六堡茶中槟榔香气主要成分的分析方法与流程

本发明涉及一种槟榔香气主要成分的分析方法，尤其是一种六堡茶中槟榔香气主要成分的分析方法，属于化学检测技术领域。

背景技术：

六堡茶，中国历史名茶，因产于广西壮族自治区梧州市苍梧县六堡镇而得名，选用苍梧县群体种、大中叶种及其分离、选育的品种、品系茶树的鲜叶为原料，经杀青、初揉、堆闷、复揉、干燥等工艺制成毛茶，再经过筛选、拼配、汽蒸或不汽蒸、渥堆、汽蒸、压制成型或不压制成型、陈化、成品包装等工艺过程加工制成的具有独特品质特征的黑茶。

目前，国内对于六堡茶的香味仅仅依靠感官进行判断，缺乏深入研究，对于槟榔香气主要成分的研究更少。六堡茶的槟榔香气主要来自于挥发性气体，包括醇类、醛类、酮类、脂类、碳氢类及杂氧化合物等，有文献报道采用顶空-固相微萃取(hs-spme)技术联合气质(gc-ms)对这些香气成分进行定性、定量分析。考虑到六堡茶的香味比较复杂，一般的分析技术难以收集和检测。

技术实现要素：

针对上述技术问题，本发明的目的是提供一种具有灵敏度更高、适用性更广的六堡茶中槟榔香气主要成分的分析方法。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是这样的：

一种六堡茶中槟榔香气主要成分的分析方法，依次包括下述步骤：

1)样品前处理

取0.6g六堡茶于烧杯中，加入25ml沸水，加盖保温15min，过滤，取6ml茶汤于已加入0.5g氯化钠的顶空瓶中，压盖密封即得；

3)将有槟榔香茶叶和无槟榔香茶叶分别进行顶空提取后，肼内吸附技术富集香气进样，全扫面采集，得到tic图，采用nist2014谱库和香料库进行检索，结合匹配度、提取离子和碎片离子相对丰度进行目标化合物的判定。

进一步的，上述的一种六堡茶中槟榔香气主要成分的分析方法，其特征在于，所述的肼内吸附条件：平衡温度：80℃，平衡时间：600s，振荡速度：500r/min，进样针温度：85℃，抽提体积：1ml，抽提次数：5次，抽提速度：200μl/s，解析温度：230℃，解析速度：20μl/s，洗针温度：250℃，洗针时间：300s，gc准备时间：3420s，进样量：200μl。

进一步的，上述的一种六堡茶中槟榔香气主要成分的分析方法，所述的色谱条件：agilenthp-5ms毛细管色谱柱；载气：he流速：1.5ml/min，分流比：50:1，进样口温度：100℃；柱温：起始温度40℃，保持3min，然后以3℃/min速率升温至180℃，再以8℃/min升温至250℃。

进一步的，上述的一种六堡茶中槟榔香气主要成分的分析方法，其特征在于，所述的质谱条件：接口温度280℃，离子源温度：230℃，离子源：ei，电子能量：70ev，扫描质量范围：45～500amu，扫描模式：全扫描。

与现有技术相比，本发明提供的技术方案先用itex(肼内吸附)技术对六堡茶的香味进行吹扫浓缩，用气质进行全扫描得到每个成分的色谱图，用nist库进行检索，并结合分子式识别新技术masswork得到准确的香味成分，从而得到六堡茶中“槟榔香”——挥发性成分的的组成。该技术相比较静态顶空技术、hs-spme技术，具有灵敏度更高、适用性更广的优势。

附图说明

图1是六堡茶(有槟榔香)香气总离子流色谱图

图2是六堡茶(无槟榔香)香气总离子流色谱图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明的权利要求书做进一步说明，但不构成对本发明的任何限制，任何对本发明做有限次修改可得的技术方案仍然属于本发明所要保护的范围。

