一种防止蒙古黄芪试管苗黄化的培养基的制作方法
【专利摘要】一种防止蒙古黄芪试管苗黄化的培养基，其属于植物生物学【技术领域】。包括改良MS培养基+30g/L蔗糖，pH值为5.8；改良MS培养基中硼酸的含量增加原来含量的1/3，改良MS培养基中硝酸铵含量降低原来含量的1/5，并加入植物生长调节剂。本发明通过选择改良MS培养基，简单易行，效果明显且持久。只需通过改变MS培养基中微量物质硼酸的含量和大量物质中硝酸铵的含量，来优化MS基本培养基，即可达到克服黄化的目的，试管苗增殖继代和生根过程中，始终保持绿色健壮。
【专利说明】一种防止蒙古黄苗试管苗黄化的培养基
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种防止蒙古黄芪试管苗黄化的培养基，其属于植物生物学【技术领域】。
【背景技术】
[0002]黄化是植物组织培养的三大难题之一。在蒙古黄芪的组培过程中，黄化现象严重。采用传统的MS培养基作为基本培养基，添加不同种类和浓度的植物生长调节剂，仍无法克服黄化现象，最终无法成苗。克服组培苗黄化的传统方法有:改善瓶内通气状况、增加糖的用量、增加光照、调节激素比例等等，而生产上普遍使用的封口膜或瓶盖往往要兼顾隔离内外环境、适当透气和成本低三个条件，因此其瓶内通气状况一般是固定不变的；用糖量的增加会增加污染的危险并提高生产成本；在同一个实验环境中，很难针对各种植物的喜光性来调节光照强度和光照时间；因此，只有通过优化基本培养基MS，再适当添加常用激素，才能彻底解决蒙古黄芪的黄化问题。
【发明内容】
[0003]为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种防止蒙古黄芪试管苗黄化的培养基，并且提高增殖系数和生根率的培养效果。
[0004]本发明是通过以下技术方案来实现的:
一种防止蒙古黄芪试管苗黄化的培养基，包括改良MS培养基+30g/L蔗糖，pH值为
5.8 ;改良MS培养基包括大量物质、微量物质、铁盐和有机物；
大量物质的组分和其对应的浓度如下:
硝酸铵1320 mg/L ；
硝酸钾1900 mg/L ；
磷酸二氢钾170 mg/L ；
七水硫酸镁370 mg/L ；
二水氯化钙440mg/L ；
微量物质的组分和其对应的浓度如下:
四水硫酸锰22.3mg/L ；
七水硫酸锌8.6 mg/L ；
硼酸8.3 mg/L ；
碘化钾0.83 mg/L ；
二水钥酸钠0.25 mg/L ；
五水硫酸铜0.025 mg/L ；
六水氯化钴0.025 mg/L ；
铁盐的组分和其对应的浓度如下:
七水硫酸亚铁27.8 mg/L ；乙二胺四乙酸二钠37.3 mg/L ；
有机物的组分和其对应的浓度如下:
甘氨酸2.0 mg/L ；
盐酸硫胺素0.1 mg/L ；
盐酸批卩多醇0.5 mg/L ；
烟酸0.5 mg/L ；
肌醇100 mg/L o
[0005]培养基还包括植物生长调节剂，其种类和其对应的浓度为6-BA0.2g/L+IBA0.05g/L0
[0006]培养基还包括植物生长调节剂，其种类和其对应的浓度为IBA2.0g/L+NAA2.0 g/L0
[0007]硼酸中的硼是植物细胞分裂和蛋白质形成的必需因素，有利于细胞壁的形成，影响植物体内的氮代谢，最终影响到植物的生长发育。缺硼或氮含量不合理均可能会导致试管苗枯梢甚至黄化。合理的硼酸的含量和硝酸铵的含量是克服黄化的有效措施。
[0008]本发明的有益效果是:本发明通过选择改良MS培养基，简单易行，效果明显且持久。只需通过改变MS培养基中微量物质硼酸的含量和大量物质中硝酸铵的含量，来优化MS基本培养基，即可达到克服黄化的目的，试管苗增殖继代和生根过程中，始终保持绿色健壮。
【专利附图】
【附图说明】
[0009]图1是采用防止蒙古黄芪试管苗黄化的培养基和传统的MS营养基对比图；
图2是采用防止蒙古黄芪试管苗黄化的培养基的增殖效果图；
图3是采用防止蒙古黄芪试管苗黄化的培养基的生根效果图。
【具体实施方式】
[0010]下面将结合具体实施例，详细说明本发明的【具体实施方式】:
实施例1
改良MS培养基+30g/L蔗糖；pH值调为5.8，改良MS培养基的大量物质的组分和其对应的浓度如下:
硝酸铵1320 mg/L ；
硝酸钾1900 mg/L ；
磷酸二氢钾170 mg/L ；
七水硫酸镁370 mg/L ；
二水氯化钙440 mg/L ；
微量物质的组分和其对应的浓度如下:
四水硫酸锰22.3 mg/L ；
