样器38电连接。
[0018]酶反应器在使用过程中，酶对底物对其进行催化，发生水解反应，生成水解热，当有农药时，酶被抑制，水解热相应减少，利用量热传感器14采集水解热的变化值且通过处理器对这一变化的水解值进行比较分析从而得到农药的残留浓度。恒温器8将流体温度保温稳定在酶最佳反应温度上，已获得良好的响应信号和重现性。
[0019]本发明提供一种借助上述酶反应器来检测有机磷农药残留的方法，利用酶促水解反应过程中产生水解热，而有机磷农药会抑制酶的活性，相应产生的水解热减少，通过检测水解热的变化值来检测有机磷农药的浓度，
具体包括以下步骤:首先制作提取待测样品的样品溶液，
(1)检测准备，配制准备pH=6.5，浓度为0.025mol/L的缓冲溶液，优选缓冲溶液为磷酸盐，配制准备16mmol/L的底物溶液，优选乙酸-α -萘酯，配制准备已知农药浓度的系列标准样液；
(2)取步骤(I)的缓冲溶液从所述酶反应器的缓冲液入口18滴入，对所述酶反应器进行检测调零，此时所述酶反应器的输出电压信号记为VO ;
(3)取定量步骤(I)中底物溶液从所述酶反应器的底物溶液入口20滴入，此时所述酶反应器的输出电压信号记为VI，净输出为Vl-VO;
(4)取底物溶液和系列标准样液分别从所述酶反应器的底物溶液入口20和样品溶液入口 16滴入，其中底物溶液与步骤(3)中的等量，此时所述酶反应器的输出电压信号记为V2,净输出为V2-V0;
(5)按照步骤(4)的方法依次测定系列标准样液的输出电压信号，在(V1-V0~V2-V0)的范围内建立农药浓度与电压信号(C-V)的回归方程；
(6)取底物溶液和样品溶液分别从所述酶反应器的底物溶液入口20和样品溶液入口16滴入，其中底物溶液于步骤(3)中的等量，此时所述酶反应器的输出电压信号记为V3，将V3-V0作为电压值根据步骤(5)中的回归方程计算待测样品的有机磷农药残留浓度。
[0020]为了得到稳定的抑制状态，步骤(4)中底物溶液和系列标准样液依次加入，间隔时间为60s，步骤(6)中底物溶液和样品溶液液依次加入，间隔时间为60s。
[0021]本发明的采用酶反应器检测有机磷农药残留的方法，利用酶促水解反应过程中产生水解热，而有机磷农药会抑制酶的活性，相应产生的水解热减少，通过检测水解热的变化值来检测有机磷农药的浓度，量热传感器精确感应酶反应器内的热量变化值并反馈数据处理器，并在数据处理器内以电压值的形式直观输出，每次测量时间少于5min，检测快速而又准确。
[0022]上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受所述实施例的限制，其它的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求所界定的保护范围为准。
【主权项】
1.一种采用酶反应器检测有机磷农药残留的方法，首先制作提取待测样品的样品溶液，所述酶反应器具有三个检测入口，分别为缓冲液入口、底物溶液入口、样品溶液入口，其特征在于:本发明是利用酶促水解反应过程中产生水解热，而有机磷农药会抑制酶的活性，相应产生的水解热减少，通过检测水解热的变化值来检测有机磷农药的浓度，包括以下步骤， (1)检测准备，配制准备pH=6.5，浓度为0.025mol/L的缓冲溶液，配制准备16mmol/L的底物溶液，配制准备已知农药浓度的系列标准样液； (2)取步骤(I)的缓冲溶液从所述酶反应器的缓冲液入口滴入，对所述酶反应器进行检测调零，此时所述酶反应器的输出电压信号记为VO ; (3 )取定量步骤(I)中底物溶液从所述酶反应器的底物溶液入口滴入，此时所述酶反应器的输出电压信号记为VI，净输出为Vl-VO; (4)取底物溶液和系列标准样液分别从所述酶反应器的底物溶液入口和样品溶液入口滴入，其中底物溶液与步骤(3)中的等量，此时所述酶反应器的输出电压信号记为V2，净输出为V2-V0; (5)按照步骤(4)的方法依次测定系列标准样液的输出电压信号，在(V1-V0~V2-V0)的范围内建立农药浓度与电压信号(C-V)的回归方程； (6)取底物溶液和样品溶液分别从所述酶反应器的底物溶液入口和样品溶液入口滴入，其中底物溶液于步骤(3)中的等量，此时所述酶反应器的输出电压信号记为V3，将V3-V0作为电压值根据步骤(5)中的回归方程计算待测样品的有机磷农药残留浓度。
2.根据权利要求1所述的采用酶反应器检测有机磷农药残留的方法，其特征在于:所述酶反应器内沿检测流体的流动方向依次设有恒温器和反应器，所述酶反应器还外接数据处理器，所述反应器上设有与所述数据处理器电连接的量热传感器，所述量热传感器感应所述反应器内的热量变化值并反馈至所述数据处理器，并在数据处理器内以电压值的形式直观输出。
3.根据权利要求1所述的采用酶反应器检测有机磷农药残留的方法，其特征在于:所述酶反应器内的酶柱为胆碱酯酶。
4.根据权利要求1所述的采用酶反应器检测有机磷农药残留的方法，其特征在于:所述底物为乙酸-α-萘酯。
5.根据权利要求1所述的采用酶反应器检测有机磷农药残留的方法，其特征在于:步骤(4)中底物溶液和系列标准样液依次加入，间隔时间为60s。
6.根据权利要求1所述的采用酶反应器检测有机磷农药残留的方法，其特征在于:步骤(6)中底物溶液和样品溶液液依次加入，间隔时间为60s。
【专利摘要】本发明提供一种采用酶反应器检测有机磷农药残留的方法，利用酶促水解反应过程中产生水解热，而有机磷农药会抑制酶的活性，相应产生的水解热减少，通过检测水解热的变化值来检测有机磷农药的浓度，量热传感器精确感应酶反应器内的热量变化值并反馈数据处理器，并在数据处理器内以电压值的形式直观输出，每次测量时间少于5min，检测快速而又准确。
【IPC分类】G01N25-20
【公开号】CN104569039
【申请号】CN201410731142
【发明人】赵杰, 邓会超
【申请人】苏州国环环境检测有限公司
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2014年12月5日