网织红细胞区别开来。
[0153]〈血液分析装置的构成〉
[0154] 参照图15,对于血液分析装置100的构成进行说明。对于与实施方式1的血液分 析装置1同样的构成，赋予相同符号，省略说明。
[0155] 测定部200具备样品制备部800。样品制备部800有反应槽830,与试剂容器 51，52, 820连接。试剂容器820收容含特异性地染色网织红细胞的荧光染料的染色试剂。 在染色试剂中可使用例如专利第3425830号中公开的试剂、或者Sysmex株式会社制的 "FLU0R0CELLRET"。
[0156] 由待测样品吸引部4吸引的血液待测样品和稀释液在反应槽830中混合，制备出 第1测定样品。第1测定样品用于红细胞的测定。由待测样品吸引部4吸引的血液待测样 品和稀释液和溶血剂在反应槽830中混合，制备出第2测定样品。第2测定样品用于血红 蛋白浓度的测定。由待测样品吸引部4吸引的血液待测样品、稀释液和染色试剂在反应槽 830中混合，制备出第3测定样品。第3测定样品用于网织红细胞的测定。
[0157] 光学检测部900用于由流式细胞术的红细胞、网织红细胞及自身荧光的测定。光 学检测部900具备流动池910、第1光源部921、第2光源部922、第1荧光检测部931、第2 荧光检测部932、第1散射光检测部941和第2散射光检测部942。流动池910的构成与实 施方式1中的流动池61的构成相同，所以省略说明。
[0158] 第1光源部921及第2光源部922的各自是半导体激光源。第1光源部921向流 动池910照射波长640nm的红色激光。第2光源部922向流动池910照射波长405nm的蓝 色激光。第1光源部921和第2光源部922向流动池910中的上下分离的2个的位置照射 光。
[0159] 第1荧光检测部931的灵敏度波长范围是400nm以上、lOOOnm以下。作为第1荧 光检测部931，使用雪崩光电二极管。在第1荧光检测部931的前方设有第1滤镜933。第 1滤镜933不透过波长610nm以上650nm以下的光，透过波长660nm以上的光。
[0160] 第2荧光检测部932的灵敏度波长范围是400nm以上、lOOOnm以下。作为第2荧 光检测部932,使用雪崩光电二极管。在第2荧光检测部932的前方设有第2滤镜934。第 2滤镜934透过波长420nm以上630nm以下及650nm以上的光。从而，第2滤镜934阻断 405nm及640nm的激光。
[0161] 第1散射光检测部941及第2散射光检测部942各自的灵敏度波长范围是400nm 以上、lOOOnm以下。作为第1散射光检测部941及第2散射光检测部942,使用光电二极管。 第1散射光检测部941及第2散射光检测部942的各自设置在上下分离的2个位置。
[0162] 第1光源部921向流动池910中的血细胞照射作为第1光的红色激光，则发生散 射光（以下，称为"第1前方散射光"），第1散射光光接收部941接收第1前方散射光。第 2散射光光接收部942由于设在与第1散射光光接收部941不同的位置，不接收由红色激 光的第1前方散射光。第2光源部922向流动池910中的血细胞照射作为第2光的蓝色激 光，则发生散射光（以下，称为"第2前方散射光"），第2散射光光接收部942接收第2前 方散射光。第1散射光光接收部941由于设在与第2散射光光接收部942不同的位置，不 接收由蓝色激光的第2前方散射光。
[0163] 第1光源部921向流动池910中照射作为第1光的红色激光，则在由试剂容器820 内收容的染色试剂染色的网织红细胞通过流动池910中时，发生660nm以上的第1波长的 荧光。第1滤镜933透过第1波长的荧光，第1荧光光接收部931接收。第1光向与第2 光不同的方向照射，不在第2荧光光接收部932成像。从而，第2荧光光接收部932不接收 第1波长的荧光。
