一种滇黄精的组培快繁方法与流程

文档序号:12299285阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种滇黄精的组培快繁方法,其特征在于,包括以下几个步骤:

①外殖体的选择与处理:选取成熟、新鲜、无病虫害的滇黄精根茎,用刀切取带芽的根茎置于洗洁精水溶液中浸泡,浸泡1~3min后将其用流水清洗干净,然后用体积分数为70~75%的酒精浸泡1~2min,用无菌水反复冲洗2~3次,最后放入质量分数为0.1~0.3%的氯化汞中反复浸泡灭菌3~5次,每次浸泡的时间为3~5min,每次浸泡后须用无菌水冲洗2~3次,冲洗干净后再用无菌滤纸将无菌水吸干,用刀切去伤口坏死的部分即可进行接种;

②诱导培养:将步骤①中消毒处理后的根茎接种于诱导培养基上进行诱导培养,在培养温度为23~28℃,光照强度为2000~2500Lux,光照时间为12~16h/天的条件下培养,培养20~30天后根茎部分膨大,根茎的切口处诱导出淡黄色致密的愈伤组织,所述诱导培养基为:MS基本培养基+1.0~3.0mg/L6-BA+0.5~1.0mg/L2,4-D+1.0~2.0mg/L赤霉素+5.0~10.0g/L琼脂+20.0~30.0g/L蔗糖;

③继代培养:先将步骤②中诱导出的愈伤组织转接于继代培养基中进行继代培养,在培养温度为23~28℃,光照强度为2000~2500Lux,光照时间为12~16h/天的条件下培养,培养20~30天分化出新的幼芽;所述继代培养基为:MS培养基+3.0~4.5mg/L6-BA+2.0~3.0mg/L62BA +3.0~5.0mg/L玉米素+0.2~1.0mg/LNAA+1.0~3.0g/L琼脂+5.0~10.0g/L蔗糖;

④增殖培养:将步骤③中继代培养成功的带有幼芽的根茎切成0.4~0.8cm3的小块,然后接种于增殖培养基中,在培养温度为23~28℃,光照强度为2000~2500Lux,光照时间为12~16h/天的条件下培养20~30天后获得分化苗;所述增殖培养基为:MS培养基+2.0~4.0mg/L6-BA+0.5~1.5mg/L2,4D+0.5~1.0 mg/L GA3 +6.0~8.0g/L琼脂+20.0~25.0g/L蔗糖;

⑤生根培养:待步骤④中增殖培养得到的分化苗长至2~4cm时,先将分化苗转接到生根培养基上诱导生根,在培养温度为23~28℃,光照强度为2000~2500Lux,光照时间为12~16h/天的条件下培养20~30天后可观察到分化苗长出3~6条根须,根须长度为2~4cm,然后将分化苗移至自然光下培养,培养10天后即可进行组培苗的移栽,所生根培养基为:1/2MS培养基 +0.2~1.0mg/LNAA +0.2~0.6mg/LIBA+0.2~0.5%活性炭+5~20%香蕉 +6.0~8.0g/L琼脂+20.0~25.0g/L蔗糖;

⑥炼苗移栽:将步骤⑤中培养得到的组培苗从生根培养基中取出,洗净根部的培养基后,将组培苗移栽至苗床的育苗基质中,移栽初期需搭建小拱棚,覆盖透明塑料布,适当遮荫,保持环境温度20~25℃,空气湿度70~80%,每隔7天喷施1次营养液,15天后除去塑料布,逐渐通风,增加光照,转入常规管理,30~40天即可进行大田移栽。

2.根据权利要求1所述的一种滇黄精的组培快繁方法,其特征在于:在步骤②中,所述的诱导培养基中还添加有1.0~2.0mg/LKT+0.1~0.2mg/LNAA。

3.根据权利要求1所述的一种滇黄精的组培快繁方法,其特征在于:在步骤⑤中,所述生根培养基中还添加有0.3~0.5mg/LCA。

4.根据权利要求1所述的一种滇黄精的组培快繁方法,其特征在于:在步骤⑥中,所述育苗基质为:树皮20~40份、锯末10~30份、蛭石30~40份、黑土10~20份、珍珠岩2~5份、草木灰0.2~0.3份。

5.根据权利要求1所述的一种滇黄精的组培快繁方法,其特征在于:在步骤①中,所述氯化汞中含有质量分数为0.02~0.1%的土温20。

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