实施例1

1材料及方法

1.1材料：

16批次茶叶(有槟榔香与无槟榔香)

氯化钠(分析纯)

1.2仪器设备

itex、7890b/qqq-7000c气质联用仪(美国agilent公司)。

1.3方法

1.3.1样品前处理

取0.6g六堡茶于烧杯中，加入25ml沸水，加盖保温15min，过滤，取6ml茶汤于已加入0.5g氯化钠的顶空瓶中，压盖密封即得。

1.3.2仪器分析条件

itex条件：平衡温度：80℃，平衡时间：600s，振荡速度：500r/min，进样针温度：85℃，抽提体积：1ml，抽提次数：5次，抽提速度：200μl/s，解析温度：230℃，解析速度：20μl/s，洗针温度：250℃，洗针时间：300s，gc准备时间：3420s，进样量：200μl。

色谱条件：agilenthp-5ms毛细管色谱柱(30m×250μm×0.25μm)；载气：he(纯度：99.999％)，流速：1.5ml/min，分流比：50:1，进样口温度：100℃；柱温：起始温度40℃，保持3min，然后以3℃/min速率升温至180℃，再以8℃/min升温至250℃。

质谱条件：接口温度280℃，离子源温度：230℃，离子源：ei，电子能量：70ev，扫描质量范围：45～500amu，扫描模式：全扫描。

1.3.3六堡茶香气成分定性分析

对16批次茶叶(有槟榔香与无槟榔香)进行顶空提取后，itex技术富集香气进样，全扫面采集，得到tic图，采用nist2014谱库和香料库进行检索，结合匹配度、提取离子和碎片离子相对丰度进行目标化合物的判定。

2结果分析

2.1六堡茶主要香气成分及总离子流图

对所有茶叶样品提取后进行检测，有槟榔香及无槟榔香的六堡茶总离子流图分别见图1、图2。六堡茶中挥发性成分主要有醇类、醛类、酮类、脂类、碳氢类及杂氧化合物等6大类化合物，其中醇类物质8种，包括β-芳樟醇、α-雪松醇、α-萜品醇、脱氢芳樟醇等；醛类物质3种，包括：苯甲醛、藏红花醛和2-十一烯醛；酮类物质4种，包括：2-十一酮、β-紫罗酮、7,8-环氧-α-紫罗酮和4-羟基-3,5-二甲基苯乙酮等；脂类物质8种，包括：乙酸苯甲酯、顺-3-己烯-苯甲酸酯、水杨酸甲酯、苯甲酸甲酯等；碳氢类物质10种，包括：α-法尼烯、1-甲基萘、1，6-二甲基萘、α-雪松烯和2-甲基萘等；杂氧化合物6种，包括：1,2,3-三甲氧基-5-甲基苯、1,2,3-三甲氧基苯、1,2-二甲氧基-4-甲基苯和茴香脑等。

2.2六堡茶特征香气成分的确定

有文献报道，六堡茶中的醇类物质是“槟榔香”的最重要成分，如β-芳樟醇、α-雪松醇及α-萜品醇等；在本次实验中，碳氢类物质检出了α-雪松烯和δ-杜松烯等陈香物质，有研究认为，雪松醇、雪松烯和杜松烯这些物质均是槟榔香的特征香气成分。六堡茶的挥发性成分主要有醇类、醛类、酮类、脂类和碳氢类等，这些组成与传统黑茶比较相似。本实验利用差异化软件mpp，对槟榔香与无槟榔香两组六堡茶数据进行聚类分析，在槟榔香茶叶中发现β-芳樟醇、顺-氧化芳樟醇、水杨酸甲酯、α-雪松烯等成分有较好交集，并在无槟榔香六堡茶中无出现，说明这几种成分是“槟榔香”的主要来源，这与相关文献的报道是基本一致的。

以上所述的仅为本发明的较佳实施例，凡在本发明的精神和原则范围内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。