[0164] 第2光源部922向流动池910中照射作为第2光的蓝色激光，则在红细胞或网织 红细胞通过流动池910中时，发生630nm附近的第2波长的自身荧光。自身荧光透过第2 滤镜934,被第2荧光光接收部932接收。第1荧光光接收部931不接收自身荧光。
[0165] 第1荧光检测部931、第2荧光检测部932、第1散射光检测部941、及第2散射光 检测部942各自输出显示光接收强度的类似物信号。以下，将自第1荧光检测部931输出 的类似物信号称为"第1荧光信号"，将自第2荧光检测部932输出的类似物信号称为"第2 荧光信号"，将自第1散射光检测部941输出的类似物信号称为"第1前方散射光信号"，将 自第2散射光检测部942输出的类似物信号称为"第2前方散射光信号"。
[0166] 信号处理电路810对于第1荧光检测部931、第2荧光检测部932、第1散射光检 测部941、及第2散射光检测部942的各自输出的类似物信号进行信号处理。信号处理电 路810将第1荧光信号、第2荧光信号、第1前方散射光信号、及第2前方散射光信号中含 的脉冲的峰值作为特征参数提取。以下，将第1荧光信号的峰值称为"第1荧光强度"，将第 2荧光信号的峰值称为"第2荧光强度"，将第1前方散射光信号的峰值称为"第1前方散射 光强度"，将第2前方散射光信号的峰值称为"第2前方散射光强度"。
[0167]〈血液分析装置的动作〉
[0168] 参照图16A及图16B，对于血液分析装置100的动作进行说明。步骤S601~S603 的处理与实施方式1中的步骤S101~S103的处理相同，所以省略说明。步骤S604的第1 测定样品调节处理，除在反应槽830中制备第1测定样品及第2测定样品之外，与实施方式 1中的步骤S101的测定样品调节处理相同，所以省略说明。
[0169] 在步骤S605中的RBC测定处理中，进行由光学检测部900的第1测定样品的测定。 将第1测定样品与鞘液一同向流动池910供给。第2光源部922向流动池910中的第1测 定样品的流照射光。
[0170] 在红细胞中含有蛋壳色素时，向红细胞照射蓝色激光，则释放自身荧光。自身荧光 由于是波长是630nm附近的红色光，所以个别地由第2荧光检测部932检测自各红细胞释 放的自身荧光。另一方面，即使向几乎不含蛋壳色素的红细胞照射蓝色激光，也几乎不发生 自身荧光。从而，第2荧光检测部932中的光接收水平成为低值，检测不到自身荧光。
[0171] 每当光照射到红细胞时，自红细胞发出散射光。自红细胞发出的前方散射光由于 是波长是405nm的第2前方散射光，所以由第2散射光检测部942检测。
[0172] 第2荧光检测部932及第2散射光检测部942将根据光接收水平的电信号作为第 2荧光信号及第2前方散射光信号输出。信号处理电路810从第2荧光信号提取第2荧光 强度，从第2前方散射光信号提取第2前方散射光强度。
[0173] RBC测定处理实行指定时间。
[0174] 步骤S606~S610的处理与实施方式1中的步骤S106~S110的处理相同，所以 省略说明。但是，第2荧光强度与实施方式1中的荧光强度相当，第2前方散射光强度与实 施方式1中的前方散射光强度相当。
[0175]CPU301在步骤S611中，判断网织红细胞的测定必要与否。在步骤S611中，CPU301 判断，第3标志被设置为1与否，S卩，在测定数据解析处理中，判断为β地中海贫血的可能 性高与否。在第3标志被设置为1时，CPU301判断为需要网织红细胞的测定，处理移向步 骤S612。在第3标志被设置为0时，CPU301判断为不需进行网织红细胞的测定，结束处理。
[0176]CPU301在步骤S612中，向测定部200发送网织红细胞的测定开始的指示数据。在 步骤S613中，测定部200接收指示数据。微计算机82在步骤S614中，实行第2测定样品 调节处理，在步骤S615中，实行网织红细胞测定处理，在步骤S616中，实行HGB测定处理。
