。
[0012] 步骤（3)色谱柱的填充剂的粒径为5 y m。
[0013] 步骤（3)中流动相的流速为I. OmL/min。
[0014] 步骤（3)中色谱柱的柱温为30°C。
[0015] 步骤（3)中蒸发光散射检测器检测条件为：载气流速1.8L/min、蒸气温度为 100°C、雾化温度为40°C。
[0016] 本发明的方法不依赖于样品的光学特性，不受官能团的影响，尤其适用于没有紫 外吸收或紫外吸收较弱的皂苷类化合物。且供试品溶液制备方法简便快速。依照2010版 《中国药典》一部对方法学考察的要求，分别对对照品溶液和8个不同浓度的供试品溶液样 本进行薯蓣皂苷在本发明色谱条件下进行各种状况的色谱分析，通过对薯蓣皂苷的峰面积 响应值的线性关系、精密度、稳定性、重复性、专属性及加样回收率等方面的测定，从而掌握 由穿山龙和刺五加为药材的中药复方制剂中薯蓣皂苷的定量分析方法：本测定方法操作简 便快速，可以提高产品的质控水平，准确度高、重复性好，值得在中药复方制剂薯蓣皂苷定 量分析方面推广应用。
【专利附图】
【附图说明】
[0017] 图1是薯蓣皂苷对照品溶液的HPLC色谱图，峰1是薯蓣皂苷；
[0018] 图2是供试品溶液的HPLC色谱图，峰1是薯蓣皂苷；
[0019] 图3是方法学验证中专属性考察缺穿山龙的阴性对照溶液色谱图；
[0020] 图4是不同供试品溶液的浓度对数与峰面积响应值对数线性关系图。
【具体实施方式】
[0021] 本发明选用Agilent 1260高效液相色谱仪、380-ELSD检测器、Chem Station色谱 工作站检测软件配套使用，ELSD是一种质量型检测器。
[0022] 由穿山龙和刺五加为药材的中药复方制剂，其中的穿山龙是经水提醇沉后获得的 提取物，与刺五加加乙醇水溶液回流提取后的提取物合并后加药用辅料按常规技术制备的 胶囊剂、片剂或颗粒剂。
[0023] 下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。
[0024] 实施例1
[0025] -种中药复方胶囊中薯蓣皂苷的定量分析方法，包括如下步骤：
[0026] (1)配制对照品溶液：取薯蓣皂苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每ImL含 I. Omg的溶液（1)，从对照品溶液（1)中精密吸取2. 5mL于IOmL容量瓶中，加入甲醇定容， 配成每ImL含250 y g的薯蓣皂苷对照品溶液⑵；
[0027] (2)配制供试品溶液：取中药复方胶囊内含物研细，过四号筛，取约0.4g，精密称 定为0. 3750g置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，称定重量，在功率120W、频率40kHz的 条件下超声处理50min，放冷至室温，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续 滤液，即得；
[0028] (3)含量测定：分别取步骤（1)获得的对照品溶液（2)和步骤（2)获得的供试品 溶液在高效液相色谱检测条件为：C18键合硅胶为填充剂的色谱柱，填充剂的粒径为5 iim， 色谱柱的柱温为30°C，以乙腈-水为流动相进行洗脱，乙腈-水的体积比为70:30,流动相 的流速为l.OmL/min ;检测器为蒸发光散射检测器进行高效液相色谱检测，蒸发光散射检 测器检测条件为：载气流速I. 8L/min、蒸气温度为KKTC、雾化温度为40°C，获得对照品溶 液和供试品溶液的高效液相色谱图，以外标法测定供试品中薯蓣皂苷的含量，见表1。
[0029] 实施例2
[0030] -种中药复方片剂中薯蓣皂苷的定量分析方法，包括如下步骤：
[0031] (1)配制对照品溶液；步骤同实施例1步骤（1);
[0032] (2)配制供试品溶液：取中药复方片剂研细，过四号筛，取约0.4g，精密称定为 0. 3745g置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，称定重量，在功率120W、频率40kHz的条件下 超声处理60min，放冷至室温，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液， 即得；