七水硫酸锌8.6 mg/L ；
硼酸8.3 mg/L ；
碘化钾0.83 mg/L ；二水钥酸钠0.25 mg/L ；
五水硫酸铜0.025 mg/L ；
六水氯化钴0.15 mg/L ；
铁盐的组分和其对应的浓度如下:
七水硫酸亚铁27.8 mg/L ；
乙二胺四乙酸二钠37.3 mg/L ；
有机物的组分和其对应的浓度如下:
甘氨酸2.0 mg/L ；
盐酸硫胺素0.1 mg/L ；
盐酸批卩多醇0.5 mg/L ；
烟酸0.5 mg/L ；
肌醇100 mg/L o
[0011]工艺流程:
1)取蒙古黄芪试管苗；
2)剪除基部新茬；
3)接种在上述培养基；
4)光照强度20001UX，光周期12h/d；
结果为:40天后即可形成绿色的苗丛，效果稳定，且不会再恢复到黄化状态。
[0012]实施例2
改良MS培养基+30g/L蔗糖，再加入植物生长调节剂，其种类和其对应的浓度为6-BA0.2g/L+IBA0.05g/L。
[0013]除培养基不同外，其余采用与实施例1相同的工艺流程。
[0014]结果为:40天后即可形成绿色的苗丛，其增殖系数高达5.5，试管苗生长健壮。
[0015]实施例3
改良MS培养基+30g/L蔗糖，再加入植物生长调节剂，其种类和其对应的浓度为IBA2.0g/L+NAA2.0 g/L。
[0016]除培养基不同外，其余采用与实施例1相同的工艺流程。
[0017]结果为:生根率较高，成苗率高，在筛选的生根培养基上生根率达到85%。
[0018]本发明通过通过改变MS培养基中微量物质硼酸的含量和大量物质中硝酸铵的含量来优化MS基本培养基，即可达到克服黄化的目的，MS培养基中除硼酸的含量和硝酸铵含量之外，其它成分含量不变，蔗糖用量采用常规的30g/L。
[0019]I) MS培养基中硼酸的含量增加原来含量的1/3。
[0020]2) MS培养基中硝酸铵含量降低原来含量的1/5。
[0021]3)试管苗增殖配方中植物生长调节剂的种类和含量为6-BA0.2g/L+IBA0.05g/L。
[0022]4)试管苗生根配方中植物生长调节剂的种类和含量为IBA2.0g/L+NAA2.0 g/L。
[0023]本发明应用在黄化的蒙古黄芪上，40天后即可形成绿色的苗丛，其增殖系数高达5.5，试管苗生长健壮，始终保持绿色的状态，不会再恢复到黄化状态，在筛选的生根培养基上生根率达到85%，能够最终成苗。用硼酸的含量和硝酸铵含量改变的优化MS基本培养基，相对于其它可能减轻黄化现象的方法来说，具有可操作性强、简单易行的优点。[0024]以上已以较佳实施例公开了本发明，然其并非用以限制本发明，凡采用等同替换或者等效变换 方式所获得的技术方案，均落在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1.一种防止蒙古黄芪试管苗黄化的培养基，其特征在于:包括改良MS培养基+30g/L蔗糖，PH值为5.8 ;改良MS培养基包括大量物质、微量物质、铁盐和有机物； 大量物质的组分和其对应的浓度如下: 硝酸铵1320 mg/L ； 硝酸钾1900 mg/L ； 无水磷酸二氢钾170 mg/L ； 七水硫酸镁370 mg/L ； 二水氯化钙440mg/L ； 微量物质的组分和其对应的浓度如下: 四水硫酸锰22.3mg/L ； 七水硫酸锌8.6 mg/L ； 硼酸8.3 mg/L ； 碘化钾0.83 mg/L ； 二水钥酸钠0.25 mg/L ； 五水硫酸铜0.025 mg/L ； 六水氯化钴0.025 mg/L ； 铁盐的组分和其对应的浓度如下: 七水硫酸亚铁27.8 mg/L ； 乙二胺四乙酸二钠37.3 mg/L ； 有机物的组分和其对应的浓度如下: 甘氨酸2.0 mg/L ； 盐酸硫胺素0.1 mg/L ； 盐酸批卩多醇0.5 mg/L ； 烟酸0.5 mg/L ； 肌醇100 mg/L o
2.根据权利要求1所述的一种防止蒙古黄芪试管苗黄化的培养基，其特征在于:还包括植物生长调节剂，其种类和其对应的浓度为6-BA0.2g/L+IBA0.05g/L。
3.根据权利要求1所述的一种防止蒙古黄芪试管苗黄化的培养基，其特征在于:还包括植物生长调节剂，其种类和其对应的浓度为IBA2.0g/L+NAA2.0 g/L。
【文档编号】C05G3/00GK103641543SQ201310593212
【公开日】2014年3月19日 申请日期:2013年11月23日 优先权日:2013年11月23日
【发明者】于亚军, 赵东利 申请人:大连大学