[0177] 参照图17,对于第2测定样品制备处理进行说明。在步骤S701中，微计算机82控 制待测样品吸引部4,从在步骤S201中吸引了血液待测样品的试管再次吸引指定量血液待 测样品，向反应槽830供给指定量的待测样品。接下来，在步骤S702中，微计算机82控制 样品制备部800,从试剂容器51向反应槽830供给指定量的稀释液，从试剂容器820向反应 槽830供给指定量的染色试剂。
[0178] 反应槽830由加热器加温至指定温度，在加温的状态下，在步骤S703进行反应槽 830内的混合物的搅拌。由步骤S701~S703的动作，在反应槽830中制备第3测定样品。 第3测定样品中的网织红细胞由染色试剂染色。在步骤S704中，为了向光学检测部900供 给，自反应槽830导出第3测定样品。
[0179] 步骤S704的处理结束，则由步骤S705~S708的处理，样品制备部800制备第2 测定样品。步骤S705~S708的处理与实施方式1中的步骤S205~S208的处理相同，所 以省略说明。
[0180] 步骤S708的处理结束，则微计算机82向主程序返回处理。
[0181] 再参照图16Β。在步骤S615的网织红细胞测定处理中进行由光学检测部900的第 3测定样品的测定。第3测定样品与鞘液一同被供给到流动池910。第1光源部921及第 2光源部922向流动池910中的第3测定样品的流同时照射光。
[0182] 自第1光源部921向通过流动池910的网织红细胞照射红色激光，则发生第1波 长的荧光和红色的第1前方散射光。第1荧光光接收部931接收第1波长的荧光，输出第 1荧光信号。第1散射光光接收部941接收第1前方散射光，输出第1前方散射光信号。
[0183] 通过流动池910的网织红细胞及红细胞中含蛋壳色素，则自第2光源部922照射 蓝色激光，则发生第2波长的自身荧光和蓝色的第2前方散射光。第2荧光光接收部932接 收自身荧光，输出第2荧光信号。第2散射光光接收部942接收第2前方散射光，输出第2 前方散射光信号。通过流动池910的网织红细胞及红细胞中几乎不含蛋壳色素，则即便自 第2光源部922照射蓝色激光，也几乎不发生自身荧光，第2荧光光接收部932不检测自身 荧光。第2前方散射光与网织红细胞及红细胞中含蛋壳色素时同样地发生，第2散射光光 接收部942接收第2前方散射光，输出第2前方散射光信号。
[0184] 在网织红细胞测定处理中，检测用染色试剂染色的网织红细胞的自身荧光。此时， 是否由网织红细胞的染色而自身荧光的检测精度降低成为问题。参照图18,对于网织红细 胞的染色给自身荧光的检测的影响进行说明。在图18中，纵轴显示向由染色试剂特异性地 染色网织红细胞的待测样品照射蓝色激光时得到的相对于网织红细胞数的发自身荧光的 网织红细胞的数的比率（后述的"第2自身荧光比率"），横轴显示向未染色网织红细胞的 待测样品照射蓝色激光时得到的第2自身荧光比率。如图20所示，染色网织红细胞时的第 2自身荧光比率与不染色网织红细胞时的第2自身荧光比率有强的相关。如上所述知，几乎 见不到随网织红细胞的染色的有无给自身荧光的检测带来的影响。
[0185]再参照图16B。步骤S616的HGB测定处理与实施方式1中的HGB测定处理相同， 所以省略说明。
[0186]HGB测定处理之后，在步骤S617中，微计算机82向信息处理部3发送含各特征参 数的测定数据，结束处理。
[0187] 在步骤S618中，信息处理部3接收测定数据，则在步骤S619中，CPU301实行第2 测定数据解析处理，生成血液待测样品的分析结果，将分析结果储存于硬盘304。
[0188]参照图19,对于第2测定数据解析处理进行说明。步骤S801~S805的处理与实 施方式1中的步骤S301~S305的处理相同，所以省略说明。
[0189] 在步骤S806中，CPU301基于第1荧光强度和第1前方散射光强度，检测网织红细 胞。使用图20对步骤S806的处理进行说明。在将第1荧光强度作为一方的座标轴，将第 1前方散射光强度作为另一方的座标轴的2维空间中，标绘测定数据中含的各粒子的信息， 则如图20所示。在图20中，在区域950分布着网织红细