[0033] (3)含量测定：分别取步骤⑴获得的对照品溶液和步骤⑵获得的供试品溶液 在高效液相色谱检测条件为=C18键合硅胶为填充剂的色谱柱，填充剂的粒径为5 iim，色谱 柱的柱温为25°C，以乙腈-水为流动相进行洗脱，乙腈-水的体积比为60:40,流动相的流 速为0. 8mL/min ;检测器为蒸发光散射检测器进行高效液相色谱检测，蒸发光散射检测器 检测条件为：载气流速I. 7L/min、蒸气温度为90°C、雾化温度为35°C，获得对照品溶液和供 试品溶液的高效液相色谱图，以外标法测定供试品中薯蓣皂苷的含量，见表1。
[0034] 实施例3
[0035] -种中药复方颗粒中薯蓣皂苷的定量分析方法，包括如下步骤：
[0036] (2)配制对照品溶液；步骤同实施例1步骤（1);
[0037] (2)配制供试品溶液：取中药复方颗粒研细，过四号筛，取约0.4g，精密称定为 0. 3752g置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，称定重量，在功率120W、频率40kHz的条件下 超声处理55min，放冷至室温，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液， 即得；
[0038] (3)含量测定：分别取步骤⑴获得的对照品溶液和步骤⑵获得的供试品溶液 在高效液相色谱检测条件为=C18键合硅胶为填充剂的色谱柱，填充剂的粒径为5 iim，色谱 柱的柱温为35°C，以乙腈-水为流动相进行洗脱，乙腈-水的体积比为80:20,流动相的流 速为0. 9mL/min ;检测器为蒸发光散射检测器进行高效液相色谱检测，蒸发光散射检测器 检测条件为：载气流速I. 9L/min、蒸气温度为95°C、雾化温度为38°C，获得对照品溶液和供 试品溶液的高效液相色谱图，以外标法测定供试品中薯蓣皂苷的含量，见表1。
[0039] 表1是四个不同样品中的薯截阜苷的含量表；
[0040] 表 1
[0041]
【权利要求】
1. 一种中药复方制剂中薯蓣皂苷的定量分析方法，其特征是包括如下步骤： (1) 配制对照品溶液：取薯蓣皂苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lmL含250 y g 的薯蓣皂苷对照品溶液； (2) 配制供试品溶液：取中药复方制剂内含物，研细，过四号筛，取约0.4g，精密称定， 置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，称定重量，在功率120W、频率40kHz的条件下超声处 理50-60min，放冷至室温，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即 得； (3) 含量测定：分别取步骤（1)获得的对照品溶液和步骤（2)获得的供试品溶液在高 效液相色谱检测条件为：C18键合硅胶为填充剂的色谱柱，以乙腈-水为流动相进行洗脱，检 测器为蒸发光散射检测器进行高效液相色谱检测，获得对照品溶液和供试品溶液的高效液 相色谱图，以外标法测定供试品中薯蓣皂苷的含量。
2. 如权利要求1所述的方法，其特征在于所述制剂为胶囊、片剂或颗粒剂。
3. 如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤（2)中超声时间为50min。
4. 如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤（3)中乙腈-水的体积比为70:30。
5. 如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤（3)色谱柱的填充剂的粒径为 5 u m〇
6. 如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤（3)中流动相的流速为1.0mL/min。
7. 如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤（3)中色谱柱的柱温为30°C。
8. 如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤（3)中蒸发光散射检测器检测条件 为：载气流速1. 8L/min、蒸气温度为100°C、雾化温度为40°C。
【文档编号】G01N30/06GK104407088SQ201410735926
【公开日】2015年3月11日 申请日期:2014年12月4日 优先权日:2014年12月4日
【发明者】蒋建兰, 孙秀婷 申请人:天津大学